-
حرية الوصول المقاله
1 - بررسی میزان آلودگی به بروسلوزیس در شیر و پنیر به روش Real Time PCR
فاطمه خداوردی پور نازیلا ارباب سلیمانی یاسمن برونبروسلاها باکتری های کوچک غیر متحرک، گرم منفی، بدون کپسول و به فرم کوکوباسیل می¬باشند. بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام است و باعث سقط جنین، اختلالات باروری، عفونت های تناسلی، کاهش شیر، اورتریت و اپیدیمیت در میزبان اصلی می¬شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل أکثربروسلاها باکتری های کوچک غیر متحرک، گرم منفی، بدون کپسول و به فرم کوکوباسیل می¬باشند. بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام است و باعث سقط جنین، اختلالات باروری، عفونت های تناسلی، کاهش شیر، اورتریت و اپیدیمیت در میزبان اصلی می¬شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل هزینه های درمانی فراوان به بیماران و ضررهای اقتصادی زیاد به دامداران می¬گردد. با وجود پیشرفت هایی که در تکنیک های کشت خون و تست های سرولوژیکی که برای کشف آنتی بادی های اختصاصی به دست آمد، هنوز مشکلات مهمی در تشخیص بروسلوزیس وجود دارد، بنابراین نیاز به آزمون های جدید آزمایشگاهی می¬باشد. یکی از جدید ترین روش های سنجش کمی که در حال حاضر مورد توجه بسیاری از محققین قرار گرفته روش تشخیص باکتری توسط Real Time PCR می¬باشد. هدف ما هم از این مطالعه شناسایی باکتری های جنس بروسلا در نمونه های شیر و پنیر توسط روش Real Time PCR می¬باشد. 25 نمونه شیر گاو (محلی) و 25 نمونه پنیر از مناطق مختلف شهرستان شهرکرد تهیه شد و به منظور تشخیص مولکولی،استخراج DNA با استفاده از کیت استخراج DNA (شرکت سیناژن) انجام و سپس واکنش Real Time PCR با استفاده از دستگاه مدل Rotor-Gene ساخت شرکت Corbett استرالیا بر روی نمونه ها انجام شد. در این تحقیق از 50 نمونه مورد بررسی تنها در 2 نمونه شیر (4%) بروسلا آبورتوس تشخیص داده شد. در نمونه های پنیر آلودگی به بروسلا گزارش نگردید. این بررسی نشان می دهد روش های مولکولی مثل Real Time PCR باید به عنوان روش هایی مکمل جهت تشخیص بروسلا در کنار روش های رایج مورد استفاده قرار گیرند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
2 - بررسی میزان آلودگی به بروسلوزیس در نمونه خون های افراد سرولوژی مثبت بروسلا در شهرستان های شهرکرد و اصفهان به روش Real Time PCR
حسین خدابنده شهرکی نازیلا ارباب سلیمانیچکیده بیماري بروسلوز جزء شایع ترین بیماري هاي باکتریایی مشترك انسان و دام است که در انسان ایجاد تب مالت نموده و خسارات اقتصادي بالایی را در حیوانات اهلی به بار می آورد. در این تحقیق با استفاده از روش Real Time PCR به بررسی فراوانی گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی ت أکثرچکیده بیماري بروسلوز جزء شایع ترین بیماري هاي باکتریایی مشترك انسان و دام است که در انسان ایجاد تب مالت نموده و خسارات اقتصادي بالایی را در حیوانات اهلی به بار می آورد. در این تحقیق با استفاده از روش Real Time PCR به بررسی فراوانی گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس در سرم افراد سرولوژی مثبت پرداختیم. نمونه های سرمی 30 نفر از افرادی که تست رایت آن ها مثبت شده بود (بالای 160/1)، از آزمایشگاهای تشخیص طبی شهرستان های شهرکرد و اصفهان جمع آوری و DNA ِنمونه ها با استفاده از کیت استخراج DNA سیناژن استخراج شد. به منظور تشخیص جنس و گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس واکنش Real Time PCR بر روی نمونه ها انجام شد. در این بررسی تمام 30 نمونه مورد بررسی با روش Real time PCR تأیید شدند. در جنس مونث پس از انجام آزمون Real Time PCR فقط باکتری بروسلا آبورتوس تشخیص داده شد در حالی که در جنس مذکر 22 مورد (33/73درصد) بروسلا آبورتوس و 3 مورد (10درصد) بروسلا ملی تنسیس شناسایی گردید. از 7 مورد آلودگی به بروسلوز در گروه سنی زیر 30 سال، 6 مورد (7/85درصد) بروسلا آبورتوس و 1 مورد (3/14درصد) بروسلا ملی تنسیس تشخیص داده شدند. در صورتی که از 23 مورد آلودگی به بروسلوز در گروه سنی بالای 30 سال، 21 مورد (3/91درصد) بروسلا آبورتوس و 2 مورد (7/8درصد) بروسلا ملی تنسیس تشخیص داده شدند. در سال هاي اخير روش هاي مولكولي زيادي براي تشخيص اين باكتري مورد استفاده قرار گرفته اند. روش Real Time PCR از اين نظر كه نيازمند صرف زمان كم و داراي حساسيت و اختصاصيت بالايي مي باشد، در تشخيص اين بيماري بسيار مفيد مي باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
3 - بررسی آلودگی مواد غذایی نیمه آماده و فست فودها نسبت به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس در استان چهارمحال و بختیاری
منوچهر مومنی شهرکی فاطمه شیرازی باصری یاس محمدی حسین خدابنده شهرکیغذاهای سریع و سرد به علت عدم نیاز به زمان پخت و نیز به دلیل تماس باد دست کارگران رستوران هنگام آماده سازی ، موجب افزایش خطر میکروبیولوژیکی مصرف کنندگان میشود. استافیلوکوکوس اورئوس، یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده بیماریهای منتقله از راه مواد غذایی میباشد. هدف از انج أکثرغذاهای سریع و سرد به علت عدم نیاز به زمان پخت و نیز به دلیل تماس باد دست کارگران رستوران هنگام آماده سازی ، موجب افزایش خطر میکروبیولوژیکی مصرف کنندگان میشود. استافیلوکوکوس اورئوس، یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده بیماریهای منتقله از راه مواد غذایی میباشد. هدف از انجام این مطالعه، تعیین میزان فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس در غذاهای نیمه آماده و فست فودها و شناسایی به روش PCR است . در این تحقیق تعداد 100 نمونه از مواد غذایی (فرآورده‌های گوشتی، فلافل، پیتزا، مرغ) به شکل تصادفی از مراکز تهیه و ارائه این غذاها در شهرستان بروجن، شهرکرد و فارسان در یک بازه زمانی یک ماهه جمع آوری وجهت بررسی حضور استافیلوکوکوس اورئوس مورد آزمایش قرار گرفتند. درمجموع آلودگی به استافیلوکوکوس در نمونههای فرآورده‌های گوشتی(1/64درصد)، فلافل (2/21درصد)، پیتزا(20درصد)، مرغ(8/30درصد) مشاهده شد. میانگین باکتریهای استافیلوکوکوس اورئوس درنمونه های مثبت (39درصد) گزارش گردید. بر اساس نتایج تحقیق حاضر میتوان گفت از آنجا که نتایج مراحل و تهیه تولید فست فود و مواد غذایی نیمه آماده به صورت دستی است احتمال آلودگی مواد غذایی از طریق نیروی انسانی کاملاً وجود دارد. اگرچه درصد آلودگی نمونهها زیاد بوده است ولی تعداد باکتریهای موجود در نمونه پایین و خطر بالقوه ایی برای سلامت مصرف کننده ندارد. لذا آموزش بهداشت شخصی و محیطی به منظور کاهش میزان استافیلوکوکوس اورئوس در افرادی که در تهیه و تولید غذا نقش دارند از اهمیت بالایی برخوردار است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
4 - An Improved Junction-Based Directional Routing Protocol (IJDRP) for VANETs
Bharat Mahaur Aishwarya GuptaVehicular Ad-Hoc Networks (VANETs) is a novel technology that has recently emerged and due to its swift changing topology and high mobility nature, it has become problematic to design an efficient routing protocol in VANETs’ amongst both moving and stationary unit أکثرVehicular Ad-Hoc Networks (VANETs) is a novel technology that has recently emerged and due to its swift changing topology and high mobility nature, it has become problematic to design an efficient routing protocol in VANETs’ amongst both moving and stationary units. Also, the existing routing algorithms are not very effective to satisfy all requirements of VANETs. This paper explores the need of a reliable routing and proposes an approach that makes use of an extended restricted greedy forwarding mechanism to select the next forwarding vehicle on basis of its average relative velocity and neighborhood density with its own neighboring vehicles. We also use static PCR junction node which forwards the packet to correct road segment vehicle based upon the relative information. The objective of this paper is to increase route reliability by increasing throughput with considerable end to end delay. Simulation results show that the proposed approach IJDRP outperforms existing GPCR and E-GyTAR. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
5 - Antimicrobial effect of Carvacrol on <i>Aspergillus flavus</i> and reduce expression of aflR gene in the aflatoxin biosynthetic pathway
Seyed Amir Ali Anvar Hamed Ahari Nasim MojarradCarvacrol was found in essential oils of thyme, oregano, wild bergamot, and some other plants. Although, a wide range of bioactivities such as anticancer, antioxidant, and antimicrobial has been identified for carvacrol, however, among all therapeutic properties it poss أکثرCarvacrol was found in essential oils of thyme, oregano, wild bergamot, and some other plants. Although, a wide range of bioactivities such as anticancer, antioxidant, and antimicrobial has been identified for carvacrol, however, among all therapeutic properties it possesses a potent antimicrobial activity. The present study investigates the inhibitory effect of carvacrol as an active compound against the growth of Aspergillus flavus, besides its effect on the expression of aflatoxin-related (aflR) gene. Twelve fungal samples of A. flavus were used and the antimicrobial activity of carvacrol was tested against them using the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal fungicidal concentration (MFC) according to the broth microdilution procedure. The expression of the aflatoxin regulatory (aflR) gene was examined by Reverse Transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) technique. The results of MIC and MFC tests showed that carvacrol at 0.8 μg/ml and 3.5 μg/ml concentrations displayed antimicrobial activities on A. flavus, respectively. The RT-PCR result indicated that the expression level of aflR gene had decreased to 33% in the presence of carvacrol compared to 67% in the absence of the mentioned active compound. Together the results demonstrated that carvacrol not only exhibited antimicrobial activity against A. flavus but also reduced its gene expression level. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
6 - Prevalence, virulence factor and antibiotic susceptibility patterns of <i>Salmonella</i> spp. from poultry products in Ardabil province
Ghadir Shahbazi Jalal Shayegh Siamak Ghazaei Mohamad Hossein Movassagh Ghazani Shahram HanifianContamination of poultry products by Salmonella spp. is a critical issue in the poultry industry and public health. The present study aimed at molecular detection and typing of Salmonella isolated from poultry products. Moreover, antibiotic resistance patterns and th أکثرContamination of poultry products by Salmonella spp. is a critical issue in the poultry industry and public health. The present study aimed at molecular detection and typing of Salmonella isolated from poultry products. Moreover, antibiotic resistance patterns and the biofilm formation ability of isolates were determined. Eighty poultry product samples were collected from chicken supply and distribution centers. Salmonella spp. were identified by culture as well as the genus-specific PCR. A slide agglutination test using O grouping polyvalent sera were used for serological identification. BOXAIR and REP-PCR methods were evaluated for the discrimination of Salmonella isolates at the serotype level. Antibiotic susceptibility testing of serotypes against sixteen antibiotics was performed using the standard Kirby-Bauer disc diffusion method. The Microtiter-plate biofilm formation assay measured the extent of biofilm formation. From 80 samples, 11 Salmonella spp. were identified, divided into two serotypes belonging to B and A serogroups. BOX repeat-based PCR (BOXAIR-PCR) and Repetitive element-based PCR (REP-PCR) banding results of isolates revealed 7 and 6 reproducible fingerprint patterns, respectively. The highest resistance was observed in response to ampicillin and doxycycline, followed by chloramphenicol, sulfamethoxazole, trimethoprim, neomycin, and nalidixic acid. Multidrug resistance was detected in all Salmonella serotypes. Seven isolates possessed the ability to produce biofilm with varied adhesion strength. These results revealed the high and unexpected prevalence of Salmonella spp. in poultry products with multiple antibiotic resistance and biofilm production ability. Also, BOXAIR and REP-PCR results revealed high diversity in Salmonella serotypes and subsequently indicated variety in the origin of Salmonella spp. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
7 - کلونینگ ژن پروتئین F ویروس نیوکاسل و تعیین توالی آن
مصطفی جعفرپور هادی کیوانفر رسول مدنی فریبا گلچین فر تارا امامیویروس عامل بیماری نیوکاسل (NDV) یکی از مهمترین عوامل بیماری های ویروسی طیور می باشد ، که سبب واگیری و مرگ ومیر شدید در طیور و گونه های متعددی از پرندگان می شود.پروتئین F ویروس جهت نفوذ و تکثیر ویروسی در حیوانات آلوده نقش محوری دارد. کلونینگ و بیان ژنوم کد کننده پروتئین أکثرویروس عامل بیماری نیوکاسل (NDV) یکی از مهمترین عوامل بیماری های ویروسی طیور می باشد ، که سبب واگیری و مرگ ومیر شدید در طیور و گونه های متعددی از پرندگان می شود.پروتئین F ویروس جهت نفوذ و تکثیر ویروسی در حیوانات آلوده نقش محوری دارد. کلونینگ و بیان ژنوم کد کننده پروتئین F جهت تولید واکسن تحت واحد و همجچنین تولید آنتی بادی مونوکلنال علیه پروتئین F می تواند گتمهای جدیدیبرای شناسایی و پیشگیری از بیماری نیوکاسل باشد. در این پژوهش ژنوم کد کننده پروتئن F ویروس نیوکاسل توسط تکنیک RT-PCR تکثیر گردید.ژنوم دلخواه پس از خالص سازی در T.A وکتور (RTZ57 R/T) کلون گردیده و سپس در باکتری DH5 a ترانسفورم شد. پس از تایید کلونینگ ، قطعه مورد نظر از حامل پلاسمیدی جدا گردیده ،و توالی نوکلئوتیدی تشکیل دهنده آن تعیین وجهت مقایسه با توالی کد کننده پروتئین F ویرویسهای نیوکاسل موجود در بانک ژن توسط نرم افزار Blast مورد بررسی قرار گرفت. بیشترین مشابهت نوکلئوتیدی با سویه هایSterna /astr و Italy/3286/00 و(98%) و کمترین تشابه نوکلئوتیدی با سویه های JS-2/98 و LZ-CH-A7/96 و (93%) گزارش شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
8 - مقایسه دو روش هیستوپاتولوژی و Multiplex-PCR در تشخیص بیماری یرسینیوز (Yersinia ruckeri) در تعدادی از مزارع پرورشی ماهیان قزل‌آلای کشور
عادل حقیقی خیابانیان اصل محمدرضا روزبهانی بهرام کاظمییرسینیا راکری عامل بیماری دهان قرمز رودهای (Enteric red mouth disease) آبزیان است که سالانه موجب خسارات هنگفتی به صنعت آبزی‌پروری و کشاورزی در ایران و جهان میگردد. تشخیص قطعی، سریع و اقدام موثر برای بیماری‌هایی مانند یرسینیوز که شیوع شان در مراکز پرورش قزل‌آلا بسیار س أکثریرسینیا راکری عامل بیماری دهان قرمز رودهای (Enteric red mouth disease) آبزیان است که سالانه موجب خسارات هنگفتی به صنعت آبزی‌پروری و کشاورزی در ایران و جهان میگردد. تشخیص قطعی، سریع و اقدام موثر برای بیماری‌هایی مانند یرسینیوز که شیوع شان در مراکز پرورش قزل‌آلا بسیار سریع است، از اهمیت ویژهای برخوردار است. هدف از این تحقیق مقایسه دو روش تشخیصی هیستوپاتولوژی و Multiplex- PCR در تشخیص بیماری یرسینوز یا بیماری دهان قرمز رودهای(ERM) در ماهی قزل‌آلا در ایران است. در این مطالعه در آزمایشات مبتنی بر PCR ، DNA مورد استفاده در هر واکنش PCR از بافت ماهی‌های قزل‌آلای مشکوک به بیماری استخراج و محصول واکنشPCR، با استفاده از ژل الکتروفورز روئیت گردید. در پایش پاتولوژی، از بافت ماهی‌های زنده یا در حال مرگ فیکس شده در محلول فرمالین 10% سالین استفاده شده است. سپس نمونهها در قالب‌های پارافین تثبیت و بوسیله میکروتوم‌های دیجیتال به ضخامت 7-5 میلیمتر برش داده شدند. اسلایدهای آماده شده بوسیله هماتوکسیلین ـ ائوزین رنگ‌آمیزی شده و مورد بررسی قرار گرفتند. در این تحقیق 20 نمونه مشکوک که علائم بالینی مشخص از قبیل سپتی سمی حاد در بافتهای داخلی و وخونریزی سطحی در اطراف دهان و مقعد از خود بروز می‌دادند، با تکنیک‌های یاد شده مورد ازمایش قرار گرفتند که بر طبق نتایج آزمایشات مولکولی، در نمونههای منفی تنها قطعه مربوط به ژن میزبان به عنوان کنترل واکنش PCR تکثیر شده است، که خود این مسئله صحت انجام آزمایش مولکولی را تایید مینماید، در مقابل در نمونههای مثبت، توالی‌های ژنی میزبان و همچنین پاتوژن یرسینیا هر دو آمپلی فای و تکثیر شدهاند که بیان کننده تشخیص عامل پاتوژن میباشد. از مجموع 20 نمونه مورد آزمایش به روش PCR در مجموع 2 مورد مثبت و 18 مورد، منفی گزارش شد در مقابل در آزمایشات هیستوپاتولوژی از نمونههای مذکور 5 مورد مثبت و دارای علایم آسیب‌شناسی تیپیک و مشخص بیماری یرسینیوز و 15 مورد، منفی و بدون هیچگونه علایم منتسب به بیماری گزارش شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
9 - بیماری مارک در مرغهای گوشتی استانهای خراسان ،اصفهان و تهران
مجید فرهود رضا طرقی محسن ملکی محمدرضا باسامی مهدی کیانی زاده سعید چرخکاربیماری مارک یک بیماری ویروسی لنوپرولیفراتیو جوجه ها با اهمیت اقتصادی بوده که توسط یک آلفا هرپس ویروس ایجاد میشود.ویروس های بیماری مارک موجب تضعیف سیستم ایمنی شده وباعث آسیب پذیری بیشتر ماکیان در برابر عوامل بیماریزای دیگر می گردد. این بیماری بیشتر ،مشکل گله های مادر و ت أکثربیماری مارک یک بیماری ویروسی لنوپرولیفراتیو جوجه ها با اهمیت اقتصادی بوده که توسط یک آلفا هرپس ویروس ایجاد میشود.ویروس های بیماری مارک موجب تضعیف سیستم ایمنی شده وباعث آسیب پذیری بیشتر ماکیان در برابر عوامل بیماریزای دیگر می گردد. این بیماری بیشتر ،مشکل گله های مادر و تخمگذار می باشد و در طیور گوشتی کمتر مطرح می باشد. در این تحقیق 22 گله مرغ گوشتی از کشتارگاههای صنعتی خراسان ، اصفهان وتهران جهت مطالعه آسیب شناسی از بافتهای مختلف و ردیابی سروتیپ یک ویروس مارک از طحال به روش PCR تحت بررسی قرار گرفتند . در شش گله (27 درصد) جراحات ماکروسکوپیک شامل نودلهای توموری در قاعده فولیکول پرها و علائم میکروسکوپیک شامل نفوذ سلولهای پلی مورفیک لنفو بلاستیک در ناحیه درم پوست مشاهده گردید.همچنین واکنش PCR نیز در این گله ها مثبت بودند در هشت گله دیگر با اینکه فاقد علایم ماکروسکوپیک و میکروسکوپیک بودند ولی در آزمایش PCR مثبت ارزیابی شدند. در هشت گله باقی مانده تمامب علائم ماکروسکوپیک و میکروسکوپیک و واکنش PCR نیز منفی بودند. با توجه به وجود 27 درصدی بیماری مارک در میان گله های مرغ گوشتی بررسی شده وهمچنین طبیعت ایمنوساپرسیو بودن این ویروس،به نظر می رسد این ویروس نقش عمده ای را در سندرم تضعیف سیستم ایمنی ماکیان ایران به عهده دارد.توصیه می شود به منظور کاهش خسارات اقتصادی ناشی از این بیماری اقدامات پیشگیرانه موثری اتخاذ شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
10 - تشخیص مولکولی برخی از عوامل سقط جنین گوسفندی و تعیین فراوانی آنها در استان چهار محال و بختیاری با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز دو تایی
دکتر علی شریف زاده دکتر عباس دوستی دکتر خدیجه خاکسارالمونلا ابورتوس اویس و بروسلا از جمله عوامل مهمی هستند که باعث سقطجنین گوسفندی در سراسر جهان می شوند . هر دو باکتری هر چند از لحاظسرولوژی تشخیص داده می شوند ولی تعدادی از عوامل باعث نتایج مثبت یامنفی کاذب می گردد. روشهای مستقیم جداسازی باکتری شناسی نیز معمولا قابل انجام أکثرالمونلا ابورتوس اویس و بروسلا از جمله عوامل مهمی هستند که باعث سقطجنین گوسفندی در سراسر جهان می شوند . هر دو باکتری هر چند از لحاظسرولوژی تشخیص داده می شوند ولی تعدادی از عوامل باعث نتایج مثبت یامنفی کاذب می گردد. روشهای مستقیم جداسازی باکتری شناسی نیز معمولا قابل انجام است ولی این روشها مشکل ، زمان بر و خطرناک است PCR با موفقیت برای جستجوی بروسلا و سالمونلا ابورتوس اویس بطور مجزا بکار برده شده است. در این تحقیق رو ش MPCR برای جستجوی عوامل جنین های سقط شده گوسفندی معرفی شده است . در این تحقیق آزمایش MPCR روی 54 نمونه از محتویات شیردان جنینهای سقط شده گوسفندی انجام گرفت . 10 نمونه بهبروسلا، 24 نمونه به سالمونلا ابورتوس اویس ، 6 نمونه به بروسلا و سالمونلاابورتوس اویس به شکل تو أم آلوده بودند . در 14 نمونه نیز آلودگی تشخیصداده نشد . سادگی و توانایی جستجوی دو باکتری به شکل همزمان در یک لولهاز جمله محاسنی است که می توان این روش را بجای روشهای تشخیصیمرسوم پیشنهاد نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
11 - مقایسه روش های الایزا و PCR در تشخیص آزمایشگاهی لوکوز گاوی
دکتر حسن ممتاز دکتر محسن خسروی دکتر پوریا قاسمیویروس لوسمی گاو (Bovine Leukemia Virus )از جنس دلتا رترویروس وخانواده رتروویر یده واجد سه 3 ژن ساختمانی اصلی gag,pol,env می باشد. به منظور ردیابی پروویروس BLV در گاوهای آلوده به این ویروس و مقایسه دو روش الایزا و PCR در تشخیص آزمایشگاهی بیماری در ایران این مطالعه در دو أکثرویروس لوسمی گاو (Bovine Leukemia Virus )از جنس دلتا رترویروس وخانواده رتروویر یده واجد سه 3 ژن ساختمانی اصلی gag,pol,env می باشد. به منظور ردیابی پروویروس BLV در گاوهای آلوده به این ویروس و مقایسه دو روش الایزا و PCR در تشخیص آزمایشگاهی بیماری در ایران این مطالعه در دو مرحله روی 200 نمونه خون کامل و سرم اخذ شده از گاوهای بالای دوسال در بعضی از نقاط کشور انجام گرفت . در مرحله اول نمونه های سرم بهروش الایزای غیر مستقیم آزمایش شدند که از 200 راس گاو مورد مطالعه تعداد راس واجد پادتن ضد پادگن GP51 ویروس BLV بودند . در مرحله دوم 30 نمونه از دام های سرم مثبت و 20 نمونه از گاوهای به ظاهر سالم (که درآزمایش الایزا پاسخ سرمی منفی نشان داده بودند ) به منظور ردیابی پروویروس BLV به روش PCR آزمایش شدند که در این آزمایش تمام نمونه های سرم مثبت و 3 نمونه از گاوهای به ظاهر سالم واجد قطعه 427 جفت بازی DNA مربوط به پروویروس BLV بودند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
12 - مقایسه آزمایش های سرولوژیک(رزبنگال، رایت لوله ای و کومبس رایت)و مولکولی(PCR)در تشخیص بروسلوز گوسفند و بز
مصطفی جعفرپور نظرعلی کترا ابراهیمی علی ناظمی مهدی آسمار محمد خاتم ینژادبروسلوز یکی از شایع ترین بیماری های مشترک حیوان و انسان محسوب می گرددو در مناطق زیادی از جهان گسترش یافته و در ایران نیز اندمیک است.امروزه تشخیص بروسلوز بر پایه آزمایش های سرولوژی و میکروبیولوژی است.در این مطالعه آزمایش های سرولوژی (رزبنگال، رایت لوله ای و کومبس رایت )ب أکثربروسلوز یکی از شایع ترین بیماری های مشترک حیوان و انسان محسوب می گرددو در مناطق زیادی از جهان گسترش یافته و در ایران نیز اندمیک است.امروزه تشخیص بروسلوز بر پایه آزمایش های سرولوژی و میکروبیولوژی است.در این مطالعه آزمایش های سرولوژی (رزبنگال، رایت لوله ای و کومبس رایت )بر روی100نمونه انجام شده و سپس بر روی نمونه های خون رزبنگال مثبت ونمونه های مثبت و منفی رایت لوله ای، آزمایشPCRانجام شد . فراوانی نسبیبروسلوز برحسب سرولوژی20%و برحسبPCR 0.5 شد.با توجه به اهمیت شناسایی صحیح موارد آلوده در کنترل و پیشگیری برسلوز درجوامع دامی و انسانی ؛ به نظر می رسد اس تفاده از آزمایش های متکی برتکنولوژی اسیدهای نوکلئیک(PCR)از حساسیت و اختصاصیت مناسبی جهتتشخیص بروسلوز برخوردار می باشند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
13 - ارزیابی فراوانی مایکوپلاسما در مخازن شیر گاوداری های صنعتی و نیمه صنعتی شهرستان شهرکرد با دو روش کشت و PCR
علی شریف زاده عبدالحمد حسنی طباطبائی سید علی پور بخشدر بین عوامل ایجاد کننده ورم پستان مایکوپلاسماها ، که بیشتر به شکل تحت درمانگاهی یا مزمن (S.C,C) دام را آلوده می کنند ؛ نسبت به سنوات قبل افزایش یافته اند. بدین جهت در مناطق مختلف دنیا برنامه های خاصی جهت کنترل و پیشگیری از آنها تدوین شده است. به منظور مشخص شدن وضعیت آل أکثردر بین عوامل ایجاد کننده ورم پستان مایکوپلاسماها ، که بیشتر به شکل تحت درمانگاهی یا مزمن (S.C,C) دام را آلوده می کنند ؛ نسبت به سنوات قبل افزایش یافته اند. بدین جهت در مناطق مختلف دنیا برنامه های خاصی جهت کنترل و پیشگیری از آنها تدوین شده است. به منظور مشخص شدن وضعیت آلودگی مایکوپلاسماها ،در مخازن شیر کلیه 61 گاوداریهای صنعتی و نیمه صنعتی شهرستان شهرکرد از زمستان 83 لغایت زمستان 84 نمونه گیری صورت گرفت وبا دو روش کشت و PCR به جستجوی این باکتری ها پرداخته شد.از آنجا که گونه های بویس ( bovis) با حدت بالا ،بوی جنیتالیوم (bovigenitalium) و آلکالسنس (alkalescems) با حدت متوسط و بوی رینیس (bovirhinis) با حدت کم در بروز این بیماری نقش ایفا می کنند لذا با استفاده از آزمایش های بیوشیمیایی در روش کشت و پرایمرهای گونه های بویس ،بوی جنیتالیوم ، آلکالسنس و بوی رینیس در روش PCR به جستجوی این گونه ها پرداخته شد. نتایج آزمون های کشت و PCR که تایید کننده یکدیگر بود میزان آلودگی این مخازن به گونه بویس را 3/3% و به گونه آلکالسنس را 4/9% برآورد کرد. در این تحقیق مخازن سیر مورد مطالعه به گونه های بوی رینیس و بوی جنیتالیوم آلوده نبودند. با توجه به نتایج این تحقیق و نقش مایکوپلاسماها به خصوص گونه بویس به عنوان یکی از عوامل مهم ورم پستان واگیردار که باعث افزایش (S.C,C)وافت تولید شیر می شود لزوم توجه بیشتر به این مشکل و کنترل و پیشگیری از آن بسیار ضروری به نظر می رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
14 - جداسازی مایکوپلاسما آگالاکتیه با دو روش کشت و واکنش زنجیرهای پلیمراز(PCR)در گوسفندان مبتلا به بیماری آگالاکسی واگیر درشهرستان بافت
بابک خیرخواه سیدعلی پوربخش عباس اشتری کیومرث امینیمایکوپلاسما آگالاکتیه بعنوان مهمترین عامل بیماری آگالاکسی واگیردار در بسیاریاز کشورهای مدیترانه و خاورمیانه از جمله در ایران مطرح است. دامهای مبتلامعمولأ دچار عفونت پستان همراه با قطع ناگهانی شیر، تورم مفاصل، التهابملتحمهی چشم، لاغری و ضعف عمومی میشوند که سبب خسارات اقت أکثرمایکوپلاسما آگالاکتیه بعنوان مهمترین عامل بیماری آگالاکسی واگیردار در بسیاریاز کشورهای مدیترانه و خاورمیانه از جمله در ایران مطرح است. دامهای مبتلامعمولأ دچار عفونت پستان همراه با قطع ناگهانی شیر، تورم مفاصل، التهابملتحمهی چشم، لاغری و ضعف عمومی میشوند که سبب خسارات اقتصادیشدید به دامداران میگردد. هدف از این تحقیق جداسازی و شناسائی مایکوپلاسما آگالاکتیه با استفاده از دو روش کشت وPCR در گوسفندان مشکوک به بیماری آگالاکسی در شهرستان بافت در سال 1388 بود. این بررسی به مدت یکسال درچهار فصل مختلف در گوسفندان شهرستان بافت انجام شد. از گلههای مشکوکنمونهگیری هدفدار بعمل آمده و نمونهها شامل شیر، سوآب چشم و پانکسیون مایع مفصلی با دو روش کشت در محیط اختصاصی PPLO ,PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی در ناحیه ژن 1687rRNA و ژن لیپوپروتئین، جهت جداسازی و شناسائی مایکوپلاسما آگالاکتیه مورد ارزیابی قرار گرفتند. در روش کشت ازمجموع 17 نمونهی اخذ شده، در 8 نمونه پرگنههای بشکل تخممرغ نیمرو مشاهدهگردید و بعنوان مایکوپلاسما شناسائی شد و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی در آزمایش PCR بعنوان جنس مایکوپلاسما مورد تأیید قرار گرفتند. در روش PCR نیز در 8 نمونه جنس مایکوپلاسما جداسازی شد و تنها یک نمونه بعنوان مایکوپلاسماآگالاکتیه مورد شناسائی قرار گرفت. این اولین گزارش از جداسازی مایکوپلاسماآگالاکتیه از گوسفندان مبتلا به بیماری آگالاکسی با استفاده از دو روش کشت و PCR در ایران است. این مطالعه نشان داد 87/5 درصد از عوامل بیماری آگالاکسی در شهرستان بافت را گونه یا گونههای دیگر مایکوپلاسما تشکیل میدهند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
15 - تمایز سارکوسیستیس هومینیس در گوشت گاو به روشPCR
ابراهیم رحیمی عباس دوستی سید رضا حسینی مجید همایونی رحمان عبدی زادهمطالعه حاضر با هدف بررسی فراوانی سارکوسیستیس هومینیس در گاوهایکشتار شده در کشتارگاه های اصفهان طراحی شد . در مجموع 768 نم ونه بافتماهیچه ای قلب و دیافراگم از 384 لاشه گاو مورد آزمایش میکروسکوپی قرارگرفته و نمونه های آلوده جهت تمایز سارکوسیستیس هومینیس با استفاده ازروش و أکثرمطالعه حاضر با هدف بررسی فراوانی سارکوسیستیس هومینیس در گاوهایکشتار شده در کشتارگاه های اصفهان طراحی شد . در مجموع 768 نم ونه بافتماهیچه ای قلب و دیافراگم از 384 لاشه گاو مورد آزمایش میکروسکوپی قرارگرفته و نمونه های آلوده جهت تمایز سارکوسیستیس هومینیس با استفاده ازروش واکنش زنجیره ای پلی مراز آزمایش شدند. بر پایه آزمون های میکروسکوپی میزان شیوع کیست های سارکوسیستیس در گاو62/8 درصد بدست آمد و بر پایه آزمون PCR ،نمونه از 431 نمونه آلوده (48/1 درصد)از نظر سارکوسیستیس هومینیس مثبت بود . بررسی آماری بیانگر آن است که اختلافآماری معنی داری بین شیوع آلودگی در بافت های ماهیچه قلب و دیافراگم وجود ندارد( p>0.05)نتایج مطالعه حاضر نشان داد میزان آلودگی گوشت گاو در اصفهان به کیست ها سارکوسیستیس هومینیس بالاست و مصرف گوشت نیمه پزمی تواند منجر به سارکوسیستیس موردی در انسان شود تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
16 - شناسایی مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در نمونه بافتی ایلئوم در گاوهای ذبح شده در کشتارگاه شهرکرد به دو روش رنگ آمیزی اختصاصی زیل نلسون و واکنش زنجیره ای پلیمراز
حسن کریمی عبدالرسول نامجو حسن ممتاز محمدرضا نامداریبیماری یون نوعی التهاب مزمن روده ای شدید و پیشرونده است که دستگاهگوارش نشخوارکنندگان اهلی، وحشی و تک سمی ها را درگیر می سازد . اینمطالعه به منظور تشخیص مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس به روش واکنشزنجیره ای پلیمراز و رنگ آمیزی اختصاصی زیل نلسون بر روی نمونه هایبافتی ا أکثربیماری یون نوعی التهاب مزمن روده ای شدید و پیشرونده است که دستگاهگوارش نشخوارکنندگان اهلی، وحشی و تک سمی ها را درگیر می سازد . اینمطالعه به منظور تشخیص مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس به روش واکنشزنجیره ای پلیمراز و رنگ آمیزی اختصاصی زیل نلسون بر روی نمونه هایبافتی ایلئوم انتخاب شده از گاوهای کشتارشده در کشتارگاه شهرکرد انجام شد .نتایج آزمایش رنگ آمیزی اختصاصی زیل نلسون و واکنش زنجیره ای پلیمراز آشیانه ای بترتیب آلودگی 6/67%و26/67% را نشان داند. آزمون آماری مک نمار نشان داد که حساسیت آزمون واکنش زنجیره ای پلی مراز بیش از رنگ آمیزی اختصاصی زیل نلسون است (P<0.001)میزان توافق کلی بین دو روش 80درصد و ضریب کاپا 0/33 محاسبه شد که نشان دهنده توافق ضعیف است (P<0.01)همچنین رابطه معنی داری بین آلودگی با جنس، نژاد و سن مشاهده تشخیص آلودگی از دقت بالایی برخوردار است و در مراحل اولیه بیماری کهتعداد میکروارگانیسم ها اندک است نمی توان به نتایج هیستوپاتولوژیک جهتتشخیص بیماری یون اعتماد کرد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
17 - مطالعه تجربی گرایش بافتی جدایه ایرانی سروتیپB/ 793 ویروس برونشیت عفونی در جوجه های SPF
پیمان بیژن زاد رضا ممیز محمدحسن بزرگمهری فرد محمدحسن حبل الورید سیدعلی پوربخشبیماری برونشیت عفونی یکی از عوامل بیماریزای مهم صنعت طیور می باشد، کهعمدتاً موجب بیماری تنفسی می گردد اما سویه های مختلف این ویروس می توانندسایر بافت ها را نیز مبتلا نمایند. هدف از این مطالعه بررسی تجربی گرایش بافتی سروتیپ793/B ویروس برونشیت عفونی در جوجه های SPF بوسیله أکثربیماری برونشیت عفونی یکی از عوامل بیماریزای مهم صنعت طیور می باشد، کهعمدتاً موجب بیماری تنفسی می گردد اما سویه های مختلف این ویروس می توانندسایر بافت ها را نیز مبتلا نمایند. هدف از این مطالعه بررسی تجربی گرایش بافتی سروتیپ793/B ویروس برونشیت عفونی در جوجه های SPF بوسیله آزمایش های RT-PCR وPCR آشیانه ای بود در این مطالعه، انتشار بافتی جدایه ایرانی ویروس (793/B ) IR/773/200از سروتیپ 793/Bدر اندام های مختلف جوجه های SPFمورد بررسی قرار گرفت. چهل و دوقطعه جوجه یکروزه SPFبطور تصادفی به دو گروه 21 قطعه ای تقسیم گردیدند. درسن 12 روزگی جوجه های گروه یک با (EID 10^3)ویروس برونشیت عفونی به روشقطره چشمی آلوده و گروه دو بعنوان گروه کنترل درنظر گرفته شد. نمونه برداری ازاندام های مختلف در روزهای 12،10،8،6،4،2پس از تلقیح انجام گردیدجوجه های گروه عفونی شده با ویروس مذکور از روز دوم تا چهارم دچار کزکردگیبودند. ویروس از کلوآک و لوزه های سکومی در روز 12-2در کلیه روزهای 10-4ودر بورس فابریسیوس در روزهای 12-4پس از تلقیح ردیابی شد. در نای نیزویروس در روزهای 2 و 4 و در تیموس در روزهای 6 و 8 پس از تلقیح ردیابیگردید. در ریه نیز تنها نمونه های مثبت مربوط به روز 4 پس از تلقیح بود.نتایج مطالعه حاضر نشان دادکه سروتیپ 793/Bویروس برونشیت عفونی به تنهایینمی تواند منجر به تلفات، علائم شدید بالینی یا کالبدگشائی در جوجه های مبتلا گردد،اما تکثیر این ویروس در برخی اندام ها می تواند منجر به مستعد شدن پرنده برای ابتلابه سایر بیماری ها گرددگرایش بافتی؛ ویروس برونشیت عفونی؛ سروتیپ 793/B ,؛ RT-PCR , جوجه های SPF تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
18 - تشخیص و ردیابی مایکوپلاسما سینوویه از مرغداری های صنعتی بااستفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس ژنvlhA
معصومه مقامی سیدعلی پوربخش علیرضا همایونی مهر حمیدرضا مهاجرانی عباس اشتری محمدعلی بیات زادهمایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه سالهخسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتئین هماگلوتینین متغیرvlhA Variable lipoprotein hemagglutinin A می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ا أکثرمایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه سالهخسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتئین هماگلوتینین متغیرvlhA Variable lipoprotein hemagglutinin A می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ایفا می کند. هدف اصلی این مطالعه تشخیص و شناسایی جدایه های مایکوپلاسما سینوویه بر اساس ژنvlhA بود. از گله های طیور صنعتی سه استان (تهران، مرکزی و قزوین) که دارای علائم مشکوک به آلودگی بودند، توسطسوآپ های کتانی و از شکاف حلقی کامی، نای و کیسه های هوائی نسبت بهنمونه گیری اقدام شد. در این مطالعه ضمن جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما با استفاده از روش کشت و آزمون PCR جنس مایکوپلاسما، نسبت به آزمون PCR برای ناحیه محافظت شده ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه نیز مبادرت گردید و بدین ترتیب علاوه بر پرایمرهای اختصاصی جنس مایکوپلاسما از جفت پرایمر مربوط به ناحیه محافظت شده انتهای آمینی ژن مربوط به ناحیه محافظت شده انتهای آمینی ژن vlhA استفاده گردید. در نتایج مشاهده شد که محصول PCR تولیدی برای پرایمرهای اختصاصی ژن vlhA در نمونه های مثبت مایکوپلاسما سینوویه، 350-400 جفت بازی برای هر جدایه بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داده شد و از بین 43 نمونه مورد مطالعه، در روش کشت، 28 (65%) نمونه مثبت مشاهده گردید و در آزمون PCR جنس مایکوپلاسما، 33 (76%) نمونه و همچنین 24 (55%)نمونه در آزمون PCR ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه، مثبت گزارش شدند. نتایج این مطالعه نشان می دهد که آزمون PCR در ناحیه́ 5 ژن vlhA مایکوپلاسما سینوویه جهت شناسایی جدایه ها کاربردی بوده و همچنین به علت دربرداشتن نواحی RII ،RI و ناحیه پلی مورفیسم ،RIII با کارایی و حساسیت بالا، می تواند جهت تشخیص و ردیابی گونه مایکوپلاسما سینوویه مورد استفاده قرار گیرد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
19 - پراکندگی ژن انتروتوکسین A در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از پنیر سفید سنتی آب نمکی
خسرو محمدیمصرف مواد غذایی حاوی انتروتوکسین های استافیلوکوکی، اغلب موجب مسمومیت غذائی می شوند. انتروتوکسین A شایع ترین سم در مسمومیت های استافیلوکوکی شناخته شده است. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی پنیرهای سفید آب نمکی تهیه شده به روش سنتی به استافیلوکوکوس اورئوس و شناسایی ژن أکثرمصرف مواد غذایی حاوی انتروتوکسین های استافیلوکوکی، اغلب موجب مسمومیت غذائی می شوند. انتروتوکسین A شایع ترین سم در مسمومیت های استافیلوکوکی شناخته شده است. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی پنیرهای سفید آب نمکی تهیه شده به روش سنتی به استافیلوکوکوس اورئوس و شناسایی ژن کد کننده انتروتوکسین A (sea) بود. در مجموع تعداد 120 نمونه پنیر آزمایش شدند که از این تعداد استافیلوکوکوس اورئوس از 11 (1/9%) نمونه جداسازی شد. نتایج شمارش در محدوده cfu/g 101 × 5/1تا 104 × 6/8 متغیر بود. هیچ کدام از نمونه ها از نظر شاخص مسمومیت با استافیلوکوکوس اورئوس در حد بحرانی (cfu/g 105>) نبود. از هر نمونه پنیر پنج کلونی مشکوک با آزمایش های بیوشیمیایی تأیید شدند. شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس در سطح گونه براساس ژن 23S rRNA، ژن ترمونوکلئاز و ژن انتروتوکسین A به روش PCR چندگانه ارزیابی شدند. در مجموع 55 جدایه مورد مطالعه قرار گرفتند. همه جدایه ها بعنوان استافیلوکوکوس اورئوس تأیید شدند. ژن انتروتوکسین A (sea) در 6 (9/10%) جدایه مشاهده شد. طبق نتایج این مطالعه ژن sea در استافیلوکوکوس اورئوس های پنیر سفید سنتی آب نمکی وجود دارد و درصورتیکه شرایط مساعد برای رشد و تولید انتروتوکسین فراهم شود می تواند بعنوان یک مخاطره بالقوه مطرح شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
20 - مقایسه دو روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت استاندارد برای تشخیص سالمونلا در شیر خام
مجتبی بنیادیان تقی زهرایی صالحی امیر مهربانیباکتری سالمونلا از جمله باکتریهای بیماریزا است که میتواند در غذا و مواد اولیهحضور پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری میتواندباعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور شود. در این مطالعه، تعداد 150 مخزن حمل شیر خام برای شناسایی و جداسازی باکت أکثرباکتری سالمونلا از جمله باکتریهای بیماریزا است که میتواند در غذا و مواد اولیهحضور پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری میتواندباعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور شود. در این مطالعه، تعداد 150 مخزن حمل شیر خام برای شناسایی و جداسازی باکتری سالمونلا در شیرخام، برای مقایسه روشهای واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت مورد آزمایش قرارگرفت. در این روش ابتدا شیر خام به روش استاندارد مورد کشت و آزمایش قرارگرفت و سپس مراحل تکمیلی و شناسایی برای جداسازی باکتری سالمونلا انجامشد. با استفاده از روش کشت، 6 نمونه کشت باکتری مشکوک، برای انجام آزمایش واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR)انتخاب شد که پس از آزمایش PCR و استفاده از شناساگر ژن invA نتایج آزمایش منفی شد. سپس آزمون PCR مستقیم بر روی شیرخام با استفاده از شناساگر ژن invA انجام شد. در این روش تعداد 3 نمونه از 150 نمونه مورد آزمایش مثبت گردید. در مجموع در 2% از کل نمونه ها، آلودگی به باکتری سالمونلا وجود داشت. نتایج این مطالعه نشان داد که روش PCR نسبت به روشهای سنتی در شناسایی باکتری سالمونلا در شیر خام از توانایی بیشتریبرخوردار است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
21 - آنالیز فیلوژنتیک کوکسیلابورنتی جدا شده از شیر گاوداریهای استان تهران
چنگیز احمدی‌زاده، محمود جمشیدیان، فرهاد موسی‌خانی .تب کیو بیماری مشترک انسان و دام با انتشار جهانی است که توسط نوعی ریکتزیا به نام کوکسیلابورنتی ایجاد میشود. جرم عامل بیماری از طریق جنین سقط شده، ادرار، مدفوع و شیر دام آلوده دفع میشود. بنابراین مصرف شیر غیر پاستوریزه آلوده میتواند منبع عفونت برای انسان باشد. در این م أکثرتب کیو بیماری مشترک انسان و دام با انتشار جهانی است که توسط نوعی ریکتزیا به نام کوکسیلابورنتی ایجاد میشود. جرم عامل بیماری از طریق جنین سقط شده، ادرار، مدفوع و شیر دام آلوده دفع میشود. بنابراین مصرف شیر غیر پاستوریزه آلوده میتواند منبع عفونت برای انسان باشد. در این مطالعه از مجموع 50 گاوداریهای شیری اطراف تهران تعداد 150نمونه شیر از تانک مخزن دریافت گردید و تمامی نمونهها با استفاده از پرایمرهای ژن ترانسپوزان IS1111a اختصاصی کوکسیلا بورنتی, مورد آزمایش PCR قرار گرفتند. که از کل نمونههای مورد آزمایش 18 نمونه از نظر کوکسیلابورنتی مثبت بودند که به طور تصادفی 12نمونه انتخاب و برای توالی یابی به شرکت ماکروژن کره ارسال گردید. نتایج این پژوهش نشان داد که شیر گاو یکی از مخازن بالقوه کوکسیلابورنتی در ایران است. هدف از این مطالعه آنالیز فیلوژنتیک کوکسیلابورنتی‌های جدا شده از شیر گاوداریهای استان تهران بود که پس از کسب توالی ژن مورد نظر باکتری کوکسیلا بورنتی، تمامی توالی‌های به دست آمده با توالی‌های موجود در بانک ژن مقایسه گردید. حاصل این مقایسه نشان داد که ژن ترانسپوزان IS1111A کوکسیلا بورنتی جداشده از شیر گاوهای گاوداریهای اطراف تهران بیش از 99% با توالی‌های موجود در بانک ژن قرابت دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
22 - تعیین هویت مولکولی آسپرژیلوس پارازیتیکوس و فلاووس در نمونههای علوفه با روش Duplex PCR و مقایسه با روشهای کشت و مستقیم
ناهید پدرام، منصور بیات، محمدحسن شاه‌حسینی، سعید بکائی، محمد قهری .آسپرژیلوزیس بیماری عفونی انسان و طیور است که موجب مشکلات عدیده در آنها میشود. هدف اصلی این مطالعه، ارزشیابی دو روش آزمایشگاهی (سنتی و مولکولی) در تشخیص آسپرژیلوس فلاوس و پارازیتیکوس و مقایسه این دو روش می باشد. بعد از استخراج DNAهای سوش‌هایاستاندارد آسپرژیلوس پارازیتیک أکثرآسپرژیلوزیس بیماری عفونی انسان و طیور است که موجب مشکلات عدیده در آنها میشود. هدف اصلی این مطالعه، ارزشیابی دو روش آزمایشگاهی (سنتی و مولکولی) در تشخیص آسپرژیلوس فلاوس و پارازیتیکوس و مقایسه این دو روش می باشد. بعد از استخراج DNAهای سوش‌هایاستاندارد آسپرژیلوس پارازیتیکوس و فلاووس به همراه پرایمرهای هر قارچ و تست PCR، ژنهای هر قارچ تکثیر و محصول PCRبه روش TA cloning با استفاده از پلاسمید PTZ57R کلون گردید پس از بهینه‌سازی تستهای PCR و PCR Duplex 50 نمونه به روش PCR Duplex، کشت و آزمایش مستقیم آزمایش شدند. در تست اپتیمایز شده PCR، محصول bp 343 و bp 413آسپرژیلوس پارازیتیکوس و فلاووس به ترتیب تکثیر گردید. 50 نمونه علوفه به روش Duplex PCR ، کشت و آزمایش مستقیم آزمایش شدند. در آزمایش Duplex PCR ، کشت و آزمایش مستقیم بر روی نمونهها، 13 نمونه با Duplex PCR و 15 نمونه با آزمایش مستقیم و کشت مثبت شد و 26 نمونه با هر دوروش منفی بودند.نتایج بدست آمده از آزمایشات فوق توسط آزمون MacNemar بین نتیجه مستقیم و کشت از یک سو و نتیجه Duplex PCR از سوی دیگر انجام شده توافق بین دو تست میباشد P=0.824. طبق نتایج بدست آمده از نظر تشخیص، تفاوت معنی داری بین دوروش آزمایشگاهی وجود نداشت هرچند روش Duplex PCR پاسخ‌دهی سریعتری نسبت به روشهای سنتی داشت و قادر به تشخیص آسپرژیلوسپارازیتیکوس در نمونهها شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
23 - ایجاد پلاک توسط سویه V4ویروس عامل بیماری نیوکاسل بر روی کشت سلولی و بررسی مولکولی با روش واکنش زنجیره پلیمراز نسخه‌برداری معکوس RT-PCR))
ساناز سبحانی، محمدجواد مهربانپور .امروزه در بسیاری از کشورهای دنیا واکسن کلون شده مورد استفاده قرار میگیرد. جهت کلون کردن یک ویروس، یکی از راه‌ها رشد ویروس بر روی کشت سلول و جدا کردن پلاک‌های مجزا و متفاوت و بررسی آنها از لحاظ مورفولوژی و ژنتیکی است. دراین تحقیق، ابتدا سلولهای ) Madin-Darby Canine Kid أکثرامروزه در بسیاری از کشورهای دنیا واکسن کلون شده مورد استفاده قرار میگیرد. جهت کلون کردن یک ویروس، یکی از راه‌ها رشد ویروس بر روی کشت سلول و جدا کردن پلاک‌های مجزا و متفاوت و بررسی آنها از لحاظ مورفولوژی و ژنتیکی است. دراین تحقیق، ابتدا سلولهای ) Madin-Darby Canine Kidney MDCK) بصورت تک لایه و بطور استاندارد کشت داده شد. رقت های مختلف ویروس به سلولهای تک لایه MDCK همراه با تریپسین، آگار و سولفات منبزیوم اضافه شد. ویروس توانست بر روی سلولهای فوق تکثیر و ایجاد اثر سایتوپاتیک (CPE) و پلاک نماید. در رقت 6-10 تعداد 6 پلاک که از لحاظ شکل و اندازه تفاوت داشتند برداشته شدند و جهت تکثیر به تخممرغ جنین دار 11-9 روزه تلقیح گردید. بعد از 48 ساعت مایع آلانتوئیک هر تخممرغ حاوی پلاک برداشت ونسبت به جداسازی RNA هر پلاک اقدام گردید. منطقه شکست (Cleavage site)پروتئین ادغامی(Fusion) با تست RT-PCR انجام شد و محصول PCR خالص‌سازی وسکانس گردید. سکانس نوکلئوتیدها و آمینواسیدها برای هر پلاک با سوش های ثبت شده در بانک ژنی مقایسه شد. سکانس نوکلئوتیدهای تمامی پلاک‌های بدست آمده، 97 تا 99% همخوانی با ویروس V4در بانک ژنی را تایید نمود. هدف از این پژوهش ایجاد پلاک از سوش V4 ویروس نیوکاسل بر روی سلولهای MDCK جهت ایجاد پلاک‌های مجزا و در نهایت بررسی مولکولی پلاک‌های ایجاد شده میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
24 - تعیین هویت مولکولی پاتوتیپ‌هایEAEC و EPEC باکتری اشریشیاکلی جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان با روش Multiplex PCR و تعیین مقاومت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن و روش E.test
ناهید سلیمانی‌فرد، کیومرث امینی .E.coli گیای نرمال مجاری گوارشی بیشتر جانوران و نیز انسان است. اغلب سویه های E.coli بیماریزا نیستند، اما برخی سویههای پاتوژنیک E.coli میتوانند باعث بروز انواعی از بیماری های روده ای و خارج روده ای شوند. مقاومت آنتیبیوتیکی در درمان بیماری‌ها حائز اهمیت می باشد. هدف از أکثرE.coli گیای نرمال مجاری گوارشی بیشتر جانوران و نیز انسان است. اغلب سویه های E.coli بیماریزا نیستند، اما برخی سویههای پاتوژنیک E.coli میتوانند باعث بروز انواعی از بیماری های روده ای و خارج روده ای شوند. مقاومت آنتیبیوتیکی در درمان بیماری‌ها حائز اهمیت می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی میزان فراوانی ژنهای پاتوتیپ های EAEC، EPEC و مقاومت آنتیبیوتیکی اشریشیاکلی جدا شده از نمونههای دامی می باشد. پس از جمعآوری 50 نمونه ، آزمون های مختلف بیوشیمیایی و میکروبی انجام و آزمون حساسیت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن بر اساس دستورالعمل CLSI وE-test با آنتی بیوتیک هایی از گروه های مختلف انجام گردید. جهت شناسایی پاتوتیپ ها از آزمون Multiplex PCR استفاده شد. اکثر E.coli جدا شده نسبت به اریترومایسین (100%) و آمپی سیلین (93%) مقاوم و نسبت به آمیکاسین (100%) و نیتروفورانتوئین (96%) حساس بودند، همچنین بسیاری از سویهها به چند دارو مقاومت داشتند. نتایج Multiplex PCR بر روی 50 نمونه شیر دام، 4 نمونه (8%) دارای ژن bfPA (پاتوتیپ EPEC) بودند. علت اختلاف نتایج بدست آمده از روش M-PCR در این مطالعه با نتایج مطالعات سایر محققان در نقاط مختلف دنیا ممکن است به علت منبع نمونه باشد، در این مطالعه سویه های جدا شده از نمونه های شیر ورم پستان مورد بررسی قرار گرفته است، در حالیکه در مطالعات سایر محققین بیشتر موارد بر روی نمونه های مبتلا به اسهال خونی بررسی انجام شده است. البته تفاوت در نمونه های جداشده از شیر می تواند به علت تفاوت در مناطق جغرافیایی باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
25 - بهینه‌سازی شرایط PCR برای دو ژن CHD-W و CHD-Z جهت تفکیک جنسیت در قناری
فاطمه اعتمادی، زینب فتح‌خانی، احمد ابراهیمی، خسرو حسینی‌پژوه .در گونههای بسیاری از پرندگان من جمله قناری‌ها، جنس نر و ماده قبل از بلوغ فاقد هر گونه تفاوت در شکل ظاهری میباشند. از آنجاییکه صدای دلنشین قناری توسط جنس نر ایجاد میشود، لذا تفکیک جنسیّت قناری‌ها قبل از بلوغ از لحاظ اقتصادی بسیار حائز اهمّیّت میباشد. ژنهای موجود بر أکثردر گونههای بسیاری از پرندگان من جمله قناری‌ها، جنس نر و ماده قبل از بلوغ فاقد هر گونه تفاوت در شکل ظاهری میباشند. از آنجاییکه صدای دلنشین قناری توسط جنس نر ایجاد میشود، لذا تفکیک جنسیّت قناری‌ها قبل از بلوغ از لحاظ اقتصادی بسیار حائز اهمّیّت میباشد. ژنهای موجود بر کروموزوم‌های جنسی به خاطر منحصر به جنس بودنشان میتوانند برای تفیین جنسیت به روش مولکولی مورد استفاده قرار گیرند. با استفاده از روش PCR و بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z تفکیک جنسیّت در قناری‌ها صورت گرفته است. هدف از این مطالعه بهینه سازی PCR بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z در تفکیک جنسیّت در قناری بود. در این مطالعه از 24 قناری دو پر حاوی ریشه تهیه گردید و استخراج DNA از بالب پرها صورت پذیرفت و از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده برای تکثیر توالی ژن W-CHD استفاده شد و با بهینه سازی شرایط PCR برنامه بهینه به صورت زیر به دست آمد: واسرشته سازی اوّلیه 94 درجه سانتیگراد به مدّت 5 دقیقه، 35 سیکل با شرایط : 94 درجه سانتیگراد به مدّت 60 ثانیه ،58 درجه سانتیگراد به مدّت 35 ثانیه و دمای 72 درجه سانتیگراد به مدّت 50 ثانیه و در نهایـت دمـای72 درجه سانتیگراد بـه مـدت 5 دقیقه. این مطالعه نشان داده شد که روش بهینه شده PCR میتواند با دقت صد درصد جنسیت قناری را تعیین کند و لذا مناسب‌ترین روش برای تعیین جنسیّت قناری است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
26 - تعیین انتشار جغرافیایی تیلریا اویسدر بزان استان تهران به روش مولکولی
مهدی خداویسی، صادق رهبری، پرویز شایان، ناصر حقوقی‌راد .تیلریا اویس یکی از عوامل تک یاخته‌ای خونی خوش خیم در گوسفند و بز در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری بوده که توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده انتقال می‌یابد. این مطالعه برای تعیین پراکنش تیلریا اویس بر روی جمعیت 400 راس بز به ظاهر سالم در استان تهران انجام گردید. گس أکثرتیلریا اویس یکی از عوامل تک یاخته‌ای خونی خوش خیم در گوسفند و بز در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری بوده که توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده انتقال می‌یابد. این مطالعه برای تعیین پراکنش تیلریا اویس بر روی جمعیت 400 راس بز به ظاهر سالم در استان تهران انجام گردید. گسترش‌های خونی تهیه شده پس از رنگ‌آمیزی با روش گیمسا، تحت آزمایشات میکروسکوپی قرار گرفتند. به منظور تشخیص مولکولی، استخراج DNA از خون صورت گرفت و متعاقب آن به منظور تفریق گونههای تیلریا و بابزیا از یکدیگر با آغازگرهای اختصاصی منشعب از ژن کد کننده 18SrRNA (آغازگر1، آغازگر2) تکثیر پیدا کرد. به منظور تفریق گونههای تیلریا از یکدیگر آزمایش Semi-nested PCR با آغازگرهای اختصاصی منشعب از ژن ms 1-2 برای تیلریا لستوکاردی (آغازگر4، آغازگر 6)، تیلریا آنولاتا (آغازگر 5، آغازگر 6) و برای تیلریا اویس با آغازگر اختصاصی منشعب از ژن 18SrRNA ( آغازگر2، آغازگر3) انجام شد. نتایج میکروسکوپی نشان داد که 7/1% ( 7 مورد از 400 نمونه) به تیلریا اویس آلوده بوده در حالی که در بررسی Semi-nested PCR 6% (24 مورد از 400 نمونه) برای تیلریا اویس مثبت بودند. نتایج این بررسی نشان داد که تیلریا اویس در بزان بدون علائم بالینی قابل شناسایی است. بنابراین آنها میتوانند به عنوان مخازن عفونت برای کنه‌ها و عامل انتقال انگل به گوسفند در نظر گرفته شوند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
27 - جستجوی ژنومی کمپیلوباکتر فتوس و لپتوسپیرا اینتروگانس در جنینهای سقط شده گوسفند در استانهای منتخب ایران به روش PCR
فاطمه کبیری، محمدرضا محزونیه، عزیزاله ابراهیمی‌کهریزسنگی، اعظم مختاری .سقط جنین عامل زیان‌های اقتصادی حائز اهمیت به سرمایه دامی کشور و موجب کاهش باروری و تولید است. عوامل عفونی مسئول بخشی از موارد سقط جنین در گوسفند و اغلب، واگیردار و مشترک بین انسان و دام هستند، لذا از نظر بهداشت عمومی نیز مورد توجه قرار گرفته‌اند. کمپیلو باکتر فتوس و لپت أکثرسقط جنین عامل زیان‌های اقتصادی حائز اهمیت به سرمایه دامی کشور و موجب کاهش باروری و تولید است. عوامل عفونی مسئول بخشی از موارد سقط جنین در گوسفند و اغلب، واگیردار و مشترک بین انسان و دام هستند، لذا از نظر بهداشت عمومی نیز مورد توجه قرار گرفته‌اند. کمپیلو باکتر فتوس و لپتوسپیرا اینتروگانس ازجمله عوامل عفونی سقط جنین گوسفندی در سراسر جهان بوده و خسارات بهداشتی اقتصادی ناشی از آنها قابل توجه است. نظر به اهمیت سقط جنینهای کمپیلوباکتریایی و لپتوسپیرایی در گوسفند در مطالعه حاضر عفونتهای حاصل از کمپیلوباکتر فتوس تحت گونه فتوس و لپتوسپیرا اینتروگانس در 98 نمونه محتویات شیردان جنینهای سقط شده گوسفند با روش PCRدر استان‎های اصفهان، چهارمحال و بختیاری و خراسان رضوی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد، میزان آلودگی به کمپیلوباکتر فتوس در نمونههای بررسی شده، 9/4 درصد بوده و نمونه آلوده به لپتوسپیرا یافت نشد. در کل نتایج این پژوهش نشان می‌دهد کمپیلوباکتر فتوس در بروز بخشی از موارد سقط جنین گوسفند نقش دارد. با توجه به روشهای مختلف تشخیصی لپتوسپیروز، به نظر می‌رسد هر روش تشخیصی نقاط ضعفی داشته و نمی‌توان صرف استفاده ازیک آزمون به طور قطع حضور این عامل را منفی دانست. بنابراین توصیه میشود به طور همزمان از چند روش استفاده شود تا بتوان با مقایسه نتایج حاصل به تشخیص دقیق‌تری دست یافت. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
28 - شناسایی مولکولی استرپتوکوکوس یوبریس از گاوهای مبتلا به ورم پستان تحت بالینی با روش PCR
سیدرضا عمادی، پرویز تاجیک، محمود بلورچی، محمدامین اسلامپور .با پیشرفت روشهای پایش و کنترل ورم پستان‌های مسری و با توسعه گلههای گاو شیری بر اهمیت عوامل محیطی ورم پستان چون استرپتوکوکوس یوبریس افزوده شده است. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی فراوانی استرپتوکوکوس یوبریس از گاوهای مبتلا به ورم پستان تحت بالینی انجام گرفته است. مطالعه أکثربا پیشرفت روشهای پایش و کنترل ورم پستان‌های مسری و با توسعه گلههای گاو شیری بر اهمیت عوامل محیطی ورم پستان چون استرپتوکوکوس یوبریس افزوده شده است. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی فراوانی استرپتوکوکوس یوبریس از گاوهای مبتلا به ورم پستان تحت بالینی انجام گرفته است. مطالعه در 4 گله گاو شیری در استان تهران انجام گرفت. نمونه از کارتیه‌های مبتلا به موارد تحت بالینی ورم پستان که به روش آزمون ورم پستان کالیفرنیا (California Mastitis Test) تشخیص داده می شدند اخذ و جهت کشت و جداسازی DNA (Deoxyribonucleic acid) با استفاده از کیت های تجاری جداسازی DNA و انجام PCR (Polymerase Chain Reaction) ارسال می شدند. محصول نهایی در 2 درصد ژل آگارز با ولتاژ 80 به مدت 2 ساعت تحت الکتروفورز قرار می گرفت. از مجموع 85 نمونه 64 مورد در اندازه 445 باز باند دادند. در مجموع 6/6 درصد گاوها مبتلا به ورم پستان تحت بالینی با عامل استرپتوکوکوس یوبریس بودند. در نتیجه روشهای پایش و کنترل ورم پستان در ارتباط با عوامل محیطی چون استرپتوکوکوس یوبریس می بایست بیشتر مورد توجه قرار گیرند و همچنین میتوان از روشهای دقیق تر و سریعتر مولکولی جهت شناسایی آن استفاده کرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
29 - بررسی شیوع مهمترین سروگروپ‌های اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک و فیمبریه 5F در گوساله‌های اسهالی زیر 5 روز در استانهای البرز و قزوین
عادل قره‌باغی، صمد لطف‌اله‌زاده، محمدرضا مخبردزفولی، فرهاد موسی‌خانی، زهرا یادگاری، غلامرضا نیکبخت‌بروجنی .اشریشیاکلی(E.Coli) فلور طبیعی مجاری گوارشی بیشتر جانوران و نیز انسان است اما برخی سویههای پاتوژنیک اشریشیاکلی باعث انواعی از بیماریهای رودهای و خارج روده ای میشوند. سروتیپ اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک (ETEC) شایع ترین علت بروز سندروم اسهال در نوزادان حیوانات مزرعه است. أکثراشریشیاکلی(E.Coli) فلور طبیعی مجاری گوارشی بیشتر جانوران و نیز انسان است اما برخی سویههای پاتوژنیک اشریشیاکلی باعث انواعی از بیماریهای رودهای و خارج روده ای میشوند. سروتیپ اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک (ETEC) شایع ترین علت بروز سندروم اسهال در نوزادان حیوانات مزرعه است. مهمترین فاکتور های مرتبط با بیماری زایی در ETEC، فیمبریه است که به عنوان عامل چسبنده و انتروتوکسین های ترشحی می باشد. مهمترین فیمبریه های معمول در گوساله‌ها (99K) 5Fو 41F می باشد و بیشترین موارد 99K جداشده متعلق به سروگروپ های 8O، 9Oو 101O است. هدف از انجام این مطالعه، بررسی میزان فراوانی ژنهای مربوط به سروگروپ‌های مختلف (101O، 9O، 8O و...) و فیمبریه 99Kدر گوساله‌های اسهالی زیر 5 روز است. هر نمونه بر روی محیط مک کانکی کشت و از هر پلیت، سه کلنی از باکتری به صورت جداگانه کشت داده شد، همچنین تمامی نمونهها از نظر فراوانی ژن 99K و در ادامه نمونه‌هایی که پس از بررسی ژن تایپ 101O منفی بودند به ترتیب اهمیت، از نظر تایپ 8O، 9O و 115O با آزمایش Multiplex PCR بررسی شدند. نتایج این بررسی نشان می دهد درصد فراوانی بدست آمده از سروگروپ های 8O، 9O، 101O، 115O و فیمبریه ی 99K در گوساله‌های اسهالی به ترتیب 7/18%، 3/9%، 3/56%، 8/7% و 3/9% و بیشترین فراوانی فیمبریه 99K بین سروگروپ‌ها در سروگروپ 101O با 3/83% می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
30 - بررسی فراوانی اشریشیاکلی‌های انتروتوکسیژنیک و انتروپاتوژنیک در شیر و فرآورده‌های شیری خام به روش دوپلکس PCR
رامین ابری، ودود رضویلر، افشین جوادی، محمد آهنگرزاده‌رضایی، تقی زهرایی‌صالحی .سویه های اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک معمولاً در کشورهای در حال توسعه شایع میباشند و علت اصلی اسهال در افرادی هستند که به کشورهای در حال توسعه مسافرت می کنند. تیپ های بیماریزای انتروپاتوژنیک (EPEC) به عنوان سویه هایی تعریف شده اند که دارای ژن eae هستند ولی ژن های 1stx و2 أکثرسویه های اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک معمولاً در کشورهای در حال توسعه شایع میباشند و علت اصلی اسهال در افرادی هستند که به کشورهای در حال توسعه مسافرت می کنند. تیپ های بیماریزای انتروپاتوژنیک (EPEC) به عنوان سویه هایی تعریف شده اند که دارای ژن eae هستند ولی ژن های 1stx و2stx را ندارند و می توانند علت اسهال در انسان و حیوانات باشند. هدف از این مطالعه شناسایی و بررسی میزان اشریشیا کلی جدا شده از نمونه شیر و فراورده های شیری خام با روش دوپلکس PCR بود. تعداد 102 نمونه شیر و فرآورده های شیری خام عرضه شده در بازار از بخش های مختلف استان آذربایجان شرقی انتخاب شدند. جدایه های اشریشیا کلی بعد از کشت و انجام تست های تاییدی شناسایی شدند. برای تشخیص سویه های اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک و انتروپاتوژنیک از دوپلکس PCR استفاده شد. به منظور شناسایی سویه های بیماریزای ETEC از پرایمر های مربوط به ژن های lt , st و برای شناسایی تیپ های بیماریزایEPEC از پرایمرهای مربوط به ژن های eae و bfp استفاده شد. طبق نتایج بدست آمده، 45% نمونه ها آلوده به اشریشیا کلی بودند. در بین اشریشیا کلی های جدا شده هیچ مورد ETEC شناسایی نشد و فقط دو مورد (34/4%) EPEC جداسازی شد که یک مورد (17/2%) آن EPEC تیپیک و یک مورد (17/2%) هم EPEC غیرتیپیک بود. باتوجه به مطالعات گذشته و مطالعه حاضر در ایران که نشان دهنده میزان بالای E. coli و حضور سویهEPEC در فرآورده های شیری خام است، می توان گفت که علت اصلی آن عدم رعایت شرایط صحیح بهداشتی، استفاده از شیر غیر پاستوریزه و انجام تمام مراحل تولید با دست و روش های سنتی می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
31 - جداسازی مایکوپلاسماهای بیماریزا از مزارع پرورش شترمرغ در ایران
حامد مومیوند، سیدعلی پوربخش، محمود جمشیدیان .در شتر مرغ ها، مایکوپلاسماها غالباً با بروز بیماریهای تنفسی همراه بوده و موجب بروز رینوتراکئیت، التهاب کیسه‌های هوایی، و التهاب سیستم تنفسی فوقانی می شوند. هدف از مطالعه حاضر جداسازی و ارزیابی مایکوپلاسماهای بیماریزای شترمرغ در ایران می باشد. در این مطالعه تعداد 100 نم أکثردر شتر مرغ ها، مایکوپلاسماها غالباً با بروز بیماریهای تنفسی همراه بوده و موجب بروز رینوتراکئیت، التهاب کیسه‌های هوایی، و التهاب سیستم تنفسی فوقانی می شوند. هدف از مطالعه حاضر جداسازی و ارزیابی مایکوپلاسماهای بیماریزای شترمرغ در ایران می باشد. در این مطالعه تعداد 100 نمونه از ریه ها، نای، و کیسه‌های هوایی شترمرغ های دارای علائم بالینی بیماری تنفسی، در زمان کشتار اخذ گردید. نمونه ها با استفاده از آزمایش سریع، کشت میکروبی و آزمایش مولکولی مورد ارزیابی قرار گرفتند. 05/21% نمونه ها در آزمایش واکنش زنجیره پلیمراز مثبت بوده اند که به ترتیب 89/7% و 14% آنها به ترتیب مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و مایکوپلاسما سینوویه بوده اند. در بررسی کشت باکتریایی، 14/6% نمونه ها از نظر مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و 01/7% نمونه ها از نظر مایکوپلاسما سینوویه مثبت بودند. همچنین براساس ارزیابی بالینی بیشترین میزان موارد مثبت کشت به ترتیب مربوط به ریه، کیسه های هوایی و نای بود. با توجه به شیوع مایکوپلاسماهای ماکیان در شترمرغ ها، بررسی دقیق بیماریزایی آن ها در شترمرغ ضروری می باشد، تا اهمیت پیشگیری مشخص شود تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
32 - بررسی تنوع ژنتیکی جدایههای کلبسیلا پنومونیه دامی و انسانی با استفاده از روش ERIC-PCR و تعیین الگو حساسیت آنتیبیوتیکی
احسان استبرقی، تقی زهرایی‌صالحی*، کیومرث امینی، محمود جمشیدیان .کلبسیلا پنومونیه، از جمله پاتوژنهای فرصت طلب و عامل عفونت در انسان و حیوانات میباشد. مقاومت به آنتی بیوتیک در جدایههای کلبسیلا پنومونیه در حال افزایش است. تست حساسیت ضد میکروبی قبل از تجویز آنتیبیوتیکها، لازم به نظر می‌رسد. هدف از مطالعه حاضر تعیین تایپ جدایههای ب أکثرکلبسیلا پنومونیه، از جمله پاتوژنهای فرصت طلب و عامل عفونت در انسان و حیوانات میباشد. مقاومت به آنتی بیوتیک در جدایههای کلبسیلا پنومونیه در حال افزایش است. تست حساسیت ضد میکروبی قبل از تجویز آنتیبیوتیکها، لازم به نظر می‌رسد. هدف از مطالعه حاضر تعیین تایپ جدایههای بالینی و دامی کلبسیلا پنومونیه و ارزیابی حساسیت آنتیبیوتیکی بود. در مجموع 100 جدایه بالینی و دامی کلبسیلا پنومونیه از شهرستان بابک جمعآوری شد. حساسیت آنتی بیوتیکی با روش کربی بائر با توجه به دستورالعمل CLSI انجام شد. سپس، استخراج DNA ژنومی با استفاده از کیت DNA انجام و واکنش زنجیرهای پلیمراز با پرایمر ERIC1 و ERIC2 انجام گردید. نتایج نشان داد که تمامی سویههای تحت مطالعه (100%) به آنتیبیوتیکهای آمپی سیلین و آمیکاسین مقاوم بودند. بیشترین و کمترین میزان مقاومت مریوط به تتراسیکلن (53 سویه؛ 3/88%) و ایمی پنم (8 جدایه؛ 3/13%) بود. نتایج حاصل از تجزیه خوشه‌ای و ترسیم دندروگرام بر اساس شباهت‌های ژنتیکی، نمونههای مورد مطالعه را به هفده گروه مجزا تفکیک نموده است. با توجه به یافته های این مطالعه، مقاومت به آنتی بیوتیک در بین جدایههای کلبسیلا پنومونیه در حال افزایش میباشد. علاوه بر این، توال‌های ERIC دارای جفت بازی هستند که حاوی تکرارهای معکوس و مرکزی به شدت حفاظت شده بوده و در نواحی خارج ژنی ژنوم باکتریها قرار گرفته اند و در تعیین تنوع ژنتیکی میان تمامی جدایه پیچیدگی کمتری دارند اما تفکیک خوبی در سطح سویه ایجاد میکنند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
33 - اپیدمیولوژی مولکولی سوش‌های مایکوپلاسما بویس جدا شده از عفونتهای ورم پستان بالینی در گاو
محسن ایمان‌‌دار، سیدعلی پوربخش*، محمود جمشیدیان، تقی زهرایی‌صالحی .مایکوپلاسما بویس از گونههای بیماریزای اصلی و شایعترین عامل ایجاد پنومونی، ورم پستان و آرتریت در گاو میباشد. هدف از این مطالعه، ارزیابی اپیدمیولوژی مولکولی (سن، میزان تولید، اندازه گله، نوع ترشحات بافت پستان، میزان افت تولید و سابقه ورم پستان بالینی) سوش‌های مایکوپلا أکثرمایکوپلاسما بویس از گونههای بیماریزای اصلی و شایعترین عامل ایجاد پنومونی، ورم پستان و آرتریت در گاو میباشد. هدف از این مطالعه، ارزیابی اپیدمیولوژی مولکولی (سن، میزان تولید، اندازه گله، نوع ترشحات بافت پستان، میزان افت تولید و سابقه ورم پستان بالینی) سوش‌های مایکوپلاسما بویس جدا شده از عفونتهای ورم پستان بالینی در گاو بود. نمونه‌گیری از 328 گاو مبتلا به ورم پستان بالینی (Purposive sampling) در گلههای شیری صنعتی انجام شد. نمونهها در کنار یخ و تا 24 ساعت به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسمای مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، ارسال شدند. جداسازی و شناسایی توسط روشهای کشت وPCR در حد جنس و گونه انجام گرفت و 31 جدایه با روش تعیین توالی نوکلئوتیدی تأیید شدند. یکی از جدایهها با سویه رفرانس مایکوپلاسما بویس PG45 ATCC25523 قرابت ژنتیکی 100% داشت. یکی از جدایهها از نظر توالی نوکلئوتیدی متفاوت با بقیه بود و سایر جدایهها، همولوژی 7/99% داشتند. بیشترین موارد مثبت متعلق به گروه سنی 6-4 سال و گلههای با اندازه 800 رأس به بالا بود و از این نظر، اختلاف آماری معنیداری وجود داشت (05/0>P). بر حسب میزان تولید و افت تولید متعاقب با عفونت، اختلاف معنیداری بین نمونههای مثبت مشاهده نگردید (05/0<P). نتایج نشان داد با ترشحات بافت پستان نمی‌توان این نوع ورم پستان را بطور قطعی تشخیص داد. بیشتر نمونههای مثبت در تاریخچه خود سابقه ورم پستان داشتند. نتیجه اینکه میزان حضور مایکوپلاسما بویس در موارد اورام پستان بالینی گاوها در ایران بالا است و رعایت اصول امنیت زیستی و قرنطینه‌ای بایستی در رأس برنامههای کنترلی قرار گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
34 - شناسایی مولکولی وارزیابی دز کشنده جدایه های سم زایی کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ C موجود در گنجینه میکروبی موسسه رازی
لیدا عبدالمحمدی خیاو علیرضا پردیس علی حق روستاکلستریدیوم پرفرینجنز عامل بیماری های متعدد از جمله انتروتوکسمی یا پرخوری یا قلوه نرمی می باشد . این بیماری با تغییر رژیم غذایی، تکثیر باکتری و تولید مقادیر زیاد توکسین بروز می نماید. بنابراین تشخیص توکسین در محتویات روده جهت تشخیص این بیماری استفاده می شود. به منظور پیش أکثرکلستریدیوم پرفرینجنز عامل بیماری های متعدد از جمله انتروتوکسمی یا پرخوری یا قلوه نرمی می باشد . این بیماری با تغییر رژیم غذایی، تکثیر باکتری و تولید مقادیر زیاد توکسین بروز می نماید. بنابراین تشخیص توکسین در محتویات روده جهت تشخیص این بیماری استفاده می شود. به منظور پیشگیری از انتروتوکسمی واکسیناسیون به موقع ضروری می باشد. هدف از این مطالعه انتخاب توکسیژنیک ترین جدایه توکسیژنیک کلستریدیوم پرفرینجنزتیپ C به منظور استفاده در تولید واکسن می باشد. در این تحقیق، ۲۱ جدایه تیپ C مورد آزمایشات میکروبیولوژی و بیوشیمیایی قرار گرفته، سپس نمونه هایی که به روش روتین باکتریولوژیک تعیین هویت گردیدند، توسط آزمون PCR تأیید شدند. نهایتا توکسیژنیک ترین جدایه به وسیله MLD انتخاب گشته و واکسن آناکالچر تتراوالان انتروتوکسمی از نمونه سویه واکسینال و این جدایه تهیه گردید . واکسن آزمایشی برای ۴۵ روز سردخانه گذاری شده سپس آزمون پتنسی بر روی نمونه ها انجام پذیرفت . نتایج این بررسی نشان داد که میزان آنتی توکسین بتا جدایه موسسه رازی چهار برابر ضعیف تر از نمونه واکسن تهیه شده از سوش واکسینال می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
35 - فراوانی آلودگی به تری تریکوموناس فتوس در گاوهای شهرستان اصفهان
حامد تفضلی علی شریف زادهتری تریکوموناس فتوس ، تک یاخته ای است که معمولا در گاو بیماری تولیدمثلی ایجاد کرده و باعث ناباروری و سقط جنین می گردد. روش مرسوم برای تشخیص آلودگی ، مشاهده مستقیم میکروسکوپی و درصورت زمان محدود برای بررسی،انتقال به محیط انتقالی یا محیط کشت است . هدف از این بررسی تنظیم ر أکثرتری تریکوموناس فتوس ، تک یاخته ای است که معمولا در گاو بیماری تولیدمثلی ایجاد کرده و باعث ناباروری و سقط جنین می گردد. روش مرسوم برای تشخیص آلودگی ، مشاهده مستقیم میکروسکوپی و درصورت زمان محدود برای بررسی،انتقال به محیط انتقالی یا محیط کشت است . هدف از این بررسی تنظیم روش مولکولی برای تشخیص آلودگی تریکوموناسی وتعیین میزان آلودگی درکشتارگاه اصفهان بود. در این بررسی از دو کشتارگاه متفاوت در شهرستان اصفهان 73 گاونر و27 گاوماده موردبررسی قرارگرفتند. با استفاده از سرنگ انسولین استریل و سواپ از رحم و مخاطات تناسلی نمونه گیری صورت گرفت. برای استخراج DNA براساس دستورالعمل شرکت سازنده کیت اقدام گردید(شرکت سیناژن - ایران). آزمایش واکنش زنجیره ی پلیمرازی (Nested PCR)، با بکارگیری پرایمرهای اختصاصیRNA ریبوزومی تری تریکوموناس فتوس برای توالی جنس(TFR 12) وگونه(TFR3-4) صورت پذیرفت. همه نمونه ها با انجام آزمون Nested PCR مورد بررسی قرارگرفتند . تعداد 6 گاونر(2/8% )و2 گاوماده (4/7% ) با نشان دادن باند372 بازی آلودگی به جنس و2 گاونرنیز آلودگی به گونه فتوس تری تریکوموناس راباباند374 بازی نشان دادند.سایر نمونه ها با گونه هایی غیر از گونه فتوس مرتبط بودند. بنابراین بر اساس نتایج این تحقیق، شیوع جنس تری تریکوموناس و خصوصا تری تریکوموناس فتوس در نمونه ها ، تاییدکننده لزوم توجه جدی به آزمایشهای غربالگری در گاو به خصوص گاوهای نر می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
36 - بررسی مولکولی آلودگی گوسفند و بز به گونه های بابزیا در استان سیستان و بلوچستان
روح ا... حسن پور دهنوی مریم گنجعلی فریبرز شریعتی شریفیدر ایران بابزیا یکی از مهمترین تک یاخته های خونی منتقله توسط کنه ها در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری است. بیماری بابزیوز به وسیله گونه های مختلف جنس بابزیا ایجاد می شود که میزبان های مهره دار گوناگون شامل حیوانات اهلی، وحشی و انسان را آلوده می نماید. بابزیا موتازی و بابز أکثردر ایران بابزیا یکی از مهمترین تک یاخته های خونی منتقله توسط کنه ها در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری است. بیماری بابزیوز به وسیله گونه های مختلف جنس بابزیا ایجاد می شود که میزبان های مهره دار گوناگون شامل حیوانات اهلی، وحشی و انسان را آلوده می نماید. بابزیا موتازی و بابزیا اویس به عنوان گونه های بیماریزا و شایع درگوسفندان و بزها در ایران شناخته شده اند وگاهی عفونت مضاعف هردوی آنها در یک میزبان گزارش شده است. در ایران بابزیوز هرساله در فصول گرم سال بخصوص اواخر بهار سبب بروز تلفات در گوسفندان می گردد. از آنجایی که بابزیوز در دام ها باعث بروز زیان های اقتصادی به صنعت دامپروری کشور می شود، این پژوهش با هدف شناسایی مولکولی گونه های بابزیا در جمعیت گوسفند و بز استان سیستان و بلوچستان انجام شد. بدین منظور نمونه های خون دامهای مشکوک (گوسفند و بز) در شهرستان های زاهدان، میرجاوه، خاش، سراوان و ایرانشهر همراه با کنه های سطح بدن دام اخذ گردید.از 100 نمونه خون جمع آوری شده با استفاده از روش PCR، 2 مورد بابزیا و 34 مورد تیلریا تشخیص داده شد، همچنین 1مورد آلودگی همزمان بابزیا و تیلریا (در مجموع 3موردمثبت بابزیا و 35 مورد مثبت تیلریا) را نشان داد و با روش Semi nested PCR فقط گونه بابزیا اویس شناسایی گردید و با استفاده از کلید های معتبر تشخیصی کنه های هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم، هیالوما آسیاتیکوم آسیاتیکوم، رپی سفالوس سانگوئینوس و رپی سفالوس تورانیکوس از سطح بدن دامهای آلوده جداسازی و شناسایی شدند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
37 - بررسی مولکولی و تعیین آلودگی لیشمانیازیس احشایی در سگهای بدون علامت در مشکین شهر استان اردبیل ، شمالغرب ایران
روزبه تسلیمیان بهار شمشادی عادل اسپوتین رضا فتوحی اردکانی نرمین نجف زادهانگل لیشمانیا اینفانتوم عامل اصلی ایجاد کننده لیشمانیازیس احشایی (Visceral leishmaniasis) است که طیف گسترده ای از انسان و سگها را در ایران تهدید می کند. هدف ما بررسی گونه های انگل لیشمانیا در مناطق آندمیک برای تشخیص لیشمانیازیس احشایی با استفاده از ژن ITS-rDNA ، توالی ی أکثرانگل لیشمانیا اینفانتوم عامل اصلی ایجاد کننده لیشمانیازیس احشایی (Visceral leishmaniasis) است که طیف گسترده ای از انسان و سگها را در ایران تهدید می کند. هدف ما بررسی گونه های انگل لیشمانیا در مناطق آندمیک برای تشخیص لیشمانیازیس احشایی با استفاده از ژن ITS-rDNA ، توالی یابی و تجزیه و تحلیل فیلوژنی بود. در این مطالعه، نمونه برداری بوسیله لوله های خلاءدار حاوی EDTA از خون سگ های بدون علامت (31 قلاده) با استفاده از روش غیر تهاجمی در اردبیل ، شمال غربی ایران در مرداد ماه 1398 انجام شد. DNA نمونه های جمع آوری شده استخراج شده، PCR و توالی یابی با هدف قرار دادن ژن ITS-rDNA انجام شد. برای نشان دادن وضعیت طبقه بندی گونه های لیشمانیا ، توالی ها به روش Maximum likelihood مورد تجزیه و تحلیل فیلوژنی قرار گرفت. از مجموع 31 نمونه سگ بدون علامت بدست آمده، 11 سگ به طور قطع آلوده به L. infantum تشخیص داده شدند. بیشترین تعداد آلودگی در گروه سنی زیر 5 سال بود که نشان داد این گروه نسبت به VL در این منطقه حساس تر هستند و آلودگی عمدتا در جنس مذکر مشاهده گردید. یافته های موجود نشان می دهد که نمونه برداری غیر تهاجمی و روش های مولکولی در تشخیص لیشمانیازیس احشایی قابل اطمینان و مناسب هستند. میزان شیوع VL در سگ های بدون علامت (35.5%) نشان دهنده یک هشدار برای بررسی و نظارت بر افراد / مخازن حساس در منطقه است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
38 - شناسائی مولکولی آناپلاسما اوویس در گوسفندان استان گیلان به روش PCR
وحید نعمان نصرالله واحدی نوری عبدالرضا نبی‌نژاد هادی میران زاده مسعود برومند جزیآناپلاسما اوویس، عامل بیماری در گوسفند و بز، در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری دنیا است. هدف از این مطالعه تعیین گونه آناپلاسما اوویس در گوسفندان استان گیلان و تاثیر برخی از متغییرها ( فصل، سن و جنس دام) در میزان شیوع آن بود. برای این منظور، تعداد 200 نمونه خون أکثرآناپلاسما اوویس، عامل بیماری در گوسفند و بز، در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری دنیا است. هدف از این مطالعه تعیین گونه آناپلاسما اوویس در گوسفندان استان گیلان و تاثیر برخی از متغییرها ( فصل، سن و جنس دام) در میزان شیوع آن بود. برای این منظور، تعداد 200 نمونه خون از طریق رگ وداج گوسفندان بطور تصادفی از نقاط مختلف استان گیلان اخذ گردید. DNA استخراجی از نمونه های خونی با جفت آغازگری که قطعه 1468 جفت بازی از ژن 16S rRNA جنس آناپلاسما را تکثیر می کرد، تکثیر شد. سپس نمونه های مثبت با جفت آغاز گر اختصاصی آناپلاسما اوویس از ژن msp4 که قطعه 866 جفت بازی را تکثیر می کرد، تکثیر شد. در مجموع، 38 نمونه از200 نمونه (19درصد) ازنظر آناپلاسما اوویس مثبت بودند. در مقایسه فراوانی آناپلاسما اوویس در فصول مختلف، آلودگی در شش ماه دوم سال با اختلاف معنی داری بیشتر از شش ماه اول سال بود (05/0 P<). اما در ارتباط با سنین مختلف دام های مورد بررسی و جنس دام هیچگونه تفاوت معنی داری مشاهده نگردید (05/0 P>). در این مطالعه آلودگی به آناپلاسما اوویس در گوسفندان استان گیلان تایید شد. مطالعه در خصوص روشهای انتقال آناپلاسما اوویس و ناقلین آن در ایران تا حد زیادی ناشناخته باقی مانده است و مستلزم تحقیقات بیشتری در مطالعات آینده می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
39 - ثبت و شناسایی ژن های توکسیک S.aureus جدا شده از ماهی تیلاپیا با تکنیک Multi plex PCR
نازنین نیاخلیلی حامد اهری بهاره نوروزیمقدمه: آبزیان به دلیل کالری و پروتئین بالا و همچنین وجود چربی غیراشباع امگا ۳ از اهمیت بسزایی در سبد غذایی برخوردارند. در مراحل مختلف از زمان صید تا رسیدن به دست مصرف‌کننده، همواره ممکن است بسیاری از آبزیان از جمله ماهی به برخی از میکروارگانیسم‌های بیماریزا آلوده شوند أکثرمقدمه: آبزیان به دلیل کالری و پروتئین بالا و همچنین وجود چربی غیراشباع امگا ۳ از اهمیت بسزایی در سبد غذایی برخوردارند. در مراحل مختلف از زمان صید تا رسیدن به دست مصرف‌کننده، همواره ممکن است بسیاری از آبزیان از جمله ماهی به برخی از میکروارگانیسم‌های بیماریزا آلوده شوند و در نهایت مسمومیت شدید را برای افراد ایجاد نمایند. در پژوهش حاضر به بررسی ثبت و شناسایی ژنهای توکسیک استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از ماهی تیلاپیا با تکنیک Multi plex PCR پرداخته شده است.مواد و روشها: تعداد کل نمونهها 42 عدد (21 عدد نمونه ماهی تازه و 21 عدد نمونه ماهی منجمد) مدنظر قرار گرفته شد. ابتدا پس از آماده‌سازی نمونههای مورد بررسی به ترتیب استافیلوکوکوس اورئوس جدا شد و به صورت کشت سطحی در محیط برد پارکر مورد بررسی قرار گرفت، سپس تست کوآگولاز انجام شد و در مرحله بعد با استخراج DNA ژن انتروتوکسیک شناسایی شد. در نهایت توالی‌یابی ژن به صورت اتوماتیک و دستگاهی انجام گرفت.یافتهها: یافته‌های به دست آمده نشان داد، 9/92 درصد از کل نمونههای مورد بررسی (21 عدد ماهی تیلاپیا تازه و 18 عدد ماهی منجمد) فاقد باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بودند و 1/7 درصد از کل نمونهها آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس شدند. نتایج بررسی تست کوآگولاز نیز نشان داد، هر سه نمونه ماهی منجمد مورد بررسی، کوآگولاز مثبت بودند. پس از بررسی ژنهای تولیدکننده انتروتوکسیک (SEA، SEB، SEC، SED، SEE و SEG) در بین سه نمونه منجمد آلوده به باکتری استافیلوکوکوس مشاهده شد که تنها در یک نمونه منجمد، ژن انتروتوکسیک SEA وجود داشت.نتیجه گیری: نتایج نشان داد با توجه به هزینه کم و زمان بسیار کوتاه‌تر مورد نیاز برای شناسایی ژن های استافیلوکوکوس اورئوس با روش Multiplex PCR، این روش ابزار قدرتمندی برای مطالعه ژنوتیپهای جدایههای استافیلوکوک میباشد. بنابراین با استفاده از این روش میتوان به ارتقا سطح سلامت غذایی در جامعه به خوبی پرداخت. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
40 - جداسازی، شناسایی و انگشت‌نگاری باکتریهای لاکتوباسیلوس از محصولات لبنی و تخمیری سنتی استان لرستان و تعیین روابط ژنتیکی بین آنها با استفاده از تکنیک RAPD-PCR
صبا دارائی بهروز دوستی کامران سمیعیباکتریهای اسید لاکتیک (LABs) اجزای اصلی و طبیعی میکرو فلور دستگاه گوارش هستند. شناسایی باکتری های اسید لاکتیک برای مطالعات پایه و کاربرد در صنایع غذایی از اهمیت ویژهای برخوردار است. جهت جداسازی باکتریهای اسید لاکتیک طبیعی، نمونههای ماست محلی و ترخینه از مناطق مختلف أکثرباکتریهای اسید لاکتیک (LABs) اجزای اصلی و طبیعی میکرو فلور دستگاه گوارش هستند. شناسایی باکتری های اسید لاکتیک برای مطالعات پایه و کاربرد در صنایع غذایی از اهمیت ویژهای برخوردار است. جهت جداسازی باکتریهای اسید لاکتیک طبیعی، نمونههای ماست محلی و ترخینه از مناطق مختلف استان لرستان با در نظر گرفتن فواصل جغرافیائی مناسب و شرایط آب و هوائی مختلف جمعآوری شد. پس از جداسازی باکتریهای گرم مثبت و کاتالاز منفی، تعداد 20 باکتری اسید لاکتیک انتخاب و سپس با استفاده از آغازگرهای اختصاصی، ژن 16SrDNA تکثیر و پس از همردیفی و مقایسه با بانک اطلاعاتی NCBI، نوع باکتری تعیین گردید. به منظور برآورد تنوع ژنتیکی بین باکتریهای مورد مطالعه، از 4 آغازگر نشانگر RAPD استفاده شد. در انتها درخت فیلوژنتیکی بین باکتریهای مورد مطالعه انجام گرفت. براساس آزمون آنتیبیوگرام مشخص شد که باکتریهای مورد مطالعه به آنتیبیوتیک کانامایسین و آمیکاسین مقاوم و به آنتیبیوتیکهای جنتامایسین، ونکومایسین و تتراسایکلین حساس بودند. باکتریهای جداسازی شده از ترخینه با 97 درصد شباهت و باکتریهای جداسازی شده از ماست با 89 درصد شباهت در گروه مشابهی قرار گرفتند. دو سویه باکتری جداسازی شده از ماست با 94 درصد به باکتری L.rhamnosus شباهت داشتند. در رابط با دو سویه باکتری جداسازی شده از نمونه ترخینه، نتایج نشان داد که این دو باکتری با شباهت 98 درصد به باکتری گونه L.pentosus شباهت داشتند. براساس نتایج گروه‌بندی توسط نشانگر RAPD، باکتریهای مورد مطالعه در ضریب تشابه 57 درصد تشکیل 6 گروه دادند و یک ژنوتیپ به تنهایی یک گروه تشکیل داد. در رابطه با فواصل جغرافیائی و گروه‌بندی به دست آمده، نمونههای باکتری جداسازی شده از محصولات سنتی مناطق جغرافیائی مشابه، در گروه‌های نزدیک به هم قرار گرفتند. نتایج به طور کلی نشان داد که استفاده از نشانگرهای ژنتیکی میتواند در شناسائی دقیق‌تر گونه و سویه باکتریهای اسید لاکتیک محصولات لبنی و تخمیری بسیار کارا باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
41 - بررسی حضور پروتئین گیاهی سویا در تعدادی از محصولات گوشتی تجاری با آزمون PCR
سارا بازیاری حمید رضا زمانی زاده مریم میزانی انوشه شریفانمقدمه: امروزه از سویا به سبب خصوصیات کاربردی و تغذیه ای موجود در پروتئین های آن در محصولات گوشتی استفاده می گردد. با این وجود سویا و مشتقات آنبر اساساستاندارد ملی ایران به عنوان مواد حساسیت زای شدید برای برخی افراد شناخته شده اند که باید از قوانین برچسب گذاری تبعیت کنند أکثرمقدمه: امروزه از سویا به سبب خصوصیات کاربردی و تغذیه ای موجود در پروتئین های آن در محصولات گوشتی استفاده می گردد. با این وجود سویا و مشتقات آنبر اساساستاندارد ملی ایران به عنوان مواد حساسیت زای شدید برای برخی افراد شناخته شده اند که باید از قوانین برچسب گذاری تبعیت کنند. بنابراین هدف این پژوهشتوسعه یک آزمون PCR برای شناسایی سویا به عنوان یک ماده آلرژن پنهان در محصولات گوشتی می باشد. مواد و روش ها: در این تحقیق، ابتدا نمونههای سویا و محصولات گوشتی تجاری تهیه و DNA هر یک با استفاده از کیت MBST، استخراج و خالص سازی گردید. پرایمر اختصاصی سویا طراحی و سفارش داده شد. سپس شرایط آزمون PCR برای تکثیر قطعه 118 جفت بازی متعلق به سویا، بهینه‌سازی و محصولات PCR، بوسیله ژل آگارز 5/1% الکتروفورز گردید. در نهایت کارایی این تکنیک برای شناسایی سویا در محصولات گوشتی تجاری مورد ارزیابی قرار گرفت و نتایج آزمون PCR بکار رفته با اظهارات برچسب محصولات گوشتی مقایسه شد. یافته ها: تحت شرایط بهینه‌سازی شده، قطعه DNA با طول 118جفت بازی برای سویا تکثیر یافت. سپس تکنیک توسعه یافته به طور موفقیت‌آمیزی برای شناسایی سویا در محصولات گوشتی تجاری مورد استفاده قرار گرفت، نتایج نشان داد که 100% محصولات سوسیس و ناگت مرغ ، 33% محصولات کالباس، 60% محصولات همبرگر، 75% محصولات کباب لقمه باند 118 جفت بازی متعلق به سویا را ظاهر ساختند. نتیجهگیری: نتایج نشان داد آزمون PCR توسعه یافته در مطالعه حاضر، روشی سریع، حساس، ساده، قابل اعتماد و مقرون به صرفه برای شناسایی پروتئین گیاهی سویا به عنوان یک ماده حساسیت زا در محصولات گوشتی تجاری خام و حرارت دیده میباشد.. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
42 - ردیابی و شناسایی افتراقی گوجه فرنگی تراریخته Solanum Lycopersicum با تکنیک Multiplex PCR در شهر تهران
عطیه عزیزی انوشه شریفان مژگان امتیازجومقدمه: صنعت غذا در همه جای دنیا از اهمیت ویژه ای برخوردار است. گوجه فرنگی و سایر فرآورده های آن نیز یکی از مهمترین محصولات کشاورزی در صنایع غذایی می باشند. گیاهان و بذرهای تراریخته یکی از دستاوردهای مهم بیوتکنولوژی نوین در زمینه کشاورزی هستند که در سال های اخیر بخشی ا أکثرمقدمه: صنعت غذا در همه جای دنیا از اهمیت ویژه ای برخوردار است. گوجه فرنگی و سایر فرآورده های آن نیز یکی از مهمترین محصولات کشاورزی در صنایع غذایی می باشند. گیاهان و بذرهای تراریخته یکی از دستاوردهای مهم بیوتکنولوژی نوین در زمینه کشاورزی هستند که در سال های اخیر بخشی از بازارهای غذایی دنیا را تسخیر نموده اند. لذا شناسایی و بررسی تراریخته بودن یا نبودن محصولات کشاورزی مصرفی بدلیل اینکه هنوز نظرات موافق و مخالف متعددی برای استفاده از این محصولات در دنیا وجود دارد، امری ضروری می باشد.مواد و روش ها: در این پژوهش 10 نوع گوجه فرنگی به همراه کاسبرگ به روش نمونه گیری تصادفی ساده از بازار شهر تهران جمع آوری شد و مورد بررسی قرار گرفت. استخراج DNA انجام و به منظور تعیین غلظت و کیفیت DNA استخراج شده مقایسه هر نمونه با غلظت استاندارد DNA فاژ لامبدا بریده شده، با آنزیم های برشی EcoRI، Hindǀǀǀ انجام شد. از آغازگرهای P35S F/R، NOS-1/NOS-3، RBCL-F/RBCL-R و NPTǁ-F/NPTǁ-R استفاده شد و قطعات نوکلئوتیدی بهترتیب bp195 و bp180 تکثیر شدند.یافته ها: قطعات نوکلئوتیدی تکثیر شده شباهت 100% توالی نوکلئوتیدی را با نمونه های موجود در بانک ژنی تایید کردند که محصولات مورد بررسی به لحاظ ژنتیکی دست ورزی شده اند. همچنین به منظور شناسایی گوجه فرنگی های تراریخته، از جفت آغازگر PG F/R اختصاصی برای تکثیر آنتی سنس ژن پلی گالاکتوروناز، به کار رفت. تمام نمونه هایی که باند مربوط به پروموتور P35S یا خاتمه دهنده NOS یا هر دو را داشتند، باند bp384 مربوط به قسمتی از آنتی سنس ژن PG را تکثیر نمودند و شباهت 100% توالی ثبت شده ژن مذبور در بانک ژن محرز شد.نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که گوجه فرنگی تراریخته در بازار ایران وجود دارد. اما به دلیل عدم برچسب گذاری به صورت گسترده، مصرف کنندگان از ماهیت تغییر یافته آن ها اطلاع ندارند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
43 - ارزیابی فراوانی آرکوباکتر بوتزلر ی در گوشت ماکیان عرضه شده در مراکز فروش شهرستان تنکابن با استفاده از تکنیک های کشت و PCR
زهرا پورعباسقلی مسعود قانع مهدی قیامی رادمقدمه: جنس آرکوباکتر همراه با کمپیلوباکتر در خانواده کمپیلوباکتریاسه قرار دارد .آرکوباکترها باکتری های گرم منفی، بدون اسپور و میکروآئروفیلیک هستند که به وسیله رشد در حضور اکسیژن و دماهای پایین از جنس کمپیلوباکتر متمایز می شوند. این باکتری ها میله ای، به و یا مارپیچی شکل أکثرمقدمه: جنس آرکوباکتر همراه با کمپیلوباکتر در خانواده کمپیلوباکتریاسه قرار دارد .آرکوباکترها باکتری های گرم منفی، بدون اسپور و میکروآئروفیلیک هستند که به وسیله رشد در حضور اکسیژن و دماهای پایین از جنس کمپیلوباکتر متمایز می شوند. این باکتری ها میله ای، به و یا مارپیچی شکل هستند. Sشکل آرکوباکتر بوتزلری رایج ترین گونه این جنس است به عنوان پاتوژن زئونوز و نوظهور شناخته شده است. هدف اصلی از این مطالعه ارزیابی فراوانی آرکوباکتر بوتزلری از گوشت ماکیان عرضه شده در مراکز فروش در شهرستان تنکابن بود. مواد و روش ها: جهت جداسازی از تکنیک استاندارد کشت و به منظور تعیین هویت و شناسایی از تست های فنوتایپینگ استفاده گردید. با و تکثیر ژن اختصاصی PCRاستفاده از آزمون آرکوباکتر تایید تست های فنوتایپینگ صورت پذیرفت. یافته نمونه گوشت ماکیان از خرده فروشی 95 ها: در مجموع های تنکابن جمع آوری و با هدف بررسی حضور گونه آرکوباکتر بوتزلری مورد آزمایش قرار گرفتند. بر پایه آزمون %) به 12/63 نمونه مورد مطالعه ( 95 نمونه از 12 های کشت آرکوباکتر بوتزلری آلوده بودند. هم چنین نتایج فنوتایپینگ را تائید نمود. PCRتکنیک نتیجه گیری: گرچه این باکتری تقریباً از تمامی مخازن محیطی جدا شده است، اما میتوان ماکیان را مخازن اصلی آرکوباکتر ها دانست. از این رو حضور این باکتری بیماریزا در گوشت ماکیان منطقه مورد تحقیق می تواند احتمال انتقال این عامل بیماری زا را به انسان از طریق مصرف محصولات غذایی افزایش دهد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
44 - تشخیص باسیلوس کواگولانس در محصولات پروبیوتیک به روش مولکولی PCR
فریما معتضدی هوشنگ نیکوپور محمد حسن شاه حسینیمقدمه: پروبیوتیک‌ها میکروارگانیسم‌های زنده‌ای هستند که اگر در مقادیر کافی تجویز گردند اثرات مفید سلامتی بر روی میزبان خواهند داشت. باسیلوس کواگولانس یک باکتری پروبیوتیکی گرم مثبت، هوازی تا غیر هوازی اختیاری، کاتالاز مثبت، اکسیداز منفی و تولید کننده اندوسپور می باشد. هدف أکثرمقدمه: پروبیوتیک‌ها میکروارگانیسم‌های زنده‌ای هستند که اگر در مقادیر کافی تجویز گردند اثرات مفید سلامتی بر روی میزبان خواهند داشت. باسیلوس کواگولانس یک باکتری پروبیوتیکی گرم مثبت، هوازی تا غیر هوازی اختیاری، کاتالاز مثبت، اکسیداز منفی و تولید کننده اندوسپور می باشد. هدف از این مطالعه شناسایی سریع مولکولی باسیلوس کواگولانس در محصولات پروبیوتیک است که طبق اطلاعات روی برچسب حاوی این باکتری میباشد. مواد و روشها: با استفاده از سوش استاندارد باسیلوس کواگولانس آزمون PCR بهینه گردید. حد تشخیص و ویژگی آزمون با استفاده از DNA این باکتری بررسی شد. تعداد 7 نمونه محصول پروبیوتیک موجود در بازار ایران جمعآوری و روشهای مختلف استخراج DNAاز این محصولات بهینه و باسیلوس کواگولانس از طریق PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافتهها: آزمونPCR بهینه و محصول Base pair450 (جفت باز) در ژل آگارز 5/1 درصد مشاهده شد، حد تشخیص در این مطالعه 1000 DNA باکتری در آزمون PCR بدست آمد و با هیچ DNA دیگری در آزمون ویژگی تکثیر نگردید. در تمامی محصولات پروبیوتیک ادعا شده حامل باسیلوس کواگولانس، این باکتری مشاهده گردید. نتیجهگیری: با توجه به نتایج حاصل از این پژوهش که وجود باسیلوس کواگولانس در تمام نمونهها مشخص شد، میتوان نتیجه گرفت که PCR روشی سریع و مطمئن جهت شناسایی این میکروارگانیسم در محصولات پروبیوتیک میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
45 - Molecular Identification of Gelatin Origin in Pastilles and Jelly Products Collected from Tehran Markets
N. Kamandi M. Ghobadi Dana M. GhavamiGelatin is a beneficial component in the structure of various foods such as desserts and pastilles. These products are most popular with children because of their visual appeal and bright colors. In this study, 30 samples of jelly products were collected from the Tehran أکثرGelatin is a beneficial component in the structure of various foods such as desserts and pastilles. These products are most popular with children because of their visual appeal and bright colors. In this study, 30 samples of jelly products were collected from the Tehran markets and were tested for the molecular identification of the gelatin source. The gelatin used in the industry is mainly produced from bovine and porcine species. Identification and detection of the species used in the gelatin structure are required from the perspective of consumer confidence in food health safety as well as religious beliefs. A species-specific singleplex PCR reaction targeting 277 bp porcine D-loop regions was used to detect porcine species. It was found that none of the products contained porcine gelatin. Complementary experiments used with 130 bp bovine mitochondrial DNA (mtDNA) to detect bovine species showed that the collected samples, according to the label, contained bovine species DNA. Therefore, this qualitative PCR assay is a useful and effective method for monitoring gelatin species origin in food products and has the ability to identifying the DNA of the porcine in gelatin as a highly processed food product and Halal authentication. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
46 - Molecular Detection of Vibrio spp. in Fish and Shrimp from the Persian Gulf
M. Raissy E. Rahimi R. Azargun M. Moumeni H.R. SohrabiVibrio species are the major seafood-borne bacteria that are frequently associated with the consumption of contaminated sea food. A total of 113 samples including 58 fish and 55 shrimps were studied for the possible contamination with Vibrio species. A biochemical proto أکثرVibrio species are the major seafood-borne bacteria that are frequently associated with the consumption of contaminated sea food. A total of 113 samples including 58 fish and 55 shrimps were studied for the possible contamination with Vibrio species. A biochemical protocol was applied for the identification of the Vibrio isolates and Polymerase Chain Reaction (PCR) was carried out to confirm the strains. The results indicated that 25 samples (22%) were contaminated with Vibrio species. Among Vibrio isolates, Vibrio harveyi was the species most frequently isolated (11.5%), followed by followed by V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginolyticus and V. mimicus. Vibrio cholerae was not detected in the studied samples. The results of this study indicated that fish and shrimp from the Persian Gulf regularly contain pathogens that might affect the public health تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
47 - Use of Real-Time PCR and High-Resolution Melting Analysis for Detection and Discrimination of Salmonella typhimurium and Salmonella enteritidis in Contaminated Raw-Egg Samples
H. Ahari B. Fahimi N. Sheikhi A.A. Anvar S. PaidariIn order to evaluate the efficacy of high-resolution melting (HRM) analysis in the detection and discrimination of S. typhimurium and S. enteritidis, this study was conducted on 30 samples of raw eggs, where 14 treatments were employed: 4 groups of samples contaminated أکثرIn order to evaluate the efficacy of high-resolution melting (HRM) analysis in the detection and discrimination of S. typhimurium and S. enteritidis, this study was conducted on 30 samples of raw eggs, where 14 treatments were employed: 4 groups of samples contaminated with Salmonella typhimurium, 4 with S. enteritidis, 4 with a mixture of both, as well as 2 control groups. DNA was extracted from the contaminated samples and used for preparation of a target DNA sequence using an invA gene-specific primer pair. RT-PCR identified and detected Salmonella in the contaminated egg samples within less than 24 hours, and HRM analysis proved that this method is suitable for the discrimination of the S. enteritidis and S. typhimurium species. The sensitivity of this method was equal to 200 Salmonella cells per microliter, and HRM analysis could distinguish S. enteritidis and S. typhimurium and their combination with high consistency (R2 > 0.993). تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
48 - Isolation and Identification of L. plantarum from Iranian Fermented Cucumbers by Conventional Culture and PCR Methods
Z. Nilchian E. Rahimi S.H. Razavi M. Momeni ShahrakiThe species of Lactobacillus are widely present in many natural environments that areimportant in fermented processes. Among these species some belong to the lactic acid bacteria group that areuseful in fermented food. One of the species of lactobacilli group such as L. أکثرThe species of Lactobacillus are widely present in many natural environments that areimportant in fermented processes. Among these species some belong to the lactic acid bacteria group that areuseful in fermented food. One of the species of lactobacilli group such as L. plantarum provides health benefits,but their identification is one of the main issue. In order to proceed with this project, conventional culturemethod and PCR primers have been employed to identify L. plantarum. According to the conventional culturemethod, colonies were Gram-positive and catalase-negative in the form of coccoid-rod, short, long, thin and fine.Under the PCR conditions, L. plantarum and L. brevis strains were detected in only one sample at 250C. Inchemical technique, L. plantarum was separated from L. brevis in four cultures medium with 4-7% NaCl whereL. brevis became inactive. The isolated L. plantarum that was used in the fermented cucumbers prevented thegrowth and development of pathogenic organisms. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
49 - جداسازی و شناسایی مولکولی باکتریهای تجزیه‌کننده ی تیوسیانات از رسوبات دریاچه مهارلو استان فارس
فهیمه مطلبی فرشید کفیل زادهزمینه و هدف:تیوسیانات ترکیبی یک کربنه معدنی وعضو مهمی از خانواده سیانید میباشد. تیوسیاناتاز منابع طبیعی و صنعتی مشتق شده ودر حجم وسیعی توسط صنایع استخراج فلزات و کک تولید می شود. این ترکیب سمی باعث بروز اثرات نامطلوبی در موجودات زنده می شود. با توجه به وجود این ترکیب س أکثرزمینه و هدف:تیوسیانات ترکیبی یک کربنه معدنی وعضو مهمی از خانواده سیانید میباشد. تیوسیاناتاز منابع طبیعی و صنعتی مشتق شده ودر حجم وسیعی توسط صنایع استخراج فلزات و کک تولید می شود. این ترکیب سمی باعث بروز اثرات نامطلوبی در موجودات زنده می شود. با توجه به وجود این ترکیب سمی در دریاچه مهارلو، این پژوهش باهدف جداسازی و شناسایی باکتری های تجزیه کننده تیوسیانات از رسوبات دریاچه مهارلو صورت گرفت. روش بررسی:نمونه برداری از پنج ایستگاه و طی دو فصل، در تابستان 94 و بهار 95 انجام گردید. جداسازی باکتری های تجزیه کننده تیوسیانات در محیط M9 انجام شد.پس از شناسایی فیزیولوژی و بیوشیمیایی باکتری های تجزیه کننده تیوسیانات، از تست های حداقل غلظت بازدارندگی،سینتیک رشد و میزان تجزیه تیوسیانات توسط باکتری های مقاوم استفادهشد. درپایان، باکتری های مقاوم با روش PCRبراساس ژن S rRNA16، شناسایی شدند. یافته ها: نتایج نشان داد که 9 گونه باکتریایی توانایی تجزیه تیوسیانات در دریاچه مهارلو را داشتند. در این میان دو گونه باکتریایی Bacillus sphaericus و Micrococcus luteus دارای بالاترین پتانسیل درحذف و تجزیه تیوسیانات بوده و بالاترین مقاومت (50 گرم در لیتر) را نسبت به سایر باکتریها نشان دادند. بیش ترین قدرت تجزیه کنندگی تیوسیانات، مربوط به B. sphaericus(66/66 درصد) وM. luteus (50 درصد) بود که به ترتیب با ارزش شباهت 97 و 92 درصد با سویه هایPlanococcus citreus strain NBRC 15849وBacillus aerius strain 24Kشباهت داشتند. بحث و نتیجه گیری: یافته های تحقیق حاضر نشان داد که دریاچه مهارلو دارای باکتری های قدرت مند در تجزیه تیوسیانات بوده به طوری که B. sphaericus تا 66/66 درصد قادر به تجزیه این ترکیب می باشد. با فراهم نمودن بستر مناسب جهت رشد این باکتری ها می توان از آن ها جهت سمیت زدایی و حذف تیوسیانات از آب های آلوده استفاده کرد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
50 - تشخیص مولکولی<i> لپتوسپیراهای</i> بیماری زا با استفاده از روش PCR بر اساس ژن <i></i> lipl32
فاطمه رحیمی زارچی پژواک خاکی سهیلا مرادی بید هندیلپتوسپیروز یکی از بیماری های مهم قابل انتقال از حیوان به انسان است. LipL32 یکی از مهمترین پروتئین های غشای خارجی لپتوسپیرا است که تنها در سرووارهای بیماری زا وجود دارد و فاکتور مناسبی جهت شناسایی لپتوسپیراهای بیماری زا می باشد. بنابراین هدف از انجام این پژوهش، تشخیص مول أکثرلپتوسپیروز یکی از بیماری های مهم قابل انتقال از حیوان به انسان است. LipL32 یکی از مهمترین پروتئین های غشای خارجی لپتوسپیرا است که تنها در سرووارهای بیماری زا وجود دارد و فاکتور مناسبی جهت شناسایی لپتوسپیراهای بیماری زا می باشد. بنابراین هدف از انجام این پژوهش، تشخیص مولکولی لپتوسپیراهای بیماری زا بر اساس ژن lipL32 می باشد. در این بررسی از سرووارهای بیماری زا و غیر بیماری زای استاندارد لپتوسپیرا استفاده شد. باکتری ها در محیط کشت اختصاصیEMJH کشت داده شدند و DNA ژنومیک آن ها با روش استاندارد فنول کلروفرم ایزوآمیل الکل تخلیص گردید. پرایمر اختصاصی جهت تکثیر ژن lipL32طراحی شد. دمای اتصال (Annealing) برای این پرایمر 61 درجه سانتی گراد، غلظت مناسب پرایمر 10 پیکومول ، میزان حساسیت 4-10 pg/µlو همچنین تعیین ویژگی آن در PCR مورد بررسی قرار گرفت. با توجه به داده های PCR تایید شد که این ژن فقط در سرووارهای بیماری زای لپتوسپیرا حضور دارد و قطعه bp 272 حاصل که نشان دهنده تکثیر ژن lip L32 می باشد، در سرووار غیر بیماری زا مشاهده نگردید. شناسایی روش های سریع تشخیص لپتوسپیراهای بیماری زا پیش از ورود به فاز حاد بیماری بسیار حائز اهمیت می باشد. بنابراین جهت تشخیص لپتوسپیراهای بیماری زا، روش های مولکولی مبتنی بر PCR با استفاده از ژن lipL32که در کوتاه ترین زمان ممکم پاسخی دقیق و قابل اعتماد ارائه می دهند، پیشنهاد می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
51 - ژنوتایپینگ ویروس برونشتی عفونی پرندگان در گله های گوشتی استان اردبیل در سال 2016
سمیرا ذاکری آرش قلیان چی لنگرودی محمد رضا ذولفقاری محمد سلیمانی علی یوسف زاده کلخوران امیر مدیری همدانچکیده ویروس برونشیت عفونی (IBV) عامل بیماری ویروسی حاد تنفسی در طیور همراه با رال‌های تنفسی و سرفه و عطسه میباشد. کرونا ویروس‌ها طیف گسترده‌ای از بیماریهای تنفسی، رودهای، کبدی، عصبی با حدت‌های مختلف در گربه‌ها، سگها، خوک‌ها، جوندگان، گاو، پرندگان و انسان ایجاد می‌کن أکثرچکیده ویروس برونشیت عفونی (IBV) عامل بیماری ویروسی حاد تنفسی در طیور همراه با رال‌های تنفسی و سرفه و عطسه میباشد. کرونا ویروس‌ها طیف گسترده‌ای از بیماریهای تنفسی، رودهای، کبدی، عصبی با حدت‌های مختلف در گربه‌ها، سگها، خوک‌ها، جوندگان، گاو، پرندگان و انسان ایجاد میکنند. ویروس برونشیت عفونی عامل بسیار واگیردار بیماری برونشیت عفونی در طیور میباشد. کرونا ویروس‌ها توانایی نوترکیبی و جهش زیادی دارند. توالی‌یابی ژنS1 برای مطالعات اپیدمیولوژی مولکولی و مشخصات ژنوتیپی ویروس برونشیت عفونی کاربرد دارد. به منظور فراهم شدن درک بهتری از اپیدمیولوژی مولکولی ویروس برونشیت عفونی در ایران جدایههای ژن S1 ویروس برونشیت عفونی طیور که در مزارع گوشتی در استان اردبیل جمعآوری شده بود، در این مطالعه توالی یابی شد. در سال 1395 در محدوده استان اردبیل 30 عدد سواب نای از گلههای گوشتی به صورت تصادفی برای ردیابی و تعیین ژنوتیپ ویروس جمعآوری گردید. سپس RNA آنها با استفاده از کیت تخلیص RNA استخراج گردید. ساخت cDNA با روش RT-PCR صورت گرفت و محصول RT-PCR با روش Nested- PCR با پرایمرهای کد کننده5'UTR، تکثیر شد. این کار جهت شناسایی ویروس برونشیت عفونی صورت گرفت.برای تعیین ژنوتیپ نمونههای مثبت (توالی یابی ژن گلیکوپروتئین S) با ارسال به شرکت کره‌ای انجام شد. 70 درصد نمونههای نایی مثبت بودند که در ادامه شناسایی سروتیپ‌ها بر اساس پروتکل‌های موجود انجام شد. در این مطالعه مراحل استخراج و RT-PCR بر روی نمونههای مشکوک مثبت چندین بار تکرار شد. میتوان نتیجه گرفت که کرونا ویروس در بین گلههای گوشتی کشور در حال چرخش است. در طول مراحل آزمایش از دو کنترل منفی شامل کنترل منفی استخراج و کنترل منفی واکنش RT-PCR استفاده گردید. آنالیز ژنتیکی بر اساس توالی نوکلئوتیدی بخش بسیار تغییر پذیر ژن S1 نشان داد که میزان کلی عفونت 65-70% بود و این ژنوتیپ‌ها با این درصد مشخص شد: (واریانت2 (IS/1494), 52.3%، 793/B 33.5% , MASS 9.5%، QX 4.7% ) تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
52 - مطالعه فنوتیپی و ژنوتیپی جدایههای اورنیتوباکتریوم راینوتراکئال در ماکیان صنعتی استان آذربایجان شرقی، ایران
مهدی ازدیادی محمد کریم خسروپناه منصور بنانی رحیم قدیمی پور کامبیز داوریاورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) ارگانیسم مرتبط با بیماری های تنفسی، کاهش تولید تخم ، کاهش رشد و مرگ و میر در مرغ ها و بوقلمون ها است. هدف پژوهش حاضر جداسازی، شناسایی، تعیین الگوی مقاومت دارویی و انگشت نگاری مولکولی این باکتری در گله های ماکیان صنعتی استان آذربایجان أکثراورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) ارگانیسم مرتبط با بیماری های تنفسی، کاهش تولید تخم ، کاهش رشد و مرگ و میر در مرغ ها و بوقلمون ها است. هدف پژوهش حاضر جداسازی، شناسایی، تعیین الگوی مقاومت دارویی و انگشت نگاری مولکولی این باکتری در گله های ماکیان صنعتی استان آذربایجان شرقی -شمال غرب ایران- با استفاده از روش مرسوم باکتریایی و نیز تکنیک واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) بود. بدین منظور تعداد 400 نمونه سواب نایی از 33 گله مرغ گوشتی در حال کشتار و هفت گله مرغ تخمگذار جمع آوری گردید. بر اساس نتایج این مطالعه، از 330 نمونه حاصل از گله های مرغ گوشتی، 14 جدایه (4/2 درصد) از سواب های نای پنج گله (15/1 درصد) به عنوان اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال شناسایی شدند. همچنین یافته های پژوهش جاری مشخص نمود که هیچکدام از گله های مرغ تخمگذار تحت بررسی آلوده به این ارگانیسم نبودند. بر اساس نتایج آزمایش تعیین الگوی مقاومت دارویی جدایه ها به روش انتشار دیسک، بالاترین حساسیت دارویی به ترتیب نسبت به پنی سیلین (85/7 درصد)، تتراسایکلین (71/4 درصد) و داکسی سایکلین (57/1 درصد) بوده و بیشترین مقاومت دارویی نیز مقابل اریترومایسین (71/4 درصد) و نئومایسین (0/50 درصد) مشاهده گردید. بر طبق داده های انگشت نگاری جدایه ها با تکنیک تکثیر مناطق بین ژنی تکراری حفاظت شده انتروباکتریایی (ERIC-PCR)، این جدایه ها در دو الگوی ژنتیکی E1 و E2 تیپ بندی شدند که اغلب جدایه ها (13=n،د92/8 درصد) در الگوی E1 قرار داشتند. تمام سویه های ORT جدا شده در این مطالعه از گله های مرغ گوشتی بودند که نشان دهنده میزان بالای آلودگی این پرندگان نسبت به ماکیان تخمگذار صنعتی تحت بررسی در استان آذربایجان شرقی است (05/0 > P). همچنین نتایج ما نشان می دهد که اغلب جدایه های ORT حاصل از ماکیان صنعتی مناطق شمال غرب ایران از نظر ژنتیکی بسیار شبیه به هم بوده و به یک پروفایل ژنتیکی خاص وابسته می باشند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
53 - اثر منبع کاتیونی و اختلاف آنیون - کاتیون جیره گاو شیری در اوایل شیردهی بر قابلیت هضم شکمبه‌ای، تولید گاز متان و جمعیت میکروبی شکمبه به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز رقابتی
یاسر فیض دار برآبادی سید احسان غیاثی محمد باقر منتظر تربتیهدف از انجام این پژوهش برررسی اثر منبع و توازن آنیون -کاتیون جیره (DCAD) گاوهای شیری بر جمعیت پروتوزوآها، متانوژن‌ها، غلظت نیتروژن آمونیاکی، گاز متان و قابلیت هضم ماده خشک در شرایط آزمایشگاهی بود. برای شمارش جمعیت پروتوزوآها و متانوژن‌ها از تکنیک واکنش زنجیرهای پلیمراز أکثرهدف از انجام این پژوهش برررسی اثر منبع و توازن آنیون -کاتیون جیره (DCAD) گاوهای شیری بر جمعیت پروتوزوآها، متانوژن‌ها، غلظت نیتروژن آمونیاکی، گاز متان و قابلیت هضم ماده خشک در شرایط آزمایشگاهی بود. برای شمارش جمعیت پروتوزوآها و متانوژن‌ها از تکنیک واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR)رقابتی استفاده شد. این طرح برای گاو شیری در اوایل شیردهی با میانگین580 کیلوگرم وزن بدن، سن 25 ماهگی و تولید روزانه 35 کیلوگرم در قالب آزمایش فاکتوریل 2×2×3 انجام شد. عوامل مؤثرها شامل DCAD (meq/kgDM 150+، 250+ و 350+)، منابع پتاسیمی (کربنات پتاسیم بدون آب(KC) و کربنات پتاسیم سسکوئی هیدرات (KCS)) و منابع منیزیمی (اکسید منیزیم (MO) و کربنات منیزیم (MC)) بود. اثر تیمارهای آزمایشی بر غلظت نیتروژن آمونیاکی معنیدار نبود. در همه تیمارها افزایش DCAD باعث کاهش غلظت نیتروژن آمونیاکی در شکمبه شد. اثر تیمارهای آزمایشی بر تولید گاز متان، قابلیت هضم ماده خشک، جمعیت پروتوزوآها و متانوژن‌ها معنیدار بود. نتایج پژوهش حاضر نشان داد که تیمار حاوی DCAD 250+ میلی‌اکی‌والان تأمین شده از دومنبع کربنات پتاسیم سسکوئی هیدرات و کربنات منیزیم باعث کاهش جمعیت پروتوزوآ، متانوژن‌ها، تولید متان و افزایش قابلیت هضم ماده خشک می شود. با توجه به اینکه اختلاف معنیدار بین DCAD 250+ و 350+ مشاهده نشد، بنظر می‌رسد که منابع کربنات پتاسیم سسکوئی هیدرات و کربنات منیزیم به همراه سطح تعادل آنیون – کاتیون جیره 250+ میلی‌اکی‌والان از طریق بهبود شرایط بافری شکمبه باعث بهبود پارامترهای تخمیر شکمبه‌ای میشود. بنابراین این دو منبع احتمالاً مکمل های مناسبی در جیره گاوهای شیری هستند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
54 - تفکیک و تایپینگ مولکولی گونه های بروسلا جداسازی شده از سقط جنین دام های اهلی در شمال و شرق ایران
علی نعمتی غلامرضا هاشمی تبار مهرناز رادبیماری بروسلوز یا تب مالت، همواره از دو بعد اقتصادی و بهداشتی حائز اهمیت بوده به نحوی که هر ساله خسارت های اقتصادی فراوانی را برای سرمایه دامی کشور به بار می‌آورد. از سوی دیگر از آنجایی که بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام می باشد، اهمیت موضوع از نظر بهداشت عمومی أکثربیماری بروسلوز یا تب مالت، همواره از دو بعد اقتصادی و بهداشتی حائز اهمیت بوده به نحوی که هر ساله خسارت های اقتصادی فراوانی را برای سرمایه دامی کشور به بار می‌آورد. از سوی دیگر از آنجایی که بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام می باشد، اهمیت موضوع از نظر بهداشت عمومی دو چندان میشود. بنابراین لازم است با انجام مطالعات اپیدمیولوژیک به عنوان گام اول، به سمت شناسایی عامل بیماری و سپس کنترل و کاهش موارد ابتلا به آن در کشور قدم برداشت. در این مطالعه، 170 نمونه سقط جنین مربوط به گوسفند و گاو در طی سال های 94 تا 97 از استان های گلستان و خراسان رضوی جمع آوری گردید. پس از کالبد شکافی، از ارگان های مختلف جنین‌ها در محیط کلمبیا آگار و مک کانکی کشت داده شد و با استفاده از رنگ آمیزی گرم و تست های استاندارد بیوشیمیایی، تمام نمونه ها مورد بررسی قرار گرفتند. در مجموع، 60 ایزوله بروسلا شناسایی گردید. در نهایت با استفاده از تکنیک های مولکولی Bruce-ladder Multiplex PCR و ERIC-PCR، تفکیک گونه و تایپینگ مولکولی ایزوله های جداسازی شده انجام پذیرفت. از میان ۶۰ ایزوله شناسایی شده، ۵۹ گونه مربوط به بروسلا ملی تنسیس و 1 گونه مربوط به بروسلا آبورتوس بود. تمامی ایزوله های شناسایی شده، علیرغم مناطق جغرافیایی متفاوت، دارای الگوی ژنتیکی مشابهی بودند. تکنیکBruce-ladder Multiplex PCR به عنوان یک روش سریع، دقیق و ایمن جهت شناسایی بروسلا در سطح جنس و گونه بسیار موثر است. با وجود اینکه تکنیک ERIC-PCR در بسیاری از مطالعات روش قدرتمندی در تمایز مولکولی باکتری ها بشمار می رود، در صورت امکان بهتر است که برای تایید نتایج این مطالعه از تکنیک های دقیق تر و با قدرت تفکیک بالا همچون MLVA و MLST نیز استفاده گردد. کلمات کلیدی: بروسلا، دام های اهلی، Bruce-ladder Multiplex PCR، ERIC-PCR. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
55 - بررسی آلودگی کبدهای گوسفند و گاو کشتار شده در کشتارگاه های استان البرز به کلستریدیوم نوای به روش های کشت بیوشیمیایی و PCR
لیدا عبدالمحمدی خیاو علی رضایی کلوانی علی حق روستاچکیده:کلستریدیوم نوای تیپ B عامل بیماری قانقاریای عفونی کبد می باشد. اسپور باکتری همراه غذا وارد بدن شده و از طریق سیستم لنفاوی وارد کبد می شود. به دلیل شرایط هیپوکسیک کبد زمینه برای تبدیل به فرم رویشی و تکثیر باکتری فراهم شده باکتری مقدار زیادی توکسین تولید نموده که در أکثرچکیده:کلستریدیوم نوای تیپ B عامل بیماری قانقاریای عفونی کبد می باشد. اسپور باکتری همراه غذا وارد بدن شده و از طریق سیستم لنفاوی وارد کبد می شود. به دلیل شرایط هیپوکسیک کبد زمینه برای تبدیل به فرم رویشی و تکثیر باکتری فراهم شده باکتری مقدار زیادی توکسین تولید نموده که در نهایت منجر به مرگ دام می شود. بنابراین تشخیص توکسین و جداسازی باکتری از دستگاه گوارش دام به خصوص کبد جهت تشخیص این بیماری استفاده می شود. به منظور کنترل بیماری بررسی فراوانی میزان آلودگی ضروری می باشد. هدف از این مطالعه بررسی تعیین شیوع کلستریدیوم نوای در کشتارگاه های استان البرز می باشد. در این تحقیق تعداد ۳۸۶ نمونه کبد از کشتارگاه ها اخذ و پس از آزمایشات باکتریولوژی (کشت در محیط اختصاصی حاوی خون اسب و محیط کشت اختصاصی مایع ، تست حرکت و رنگ آمیزی گرم) و بیوشیمیایی (تخمیر قندها، لیسیتیناز، لیپاز، ژلاتیناز، اندل، هضم شیر و کاتالاز) نمونه ها توسط PCR تأیید نهایی شدند. برای این منظور از پرایمر طراحی شده از توکسین آلفا این باکتری استفاده گردید.نتایج این بررسی نشان داد که میزان آلودگی به این باکتری در کشتارگاه ها ۳۷ مورد (۵/۹٪) بود که ۳۳ مورد (۱۸/۸۹٪) آن آلودگی همزمان به کلستریدیوم نوای و فاسیولا داشتند و تنها در ۴ مورد بدون آلودگی به فاسیولا این باکتری جداسازی و تشخیص داده شد . با توجه به خسارات اقتصادی ناشی از این بیماری به صنعت دامپروی لازم است واکسیناسیون به موقع صورت گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
56 - جستجوی ژنومی بروسلا ملی تنسیس، سالمونلا آبورتوس اویس، کلامیدوفیلا آبورتوس و کوکسیلا بورنتی در سقطجنین گوسفندان با یک روش طراحی شده PCR چندگانه
محمدرضا محزونیه محمود احسانی عزیزالله ابراهیمی فاطمه کبیری اعظم مختاریواکنش زنجیره‎ای پلیمراز چندگانه (PCR Multiplex) یک روش پیشرفته از تکنیک‌های تشخیص مولکولی است که امکان شناسایی همزمان چند عامل بیماریزا را در یک نمونه فراهم می کند. مزایای استفاده از روش واکنش زنجیره‎ای پلیمراز چندگانه در مقایسه با نتایج تشخیص به دست آمده با روش أکثرواکنش زنجیره‎ای پلیمراز چندگانه (PCR Multiplex) یک روش پیشرفته از تکنیک‌های تشخیص مولکولی است که امکان شناسایی همزمان چند عامل بیماریزا را در یک نمونه فراهم می کند. مزایای استفاده از روش واکنش زنجیره‎ای پلیمراز چندگانه در مقایسه با نتایج تشخیص به دست آمده با روشهای متداول دیگر توسط محققان مختلف بررسی شده است. در این پژوهش از PCR چندگانه طراحی شده در آزمایشگاه بهمنظور شناسایی همزمان عوامل مهم سقطجنین گوسفندان شامل: Brucella melitensis ، Salmonella abortusovis ، Chlamydophila abortusوCoxiella burnetii ، استفاده شد. برای این منظور تعداد 98 نمونه محتویات شیردان جنینهای سقط شده از سه منطقه جغرافیایی ایران شامل استانهای اصفهان، چهارمحال و بختیاری و خراسان رضوی، مورد آزمایش قرار گرفت. میزان آلودگی در نمونههای بررسی‌شده، 15/3 درصد Brucella melitensis، 11/2 درصد Salmonella abortusovis، 7/1 درصد Chlamydophila abortus و صفر درصد Coxiella burnetii بود. در کل نتایج این پژوهش نشان می‌دهد که Brucella melitensis ، Salmonella abortusovisوChlamydophila abortusاز مهمترین عوامل سقط جنین نشخوارکنندگان کوچک بوده و از آزمون PCR چندگانه، به‌خوبی میتوان برای تشخیص عوامل سقطجنین در گوسفند و بز استفاده کرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
57 - تشخیص ویروس آکابان همراه با نشانه‌های بالینی و کالبدگشایی آن در گوساله‌های شیرخوار در اطراف تهران
پیمان دهقان رحیم آبادی افشین رئوفی مرتضی گرجی دوز سید حسین مرجانمهر مجید مسعودی فردویروس آکابان در خانواده Peribunyaviridae، راسته Bunyavirales قرار دارد. این ویروس توسط پشه جنس کولیکوئیدس به دامهای نشخوارکننده منتقل شده و با عبور از سد جفت قادر به ایجاد نواقص مادرزادی در جنین است. ضایعات ایجاد شده بسته به سن جنین از سقط و مومیایی شدن تا بروز هیدرانن أکثرویروس آکابان در خانواده Peribunyaviridae، راسته Bunyavirales قرار دارد. این ویروس توسط پشه جنس کولیکوئیدس به دامهای نشخوارکننده منتقل شده و با عبور از سد جفت قادر به ایجاد نواقص مادرزادی در جنین است. ضایعات ایجاد شده بسته به سن جنین از سقط و مومیایی شدن تا بروز هیدراننسفالی و آرتروگریپوزیس میتواند متغیر باشد. در یکی از دامداری‌های شیری صنعتی اطراف تهران در سال 1395 تعداد 33 راس گوساله نژاد هلشتاین با نشانه‌های عصبی و آرتروگریپوزیس (18 راس مبتلا به نشانه‌های عصبی و 15 راس مبتلا به آرتروگریپوزیس) متولد شدند. در همه مبتلایان کوری، افسردگی، کودنی، عدم درک از محیط پیرامون، ناتوانی در مکیدن سرپستانک، عدم یادگیری و آرتروگریپوزیس نشانه بالینی متداول بود. کم خونی، لکوسیتوز و نوتروفیلی سه یافته مشخص خونشناسی در گوساله‌های مبتلا به هیدراننسفالی بود. در کالبدگشایی جمجمه گوساله‌های مبتلا عدم تشکیل نیمکره‌های مغز و جایگزین شدن آنها توسط کیسه‌های مملو از مایع مغزی-نخاعی دیده می‌شد. ساقه مغز و مخچه به صورت طبیعی در همه مبتلایان شکل گرفته بود. بررسی باقیمانده بافت مغز به روش RT-PCR نشان داد که ضایعات ایجاد شده نتیجه آلودگی گوساله‌ها با ویروس آکابان در دوران جنینی است. یافته‌های حاضر توصیف بالینی و کالبدگشایی بیماری آکابان در گوساله‌های شیرخوار در ایران است که نقش ویروس آکابان در ایجاد آن به اثبات رسید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
58 - بررسی تنوع ژنتیکی جدایه های سودوموناس آئروژینوزا بدست آمده از موارد ورم پستان گاو در شهر تبریز
سامان مهدویباکتری پســودوموناس آئروژینوزا از مهمترین پاتوژنهای فرصت‌طلب بوده که موجب بروز ورم پســتان‌های تحت بالینی مقاوم به درمان در گاوهای شیری میباشد. بررسی الگوی ژنتیکی ایزولهها، در مدیریت عفونتهای ناشی از این باکتری ضروری است. هدف از این مطالعه، بررسی تنوع ژنتیکی جدایه ه أکثرباکتری پســودوموناس آئروژینوزا از مهمترین پاتوژنهای فرصت‌طلب بوده که موجب بروز ورم پســتان‌های تحت بالینی مقاوم به درمان در گاوهای شیری میباشد. بررسی الگوی ژنتیکی ایزولهها، در مدیریت عفونتهای ناشی از این باکتری ضروری است. هدف از این مطالعه، بررسی تنوع ژنتیکی جدایه های سودوموناس آئروژینوزا بدست آمده از موارد ورم پستان گاو در شهر تبریز بود. در این مطالعه توصیفی مقطعی، از 200 راس گاو مبتلا به ورم پستان در گاوداریهای شهر تبریز نمونه‌گیری انجام شد. پس از انجام آزمایشات بیوشیمیایی اختصاصی و رنگ آمیزی، موارد مثبت جهت آزمایشات مولکولی مورد استفاده قرار گرفتند. از مجموع 200 مورد گاو مبتلا به ورم پستان، 90 ایزوله (%45) پسودوموناس آئروژینوزا شناسایی شد. نتایج حاصل از RAPD-PCR نشان داد که 80 ایزوله (9/%88) از نمونههای تحت مطالعه، با هر دو پرایمر مورد استفاده، قابل تایپ بودند و 10 ایزوله (%10) با پرایمرهای مورد استفاده تایپ نشدند. ایزوله‌های تایپ شده در 14گروه مجزا قرار داشتند و هر کدام حاوی چندین نمونه پسودوموناس آئروژینوزا بودند. گروه‌های I و VII بیشترین ایزوله را داشتند و گروه‌های IX، X و XII دارای کمترین ایزوله بودند. نتایج نشان داد که RAPD-PCR، روش ابزار ژنوتیپ‌بندی با قدرت افتراق بالا در مطالعات اپیدمیولوژی و پلیمورفیسم سویههای پسودوموناس آئروژینوزا میباشد. با توجه به داده‌های این مطالعه، کنترل منابع عفونت در ورم پستان ناشی از این باکتری، جهت کنترل و پیشگیری از انتقال این باکتری تأکید میشود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
59 - بررسی مولکولی ژن فلاژلین flaB2 در سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا
پژواک خاکی مجید اسمعیلی زاد مجید تبیانیان سهیلا مرادی سپیده حق نظریچکیده: لپتوسپیروزیس یک بیماری عفونی مشترک بین انسان و حیوانات می باشد که توسط لپتوسپیراهای بیماریزا ایجاد می گردد. FLaB2 پروتئین تاژک پری پلاسمی می باشد که در طی عفونت در میزبان بیان می شوند. این پروتئین در بین تمام سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا حفظ شده است. هدف از این أکثرچکیده: لپتوسپیروزیس یک بیماری عفونی مشترک بین انسان و حیوانات می باشد که توسط لپتوسپیراهای بیماریزا ایجاد می گردد. FLaB2 پروتئین تاژک پری پلاسمی می باشد که در طی عفونت در میزبان بیان می شوند. این پروتئین در بین تمام سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا حفظ شده است. هدف از این تحقیق بررسی مولکولی ژن کد کننده فلاژلین flaB2 به روش PCR در سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا در ایران می باشد. در این تحقیق 20 سرووار بیماریزا و دو سرووار غیر بیماریزای لپتوسپیرا استفاده گردید. 22 سرووار فوق در محیط کشت اختصاصی EMJH کشت داده شدند و DNA ژنومیک با استفاده از روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص گردید. جهت تکثیر ژن flaB2 پرایمرهای اختصاصی طراحی و حساسیت و ویژگی آن در PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج PCR روی ژن flaB2 با تولید قطعه ای به طول 1050 جفت باز نشان داد که در همه 20 سرووار بیماری زای لپتوسپیرا ژن flaB2 وجود دارد، این ژن در لپتوسپیراهای غیربیماریزای L. biflexa مشاهده نگردید. یافته ها نشان می دهد که ژن کدکننده flaB2 فقط در سرووارهای بیماری زا وجود دارد. بنابراین شناسایی مولکولی ژن flaB2 برای تشخیص سرووارهای بیماری زا از غیربیماری زا لپتوسپیرا از اهمیت بالایی برخوردار است. کلمات کلیدی : لپتوسپیروزیس، لپتوسپیرا ، سرووار، flaB2، PCR تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
60 - جداسازی، شناسایی مولکولی، ردیابی ژن magA و ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های کلبسیلا در تلفات جنینی شترمرغ در اصفهان
مجید غلامی آهنگران امیرحسین آقاخانی لنبانی راضیه فرهنگ اصفهانی آسیه احمدیتلفات جنینی در شترمرغ می تواند باعث کاهش سودآوری صنعت پرورش شترمرغ شود. عوامل زیادی در کاهش جوجه درآوری نقش دارند. در این میان عوامل عفونی از اهمیت ویژه ای برخوردارند. در بین عوامل عفونی نقش کلبسیلا در تلفات جنینی و به ویژه در شترمرغ کمتر مورد بررسی قرار گرفته است. لذا أکثرتلفات جنینی در شترمرغ می تواند باعث کاهش سودآوری صنعت پرورش شترمرغ شود. عوامل زیادی در کاهش جوجه درآوری نقش دارند. در این میان عوامل عفونی از اهمیت ویژه ای برخوردارند. در بین عوامل عفونی نقش کلبسیلا در تلفات جنینی و به ویژه در شترمرغ کمتر مورد بررسی قرار گرفته است. لذا در مطالعه اخیر 200 نمونه سواب از جنین های تلف شده شترمرغ جمع آوری شد و با روشهای میکروبیولوژی و بیوشیمیایی به شناسایی موارد آلوده به کلبسیلا پرداخته شد. سپس با روش PCR با پرایمرهای اختصاصی به شناسایی و تعیین گونه کلبسیلا و ژن حدت magA پرداخته شد. نتایج نشان داد از مجموع 200 نمونه سوآب جمع آوری شده 60 مورد آلوده به عوامل عفونی باکتری های گرم منفی (30%) بودند و از مجموع موارد آلوده به باکتری های گرم منفی 20 مورد آلوده به کلبسیلا تشخیص داده شد (33%). از مجموع موارد آلوده به کلبسیلا 15 مورد گونه نومونیا (75%) و 5 مورد گونه اکسی توکا (25%) شناسایی شد. هیچ کدام از سویه های کلبسیلا حامل ژن magA نبودند. در این مطالعه سویه های کلبسیلا بیشترین حساسیت را نسبت به ایمیپنم (100%) و بیشترین مقاومت را نسبت به انروفلوکساسین (70%) نشان دادند. بطور کلی، با توجه به آلودگی جنین های تلف شده به کلبسیلا به نظر می رسد این باکتری سهم 10 درصدی در تلفات جنینی شترمرغ داشته باشد لذا جلوگیری از آلودگی های سطحی و رعایت اصول ضدعفونی در جوجه کشی شترمرغ در کاهش تلفات جنینی ناشی از آلودگی های سطحی و از جمله کلبسیلا نقش عمده ای دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
61 - بررسی آلودگی گلههای طیور گوشتی در آخر دوره پرورش به کمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای
عنایت بریزی سید شهرام شکر فروش سعید حسین زاده مصطفی عبدالهیکمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای به عنوان عامل اصلی آنتریت باکتریایی انسان در تمام دنیا شناخته شده اند. معمولاً پرندگان نقش معنی داری را در عفونت کمپیلوباکتریایی انسان بازی می کنند. شیوع بالای کمپیلوباکتر در گله های طیور در مرحله پرورش، سبب ایجاد آلودگی متقاطع در ط أکثرکمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای به عنوان عامل اصلی آنتریت باکتریایی انسان در تمام دنیا شناخته شده اند. معمولاً پرندگان نقش معنی داری را در عفونت کمپیلوباکتریایی انسان بازی می کنند. شیوع بالای کمپیلوباکتر در گله های طیور در مرحله پرورش، سبب ایجاد آلودگی متقاطع در طی کشتار و فرآوری گوشت می گردد. در این بررسی میزان آلودگی طیور گوشتی شهرستان شیراز در پایان دوره پرورش به کمپیلوباکتر با روش کشت مستقیم و غنی سازی قبل از کشت صورت گرفت. 100 مرغداری شهرستان شیراز انتخاب و با مراجعه به کشتارگاه ، از هر مرغداری 21 لاشه انتخاب و سیکوم آن ها برداشته شد. محتویات هر 7 سیکوم با هم مخلوط و پس از آماده سازی به دو صورت مستقیم در محیط آگار انتخابی و غنی سازی در محیط براث قبل از کشت در محیط آگار کشت شدند. جدایه ها با PCR تایید شدند. در آزمایش کشت مستقیم 7/53% نمونه ها (70% مرغداری ها) و در آزمایش غنی سازی در براث و کشت در محیط آگار، 0/60% نمونه ها (76% مرغداری ها) مثبت تشخیص داده شدند. میزان آلودگی به کمپیلوباکتر ژژونی 3/31% تا 0/35% و کمپیلوباکتر کولای 7/36% تا 0/40% بود. میزان جدا سازی کمپیلو باکتر به وسیله کشت در محیط انتخابی پس از غنی سازی در محیط براث نسبت به کشت مستقیم افزایش 3/6% را نشان داد که تاثیر آماری معنی داری داشت. بررسی حاضر نشان داد که آلودگی گله های طیور بسیار زیاد است و به منظور کنترل آلودگی، شناخت ریسک فاکتورهای ایجاد آلودگی وکنترل آن ها ضروری میباشد و برای کنترل آلودگی انسان، علاوه بر رعایت موارد فوق، رعایت بهداشت در کشتار گاه ها مد نظر قرار گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
62 - جداسازی و شناسایی مولکولی گونههای آسپرژیلوس خوراک دام
سمیرا رنجبر راظیه نظری میترا نوریبرخی گونههای جنس آسپرژیلوس مولدین بالقوه آفلاتوکسین میباشند که مایکوتوکسینی با اثرات کارسینوژنیک و تراتوژنیک است. آلودگی خوراک دام با گونههای آسپرژیلوس سبب تولید آفلاتوکسین، انتقال آن به شیر و فراورده‌های لبنی و اختلال در سلامت دام، شیر و افراد مصرف کننده آن میگردد. أکثربرخی گونههای جنس آسپرژیلوس مولدین بالقوه آفلاتوکسین میباشند که مایکوتوکسینی با اثرات کارسینوژنیک و تراتوژنیک است. آلودگی خوراک دام با گونههای آسپرژیلوس سبب تولید آفلاتوکسین، انتقال آن به شیر و فراورده‌های لبنی و اختلال در سلامت دام، شیر و افراد مصرف کننده آن میگردد. در این تحقیق ترکیبات خوراک سالانه مورد استفاده در ده دامداری شهر اراک در سالهای 1388 و 1389 بـررسی گردید. نتایج نشان داد بیشترین مواد تشکیل دهنده خوراک دام شـامل ذرت، کنجاله پنبه دانه و کلزا، مکمل‌های غذایی، جو، سبوس گندم، نان خشـک، پـودر چـربـی و یونجه بوده است. پس ازجداسازی و کشت در محیط اختصاصی ،آسپرژیلوسهای جدا شده از خوراک دام با روش میکروسکوپی و مـاکـروسکـوپـی مـورد بـررسـی قـرار گـرفتنـد. جهـت شنـاسـایـی مولکولی آسپرژیلوسهای جدا شده از روش PCR استفاده شد. جهت شناسایی گونه‌ها قطعه ژنی ITS1-5.8S-ITSدرون کمپلکس ژنی DNA ریبوزومی تعیین تـوالـی و در Gen Bank مـورد بـررسـی قـرار گرفت. نتایج نشان داد که در دامـداری‌هـای شهـر اراک خـوراک دام بـا دو گـونـه آسپـرژیلـوس فلاووس و آسـپـرژیلـوس کلاواتوس آلوده بوده است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
63 - خصوصیات پاسخ‌های ایمنی القاء شده ناشی از واکسن زنده تخفیف حدت یافته آبله بزی سویه گرگان بر علیه بیماری لمپی اسکین در گاو
رضا نوریان ناهیده افضل آهنگران حمید رضا ورشوی عباس آزادمهرویروس های بیماری لمپی اسکین، آبله بزی وآبله گوسفندی از اعضاء جنس کاپری پاکس ویروس و از خانواده پاکس ویریده هستند. این ویروس ها قرابت ژنتیکی بسیار زیادی دارند. بنابراین استفاده از واکسن های حاوی سوش های کاپری پاکس ویروس مشتق شده از بز و گوسفند برای کنترل بیماری لمپی اسکی أکثرویروس های بیماری لمپی اسکین، آبله بزی وآبله گوسفندی از اعضاء جنس کاپری پاکس ویروس و از خانواده پاکس ویریده هستند. این ویروس ها قرابت ژنتیکی بسیار زیادی دارند. بنابراین استفاده از واکسن های حاوی سوش های کاپری پاکس ویروس مشتق شده از بز و گوسفند برای کنترل بیماری لمپی اسکین می تواند مفید باشد. هدف از این مطالعه ارزیابی خصوصیات پاسخ های ایمنی القاء شده ناشی از واکسن آبله بزی بر علیه بیماری لمپی اسکین در گاو میباشد. گوساله‌ها از زمان تزریق واکسن تا 5 هفته بعد از آن از نظر ظهور تب و علایم بالینی بطور روزانه مورد معاینه قرار گرفتند. پاسخ های ایمنی هومورال توسط تست خنثی‌سازی سرم و پاسخ های ایمنی سلولی توسط تستهای MTT Real-time PCR, و ELISA مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که در گوساله های واکسینه شده، تبو تورم موضعی در محل تزریق در مقایسه با گروه کنترل مشاهده شد. در ارزیابی پاسخ ایمنی هومورال افزایش معنی داری در میزان تیتر آنتی‌بادی اختصاصی در گروه واکسینه در مقایسه با گروه کنترل مشاهده شد، بطوریکه این میزان در روز 35 بعد از واکسیناسیون دارای اختلاف معنی داری نسبت به سایر روزها بود (05/0P<). در ارزیابی پاسخ ایمنی سلولی، افزایش معنی داری در بیان ژن IFN-γ در روز 7 و ژن IL-4 در روز 21 بعد از واکسیناسیون در مقایسه با روز صفر و گروه کنترل مشاهده شد (05/0P<) و این در حالی بودکه بیشترین میزان تولید سایتوکاین در مایع رویی کشت سلول برای IFN-γ و IL-4 در روز 21 بعد از واکسیناسیون مشاهده شد (05/0P<). همچنین شاخص تکثیر لنفوسیتی درگوساله‌های واکسینه، در روزهای 7، 21 و 35 در مقایسه با روز صفر و گروه کنترل افزایش معنی داری را نشان داد (05/0P<). بر اساس نتایج این مطالعه واکسن آبله بزی سوش گرگان با القاء پاسخ های ایمنی هومورال و سلولی قادر به تولید مقادیر مناسبی از آنتی‌بادی های خنثی کننده و همچنین با افزایش قدرت تکثیر لنفوسیتی و بیان و تولید سایتوکاین ها از ایمنی زایی مناسبی جهت استفاده در واکسیناسیون در برابر LSD برخوردار است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
64 - گزارش کریپتوسپوریدیوم آندرسونی از گوسفندان تهران بر مبنای تکثیر ژن HSP70
عبدالحسین دلیمی فرید تحویلدار بیدرونی فاطمه غفاری فرکریپتوسپوریدیوزیس از عفونتهای انگلی شایع در گوسفندان بشمار می‌آید. هدف از انجام مطالعه حاضر تعیین گونههای کریپتوسپوریدیوم شایع در گوسفندان تهران بر مبنای ژن HSP70 با استفاده روش Nested PCR-RFLP است. در مرحله اول تعداد 1485 نمونه مدفوع از گوسفندان استان تهران جمع آوری أکثرکریپتوسپوریدیوزیس از عفونتهای انگلی شایع در گوسفندان بشمار می‌آید. هدف از انجام مطالعه حاضر تعیین گونههای کریپتوسپوریدیوم شایع در گوسفندان تهران بر مبنای ژن HSP70 با استفاده روش Nested PCR-RFLP است. در مرحله اول تعداد 1485 نمونه مدفوع از گوسفندان استان تهران جمع آوری شد سپس نمونهها با روش اسید فاست تغییر یافته رنگ آمیزی گردیدند. در مرحله دوم DNA نمونههای مثبت استخراج و ژن HSP70 با روش Nested-PCR تکثیر، سپس برای تشخیص گونه، محصول PCR با آنزیم محدود کننده Hind II برش داده شد. با روش اسید فاست تعداد 22 نمونه مثبت تشخیص داده شد. همه این نمونهها با روش مولکولی مورد تأیید قرار گرفتند. باند تکثیر یافته 800 جفت بازی ژن HSP70 با آنزیم برش داده شد. بر روی ژل آگاروز 5/2 درصد، باندهای بیست نمونه دارای الگوی مشابه و دو نمونه دارای الگوی متفاوت بودند. بر مبنای ترادف بازی این دو الگو گروه اول گونه آندرسونی و گروه دوم پاروم تشخیص داده شد. بطور کلی گرچه گونه پاروم بعنوان گونه شایع در گوسفندان شناخته شده است ولی در این مطالعه گونه آندرسونی بعنوان گونه غالب بوده است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
65 - تشخیص مولکولی سروتیپ B/793 ویروس برونشیت عفونی در جوجه های گوشتی اطراف شیراز
محمد جواد مهربانپور شیرین عمادیبیماری برونشیت عفونی ماکیان، یک بیماری حاد و به شدت واگیر دستگاه تنفسی و ادراری- تناسلی می باشد که منجر به تلفات و خسارات سنگین به صنعت طیور کشور می گردد. به منظور بررسی بیماری برونشیت در گله های گوشتی مرغداریهای دارای علائم تنفسی اطراف شیراز، از 30 واحد مرغداری گوشتی م أکثربیماری برونشیت عفونی ماکیان، یک بیماری حاد و به شدت واگیر دستگاه تنفسی و ادراری- تناسلی می باشد که منجر به تلفات و خسارات سنگین به صنعت طیور کشور می گردد. به منظور بررسی بیماری برونشیت در گله های گوشتی مرغداریهای دارای علائم تنفسی اطراف شیراز، از 30 واحد مرغداری گوشتی مختلف، نمونه های بافت نای و ریه از جوجه ها اخذ و با رعایت زنجیره سرما به آزمایشگاه منتقل شد. پس از آماده سازی و تزریق نمونه ها به تخم مرغ جنین دار SPF ، با استفاده از تست هماگلوتیناسیون برای ویروس های نیوکاسل و آنفلوانزا ارزیابی شدند. RNA ویروس با استفاده کیت تخلیص RNA از مایع آلانتوئیک استخراج شد و با استفاده از پرایمر عمومی، ویروس برونشیت عفونی به روش RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت و سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و با روش nested-PCR سروتیپ ماساچوست و B/793 شناسایی گردیدند. از مجموع نمونه های 30 واحد مرغداری بررسی شده در این مطالعه، 6 واحد آن آلوده به برونشیت عفونی طیور بود که در واکنش nested-PCR ، 4 مورد از نظر سروتیپ B/793 مثبت بودند. در واحدهای مورد بررسی واکسن B/793 مصرف نشده بود. لذا با توجه به حضور سروتیپ B/793 در مرغداریهای گوشتی، استفاده از واکسن این سروتیپ، لازم به نظر می رسد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
66 - شناسایی و آنالیز فیلوژنتیکی ویروس بیماری نیوکاسل به روش مولکولی در طیور صنعتی استان اصفهان
محمد داود رحیمیان عبدالکریم زمانی مقدم حسن ممتاز محمد حسین نیازیویروس بیماری نیوکاسل (APMV-1)، از خانواده Paramyxoviridae، تحت خانواده Paramyxovirinae و جنس Avulavirus میباشد که واجد هفت ژن3`NP/V-M-F-HN-L 5` است. این بیماری در سرتاسر دنیا به عنوان یکی از مهمترین بیماریهای ماکیان و سایر پرندگان به حساب آمده و می تواند گاهی باعث مرگ أکثرویروس بیماری نیوکاسل (APMV-1)، از خانواده Paramyxoviridae، تحت خانواده Paramyxovirinae و جنس Avulavirus میباشد که واجد هفت ژن3`NP/V-M-F-HN-L 5` است. این بیماری در سرتاسر دنیا به عنوان یکی از مهمترین بیماریهای ماکیان و سایر پرندگان به حساب آمده و می تواند گاهی باعث مرگ و میر100 درصدی در طیور مبتلا گردد. به دلیل این که طبیعت بیماری نیوکاسل حاد و وخیم است و عواقب متعاقب آن خطرناک است، بیماری مذکور از طرف دفتر بین‌المللی همه‌گیری‌ها (OIE) جز بیماریهای لیست A گروه‌بندی شده است. به منظور تعیین قرابت ژنتیکی ژن F ویروس NDVدر ایران و مقایسه آن با سایر کشورها، در ابتدا قطعه 1097 جفت بازی مربوط به ژن M از 37 نمونه بافتی ویروس جهت شناسایی بیماری و سپس قطعه 1349 جفت بازی از ژنF جهت تعیین قرابت ژنتیکی، در سیستم RT-PCRتکثیر داده شد. محصول PCRمربوط به ژن F، 4 نمونه مثبت جهت تعیین ردیف نوکلیوتیدی سکانس گردید. نتایج حاصل از مقایسه ردیف نوکلیوتیدی تعیین شده در این مطالعه با سکانس شناخته شده ژن F ویروس نیوکاسل در سایر کشورها نشانگر وجود 4/1 تا 3/27درصد تنوع ژنتیکی در این ژن بود که در این میان بیشترین قرابت با ردیف نوکلیوتیدی ژن F در هند (سکانس AY339401.1) و بیشترین تفاوت با ردیف نوکلیوتیدی شناخته شده این ژن در ایالات متحده (سکانس ACD14136.1) مشاهده گردید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
67 - شناسایی عفونت مایکوپلاسما سینوویه در مرغان مادر گوشتی واکسینه شده
منصور میاحی زهرا برومند سید علی پور بخش رمضان علی جعفری حسین گیلوریمایکوپلاسما سینوویه یکی از مهمترین عوامل بیماری زای پرندگان است و خسارت های اقتصادی زیادی را به صنعت مرغداری وارد می کند، این مطالعه با هدف تشخیص احتمالی آلودگی گله های مرغ مادر گوشتی واکسینه شده و نتاج آن ها به سویه های وحشی مایکوپلاسما سینوویه و بررسی کارایی واکسن ضد أکثرمایکوپلاسما سینوویه یکی از مهمترین عوامل بیماری زای پرندگان است و خسارت های اقتصادی زیادی را به صنعت مرغداری وارد می کند، این مطالعه با هدف تشخیص احتمالی آلودگی گله های مرغ مادر گوشتی واکسینه شده و نتاج آن ها به سویه های وحشی مایکوپلاسما سینوویه و بررسی کارایی واکسن ضد مایکوپلاسما سینوویه در گله های مرغ مادر گوشتی انجام شد. به همین منظور در سنین 40 و 60 هفتگی هر نوبت 20 سواپ نای و 20 نمونه خون از 20 مزرعه مرغ مادر گوشتی واکسینه شده بر ضد مایکوپلاسما سینوویه و نتاج آن ها گرفته شد. تمام گله های مورد آزمایش قبل از واکسیناسیون از نظر عدم آلودگی به مایکوپلاسما سینوویه تأیید شده بودند. سواپ نای به لوله های درپوش دار حاوی محیط انتخابی مایکوپلاسما منتقل شده و در دمای 4 درجه سانتی گراد در کم تر از 24 ساعت به آزمایشگاه ارسال شدند. در آزمایشگاه میزان پادتن ضد مایکوپلاسما سینوویه به 2 روش آزمایش آگلوتیناسیون سریع روی لام و الیزا اندازه گیری شد. نمونه های سواپ های نای توسط آزمون (High Resolution Melting)HRM با استفاده از ژن vlhA، به منظور تفریق سویه های واکسن و سویه های وحشی مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان داد واکسیناسیون گله های مادر به خوبی توانسته تا سن 40 هفتگی گله ها را از ابتلا به بیماری محافظت و عیار پادتن مناسبی ایجاد نماید ولی با افزایش سن میزان محافظت کاهش یافت و یک مزرعه گله ی مادر (5%) در سن 60 هفتگی و نتاج آن آلودگی به مایکوپلاسما سینوویه متمایز از میکوپلاسما سینوویه به کار رفته در واکسن زنده را نشان دادند. این مطالعه نشان داد واکسیناسیو ن با واکسن های فعلی ضد مایکوپلاسما سینوویه نمی تواند حفاظت کامل در مادران گوشتی در سنین بالا ایجاد نماید و احتمال انتقال آلودگی به نتاج نیز وجود دارد و گله های واکسینه شده باید به روش های مولکولی کنترل و بررسی شوند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
68 - بررسی میزان فراوانی مایکوپلاسما آرژینینی در ریه شتران مبتلا به پنومونی، ذبح شده در کشتارگاه صنعتی مشهد
مریم ایزدی جعفر نوید مهر مصطفی جعفرپور سعید زیباییازرسی کشتارگاهی شترهای کشتار شده، در کشتارگاه صنعتی مشهد حاکی از این است که پنومونی در بین شتران کشتار شده به وفور دیده میشود. مایکوپلاسماها که کوچکترین میکروارگانیسم‌ها با زندگی آزاد میباشند از عوامل مطرح در پنومونی شتران بشمار می‌روند. مایکوپلاسما آرژینینی از حیوانا أکثرازرسی کشتارگاهی شترهای کشتار شده، در کشتارگاه صنعتی مشهد حاکی از این است که پنومونی در بین شتران کشتار شده به وفور دیده میشود. مایکوپلاسماها که کوچکترین میکروارگانیسم‌ها با زندگی آزاد میباشند از عوامل مطرح در پنومونی شتران بشمار می‌روند. مایکوپلاسما آرژینینی از حیوانات مبتلا به پنومونی و پلوروپنومونی خصوصأ گاو، گوسفند و بز جدا میشود. این میکروارگانیسم در ریه شتران مبتلا به پنومونی نیز گزارش شده است اما این موضوع تاکنون در ایران مورد توجه و مطالعه آزمایشگاهی قرار نگرفته است. در این مطالعه با استفاده از کشت و روش مولکولی Nested PCR به تشخیص این میکروارگانیسم پرداختیم. از 100 نمونه ریه مبتلا به پنومونی توسط روش کشت 43 مورد مثبت مایکوپلاسما جدا گردید. سپس با روش مولکولی Nested PCR و با بهره گیری از دو پرایمر اختصاصی که در برگیرنده ناحیه spacer در ایران RNA ریبوزومی مایکوپلاسما آرژینینی بودند، مورد بررسی قرار گرفتند که از 43 نمونه 19 مورد از نظر مایکوپلاسما آرژینینی مثبت بودند. بنابراین طبق نتایج حاصل در این تحقیق برای اولین بار در ایران مایکوپلاسما آرژینینی با روش Nested PCR از ریه شتران مبتلا به پنومونی جداسازی و معرفی گردید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
69 - کاربرد PCR در تشخیص ویروس عامل بیماری مارک طیور (MDV)
صادق ربیعی سعادت مشکلانی عباس دوستی محمد جواهری کوپایی علی رضا مجلسیبیمـاری مـارک MD()یـک بیماری ویروسی است که در اثر نفوذ و تکثیر سلولهای لنفوئید در اعصاب سطحی و برخی اندامهای دیگر در پرندگان بروز میکند و در واقـع یکی از بیماریهای واگیر متداول و مهم طیور محسوب میشود. این ویـروس بـا تضعیـف سیستـم ایمنی، باعث مستعد شدن طیور در مقابل أکثربیمـاری مـارک MD()یـک بیماری ویروسی است که در اثر نفوذ و تکثیر سلولهای لنفوئید در اعصاب سطحی و برخی اندامهای دیگر در پرندگان بروز میکند و در واقـع یکی از بیماریهای واگیر متداول و مهم طیور محسوب میشود. این ویـروس بـا تضعیـف سیستـم ایمنی، باعث مستعد شدن طیور در مقابل دیگر بیماری‌ها میشود. هدف از این مطالعه تشخیص ویروس عامل بیماری مارک به عنـوان یکـی از عـوامل ویروسی تومورزا در طیور با استفاده از واکنش PCR میباشد. به منظور تشخیص و ردیابی ویروس مارک، نمونههای بافت توموری از کشتارگاههای طیور استان چهارمحال و بختیاری جمع آوری شد. پس از استخراج DNA از نمـونـه‌ها، واکنش PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ژن A و پرایمرهای ردیف 132 جفت بازی تکرار شونده ویروس MDV انجـام شـد. سـرانجام محصولات PCR روی ژل آگارز 5/1 درصد الکتروفورز گردید. نتایج نشان داد که 86/62 درصد از مجموع 280 نمونه ندول پوستی مورد آزمایش، از لحاظ حضور ژن A ویروس مارک مثبت بودند. همچنین در40 درصد از نمونهها نیز ردیف 132 جفت بازی تکرار شونده تشخیص داده شد. از آنجا که کلیه نمونههای مورد آزمایش دارای علایم بالینی آلودگی به مارک بودند، اما با توجه به تشخیص آلودگی 86/62 درصدی، به نظر می‌رسد عوامل دیگری به جز ویروس مـارک نیز در ایجاد ضایعات توموری در طیور نقش دارند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
70 - شناسایی اشریشیا کلی O157:H7 از گوشت گاوهای کشتار شده در کشتارگاه شهرستان رفسنجان با استفاده از تکنیک PCR
رضا شاهرخ آبادی ابراهیم رحیمی حسن ممتاز راحله پور صاحبیاشریشیا کلی O157:H7 به عنوان یک عامل اسهال، کولیت خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولیتیک در سراسر جهان شناخته شده است. گوشت آلوده به مدفوع حیوانی احتمالاً منبع اصلی عفونت اشریشیا کلی O157:H7 در نمونههای گوشت میباشد. این مطالعه با هدف بررسی میزان شیوع اشریشیا کلی O157:H7 أکثراشریشیا کلی O157:H7 به عنوان یک عامل اسهال، کولیت خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولیتیک در سراسر جهان شناخته شده است. گوشت آلوده به مدفوع حیوانی احتمالاً منبع اصلی عفونت اشریشیا کلی O157:H7 در نمونههای گوشت میباشد. این مطالعه با هدف بررسی میزان شیوع اشریشیا کلی O157:H7 در نمونههای گوشت گاو کشتارشده در کشتارگاه شهرستان رفسنجان صورت گرفت. این مطالعه به صورت توصیفی- تحلیلی، از اردیبهشت تا بهمن 1390 انجام پذیرفت. در این مطالعه تعداد 148 لاشه مورد بررسی قرار گرفت. نمونهها از برش سطحی عضله گردن گرفته شد و پس از نمونه‌برداری سریعا کشت و آنالیز میکروبی بر روی نمونهها صورت گرفته و کلنی‌های مشکوک به اشریشیا کلی O157:H7 توسط تکنیک Polymerase Chain reaction مورد ارزیابی قرار گرفت. میزان آلودگی نمونهها به اشریشیا کلی و اشریشیا کلی O157:H7 بر اساس آزمون کشت به ترتیب 36 (%32/24) و10 (%75/6) مثبت بودند. از این تعداد 6 نمونه (%05/4) در آزمون PCR به عنوان اشریشیا کلیO157:H7 تشخیص داده شدند. شیوع فصلی اشریشیا کلیO157:H7 نشان داد که بیشترین شیوع آلودگی نمونههای اخذ شده در فصل تابستان میباشد (P < 0.05). نتایج این مطالعه نشان داد که گوشت گاو میتواند به عنوان یک مخزن بالقوه برای اشریشیا کلی O157:H7 مطرح باشد و گوشت گاو ممکن است به عنوان یک حامل در انتقال این پاتوژن به انسان عمل کند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
71 - مطالعه اثر بازدارندگی اسانس مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه با استفاده از Real Time PCR
حسین مومنی مهدی رئیسی حاجیه قاسمیان صفایی حسن ممتازلاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکـوزیس یکـی از مهمتـرین بـاکتری هـای بیماری زا در ماهیان به حساب مـی آیـد. بررسی حاضر با هدف مطالعه اثر بازدارندگی غلظتهای مختلف اسانس گیاه مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لا أکثرلاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکـوزیس یکـی از مهمتـرین بـاکتری هـای بیماری زا در ماهیان به حساب مـی آیـد. بررسی حاضر با هدف مطالعه اثر بازدارندگی غلظتهای مختلف اسانس گیاه مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکوزیس ماهیان انجام پذیرفت. به منظور انجام این مطالعه، باکتری دارای ژن epsD در مجاورت حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) اسانس ها برابر با μl/ml 12/0 قرار گرفت و میزان بیان ژن مربوطه با استفاده از Real Time PCR بررسی گردید. نتایج نشان داد که بیان ژن در باکتری های مجاورت داده شده با غلظت MIC اسانس ها کاهش یافت. نتایج همچنین حاکی از کاهش بیان ژن مذکور متعاقب افزایش غلظت اسانس بود. اگر چه میزان تأثیر مرزه بختیاری بر بیان ژن کپسول بیش از مرزه خوزستانی بود. از این رو استفاده از اسانس مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی به منظور کنترل و پیشگیری بیماری لاکتوکوکوزیس به واسطه ممانعت از بیان ژن کپسول توصیه می شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
72 - جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما بووی‌جنیتالیوم از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با روش-های کشت و PCR
زهرا معصومعلی نژاد سید علی پوربخشهدف: مایکوپلاسما بووی جنیتالیوم یکی از پاتوژن های ایجاد کننده ورم پستان در گاو های شیرده است. عوارض ناشی از این بیماری شامل کاهش شیر دهی، تغییر کیفیت شیر، تورم کارتیه ها، ورم مفاصل، عفونت دستگاه تنفسی، عفونت سیستم ادراری، عفونت گوش داخلی و سپتی سمی می باشد. هدف از این م أکثرهدف: مایکوپلاسما بووی جنیتالیوم یکی از پاتوژن های ایجاد کننده ورم پستان در گاو های شیرده است. عوارض ناشی از این بیماری شامل کاهش شیر دهی، تغییر کیفیت شیر، تورم کارتیه ها، ورم مفاصل، عفونت دستگاه تنفسی، عفونت سیستم ادراری، عفونت گوش داخلی و سپتی سمی می باشد. هدف از این مطالعه، جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما بووی جنیتالیوم از شیر گاو های مبتلا به ورم پستان بالینی با روش های کشت و PCR بود. روش کار: در این مطالعه توصیفی در سال 1395، تعداد 156 نمونه ی شیر از گاوهای مشکوک به اورام پستان بالینی در گاوداری های صنعتی ایران اخذ گردید. نمونه ها در محیط PPLO broth و PPLO agar کشت داده شدند. برای استخراج DNA از روش فنل کلروفرم استفاده گردید. نمونهها از نظرحضور جنس مایکوپلاسما و گونه مایکوپلاسما بووی جنیتالیوم به روش PCR مورد آزمایش قرار گرفتند. به منظور تشخیص این میکروارگانیسم به روش مولکولی از پرایمرهای اختصاصی Mbg F و Mbg R استفاده گردید. نتایج بدست آمده: در روش کشت از تعداد 156 نمونه، 57 (37%) نمونه کلنی‌های تخم مرغ نیمرو شده مایکوپلاسما را از خود نشان دادند؛ در حالیکه در آزمون PCR از این تعداد نمونه، 62 (40%) نمونه از نظر حضور پرایمر جنس مایکوپلاسما مثبت گزارش گردید و در آزمون PCR اختصاصی گونه نیز، یک نمونه (2%) مثبت مایکوپلاسما بووی جنیتالیوم گزارش شد. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این تحقیق، PCR را به عنوان یک روش سریع، با حساسیت و ویژگی بالا جهت تشخیص مایکوپلاسماها معرفی نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
73 - تشخیص مولکولی و تعیین توالی اسیدهای آمینه ناحیه شکافتگی هماگلوتینین در ویروس آنفلوانزای جداشده از طیور گوشتی استان خراسان شمالی
پژمان بهاری سید علی پوربخش عبدالحمید شوشتری محمد علی بهمنی نژادبیماری آنفلوانزای پرندگان یکی از بیماری های ویروسی مهم در مرغداری های صنعتی کشور می باشد و هر سال خسارات عمده ای به صنعت پرورش طیور کشور وارد میکند.تشخیص سریع ویروس آنفلوانزا و تعیین حدت آنها یکی از اولویت های مهم پیشگیری و مبارزه علیه این بیماری در کشور محسوب می شود. أکثربیماری آنفلوانزای پرندگان یکی از بیماری های ویروسی مهم در مرغداری های صنعتی کشور می باشد و هر سال خسارات عمده ای به صنعت پرورش طیور کشور وارد میکند.تشخیص سریع ویروس آنفلوانزا و تعیین حدت آنها یکی از اولویت های مهم پیشگیری و مبارزه علیه این بیماری در کشور محسوب می شود. از آزمایش RT-PCR جهت تشخیص ویروس های آنفلوانزا و نیز بررسی تواالی محل شکافتگی پروتیین هماگلوتینین (HA) به عنوان یک شاخص مولکولی به منظور پیش بینی حدت سویه های آنفلوانزا مورد استفاده قرار گرفت. در این تحقیق جهت پایش بیماری آنفلوانزا 160 نمونه سوآپ نای از 20 واحد پرورش مرغ گوشتی در استان خراسان شمالی که مشکوک به بیماری آنفلوانزا بودند اخذگردید. آزمایش مولکولی RT-PCR براساس ژنوتیپ های شایع در ایران پایه ریزی گردید که در آن برای تعیین تیپ گروه A آنفلوانزا از پرایمراختصاصی ژن ماتریکس (M)وجهت تعیین تحت تیپ های H9، H5 ، H7 از پرایمرهای اختصاصی ژن هماگلوتنین(HA) استفاده شد. جهت تعیین توالی، نمونه های مثبت شده از نظر تیپ Aبه تخم مرغ جنین دار (SPF) 9-11 روزه تزریق شد، پس از سه تاپنج روز مایع آلانتوییک با استفاده از فرمالین 1درصد خنثی و جهت بررسی تست هماگلوتیناسیون و استخراج RNAی ویروسی استفاده گردید. سپس قطعه ای به طول 437bp دربرگیرنده محل شکافتگی ژن هماگلوتینین تکثیر و جهت تعیین توالی نوکلیوتیدی به شرکت MWGآلمان ارسال شد و درنهایت به توالی اسیدآمینه ای ترجمه گردید .نتایج نشان دادکه با استفاده ازروش RT-PCR نمونه های اخذشده از 4 مرغداری صنعتی از نظر ویروس تیپ A آنفلوانزا مثبت بودند. تمام ویروس های تیپ Aاز نظر تحت تیپ H5 ، H7 ، منفی و از لحاظ H9 مثبت تشخیص داده شدند. بررسی محل شکافتگی پروتیین هماگلوتینین نشان دادکه هر4 سویه دارای توالی KSSR بودند، اگرچه این توالی نشان دهنده غیرحاد بودن سویه ها می باشد ولی با الگوی جدایه های قبلی ایران که عمدتا RSSR میباشد تفاوت داشت. به طورکلی آزمایش RT-PCR با استفاده ازپرایمرهای اختصاصی تحت تیپ های رایج درمنطقه، تشخیص تفریقی سریع ویروسهای آنفلوانزا را امکان پذیرمی سازد. تغییر در محل شکافت پروتیین هماگلوتینین درویروس های H9N2 را میتوان به عنوان یک خطر بالقوه جهت تبدیل این ویروس ها به سویه های حاد در نظرگرفت .لذا پایش مستمر توالی ژنتیکی این ویروس ها توصیه می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
74 - ردیابی مولکولی کمپیلوباکتر در کبوترهای خانگی شهرکرد
عبدالکریم زمانی مقدم حسین طهماسبی سمانه مهرابیان سارا براتی سید حسین هاشمی باباحیدری مرضیه صفرپورکبوترها میتوانند حامل بعضی از عوامل بیماریزای انسانی باشند و در انتقال و گسترش عوامل عفونی مقاوم به دارو به انسان نقش ایفا کنند. کمپیلوباکتر معمول‌ترین علت گاستروانتریت انسان در سراسر جهان است. با توجه به علاقه بسیاری از مردم در نگهداری از پرندگان زینتی و توانایی بال أکثرکبوترها میتوانند حامل بعضی از عوامل بیماریزای انسانی باشند و در انتقال و گسترش عوامل عفونی مقاوم به دارو به انسان نقش ایفا کنند. کمپیلوباکتر معمول‌ترین علت گاستروانتریت انسان در سراسر جهان است. با توجه به علاقه بسیاری از مردم در نگهداری از پرندگان زینتی و توانایی بالقوه این پرندگان در انتقال کمپیلوباکتر به انسان در این مطالعه به ارزیابی آلودگی به کمپیلوباکتر در کبوترهای شهرکرد با روش PCR پرداخته شد. مجموعا 150 نمونه مدفوعی از کبوتر از نقاط مختلف شهرکرد جمعآوری گردید و با استفاده از روشهای باکتری‌شناسی و PCR به جست و جوی کمپیلوباکتر پرداخته شد. نتایج نشان داد که کمپیلوباکتر از 7/0 درصد (1 از 150) نمونهها جدا گردید. همچنین جدایههای کمپیلوباکتر مقاومت بالای آنتیبیوتیکی از خود نشان دادند. این مطالعه نشان داد که کبوترهای خانگی شهرکرد قادرند میزان پایینی از آلودگی را با خود حمل نمایند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
75 - شناسایی مولکولی وارزیابی توکسین زایی سویههای کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D جدا شده ازموارد آنتروتوکسمی در موسسه رازی
لیدا عبدالمحمدی خیاو احمد رضا جباری رضا پیله چیان لنگرودیباکتری کلستریدیوم پرفرینجنز عامل بیماری انتروتوکسمی در گوسفند میباشد. هدف از این مطالعه انتخاب بهترین سویه کلستریدیوم پرفرینجنزتیپ D ازایران و مقایسه آن با سویه واکسینال به وسیله تستهای پتنسی و MLD است. در این تحقیق، ۱۵ سویه تیپ D مورد مطالعه قرار گرفت. در ابتدا آزمای أکثرباکتری کلستریدیوم پرفرینجنز عامل بیماری انتروتوکسمی در گوسفند میباشد. هدف از این مطالعه انتخاب بهترین سویه کلستریدیوم پرفرینجنزتیپ D ازایران و مقایسه آن با سویه واکسینال به وسیله تستهای پتنسی و MLD است. در این تحقیق، ۱۵ سویه تیپ D مورد مطالعه قرار گرفت. در ابتدا آزمایشات میکروبیولوژی و بیوشیمیایی انجام شد، سپس نمونه‌هابه وسیله تست PCR تأیید شدند. در نهایت بهترین سویهها به وسیله MLD انتخاب شد و واکسن انتروتوکسمی از نمونه سویه واکسینال و این سویهها تهیه شد. واکسن برای مدت ۴۵ روز در یخچال نگهداری شد. سپس تست پتنسی طبق دستورالعمل‌های استاندارد بر روی نمونهها انجام شد. نتایج نشان داد که شرایط توکسین اپسیلون واکسن سویههای جدا شده در موسسه رازی با توکسین اپسیلون نمونه واکسن سویه واکسینال برابر میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
76 - میزان شیوع برونشیت عفونی در گلههای گوشتی مبتلاء به سندرم تنفسی در استان چهارمحال و بختیاری
عزت اله فتحی هفشجانی همایون خلفیان -
حرية الوصول المقاله
77 - بررسی تنوع ژنتیکی تحت تیپ های مایکوباکتریوم بوویس در ایران توسط روش اسپولیگوتایپینگ و PCR-RFLP
پویان خالقیان کیوان تدین پریسا فرنیا نادر مصوری محدثه مظفری زهرا درخشانی نژاد روح اله کشاورز شجاعت دشتی پور محمد رضا مسجدی علی اکبر ولایتی رایناک قادری سامد برومندفر -
حرية الوصول المقاله
78 - شناسایی مولکولی و بررسی کلونیزاسیون برخی گونه های استافیلوکوکوس در سگ های به ظاهر سالم ارجاعی به بیمارستان دانشکده دامپزشکی اهواز
داریوش غریبی بهمن مصلی نژاد سید محدثه هاشمیهدف از این مطالعه شناسایی مولکولی و بررسی کلونیزاسیون استافیلوکوکوس سوداینترمدیوس و استافیلوکوکوس اورئوس در سگ های به ظاهر سالم ارجاعی به بیمارستان دانشکده دامپزشکی اهواز بود. سواب های بینی از تعداد 143 سگ ارجاعی به بیمارستان دامپزشکی اهواز گرفته شد و پس از کشت باکتریها أکثرهدف از این مطالعه شناسایی مولکولی و بررسی کلونیزاسیون استافیلوکوکوس سوداینترمدیوس و استافیلوکوکوس اورئوس در سگ های به ظاهر سالم ارجاعی به بیمارستان دانشکده دامپزشکی اهواز بود. سواب های بینی از تعداد 143 سگ ارجاعی به بیمارستان دامپزشکی اهواز گرفته شد و پس از کشت باکتریهای جدا شده با استفاده از روش های روتین تعیین هویت باکتریها و روش مولکولی واکنش زنجیره ای پلی مراز دوگانه تعیین هویت گردید. نتایج تشخیص با استفاده از روش های بیوشیمیایی نشان داد، تعداد 13جدایه استافیلوکوکی(19/40درصد) ، استافیلوکوکوس اورئوس بودند ولی در مورد بقیه جدایه(54 جدایه دیگر) تشخیص قطعی امکان پذیر نبود. نتایج آزمون PCR دوگانه با استفاده از تکثیر ژن ترمونوکلئاز(nuc) برای گونه های استافیلوکوکوس سوداینترمدیوس و استافیلوکوکوس اورئوس نشان داد، از تعداد 67 جدایه کوآگولاز مثبت استافیلوکوکوس، 13 جدایه (19/40درصد) استافیلوکوکوس اورئوس و 54 جدایه (80/59 درصد) استافیلوکوکوس‌سوداینترمدیوس بودند. تعداد 7 سگ (10/44%) آلودگی همزمان به استافیلوکوکوس اورئوس و استافیلوکوکوس سوداینترمدیوس داشتند. با توجه به شیوع نسبتا بالای استافیلوکوکوس‌های کوآگولاز مثبت و بویژه استافیلوکوکوس سوداینترمدیوس در سگ و احتمال انتقال آنها به صاحبان آنها، رعایت اصول بهداشتی در مواجهه با این حیوانات از طرف صاحبان آنها ضروری به نظر می رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
79 - تشخیص ویروس بیماری نیوکاسل با استفاده از روش RT-PCR
سید علی پوربخش عباس اشتری رضا ممیز فاطمه عشرت آبادی -
حرية الوصول المقاله
80 - مطالعه سرمی و مولکولی میزان شیوع ویروس نقصان ایمنی گاو (BIV) در گاوداریهای استانهای اصفهان و چهارمحال و بختیاری
محمد رضا محزونیه اعظم مختاری ژان پیر فروساردویروس نقصان ایمنی گاو (Bovine Immunodeficiency Virus) از خانواده رتروویریده و یکی از مهمترین پاتوژن های ویروسی سرکوب کننده ی سیستم ایمنی گاو است. در سال های اخیر وجود گاوهای شیری و گاومیش‌های آلوده به BIV از مناطق مختلفی در سراسر جهان و از آن جمله ایران گزارش گردیده است أکثرویروس نقصان ایمنی گاو (Bovine Immunodeficiency Virus) از خانواده رتروویریده و یکی از مهمترین پاتوژن های ویروسی سرکوب کننده ی سیستم ایمنی گاو است. در سال های اخیر وجود گاوهای شیری و گاومیش‌های آلوده به BIV از مناطق مختلفی در سراسر جهان و از آن جمله ایران گزارش گردیده است. با وجودی که متوسط شیوع سرمی BIV در سراسر جهان در اغلب مطالعات در محدوده‌ی 4? تا 6? گزارش شده است، پژوهش های انجام گرفته در مورد شیوع این ویروس در ایران این مقدار را فراتر از این محدوده گزارش نموده‌اند. مطالعه ی حاضر به منظور تعیین شیوع دقیق این ویروس برای پایه‌ریزی مطالعات اپیدمیولوژیک آینده در نواحی مرکزی ایران و به طور اختصاصی دو استان اصفهان و چهارمحال و بختیاری انجام پذیرفت. در این مطالعه نمونههای خون2290 گاو از این دو استان (490 گاو از فارم های سنتی و 1800 گاو از فارم های صنعتی) اخذ شد و پس از آزمون نمونههای خون به دو روش الایزا و PCR میزان کلی آلودگی به ویروس BIV در این دو ناحیه 61/1% به دست آمد. میزان شیوع آلودگی در چهارمحال و بختیاری 7/5% و در اصفهان 12/1% محاسبه شد و میزان آلودگی در دامداری‌های سنتی و صنعتی در این دو ناحیه به ترتیب 5/4% و 83/0% گزارش گردید. نمونههای مثبت شده در آزمون PCR جهت شناسایی ژن pol در BIV و تعیین توالی به آژانس آزمایشگاهی انگلیس، ویبریج(VLA, Weybridge) ارسال شدند و نتایج حاکی از تشابه بیشتر جدایههای ایران به سویه ی استاندارد R29 (GenBank NC001413.1) بود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
81 - جداسازی و شناسایی عامل بیماری نیوکاسل از مزارع پرورش ماکیان گوشتی استان خوزستان
منصور میاحی مسعود رضا صیفی آباد شاپوری رمضانعلی جعفری بابک محمدیان قلعه جوقی -
حرية الوصول المقاله
82 - بررسی مولکولی فاکتورهای ویرولانس پاستورلا مولتوسیداهای جدا شده از طیور در ایران
سپیده حق نظری احمد رضا جباری کیوان ندیناستورلا مولتوسیدا باکتری گرم منفی، غیرمتحرک، کوکوباسیل حساس به پنی سیلین متعلق به خانواده پاستورلاسه است که می تواند باعث یک عفونت مشترک بین انسان و دام شود همچنین عامل بیماری های مهمی از جمله: وبای مرغان در پرندگان اهلی و وحشی، رینیت آتروفیک در خوک، پنومونی یا بیماری ت أکثراستورلا مولتوسیدا باکتری گرم منفی، غیرمتحرک، کوکوباسیل حساس به پنی سیلین متعلق به خانواده پاستورلاسه است که می تواند باعث یک عفونت مشترک بین انسان و دام شود همچنین عامل بیماری های مهمی از جمله: وبای مرغان در پرندگان اهلی و وحشی، رینیت آتروفیک در خوک، پنومونی یا بیماری تنفسی در گاو و گوسفند، سپتی سمی هموراژیک در گاو و گاومیش و بیماری خرناس در خرگوش می باشد. گونه هایی که به طور معمول وبای مرغان را در مرغ ایجاد می کند به سروتیپ های ( A:3 , A:1 یا A:4) تعلق دارد. در این مطالعه بر روی سی جدایه از پاستورلا مولتوسیدا جدا شده از طیور تست های باکتری شناسی و بیوشیمیایی بر اساس روش کلاسیک انجام گرفت. در این تحقیق جدایه های پاستورلا مولتوسیدای طیور ایران از نظر حضور ژن عوامل ویرولانس کپسول، ompH، فیمبریه و عوامل چسبندگی شامل ژن های ptfA ، pfhA، tadD،hsf-1، fimAو toxAمورد بررسی قرار گرفتند. تمام جدایه های آزمایش شده به روش PM-PCR با استفاده از پرایمر KMT1به عنوان پاستورلا مولتوسیدا مورد تأیید مولکولی قرار گرفتند و با روش CAP-PCR تیپ کپسولی آن ها در گروه A قرار گرفت. همه جدایه ها (100%) حاوی ژن های ompH، ptfA،pfhA ، hsf-1 و fimA بودند، پانزده جدایه (50%) حاوی ژن tad D و 70% واجد ژن toxA شناخته شدند. همچنین الگوی حساسیت جدایه های مذکور نسبت به 9 آنتی بیوتیک مورد بررسی قرار گرفت که حساسیت نسبی و کامل در نمونه ها مشاهده گردید. دو جدایه (33/3%) به آنتی بیوتیک های فلومکوئین و نالیدیکسیک اسید مقاوم بودند. حساسیت به آنتی بیوتیک های پنی سیلین، آمپی سیلین، لینکوسپکتین، فلورفنیکول، تایلوزین و تیامولین 100% و کامل بود. حساسیت به آنتی بیوتیک های فلومکوئین، انروفلوکساسین 6/96% و نالیدیکسیک اسید 80% مشاهده شد. نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که جدایه های طیوری پاستورلا مولتوسیدای ایران حاوی ژن های مهم ویرولانس شناخته شده برای این باکتری می باشند که نشان دهنده توانمندی بیماری زایی جدایه ها در پرندگان می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
83 - ارزیابی دو روش کشت باکتریایی و PCR در تشخیص بیماری لوک آمریکایی و اروپایی
صبا الماسی چگنی ملاحت احمدی حبیب دستمال چی ساعی بنت الهدی رحمان -
حرية الوصول المقاله
84 - جداسازی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس از جوندگان دامداری‌های آلوده در استان خوزستان
رحمن لونی نادر مصوری کیوان تدین روح اله کشاورز شمس الدین قائمی شجاعت دشتی پور محمد محمد طاهریگونههای مختلف کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس عامل ایجادکننده بیماری سل در انسان و دام میباشند. با توجه به زئونوز بودن این پاتوژن ها و وجود گله های متعدد گاو در جوار شهرها همواره جهت کنترل و پیشگیری از بروز اپیدمی سل در انسان و دام و همچنین انجام بهتر و دقیق تر برنامه أکثرگونههای مختلف کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس عامل ایجادکننده بیماری سل در انسان و دام میباشند. با توجه به زئونوز بودن این پاتوژن ها و وجود گله های متعدد گاو در جوار شهرها همواره جهت کنترل و پیشگیری از بروز اپیدمی سل در انسان و دام و همچنین انجام بهتر و دقیق تر برنامه کنترل و مبارزه با این بیماری، می‌بایست مراقبت‌های فعالانه انجام پذیرد. لذا هدف از این تحقیق جداسازی عامل بیماری از گاوهای توبرکولین مثبت و حیواناتی که در گله وجود دارند مانند جوندگان دامداری‌هامی باشد تا مشخص گردد که چه سویهها و گونه‌هایی در کشور در حال گردش میباشند. برای رسیدن به این اهداف، می‌بایست عامل پاتوژن مجزا و تعیین هویت گردد. در جریان انجام این تحقیق با همکاری سازمان دامپزشکی استان خوزستان و با استفاده از تست توبرکولین، از تعداد 40 کانون آلوده به سل گاوی 16 نمونه موش از دامداری‌های آلوده به کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس شکار شد. تمامی نمونهها مورد کشت باکتریایی در محیط‌های اختصاصی قرار گرفتند و پس ازانکوباسیون (حداقل 8 هفته)، 2 جدایه به دست آمد. به کمک PCRبا استفاده از 16sRNAجنس مایکوباکتریایی جدایهها تائید و سپس با استفاده از قطعه الحاقی IS6110،تعلق جدایهها به اعضاء کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مشخص گردید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
85 - بررسی مولکولی فاکتورهای ویرولانس پاستورلا مولتوسیداهای جدا شده از گوسفند در ایران
الهه رضایی احمد رضا جباری مجید اسمعیلی زاد عباس دوستیپاستورلا مولتوسیدا یکی از باکتری های مهم پاتوژن در بسیاری از حیوانات و انسان می باشد. این باکتری عامل بیماری های مختلفی از جمله: پنومونی در نشخوارکنندگان، رینیت آتروفیک درخوک، وبای مرغان و سپتی سمی هموراژیک در گاو میباشد. عوامل حدت مختلفی در بیماری زایی این باکتری شناسا أکثرپاستورلا مولتوسیدا یکی از باکتری های مهم پاتوژن در بسیاری از حیوانات و انسان می باشد. این باکتری عامل بیماری های مختلفی از جمله: پنومونی در نشخوارکنندگان، رینیت آتروفیک درخوک، وبای مرغان و سپتی سمی هموراژیک در گاو میباشد. عوامل حدت مختلفی در بیماری زایی این باکتری شناسایی شده اند؛ از جمله آنها، پروتئین غشای خارجی OmpH، ادهسین ها شامل ژن های ptfA،phfA ، tadD، hsf-1 ، fimA و ژن درمونکروتوکسین (toxA ) را می توان نام برد. هدف از این مطالعه بررسی حضور این ژن ها در بین جدایه های پاستورلا مولتوسیدا به دست آمده از موارد پنومونی در گوسفند است. سی جدایه پاستورلا مولتوسیدا با روش های باکتری شناسی و بیوشیمیایی تعیین هویت گردیدند. تمام جدایه ها با روش PM-PCR و استفاده از پرایمر اختصاصی KMT1مورد تائید قرار گرفت و با روش CAP-PCRتیپ کپسولی آن ها مشخص گردید. تایپینگ مولکولی نشان داد که جدایه های گوسفندی مورد مطالعه در ایران به گروه کپسولی A تعلق دارند. همه جدایهها حاوی ژن های OmpH و fimA بودند، اکثر جدایه ها (3/93%) حاوی ژن های ptfA ،hsf-1و 90% دارای ژن toxA بودند. کمترین فراوانی در ژن های tadD و phfA مشاهده شد (6/36%). حضور عوامل حدت، پتانسیل ژنتیکی جدایه های مذکور را برای ایجاد بیماری پنومونی گوسفندان نشان می دهد. مطالعه تکمیلی به منظور مشخص شدن نقش فنوتیپی هر یک از عوامل حدت در ایجاد بیماری توصیه می شود. به طورکلی بررسی فاکتورهای حدت، به انتخاب سویه مناسب، برای تهیه واکسن کارآمد و مفید کمک می کند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
86 - کلونینگ ژن lipL41 با هدف تولید کنترل مثبت جهت تشخیص لپتوسپیراهای بیماریزا
مریم السادات سلطانی پژواک خاکی سهیلا مرادی بید هندی محمد حسن شاه حسینی سما رضا سلطانی -
حرية الوصول المقاله
87 - بررسی کوکسیلا بورنتی به عنوان یکی از عوامل عفونی سقط جنین در نشخوارکنندگان کوچک با روش PCRدر استان همدان
محمد خلیلی سعید رضا نور الهی فرد زینب عبیری حسین عدالتی شوکت -
حرية الوصول المقاله
88 - شناسایی ویروس عامل بیماری هپاتیت به همراه گنجیدگی (IBH) به روش PCR در ماکیان گوشتی استان اصفهان
محسن قربیانی کیوان هاتفی نژاد جلال شایقچکیده آدنوویروس‌های پرندگان به‌طور گسترده‌ای در گلههای تجاری جهان پراکنده هستند و گستره‌ی وسیعی از حدت و علائم بالینی را نشان میدهند. برخی جدایههای آدنوویروس مرغی میتوانند عامل بیماری هپاتیت به همراه گنجیدگی (IBH) باشند. اهمیت حضور ویروس عامل IBH علاوه بر خسارات ا أکثرچکیده آدنوویروس‌های پرندگان به‌طور گسترده‌ای در گلههای تجاری جهان پراکنده هستند و گستره‌ی وسیعی از حدت و علائم بالینی را نشان میدهند. برخی جدایههای آدنوویروس مرغی میتوانند عامل بیماری هپاتیت به همراه گنجیدگی (IBH) باشند. اهمیت حضور ویروس عامل IBH علاوه بر خسارات اقتصادی، همراهی آن با سایر بیماریهای ویروسی هست. تضعیف سیستم ایمنی به دنبال درگیری با ویروس بیماری بورس عفونی (IBDV) بیماریزایی ویروس عامل IBH را تسهیل میکند و علاوه بر این، درگیری همزمان ویروس کم‌خونی عفونی ماکیان (CIAV) با ویروس عامل IBH میزان جراحات قلبی و تلفات را افزایش می‌دهد. میزان مرگ و میر در بیماری ویروس عامل IBH ممکن است به 10 ٪ برسد، اما در بعضی موارد تا 30 ٪ هم گزارش‌شده است. مطالعه حاضر برای اولین بار به شناسایی ویروس IBH به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) و حضور ژن هگزون در ناحیه متغیر LOOP1 در ماکیان گوشتی استان اصفهان پرداخته شد. در این راستا 69 نمونه کلینیکی از 35 مرغداری مختلف در هشت شهرستان استان، با علائم کبدی موردبررسی قرار گرفت، درمجموع پنج نمونه مثبت (25/7 ٪) از سه شهرستان کاشان، اردستان و گلپایگان در آزمایش PCR تأیید شدند و وجود آلودگی برای اولین بار در استان اصفهان تأیید گردید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
89 - مقایسه حضور تک یاخته‌های خونی در گاوهای به ظاهر سالم مناطق مختلف جغرافیایی کشور با استفاده از روش PCR
بهاره چشتی غلام رضا رزمی ابوالقاسم نقیبیبابزیوز و تیلریوز از بیماری های مهم منتقله توسط کنه میباشند که به علت کم خونی، لاغری، مرگ و میر و کاهش فراورده‌های دامی سبب خسارت اقتصادی زیادی در صنعت دامپروری کشور میشود. در این مطالعه با هدف بررسی میکروسکپی و ملکولی آلودگی به تیلریا و بابزیا در گاوهای سه منطقه آب و أکثربابزیوز و تیلریوز از بیماری های مهم منتقله توسط کنه میباشند که به علت کم خونی، لاغری، مرگ و میر و کاهش فراورده‌های دامی سبب خسارت اقتصادی زیادی در صنعت دامپروری کشور میشود. در این مطالعه با هدف بررسی میکروسکپی و ملکولی آلودگی به تیلریا و بابزیا در گاوهای سه منطقه آب و هوایی گرم و خشک، کوهستانی و خزری انجام گرفت. در این مطالعه تعداد 270 نمونه خون حاوی ماده ضدانعقاد در فصول بهار و تابستان از گاوهای شهرستان یزد (منطقه کویری)، تربت جام (منطقه نیمه کوهستانی) و تنکابن و رامسر (منطقه خزری) جمع آوری گردید. نمونههای جمع آوری شده به آزمایشگاه منتقل گردید. ابتدا از نمونههای خون گسترش تهیه و سپس با گیمسا رنگ آمیزی شدند. همچنین DNA خون، با استفاده از کیت تجاری استخراج و سپس آزمایش PCR طی دو مرحله جهت تشخیص آلودگی به تیلریا و بابزیا در گاوهای موردبررسی انجام شد. در بررسی میکروسکوپی گسترش‌های خونی آلودگی به گونههای تیلریا در 4 نمونه خون ازگاوهای شهرستان یزد مشاهده گردید. همچنین با استفاده از روش PCR آلودگی به تیلریا آنولاتا در 12 نمونه خون از گاوهای شهرستان یزد، یک نمونه خون از گاوهای شهرستان تربت جام و 3 نمونه خون از گاوهای شهرستان‌های رامسر و تنکابن آلودگی را تایید نمود . در این مطالعه هیچ گونه آلودگی به بابزیا مشاهده نگردید. نتایج حاصله مبین اهمیت بیشتر آلودگی به تیلریا آنولاتا در گاوهای مناطق مختلف ایران میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
90 - بازنگری استرین‌های Erwinia amylovora عامل بیماری آتشک درختان میوه دانه‌دار از نظر تنوع ژنتیکی، بیماریزایی و وجود مقاومت به استرپتومایسین
عباس داودی ابوالقاسم قاسمی مونا اسمعیلیبیماری آتشک با عامل Erwinia amylovora به عنوان مخرب‌ترین بیماری در خانواده رزاسه است که در بعضی از استان‌ها تولید محصول به و گلابی را غیراقتصادی نموده است. در این تحقیق تنوع فنوتیپی، ژنتیکی، بیماریزایی استرین‌ها و نیز احتمال ورود استرین های مقاوم به استرپتومایسین صورت گ أکثربیماری آتشک با عامل Erwinia amylovora به عنوان مخرب‌ترین بیماری در خانواده رزاسه است که در بعضی از استان‌ها تولید محصول به و گلابی را غیراقتصادی نموده است. در این تحقیق تنوع فنوتیپی، ژنتیکی، بیماریزایی استرین‌ها و نیز احتمال ورود استرین های مقاوم به استرپتومایسین صورت گرفته است. تعداد 422 جدایه از نمونه‌هایی که طی فصل بهار، تابستان و زمستان از مناطق مختلف استانهای خراسان، سمنان، قزوین، لرستان، آذربایجان شرقی، آذربایجان غربی و تهران نمونه‌برداری شد حاصل گردید. میزبان‌های مورد نظر در این بررسی سیب، گلابی، به، زالزالک و رز بودند. استرین‌های جداشده از نظر ویژگی‌های فنوتیپی و مقایسه الگوی پروتئینی شباهت‌های بسیار بالایی نشان دادند. همچنین طی سایر بررسی‌ها جدایههای مختلف جغرافیایی و میزبانی از نظر قدرت و شدت بیماریزایی که در برگ‌های گلابی به صورت شاخه بریده ارزیابی گردید، مشابه بودند. تعیین حساسیت استرین‌ها به آنتی بیوتیکهای استرپتومایسین، اکسی تتراسایکلین و ترکیب اکسی کلرور مس بررسی گردید و هیچگونه مقاومتی به آنتی بیوتیکهای استرپتومایسین، تتراسایکلین و مس در آنها مشاهده نشد. براساس خصوصیات فنوتیپی، دامنه میزبانی و مناطق جغرافیایی تعداد 75 استرین برای بررسی تنوع ژنتیکی انتخاب شدند که در انگشت نگاری به روش rep-PCR با آغازگرهای ERIC و BOX تمامی جدایهها با جدایه مرجع ATCC 49946 هموژن و یکسان بودند و الگوی مشابهی در ژل آگارز ایجاد نمودند. لذا با توجه به نتایج حاصل در پروفیل پروتئینی جدایههای ایرانی با جدایه استاندارد که تفاوتی مشاهده نشد، تغییر ژنتیکی در جدایهها برخلاف آنچیزی که انتظار می‌رفت، دیده نشد و در مدیریت این بیماری، ترکیبات شیمیایی باکتری‌کش موجود کماکان با دغدغه کمتری قابل استفاده میباشند و نیز یکنواختی استرین‌ها کمک خواهد نمود که از یک رویه یکسان در تهیه ارقام مقاوم، پیش آگاهی بیماری و مدیریت تلفیقی استفاده نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
91 - بررسی بیان ژنBCL9دربیماران مبتلا به سرطان کولورکتال
شهلا محمدگنجی بهروز طوفان ناهید مسعودیانمقدمه:سرطان کولورکتال سومین سرطان شایع درمردان ودومین سرطان شایع درزنان دنیاونیزدومین عامل مرگ ومیر ناشی ازمیان سرطان های دنیا می باشد.میزان شیوع آن درآسیا به سرعت روبه افزایش است طوریکه سالانه1.2میلیون نفربه سرطان کولورکتال مبتلاوبیش ازنیمی ازاین مبتلایان می میرند.در ا أکثرمقدمه:سرطان کولورکتال سومین سرطان شایع درمردان ودومین سرطان شایع درزنان دنیاونیزدومین عامل مرگ ومیر ناشی ازمیان سرطان های دنیا می باشد.میزان شیوع آن درآسیا به سرعت روبه افزایش است طوریکه سالانه1.2میلیون نفربه سرطان کولورکتال مبتلاوبیش ازنیمی ازاین مبتلایان می میرند.در ایران نیز طی30سال اخیر میزان شیوع سرطان کولورکتال درمردان بیش از50%و در زنان کمی کمتر ازآن می باشدوسن مبتلایان اکثراً بالای50سال است.دراین مطالعه بمنظور شناسایی ژنهای دخیل درایجادCRC،به بررسی بیان ژنBCL9 در بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال پرداخته شد. موادوروش:دراین تحقیق از40بیمار مبتلا به سرطان کولورکتال با تکمیل رضایتنامه وپرسشنامه کتبی، نمونه بافت تازه تهیه شد.سپس mRNAآنها استخراج وسنتزcDNAانجام شد.سپس باپرایمرهای اختصاصی برای ژنهایBCL9وB-actin،آزمایش نیمه کمیRT-PCRانجام شد.نتایج:نتایج این مطالعه نشان داددرتمامی نمونه های توموری باند مربوط به ژنcl9 مشاهده میشود درحالیکه درنمونه های نرمال یا باندی مشاهده نشدویااینکه باندبسیارضعیفی قابل مشاهده بود.دراین مطالعه،21مرد(52.5%)و19 زن(47.5%) با میانگین سنی 10±56.1 سال شرکت کردند و 77.5% ایشان (31 نفر) بالاتر از 50 سال سن داشتند. از نظر فاکتور T ، 96.5% بیماران دارای T2 و T3 بودند (P=0.025) و از لحاظ فاکتور N، در 48.3% بیماران تهاجم به غدد لنفاوی مشاهده شد و 22.5% بیماران متاستاز را نشان دادند P=0.013)). بحث: دراین مطالعه بیان ژنBCL9 در نمونه های توموری افزایش 3.5 برابری نسبت به نمونه های نرمال داشت. میتوان گفت ژنBCL9 می تواند ، بعنوان یکی از ژن های دخیل درسرطان کولورکتال عمل کند که با برخی از ژنها مثل TCF،LEF،B-catenin،Pygo برهمکنش دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
92 - PCR-DGGE : روشی نوین در دنیای میکروبیولوژی
آروین توکلیPCR-DGGE یکی از روشهای مولکولی نوین میباشد که در ابتدا برای کشف پلی مورفیسم DNA ابداع شد. این تکنیک قطعات هم اندازهDNA را بر اساس اختلاف توالی جدا میکند. در حال حاضر این تکنیک در حوزه های مختلف علم میکروبیولوژی مانند میکروبیولوژی پزشکی، میکروبیولوژی غذایی و میکروبیولوژی أکثرPCR-DGGE یکی از روشهای مولکولی نوین میباشد که در ابتدا برای کشف پلی مورفیسم DNA ابداع شد. این تکنیک قطعات هم اندازهDNA را بر اساس اختلاف توالی جدا میکند. در حال حاضر این تکنیک در حوزه های مختلف علم میکروبیولوژی مانند میکروبیولوژی پزشکی، میکروبیولوژی غذایی و میکروبیولوژی صنعتی به کار میرود. در این روش پس از استخراج DNA از نمونه مورد نظر، DNA به کمک پرایمرهای یونیورسال از طریقPCR تکثیر میشود. سپس محصولPCR که حاوی قطعات هم اندازه ی DNA میباشد، بر روی ژل DGGE که حاوی شیبی از مواد دناتوره کننده (اوره و فرم آمید) است، قرار میگیرد و الکتروفورز انجام میشود DGGE . DNA ی باکتریهای مختلف را تفکیک میکند که میتوانند برای آنالیز های بعدی مورد استفاده قرار گیرند. علی رغم وجود برخی محدودیت ها مانند محدودیت در سایز توالی مورد استفاده، PCR-DGGE میتواند به عنوان یک تکنیک سریع و کارآمد برای اهداف بسیاری در میکروبیولوژی مورد استفاده قرار گیرد. در این مطالعه ضمن معرفی اجمالی این تکنیک، مزایا و محدودیت های آنرا در تحقیقات میکروبیولوژی مورد بررسی قرار میدهیم. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
93 - تشخیص عوامل باکتریایی مسبب عفونت ادراری و تعیین الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی آنها در بیماران مبتلا به دیابت ملیتوس نوع 2 در شهر کرمانشاه
فرشاد یدالهی الهه تاج بخش حسن ممتاززمینه و هدف: دیابت از جمله شایعترین و مهمترین بیماریهای موجود در جهان میباشد و مبتلایان خود را در معرض خطر بالایی از نظر ابتلا به عفونت قرار می‌دهد. با توجه به شیوع بسیار زیاد دیابت در جوامع کنونی و خطرات ناشی از عفونت ادراری بررسی عوامل ایجاد کننده عفونت ادراری و أکثرزمینه و هدف: دیابت از جمله شایعترین و مهمترین بیماریهای موجود در جهان میباشد و مبتلایان خود را در معرض خطر بالایی از نظر ابتلا به عفونت قرار می‌دهد. با توجه به شیوع بسیار زیاد دیابت در جوامع کنونی و خطرات ناشی از عفونت ادراری بررسی عوامل ایجاد کننده عفونت ادراری و راه صحیح درمان آن بشدت احساس می گردد. روش بررسی: در این پژوهش با کشت ادرار 353 بیمار دیابتی و انجام تست های بیوشیمیایی بر روی نمونه های مثبت، تشخیص نوع باکتری پاتوژن صورت پذیرفته و پس از استخراج DNA از باکتریهای جدا شده از بیماران، آزمون PCR جهت تایید تشخیص دقیق نوع باکتری های عامل عفونت ادراری انجام پذیرفت و با انجام تست آنتی بیوگرام بر روی نمونه های مثبت، درمان مناسب تعیین گردید. یافته ها: ابتلا به عفونت ادراری در مبتلایان به دیابت نوع 2، 3/28% گزارش گردید. باکتریوری بدون علامت1/22% وباکتریوری علامت دار 22/6% گزارش شد. میانگین سن بیماران 15/56 سال بود و شایع ترین باکتری های عامل عفونت ادراری در این بیماران به ترتیب اشریشیا کلی، کلبسیلا پنومونیه، پروتئوس، استافیلوکوکوس ساپروفیتیکوس، اسنیتوباکتر، سیتروباکتر، انتروباکتر، سودوموناس آئروژینوزا و پروویدنسیا بودند. نتیجه گیری:با توجه به اینکه جمعیت باکتریایی عامل عفونت ادراری در بیماران مبتلا به دیابت ملیتوس نوع 2،تقریبا مشابه افراد غیر دیابتی مبتلا به عفونت ادراری در دیگر مطالعات می باشد، در نتیجه درمان آنتی بیوتیکی اولیهجهت بیماران مبتلا به عفونت ادراریدر بیماران دیابتی با بیماران غیر دیابتی یکسان است. بهترین آنتی بیوتیک در این مطالعه نیتروفورانتئین تعیین گردید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
94 - ترانسکریپتومیکس و روش های پر کاربرد بررسی بیان ژنهای دفاعی گیاه
جلال غلام نژادترانسکریپتومیکس یکی از زمینه‌های پیشرفته در زمینۀ علوم بعد از ژنومیک است. علم ترانسکریپتومیکس بر روی میزان بیان ژنها با بررسی سطوح RNA تمرکز میکند. ترانسکریپتومیکس اطلاعات زیادی را در مورد ژنوم، ساختار ژنها و عملکرد ژنها فراهم می-آورد و با استفاده از این اطلاعات مک أکثرترانسکریپتومیکس یکی از زمینه‌های پیشرفته در زمینۀ علوم بعد از ژنومیک است. علم ترانسکریپتومیکس بر روی میزان بیان ژنها با بررسی سطوح RNA تمرکز میکند. ترانسکریپتومیکس اطلاعات زیادی را در مورد ژنوم، ساختار ژنها و عملکرد ژنها فراهم می-آورد و با استفاده از این اطلاعات مکانیسم‌های مولکولی که در فرایندهای بیولوژیکی مختلف سلولی رخ می دهد آشکار میشود. گیاهان بعد از درک بیمارگر سیستم دفاعی خود را فعال میکنند. امروزه ترانسکریپتومیکس کاربرد وسیعی در کشاورزی پیدا کرده و با استفاده از این علم پاسخ به تنش‌های زیستی و غیرزیستی، بیماریهای انباری و شناسایی ارقام مقاوم در بیماری شناسی گیاهی مطالعه می-شود. بررسی بیان ژنها در زمان تنش و شناسایی ژنهای دفاعی نسبت به بیمارگرها، بسیار ضروری است. نتایج تحقیقات ترانسکریپتومیکس در مورد بیان ژن، اطلاعات مرتبط به مکانیسم تحمل و مقاومت به بیمارگرهای گیاهی را افزایش داده و تولید ارقام مقاوم و متحمل از راه روشهای زیست فناوری را هموارتر می سازد. روشهای مختلفی جهت تجزیه پروفایل بیان ژن در گیاهان وجود دارد. روش‌هایی که برای مطالعۀ بیان ژنها مورد استفاده قرار میگیرد به سه دستۀ روشهای متکی بر هیبریداسیون، روشهای مبتنی بر PCR و روشهای متکی بر توالی یابی تقسیم میشوند. در این مقاله مروری بر روش های مطالعۀ بیان ژنها و کاربردهای آن در بیماری شناسی گیاهی پرداخته می شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
95 - شناسایی مولکولی ژنهای حدت چسبندگی، نکروز کننده و همولیزین در سویه های UPEC و APEC جدا شده از نمونههای بالینی و طیور
کیومرث امینی غلامعلی مرادلی سپیده شمس گلیزمینه و هدف: اشریشیاکلی اوروپاتوژنیک(Uropathogenic Escherichia coli ‎) و اشریشیاکلی‌های بیماریزای پرندگان (Avian Pathogenic Escherichia coli ‎) واجد محدوده وسیعی از فاکتورهای حدت در انسان و طیور میباشند. این فاکتورها در ایجاد کلونیزاسیون، تهاجم و متعاقب آن کاهش أکثرزمینه و هدف: اشریشیاکلی اوروپاتوژنیک(Uropathogenic Escherichia coli ‎) و اشریشیاکلی‌های بیماریزای پرندگان (Avian Pathogenic Escherichia coli ‎) واجد محدوده وسیعی از فاکتورهای حدت در انسان و طیور میباشند. این فاکتورها در ایجاد کلونیزاسیون، تهاجم و متعاقب آن کاهش پاسخ دستگاه ایمنی میزبان نقش دارند که شامل ژنهای pap،sfa،afa،hly و cnf میباشند. هدف این مطالعه ردیابی مولکولی ژنهای چسبندگی، نکروز کننده و همولیزین پاتو وارهای UPEC, APEC اشریشیاکلی جدا شده از انسان و طیور است. روش بررسی: در مجموع 36 جدایه اشریشیاکلی از نمونه های بالینی بیماران دارای عفونت ادراری پذیرش شده در بیمارستانهای کرمان و 36 جدایه اشریشیاکلی طیور از دانشکده دامپزشکی استان کرمان اخذ گردید. جدایه ها بر اساس تست های بیوشیمیایی و باکتریولوژی استاندارد تشخیص داده شدند. به منظور شناسایی ژن های حدت pap،sfa،afa،hly و cnf واکنش PCR Multiplex- در شرایط آزمایشگاهی انجام شد. یافتهها: بررسی ژنها نشان داد که در نمونههای طیور تعداد 10 جدایه (7/27) درصد حاوی ژنهای حدت و 22 جدایه (1/)61 درصد در نمونههای انسانی از نظر حضور ژن مثبت بودند. ژنهای cfa و cnf در هیچ یک از نمونههای انسانی و طیور ردیابی نگردید. بیشترین فراوانی مربوط به ژن pap با (33/33) درصد در نمونههای طیور و (8/13) درصد در نمونه-های انسانی گزارش شد. نتیجهگیری: روش PCR راهی در جهت تشخیص سریع فاکتور های حدت در اشریشیاکلی جدا شده از نمونه های دامی و انسان بوده که میتوان از نحوه انتشار و منشاء آلودگی، جهت بررسی‌های اپیدمیولوژیکی و مبارزه سریع با بیماری استفاده نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
96 - بررسی مقاومت دارویی و وجود ژن tem در ایزوله های کلینیکی اشریشیاکلی با روش PCR
سمانه غفاری وسطیسابقه و هدف:اشریشاکلی تولید کننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف(ESBL) به دلیل مقاومت نسبت به آنتی بیوتیکهای مختلف، مشکلات درمانی فراوانی ایجاد نموده است. لذا در این مطالعه به بررسی فراوانی ژن TEM در جدایه های بالینی اشریشیاکلی تولید کننده بتالاکتاماز با طیف گسترده(ESBL)در ب أکثرسابقه و هدف:اشریشاکلی تولید کننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف(ESBL) به دلیل مقاومت نسبت به آنتی بیوتیکهای مختلف، مشکلات درمانی فراوانی ایجاد نموده است. لذا در این مطالعه به بررسی فراوانی ژن TEM در جدایه های بالینی اشریشیاکلی تولید کننده بتالاکتاماز با طیف گسترده(ESBL)در بیمارستان رازی قائمشهر پرداخته شد. مواد و روش ها: تعداد 1200 نمونه ادراری از بیماران بستری وسرپایی بیمارستان رازی قائمشهر مورد بررسی قرار گرفتند و از طریق روش های بیوشیمیایی و مولکولی تایید نهایی اشریشیاکلی انجام شد. سپس مقاومت آنتی بیوتیکی از طریق روش دیسک دیفیوژن و از طریق روش pcr وجود ژن tem بررسی و برای تائید نهایی ژن موردنظر تعیین توالی گردید. نتایج: نتایج نشان داد که 74 جدایه از نوع اشریشیا کلی می باشند.در نتایج آنتی بیوگرام، بیش ترین مقاومت این باکتری در برابر آنتی بیوتیک نالیدیکسیک اسید با 53 نمونه(6/71%) و کم ترین مقاومت در برابر آنتی بیوتیک جنتامایسین با 11 نمونه (15%) مشخص شد.همچنین از بین 74 جدایه اشریشیا کلی، تعداد 30 ایزوله (5/40%) از لحاظESBL مثبت هستند (30 از 74) و از این 30 نمونه، 9 نمونه(30%) حاوی ژنTEM هستند(9 از 30). نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه، هر چند ژن TEMفراوانی چشمگیری نداشت اما فراوانی ESBL بیانگر آن است که در تجویز آنتی بیوتیک ها برای درمان، دقت بیشتری صورت گیرد تا سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک ها افزایش نیابد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
97 - ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن های TEM و SHV در کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی با استفاده از تکنیک Real Time PCR
نجمه طهماسبی بابک خیرخواهزمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک پاتوژن گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن های TEM و SHV در کلبسیلا پنو أکثرزمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک پاتوژن گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن های TEM و SHV در کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی با استفاده ازتکنیک Real- Time PCR می باشد. روش تحقق: تعداد 50 سویه کلبسیلا پنومونیه ظرف مدت 6 ماه، از بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه بیمارستان های شهر کرمان جمع آوری شد. ایزوله ها بر اساس تست های بیوشیمیایی موجود در سیستم API20E به عنوان کلبسیلا پنومونیه شناسایی شدند. تست حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفیوژن انجام گردید. جهت شناسایی مولکولی ژن های TEM و SHV، PCR انجام گردید. برای تعیین اثر بخشی نانو ذره آهن بر روی سویه های موردنظر، از روش براث دایلوشن طبق استاندارد CLSI استفاده و درنهایت Real- Time PCR صورت گرفت. یافته ها: در این مطالعه تعداد 46 نمونه از جدایه ها به صورت فنوتیپی مولد ESBL مثبت بودند. که 48 درصد (22 مورد) واجد ژن SHV ، 13 درصد (6 مورد) واجد ژن TEM و 39 درصد (18 مورد) دارای هر دو ژن SHV +TEM بودند. نانوذره آهن توانست بیان ژن های TEM و SHV را در کلبسیلا پنومونیه کاهش دهد. نتیجه گیری: با توجه به اثر بخش بودن نانوذرات آهن بر روی کلبسیلاهای بتالاکتاماز مثبت، می توان از نانوذره آهن بعنوان یک دوز دارویی استفاده کرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
98 - بررسی بیان ژنaflR در قارچ آسپرژیلوس فلاووس توکسین زای جدا شده از پسته های شهر رفسنجان به روش مولکولی RT-PCR
مژگان سقازاه بیتا نجمیمایکوتوکسین ها از متابولیت های ثانویه قارچ ها هستند که بوسیله تعدادی از قارچ ها بویژه آسپرژیلوس فلاووس و آسپرژیلوس پارازیتیکوس تولید می شوند و می توانند سرطانزا باشند. مواد غذایی در شرایط آب و هوای گرم بستری مناسب برای آلودگی به انواع کپک ها بخصوص گونه های آسپرژیلوس توک أکثرمایکوتوکسین ها از متابولیت های ثانویه قارچ ها هستند که بوسیله تعدادی از قارچ ها بویژه آسپرژیلوس فلاووس و آسپرژیلوس پارازیتیکوس تولید می شوند و می توانند سرطانزا باشند. مواد غذایی در شرایط آب و هوای گرم بستری مناسب برای آلودگی به انواع کپک ها بخصوص گونه های آسپرژیلوس توکسین زا هستند و بدنبال آن باعث تولید آفلا توکسین در مراحل مختلف محصول ، هنگام برداشت و حمل و نگهداری آن می باشند. از آنجایی که ایران یکی از بزرگترین صادرکنندگان پسته درجهان است و یکی از آلودگی های مهم پسته آفلاتوکسین است. هدف از این پژوهش بررسی بیان ژن aflR در قارچ‌های آسپرژیلوس فلاووس توکسین‌زای جدا شده از پسته های شهر رفسنجان به روش مولکولی RT-PCR میباشد. این ژن نقش تنظیم کننده در بیان دیگر ژنهای مسیر بیوسنتز آفلاتوکسین را دارد. در این پژوهش به طور تصادفی از 10 خشکبار فروشی در نقاط مختلف شهر، نمونههای پسته‌ی شهررفسنجان جمع آوری و یک مجموعه از1000 نمونه پسته جمع آوری شد، سپس قارچ های موجود با تکنیک‌های میکروبی جداسازی شدند. با بررسی‌های ماکروسکوپی و میکروسکوپی وجود قارچ آسپرژیلوس فلاووس، تایید شد. سپس محتویات ژنومی و RNA قارچ‌های توکسین‌زا استخراج ، تخلیص و آزمایش RT-PCR جهت بررسی بیان ژن مورد نظر انجام شد. در این تحقیق 42 سویه قارچ آسپرژیلوس فلاووس جدا شده از پسته‌های محصول شهر رفسنجان مورد بررسی قرار گرفت. درنهایت 9 نمونه از 42(4/21%) نمونهی بررسی شده برای ژنaflR دارای بیان و به عبارت دیگر توکسین‌زا بودند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
99 - شناسایی مولکولی ژن های TEM و CTX در سویه های کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی بیمارستان های شهر ایرانشهر
مهناز تقی مصلح لاله خواجه کریم الدینیزمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک باکتری بیماریزای گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق شناسایی مولکولی ژن های TEM و CTX در سویه های کلبسیلا پ أکثرزمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک باکتری بیماریزای گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق شناسایی مولکولی ژن های TEM و CTX در سویه های کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی بیمارستان های شهر ایرانشهر می باشد. روش تحقق: تعداد 50 سویه کلبسیلا پنومونیه ظرف مدت 6 ماه، از بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه بیمارستان های شهر ایرانشهر جمع آوری شد. ایزوله ها بر اساس تست های بیوشیمیایی به عنوان کلبسیلا پنومونیه شناسایی شدند. تست حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفیوژن انجام گردید. جهت شناسایی مولکولی ژن های TEM و CTX، PCR انجام گردید. یافته ها: براساس نتایج PCR از تعداد 43 (86%) نمونه که به طور فنوتیپی دارای آنزیم های ESBL بودند، تعداد 20(47%) ایزوله دارای ژن CTX، 8 مورد (18%) دارای ژن TEM ، و 15 مورد (34%) دارای هر دو ژن CTX و TEM بودند. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه شیوع بالایی( p<0/05) از ایزوله های کلبسیلا پنومونیه مقاوم به چند دارو و تولید کننده ESBL را در بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه نشان می دهد که این امر بر سیاست های مناسب برای کنترل عفونت تاکید دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
100 - تیپ بندی مولکولی سویه های اشریشیاکلی اوروپاتوژنیک(UPEC) در استان اصفهان و دسته‌بندی ژنتیکی جدایههای سروگروپ O25 به روش ERIC-PCR
حسن ممتاز فاطمه رییسی زهرا بم زادهسابقه و هدف: اشریشیاکلی شامل طیف گسترده ای از سویه های مختلف در اکوسیستم ها با تنوع زیاد در ژنوم آنها است. برخی از انواع سویه ها باعث ایجاد بیماری های جدی مانند عفونت های دستگاه ادراری (UTI) می گردند. اشریشیاکلی اوروپاتوژنیک (UPEC) شایع ترین عامل ایجاد عفونت ادراری در ا أکثرسابقه و هدف: اشریشیاکلی شامل طیف گسترده ای از سویه های مختلف در اکوسیستم ها با تنوع زیاد در ژنوم آنها است. برخی از انواع سویه ها باعث ایجاد بیماری های جدی مانند عفونت های دستگاه ادراری (UTI) می گردند. اشریشیاکلی اوروپاتوژنیک (UPEC) شایع ترین عامل ایجاد عفونت ادراری در انسان است. هدف از این مطالعه بررسی شیوع انواع سروگروپ های O در جدایه های اشریشیاکلی جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت ادراری در استان اصفهان و دسته‌بندی ژنتیکی جدایههای سروگروپ O25، به روش ERIC-PCR می باشد. مواد و روش کار: 226 نمونه ادرار از بیماران مبتلا به عفونت ادراری در بیمارستان های استان اصفهان جمع آوری و مورد بررسی قرار گرفتند. جدایه های اشریشیاکلی با استفاده از روش های بیوشیمیایی شناسایی شدند. سروگروپ های این جدایه ها به روش PCR تعیین و دسته بندی ژنتیکی جدایه های دارای سروگروپ O25 با استفاده از روش ERIC-PCR انجام گرفت. نتایج: از میان کل نمونه های مورد مطالعه، 96 جدایه اشریشیاکلی جدا گردید. شایع ترین انواع سروگروپ O، O25(5/37 درصد)، O21(37/9 درصد) و O6(33/8 درصد) بودند. دسته بندی ژنتیکی جدایه های دارای سروگروپ O25، 25 پروفایل مختلف را در میان این 36 جدایه نشان داد. نتیجه گیری: تکنیک ERIC-PCR روش سریع، حساس و ارزان قیمت می باشد. وجود تنوع ژنتیکی در جدایه ها نشانگر منابع مختلف آلوده کننده دستگاه ادراری به این باکتری است و این روش یک تکنیک مناسب جهت تایپینگ مولکولی سویه های اشریشیاکلی جدا شده از منابع مختلف عفونت های مجاری ادراری می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
101 - بررسی مولکولی ژنهای slyA، stn، sopB، Phop/Q و spvc در سالمونلا تیفیموریوم جدا شده از نمونههای بالینی با روش Multiplex PCR
زهرا معصومعلی نژاد بابک خیرخواه فهیمه میرزادهسابقه و هدف: سالمونلا یک ارگانیسم رودهای گرم‌‌منفی و عامل بروز مسمومیتهای غذایی در انسان میباشد. جنس سالمونلا دارای پنج ژن ویرولانس stn،Phop/Q ،spvc ، slyAو sopB میباشد. این ژنها پروتئین‌‌هایی را در قسمت‌‌های مختلف باکتری کد مینمایند که مقابله با سیستم ایمنی، أکثرسابقه و هدف: سالمونلا یک ارگانیسم رودهای گرم‌‌منفی و عامل بروز مسمومیتهای غذایی در انسان میباشد. جنس سالمونلا دارای پنج ژن ویرولانس stn،Phop/Q ،spvc ، slyAو sopB میباشد. این ژنها پروتئین‌‌هایی را در قسمت‌‌های مختلف باکتری کد مینمایند که مقابله با سیستم ایمنی، کمپلمان و مرگ داخل سلول را باعث میشوند. هدف از مطالعه حاضر شناسایی ژن‌‌هایویرولانسدر سویههای سالمونلاتیفی‌‌موریوم جدا شده از نمونههای بالینی به روش Multiplex PCR و تعیین الگوی مقاومت آنتیبیوتیکی میباشد. مواد و روشها: در این مطالعه توصیفی- مقطعی طی سال 1396 تعداد 60 نمونه مدفوع بهمنظور شناسایی سالمونلا تیفیموریوم از بیمارستان البرز شهر کرج جمعآوری شد. آزمون حساسیت آنتیبیوتیکی روی محیط مولر هینتون آگار و بر اساس استاندارد (CLSI) انجام گردید. آزمون Multiplex PCR جهت تشخیص ژنهای ویرولانس با استفاده از آغازگرهای اختصاصی انجام شد. نتایج: نتایج آزمون حساسیت آنتیبیوتیکی نشان داد تمامی ایزولهها دارای حساسیت به ایمیپنم، جنتامایسین و آمیکاسین بودند. همچنین، فراوانی ژنهای Phop/Q، slyAوstn بهترتیب برابر 100، 3/98 و 6/91 درصد بود و ژنهای sopB و Spvc در جدایههای سالمونلا تیفیموریوم مشاهده نگردید. نتیجهگیری: نتایج مطالعه حاضر حاکی از شیوع ژنهای ویرولانس در سویههای بالینی سالمونلاتیفی‌‌موریوم میباشد که میتواند بهعنوان زنگ خطری برای انتشار این ژنها به دیگر سروتیپهای سالمونلا باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
102 - بررسی آلودگی استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های غذایی و تعیین ارتباط اپیدمیولوژیک آن با کارکنان تولید کننده آن ها به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز
سید منصور میبدی زهرا معصومعلی نژاد مریم فخرآبادیمقدمه: غذاهای سریع و سرد، به علت عدم نیاز به زمان پخت و هنگام آماده سازی با دست کارگران رستوران در تماس هستند، خطرات میکروبیولوژیکی مصرف کنندگان از این محصولات افزایش یافته است. هدف از این تحقیق بررسی آلودگی استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های غذایی با روش واکنش زنجیره ای أکثرمقدمه: غذاهای سریع و سرد، به علت عدم نیاز به زمان پخت و هنگام آماده سازی با دست کارگران رستوران در تماس هستند، خطرات میکروبیولوژیکی مصرف کنندگان از این محصولات افزایش یافته است. هدف از این تحقیق بررسی آلودگی استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های غذایی با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بود. روش کار: در این تحقیق تعداد 50 نمونه از موادغذایی (همبرگر دست ساز، فلافل، سمبوسه سیب زمینی، سمبوسه پیتزایی، کباب، سالاد ماکارونی) از 10 فست فود فروشی در سطح شهرستان سیرجان در یک بازه زمانی 3 ماهه از ابتدای تیر لغایت پایان شهریور 1396 جمع آوری گردید. همچنین 36 نمونه ی سواب بینی از کارکنان آن ها تهیه شد و توسط آزمون های میکروبیولوژی و مولکولی از نظر حضور استافیلوکوکوس اورئوس مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: آلودگی مواد غذایی به استافیلوکوکوس اورئوس 6 درصد و آلودگی کارکنان به این باکتری، 44/19 درصد بود. بیشترین حساسیت به آنتی بیوتیک کوتریموکسازول، سفتی زوکسیم، سیپروفلوکساسین به ترتیب 100، 90، 90 درصد و بیشترین مقاومت به آنتی بیوتیک کانامایسین، لینزولید، آزیترومایسین به ترتیب 60، 35، 30 درصد گزارش شد. نتیجه گیری: بر اساس نتیجه ی تحقیق حاضر می توان گفت، از آنجا که مراحل تهیه و تولید همبرگر دست ساز، فلافل، سمبوسه، کباب و سالاد ماکارونی در ایران به صورت دستی است، احتمال آلودگی مواد غذایی از طریق نیروهای انسانی کاملا وجود دارد. لذا آموزش بهداشت شخصی و محیط به منظور کاهش میزان استافیلوکوکوس اورئوس در افرادی که در تهیه غذا نقش دارند از اهمیت بالایی برخوردار است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
103 - بررسی تنوع ژنتیکی جدایههای استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی‌سیلین جداسازی شده از نمونههای بالینی با روش RAPD-PCR
برومند مرواریدی شهرام نخجوان شهرام ننه کرانی رضا یاریسابقه و هدف:استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی سیلین عامل مهم عفونتهای اکتسابی بیمارستانی است. تنوع ژنتیکی در استافیلوکوکوس اورئوس میتواند بر پاسخ به درمان تأثیر بگذارد و لذا شناسایی آنها در انتخاب آنتی بیوتیکهای کارآمد، مؤثر میباشد. در این مطالعه سعی شد تا تنوع ژنتیکی أکثرسابقه و هدف:استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی سیلین عامل مهم عفونتهای اکتسابی بیمارستانی است. تنوع ژنتیکی در استافیلوکوکوس اورئوس میتواند بر پاسخ به درمان تأثیر بگذارد و لذا شناسایی آنها در انتخاب آنتی بیوتیکهای کارآمد، مؤثر میباشد. در این مطالعه سعی شد تا تنوع ژنتیکی جدایههای MRSA با پرایمرهای تصادفی تعیین گردد.مواد و روش کارها:پژوهش توصیفی- مقطعی حاضر در سال 1394 بر روی 50 ایزوله MRSAانجام شد. ژنوم با روش Boiling استخراج گردید. تکنیک RAPD-PCR با 16پرایمر انجام و قرابت ژنتیکی ایزولهها با استفاده از ماتریس یک و صفر و خوشه‌بندی و رسته‌بندی با کمک نرم‌افزار NTSYS و MVSP انجام شد.نتایج:بیشترین و کمترین باندهای تولیدی مربوط به پرایمرهای 4M و 9 Mمیباشد. بیشترین میانگین باند برای هر ایزوله- پرایمر مربوط به پرایمر 4M با 1/8 باند است. بیشترین باند پلیمرف با 36 باند مربوط به پرایمر 5M میباشد. بزرگترین و کوچکترین باندها مربوط به پرایمر 2M باKb 6/3 و پرایمر 12M به میزان bp100 بود. 16 آغازگر 583 باند تشکیل دادند که 412 (91/70%) باند پلیمرف و 171 (09/29%) باند اختصاصی بود.این روش ایزولهها را به دو خوشه عمده تقسیم‌بندی کرد.نتیجهگیری:مطالعه نشان داد ایزولهها از نظر ژنتیکی هتروژن میباشند. نتایج بیانگر تواناییRAPD-PCR در تمایز ایزولهها است. رعایت بهداشت توسط افراد مراجعه‌کننده به مراکز درمانی و نیز استریل لوازم و وسایل مورد استفاده عمومی بیماران و مراجعان این مراکز مورد تاکید است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
104 - بررسی فراوانی ژنهای اینتگرون کلاس 3، 2، 1 و بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف bla-CTX-M، bla-SHV و bla-TEMدر باسیل‌های گرم منفی جدا شده از بیمارستان آموزشی کودکان بندر عباس (1396)
مهشید وحدانی نوشین خندان افسانه کرمستجیسابقه و هدف: باسیل‌های گرم منفی پاتوژنهای مهم بیمارستانی‌اند که شیوع ژنهای بتالاکتاماز وسیع‌الطیف و اینتگرون‌ها در آنها رو به افزایش است. لذا شناسایی این ژنهای مقاومت آنتی بیوتیکی به منظور جلوگیری از گسترش سویههای مقاوم، ضروری است. هدف این مطالعه بررسی فراوانی ژنها أکثرسابقه و هدف: باسیل‌های گرم منفی پاتوژنهای مهم بیمارستانی‌اند که شیوع ژنهای بتالاکتاماز وسیع‌الطیف و اینتگرون‌ها در آنها رو به افزایش است. لذا شناسایی این ژنهای مقاومت آنتی بیوتیکی به منظور جلوگیری از گسترش سویههای مقاوم، ضروری است. هدف این مطالعه بررسی فراوانی ژنهای اینتگرون کلاس 1،2،3 و بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف bla-CTX-M ،bla-SHV و bla-TEM در باسیل‌های گرم منفی جدا شده از بیمارستان آموزشی کودکان بندر عباس میباشد. مواد و روش کار: تعداد 60 سویه باسیل گرم منفی از نمونههای بالینی، جداسازی و با تستهای بیوشیمیایی شناسایی و الگوی مقاومت آنتیبیوتیکی آنها با روش انتشار در ژل تعیین شد. PCR چندگانه برای شناسایی ژنهای اینتگرون کلاس1،2،3 و از PCR به منظور شناسایی bla-CTX-M ،bla-SHV و bla-TEM استفاده شد. نتایج: بیشترین فراوانی سویهها مربوط به اشرشیاکلی،70% و بیشترین میزان مقاومت و حساسیت به ترتیب مربوط به سولفومتوکسازول 68% و جنتامایسین 75% بود. 37 سویه (7/61%) دارای ژن اینتگرون کلاس 1، و 19 سویه (7/26%)، دارای ژن اینتگرون کلاس 2میباشند. اینتگرون کلاس 3 در هیچ یک از سویهها مشاهده نشد. بیشترین فراوانی ژنهای کدکننده بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف به ترتیب مربوط به ژن bla-CTX-M (40 مورد، 7/66%)، bla-TEM (19مورد، 7/31%) و bla-SHV (6 مورد، 10%) میباشد. نتیجهگیری: در مطالعه حاضر ارتباط معنیداری 05/0>P بین حضور ژنهای اینتگرون کلاس 2 و 1 و بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف bla-CTX-M،bla-SHV و bla-TEM و مقاومت آنتیبیوتیکی مشاهده گردید. از این‌رو شناسایی ژنهای مقاومت آنتیبیوتیکی و استفاده از روش درمانی مناسب بر پایه تعیین الگوی آنتیبیوگرام سویهها توصیه میگردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
105 - بررسی ضایعات کاندیدایی ناخن و تعیین هویت گونههای جدا شده با روشهای قارچ‌شناسی و مولکولی
مژگان سقازاه الهام نجفیهدف:اونیکومایکوزیس شایعترین بیماری ناخن محسوب میشود که مخمرها از عوامل مهم بروز آن میباشند. هدف مطالعه حاضر بررسی ضایعات کاندیدیایی ناخن و تعیین هویت گونههای جدا شده PCR-RFLP میباشد. روش‌شناسی: در این مطالعه مقطعی از 280 بیمار دچار دیستروفی ناخن مراجعه‌کننده به آزم أکثرهدف:اونیکومایکوزیس شایعترین بیماری ناخن محسوب میشود که مخمرها از عوامل مهم بروز آن میباشند. هدف مطالعه حاضر بررسی ضایعات کاندیدیایی ناخن و تعیین هویت گونههای جدا شده PCR-RFLP میباشد. روش‌شناسی: در این مطالعه مقطعی از 280 بیمار دچار دیستروفی ناخن مراجعه‌کننده به آزمایشگاه تخصصی قارچ‌شناسی در تهران نمونه تهیه شد. آزمایش مستقیم و کشت در محیط‌های سابورودکستروز آگار، کروم آگار کاندیدا، کورن میل آگار و تست لوله زایا بر روی مخمرهای جدا شده از ضایعات ناخن انجام گرفت و در نهایت برای تشخیص نهایی گونههای کاندیدایی که تعیین هویت نشده، روش مولکولی PCR-RFLP با استفاده از آنزیم Msp1 انجام شد. یافتهها:از 280 بیمار، 87 نفر انیکومایکوزیس کاندیدایی داشتند که 54 مورد کاندیدا آلبیکنس و پس از آن به ترتیب کاندیدا پاراپسیلوزیس 16 مورد، کاندیدا تروپیکالیس7 مورد، کاندیدا گلابراتا 6 مورد و کاندیدا کروزئی 3 مورد و یک مورد کاندیدا گیلرموندی بود. به منظور تعیین هویت گونههای مجهول و همچنین تائید نتایج حاصل از روشهای تشخیصی، تست ژنوتیپی بر روی 20 نمونه انجام گردید و نتایج حاصل از کشت و آزمایش مستقیم و همچنین تعیین هویت گونههای مجهول را تایید کرد. نتیجهگیری:به دلیل زمانبر بودن مراحل تشخیصی معمول در آزمایشگاه‌ها از جمله کشت، استفاده از روشهای ژنوتیپی سریع و مطمئن مانند PCR-RFLP که شناسایی را در حد گونه انجام می‌دهد، بسیار کارآمد خواهد بود و روشهای نوین مولکولی میتواند در تشخیص و شناسایی گونه‌ها بسیار کمک کننده باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
106 - اثرات نانوذرات اکسید روی بر بیان ژنهای انتقال‌دهنده روی 1-4 در سل لاین هیپوکامپ موشهای صحرایی نر
مائده نیله چی اکرم عیدی حمید گله داری مهناز کسمتیسابقه و هدف: عنصر روی نقش مهمی در کارکرد ارگانهای حیاتی، به ویژه سیستم عصبی مرکزی ایفا مینماید. اختلال در هموستازی روی موجب ایجاد و پیشرفت بیماریهای سیستم عصبی نظیر آلزایمر، افسردگی، اختلال در یادگیری و استرس میگردد. هموستازی روی در بدن توسط پروتئینهای ZnT و Z أکثرسابقه و هدف: عنصر روی نقش مهمی در کارکرد ارگانهای حیاتی، به ویژه سیستم عصبی مرکزی ایفا مینماید. اختلال در هموستازی روی موجب ایجاد و پیشرفت بیماریهای سیستم عصبی نظیر آلزایمر، افسردگی، اختلال در یادگیری و استرس میگردد. هموستازی روی در بدن توسط پروتئینهای ZnT و ZIP صورت میپذیرد. هدف مطالعه حاضر بررسی اثر نانوذرات اکسید روی در بیان ژنهای انتقال‌دهنده روی 1-4 موسوم به Znt1،Znt2، Znt3 و Znt4در سلولهای هیپوکامپ به عنوان یکی از بافتهایی که تراکم بالایی از روی را در خود جای داده، میباشد. روش کار: ابتدا پاساژ سلولی رده سلولی هیپوکامپ انجام شد، سپس تست MTT assay برای نانوذره اکسید روی صورت گرفت. در مرحله بعد استخراج RNA و سنتز CDNA انجام شده و جهت اطمینان از خلوص نمونه RNA از اسپکتروفتومتر نانودراپ استفاده گردید و پرایمرهای اختصاصی و مناسب ژنهای مورد نظر طراحی و سنتز شد. سپس با استفاده از Real-Time PCR تغییرات بیان ژنهای Znt1، Znt2، Znt3 و Znt4 بررسی گردید. یافتهها: غلظتهای 10 و 20 μg/mL از نانوذره اکسید روی ضمن ایجاد کمترین سیتوتوکسیتی، موجب افزایش بیان معنادار هر چهار ژن Znt1،Znt2، Znt3 و Znt4 در رده سلولی هیپوکامپ موش صحرایی گردید. نتیجهگیری: نانوذره اکسید روی میتواند با افزایش بیان ژنهای انتقال‌دهنده روی Znt1،Znt2، Znt3 و Znt4 در درمان بیماریهای ناشی از اختلال هموستازی روی نظیر آلزایمر، افسردگی، اختلال در یادگیری و استرس مورد بررسی داروشناسی قرار گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
107 - مطالعه ی مولکولی ژنهای مشترک در تکامل سلولی و سرطان بر روی بافت بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال
شیرین مرادی فرد شهلا محمد گنجی زرین مینوچهرمقدمه و هدف:سرطان کولورکتال سومین سرطان شایع در مردان و دومین سرطان شایع در زنان در جهان است.ژن Axinشامل axin1و axin2می باشدC-mycودیگر ژنهای این خانواده فاکتورهای رونویسی را کد می کنند که نقش حیاتی را درتکثیر سلولی، رشد، تمایز و آپاپتوز بازی می نمایند.هدف از انجام این أکثرمقدمه و هدف:سرطان کولورکتال سومین سرطان شایع در مردان و دومین سرطان شایع در زنان در جهان است.ژن Axinشامل axin1و axin2می باشدC-mycودیگر ژنهای این خانواده فاکتورهای رونویسی را کد می کنند که نقش حیاتی را درتکثیر سلولی، رشد، تمایز و آپاپتوز بازی می نمایند.هدف از انجام این مطالعه، ارزیابی نیمه کمی بیان ژنهایAXIN1و CMYCدر mRNAبافت بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کولورکتال و ارتباط خاموش یا روشن بودن این ژنها در هر یک از مراحل توموری با فاکتورهای پاتولوژیک بیماران است. روش کار:بدین منظور بررسی ها بر روی 54 نمونه ی توموری و 41 نمونه ی نرمال(بافت سالم کنارناحیه توموری) از 54 بیمار مراجعه کننده به بیمارستان امام خمینی تهیه شد و آزمایش RT-PCRبر روی cDNAسنتز شده حاصل از mRNAبافت ها با پرایمرهای بتااکتین و ژنهای AXIN1CMYCانجام شد.یافته ها:باتوجه به نتایج به دست آمده، بیان ژن AXIN1در 55% از نمونهها روشن و در 45% از نمونه ها خاموش بود و بیان ژن C-MYCدر87/5% از نمونه ها روشن و در 12/5% از نمونه ها خاموش بود.آنالیزی آماری توسط نرم افزارSPSSو آزمون های، t-Testو X2مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت که نشان داد تفاوت معناداری میان بیان ژنهای AXIN1و C-MYCدر دو گروه از نمونه های نرمال و تومور وجود دارد(0/05Pنتیجه گیری:نتایج حاصله نشان داد که بیان ژنهای AXIN1و C-MYCکه همواره در تکامل سلولی نقش داشتند و بسیار موثر ظاهر می شدند در بیماران مبتلا به سرطان کولورکتال افزایش می یابد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
108 - جداسازی باسیلوس های سرئوس از مواد غذایی و مطالعه تاثیر سایتو توکسیسیته آنها بر روی سلول های Vero
زهرا دیلمی خیابانی شهرزاد نصیری سمنانیمقدمه و هدف:باسیلوس سرئوس از مهم ترین باکتری های عامل مسمومیت غذایی در انسان می باشد. انتروتوکسین های سه جزیی این باکتری شامل کمپلکس های HBLو NHEمی باشد که از ژن های این کمپلکس می توان جهت شناسایی سویه های بیماری زا استفاده نمود. هدف از این مطالعه بررسی میزان شیوع ژن ها أکثرمقدمه و هدف:باسیلوس سرئوس از مهم ترین باکتری های عامل مسمومیت غذایی در انسان می باشد. انتروتوکسین های سه جزیی این باکتری شامل کمپلکس های HBLو NHEمی باشد که از ژن های این کمپلکس می توان جهت شناسایی سویه های بیماری زا استفاده نمود. هدف از این مطالعه بررسی میزان شیوع ژن های انتروتوکسیژنیک در باسیلوس سرئوس های جدا شده از مواد غذایی مختلف و اثر آن بر روی سلول های Veroمی باشد.روش کار:در این مطالعه، 220 نمونه غذایی شامل 80 فرآورده گوشتی آماده، تعداد 20 نمونه لبنیات شامل شیر پاستوریزه و محلی و پنیر، خامه و بستنی و20 نمونه برنج و100 نمونه سالاد های سرو شده در رستوران های شهر تبریز و زنجان در بین سال های 1393-1391 جمع آوری شده و از نظر آلوده بودن به باکتری باسیلوس سرئوس هم از نظر بیوشیمیایی و هم مولکولی بررسی گردید. سپس سویه های حاوی کمپلکس NHEHBLو یا هردو کمپلکس با پرایمرهای اختصاصی و روش PCRتفکیک شدند. باسیلوس سرئوسهایی که هر دو کمپلکس را دارا بودند، جهت بررسی میزان سایتو توکسیسیتی سلول های Veroاستفاده شد.یافته ها:از نمونه های غذایی مورد مطالعه، 100 نمونه آلوده به باسیلوس سرئوس بودند که از این تعداد 40 جدایه حاویNHE ، 23 نمونه حاوی HBLو 17 نمونه هر دو کمپلکس را نشان دادند. انکوباسیون سلول های Veroبا باسیلوس سرئوس های حاوی HBLو NHEنشان داد که این باکتری ها اثر سایتو توکسیک بر روی آن ها داشته و باعث تغییر شکل و از بین رفتن 80 درصد سلول ها شدند.نتیجه گیری:استفاده از تکنیک و روش سریع PCRبرای تشخیص حضور باسیلوس سرئوس انتروتوکسیژنیک در غذا از اهمیت زیادی برخودار است تا از سلامتی غذای مصرفی اطمینان حاصل شود. افزایش اطلاعات درباره بیماری زایی و شیوع ژن های عامل مسمومیت می تواند باعث کاهش مسمومیت های غذایی گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
109 - ارزیابی سطح بیان ژن CXCL12در رده سلولی آدنوکارسینومای ریه A549با استفاده از روشReal Time PCR
ریحانه محبوبی جلیل فلاح مهرآبادی الهه علی عسگریزمینه و هدف:سرطان ریه شایع ترین بدخیمی و اولین عامل مرگ و میر ناشی از سرطان در میان زنان و مردان جهان است، به طوری که بقای 5 ساله بیماران حدود 15% میباشد. با توجه به نقش تهاجمی CXCL12و چالشهای موجود درمطالعات مختلف در بیان و عدم بیانCXCL12 و وجود متاستاز در مراحل اولیهی أکثرزمینه و هدف:سرطان ریه شایع ترین بدخیمی و اولین عامل مرگ و میر ناشی از سرطان در میان زنان و مردان جهان است، به طوری که بقای 5 ساله بیماران حدود 15% میباشد. با توجه به نقش تهاجمی CXCL12و چالشهای موجود درمطالعات مختلف در بیان و عدم بیانCXCL12 و وجود متاستاز در مراحل اولیهی آدنوکارسینومای ریه، رده سلولیA549انتخاب شد تا میزان بیان ژنCXCL12در آن مورد بررسی قرار گیرد.روش کار:در این مطالعه رده سلولی A549در محیط کشت DMEMحاوی 10% سرم گاوی و 1% پنی سیلین-استرپتومایسین کشت داده شد. از رده ی سلولی مذکور RNAاستخراج گردید و پس از ارزیابی کمی و کیفی آن،cDNAسنتز شد. سپس میزان بیان ژن CXCL12با روش Real Time PCRمورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها:بیان اندکCXCL12در رده سلولی آدنوکارسینومای ریه A549نشان دهندهی آن است که CXCL12میتواند به عنوان یک مارکر بالقوه برای اهداف پیشگوییکننده و در نهایت درمانی در نظر گرفته شود.نتیجه گیری:CXCL12در رده سلولیآدنوکارسینومای ریه A549بیان کمی دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
110 - شناسایی باسیلوس سرئوس ها ی انتروتوکسی ژنیک در غذا های گوشتی آماده در شهر زنجان
زهرا دیلمی خیابانی غزاله شمس المعالیزمینه وهدف: بسیاری از سویههای باسیلوس سرئوس باعث مسمومیت غذایی از نوع اسهالی و استفراغی میشوند. بیماریهای نوع اسهالی توسط انتروتوکسینهای همولیزین HBL، غیرهمولیتیک NHEو سیتوتوکسین Kایجاد میگردد. از آنجا که مصرف غذاهای گوشتی آماده در کشورهای درحال توسعه همچون ایران أکثرزمینه وهدف: بسیاری از سویههای باسیلوس سرئوس باعث مسمومیت غذایی از نوع اسهالی و استفراغی میشوند. بیماریهای نوع اسهالی توسط انتروتوکسینهای همولیزین HBL، غیرهمولیتیک NHEو سیتوتوکسین Kایجاد میگردد. از آنجا که مصرف غذاهای گوشتی آماده در کشورهای درحال توسعه همچون ایران رو به افزایش می باشد و نیز گزارش دقیقی در رابطه با میزان آلودگی این باکتری در دسترس نمی باشد، هدف از این پژوهش شناسایی و جداسازی باسیلوس سرئوس های انترو توکسی ژنیک و بررسی شیوع آن است.روش کار:در این مطالعه وجود باسیلوس سرئوس در 80 نمونهی مواد گوشتی مختلف (سوسیس، کالباس، همبرگر و کباب های آماده) خریداری شده از فروشگاهها در شهر زنجان مورد آزمایش قرار گرفت. جداسازی باسیلوس سرئوس با استفاده از محیط کشت اختصاصی استفاده از محیط کشت انتخابی (پلیمیکسین، زردهی تخممرغ، مانیتول، فنلرد آگار) انجام گردید. آزمونهای تاییدی بیوشیمیایی و به دنبال آن تایید مولکولی باسیلوس سرئوس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی انجام شد. نمونههای مثبت باسیلوس سرئوس جهت بررسی ژن های کمپلکسNHمورد آزمایش قرار گرفتند.یافته ها:از 80 نمونه مورد بررسی 32 نمونه آلوده به باسیلوس سرئوس بودند و در بین این تعداد، باسیلوس سرئوس های جدا شده از 14 نمونه حاوی ژن های کمپلکس NHEبودند.نتیجه گیری: استفاده از تکنیک و روش سریع برای تشخیص حضور باسیلوس سرئوس انتروتوکسی ژنیک در غذا از اهمیت زیادی برخودار است تا از سلامتی غذای مصرفی اطمینان حاصل شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
111 - بررسی چند شکلی ژن GDF9 در گوسفند قره گل و ارتباط آن با چند قلوزایی
رضا سید شریفی نجات بادبرین امجد بهمنی علی مجتهدینزمینه و هدف:یکی از صفات بسیار مهم و اقتصادی در پرورش گوسفند چند قلوزایی است. مطالعات ژنتیکی مشخص نموده است که چند قلوزایی تحت تاثیر مجموعهای از ژنها معروف به ژنهای باروری قرار دارد. از جمله این ژن ها، ژن GDF9است که بر روی کروموزوم شماره 5 گوسفند شناسایی گردید. پژوهش أکثرزمینه و هدف:یکی از صفات بسیار مهم و اقتصادی در پرورش گوسفند چند قلوزایی است. مطالعات ژنتیکی مشخص نموده است که چند قلوزایی تحت تاثیر مجموعهای از ژنها معروف به ژنهای باروری قرار دارد. از جمله این ژن ها، ژن GDF9است که بر روی کروموزوم شماره 5 گوسفند شناسایی گردید. پژوهش حاضر با هدف بررسی چند شکلی ژن GDF9و رابطه آن با صفت چندقلوزایی در گوسفند قره گل انجام گرفت. روش کار:برای این منظور از 100 راس گوسفند ماده قره گل در ایستگاه اصلاح نژاد قره گل سرخس به صورت تصادفی نمونه خون تهیه و اطلاعات زایش آن ها ثبت گردید. پس از استخراج DNAبا استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی یک قطعه 1503 جفت بازی از ژن GDF9تکثیر شد. قطعه تکثیر شده با استفاده از آنزیم Rsa Iهضم گردید. با استفاده از نرم افزار SAS 9.1ارتباط بین ژنوتیپهای شناسایی شده و صفت چند قلوزایی بررسی شد.یافته ها:نتایج حاصل از هضم آنزیمی وجود جهش را در این جایگاه ژنی تایید نمود و رابطه معنیدار(05/0P) بین ژنوتیپهای مشاهده شده و صفت چند قلوزایی نشان داد، به طوری که حیوانات هتروزیگوت نسبت به هموزیگوتها میزان چند قلوزایی بالاتری داشتند.نتیجه گیری: جهش ایجاد شده در ژن GDF9جهش مفیدی بوده و اقدام برای تثبیت این جهش در طی سالهای آینده به احتمال زیاد موجب افزایش چند قلوزایی، افزایش راندمان تولید مثلی و در نهایت افزایش درآمد دامداران خواهد شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
112 - بررسی پلی مورفیسم ژن1DISCدخیل در تکامل قشر مخ و توسعه شبکة عصبی بیماران اسکیزوفرنی: اولین مطالعه بر روی یک جمعیت ایرانی
علی رضا پور طالبی فیروزآبادی اباصلت حسین زاده کلاگر جلیل فلاح مهرآبادی غلامرضا بیدخوریزمینه و هدف:اسکیزوفرنی یک بیماری شایع روانی با وراثت بالا و فنوتیپ متغیر است و 1 DISCنقش مهمی را در توسعه قشر مخ ایفا میکند. پلیمورفیسم در این ژن با مدل‌های بیولوژیکی عصبی اسکیزوفرنی که کمبود قشر مغز در پاتوفیزیولوژی آن دخیل است ارتباط دارد. این پژوهش با هدف تشخیص پل أکثرزمینه و هدف:اسکیزوفرنی یک بیماری شایع روانی با وراثت بالا و فنوتیپ متغیر است و 1 DISCنقش مهمی را در توسعه قشر مخ ایفا میکند. پلیمورفیسم در این ژن با مدل‌های بیولوژیکی عصبی اسکیزوفرنی که کمبود قشر مغز در پاتوفیزیولوژی آن دخیل است ارتباط دارد. این پژوهش با هدف تشخیص پلی مورفیسم2738864 rs، در ژن 1 DISCدر مبتلایان به بیماری اسکیزوفرنی و مقایسه آن با افراد سالم انجام شد.روش کار:این پژوهش برای اولین بار در ایران بر روی ۳۰۰ فرد مبتلا به بیماری اسکیزوفرنی که بر اساس روش DSM-IVانتخاب گردیدند و ۳۰۰ فرد سالم صورت گرفت. در این مطالعه از پرسش‌نامه جهت جمعآوری اطلاعات استفاده شد. برای بررسی این پلیمورفیسم از تکنیک Nested allele specific PCRاستفاده گردید و برای تأیید و صحت پژوهش انجام گرفته ۵۰ عدد از نمونهها توالی یابی شده و نتایج با توالی‌های ژنی موجود در بانک ژن هم‌تراز گردید و جواب نهایی با استفاده از نرم‌افزارSPSS ver.22و SNP Analyzerمورد تجزیه‌وتحلیل آماری قرار گرفت.یافته ها:بررسی پلی مورفیسم2738864 rsدر جمعیت موردبررسی در ایران نشان داد که این پلی مورفیسم با اسکیزوفرنی ارتباط دارد و یافته‌های46/385 Chi-square=، 0000/0pT371/0/C926/0 Allele Frequency=به دست آمد.نتیجه گیری:یافته‌های این تحقیق نشان داد که این پلی مورفیسم با بیماری اسکیزوفرنی در جمعیت ایرانی مرتبط است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
113 - بررسی تاثیر آلودگی داروی ایبوژروفن بر روی تغییرات ژنتیکی گورخرماهی به روش QPCR
مهسا افشاری کاشانیان پرگل قوام مصطفوی علی ماشینچیان مرادیزمینه و هدف: داروی ایبوپروفن به عنوان یک آلاینده دارویی، اثرات مخرب و در برخی موارد جبران ناپذیری بر موجودات آبزی و به طور کلی موجودات زنده می گذارد که در بسیاری از مواقع این اثرات به صورت تخریب های ژنتیکی و آسیب به ساختار DNA می باشد.هدف این تحقیق بررسی تاثیرات غلظت ها أکثرزمینه و هدف: داروی ایبوپروفن به عنوان یک آلاینده دارویی، اثرات مخرب و در برخی موارد جبران ناپذیری بر موجودات آبزی و به طور کلی موجودات زنده می گذارد که در بسیاری از مواقع این اثرات به صورت تخریب های ژنتیکی و آسیب به ساختار DNA می باشد.هدف این تحقیق بررسی تاثیرات غلظت های مختلف داروی ایبوپروفن در تخریب و آسیب به ساختار DNA در گورخرماهی می باشد. روش کار: در این مطالعه تغییرات ژنتیکی ژن P53 و بیان آن در گورخرماهی پس از مواجه دو هفته ای با غلظت های 1/0، 1 و 10 میلی گرم بر لیتر ایبوپروفن در شرایط آزمایشگاهی بررسی شد. در انجام این تحقیق گورخرماهی به مدت دو هفته در معرض غلظت های ذکر شده قرار گرفتند و پس از آن استخراج RNA از آن ها صورت گرفت، با استفاده از روش QPCR نتایج به دست آمده مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: نتایج نشان دادند که غلظت کم دارو یعنی 1/0 میلی گرم بر لیتر تاثیری بر بیان ژن P53 نداشته است، در حالی که در دو غلظت دیگر که به ترتیب 1 و 10 میلی گرم بر لیتر ایبوپروفن بودند، نشان داده شد که اختلاف معناداری بین کنترل و نمونه حاوی دارو بوده است، که در نتیجه آن، ژن P53 به میزان زیادی بیان شده است.همچنین برای ژن کنترل داخلی که GAPDH بود، در کمترین غلظت دارو هیچ گونه اختلاف معناداری بین نمونه تیمار و کنترل مشاهده نشد، در حالی که در تیمارهای بعدی اختلاف معنادار در حد بسیار کم بین نمونه کنترل و تیمار مشاهده شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
114 - تنوع ژنتیکی درون گونه‌ای جمعیت‌های مختلف نماتد Meloidogyne javanica در مزارع گوجه‌فرنگی استان خراسان شمالی با استفاده از نشانگر RAPD-PCR
قاسم فدوی خلاجلو عصمت مهدیخانی مقدم حمید روحانیبه منظور شناسایی نماتدهای ریشه گرهی گوجه‌فرنگی در استان خراسان شمالی، طی سالهای 1388 و 1389 تعداد 21 جمعیت از نماتدهای ریشه گرهی از ریشه گوجه‌فرنگی در مناطق مختلف استان خراسان شمالی جمعآوری و شبکه کوتیکولی انتهای بدن ماده‌های بالغ و خصوصیات مرفولوژیکی لاروهای سن دو از أکثربه منظور شناسایی نماتدهای ریشه گرهی گوجه‌فرنگی در استان خراسان شمالی، طی سالهای 1388 و 1389 تعداد 21 جمعیت از نماتدهای ریشه گرهی از ریشه گوجه‌فرنگی در مناطق مختلف استان خراسان شمالی جمعآوری و شبکه کوتیکولی انتهای بدن ماده‌های بالغ و خصوصیات مرفولوژیکی لاروهای سن دو از لحاظ خصوصیات مرفولوژیکی مطالعه و تنوع قابل ملاحظه‌ای بین جمعیت‌های مختلف این گونه مشخص نگردید. به منظور مطالعات مولکولی و بررسی تنوع ژنتیکی درون گونه‌ای Meloidogyne javanica، گونه مذکور در گلخانه تکثیر شد. پس از خالص‌سازی و تکثیر نماتد بر روی رقم حساس گوجه‌فرنگی (Red colud) در گلخانه، تخم‌ها و لاروهای سن دوم هر ریشه جدا و به عنوان یک جمعیت در نظر گرفته شد. پس از استخراج DNA ژنومی نتایج بررسی‌های مرفولوژیکی توسط آغازگرهای اختصاصی گونه M. javanica ارزیابی و برای بررسی میزان تنوع ژنتیکی در جمعیت‌های مختلف این گونه از روش RAPD استفاده شد. فرآورده‌های حاصل از واکنش PCR بر روی ژل آگارز 7/1 درصد الکتروفورز و چند شکلی‌های به وجود آمده از DNA هر جمعیت در این تکنیک، بر اساس وجود یا عدم وجود باند به صورت داده‌های صفر و یک ثبت گردید و سپس ماتریس تشابه بر مبنای ضریب شباهت Dice محاسبه شد. جهت بررسی تنوع ژنتیکی بین جمعیت‌ها، ماتریس فاصله ژنتیکی تشکیل و تجزیه خوشه‌ای به روش UPGMA در نرم‌افزار NTSYS انجام شد. دندروگرام حاصل از داده‌های RAPD در سطح تشابه 73٪ به پنج گروه اصلی تقسیم شد. با توجه به نتایج کلی، نشانگر RAPD توانست 73٪ تشابه و 27٪ تفاوت بین جمعیت‌های مختلف گونه مورد مطالعه را نشان دهد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
115 - نقشه پراکنش ویروسهای عامل پیچیدگی برگ (زرد) گوجه فرنگی در مزارع گوجه فرنگی استان فارس
علی پاک نیت ساسان قاسمی عبداله کاربرطی زمستان سال 1390 و بهار و تابستان 1391 به منظور تعیین پراکندگی جمینی ویروس های مولد بیماری پیچیدگی برگ (زرد) گوجه فرنگی از مناطق عمده گوجه فرنگی کاری استان فارس که شامل شهرستان های لامرد، لار، فراشبند، کازرون، ممسنی، شیراز، سعادت شهر و آباده بازدید به عمل آمد. پس از أکثرطی زمستان سال 1390 و بهار و تابستان 1391 به منظور تعیین پراکندگی جمینی ویروس های مولد بیماری پیچیدگی برگ (زرد) گوجه فرنگی از مناطق عمده گوجه فرنگی کاری استان فارس که شامل شهرستان های لامرد، لار، فراشبند، کازرون، ممسنی، شیراز، سعادت شهر و آباده بازدید به عمل آمد. پس از شناسایی مزارع آلوده نمونه های مشکوک از مزارع گوجه فرنگی دارای علائم پیچیدگی شدید برگ همراه با کوتولگی و زردی در حاشیه برگ ها، ریزش گل و کوتولگی گیاه بودند در این مناطق جمع آوری شدند. پس از استخراج دی ان ای ازآلودگی نمونه های دارای علائم با استفاده از جفت آغازگرهای اختصاصی جدایه آباده و جفت آغازگرهای دژنره ویروس پیچیدگی برگ (زرد) گوجه فرنگی مورد بررسی پی سی آر قرار گرفتند. در این تحقیق بیماری در مناطق لامرد، لار، سعادت شهر، آباده و ممسنی با استفاده از جفت آغازگرهای مذکور ردیابی و نقشه پراکنش این ویروس در استان تهیه شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
116 - شناسایی جدایه های Pseudomonas syringae pv syringae جدا شده از درختان میوه هسته دار با استفاده از انگشت نگاری ژنتیکی با توالی REP
ساغر کتابچی نادر حسن زادهدر این تحقیق نقوش ژنومی rep-PCR مربوط به 24 جدایه P. syringae pv. syringae که از نواحی مختلف ایران و از روی میزبان های مختلف جداسازی شده بودند در مقایسه با استرین استاندارد از کشور یونان مورد ارزیابی قرار گرفتند. DNA باکتری های مورد مطالعه به سه روش فریز- جوشاندن، استفا أکثردر این تحقیق نقوش ژنومی rep-PCR مربوط به 24 جدایه P. syringae pv. syringae که از نواحی مختلف ایران و از روی میزبان های مختلف جداسازی شده بودند در مقایسه با استرین استاندارد از کشور یونان مورد ارزیابی قرار گرفتند. DNA باکتری های مورد مطالعه به سه روش فریز- جوشاندن، استفاده از کلنی های خالص و از طریق شستشوی برگ حاوی باکتری تهیه شد. نتایج بدست آمده نشان داد در روش فوق نیاز به استخراج DNA نیست. به علاوه بررسی انگشت نگاری REP نشان داد خصوصیات میزبان و محل زندگی آنها بر روی ژنوم باکتری تاثیر متقابل دارند. به طوری که جدایه هایی که از درختان میوه هسته دار جدا شده بودند مجموعه ای بزرگ و مستقل از جدایه های گندم و نیشکر را تشکیل می دادند. همچنین جدایه های درختان میوه هسته دار که مربوط به یک منطقه جغرافیائی بودند از شباهت های بیشتری بر خوردار بودند. استفاده از توالی REP در روش rep-PCR به عنوان یک روش ساده، دقیق و سریع در جهت شناسائی و طبقه بندی ایزوله‌های پاتوارهای P. syringae مورد مطالعه و تائید قرار گرفت. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
117 - کاربرد نشانگر ملکولی RAPDدر بررسی تنوع ژنتیکی کفشدوزک (Col.:Coccinellidae) Hippodamia variegata در استان لرستان
مریم هاشمی فاطمه نبی‌‌پور رضا یاری رضا جعفریکفشدوزک (Col.:Coccinellidae) Goeze Hippodamia variegata یکی از شکارگرهای مهم آفات در کشتزارهای ایران است. این شکارگر همه چیز خوار است و از شته ها و پسیل ها تغذیه می کند. مارکر RAPD نشانگر ژنتیکی مفیدی در بررسی تنوع ژنتیکی و چندشکلی در بین کفشدوزک ها می باشد. این تح أکثرکفشدوزک (Col.:Coccinellidae) Goeze Hippodamia variegata یکی از شکارگرهای مهم آفات در کشتزارهای ایران است. این شکارگر همه چیز خوار است و از شته ها و پسیل ها تغذیه می کند. مارکر RAPD نشانگر ژنتیکی مفیدی در بررسی تنوع ژنتیکی و چندشکلی در بین کفشدوزک ها می باشد. این تحقیق با هدف شناسایی و بررسی تنوع ژنتیکی جمعیت کفشدوزک Hippodamiavariegata در 9 جمعیت طبیعی و 2 جمعیت پرورش تجاری صورت پذیرفته است. برای بررسی تنوع ژنتیکی از 8 آغازگر10 نوکلئوتیدی تصادفی (C-15،C-16 ، C-18، C-19، BE-03، BE-09، B-01، B-06 ) استفاده گردید. تمامی آغازگرها باندهای واضح و تکرار پذیر ایجاد کردند. از 147 باند تولید شده 82 باند یعنی78/55% باند چند شکل بودند. طول قطعات تکثیر یافته در آغازگرها از 225 تا 20000 جفت باز متغیر بود. دندروگرام بر اساس ضریب تشابه جاکارد به روش UPGMA رسم گردید. نتایج حاصل از تجزیه خوشه ای، بیانگر وجود تفاوت ژنتیکی بالا در بین جمعیت های مورد مطالعه در سطح استان لرستان بود. پرایمر BE-09 (باند 28) بالاترین و پرایمر C-16 (باند 13) کمترین تعداد باند را تشکیل دادند. به طوری که تنها دو جمعیت دورود و خرم آباد آن هم با درصد بسیار کم (به میزان 285/0 با ضریب جاکارد) نخستین خوشه را تشکیل می دادند و سایر خوشه ها با درصد تشابه بسیار کم تشکیل شدند که این امر حاکی از مستعد بودن شرایط اکولوژی و جغرافیایی استان لرستان با وجود کوچک بودن سطح استان برای ایجاد و حفظ تنوع ژنتیکی در کفشدوزک های استان می باشد. [1] . Jaccards similarity coefficient [2] . Unweighted paired group method using aarithmetic average تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
118 - بررسی تنوع ژنتیکی لاکتوباسیلوس‌های جدا شده از نمونههای شیر گاو به روش RAPD-PCR
حکیمه قلعه خانی معصومه حاجی رضایی آرتادخت توکلیمحصولات لبنی مناطق مختلف می توانند منبعی برای سویه های جدید لاکتوباسیلوس باشند، بنابراین شناسایی مولکولی و بررسی تنوع ژنتیکی آنها می تواند گام موثری در شناسایی ذخیره لاکتوباسیلوس های بومی با خصوصیات عملکردی ویژه و به کارگیری آنها در محصولات لبنی صنعتی شود. هدف از این تح أکثرمحصولات لبنی مناطق مختلف می توانند منبعی برای سویه های جدید لاکتوباسیلوس باشند، بنابراین شناسایی مولکولی و بررسی تنوع ژنتیکی آنها می تواند گام موثری در شناسایی ذخیره لاکتوباسیلوس های بومی با خصوصیات عملکردی ویژه و به کارگیری آنها در محصولات لبنی صنعتی شود. هدف از این تحقیق جداسازی لاکتوباسیلوس ها از فلور موجود در شیر گاو شهرستان نرماشیر و بررسی تنوع ژنتیکی آنها می باشد. بدین منظور تعداد 21 نمونه شیر از مناطق مختلف این شهرستان جمع آوری و با روش های مرسوم فنوتیپی و بیوشیمیایی لاکتوباسیلوس ها جداسازی شدند. به منظور غربالگری و بررسی تنوع ژنتیکی لاکتوباسیلوس های جدا شده، پنج پرایمر RAPD به طور تصادفی انتخاب گردید و پس از PCR، تجزیه و تحلیل تنوع ژنتیکی و فیلوژنتیکی با استفاده از نرم افزار Pyelph انجام و درخت فیلوژنی رسم شد. تجزیه خوشه ای داده های مولکولی توانست جدایه ها را در فاصله ژنتیکی 10 به هفت گروه مجزا تقسیم بندی کند. جدایه های K3 و K4 در گروه یک و جدایه های K21 و K13 و K11 در گروه چهار قرار گرفتند. بقیه جدایه ها در گروه های مجزا قرار گرفتند. از آنجائیکه جدایه های K3 و K4 از یک ناحیه و جدایه های K21 و K13 نیز از یک ناحیه جمع آوری شده اند، قرار گرفتن آنها در یک گروه منطقی به نظر می رسد. نتایج بدست آمده از این تحقیق بیانگر تنوع ژنتیکی بالای جدایه های بومی شهرستان نرماشیر و مناسب بودن تکنیک RAPD-PCR برای مطالعات مشابه می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
119 - بررسی آلودگی شیرهای محلی کرمان به لیستریا مونوسیتوژنز به روشهای فنوتیپی و مولکولی
سمیه فرحبخش اشرف کریمی نیکلیستریا مونوسیتوژنز باکتری گرم مثبت و عامل بیماری لیستریوز در انسان و حیوان است و در بیشتر مواد غذایی از جمله لبنیات و شیر حضور دارد. این باکتری در گاو موجب سقط جنین و ورم پستان و در انسان منجر به مسمومیت غذایی شده و می تواند در افراد پرخطر مانند زنان باردار، جنین و نوز أکثرلیستریا مونوسیتوژنز باکتری گرم مثبت و عامل بیماری لیستریوز در انسان و حیوان است و در بیشتر مواد غذایی از جمله لبنیات و شیر حضور دارد. این باکتری در گاو موجب سقط جنین و ورم پستان و در انسان منجر به مسمومیت غذایی شده و می تواند در افراد پرخطر مانند زنان باردار، جنین و نوزاد تازه متولد شده به صورت مننژیت سپتی سمی مشاهده گردد. وجود این باکتری به عنوان شاخص بهداشتی و آلودگی در شیر تلقی می شود. در این تحقیق 50 نمونه شیر خام و غیرپاستوریزه موجود در سطح شهر کرمان جمع آوری و با رعایت زنجیره سرد به آزمایشگاه منتقل گردید. کشت بر روی محیط کشت اختصاصی لیستریا انجام و شناسایی فنوتیپی صورت پذیرفت. جهت شناسایی مولکولی، DNA باکتری های شناسایی شده به روش فنوتیپی، با استفاده از کیت تجاری استخراج گردید و تشخیص لیستریا مونوسیتوژنز با کاربرد کیت IGF اختصاصی شناسایی این باکتری از شرکت ایرانیان ژن فن آوران صورت پذیرفت. محصول پی سی آر با ژل یک درصد الکتروفورز گردید و باندهای اختصاصی مشاهده گردید. نتایج نشان داد 30 و 27 نمونه از شیرهای غیرپاستوریزه به ترتیب بر اساس روشهای انجام شده، کشت و پی‌سی‌آر نسبت به لیستریا مونوسیتوژنز آلودگی نشان دادند. این امر توجه و رعایت شرایط بهداشتی را در طی مراحل تولید و تهیه شیر و ضرورت استفاده از شیر پاستوریزه را نشان می‌دهد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
120 - بررسی وقوع عوامل ویروسی لکه‌حلقوی گوجه‌فرنگی (ToRSV) و لکه‌حلقوی نکروتیک درختان میوه هسته‌دار (PNRSV) در برخی گلستان‌های استانهای تهران، البرز، مازندران و مرکزی
سیمین صباغیان فرشاد رخشنده رو توفیک البینو حمیدرضا زمانیزادهدر طی فصول زراعی سال های 95-1394 به منظور تعیین پراکنش PNRSV و ToRSV در گل رز و علف های هرز پیچک و شیرتیغی مجاور آن ها در استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی از 600 نمونه برگ رز و 50 نمونه برگ علف هرز بدون علایم و با علایم به صورت کاملاً تصادفی نمونه برداری شد. توس أکثردر طی فصول زراعی سال های 95-1394 به منظور تعیین پراکنش PNRSV و ToRSV در گل رز و علف های هرز پیچک و شیرتیغی مجاور آن ها در استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی از 600 نمونه برگ رز و 50 نمونه برگ علف هرز بدون علایم و با علایم به صورت کاملاً تصادفی نمونه برداری شد. توسط آزمون الایزای مستقیم DAS-ELISA نمونه ها ارزیابی شدند. نتایج نشان داد گل رز در استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی به ترتیب 24/39%، 7/30%، 8/44% و 1/38% به PNRSV و 38%، 6/25%، 3/32% و 3/28% به ToRSV و علف های هرز پیچک و شیرتیغی به ترتیب 26% و 18% به PNRSV و ToRSV آلوده بودند. نمونه های آلوده با استفاده از بافر فسفات پتاسیم (1/7 pH=) حاوی ماده ضد اکسیداتیو بر روی گیاهان علفی در گلخانه مایه زنی شدند. برای تأیید آلودگی ویروسی نمونه ها، از آزمون RT-PCR و پرایمر های اختصاصی جهت تکثیر قطعات اختصاصی از طول ژنوم PNRSV و ToRSV در نمونه های رز و گیاه محک استفاده شد. نمونه هایی که در آزمون های سرولوژیک آلوده به ویروس تشخیص داده شده بودند، با هر دو جفت آغازگر مورد استفاده واکنش دادند و قطعات ژنتیکی مورد انتظار با اندازه های 210 جفت باز مربوط به پروتئین پوششی PNRSV و 500 جفت باز مربوط به پلیمرازToRSV برای نمونه های آلوده تکثیر شدند. در این بررسی برای اولین بار حضور عوامل ویروس PNRSV و ToRSV در گیاه رز و علف های هرز مورد ارزیابی قرار گرفت. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
121 - بررسی فیلوژنتیکی عامل پوسیدگی نرم ارکیده در گلخانه‌های منطقه پاکدشت
طیبه یوسفیه ابوالقاسم قاسمی علی علیزاده علیآبادیارکیده از با ارزش ترین گل های زینتی و پوسیدگی نرم از بیماری های مهم این گیاه می باشد. در بهار سال 1392 از گلخانه های منطقه پاکدشت تهران بازدید و از گیاهان دارای علائم پوسیدگی نرم نمونه برداری شد. جدا سازی باکتری در محیط کشت های NA و EMBA انجام و بیماری زایی جدایه های آن أکثرارکیده از با ارزش ترین گل های زینتی و پوسیدگی نرم از بیماری های مهم این گیاه می باشد. در بهار سال 1392 از گلخانه های منطقه پاکدشت تهران بازدید و از گیاهان دارای علائم پوسیدگی نرم نمونه برداری شد. جدا سازی باکتری در محیط کشت های NA و EMBA انجام و بیماری زایی جدایه های آن در برگ های ارکیده به اثبات رسید. بر اساس ویژگی های مورفولوژیکی، آزمون های فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی، جدایه ها گرم منفی و بی هوازی اختیاری، تولید اندول، احیاء نیترات، حساسیت به اریترومایسین و داشتن فعالیت فسفاتاز، جدایه های مذکور به جنس Dickeya تعلق داشتند. جدایه ها بر اساس تکثیر ژن پکتات لیاز با استفاده از آغازگر ADE1/ADE2 و عدم تکثیر با آغازگر های EXPECCF/R و Y1/Y2، گونه ای از جنس Dickeya شناسایی شد. توالی قطعات تکثیر شده ژن های ریکامبینازآ و RNA پلیمراز زیر واحد بتا تعدادی از جدایه ها به میزان 99 تا 100 درصد با نمونه های Dickeya sp.. موجود در بایگانی NCBI شباهت داشتند ولی با گونه های توصیف شده این جنس متفاوت بودند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
122 - اثرات استرس حاد حرکتی بر بیان ژنهای Znt1، Znt2، Znt3 و Znt4 در هیپوکامپ موشهای صحرایی نر
مائده نیله چی اکرم عیدی حمید گله داری مهناز کسمتیامروزه از استرس به عنوان مسئله‌ای رایج در زندگی روزمره یاد میشود. استرس میتواند با ایجاد اختلال در هموستازی عناصر فلزی مانند روی در سیستم عصبی مرکزی موجب بروز بیماری‌ها یا اختلال در عملکرد بافتهای مختلف گردد. در این میان عنصر روی نقش مهمی در کارکرد ارگانهای حیاتی به أکثرامروزه از استرس به عنوان مسئله‌ای رایج در زندگی روزمره یاد میشود. استرس میتواند با ایجاد اختلال در هموستازی عناصر فلزی مانند روی در سیستم عصبی مرکزی موجب بروز بیماری‌ها یا اختلال در عملکرد بافتهای مختلف گردد. در این میان عنصر روی نقش مهمی در کارکرد ارگانهای حیاتی به ویژه سیستم عصبی مرکزی ایفا مینماید. اختلال در هموستازی روی به نوبه خود موجب ایجاد و یا پیشرفت بیماری‌هایی نظیر آلزایمر، افسردگی، اختلال در یادگیری و ایسکمی میگردد. هموستازی روی در بدن توسط پروتئینهای ZnT و ZIP صورت میپذیرد. هدف از این مطالعه بررسی اثر استرس حاد حرکتی در بیان ژنهای انتقال دهنده روی 1-4 موسوم به Znt1، Znt2، Znt3 و Znt4 در بافت هیپوکامپ موش صحرایی به عنوان یکی از بافتهایی که تراکم بالایی از روی را در خود جای داده، میباشد. موشهای صحرایی به دو گروه استرس و کنترل تقسیم بندی شدند. از بافت هیپوکامپ RNA استخراج گردید و تغییرات بیان ژنهای Znt1، Znt2، Znt3 و Znt4 به وسیله ریل تایم پی سی آر بررسی شد. نتایج نشان داد که بر اثر القای استرس بیان ژن Znt1 افزایش بیان معنیدار داشته و در بیان ژنهای مورد بررسی دیگر تغییر بیان معنیدار مشاهده نگردید. شناخت آن دسته از ژنهای انتقال دهنده روی که بر اثر استرس بیان آنها دستخوش تغییر میشود، میتواند مسیر یافتن درمان این بیماری را به کمک تنظیم سطح روی در بدن از طریق داروهای حاوی این عنصر ممکن سازد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
123 - بررسی میزان بیان Mir-96 در سلول های سرطانی دهان انسان
مهتاب پازکی مریم عیدی فهیمه باغبانی آرانیسرطان دهان یکی از انواع سرطان‌های سر و گردن می باشد. سرطان های سر و گردن، پنج درصد همه سرطان‌ها را شامل میشوند که تقریبا نیمی از آن ها در محدوده حفره دهان رخ می دهند. فاکتورهای زیادی در شروع و پیشرفت سرطان دهان دخیل هستند. یکی از مهمترین این فاکتورها، miRNAs و مکانیسم أکثرسرطان دهان یکی از انواع سرطان‌های سر و گردن می باشد. سرطان های سر و گردن، پنج درصد همه سرطان‌ها را شامل میشوند که تقریبا نیمی از آن ها در محدوده حفره دهان رخ می دهند. فاکتورهای زیادی در شروع و پیشرفت سرطان دهان دخیل هستند. یکی از مهمترین این فاکتورها، miRNAs و مکانیسم های وابسته به آن هستند. Mir-96 به صورت مستقیم و غیرمستقیم در آپاپتوز، تکثیر و تهاجم سلولی دخیل می باشد. بنابراین، تحقیقات در رابطه با نقش و ارتباط آن با سرطان دهان می تواند سبب بهبود و پیشرفت در تشخیص و درمان این گروه از بیماران شود. در این مطالعه ۳۰ نمونه توموری و مجاور توموری سرطان دهان پس از مطالعات هیستوپاتولوژیک جمعآوری شدند. پس از استخراج RNA و طراحی پرایمر اختصاصی Mir-96 و U6، میزان بیان Mir-96 با روش Real-time PCR مورد سنجش قرار گرفت. نتایج نشان داد که میزان بیان Mir-96 در نمونههای توموری ۳.۴۴ برابر بالاتر از نمونههای نرمال بود (p <0.001). همچنین میزان بیان Mir-96 در نمونههای افراد الکلی بالاتر از افراد غیرالکلی بود (p <0.01). همچنین میزان بیان Mir-96 در نمونههای افرادی که دچار متاستاز شده بودند، بالاتر از افرادی بود که دچار متاستاز نشده بوند (p <0.01). از سوی دیگر، میزان بیان Mir-96 در نمونههای افرادی که سابقه سرطان پوست داشتند، بالاتر از افراد بدون سابقه سرطان بود (p <0.05). Mir-96 پتانسیل خوبی به عنوان مارکر تشخیصی و درمانی برای سرطان دهان دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
124 - استفاده از تکنیکqPCR به منظور شناسایی سویه های کدکننده توکسین کلستریدیوم دیفیسیل
لیلا نوری مهدی ابراهیمی مهدی علیجانیان زادهکلستریدیوم دیفیسیل (Clostridium difficile)، باکتری گرم مثبت، بی‌هوازی و اسپوردار بوده و عامل گاستروآنتریتوکولیت با غشاءکاذب است. هنگامی که میکروفلور طبیعی روده، توسط فاکتورهای خطر، مانند درمان با آنتیبیوتیکها، شیمی‌‌درمانی و غیره آشفته میشود،کلستریدیوم دیفیسیل فرصت أکثرکلستریدیوم دیفیسیل (Clostridium difficile)، باکتری گرم مثبت، بی‌هوازی و اسپوردار بوده و عامل گاستروآنتریتوکولیت با غشاءکاذب است. هنگامی که میکروفلور طبیعی روده، توسط فاکتورهای خطر، مانند درمان با آنتیبیوتیکها، شیمی‌‌درمانی و غیره آشفته میشود،کلستریدیوم دیفیسیل فرصت تکثیر یافته و باعث بیماری میشود. عوامل اصلی بیماریزایی این باکتری، دوتوکسینB وAهستند،که توسط ژنهایtcdA وtcdB کد میشوند. هدف از این تحقیق توسعه روش qPCR به منظور شناسایی عفونت کلستریدیوم‌دیفیسیل از طریق طراحی پرایمرهای اختصاصی برای ژنهایtcdAو tcdB میباشد. در این مطالعه ابتدا با بررسی دقیق نواحی حفاظت‌شده در توالی ژنهایtcdAو tcdB، دو جفت پرایمر برای تکثیر اختصاصی نواحی مورد نظر طراحی‌شد. سپس بهینه‌سازی روش qPCRبا استفاده از این پرایمرها انجامشد. حساسیت روش با استفاده از غلظت-های مختلف DNA باکتری مورد ارزیابی قرارگرفت. علاوه براین، به منظور بررسی اختصاصیت روش از DNA باکتریهای مولد اسهال (اشرشیاکلی، شیگلا دیسانتری، سالمونلا تیفی و یرسینا انتروگلیتیکا) استفاده شد. در نهایت عملکرد روش بهینه‌سازی-شده با تعداد 100 نمونه بالینی مورد ارزیابی قرارگرفت. حساسیت روش به میزان pg100از DNA و اختصاصیت روش بهینه-سازی شده 100% تعیین شد. در نمونههای بالینی مورد مطالعه با روش بهینه‌سازی شده 9 مورد مثبت شناسایی شد. با توجه به نتایج بدست آمده استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای ژنهایtcdA و tcdB میتواند به عنوان رویکرد مناسبی برای شناسایی سریع و دقیق عفونت C. difficile در تکنیک qPCR مورد استفاده قرارگیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
125 - ارزیابی بیان ژن های CCND1 و ITGB1 در بیماران مبتلا به سرطان پستان
فرنام قلی پور مارالان شهره زارع کاریزی محمد ابراهیم زادهسرطان پستان یکی از شایع ترین سرطان‌های شناخته شده و یکی از عوامل مرگ و میر زنان در سراسر دنیا می باشد. لذا بررسی مکانیسم‌های مولکولی دخیل در پیشرفت آن حائز اهمیت است. در مطالعه حاضر میزان بیان ژنهای CCND1 و ITGB1 در 30 بیمار مبتلا به سرطان پستان بررسی گردیده است. استخرا أکثرسرطان پستان یکی از شایع ترین سرطان‌های شناخته شده و یکی از عوامل مرگ و میر زنان در سراسر دنیا می باشد. لذا بررسی مکانیسم‌های مولکولی دخیل در پیشرفت آن حائز اهمیت است. در مطالعه حاضر میزان بیان ژنهای CCND1 و ITGB1 در 30 بیمار مبتلا به سرطان پستان بررسی گردیده است. استخراج RNA از بافت توموری و نرمال مجاور 30 بیمار مبتلا به سرطان پستان انجام شد. پس از سنتز cDNA و طراحی پرایمر برای ژن های CCND1 و ITGB1، بیان ژن های مذکور با روش Real time-PCR ارزیابی شد. به منظور آنالیز دادهها نیز از فرمول 2-ΔΔct استفاده شد و معنادار بودن دادهها نیز براساس آزمون T-test(P ≤ 0.05) ارزیابی شد. بیان ژن های CCND1 و ITGB1 در نمونه های بافت های توموری افزایش معنا داری را در مقایسه با نمونه های نرمال نشان دادند (P<0.0001). بیان بالای ژن های سیکلین D1 و ITGB1 که نقش اصلی را در کنترل چرخه سلولی دارند با پیشرفت سرطان رابطه مستقیمی دارند. تایید این نتایج نیازمند مطالعات بیشتر می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
126 - بررسی همراهی پلیمورفیسمهایrs11639084 و rs4774388 ژن RORA با استعداد ابتلا به بیماری بهجت
پریسا زارعی شهره زارع کاریزی مریم عیدیبهجت یک بیماری خودایمن و مزمن است که چندین سیستم بدن را درگیر کند. پاتوژنز بیماری بهجت شامل عوامل متعدد ژنتیکی و محیطی می باشد، با این حال هنوز علت این بیماری ناشناخته است. پلی مورفیسم در ژن های مختلفی در بروز بیماری بهجت موثر می باشند. در تحقیق حاضر به بررسی ارتباط 2 أکثربهجت یک بیماری خودایمن و مزمن است که چندین سیستم بدن را درگیر کند. پاتوژنز بیماری بهجت شامل عوامل متعدد ژنتیکی و محیطی می باشد، با این حال هنوز علت این بیماری ناشناخته است. پلی مورفیسم در ژن های مختلفی در بروز بیماری بهجت موثر می باشند. در تحقیق حاضر به بررسی ارتباط 2 پلی مورفیسم ژنRORA در بیماران مبتلا به بیماری بهجت پرداخته شده است.در این مطالعه 100 فرد مبتلا به بیماری بهجت به عنوان مورد، هم چنین 100 فرد سالم به عنوان شاهد انتخاب شدند. DNA ژنومی از لوکوسیت های خون محیطی استخراج شد. جهت بررسی پلی مورفیسم های rs11639084 و rs4774388 ژن RORAاز روش4ARMS-PCR استفاده شد. محصولات روی ژل آکریلامید 12% برده و قطعات بررسی شدند. آزمون مربع کای به منظور بررسی تفاوت بین فراوانی آللی و ژنوتیپی افراد بیمار و کنترل با استفاده از نرم افزار SPPS ver16 انجام شد. میزان خطر نسبی با استفاده از آزمون رگرسیون لجستیک بررسی گردید.فراوانی سه ژنوتیپ CC، CT و TTچند شکلی rs11639084 در گروه بیمار به ترتیب 67، 30 و 3 و در گروه شاهد به ترتیب 61، 28 و 11 می باشد. فراوانی ژنوتیپ CC، CT و TTچند شکلی rs4774388 در گروه بیمار 7، 40 و 53 و در گروه شاهد 21، 60 و 19 می باشد. تفاوت معناداری بین فراوانی آللی و ژنوتیپی چندشکلی rs4774388 با استعداد ابتلا به بیماری وجود دارد (P<0.005).نتایج نشان داد که ارتباط معنی داری بین برخی پلی مورفیسم ها ی ژن RORA و بیماری بهجت می تواند وجود داشته باشد و این امر مطالعات بیشتر در این زمینه را می طلبد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
127 - بررسی هم بستگی پلی مورفیسم های تک نوکلئوتیدیrs1800734وrs4647269 ژن MLH1 در مردان نابارور ایرانی آزواسپرم
مهردخت درپوش زهرا نورمحمدی مسعود شیداییمقدمه: ناباروریو مشکلات ناشی از آن امروزه به عنوان یکی از مسایل مهمی است که %15-10زوج هاراتحتتأثیر قرار می دهد.حدود نیمی از کل ناباروری ها مربوط به مردان است. اسپرماتوژنز انسان وابسته به فعالیت هزاران ژن است و نقص در مکانیسم های ترمیم می تواند باعث توقف اسپرماتوژنز شود. أکثرمقدمه: ناباروریو مشکلات ناشی از آن امروزه به عنوان یکی از مسایل مهمی است که %15-10زوج هاراتحتتأثیر قرار می دهد.حدود نیمی از کل ناباروری ها مربوط به مردان است. اسپرماتوژنز انسان وابسته به فعالیت هزاران ژن است و نقص در مکانیسم های ترمیم می تواند باعث توقف اسپرماتوژنز شود. یکی از پروتئین های دخیلدر سیستم ترمیم ، پروتئینMLH1 است.هدف از این مطالعه بررسی ارتباطپلی مورفیسم هایrs1800734وrs4647269در ژن MLH1با ناباروری آزواسپرمی مردان می باشد.روش کار:در این تحقیق مورد- شاهدی از113مرد مبتلا به ناباروری آزواسپرمی به عنوان بیمار و 101مرد سـالم بـه عنـوان کنتـرل ، نمونه خونجمع آوری شد. پس از استخراجDNA، ژنوتیپ هایپلی مورفیسم هاrs4647269 وrs1800734، توسط روشRFLP-PCRبه ترتیب با کمک آنزیم های HPYCH4IV وPVUII تعیین و با توالی یابی تایید گردید.آزمون مربع کای ،رگرسیون لجستیک و ANOVA به منظور آنالیز داده های ژنتیکی و دموگرافی به کمک نرم افزارهایSPPS و SNPSTATSصورت گرفت.یافته ها : درپلی مورفیسمrs1800734تفاوت معناداری (p<0.05) بین فراوانی ژنوتیپی گروه بیمار و شاهد مشاهده نشد.در بررسیپلی مورفیسم rs4647269در مدل های وراثتی هم بارز (CT ، TT)، بارز(CT/TT) و مغلوب (TT) تفاوت معنی داری بین فراوانی ژنوتیپی بین دو گروه دیده شد.P=0.024) ، P=0.021 ، P=0.036)همچنین در این پلی مورفیسم از نظر حجم اسپرم در صفات نیز تفاوت معنا دار مشاهده شد.(P=0.000)نتیجه گیری : بین پلی مورفیسم rs4647269 ژن MLH1 و ناباروری آزواسپرمی در جمعیت مردان ایرانی مورد مطالعه ارتباط معنا دار بوده و احتمالا می تواند در آن موثر باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
128 - بررسی سطح mRNA ژن GLUT1 در نمونه های بافتی سرطان سلول غیر کوچک ریه
فاطمه صاعدوند مهدی ابراهیمی شهره زارع کاریزیمقدمه: سرطان ریه نوعی تومور ریوی بدخیم است که مهمترین عامل مرگ و میر ناشی از ابتلا به سرطان در انسان محسوب میشود. GLUT1 حامل مهم گلوکز به سلولها است که بیان بیش از حد طبیعی آن در افزایش سوخت و ساز سلول های سرطانی نقش دارد. هدف: بررسی تغییر در بیان ژن GLUT1 در نمونه های أکثرمقدمه: سرطان ریه نوعی تومور ریوی بدخیم است که مهمترین عامل مرگ و میر ناشی از ابتلا به سرطان در انسان محسوب میشود. GLUT1 حامل مهم گلوکز به سلولها است که بیان بیش از حد طبیعی آن در افزایش سوخت و ساز سلول های سرطانی نقش دارد. هدف: بررسی تغییر در بیان ژن GLUT1 در نمونه های بافتی سرطان سلول غیر کوچک است.مواد و روش ها: تعداد 30 نمونه بافت سرطان سلول های غیرکوچک ریه و 30 نمونه بافت مجاور تومور از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان مسیح دانشوری پس از اخذ رضایت نامه، دریافت شد. پس از نمونه گیری و جداسازی RNA و ساخت cDNA، سطح mRNA ژن GLUT1 و GAPDH با تکنیک Real time PCRسنجیده شد. آنالیز داده های بیان ژن با آزمون آماری t انجام شد.نتایج: در 21 نمونه (70 درصد) سطح mRNA ژن GLUT1 در بافت سرطان سلول های غیرکوچک ریه نسبت بافت سالم افزایش داشته است. علاوه براین سطح mRNA در بافت تومور نسبت به بافت طبیعی 3/4 برابر افزایش داشت (013/0 = P).نتیجه گیری: افزایش سطح mRNA ژن GLUT1 در سلول های کارسینومای ریه سلول غیرکوچک می تواند نشانه ای از تغییر برنامه متابولیکی این سلول ها به گلیکولیز هوازی باشد که نتیجه آن گسترش تومور و بدخیمی ناشی از آن می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
129 - بررسی ملکولی ژنهای مقاومت به کینولون (qnr) در سالمونلا تیفی موریوم جدا شده از نمونههای غذایی
کیومرث امینی طیبه قاسمی بابک خیرخواهسالمونلوز یک بیماری مهم در انسان و گونه های حیوانات است که به وسیله سرووارهای مختلف سالمونلا انتریکا ایجاد می شود. سرووار تیفی موریوم یکی از شایع ترین سرووارها در انسان می باشد. کینولونها و فلوروکینولونها خانواده‎ ‎ای از آنتی بیوتیک های وسیع الطیف هستند که در أکثرسالمونلوز یک بیماری مهم در انسان و گونه های حیوانات است که به وسیله سرووارهای مختلف سالمونلا انتریکا ایجاد می شود. سرووار تیفی موریوم یکی از شایع ترین سرووارها در انسان می باشد. کینولونها و فلوروکینولونها خانواده‎ ‎ای از آنتی بیوتیک های وسیع الطیف هستند که در درمان سالمونلوز مورد استفاده قرار می گیرند. ژنهای qnr جزء عوامل مقاومت کینولونی وابسته به پلاسمید‎ (PMQR) ‎هستند که باعث‎ ‎گسترش مقاومت در باکتریهای خانواده انتروباکتریاسه میشوند‎.‎ هدف از این تحقیق شناسایی ژنهای مقاومت کینولونی qnr در سالمونلا تیفی موریوم جدا شده از نمونه های مواد غذایی بود.در این تحقیق60 نمونه سالمونلای جداسازی شده از مواد غذایی جمع آوری گردید و با استفاده از آزمونهای کشت و بیوشیمیایی تایید شدند. سروتایپینگ نمونه ها با استفاده از آنتی سرم های O و H انجام گرفت. آزمون Multiplex-PCR جهت شناسایی ژنهای qnrA، qnrB و qnrS انجام گرفت.تمامی 60 نمونه با استفاده از آزمونهای کشت و بیوشیمیایی به عنوان سالمونلا تایید شدند. نتایج سروتایپینگ نشان داد هر 60 نمونه مربوط به گروه سرمی B و سرووار تیفی موریوم متعلق بودند. نتایج Multiplex-‎PCR نشان داد 5 نمونه دارای ژن ‎ qnrB ‎و 4 نمونه دارای ژن qnrS مثبت و 1 نمونه دارای ژن qnrA بود‎.‎ نتایج مطالعه حاضر نشان دهنده حضور ژنهای qnr در نمونه های سالمونلا تیفی موریوم جداسازی شده از مواد غذایی می باشد که اهمیت ویژه ای از لحاظ بهداشت عمومی دارا می باشد. جهت جلوگیری از این مقاومت کینولونی، نیاز به برنامه های پایش و مراقبت جهت شناسایی این ژنها می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
130 - شیوع <i>کوکسیلا بورنتی </i> در مخازن جمعآوری شیر گاوهای بومی استان گیلان بهروش Nested-PCR
اکرم نوروز حقی نوبیجاری ابراهیم رحیمی امیر شاکریانتب کیو با عامل ریکتزیا، بیماری مشترک انسان و دام باقدرت بیماری زایی بسیار بالا است که اخیراً تنها بهعنوان بیماری شغلی در دامداران، دامپزشکان و کارگران کشتارگاه ها تلقی نمی شود. مصرف شیر نقش بسیار مهمی در اپیدمی و گسترش بیماری دارد و شیر گاو یکی از منابع بالقوه کوکسیلا أکثرتب کیو با عامل ریکتزیا، بیماری مشترک انسان و دام باقدرت بیماری زایی بسیار بالا است که اخیراً تنها بهعنوان بیماری شغلی در دامداران، دامپزشکان و کارگران کشتارگاه ها تلقی نمی شود. مصرف شیر نقش بسیار مهمی در اپیدمی و گسترش بیماری دارد و شیر گاو یکی از منابع بالقوه کوکسیلا بورنتی می باشد. این مطالعه با هدف بررسی شیوع کوکسیلا بورنتی در مخازن جمعآوری شیر گاوهای بومی استان گیلان انجام گرفت. در این مطالعه مقطعی-توصیفی از تابستان 1395 تا بهار 1396 در مجموع 204 نمونه شیراز مخازن جمعآوری شیر در مراکز جمعآوری شیر شهرستان‌های استان گیلان تهیه و جهت بررسی شیوع کوکسیلا بورنتی، به روش Nested PCR مورد آزمایش قرار گرفت. از مجموع 204 نمونه شیر خام، 21 نمونه(10.29%) ازنظر حضور کوکسیلا بورنتی مثبت بود. بالاترین میزان آلودگی در شهرستان لاهیجان،33/33% و به دنبال آن در شهرستان رودبار،(29.4%) مشاهده شد. نمونههای اخذشده از شهرستان های رشت، تالش، آستانه و ماسال هیچ مورد مثبتی نداشتند. بررسی شیوع فصلی نمونه ها حاکی از عدم اختلاف آماری بین فصول مختلف بود. نتایج حاکی از آن است که شیر گاوهای سنتی میتواند منبع و مخزن کوکسیلا بورنتی در ایران میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
131 - سنجش مولکولی تقلب گوشت مرغ در همبرگر‌ممتاز به روش Simplex PCR و Duplex PCR
معصومه هاشم‌زادگان سید ابراهیم حسینی فرزانه تفویضی منصور بیاتگوشت یک منبع پروتئین عالی و مغذی محسوب می شود اما به علت قیمت بالای این پروتئین حیوانی و دستیابی به سود اقتصادی بیشتر توسط برخی تولیدکنندگان، اغلب در فرآورده های گوشتی، تقلباتی نظیر استفاده از گونه های گوشتی با ارزش تجاری کمتر، مورد توجه است. در این تحقیق سعی أکثرگوشت یک منبع پروتئین عالی و مغذی محسوب می شود اما به علت قیمت بالای این پروتئین حیوانی و دستیابی به سود اقتصادی بیشتر توسط برخی تولیدکنندگان، اغلب در فرآورده های گوشتی، تقلباتی نظیر استفاده از گونه های گوشتی با ارزش تجاری کمتر، مورد توجه است. در این تحقیق سعی شده تا پروتئین ارزان قیمتی نظیر گوشت مرغ بهروش مولکولی شناسایی گردد. از 10 نوع همبرگر ممتاز صنعتی با درج عنوان تهیه شده از گوشت گاو و نمونههای شاهد، شامل گوشت خام گاو و مرغ،استخراج DNAانجام گرفت و سپس واکنش‌های Simplex PCR و Duplex PCR بر روی DNAهای حصول یافته با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ویژه ژن سیتوکروم b گاو و s rRNA12 مرغ انجام شد. ژنهای ویژه سیتوکروم b گاو و srRNA 12 مرغ به ترتیب قطعات bp 274 و bp 183 را طی واکنش‌های Simplex-PCR و Duplex-PCR در تمام نمونه های همبرگر ممتاز تکثیر کردند. تکثیر قطعه bp183 ویژه ژن مرغ طی واکنش‌های Simplex-PCR و Duplex-PCR، حاکی از جایگزینی تقلب مرغ با بخشی از گوشت گاو که ماده اصلی تمامی همبرگرهای ممتاز مورد آزمون است، می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
132 - بررسی میزان آلودگى گوشت گاوهاى ذبح‌شده در کشتارگاه صنعتى ارومیه به انگل سارکوسیست با روش PCR و مقایسه با دو روش ماکروسکوپی و هضمی
فاطمه قاسمی کهریزه عباسعلی مطلبی مغانجوقی سهراب رسولیسارکوسیستیس (Sarcocystis sp.) یکى از مهمترین تک یاخته هاى متعلق به شاخه Apicomplexa مى باشد که در بین حیوانات خونگرم در کلیه نقاط جهان شایع بوده و داراى اهمیت زئونوتیک مى باشد. سه گونه Sarcocystis bovicanis، S. bovifelis و S. hominis در گاو شناسایى شده است. با توجه به أکثرسارکوسیستیس (Sarcocystis sp.) یکى از مهمترین تک یاخته هاى متعلق به شاخه Apicomplexa مى باشد که در بین حیوانات خونگرم در کلیه نقاط جهان شایع بوده و داراى اهمیت زئونوتیک مى باشد. سه گونه Sarcocystis bovicanis، S. bovifelis و S. hominis در گاو شناسایى شده است. با توجه به بالا بودن میزان آلودگى لاشه هاى گاوهاى کشتارى در ایران به سارکوسیست، میزان آلودگى گوشت گاوهاى ذبح‌شده در کشتارگاه صنعتى ارومیه به این انگل با استفاده از روش مولکولی PCR بررسی شد و کارایی این روش با دو روش ماکروسکوپی و هضمی (میکروسکوپی) در تشخیص میزان آلودگی به این انگل مقایسه شد. در مجموع ٨٠ نمونه از زبان و مری اخذ شده از 40 لاشه مورد مطالعه قرار گرفت. برای بررسی مولکولی، DNA انگل با دستورالعمل کیت استخراج شد و قطعه ژن 18sRNA با استفاده از پرایمر هاى اختصاصى تکثیر شد و در ادامه با آنزیم هاى محدودکننده محصولPCR هضم شد و الگوى شکسته شدن آنها مورد ارزیابى قرار گرفتند. نتایج تحقیق حاضر نشان داد که از مجموع ٤٠ رأس گاو نمونه بردارى شده، در روش هاى ماکروسکوپیک و میکروسکوپیک میزان آلودگى بهترتیب 5/2 و 5/72 درصد بود. همچنین تعداد 36 رأس گاو ازلحاظ آلودگى با روش PCR مثبت گزارش گردید که 90 درصد کل گاوها را شامل مى شود. نتایج تحقیق حاضر نشان داد قدرت تشخیص روش مولکولی بیشتر از دو روش دیگر می باشد و میزان آلودگی بافت زبان در هر دو جنسیت نر و ماده بیشتر (05/0< P) از میزان آلودگی بافت مری است. میتوان به این جمع‌بندی رسید که برای ردیابی موثر سارکوسیست، امکان استفاده از روش PCR به موازات روشهای متداول وجود دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
133 - مطالعه شیوع فصلی و جغرافیایی توکسوپلاسما گوندی در شیر نشخوارکنندگان بهروش nested-PCR
مهتاب علیپور عمروآبادی ابراهیم رحیمی امیر شاکریانتوکسوپلاسموزیس یکی از خطرناک ترین بیماری های تک‌یاخته‌ای مشترک بین انسان و دام است که انسان از طرق مختلف به آن آلوده میشود. تماس با حیوان آلوده، مصرف مواد غذایی آلوده و انتقال از مادر به جنین از مهم ترین راه های انتقال میباشد.مطالعه حاضر اولین گزارش شیوع توکسوپلاسما أکثرتوکسوپلاسموزیس یکی از خطرناک ترین بیماری های تک‌یاخته‌ای مشترک بین انسان و دام است که انسان از طرق مختلف به آن آلوده میشود. تماس با حیوان آلوده، مصرف مواد غذایی آلوده و انتقال از مادر به جنین از مهم ترین راه های انتقال میباشد.مطالعه حاضر اولین گزارش شیوع توکسوپلاسما گوندی در شیر خام گاومیش و شتر در برخی از مناطق ایران می باشد. به این منظور تعداد 440 نمونه شیر خام 5 گونه دام طی چهار فصل سال از استان های اصفهان، چهارمحال و بختیاری، خوزستان و فارس جمعآوری و از نظر حضور توکسوپلاسما گوندی بهروش واکنش nested-PCR مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که 26 نمونه (9/5 درصد) آلوده به توکسوپلاسماگوندی بود. بالاترین میزان آلودگی در شیر گوسفند (8 درصد) و پایین ترین آن در شیر گاومیش (28/4 درصد) مشاهده شد. ازنظر شیوع فصلی میزان آلودگی در فصل زمستان (43/11 درصد)، در پاییز (8/6 درصد) و در بهار (03/5 درصد) بود، در حالیکه هیچیک از نمونه های اخذ شده در تابستان به این انگل آلوده نبود. آلودگی شیر خام و فرآورده های لبنی سنتی به توکسوپلاسما گوندی می تواند به شکل مستقیم از حیوانات آلوده و یا درنتیجه عدم رعایت اصول بهداشتی در طول فرایند شیردوشی، حمل‌ونقل، نگهداری و آلودگی متقاطع باشد. لذا سالم‌سازی مناسب شیر قبل از مصرف پیشنهاد می گردد.TRANSLATE with xEnglishArabicHebrewPolishBulgarianHindiPortugueseCatalanHmong DawRomanianChinese SimplifiedHungarianRussianChinese TraditionalIndonesianSlovakCzechItalianSlovenianDanishJapaneseSpanishDutchKlingonSwedishEnglishKoreanThaiEstonianLatvianTurkishFinnishLithuanianUkrainianFrenchMalayUrduGermanMalteseVietnameseGreekNorwegianWelshHaitian CreolePersian// TRANSLATE with COPY THE URL BELOW BackEMBED THE SNIPPET BELOW IN YOUR SITE Enable collaborative features and customize widget: Bing Webmaster PortalBack//TRANSLATE with xEnglishArabicHebrewPolishBulgarianHindiPortugueseCatalanHmong DawRomanianChinese SimplifiedHungarianRussianChinese TraditionalIndonesianSlovakCzechItalianSlovenianDanishJapaneseSpanishDutchKlingonSwedishEnglishKoreanThaiEstonianLatvianTurkishFinnishLithuanianUkrainianFrenchMalayUrduGermanMalteseVietnameseGreekNorwegianWelshHaitian CreolePersian// TRANSLATE with COPY THE URL BELOW BackEMBED THE SNIPPET BELOW IN YOUR SITE Enable collaborative features and customize widget: Bing Webmaster PortalBack// تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
134 - پلیمورفیسم ژن aroA در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از شیر خام و پنیر سنتی
عزیزه حسین خانی علیرضا منادی سفیدان جلال شایقبا توجه به بیماریزایی استافیلوکوکوس اورئوس و حضور آن در مواد لبنی و اهمیت انتقال این باکتری به واسطه مواد لبنی، هدف از این مطالعه آنالیز ژن aroA در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از شیر گاو و پنیر سنتی است. بدین منظور تعداد 40 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس شامل 14 جدایه أکثربا توجه به بیماریزایی استافیلوکوکوس اورئوس و حضور آن در مواد لبنی و اهمیت انتقال این باکتری به واسطه مواد لبنی، هدف از این مطالعه آنالیز ژن aroA در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از شیر گاو و پنیر سنتی است. بدین منظور تعداد 40 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس شامل 14 جدایه از پنیر سنتی، 19 جدایه از شیر گاو و 7 جدایه از شیر گاومیش به روش PCR-RFLP مورد آزمایش قرار گرفتند. برش آنزیمی پس از تکثیر ژن کوآگولاز با پرایمرهای اختصاصی، با استفاده از آنزیمTaqI به‌عمل آمد. نتیجه تکثیر شده برای ژن aroA تولید باندی با اندازه 1153 جفت باز بود. هضم باند مذکور با آنزیم TaqI سه الگوی مختلف برش از ژن مورد نظر نمایش می‌داد. الگوی اول شامل سه باند، الگوی دوم دو باند و الگوی سوم چهار باند بودند. از 40 نمونه استافیلوکوکوس اورئوس مورد مطالعه در این پژوهش تعداد 29 نمونه حاوی ژن aroA با الگوی سه باندی، 9 نمونه با الگوی دو باندی و 2 نمونه الگوی 4 باندی بودند. با توجه به این که این روش قادر به تشخیص تفاوت بین سویههای با منشأ غذایی مختلف نیست، لازم است با روشهای مکمل جایگزین شود. همچنین نتایج این بررسی نشاندهنده نیاز به توجه بیشتر به نکات بهداشتی در تهیه مواد غذایی حاصل از مواد لبنی و نیز توجه بیشتر دامپزشکان در برخورد با استافیلوکوکوس اورئوس و انتخاب رویکرد درمانی مناسب برای آن میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
135 - بررسی میزان شیوع پاتوتیپ‌های اشریشیا کولای مولد اسهال از غذاهای آماده مصرف
رافد الزبیدی ندا فلاح عبداله جمشیدیسویههای اسهالی اشریشیا کولای (DEC) پاتوژنهای شایعی هستند که از طریق مصرف مواد غذایی آلوده باعث بیماریهای حاد رودهای در انسان میشود. مطالعه حاضر روی ۲۴۰ نمونه شامل اشترودل، پیتزا، ساندویچ و سالاد انجام شد. جداسازی اشریشیا کولای بهروش کشت و آزمونهای بیوشیمیائی انج أکثرسویههای اسهالی اشریشیا کولای (DEC) پاتوژنهای شایعی هستند که از طریق مصرف مواد غذایی آلوده باعث بیماریهای حاد رودهای در انسان میشود. مطالعه حاضر روی ۲۴۰ نمونه شامل اشترودل، پیتزا، ساندویچ و سالاد انجام شد. جداسازی اشریشیا کولای بهروش کشت و آزمونهای بیوشیمیائی انجام گردید. جهت تأیید تشخیص از روش PCR به‌وسیله تعیین حضور ژن uidA که یک ژن شاخص در اشریشیا کولای است، استفاد گردید. از تعداد 240 نمونه، تعداد 123 نمونه (25/51درصد) از نظر آلودگی به اشریشیا کولای مثبت ارزیابی شد و از تعداد 123 نمونه آلوده به اشریشیا کولای، تعداد 103 نمونه (9/42 درصد) فاقد ژنهای بیماریزای مورد بررسی بودند. تعداد 11 نمونه (6/4درصد) پاتوتایپ EPEC، 5 نمونه (2 درصد) EHEC، 2 نمونه (8/0 درصد) EAEC و 2 نمونه (8/0 درصد) DAEC مثبت تشخیص داده شد. در هیچ یک از نمونهها ETEC و EIEC مورد شناسایی قرار نگرفت. با توجه به آلودگی نمونههای غذائی آماده مصرف به پاتوتیپ‌های بیماریزای رودهای، پایش و نظارت مستمر بر عرصه مواد غذایی آماده مصرف پیشنهاد میشود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
136 - بررسی شیوع نئوسپورا کانینوم در پنیرهای سنتی تولید شده از شیر نشخوارکنندگان در استان چهارمحال و بختیاری بهروش مولکولی
دانیال عباسی طادی ابراهیم رحیمیپنیر یکی از محصولات شیر است که محیط مناسبی برای رشد و تکثیر میکروارگانیسم هاست. یکی از این عوامل بیماری زا، نئوسپورا کانینوم تک‌یاخته عامل سقط جنین در گاو است. هدف از مطالعه حاضر شیوع نئوسپورا کانینوم در پنیرهای سنتی تولیدشده از شیر نشخوارکنندگان بهروش مولکولی است. در أکثرپنیر یکی از محصولات شیر است که محیط مناسبی برای رشد و تکثیر میکروارگانیسم هاست. یکی از این عوامل بیماری زا، نئوسپورا کانینوم تک‌یاخته عامل سقط جنین در گاو است. هدف از مطالعه حاضر شیوع نئوسپورا کانینوم در پنیرهای سنتی تولیدشده از شیر نشخوارکنندگان بهروش مولکولی است. در این مطالعه 86 نمونه پنیر سنتی شامل پنیر گاوی 42، پنیر گوسفندی 20 ، پنیر بز 12 و پنیر گوسفندی سنتی رسیده در آب نمک 12 نمونه ، از گله های شیری واقع در استان چهارمحال و بختیاری به‌شکل تصادفی در لوله های آزمایش استریل جمعآوری شد. نمونه ها در شرایط سترون در کنار یخ و بلافاصله پس از نمونه گیری، به آزمایشگاه منتقل شدند. از تکنیک Nested-PCR روی ژن Nc5 جهت بررسی مولکولی استفاده شد. نتایج نشان داد که از مجموع 86 نمونه مورد بررسی، تعداد 8 نمونه (3/9 درصد) آلوده به نئوسپورا کانینوم بودند. بالاترین میزان آلودگی در نمونه های پنیر سنتی شیر گاو ( 5/12درصد) بود و در پنیرهای سنتی تولیدشده از شیر بز و پنیر گوسفندی سنتی رسیده در آب نمک هیچ آلودگی مشاهده نشد. مقایسه میزان آلودگی در پنیرهای مختلف نشان داد که بین هیچ کدام از گروه ها تفاوت معنی داری وجود ندارد. از آنجایی که شیر و محصولات لبنی جایگاه بالایی در سبد غذایی انسان دارد؛ بنابراین سلامت این مواد غذایی و عاری از عوامل بیماری زا بودن بسیار حائز اهمیت است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
137 - مطالعه اثر غلظتهای مختلف نمک بر بقای مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس در پنیر سفید فراپالایشی ایرانی
شهرام حنیفیان حسین جدیریمایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس (مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس) به دلیل ارتباط احتمالی با بیماری کرون (Crohn’s disease) در انسان به عنوان یک مخاطره بهداشتی برای سلامتی عمومی محسوب می گردد. هدف این مطالعه بررسی اثر غلظت های مختلف نمک بر بقای مایکوباکتریوم أکثرمایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس (مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس) به دلیل ارتباط احتمالی با بیماری کرون (Crohn’s disease) در انسان به عنوان یک مخاطره بهداشتی برای سلامتی عمومی محسوب می گردد. هدف این مطالعه بررسی اثر غلظت های مختلف نمک بر بقای مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس طی دوره رسیدن و نگهداری پنیر سفید فراپالایشی ایرانی است. شیر پاستوریزه گاوی متعاقب فرآیند فراپالایش با تعداد 2 واحد لگاریتمی در هر گرم (Log cfu/g) مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیستلقیح و سپس نمونه های پنیر حاوی مقادیر 2%، 3% و 4% نمک از آن تهیه گردید.تعداد مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس طی دوره رسیدن و نگهداری با استفاده از روش های F57-Quantitative Real-Time PCR (F57-qPCR) و کشت ارزیابی شد. به موازات آن، جمعیت باکتری های لاکتیکی کشت آغازگر و خصوصیات فیزیکوشیمیایی در نمونه های پنیر تعیین گردید. بر اساس نتایج مطالعه، کاهش تعداد مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس در نیمه اول دوره نگهداری (روز 1 تا روز 30) در تمامی نمونه ها آهسته و غیرمعنی دار (05/0p>) بود. اما با پیشرفت این دوره (از روز 30 تا روز 60)، روند کاهش تعداد مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس سریع و به لحاظ آماری معنی دار (01/0p<) گردید. هم چنین، در پایان دوره نگهداری (روز 60) تفاوت تعداد مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس در نمونه های پنیر دارای 4% نمک، به طور معنی داری (01/0>p) کمتر از نمونه های تهیه شده با 2% و 3 % نمک بود. با این حال در تمامی نمونه ها مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس بقای خود را تا انتهای دوره نگهداری حفظ نمود. به نظر می‌رسد استفاده از غلظت های بالاتر نمک روند کاهش مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس را تسریع می کند. به علاوه، با توجه به اثر زمان بر روند از بین رفتن مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس، نگهداری پنیر سفید فراپالایشی تا اواخر دوره موجب غیرفعال شدن تعداد بیشتری از مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
138 - مطالعه فراوانی شش ژن مولد آنتروتوکسین در استافیلوکوکوس آرئوس های جدا شده از پنیرهای محلی به روش Multiplex PCR
سامان مهدویبا توجه به اهمیت انتروتوکسینهای استافیلوکوکوس آرئوس به عنوان یکی از عوامل عمده مسمومیتهای غذایی، بررسی روشهای متعدد نظیر جداسازی، شناسایی و دسته‌بندی این انتروتوکسین‌ها ضروری است. در این تحقیق 22 سویه باکتری استافیلوکوکوس آرئوس کوآگولاز مثبت جدا شده از پنیرهای سنتی ر أکثربا توجه به اهمیت انتروتوکسینهای استافیلوکوکوس آرئوس به عنوان یکی از عوامل عمده مسمومیتهای غذایی، بررسی روشهای متعدد نظیر جداسازی، شناسایی و دسته‌بندی این انتروتوکسین‌ها ضروری است. در این تحقیق 22 سویه باکتری استافیلوکوکوس آرئوس کوآگولاز مثبت جدا شده از پنیرهای سنتی روستاهای شهرستان مراغه برای بررسی وجود شش ژن انتروتوکسین با استفاده از روش Multiplex PCRمورد ارزیابی قرار گرفتند. ابتدا DNA نمونهها استخراج شده و سپس Multiplex PCR برای حضور ژنهای انتروتوکسین a، b، g،h ،iو j بر روی نمونهها انجام شد. در بین ژنهای انتروتوکسین مورد آزمایش ژن Seg با بیشترین فراوانی (8 سویه) و ژن Seb با کمترین فراوانی (منفی) گزارش شد. در 9 مورد (9/40 %) از جدایهها، ژنهای انتروتوکسین مورد آزمایش مشاهده شد. چهار مورد (18/18%) دارای بیش از یک نوع ژن انتروتوکسین بودند. نتایج مطالعه نشان داد اکثر استافیلوکوکوس آرئوسهای جدا شده از پنیرهای محلی دارای پتانسیل تولید انتروتوکسین میباشند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
139 - مطالعه مقایسه‌ای روشهای کشت و PCR جهت تشخیص آلودگی شیر خام گاوهای به ظاهر سالم به مایکوباکتریوم اوویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس
یونس انزابیمایکوباکتریوم اوویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس عامل بیماری یون گاوی است که به عنوان یک بیماریهای عفونی مزمن محسوب میشود. نکته مهم از نظر بهداشت مواد غذایی، نقش احتمالی این باکتری در ایجاد بیماری کرون در انسان میباشد. شیوع بالای آلودگی با این باکتری در گاوهای شیری در سر أکثرمایکوباکتریوم اوویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس عامل بیماری یون گاوی است که به عنوان یک بیماریهای عفونی مزمن محسوب میشود. نکته مهم از نظر بهداشت مواد غذایی، نقش احتمالی این باکتری در ایجاد بیماری کرون در انسان میباشد. شیوع بالای آلودگی با این باکتری در گاوهای شیری در سرتاسر جهان گزارش شده است. در این ارتباط تشخیص باکتری مذکور در شیر دامهای سالم و مشکوک به آلودگی از مهمترین اقدامات جهت جلوگیری از گسترش عفونت محسوب میشود. کشت در محیط اختصاصی به عنوان روش مرجع برای تشخیص این باکتری میباشد. اما در عین حال، روش PCRبا شناسایی میکروارگانیسم‌های کند رشد نظیر مایکوباکتریوم اوویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس، این امکان را فراهم میکند تا در زمان بسیار کوتاه بتوان از این روش به عنوان یک آزمایش تشخیصی با حساسیت بالا استفاده کرد. لذا در پژوهش حاضر، آزمایشهای کشت و PCR بر روی نمونههای خامه و رسوب شیر 160 رأس گاو شیری به ظاهر سالم، انجام گردید. با بررسی یافته‌های حاصله بر اساس آزمون آماری کاپا مشاهده گردید، توافق بین کشت و PCR با محصول bp 400تقریباً کامل، توافق بین کشت و PCR با محصول bp228 اساسی و توافق بین دو آزمایش PCR با محصولات متفاوت ذکر شده هم اساسی برآورد گردید. در نهایت با مقایسه توافق بین دو آزمایش PCR استفاده شده در این پژوهش با روش کشت اختصاصی به عنوان آزمایش استاندارد طلایی تشخیص باکتری مذکور در نمونهها، میتوان اعلام کرد که آزمایش PCRمیتواند به عنوان یک روش سریع و دقیق جایگزینی مناسب به جای روشهای متداول در تشخیص مایکوباکتریوم اوویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس علی‌الخصوص بهعنوان یک آزمایش غربالگری در مورد نمونه شیر گاوها مطرح شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
140 - جداسازی، شناسایی و تعیین بیوتیپ یرسینیا انتروکولیتیکای بیماریزا از شیرهای پاستوریزه
شهرام حنیفیانبه منظور بررسی وجود سویه های بیماری زای یرسینیا انتروکولیتیکا در شیر پاستوریزه، طی سال 1390 تعداد 242 نمونه شیر پاستوریزه عرضه شده در تبریز جمع آوری گردید. نمونه ها در محیط PSBB غنی سازی شد و از ژن های ail و virFبه عنوان توالی های هدف برای ردیابی سویه های بیماری زای یر أکثربه منظور بررسی وجود سویه های بیماری زای یرسینیا انتروکولیتیکا در شیر پاستوریزه، طی سال 1390 تعداد 242 نمونه شیر پاستوریزه عرضه شده در تبریز جمع آوری گردید. نمونه ها در محیط PSBB غنی سازی شد و از ژن های ail و virFبه عنوان توالی های هدف برای ردیابی سویه های بیماری زای یرسینیا انتروکولیتیکا در نمونه های غنی شده استفاده گردید. از نمونه های مثبت در آزمایش PCR در محیط CIN آگار وMacConkeyآگار کشت داده شد و پرگنه های مشکوک با duplex-PCRتأیید گردید. جهت تعیین بیوتیپ یرسینیا انتروکولیتیکا،جدایه باکتری به وسیله آزمون های بیوشیمیایی مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین شمارش تعداد باکتری های شاخص بهداشتی و آزمون کیفی فسفاتاز قلیایی (ALP) بر روی نمونه های شیر پاستوریزه انجام یافت. یرسینیا انتروکولیتیکای بیماری زا در 61/6% (16 نمونه) از نمونه های شیر پاستوریزه با روش ail-PCR ردیابی گردید. در حالی که 13/4% (10 نمونه) از نمونه ها با روش virF-PCRمثبت تشخیص داده شد. از بین نمونه های مثبت در آزمایش PCR، فقط 41/0% (1 نمونه) به وسیله کشت جداسازی و با duplex-PCR تأیید گردید. بر اساس آزمایش های بیوشیمیایی، جدایه یرسینیا انتروکولیتیکا ازنوع بیوتیپ 4 تعیین گردید. طبق نتایج مطالعه، 57/11% (28 نمونه) از نمونه های شیر پاستوریزه ALP مثبت بودند و تعداد باکتری های شاخص بهداشتی در این نمونه ها در قیاس با نمونه های ALP منفی تفاوت معنی دار (01/0>p) نشان داد. با توجه به حساسیت زیاد یرسینیا انتروکولیتیکا نسبت به حرارت پاستوریزاسیون، لذا آلودگی ثانویه می تواند دلیل اصلی حضور یرسینیا انتروکولیتیکای زنده در شیر پاستوریزه باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
141 - مطالعه پلیمورفیسم ژن کوآگولاز در استافیلوکوکوس آرئوسهای جدا شده از شیر گاومیش
جلال شایق علی رضا منادیهدف از این مطالعه آنالیز ژن کوآگوالاز در استافیلوکوکوس آرئوسهای جدا شده از شیر گاومیش‌های بومی در شمال غربی ایران بود. برای این منظور تعداد 75 جدایه استافیلوکوکوس آرئوس به روش PCR-RFLP مورد آزمایش قرار گرفتند. نتیجه تکثیر شده برای ژن کوآگولاز تولید باندهای با اندازه‌ها أکثرهدف از این مطالعه آنالیز ژن کوآگوالاز در استافیلوکوکوس آرئوسهای جدا شده از شیر گاومیش‌های بومی در شمال غربی ایران بود. برای این منظور تعداد 75 جدایه استافیلوکوکوس آرئوس به روش PCR-RFLP مورد آزمایش قرار گرفتند. نتیجه تکثیر شده برای ژن کوآگولاز تولید باندهای با اندازه‌های 600، 700، 760 و 850 جفت باز بود که به ترتیب 12، 25، 29 و 9 مورد از جدایههای مورد آزمایش را شامل می‌شد. از هضم باندهای مذکور با آنزیم AluI الگوهای متفاوتی از هر اندازه بدست آمد. اما الگوهای متعلق به یک اندازه، مشابه هم بودند. نتایج آنالیز ژن کواگولاز در این مطالعه مشابه نتایج حاصل از جدایههای گاوی بودند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
142 - مطالعه اثر ضدمیکروبی اسانس رزماری بر سه باکتری بیماریزای غذایی در سبزیجات با استفاده از PCR کمی و پروپیدیوم مونوآزید
مریم عزیزخانی پاتریسیا الیزاکویویلاسانسهای گیاهی از دیرباز با هدف بهبود طعم در مواد غذایی به‌کار می‌رفتند. امروزه این اسانس‌ها به‌علت داشتن ترکیبات ضدمیکروبی بهعنوان نگهدارندههای طبیعی در محصولات غذایی مورد استفاده قرار می‌گیرند. در این مطالعه، ابتدا حداقل غلظت کشندگی رزماری علیه اشریشیا کولایO157: أکثراسانسهای گیاهی از دیرباز با هدف بهبود طعم در مواد غذایی به‌کار می‌رفتند. امروزه این اسانس‌ها به‌علت داشتن ترکیبات ضدمیکروبی بهعنوان نگهدارندههای طبیعی در محصولات غذایی مورد استفاده قرار می‌گیرند. در این مطالعه، ابتدا حداقل غلظت کشندگی رزماری علیه اشریشیا کولایO157: H7، سالمونلا انتریکا و لیستریا مونوسیتوژنز تعیین شد. سپس کمیت سلولهای زنده در یک جمعیت باکتریایی تحت تیمار با اسانس رزماریبا PMA-qPCRتعیین شد. طبق نتایج مطالعه، غلظتهای 1% ، 45/0% و 9/0% بهترتیب موجب غیرفعال شدن لیستریا مونوسیتوژنز، اشریشیا کولایO157: H7و سالمونلا انتریکا شد. لیستریا مونوسیتوژنز طی 45 دقیقه غیرفعال گردید، در حالیکه سالمونلا انتریکا و اشریشیا کولای طی 90 دقیقه از بین رفتند. از آنجایی که اسانس رزماری در غلظتهای پایین‌تر از سایر اسانس‌ها قادر به غیرفعال‌سازی برگشت‌ناپذیر سه پاتوژن مورد آزمایش شد، لذا دارای پتانسیل لازم جهت استفاده بهعنوان افزودنی طبیعی یا نگه‌دارنده زیستی در مواد غذایی میباشد. علاوه بر این، یافتهها نشان داد روش PMA-qPCR یک روش کمی دقیق و اختصاصی برای جستجو و تشخیص انتخابی باکتریهای بیماریزای زنده میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
143 - مطالعه میزان شیوع آلودگی گوشت‌های گاو تازه عرضه شده در سطح شهرستان سنندج به سالمونلا انتریتیدیس و تایفی موریوم، سال91
هیوا کریمی دره آبی فرزین اسماعیل پور کیوان ابراهیمی محمدیسالمونلا یکی از مهمترین عوامل عفونت غذایی است که میتواند عوارض مختلفی را در دستگاه گوارش ایجاد کند. گوشت به عنوان یکی از مهمترین عوامل انتقال عفونت سالمونلایی در انسان شناخته شده است. در این مطالعه برای بررسی میزان آلودگی سالمونلایی، 60 نمونه گوشت گاو تازه توزیع شده در أکثرسالمونلا یکی از مهمترین عوامل عفونت غذایی است که میتواند عوارض مختلفی را در دستگاه گوارش ایجاد کند. گوشت به عنوان یکی از مهمترین عوامل انتقال عفونت سالمونلایی در انسان شناخته شده است. در این مطالعه برای بررسی میزان آلودگی سالمونلایی، 60 نمونه گوشت گاو تازه توزیع شده در سطح قصابی‌ها و فروشگاه‌های عرضه گوشت سنندج در شرایط استریل نمونه‌برداری شده و برای جداسازی سالمونلا کشت داده شده و نتایج با استفاده از PCR مورد ارزیابی قرار گرفت. به منظور تشخیص تائیدی کلنی‌های جداسازی شده به عنوان جنس سالمونلا و تفریق گونههای تایفی موریوم و انتریتیدیس با استفاده از روش Multiplex-PCR از سه جفت پرایمر شامل 138S،S141 اختصاصی ژن InvA، پرایمرهای Flil5، Tym اختصاصی ژن fliC و پرایمرهای Prot6e-5 ، Prot6e-6 اختصاصی ژن Prot6E به ترتیب اختصاصی جنس سالمونلا، گونههای تایفی‌موریوم و انتریتیدیس مورد استفاده قرار گرفت. در مجموع نتایج حاصل از کشت میکروبی 12 نمونه (20%) آلوده به سالمونلا بودند، در حالی که بر اساس آزمایش PCR روی جدایههای حاصله در نهایت 7 مورد (6/11%) از نمونهها آلوده به سالمونلا تشخیص داده شدند. 4 مورد (6/6%) از نمونهها آلوده به سالمونلا تایفی موریوم تشخیص داده شدند و از هیچکدام از نمونهها سالمونلا انتریتیدیس جدا نشد (0%). این مطالعه نشان داد که میزان شیوع آلودگی سالمونلایی در گوشت تازه گاو توزیع شده در سطح سنندج بالا میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
144 - جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس از فرآورده‌های گوشتی و بررسی حضور ژن مولد انتروتوکسین A
مهسا سپیدارکیش مسعود قانعاستافیلوکوکوس اورئوس، یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده بیماریهای منتقله از راه مواد غذایی میباشد.هدف از انجام این مطالعه، تعیین میزان فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس در فرآورده‌های گوشتی و شناسایی ژن تولیدکننده انتروتوکسینSEAمیباشد. پس از جمعآوری 150 نمونه گوشتی، نمونه أکثراستافیلوکوکوس اورئوس، یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده بیماریهای منتقله از راه مواد غذایی میباشد.هدف از انجام این مطالعه، تعیین میزان فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس در فرآورده‌های گوشتی و شناسایی ژن تولیدکننده انتروتوکسینSEAمیباشد. پس از جمعآوری 150 نمونه گوشتی، نمونهها با استفاده از تکنیک استاندارد کشت و تستهای فنوتایپینگ استاندارد از نظر وجود استافیلوکوکوس اورئوس مورد بررسی قرار گرفتند. پس از استخراج DNA، آزمون PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی جهت شناسایی ژن sea صورت گرفت. بر اساس نتایج به دست آمده، در 19 مورد نمونه (6/12%) استافیلوکوکوس اورئوس جدا گردید. بیشترین میزان آلودگی به ترتیب، مربوط به ماهی دودی (30%)، کباب لقمه (6/16%)، انواع کالباس و ژامبون (3/13%) و شنسل مرغ (3/3%) بود. در انواع سوسیس هیچ موردی از آلودگی به استافیلوکوکوس اورئوس مشاهده نگردید. بررسی‌های آماری نشان داد که در مقایسه میزان فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس و نوع فرآورده های گوشتی اختلاف آماری معنیدار وجود دارد (05/0 >p). همچنین با انجام تکنیک PCR مشخص گردید که ژن sea در هیچیک از جدایهها وجود ندارد. در این مطالعه میزان آلودگی مواد غذایی مورد بررسی به استافیلوکوکوس اورئوس نسبتاً قابل ملاحظه میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
145 - جداسازی استافیلوکوکوس آرئوس کوآگولاز مثبت از گوشت و روده اردک‌های بومی اطراف تبریز
افشین جوادی سیروس رفیعی اصل فرهاد شاهیان حامد قاضی هشترودیاستافیلوکوکوس آرئوس کواگولاز مثبتبه عنوان سومین عامل مهم بیماریهای با منشأ مواد غذایی مطرح میباشد. این باکتری بر روی مواد غذایی پروتئینی و کربوهیدراتی رشد کرده و با تولید سم باعث ایجاد مسمومیت غذایی میشود. هدف از این مطالعه جداسازی، شناسایی و شمارش استافیلوکوکوس آرئو أکثراستافیلوکوکوس آرئوس کواگولاز مثبتبه عنوان سومین عامل مهم بیماریهای با منشأ مواد غذایی مطرح میباشد. این باکتری بر روی مواد غذایی پروتئینی و کربوهیدراتی رشد کرده و با تولید سم باعث ایجاد مسمومیت غذایی میشود. هدف از این مطالعه جداسازی، شناسایی و شمارش استافیلوکوکوس آرئوس در گوشت و محتویات رودهای اردک های بومی مناطق اطراف تبریز میباشد. برای این منظور، به طور تصادفی 35 قطعه اردک بومی از روستاهای اطراف تبریز خریداری و پس از کشتار مقدار 50 گرم از گوشت ران و 10 گرم از مدفوع نمونه برداری و مطابق با روش استاندارد ملی ایران مورد آزمایش قرار گرفتند. برای تأیید جدایههای استافیلوکوکوس آرئوس از تکنیک PCR استفاده گردید. نتایج نشان داد که 14/17% نمونههای گوشت و محتویات رودهای آلوده به استافیلوکوکوس آرئوس بودند. میانگین بار آلودگی استافیلوکوکوس آرئوس در گوشت و مدفوع به ترتیبCFU 87 وCFU 64 به ازای هر گرم برآورد گردید. به نظر می‌رسد آلودگی گوشت با استافیلوکوکوس آرئوسمی‌تواند از طریق دستکاری غیربهداشتی در حین کشتار و یا تماس لاشه‌ها با پوست و محتویات روده صورت گرفته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
146 - مطالعه میزان شیوع ژنهای آنتروتوکسین‌های معمول در استافیلوکوکوس آرئوسهای جدا شده از شیر گاومیش‌های شهرستان تبریز به روش Multiplex PCR
مهرداد اثنی عشری جلال شایق آیت الله نصرالهی عمرانبا توجه به اهمیت آنتروتوکسین‌های استافیلوکوکوس موجود در شیر به عنوان یکی از منابع عمده مسمومیتهای غذایی، بررسی روشهای متعدد جداسازی، شناسایی و دسته‌بندی این آنتروتوکسین‌ها ضروری است. در این مطالعه توصیفی 75 نمونه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر گاومیش برای أکثربا توجه به اهمیت آنتروتوکسین‌های استافیلوکوکوس موجود در شیر به عنوان یکی از منابع عمده مسمومیتهای غذایی، بررسی روشهای متعدد جداسازی، شناسایی و دسته‌بندی این آنتروتوکسین‌ها ضروری است. در این مطالعه توصیفی 75 نمونه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر گاومیش برای بررسی وجود و حضور ژن های مربوط به آنتروتوکسین‌های معمول استافیلوکوکوس آرئوس با استفاده از روشMultiplex PCRمورد ارزیابی قرار گرفتند. بدین صورت که ابتدا DNA نمونهها استخراج سپس برای اطمینان از استافیلوکوکوس بودن تمام نمونهها به روش PCR مورد تأیید قرار گرفتند. نتایج حاصل نشان داد که از این تعداد نمونه باکتریایی یک جدایه دارای هر دو باند آنتروتوکسین هایseb و آنتروتوکسینsecبود و سه جدایه دیگر فقط دارای آنتروتوکسین sec بودند و ژن مربوط به آنتروتوکسین A در هیچکدام از جدایه ها شناسایی نشد. بر اساس نتایج این تحقیق میزان شیوع تنوع ژن های مربوط به آنتروتوکسین های معمول در استافیلوکوکوس آرئوس های جدا شده از شیر گاومیش در شهرستان تبریز پایین می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
147 - مطالعه وضعیت ابتلا ماهیان قزل‌آلای رنگین‌کمان پرورشی به استرپتوکوکوس اینیایی و لاکتوکوکوس گارویه در برخی میادین عرضه ماهی تهران و کرج (مقاله کامل تحقیقاتی)
علی طاهری میرقائد مهدی سلطانی زهرا محمودی سیدپژمان حسینی شکرابیاسترپتوکوکوزیس از بیماریهای مهم و اقتصادی در صنعت آبزی پروری به‌ویژه برای ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان است و سالانه خسارات فراوانی را به این صنعت وارد میکند. از سوی دیگر این بیماری یکی از بیماریهای مشترک بین ماهیان و انسان میباشد که موجب بیماری و تلفات انسانی در بین مصر أکثراسترپتوکوکوزیس از بیماریهای مهم و اقتصادی در صنعت آبزی پروری به‌ویژه برای ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان است و سالانه خسارات فراوانی را به این صنعت وارد میکند. از سوی دیگر این بیماری یکی از بیماریهای مشترک بین ماهیان و انسان میباشد که موجب بیماری و تلفات انسانی در بین مصرف‌کنندگان ماهیان آلوده میشود. در این مطالعه وضعیت آلودگی ماهیان قزل‌آلای پرورشی به استرپتوکوکوس اینیایی (Streptococcus iniae) و لاکتوکوکوس گارویه (Lactococcus garvieae) عامل بیماری در پنج میدان عرضه ماهی مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور نمونههای ماهیان با علایم ظاهری غیرطبیعی از برخی بازارهای فروش ماهی در شهرهای تهران و کرج خریداری و آزمونهای میکروبی بر روی آنها انجام گرفت. پس از رنگ‌آمیزی گرم و مشاهده کوکسی‌های گرم مثبت، گونههای باکتریایی با انجام آزمایشات بیوشیمیایی و PCR شناسایی شدند. طبق نتایج به‌دست آمده، از مجموع 64 ماهی مورد مطالعه، 36 مورد (23/56%) مبتلا به این دو باکتری بیماریزا بوده که از این میزان در 21 (8/32%) مورد استرپتوکوکوس اینیایی و در 15 (43/23%) مورد لاکتوکوکوس گارویه جداسازی گردید. بیشترین و کمترین میزان فراوانی ابتلا به استرپتوکوکوس اینیایی بهترتیب در کرج (62/15%) و کهریزک (0%) مشاهده شد. بیشترین و کمترین میزان فراوانی ابتلا به لاکتوکوکوس گارویه نیز بهترتیب مربوط به کرج و شهریار (81/7%) و میدان نبی (56/1%) بود. نتیجه این مطالعه حاکی از میزان بالای آلودگی ماهیان عرضه شده به استرپتوکوکوزیس و لاکتوکوکوزیس میباشد و لذا نیازمند مطالعه بیشتر در این زمینه است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
148 - شناسایی تقلبات موجود در سوسیس و کالباس تهیه شده از گوشت گاو بر اساس شناسایی ژنهای میتوکندریایی گونههای حیوانی در استان تهران
سید ابراهیم حسینی فرزانه تفویضی مریم تاج آبادی ابراهیمی انوشه شریفانهدف از این مطالعه توسعه روش PCR‎ خاص گونه‌ها برای شناسایی دقیق و سریع گوشت گونههای حیوانی در فرآورده‌های گوشتی برای تشخیص تقلبات احتمالی در این محصولات است. برای تعیین گوشت گاو و مرغ، پرایمرها بر اساس ژن سیتوکروم bمیتوکندریایی طراحی و قطعات bp274 وbp 183به ترتیب بر أکثرهدف از این مطالعه توسعه روش PCR‎ خاص گونه‌ها برای شناسایی دقیق و سریع گوشت گونههای حیوانی در فرآورده‌های گوشتی برای تشخیص تقلبات احتمالی در این محصولات است. برای تعیین گوشت گاو و مرغ، پرایمرها بر اساس ژن سیتوکروم bمیتوکندریایی طراحی و قطعات bp274 وbp 183به ترتیب برای گوشت گاو و مرغ تکثیر گردید. از ده برند مختلف سوسیس تهیه شده از گوشت گاو در سرتاسر استان تهران نمونه‌گیری گردید. نتایج PCR‎ اختصاصی نشان داد، تمام نمونهها برخلاف بر چسب‌شان حاوی آلایشمرغی بودند و احشای گاوی در پنج نمونه تشخیص داده شد. به‌علاوه، روش PCR‎ قادر است بدون واکنش متقاطع گونههای گوشتی را شناسایی کند. این تکنیک به علت سرعت، سادگی، حساسیت و اختصاصی بودن،پتانسیل بالایی برای تشخیص تقلبات گوشتی در سوسیس دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
149 - ردیابی مولکولی اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) و ویروس بیماری نیوکاسل در شترمرغ‌های استان اصفهان
عباس علی شعبانی مجید غلامی آهنگران حسن ممتازبا هدف شناسایی باکتری اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) و ویروس بیماری نیوکاسل در تلفات حاد شترمرغ، 40 نمونه نای از 22 گله شترمرغ واجد تلفات از نقاط مختلف استان اصفهان با ثبت تاریخچه جمعآوری شد. پس از استخراج RNA و DNA از بافت نای با کیت ترانس کریپتاز معکوس cDNA تهیه ش أکثربا هدف شناسایی باکتری اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) و ویروس بیماری نیوکاسل در تلفات حاد شترمرغ، 40 نمونه نای از 22 گله شترمرغ واجد تلفات از نقاط مختلف استان اصفهان با ثبت تاریخچه جمعآوری شد. پس از استخراج RNA و DNA از بافت نای با کیت ترانس کریپتاز معکوس cDNA تهیه شد. DNA استخراج شده با پرایمرهای اختصاصی جهت تکثیر ژن 16srRNA باکتری ORT مورد ارزیابی قرار گرفت و cDNA تهیه شده با پرایمرهای اختصاصی ژن M نیوکاسل تکثیر شد. ژن 16srRNA در کنترل مثبت به‌خوبی تکثیر شد و قطعه 784 جفت بازی به دست آمد، اما در هیچ کدام از نمونههای اخذشده، قطعه مورد نظر تکثیر نشد. علاوه بر آن، در 24 نمونه از 40 نمونه جمعآوری شده (60 درصد)، قطعه 1097 جفت بازی ژن M ویروس نیوکاسل تکثیر شد. از مجموع 22 گله مورد بررسی با مرگ حاد، 15 گله یا به‌عبارتی 18/68درصد گله‌ها آلوده به ویروس نیوکاسل بودند. با توجه به نتایج این مطالعه میتوان بیان داشت که در حال حاضر آلودگی با ORT در گلههای شترمرغ در استان اصفهان منتفی است، اما ویروس نیوکاسل سهم بالایی در ایجاد تلفات حاد در گلههای شترمرغ دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
150 - جداسازی سالمونلا از مزارع و خوراک مرغ مادر گوشتی ایران
منصور میاحی فروغ طلازاده رمضانعلی جعفری وحید کشاورز زمانیانآلودگی طیور با باکتری های جنس سالمونلا یکی از مسائل مهم در زمینه سلامت انسان و طیور محسوب می شود و ماکیان نقش مهمی در انتشار و شیوع سالمونلوز در انسان دارند. هدف این مطالعه جداسازی سالمونلا از مزارع و خوراک مرغ مادر گوشتی ایران میباشد. بدین منظور از 62 گله مرغ مادر گو أکثرآلودگی طیور با باکتری های جنس سالمونلا یکی از مسائل مهم در زمینه سلامت انسان و طیور محسوب می شود و ماکیان نقش مهمی در انتشار و شیوع سالمونلوز در انسان دارند. هدف این مطالعه جداسازی سالمونلا از مزارع و خوراک مرغ مادر گوشتی ایران میباشد. بدین منظور از 62 گله مرغ مادر گوشتی و خوراک آن ها در 21 استان کشور در محدوده زمانی یک ساله نمونه برداری صورت گرفت و با استفاده از روش کشت مرسوم شامل مراحل پیش غنی سازی، غنی سازی و کشت در محیط های اختصاصی و تفریقی، تعداد 18 جدایه سالمونلا تشخیص داده شد. جهت تأیید هویت سالمونلای تشخیص داده شده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه استفاده شد و 12 جدایه سالمونلا تأیید گردید که 7 جدایه (33/58 درصد) مربوط به سالمونلا انتریتیدیس در استان های قزوین، مازندران و مرکزی، 3 جدایه (25 درصد) مربوط به سالمونلا اینفانتیس در استان های کردستان و جنوب خراسان و 2 جدایه (66/16 درصد) مربوط به سالمونلا تیفی موریوم در استان های فارس و لرستان مشخص گردید. تمامی نمونههای خوراک از نظر آلودگی به باکتریهای جنس سالمونلا منفی بودند. نتایج این مطالعه نشان داد تعدادی از مزارع مرغ مادر ایران به باکتری سالمونلا آلوده می باشند و سالمونلای غالب در مزارع مرغ مادر گوشتی ایران به ترتیب سالمونلا انتریتیدیس، سالمونلا اینفانتیس و سالمونلا تایفی موریوم میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
151 - جستجو و شناسایی هلیکوباکتر پلوروم در کبد و محتویات سکوم تعدادی از طیورگوشتی ارجاعی به درمانگاه‌های شهر تبریز، با استفاده از روشهای کشت و PCR
سید محمد علوی شوشتری افشین جوادی غلامرضا زرینی حمید میرزایی شهرام حنیفیاننقش بالقوه هلیکوباکتر پلوروم به عنوان عامل نوظهور ایجاد عفونت غذایی و یک بیماری مشترک بین انسان و دام ثابت شده است. این باکتری از محتویات سکوم، کبد و دوازدهء طیور تخمگذار و گوشتی و همچنین از محتویات دستگاه گوارش و مجاری صفراوی در موارد بیماریهای التهاب معده ای &ndas أکثرنقش بالقوه هلیکوباکتر پلوروم به عنوان عامل نوظهور ایجاد عفونت غذایی و یک بیماری مشترک بین انسان و دام ثابت شده است. این باکتری از محتویات سکوم، کبد و دوازدهء طیور تخمگذار و گوشتی و همچنین از محتویات دستگاه گوارش و مجاری صفراوی در موارد بیماریهای التهاب معده ای – رودهای انسان، جدا شده است. هدف از انجام مطالعه حاضر، بررسی آلودگی به هلیکوباکتر پلوروم در طیور گوشتی دارای علائم آنتریت ارجاعی به یکی از کلینیک‌های طیور سطح شهر تبریز بود. بدین منظور، تعداد 70 نمونه محتویات سکوم و 70 نمونه کبد مربوط به 14 گله جوجه گوشتی با استفاده از روشهای کشت باکتریایی و PCR (Polymerase Chain Reaction) مورد ارزیابی قرارگرفت. بر اساس یافته ها، تعداد10 نمونه از محتویات سکوم مربوط به 2 گله متفاوت، در آزمایشات مربوط به کشت و نیز آزمون مولکولی PCR، از نظر وجود باکتری هلیکوباکتر پلوروم مثبت بودند، در حالی که هیچ یک از نمونههای کبد از این نظر مثبت نبود. با توجه به نقش هلیکوباکتر پلوروم در ایجاد تلفات وخسارت در طیور پرورشی و اهمیت اقتصادی مربوطه و جایگزینی آن در دستگاه گوارش طیور و امکان ایجاد آلودگی ثانویهء لاشه‌ها در حین عملیات کشتار و نیز زئونوز بودن بیماری مذکور ، لذا باکتری فوق بهعنوان یک عامل خطر بهداشتی تهدیدکننده سلامت مصرف‌کنندگان، همواره مطرح میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
152 - شناسایی مایکوپلاسما بویس در گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با استفاده از کشت و روش واکنش زنجیرهای پلیمراز بر اساس ژنهای 16SrRNA و uvrC
محسن ایمان‌‌دار سید علی پوربخش محمود جمشیدیان تقی زهرائی صالحیمایکوپلاسما بویس از عوامل اصلی ایجاد پنومونی، ورم پستان و آرتریت مایکوپلاسمائی در گاو میباشد. هدف از این مطالعه، شناسایی مایکوپلاسما بویس در گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با استفاده از کشت و روش زنجیرهای پلیمراز بود. این مطالعه روی تعداد 328 نمونه شیر گاو مبتلا به أکثرمایکوپلاسما بویس از عوامل اصلی ایجاد پنومونی، ورم پستان و آرتریت مایکوپلاسمائی در گاو میباشد. هدف از این مطالعه، شناسایی مایکوپلاسما بویس در گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با استفاده از کشت و روش زنجیرهای پلیمراز بود. این مطالعه روی تعداد 328 نمونه شیر گاو مبتلا به ورم پستان بالینی که در طول یک سال به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسمای مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی ارجاع می‌شد، اجرا گردید. نمونهها در دمای 4 درجه سلسیوس و در مدت کمتر از 24 ساعت به آزمایشگاه ارسال و به مدت 24-18 ساعت در 37 درجه سلسیوس انکوبه می شدند و پس از فیلتر شدن به محیط اختصاصی PPLO، در انکوباتور Co2دار به مدت 10-7 روز از نظر رشد پایش می شدند. همزمانDNA نمونهها به وسیله روش فنل- کلروفرم استخراج و خالص سازی شده و از روش PCR برای تشخیص جنس مایکوپلاسما بر اساس ژن 16SrRNA و برای تشخیص گونه بویس از جستجوی وجود ژن uvrC استفاده گردید.از تعداد 328 نمونه، 58 مورد (69/17 درصد) در محیط کشت PPLO مثبت شناخته شدند. از نظر حضور ژن مربوط به جنس مایکوپلاسما، تعداد 97 نمونه (57/29 درصد) مثبت شناخته شدند که از این تعداد، 14 نمونه (26/4 درصد) ژن اختصاصی گونه بویس (uvrC) را نشان دادند.نتایج این مطالعه روش PCR را به عنوان یک تست سریع و قابل اعتماد در شناسایی مایکوپلاسما بویس در نمونههای شیر معرفی کرده و نشان داد که میزان حضور مایکوپلاسما بویس در گلههای شیری در ایران بالا است و میتواند به عنوان یکی از عوامل اصلی مسبب ورم پستان بالینی در گاو مطرح باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
153 - تعیین میزان آلودگی به تیلریا آنولاتا در کنه‌های ایکسودیده در منطقه ارومیه به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR)
احمد نعمت الهی ایرج پناهیتیلریوز یکی از بیماریهای مهم انگلی تک‌یاخته‌ای در ایران می باشد که باعث بروز ضررهای اقتصادی و مرگ‌ومیر در دام‌ها می شود. این بیماری توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده منتقل میشود و با تب، کم خونی، آنوکسی و نهایتاً مرگ دام همراه است. تشخیص بیماری سابقاً بر اساس رنگ‌آمیزی ن أکثرتیلریوز یکی از بیماریهای مهم انگلی تک‌یاخته‌ای در ایران می باشد که باعث بروز ضررهای اقتصادی و مرگ‌ومیر در دام‌ها می شود. این بیماری توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده منتقل میشود و با تب، کم خونی، آنوکسی و نهایتاً مرگ دام همراه است. تشخیص بیماری سابقاً بر اساس رنگ‌آمیزی نمونههای خونی و غدد لنفاوی با روش گیمسا انجام می‌پذیرفت. استفاده از روشهای مولکولی به دلیل بالا بودن حساسیت و ویژگی نسبت به روشهای قبلی ارجحیت دارد. به دلیل این که در دامداری‌های سنتی ایران کنه‌های ایکسودیده که میتوانند ناقل بیماری باشند به فراوانی یافت میشوند، شناسایی این کنه‌ها اهمیت فراوان دارد. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی آلودگی به تیلریا در کنه های جداشده از گاوهای منطقه ارومیه انجام پذیرفت. تعداد 100 کنه از گله های با تاریخچه آلودگی به تیلریا در منطقه جمع آوری و با استفاده از کلیدهای تشخیص شناسایی شدند. از مجموع 100 کنه مورد آزمایش، تک‌یاخته‌های انگلی هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم (33 درصد)، هیالوما دیتریتوم (16 درصد)، بووفیلوس آنولاتوس (16 درصد)، درماسنتور مارژیناتوم (14 درصد)، ریپیسفالوس بورسا (9 درصد)، هیالوما آناتولیکوم اکسکاواتوم (7 درصد)، درماسنتور نیووس (4 درصد) و همافیزالیس پونکتاتا (1 درصد) شناسایی شدند. کنه غالب هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم تشخیص داده شد. غدد بزاقی کنه ها پس از جداسازی با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی مربوط به گونه تیلریا آنولاتا (N516 وN517) مورد آزمایش PCR قرار گرفتند. آزمایش PCR وجود باند اختصاصی با اندازه bp 721 ناشی از وجود تیلریا آنولاتا را روی ژل آگارز در 62 درصد کنه ها مشخص ساخت. میزان بالای آلودگی در کنه های ناقل موجود در منطقه پتانسیل بالای آنها را در راه آلودگی گاوها به عامل تیلریا آنولاتا را می رساند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
154 - ارزیابی تشخیص سریع و بررسی حضور ژنهای حدت اپرون spv در جدایههای سالمونلا با استفاده از روشهای مولکولی simplexPCR و multiplexPCR
سمیه یزدی امیرخیز یونس انزابی ساناز مهمازیامروزه بـرای شناسـایی و تشخیص سروتیپ های سالمونلا در نمونه های بالینی و مواد غذائی از روشهای سنتی تشخیص این باکتری استفاده مـی‌گـردد که وقت گیر و گاهی مشکل ساز میباشند، اما با کشف روشهای سریع تشخیص مولکولی، این مشکلات تا حد زیادی مرتفع گردیده است. مطالعه حاضر، با هد أکثرامروزه بـرای شناسـایی و تشخیص سروتیپ های سالمونلا در نمونه های بالینی و مواد غذائی از روشهای سنتی تشخیص این باکتری استفاده مـی‌گـردد که وقت گیر و گاهی مشکل ساز میباشند، اما با کشف روشهای سریع تشخیص مولکولی، این مشکلات تا حد زیادی مرتفع گردیده است. مطالعه حاضر، با هدف تشخیص سریع جدایه های مختلف سالمونلا بر اساس جسجوی ژن کروموزومی invA و نیز شناسائی جدایه های حاد حاوی ژن های حدت اپرون spv انجام گردید. بدین منظور تعداد 20 جدایه انسانی سالمونلا از بیمارستان های شهر تبریز و 20 جدایه این باکتری که از پنیرهای سنتی عرضه شده در بازار مصرف تبریز جدا شده بود، تهیه گردید. ابتدا با استفاده از پرایمر های اختصاصی ژن invA ، تائید مولکولی جدایه ها با استفاده از روشsimplex PCR ارزیابی گردید. در ادامه برای بررسی سویه های حاد باکتری مذکور براساس حضور ژن های اپرون spv، با استفاده از پرایمرهای اختصاصی مربوطه، به روشmultiplex PCR حضور ژن های R، C، B وspvA بررسی شد. یافته ها اولاً نشان دهنده تائید مولکولی همه جدایه ها بود. ثانیاً همه 40 جدایه مورد آزمایش دارای 3 ژن R، C وspvA بوده ولی هیچ کدام از آن ها دارای ژنspv B نبودند. به نظر می رسد که با توجه به محدودیت ها و مشکلات موجود در روش بررسی آزمایشگاهی سنتی سالمونلاها، می توان ازPCR به عنوان روشی سریع در تشخیص آلودگی به باکتری سالمونلا استفاده کرد. همچنین بایستی وجود 3 ژن از 4 ژن حدت اپرون spv در جدایه های مختلف سالمونلا در منطقه تبریز را یافته ای نامطلوب تلقی کرد که لزوم رعایت بیشتر اصول کنترل و پیشگیری در جوامع دامی و انسانی را تاکید می کند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
155 - شناسایی ژنهای blaTEM، blaSHV و blaOXA در جدایههای اشریشیا کلی جمعآوری شده از کلی‌باسیلوز طیور با استفاده از روشMultiplex-PCR
زهره مهرانی فر میترا صالحی کیومرث امینیچکیده مقاومت ضدمیکروبی ایجاد شده به واسطه تولید آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs) در اشریشیا کلی یک تهدید اساسی در کلی باسیلوزیس ماکیان محسوب می شود. مطالعه حاضر به شناسایی ژن های blaTEM، blaSHVو blaOXAدر جدایه های اشریشیا کلی به دست آمده از کلی باسیلوزیس طیور أکثرچکیده مقاومت ضدمیکروبی ایجاد شده به واسطه تولید آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs) در اشریشیا کلی یک تهدید اساسی در کلی باسیلوزیس ماکیان محسوب می شود. مطالعه حاضر به شناسایی ژن های blaTEM، blaSHVو blaOXAدر جدایه های اشریشیا کلی به دست آمده از کلی باسیلوزیس طیور با استفاده از روش MPCR می پردازد. در مجموع، 60 جدایه اشریشیا کلیاز طیور استان کرمان به دست آمد. DNA سلولی با استفاده از کیت DNA-سیناژن (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF) استخراج و PCR چندگانه به منظور شناسایی ژن های OXA،SHVو TEMانجام شد. نتایج تست CDT نشان داد که 45 جدایه (75 درصد) مولد ESBLs بودند. تعداد 19 و 13 جدایه (6/31 درصد و 6/21 درصد) به ترتیب برای ژن هایbla OXA و bla aada مثبت بودند. تعداد 7 جدایه (6/11 درصد) به طور هم زمان ژن های OXA و aada را حمل می کردند. تمام ایزوله ها برای ژن های TEM و SHV منفی بودند. نتایج نشان داد، با اینکه روشدیسکدیفیوژنبرایشناسایی ESBLs روشیبسیارکاربردیو مقرونبهصرفهمی باشد، ولی روش جدید طراحی شده Multiplex-PCR در این مطالعه می تواند به صورت روزمره در آزمایشگاه تشخیصی دامپزشکی برای شناسایی انتروباکتریاسه مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs) به کار رود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
156 - مقایسه واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) و الیزای تجاری بهمنظور شناسایی عفونت با ویروس لکوز در گاوهای شیری
رضی‌اله جعفری‌جوزانی غلامعلی مقدم محسن آسمندویروس لوسمی گاوی (BLV) یک رتروویروس است که باعث لکوز انزوتیک گاوی می شود. روش متداول برای شناسایی وجود عفونت با BLV غربالگری آنتی بادی ها است. آگار ژل ایمونودیفیوژن و الیزا به طور گسترده ای برای شناسایی آنتی بادی های ضد BLV استفاده می شود. تکثیر و شناسایی DNA پروویروس ل أکثرویروس لوسمی گاوی (BLV) یک رتروویروس است که باعث لکوز انزوتیک گاوی می شود. روش متداول برای شناسایی وجود عفونت با BLV غربالگری آنتی بادی ها است. آگار ژل ایمونودیفیوژن و الیزا به طور گسترده ای برای شناسایی آنتی بادی های ضد BLV استفاده می شود. تکثیر و شناسایی DNA پروویروس لکوز گاو به وسیله واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) روش توانمندی است که قادر به تشخیص مستقیم عفونت می باشد. با این حال، استفاده گسترده از این روش به منظور تشخیص آزمایشگاهی بیماری محدودیت‌هایی داشته و نیاز به مطالعات بیشتری دارد. هدف از این مطالعهمقایسه نتایج آزمون واکنش زنجیره ای پلی مراز و یک الیزای تجاری در شناسایی پروویروس لکوز گاو و آنتی بادی های ضد این ویروس در خون گاو های شیری بود. بدین منظور حساسیت و ویژگی نسبی واکنش زنجیره ای پلی مراز در مقایسه با یک الیزای تجاری مورد ارزیابی قرار گرفت. نمونه های خونی از 173 رأس گاو شیری از گاوداری های اطراف تبریز تهیه شد و توسط یک الیزای تجاری به منظور تشخیص آنتی بادی ضد لکوز ویروس گاو و نیز توسط واکنش زنجیرهای پلیمراز مورد ارزیابی قرار گرفتند. حساسیت و ویژگی نسبی آزمون واکنش زنجیره ای پلی مراز در مقایسه با الیزای تجاری به ترتیب 100% و 6/98% محاسبه شد. فراوانی حضور بخش هدف از ژن gag در واکنش زنجیره ای پلی مراز 3/13% و فراوانی پاسخ سرمی مثبت با الیزای تجاری 1/12% به دست آمد. نتایج حاکی از آن است که امکان استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز در تشخیص آزمایشگاهی بیماری وجود دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
157 - مطالعه کارآیی روش تشخیصی آزمایش مستقیم میکروبی، PCR900IS و کشت میکروبی در تشخیص باکتری مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در مدفوع گاوهای به ظاهر سالم
یونس انزابی صمد فراشی بناب غلامعلی مقدمبیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی آنتریت گرانولوماتوزی مزمن در نشخوارکنندگان با عامل مسبب مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس (MAP) می باشد و خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری به‌خصوص گاوداری شیری در سراسر دنیا وارد می کند. تشخیص MAP در نمونه های بالینی با أکثربیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی آنتریت گرانولوماتوزی مزمن در نشخوارکنندگان با عامل مسبب مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس (MAP) می باشد و خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری به‌خصوص گاوداری شیری در سراسر دنیا وارد می کند. تشخیص MAP در نمونه های بالینی با روش کشت میکروبی به عنوان روش استاندارد طلایی به 16-6 هفته زمان نیاز دارد. از طرف دیگر شناسایی سریع و دقیق گاوهای دفع کننده میکروب فوق در مدفوع برای کنترل موفق بیماری در گله لازم است. در این تحقیق، بر روی مدفوع 100 رأس گاو به ظاهر سالم از گاوداری های صنعتی تبریز با سابقه بیماری یون، آزمایش مستقیم میکروبی با رنگ آمیزی ذیل نلسن، کشت میکروبی در محیط زرده تخم مرغ هرولد و دو روش direct PCRبر پایه عنصر 900IS انجام شد. در آزمایش مستقیم میکروسکوپی 7 نمونه (7 درصد)، در کشت میکروبی 14 نمونه (14 درصد)، در PCR با جفت پرایمر 91F/90F 15 نمونه (15 درصد) و در PCR با جفت پرایمر 26FP/25FP 25 نمونه (25 درصد) مثبت ثبت شدند. این نتایج نشان داد روش PCR تعداد موارد مثبت بیشتری را شناسایی می کند، بنابراین می توان از آن برای شناسایی سریع و در عین حال دقیق تر گاوهای دفع کننده MAP در مدفوع استفاده کرد. همچنین نوع پرایمر در حساسیت تست PCR نقش مهمی ایفا می کند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
158 - تشخیص گونه مایکوپلاسما گالی‌سپتیکوم به‌وسیله 16S rRNA PCR با پرایمرهای اختصاصی در نمونههای بالینی
سید علی پوربخش افشین ذاکری نریمان شیخی سعید چرخکار عباس اشتریمایکوپلاسما گالی سپتیکوم به عنوان یکی از اصلی ترین پاتوژن های پرندگان، خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت مرغداری وارد می کند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی گونه مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در نمونه های بالینی با استفاده از روش 16S rRNA PCRمی باشد. برای بررسی تیتر سرمی، 18 فا أکثرمایکوپلاسما گالی سپتیکوم به عنوان یکی از اصلی ترین پاتوژن های پرندگان، خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت مرغداری وارد می کند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی گونه مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در نمونه های بالینی با استفاده از روش 16S rRNA PCRمی باشد. برای بررسی تیتر سرمی، 18 فارم تخم گذار تجارتی و 8 فارم مادر گوشتی انتخاب و تست RSAT (Rapid Serum Agglutination Test) انجام گردید. جهت نمونه‌برداری برای PCR (Polymerase Chain Reaction)، از 17 فارمی که در تست RSAT مثبت شده بودند، 10 فارم انتخاب و 109 سوآپ استریل از شکاف کامی، نای، کیسه هوایی و ریه از هر فارم تهیه گردید. سه سوآپ از سه پرنده داخل یک لوله آزمایش حاوی یک میلی لیتر PBS انداخته شد و به آزمایشگاه منتقل گردید تا برای انجام PCR مورد استفاده قرار گیرد. در این مطالعه، پرایمرهای اختصاصی برای ژن 16S rRNA استفاده شد. پرایمرهای مورد استفاده برای ژن16S rRNA کاملاً اختصاصی مایکوپلاسما گالی سپتیکوم می باشد و با تمام مایکوپلاسما ها و دیگر باکتری های موجود در نای طیور قابل تفریق است. از 26 فارم مورد آزمایش، 17 فارم در تست سرمی RSAT مثبت شدند. محصولPCR تولیدی توسط پرایمرهای اختصاصی، در 10 فارم، 46 نمونه معادل 2/42 درصد در PCR ، باند 530 جفت بازی را برای همه سویه های فیلدی بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داد.16S rRNA PCR با حساسیت بالا می تواند در تشخیص قطعی عفونت با مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در آزمایشگاه به کار برده شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
159 - تشخیص گونه مایکوپلاسما سینوویه در نمونههای بالینی با استفاده از روش VlhA-PCR
حسین انصاری سید علی پوربخش نریمان شیخی محمد حسن بزرگمهری فرد عباس اشتریمایکوپلاسما سینوویه به عنوان یکی از اصلی ترین پاتوژن های پرندگان، خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت مرغداری وارد می کند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی گونه مایکوپلاسما سینوویه در نمونه های بالینی با استفاده از روش VlhA-PCRمی باشد. برای بررسی تیتر سرمی، تعداد 375 نمونه سرم أکثرمایکوپلاسما سینوویه به عنوان یکی از اصلی ترین پاتوژن های پرندگان، خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت مرغداری وارد می کند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی گونه مایکوپلاسما سینوویه در نمونه های بالینی با استفاده از روش VlhA-PCRمی باشد. برای بررسی تیتر سرمی، تعداد 375 نمونه سرمی از 25 گله مادر گوشتی اخذ و بر روی آن تست (Rapid Serum Agglutination) RSA انجام گردید که 143 نمونه، معادل 19 گله در آزمایش RSA مثبت گردید. جهت نمونه‌برداری برای (Polymerase Chain Reaction) PCR از 25گله ای که 19 گله آن در تست RSA مثبت شده بودند، 20 گله انتخاب و سوآپ های استریل از شکاف کامی، نای، کیسه هوایی و ریه از آنها تهیه گردید. سه سوآپ از سه پرنده داخل یک لوله آزمایش حاوی یک میلی لیتر PBS انداخته شد و به آزمایشگاه منتقل گردید تا برای انجام PCR مورد استفاده قرار گیرد. در این مطالعه، از پرایمرهای اختصاصی برای ژن VlhA استفاده شد. محصول PCR تولیدی توسط پرایمرهای اختصاصی، در 8 گله، باند 400-350 جفت بازی را برای همه سویه های فیلدی بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داد. VlhA-PCR با حساسیت بسیار بالا می تواند در تشخیص قطعی عفونت با مایکوپلاسما سینوویه در آزمایشگاه به کار برده شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
160 - مقایسه چهار روش مشاهده مستقیم، الایزا، کشت و Nested PCR در بررسی آلودگی شیر مخزن دامداریها به باکتری مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس
آریا بدیعی فرهاد موسی خانی عباس برین امیر حمیدی محسن ظفریعامل بیماری یون، باکتری مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس است و هر ساله زیان فراوانی در سطح جهانی، از قبیل کاهش تولید، افت شاخص های تولید مثلی و حذف دام مبتلا را متوجه صنعت گاو شیری، می نماید. از دیگر سوی، این باکتری را یک پاتوژن زئونوز می دانند و تحقیقات جدی أکثرعامل بیماری یون، باکتری مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس است و هر ساله زیان فراوانی در سطح جهانی، از قبیل کاهش تولید، افت شاخص های تولید مثلی و حذف دام مبتلا را متوجه صنعت گاو شیری، می نماید. از دیگر سوی، این باکتری را یک پاتوژن زئونوز می دانند و تحقیقات جدید احتمال می دهند که این باکتری در ایجاد بیماری کرون در انسان، نقش داشته باشد. هدف این مطالعه مقایسه روش های تشخیص آزمایشگاهی الایزا، مشاهده مستقیم، کشت و Nested-PCR در شیر بالک تانک جهت تشخیص آلودگی شیر مخزن گله ها به باکتری مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکولوزیس، می باشد. بدین منظور نمونه گیری از مخزن 100 دامداری صنعتی استان تهران صورت پذیرفت و این نمونه ها با هر چهار روش کشت شیر، مشاهده مستقیم، Nested-PCR و الایزا مورد بررسی قرار گرفتند که تعداد 82 نمونه (82%) در محیط کشت مثبت بوده اند، 94 نمونه(94%)در تستIS900 Nested PCR مثبت بوده اند و 98 نمونه(98%) با الایزا مثبت بوده اند. اما از کل نمونه های تست شده تنها 33 نمونه(33%) در مشاهده مستقیم مثبت بودند. تعداد چهار نمونه وجود داشت که در تست الایزا مثبت بودند ولی در تست PCR منفی شدند. این چهار نمونه به علاوه 12 نمونه دیگر که الایزای آنها مثبت بود، در مجموع 16 نمونه در محیط کشت، رشد باکتری نداشتند. در مجموع نتایج این مطالعه ارجحیّت Nested PCR بر سایر روش های استفاده شده در این تحقیقرا، تأیید می نماید.در ضمن نتایج این مطالعه نشان دهنده میزان بالای آلودگی به این باکتری در دامداری های استان تهران می باشد که نیازمند اقدامات جدی تری است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
161 - مطالعه فراوانی باکتری اشرشیاکولی وروتوکسیکوژنیک در مدفوع گاوها و گوساله‌های کشتاری در کشتارگاه تبریز
منصور خاکپور فرهاد ناظری جلیل خندقی جلال شایقاشرشیا کولای به عنوان فلور طبیعی در روده بزرگ و پاتوژن عمده مشترک میان انسان و دام قابل انتقال از طریق غذا بوده که عامل مهم عفونت های اسهالی در گاو به ویژه گوساله می باشد. در این پژوهش هدف شناسائی و جداسازی اشرشیا کولای وروتوکسیکوژنیک می باشد که با مراجعه به کشتارگاه تب أکثراشرشیا کولای به عنوان فلور طبیعی در روده بزرگ و پاتوژن عمده مشترک میان انسان و دام قابل انتقال از طریق غذا بوده که عامل مهم عفونت های اسهالی در گاو به ویژه گوساله می باشد. در این پژوهش هدف شناسائی و جداسازی اشرشیا کولای وروتوکسیکوژنیک می باشد که با مراجعه به کشتارگاه تبریز به طور تصادفی 43 نمونه مدفوعی از گوساله ها و 151 نمونه مدفوعی از گاوها اخذ و به آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه آزاد اسلامی تبریز منتقل گردید. پس از غنی سازی نمونه ها و کشت در محیط های کشت نتایج ذیل به دست آمد: از 194 نمونه اخذ شده 113 مورد اشرشیا کولای جدا شد که 85 نمونه سوربیتول مثبت و 28 نمونه سوربیتول منفی بودند از 85 نمونه سوربیتول مثبت، 19 نمونه گوساله و 66 نمونه گاو و از 28 نمونه سوربیتول منفی، 13 نمونه گوساله و 15 نمونه گاو بودند. همچنین تست سرولوژی برای مشخص کردن سروتیپ های اشرشیا کولای غیر O157روی نمونه های سوربیتول مثبت انجام گرفت که 9 نمونه گوساله و 33 نمونه گاوی واکنش مثبت نشان دادند. سپس روی 28 نمونه سوربیتول منفی و 85 نمونه سوربیتول مثبت تست PCR با استفاده از سکانس ژن های STx1 و STx2 انجام گرفت که 19 نمونه از 28 نمونه سوربیتول منفی و 7 نمونه از 85 نمونه سوربیتول مثبت اشرشیا کولای وروتوکسیکوژنیک بودند. نتایج نشان دهنده وجود مقادیر نسبتاً بالای اشرشیا کولای وروتوکسیکوژنیک در مدفوع گاوها و گوساله های کشتاری در کشتارگاه تبریز می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
162 - شناسایی تیپ 91/4 ویروس برونشیت عفونی در جوجه‌های گوشتی استان چهارمحال و بختیاری
مجید غلامی آهنگران عبدالحمید شوشتری عباس دوستی عزت اله فتحی هفشجانی نوشا ضیاء جهرمیبیماری برونشیت عفونی یک بیماری ویروسی واگیردار تنفسی است که عامل بیماری واجد سروتیپ های متعددی است. در این بررسی به شناسایی تیپ 91/4 (793/B) برونشیت عفونی در استان چهارمحال و بختیاری پرداخته شده است. به این منظور از 18 گله جوجه گوشتی واجد سندرم تنفسی مشکوک به برونشیت عف أکثربیماری برونشیت عفونی یک بیماری ویروسی واگیردار تنفسی است که عامل بیماری واجد سروتیپ های متعددی است. در این بررسی به شناسایی تیپ 91/4 (793/B) برونشیت عفونی در استان چهارمحال و بختیاری پرداخته شده است. به این منظور از 18 گله جوجه گوشتی واجد سندرم تنفسی مشکوک به برونشیت عفونی با تلفات بیش از یک درصد در روز نمونه نای اخذ شد. پس از استخراج RNA از نمونه های بافتی نای، در واکنش RT-PCR یک مرحله ای قطعه ای از ژن S1 ویروس برونشیت عفونی تکثیر شد و محصول RT-PCR با پرایمرهای اختصاصی تیپ91/4 به روش Nested-PCR تکثیر شد. نتایج نشان داد از 18 گله مبتلا به مشکلات تنفسی 11 گله یا به عبارتی 11/61% آلوده به ویروس برونشیت عفونی بودند که در گله های مبتلا به برونشیت عفونی، 45/45% آلودگی با تیپ 91/4 را نشان دادند. لذا به نظر می رسد تیپ 91/4 برونشیت عفونی در شکل گیری و پیچیده سازی علایم تنفسی در جوجه های گوشتی مبتلا به سندرم تنفسی در استان چهارمحال و بختیاری نقش داشته باشد و لازم است سیاست های کنترلی مناسب در جهت پیشگیری از آلودگی با تیپ 91/4 برونشیت عفونی اتخاذ گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
163 - بررسی وضعیت آلودگی ماده گاوهای هلشتاین پیر به ویروس کمبود ایمنی گاو (BIV) و ارزیابی بالینی آنها در برخی از گاوداریهای شیری اطراف تبریز
محمد طلوعی صمد فراشی حامد پناه پورویروس کمبود ایمنی گاو، لنتی ویروسی از خانواده بزرگ رتروویروس ها می باشد. در امکان ایجاد عوارض عفونی متنوع ناشی از اختلال سیستم ایمنی توسط آن و در نتیجه خسارات اقتصادی حاصله نظرات متفاوتی ارائه شده است. نظر به فراوانی آلودگی با این ویروس در گاوداری های کشورهای مختلف و ار أکثرویروس کمبود ایمنی گاو، لنتی ویروسی از خانواده بزرگ رتروویروس ها می باشد. در امکان ایجاد عوارض عفونی متنوع ناشی از اختلال سیستم ایمنی توسط آن و در نتیجه خسارات اقتصادی حاصله نظرات متفاوتی ارائه شده است. نظر به فراوانی آلودگی با این ویروس در گاوداری های کشورهای مختلف و ارتباط این آلودگی ها با وقوع اختلالات بالینی، انجام مطالعات بسیار اندک در ایران و همچنین احتمال همبستگی میزان آلودگی با افزایش سن و در نتیجه پیشنهاد وازد نمودن گاوهای پیر به ظاهر سالم، این تحقیق با هدف تعیین وضعیت آلودگی با این ویروس و بررسی اختلالات بالینی در گاوهای هلشتاین مسن در برخی از گاوداری های اطراف تبریز به اجرا در آمد. در این مطالعه به برخی گاوداری های شیری اعم از سنتی یا صنعتی و عمدتاً واحدهای کوچک اطراف تبریز مراجعه شد. 50 رأس گاو شیری هلشتاین به ظاهر سالم با سن بالاتر از 6 سال انتخاب و مشخصات انفرادی و بالینی آنها ثبت گردید. از دام های مورد مطالعه نمونه های خون جهت ردیابی ژنوم BIV تهیه شد. نتایج واکنش زنجیره ای پلی مراز از نوع نستد، روی نمونه ها نشان دادند که آلودگی با ویروس کمبود ایمنی گاو در گاوهای مورد مطالعه، به میزان 2 درصد (یک رأس از 50 مورد) وجود دارد. بین میزان آلودگی به این ویروس و سن رابطه آماری معنی داری مشاهده نشد. همچنین بین میزان آلودگی و درجه وضعیت بدنی، میزان تولید شیر، وجود اختلالات بالینی، وجود سابقه اختلالات بالینی، حالت ظاهری عقده های لنفاوی، حضور یا بزرگ شدگی عقده های خونی رابطه آماری معنی داری مشاهده نشد. بررسی حاضر نشان داد که گاوهای هلشتاین نمونه برداری شده واجد آلودگی بسیار پائینی با ویروس BIV هستند و برخلاف برخی مطالعات گذشته و مطابق با برخی دیگر، افزایش سن تاثیری در حساسیت به آلودگی با این ویروس ندارد. کوچک کردن واحدهای گاوداری و کاهش تراکم گاو در آنها، می تواند در پیشگیری و کنترل آلودگی با BIV کمک کننده باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
164 - مطالعه همزمانی آلودگی به ویروس کم‌خونی عفونی جوجه ها با ابتلا به بیماریهای نیوکاسل و آنفلوانزا در گلههای گوشتی در استان چهارمحال و بختیاری
عزت اله فتحی هفشجانیچکیده عامل بیماری کم‌خونی عفونی جوجه‌ها، ویروسی از خانواده سیرکوویریده است که باعث کم‌خونی شدید می شود. سرکوب ایمنی بدن و افزایش حساسیت نسبت به سایر بیماریهای باکتریایی، ویروسی، انگلی و قارچی از دیگر اثرات این بیماری می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی میزان همزمانی آ أکثرچکیده عامل بیماری کم‌خونی عفونی جوجه‌ها، ویروسی از خانواده سیرکوویریده است که باعث کم‌خونی شدید می شود. سرکوب ایمنی بدن و افزایش حساسیت نسبت به سایر بیماریهای باکتریایی، ویروسی، انگلی و قارچی از دیگر اثرات این بیماری می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی میزان همزمانی آلودگی به ویروس کم‌خونی عفونی جوجه‌ها با ابتلا به بیماریهای نیوکاسل و آنفلوانزا در گلههای گوشتی در استان چهار محال و بختیاری بود. به این منظور، در سال 1390 از 14 گله گوشتی با سن 7-2 هفته که بیماری نیوکاسل و یا آنفلوانزا در آنها تائید شده بود، نمونههای بافتی تیموس و بورس فابرسیوس اخذ گردید. نمونهها به روش هیستوپاتولوژی و PCR مورد آزمایش قرار گرفتند. جهت انجام PCR قطعه ای از ژن VP1 و از پرایمری با پهنای باند 1390 استفاده گردید. نتایج آزمایش PCR نشان داد که 4 گله (57/28 درصد) از نظر ویروس کم‌خونی صد در صد مثبت بودند و آزمایش هیستوپاتولوژی نمونهها نیز این مسئله را تائید کرد. این آلودگی نشان دهنده میزان بالایی از همزمانی بیماری CIAV (Chicken Infectious Anemia Virus) با بیماریهای نیوکاسل و یا آنفلوانزا در گلههای گوشتی این استان میباشد که سبب افزایش تلفات در گلههای CIAV مثبت نسبت به گلههای منفی شده است. لذا اهمیت وجود ویروس به خاطر توانایی آن در کاهش سیستم ایمنی بدن به تنهایی و یا همراه با سایر عفونت‌ها میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
165 - تنش سرما و اثر آن بر سنتز هورمون اسید آبسیزیک از طریق بررسی بیان ژن و تغییرات آنتی‌اکسیدان‌های غیرآنزیمی گوجه فرنگی (Solanum lycopersicum 'Red Cloud)
نیلوفر صمدی سکینه سعیدی سار حسین عباسپور ناهید مسعودیانگوجهفرنگی یکی از محصولات عمده کشاورزی در رده‌ی محصولات زراعی است که در بسیاری از کشورهای جهان و همچنین ایران از جنبه‌های مختلف دارای اهمیت میباشد. در این تحقیق تحت تنش سرما به بیان ژن SlNCED1در مسیر بیوسنتز هورمون آبسیزیک اسید به روش Real-Time qRT-PCR و اندازه‌گیری بر أکثرگوجهفرنگی یکی از محصولات عمده کشاورزی در رده‌ی محصولات زراعی است که در بسیاری از کشورهای جهان و همچنین ایران از جنبه‌های مختلف دارای اهمیت میباشد. در این تحقیق تحت تنش سرما به بیان ژن SlNCED1در مسیر بیوسنتز هورمون آبسیزیک اسید به روش Real-Time qRT-PCR و اندازه‌گیری برخی خواص فیزیولوژیکی پرداخته شده است. بدین‌منظور پس از میوه‌دهی، بوته‌ها به‌مدت 12 و 24 ساعت در دمای 2 و 4 درجه سانتیگراد قرار گرفتند. پس از این مدت میوه‌ها جهت سنجش آنتی اکسیدان‌های غیرآنزیمی به روش DPPD و فنل کل به روش فولین سیکالتو و بیان ژن جدا شدند. نتایج حاکی از آن بود که بیشترین میزان بیان ژن SlNCED1مربوط به دمای 4 درجه بهترتیب در ساعات 24 و12 بود. همچنین نتایج آنالیز مقایسه میانگین نشان داد که فعالیت معنی دار آنتی اکسیدان وفنل کل در دمای 2درجه و 12 ساعت اتفاق افتاد. به‌طورکلی میتوان گفت که از آنجایی که گوجه فرنگی رد کلود متعلق به نواحی گرمسیری است لذا در دماهای پایین‌تر از 12 درجه سانتیگراد دچار تنش سرمایی شده و متعاقب آن تغییرات بیان ژنها و آنتی اکسیدان‌ها را جهت حفاظت از خود در برابر تنش ایجاد میکند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
166 - شناسایی فنوتپی و ژنوتیپی گونههای مختلف شیگلا از غذا براساس ژن IpaH و تعیین الگوی آنتیبیوتیکی جدایهها
نیما بهادر ایما عجم پورغذا ماده حیاتی است که بدون آن موجود زنده قادر به زیستن نخواهد بود، اما این ماده حیاتی می تواند بعنوان عاملی برای انتقال بیماری به انسان باشد. بنابراین به دلیل اهمیت شیگلا به عنوان ارگانیسمی که باعث دیسانتری در انسان می شود تحقیق حاضر بدنبال جداسازی شیگلا از مواد غذایی م أکثرغذا ماده حیاتی است که بدون آن موجود زنده قادر به زیستن نخواهد بود، اما این ماده حیاتی می تواند بعنوان عاملی برای انتقال بیماری به انسان باشد. بنابراین به دلیل اهمیت شیگلا به عنوان ارگانیسمی که باعث دیسانتری در انسان می شود تحقیق حاضر بدنبال جداسازی شیگلا از مواد غذایی میباشد. بطور کلی صد نمونه مواد غذایی شامل چهل نمونه سبزیجات، 30 نمونه مرغ، 20 نمونه گوشت چرخ‌کرده، 10 نمونه ماهی جمع آوری گردید. نمونه ها به محیط کشت گرم‌نگاتیو‌براث منتقل شده و سپس به محیط‌های افتراقی مک‌کانکی و سالمونلا‌شیگلا‌آگار انتقال یافته است.کلنی‌های مشکوک خالص‌سازی‌شده و به کمک تستهای بیوشیمیایی شناسایی شدند.جدایهها براساس ژن ipaH بکمک آزمون PCR مورد شناسایی مولکولی قرارگرفتند. پس از آن سروتایپینگ جدایهها و الگوی‌آنتی بیوتیکی میکروارگانیسم‌ها مورد ارزیابی قرار گرفتند. از صد نمونه مورد ارزیابی از بین مواد غذایی تنها شیگلا از سبزیجات جداسازی گردید. جدایهها ( 6 سویه ) به کمک آزمون مولکولی تایید شدند و همگی در جنس شیگلا قرار دارند. همچنین بر اساس تست اگلوتیناسیون جدایهها متعلق به یک سویه دیسانتری، دو سویه سونئی، دو سویه فلکسنری و یک سویه غیر قابل شناسایی گزارش گردید. علاوه بر این باکتریها الگوهای متفاوتی در رابطه با آنتیبیوتیکها نشان دادند بطوریکه سویه شماره 1 با 100% حساسیت نسبت به تتراسایکلین ارزیابی گردید و نسبت به سایر آنتیبیوتیکها مقاومت نشان دادند.از آنجاییکه غذا ماده‌ایی موثر در انتقال میکروارگانیسمهاست بنابراین مانیتورکردن مواد غذایی در مارکتها و سبزی فروشی‌ها از اهمیت ویژهای برخوردار است . تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
167 - ردیابی ویبریو پاراهمولیتیکوس در نمونههای میگوی جمع آوری شده از شهر اردبیل به روش PCR
داریوش عسگرپور مهدی قاسمی ماهرخ بهرامیویبریو پاراهمولیتیکوس از خانواده ویبریوناسه یک باکتری هالوفیل گرم منفی میلهای شکل، غیراسپور زا و دارای تاژک قطبی و متحرک می باشد که به عنوان عامل گاستروآنتریت ناشی از مصرف غذا های دریایی آلوده در سراسر جهان شناخته می شود. این باکتری سه بیماری عمده بالینی در انس أکثرویبریو پاراهمولیتیکوس از خانواده ویبریوناسه یک باکتری هالوفیل گرم منفی میلهای شکل، غیراسپور زا و دارای تاژک قطبی و متحرک می باشد که به عنوان عامل گاستروآنتریت ناشی از مصرف غذا های دریایی آلوده در سراسر جهان شناخته می شود. این باکتری سه بیماری عمده بالینی در انسان ایجاد می کند بهطوریکه علاوه برگاستروآنتریت می تواند باعث ایجاد عفونت زخم و سپتی سمی شود. هدف از انجام این مطالعه، بررسی میزان آلودگی به ویبریو پاراهمولیتیکوس در نمونههای میگوی جمع آوری شده از شهر اردبیل بود. در این مطالعه توصیفی مقطعی، 80 نمونه میگوی تازه از فروشگاه‌های مختلف عرضه کننده مواد غذایی دریایی شهر اردبیل جمع آوری شد. نمونهها بلافاصله هموژن و در محیط TCBS آگار کشت داده شده و سویه های جداسازی شده مورد آزمونهای بیوشیمیایی قرار گرفتند. DNA کلنی‌های تیپیک ویبریو پاراهمولیتیکوس استخراج و ژنVp-toxR به عنوان شاخصی جهت شناسایی ویبریو پاراهمولیتیکوس با روش PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج PCR نشان داد از 80 نمونه میگوی جمع آوری شده، 11 نمونه (75/13 درصد) حامل ژن Vp-toxR بودند. بر اساس نتایج بدست آمده میگو مخزن مهمی برای این باکتری بوده و از آنجا که میتواند حامل باکتری زنده و عفونی کننده باشد لذا مصرف غیر بهداشتی این اغذیه دریایی بهعنوان خطر باالقوه برای بهداشت و سلامت عمومی محسوب میگردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
168 - جداسازی آلیسایکو باسیلوس از آب میوه جات در ایران
ابراهیم رحیمی عباس دوستی ساناز دهقانژادآلیسایکلوباسیلوس به عنوان عامل فساد میکروبی آب میوه‌های صنعتی شناخته و مورد توجه قرار گرفته است. این باکتری دارای اسپور،گرما دوست و هاگزاست و تاکنون گزارشی از بیماریزایی آن منتشر نشده است اما از طریق ایجاد تغییر در طعم و بوی آب میوه‌های صنعتی موجب فساد و زیان اقتصادی ف أکثرآلیسایکلوباسیلوس به عنوان عامل فساد میکروبی آب میوه‌های صنعتی شناخته و مورد توجه قرار گرفته است. این باکتری دارای اسپور،گرما دوست و هاگزاست و تاکنون گزارشی از بیماریزایی آن منتشر نشده است اما از طریق ایجاد تغییر در طعم و بوی آب میوه‌های صنعتی موجب فساد و زیان اقتصادی فراوان میشود. این مطالعه با هدف بررسی آلودگی کنسانتره‌های آب میوه بسته بندی شده به این باکتری صورت پذیرفته است. در این راستا، مجموع 300 نمونه شامل آب انار، آب سیب، آب پرتقال، آب انبه، آب آناناس و آب انگور که از کارخانجات مختلفی استحصال و به بازار عرضه شده بودند به صورت تصادفی از فروشگاه‌های شهر اصفهان جمعآوری و از نظر حضور آلیسایکلوباسیلوس ارزیابی شدند. پس از کشت و آزمونهای بیوشیمیایی، نمونههای مثبت با استفاده از PCR مورد آزمایش قرار گرفته و حضور باکتری آلیسایکلوباسیلوس در 13 نمونه (33/4 درصد) تایید شد. بالاترین میزان آلودگی در بین نمونههای آب انار و آب پرتقال (3/13 درصد) دیده شد. آلودگی در آب آلبالو به میزان 10 درصد، در آب میوه جات مخلوط 66/6 درصد و در مابقی نمونههای آب میوه‌جات (66/95 درصد) آلودگی به باکتری آلیسایکلوباسیلوس مشاهده نشد. با توجه به گزارش فوق، به منظور جلوگیری از فساد آبمیوه‌های صنعتی، ممانعت از رشد این باکتری، به خصوص در طول حداکثر مدت زمان نگهداری آب میوه‌ها و تشخیص حضور یا عدم حضور این باکتری پس از اتمام مراحل پاستوریزاسیون و سالم سازی محصول، امری ضروری به نظر می‌رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
169 - الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سالمونلا تیفی موریوم جدا شده از شیرهای خام و پنیرهای سنتی
مریم مظهری دهکردی مجتبی بنیادیان حمداله مشتاقیباکتری سالمونلا از جمله باکتری های بیماری زای است که می تواند در غذا و مواد اولیه غذایی راه پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری باعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور نیز می شود. شیر و فراورده های آن از جمله مواد غذایی هستند که هم به طور أکثرباکتری سالمونلا از جمله باکتری های بیماری زای است که می تواند در غذا و مواد اولیه غذایی راه پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری باعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور نیز می شود. شیر و فراورده های آن از جمله مواد غذایی هستند که هم به طور اولیه و هم به طور ثانویه توسط کارکنان، آب و .. آلوده شده و به انسان انتقال می دهند. در این مطالعه، تعداد 100 نمونه شیرخام و 50 نمونه پنیر سنتی از نقاط مختلف استان چهارمحال و بختیاری جهت جداسازی و شناسایی باکتری سالمونلا در شیرخام و پنیرهای سنتی با استفاده از آزمون های میکروب شناسی و آزمون واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از پرایمرهای InvA، IE و FliCe مورد آزمایش قرار گرفتند. همچنین مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه های سالمونلا به روش دیسک انتشاری مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج آزمون های میکروبی نشان داد که 7 نمونه مشکوک آلوده به سالمونلا، 5 نمونه از شیر خام و 2 نمونه از پنیرهای سنتی بودند. در آزمون PCR تعداد 3 نمونه از موارد مشکوک شیرخام (3 درصد) و 1 نمونه از موارد مشکوک پنیر سنتی (2 درصد) سالمونلا تیفی موریوم بودند. نتایج آزمون آنتی بیوگرام روی جدایه های سالمونلا نشان داد بیش ترین حساسیت به آنتی بیوتیک های جنتامایسین و سیپروفلوکساسین و بیش ترین مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های آمپی سیلین، تتراسایکلین و تری متوپریم سولفامتوکسازول وجود دارد. بر اساس نتایج شیرهای خام و پنیرهای سنتی آلوده به باکتری سالمونلا تیفی موریوم بوده که نسبت به برخی از آنتی بیوتیکهای رایج در درمان عفونت با این باکتری مقاوم هستند. لذا بررسی فراورده های لبنی سنتی بخصوص پنیر از نظر پیشگیری از بروز بیماری در انسان بیش از پیش ضروری به نظر می رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
170 - بررسی آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در شیرهای خام گاو عرضه شده در منطقه‌ی اهواز و ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه ها
علی فضل آرا مهدی زارعی احمد موالی زادهجهت مطالعه حاضر در طی مدت 6 ماه تعداد 150 نمونه شیر خام گاو عرضه شده در منطقه ی اهواز تهیه و در شرایط سرما به آزمایشگاه منتقل شد. مقدار 25 میلی لیتر از هر نمونه شیر به داخل 225 میلی لیتر از محیط غنی سازی Tris-Buffered Peptone Water با pH معادل 8 افزوده گشته و به مدت 3 ه أکثرجهت مطالعه حاضر در طی مدت 6 ماه تعداد 150 نمونه شیر خام گاو عرضه شده در منطقه ی اهواز تهیه و در شرایط سرما به آزمایشگاه منتقل شد. مقدار 25 میلی لیتر از هر نمونه شیر به داخل 225 میلی لیتر از محیط غنی سازی Tris-Buffered Peptone Water با pH معادل 8 افزوده گشته و به مدت 3 هفته در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شد و در روزهای 7، 14 و 21، نسبت به انجام کشت خطی بر روی محیط کشت اختصاصی آگار CIN اقدام و در دمای 30 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت گرمخانه گذاری شد. سپس کلونی های مشکوک به یرسینیا انتخاب و پس از انجام برخی آزمایش های بیوشیمیایی اولیه در مرحله بعد جهت تشخیص قطعی از پرایمرهای اختصاصی ژن کروموزومی 16s rRNA استفاده شد. در این تحقیق یرسینیا انتروکولیتیکا از 36 نمونه (24 درصد) جدا شد. نهایتاٌ جدایه های تایید شده جهت ارزیابی حساسیت آنتی بیوتیکی، بر روی محیط جامد کشت سطحی داده شد. نتایج تست سنجش حساسیت نشان داد که صد در صد جدایه ها به سیپروفلوکسین حساس بودند. پس از آن به ترتیب (05/97درصد) به جنتامایسین، (17/91 درصد) به تتراسایکلین، (29/85 درصد) به سفتازیدیم، (35/82 درصد) به نالیدیکسیک اسید، (41/79 درصد) به کانامایسین، (64/67 درصد) به تری متوپریم سولفامتاکسازول، (64/17 درصد) به آموکسی سیلین و (70/14درصد) به سفالوتین حساس بوند. همچنین در هیچ کدام از جدایه ها حساسیت به اریترومایسین مشاهده نشد که نشان دهنده ی بیشترین مقاومت جدایه های یرسینیا انتروکولیتیکا به این آنتی بیوتیک می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
171 - بررسی آلودگی سالمونلایی گوشت شتر در مراحل مختلف کشتار در استان اصفهان و چهارمحال و بختیاری
ابراهیم رحیمی امیر شاکریانسالمونلا به عنوان یک پاتوژن منتقل شونده از مواد غذایی مطرح بوده و یک معضل بزرگ در بهداشت جامعه در دنیا به حساب می آید. مسمومیت های غذایی ناشی از این پاتوژن با علایمی همچون گاستروآنتریت، اسهال، کرامپ شکمی و تب های روده ای (تب حصبه) بروز می کند. این مطالعه به منظور جداسا أکثرسالمونلا به عنوان یک پاتوژن منتقل شونده از مواد غذایی مطرح بوده و یک معضل بزرگ در بهداشت جامعه در دنیا به حساب می آید. مسمومیت های غذایی ناشی از این پاتوژن با علایمی همچون گاستروآنتریت، اسهال، کرامپ شکمی و تب های روده ای (تب حصبه) بروز می کند. این مطالعه به منظور جداسازی و شناسایی سالمونلا تیفی موریوم در گوشت شتر درمراحل مختلف کشتار انجام شد. به این منظور در مجموع 150نمونه گوشت شتر در مراحل مختلف کشتار ( بعد از پوست کنی، بعد از تخلیه امعا و احشا، بعد از مرحله شست و شو)، (از هریک 50 نمونه) در بازه زمانی تابستان 1395 تا زمستان 1395 از کشتارگاه شهرستان بن استان چهارمحال و بختیاری و شهرستان نجف آباد و زرین شهر استان اصفهان، اخذ شد. نتایج نشان داد که 22 مورد از 150 نمونه گوشت شتر به عنوان گونه هایی از جنس سالمونلا تشخیص داده شدند. استفاده از روش PCR نشان داد که از 22 نمونه مثبت، 3 مورد (2%) سالمونلا تیفی موریوم و 19 مورد (%6/12) سایر گونه ها می باشند..از50 نمونه جمع آوری شده بعد از تخلیه امعا و احشا 11 مورد مثبت تشخیص داده شد که 2 مورد (4%) سالمونلا تیفی موریوم بودند.پس ازمرحله شست و شو 50 نمونه دیگر جمع آوری شد که 4 مورد آن (8%) مربوط به جنس سالمونلا بود و از این 4 مورد هیچ کدام متعلق به سروتیپ سالمونلا تیفی موریوم نبود. نتایج به دست امده حاکی از آن است که خط آلودگی لاشه در مرحله تخلیه امعا و احشا بیشتر و رعایت اصول بهداشتی در این مرحله می تواند نقش مهمی در کاهش آلودگی لاشه داشته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
172 - گونه های کمپیلوباکتر به عنوان یک عامل بالقوه بیماری زا در قارچ های دکمه ای خوراکی( Agaricus mushrooms )
امیر شاکریانعفونت های ناشی از کمپیلوباکتر ژژونی به عنوان یکی از مهمترین بیماری های منتقله از غذا در بسیاری از کشور های جهان می باشد که باعث ایجاد اسهال در اکثر کشور ها می شود. در این بررسی 100 نمونه قارچ دکمه ای خوراکی در سال 1393 از از فروشگاه‌های عرضه انواع قارچ های خوراکی در شهر أکثرعفونت های ناشی از کمپیلوباکتر ژژونی به عنوان یکی از مهمترین بیماری های منتقله از غذا در بسیاری از کشور های جهان می باشد که باعث ایجاد اسهال در اکثر کشور ها می شود. در این بررسی 100 نمونه قارچ دکمه ای خوراکی در سال 1393 از از فروشگاه‌های عرضه انواع قارچ های خوراکی در شهرکرد نمونه برداری شد. ابتدا نمونهها در محیط های کشت غنی کننده و اختصاصی کشت داده شدند و سپس مورد آزمایش واکنش زنجیره ای پلی مراز قرارگرفتند. از مجموع 100 نمونه قارچ دکمه ای خوراکی اخذ شده 15 نمونه (15 درصد) آنها آلوده به جنس کمپیلوباکتر تشخیص داده شدکه 3/13 درصد آلوده به کمپیلوباکتر ژژونی و7/86 درصد آلوده به گونه کمپیلوباکتر کلی بودند. براساس نتایج حاصله می توان گفت که مصرف خام قارچ های دکمه ای خوراکی آلوده به کمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کلی به عنوان یکی از مخاطرات بهداشتی درجوامع انسانی نقش مهمی ایفا می نمایند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
173 - تعیین وجود ژن حدت پنتون والنتین لکوسیدین PVL و ژن مقاومت به متی‌سیلین mecA در سویههای استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از نمونههای مواد غذایی به روش Multiplex PCR و بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی آن
کیومرث امینی سجاد علیزادهاستافیلوکوکوساورئوس از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان بوده که در اثر مصرف غذای آلوده ایجاد میشود. استافیلوکوکوس‌اورئوس حاوی پنتون والنتین لوکوسیدین (PVL) و مقاوم به متی‌سیلین (mecA) نسبت به حرارت پاستوریزاسیون و بسیاری از آنزیم‌های پروتئولیتیک پایدار بوده و می أکثراستافیلوکوکوساورئوس از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان بوده که در اثر مصرف غذای آلوده ایجاد میشود. استافیلوکوکوس‌اورئوس حاوی پنتون والنتین لوکوسیدین (PVL) و مقاوم به متی‌سیلین (mecA) نسبت به حرارت پاستوریزاسیون و بسیاری از آنزیم‌های پروتئولیتیک پایدار بوده و میتوانند در نمونههای غذایی مدت طولانی فعال باقی بمانند. هدف مطالعه حاضر، جداسازی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس و شناسایی ژن حدت پنتون والنتین لوکوسیدین (PVL) و ژن مقاومت به متی‌سیلین (mecA) در نمونههای مواد غذایی با استفاده از تکنیک PCR چندگانه‌ای بوده‌است. در این تحقیق 120 نمونه مواد غذایی مختلف (لبنیات، شیرینی، گوشت خام و سبزیجات) جمعآوری گردید. آزمون حساسیت آنتیبیوتیکی به روش دیسک‌گذاری بر اساس دستورالعمل CLSI انجام گردید. جهت شناسایی و تایید استافیلوکوکوس‌اورئوس جداسازی شده و ژنهای حدت و مقاومت از آزمون PCR چندگانه‌ای استفاده شد. در نهایت40 مورد (3/33 درصد) جدایه استافیلوکوکوس اورئوس تشخیص داده‌شد. نتایج آنتیبیوگرام نشان داد، بیشترین حساسیت مربوط به آنتیبیوتیکهای ونکومایسین، تیکوپلانین و متی‌سیلین به ترتیب 95، 90 و 75 درصد بود. مقاومت به لینزولید، آزیترومایسین و متی‌سیلین به ترتیب 35، 32 و 25 درصد بیش از سایر آنتیبیوتیکهای مورد آزمایش بود. فراوانی ژن مقاوم به متی‌سیلین در کل نمونهها 5/57 درصد و ژن PVL تشخیص داده نشد. همچنین ژن16sr RNA جهت تشخیص گونه باکتری در کل نمونهها شناسایی و تایید گردید. توزیع متفاوت ژن مقاومت به متی‌سیلین در این تحقیق با سایر مطالعات نشان از خطر بالقوه استافیلوکوکوساورئوسمقاوم به متی‌سیلین در دنیا میباشد. بنابراین، تشخیص سریع و به موقع جدایههای مقاوم، به منظور جلوگیری از گسترش مقاومت امری ضروری به نظر می‌رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
174 - ردیابی ژن های حدت و انتروتوکسین در سویه های سالمونلا انتریتیدیس جدا شده از نمونه های گوشت و تخم مرغ با روش Multiplex PCR
تکتم خدادادی پور کیومرث امینی رزاق محمودیبیماریهای منتقله از مواد غذایی یکی از جدی‌ترین معضلات دنیای امروزی بوده و به دلیل مصرف آب یا غذاهای آلوده در انسان بروز مینمایند. هدف از مطالعه حاضر، ردیابی ژنهای حدت و انتروتوکسن در سویههای سالمونلا انتریتیدیس جدا شده از نمونههای غذایی با روش واکنش زنجیره پلیمراز أکثربیماریهای منتقله از مواد غذایی یکی از جدی‌ترین معضلات دنیای امروزی بوده و به دلیل مصرف آب یا غذاهای آلوده در انسان بروز مینمایند. هدف از مطالعه حاضر، ردیابی ژنهای حدت و انتروتوکسن در سویههای سالمونلا انتریتیدیس جدا شده از نمونههای غذایی با روش واکنش زنجیره پلیمراز چندگانه می باشد. این مطالعه به صورت توصیفی- مقطعی و از ابتدا تا انتهای سال 1393 بر روی 1250 نمونه غیر تکراری غذایی شامل گوشت مرغ و تخم مرغ انجام گردید. روش واکنش زنجیره پلیمراز چند گانه به منظور شناسایی ژن های Stn، sopB، slyA، spvc و Phop/Qانجام شد. از تعداد 60 سویه سالمونلا انتریتیدیس به ترتیب از گوشت مرغ(35 سویه، 3/58 درصد)، و تخم مرغ(25 سویه، 6/41 درصد) بدست آمد. یافته‌های حاصل از مطالعه مولکولی برای شناسایی ژن های حدت نشان داد که تمامی ایزوله ها (100 درصد) برای حضور ژن spvC منفی بودند. بیشترین و کمترین فراوانی متعلق به ژن های Phop/Qو SopB و برابر 3/33 درصد و 6/1 درصد می باشد. بررسی ژن های حدت و انتروتوکسین سالمونلا انتریتیدیس جدا شده در نمونه های غذایی از حضور ژنها و کارایی روش واکنش زنجیره پلیمراز چندگانه در بررسی های اپیدمیولوژی و ارزیابی انتقال بین گونه‌ای این ژن ها در بین نمونههای غذایی میتواند مفید باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
175 - شناسایی ژنهای حدت در سروتیپ O:3 باکتری یرسینیا انتروکولیتیکا جدا شده از گوشت بوقلمون به روش PCR در شهرکرد
عطیه حداد الهه تاج بخش مریم رئیسیاامروزه روش های مبتنی بر PCR، به منظور تشخیص سویههای یرسینیا انتروکولیتیکا و بررسی ژنهای حدت پلاسمیدی و کروموزومی مورد استفاده قرار می‌گیرند. این روش قادر به ارائه یک توصیف سریع و قابل اطمینان است. در این مطالعه 300 نمونه گوشت بوقلمون به طور تصادفی از فروشگاه‌های عرضه أکثراامروزه روش های مبتنی بر PCR، به منظور تشخیص سویههای یرسینیا انتروکولیتیکا و بررسی ژنهای حدت پلاسمیدی و کروموزومی مورد استفاده قرار می‌گیرند. این روش قادر به ارائه یک توصیف سریع و قابل اطمینان است. در این مطالعه 300 نمونه گوشت بوقلمون به طور تصادفی از فروشگاه‌های عرضه کننده فراورده‌های گوشتی در شهرستان شهرکرد جمع آوری شد. نمونهها با استفاده از آزمون PCR شناسایی شدند و سپس ردیابی ژنهای حدت در جدایهها صورت پذیرفت. بر اساس نتایج، 55 جدایه سروتیپ O:3 شناسایی شد که شیوع ژنهای حدت شامل (72/32%)yadA، (100%)inv، (18/38%)ail،(40%)ystA و (27/27%)virF بود. با توجه به افزایش روزمره مصرف گوشت بوقلمون در سطح کشور و احتمال انتقال یرسینیا انتروکولیتیکا به انسان، رعایت دقیق اصول نگهداری و عدم مصرف گوشت بوقلمون به صورت غیربهداشتی و به کارگیری آزمون PCR جهت شناسایی مستقیم آلودگی در مواد غذایی به عنوان یک روش سریع، دقیق و اختصاصی توصیه میگردد. کلید واژه ها: آزمون PCR، ژنهای حدت، گوشت بوقلمون، یرسینیا انتروکولیتیکا تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
176 - شیوع و الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی باکتری اشریشیاکلی O157:H7 در تخم طیور(بلدرچین،مرغ،کبوتر و شترمرغ) بومی استان اصفهان
مهدی مرادی سرمیدانی محسن فرد عمادی ابراهیم رحیمی عبدالکریم زمانی مقدماشریشیاکلی یکی از متداول‌ترین باکتریهای بیماریزای رودهای در انسان و حیوانات است که باعث بروز عفونتهای مختلفی میگردد. اشریشیاکلی O157:H7 یکی از سروتیپهای مهمی است که در تحت گروه اشریشیاکلی‌های خونریزی دهنده رودهای قرار میگیرد. این تحقیق با هدف جستجوی سروتیپ O1 أکثراشریشیاکلی یکی از متداول‌ترین باکتریهای بیماریزای رودهای در انسان و حیوانات است که باعث بروز عفونتهای مختلفی میگردد. اشریشیاکلی O157:H7 یکی از سروتیپهای مهمی است که در تحت گروه اشریشیاکلی‌های خونریزی دهنده رودهای قرار میگیرد. این تحقیق با هدف جستجوی سروتیپ O157:H7 در نمونههای تخم طیور بومی موجود در بازار با استفاده از دو روش کشت و روش ملکولی PCR انجام و مقاومت آنتیبیوتیکی این باکتری نیز بررسی شد. در مجموع تعداد 87 نمونه تخم طیور بومی(مرغ،بلدرچین،کبوتر،شترمرغ) از سه قسمت پوسته،زرده و سفیده(از هر قسمت یک نمونه مجزا) مورد بررسی قرار گرفت که بعد انجام مراحل کشت تعداد 8 نمونه آلوده به این باکتری بودند سپس این 8 نمونه جهت تعیین سویه مورد آزمایش با روش PCRقرار گرفتند و در نهایت تعداد 4 نمونه واجد ژنوم سویه O157:H7 بودند.همچنین پس از انجام تست های آنتی بیوگرام جهت تعیین میزان حساسیت به آنتی بیوتیکهای مختلف، بیشترین حساسیت در مورد اشریشیاکلی به آنتیبیوتیکهای سیپروفلوکساسین، سفتریواکسن، انروفلوکساسین، انروفلوکساسین و نالی دیکسیک اسید بود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
177 - تعیین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین جدا شده از نمونه های مواد غذایی با روش PCR چندگانه
عصمت خوری اسماعیل عطای صالحی مرضیه خوریاستافیلوکوکوس اورئوس با تولید چندین انتروتوکسین در مواد غذایی باعث بروز علائم مسمومیت با شدت های مختلف می شود. به علت پیدایش سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک در باکتری استافیلوکوکوس اورئوس روز به روز تعداد آنتی بیوتیک های موجود برای درمان این عفونت ها کاهش می یابد. مطالعه أکثراستافیلوکوکوس اورئوس با تولید چندین انتروتوکسین در مواد غذایی باعث بروز علائم مسمومیت با شدت های مختلف می شود. به علت پیدایش سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک در باکتری استافیلوکوکوس اورئوس روز به روز تعداد آنتی بیوتیک های موجود برای درمان این عفونت ها کاهش می یابد. مطالعه حاضر با هدف جداسازی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس و شناسایی ژن مقاوم به متی سیلین در نمونه های مواد غذایی با استفاده از تکنیک PCR چند گانه انجام گرفت. دراین مطالعه 320 نمونه مواد غذایی مختلف در فاصله زمانی مرداد ماه 1394 تا فروردین 1395 به صورت تصادفی از مناطق مختلف تربت حیدریه جمع آوری و به آزمایشگاه ارسال شدند. نمونه ها مطابق با دستورالعمل استاندارد از نظر وجود استافیلوکوکوس اورئوس مورد بررسی قرار گرفتند. آزمون حساسیت آنتی بیوتیکی به روش انتشار دیسک در آگار بر اساس دستورالعمل CLSI انجام گردید. جهت شناسایی و تایید استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شده و ژن های حدت و مقاومت از آزمون PCR استفاده شد .از تعداد 320 نمونه،53 نمونه (6/16 درصد) آلوده به استافیلوکوکوس اورئوس بودند. آلوده ترین نمونه مربوط به نمونه شیرینی (7/19 درصد) بود. نتایج آنتی بیوگرام نشان داد، بیشترین حساسیت مربوط به آنتی بیوتیک توبرامایسین (شامل 100 درصد موارد) و بیشترین مقاومت مربوط به آنتی بیوتیک تتراسایکلین (شامل 09/15 درصد) بود. از میان 53 جدایه 9 مورد (98/16 درصد) در آزمایش انتشار دیسک در آگار به متی سیلین مقاوم بودند و 5 جدایه (5/9 درصد) در تست PCR دارای ژن مقاومت mecA بودند. با توجه به میزان بالای آلودگی مواد غذایی به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، به منظور جلوگیری از آلودگی و انتقال سویه های مقاوم میکروبی تولید و توزیع آنها باید تحت کنترل بهداشتی قرار گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
178 - بررسی مولکولی ژن های مولد کولی باکتین کلبسیلا پنومونیه جدا شده از شیر خام با روش Multiplex-PCR به عنوان عامل ابتلا به سرطان کلورکتال
مرضیه ردائی الاملی صدیقه مهرابیان کیومرث امینی پریسا مبصریکلبسیلا پنومونیه باکتری گرم منفی، غیر متحرک، دارای کپسول، تخمیر کننده لاکتوز، بی هوازی اختیاری و میله ای شکل است. آن از دیرباز به عنوان پاتوژن فرصت طلب مورد توجه قرار گرفته است و یک علت شایع عفونت های بیمارستانی است. خوشه ژنی pksآنزیم هایی را تولید می کند که مسئول تولید أکثرکلبسیلا پنومونیه باکتری گرم منفی، غیر متحرک، دارای کپسول، تخمیر کننده لاکتوز، بی هوازی اختیاری و میله ای شکل است. آن از دیرباز به عنوان پاتوژن فرصت طلب مورد توجه قرار گرفته است و یک علت شایع عفونت های بیمارستانی است. خوشه ژنی pksآنزیم هایی را تولید می کند که مسئول تولید سنتز کولی باکتین هستند. کولی باکتین یک ژنوتوکسین است که باعث آسیب بهDNA می شود و با افزایش ویرولانس مرتبط است. همچنین حدس زده می شود که کولی باکتین در توسعه سرطان کولورکتال نقش داشته باشد. در این مطالعه شیوع ژن های pks،clbN و clbB در جدایه های کلبسیلا پنومونیه مورد بررسی قرار گرفت. در این مطالعه 220 نمونه از شیر خام به دست آمد. سپس تمام نمونه ها در محیط کشت ویولت رد بایل آگار و سپس بلاد آگار، مک کانکی آگار و شکلات آگار برای جداسازی باکتری ها کشت شدند. آزمایش های بیوشیمیایی و میکروبیولوژی برای تایید باکتری انجام شد. DNA از تمام جدایه ها با استفاده از کیت استخراجDNA ژنومی استخراج شد. سپس واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه با استفاده از پرایمرهای اختصاصیانجام شد. یافته ها نشان داد که 60 مورد از کلبسیلا پنومونیه از 220 نمونه (27/27 درصد) جداسازی شده با استفاده از تست های فنوتیپی استاندارد مورد تایید قرار گرفتند. آزمون PCR نشان داد که 6 سویه (10 درصد) دارای ژن های clbBو clbNبودند. کلبسیلا پنومونیهpks مثبت در نمونه های ما شایع بود. با توجه به اثرات پلیوترروپیک آن، کولی باکتین عمیقا بر فیزیولوژی سلولی اثر می گذارد، باعث ایجاد اختلالات DNA می شود که منجر به پیر شدن یا آپوپتوزیس می شود. به نظر می رسد شناسایی کلبسیلا پنومونیهpks مثبت در شیر بسیار ضروری برای جلوگیری از سرطان کلورکتال است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
179 - بررسی شیوع و خصوصیات مولکولی گونههای سالمونلا جدا شده از شیر، گوشت و فرآورده‌های شیر در گاومیش
ساناز علیزاده حسن ممتاز ابراهیم رحیمیباکتری سالمونلا به عنوان یک بیماری منتقل شونده از مواد غذایی مطرح بوده و یک معضل بزرگ در بهداشت جامعه در دنیا به حساب می آید. هدف از این تحقیق تعیین شیوعسالمونلاو بررسی ژن های حدتسالمونلا انتریتیدیسوسالمونلا تیفی موریومجدا شده از شیر و فراورده های شیری گاومیش و گوشت گاو أکثرباکتری سالمونلا به عنوان یک بیماری منتقل شونده از مواد غذایی مطرح بوده و یک معضل بزرگ در بهداشت جامعه در دنیا به حساب می آید. هدف از این تحقیق تعیین شیوعسالمونلاو بررسی ژن های حدتسالمونلا انتریتیدیسوسالمونلا تیفی موریومجدا شده از شیر و فراورده های شیری گاومیش و گوشت گاومیش در استان خوزستان، شهرستان ملاثانی بود. در مجموع 210 نمونه از گوشت، شیر و فراورده های شیری در اسفند 94 و فروردین 95 از شهرستان ملاثانی جمع آوری و با هدف بررسی حضورسالمونلا انتریتیدیسوسالمونلا تیفی موریومو ژن های حدت مورد ارزیابی قرار گرفتند. به طور کلی شیوعسالمونلادر نمونه های مورد مطالعه 86/2 درصد به دست امد. شیوع آلودگی نمونه ها بهسالمونلا اینتریتیدیس6/66 درصد وسالمونلا تیفی موریوم3/33 درصد بود. بیشترین شیوع الودگیسالمونلادر نمونه های پنیر 10 درصد و سپس در شیر 5/2 درصد و در سرشیر 14/7 درصد. هیچسالمونلاییدر نمونه های گوشت، ماست، کره و شیربرنج یافت نشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
180 - شناسایی سویههای استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مقاوم به متی‌سیلین (MRSE)، مرتبط با شیوع مسمومیت غذایی در نمونههای بالینی
پریسا بهشود الهه تاج بخش حسن ممتازاستافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مقاوم به متی‌سیلین یک پاتوژن مهم است که باعث بیماریهای عفونی که درمان آنها بسیار مشکل است میشود. انتروتوکسینهای استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس با اثر بروی سلولهای اپی‌تلیال روده میتوانند باعث ایجاد مسمومیت غذایی در افراد شوند. هدف از این مطالعه، أکثراستافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مقاوم به متی‌سیلین یک پاتوژن مهم است که باعث بیماریهای عفونی که درمان آنها بسیار مشکل است میشود. انتروتوکسینهای استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس با اثر بروی سلولهای اپی‌تلیال روده میتوانند باعث ایجاد مسمومیت غذایی در افراد شوند. هدف از این مطالعه، شناسایی سویههای MRSE مرتبط با شیوع مسمومیت غذایی در اصفهان میباشد. در یک بازه زمانی 6 ماهه،60 نمونه بالینی جهت جداسازی سویههای استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس مورد بررسی قرار گرفتند. پس از شناسایی جدایهها، ایزوله‌های MRSE با روش PCR جداسازی شدند و سپس الگوی مقاومت آنتیبیوتیکی آنها با استفاده از روشKirby – Bauer تعیین شد. حضور ژنهای انتروتوکسین sea، seb، sed و sei با روش PCR مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. از 60 نمونه مورد بررسی، 45 ایزوله استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس جداسازی شد که 30 جدایه (6/66 درصد) MRSE بودند. جدایههای MRSE بالاترین میزان مقاومت به پنی‌سیلین (80 درصد) و سفوکسیتین (6/56 درصد) را نشان دادند، درحالیکه کمترین مقاومت را به لووفلوکساسین (3/13 درصد) و ریفامپیسین (6/6 درصد) نشان دادند. علاوه براین شیوع فراوانی ژنهای انتروتوکسین sea، seb، sed و sei در جدایهها به ترتیب برابر با 60 درصد، 3/63 درصد،3/13 درصد و 6/76 درصد بود. در این مطالعه درصد بالایی از سویههای MRSE، مقاوم به آنتیبیوتیک بودند و انتروتوکسین تولید کردند. با توجه به اینکه این توکسین‌ها سوپرآنتی‌ژن میباشند و میتوانند عوارض عفونتهای بالینی و بیمارستانی را شدیدتر نمایند، تشخیص و درمان سریع این عفونت‌ها ضروری میباشد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
181 - ارزیابی ویژگی‌های پروبیوتیکی و تنوع درون گونه‌ای سویههای Lactobacillus plantarum جدا شده از موادغذایی مختلف با روش RAPD-PCR
دینا شهرام پور مرتضی خمیری محبوبه کشیری سید محمد علی رضویهدف از این مطالعه ارزیابی تنوع درون گونه‌ای 10 سویه Lactobacillus plantarum جدا شده از موادغذایی مختلف شامل زیتون تخمیری، پنیرکوزه، شیر شتر و خمیر ترش به کمک روش RAPD-PCR همچنین مقایسه قابلیت پروبیوتیکی آنها بود. نتایج نشان داد که الگوی باندی متفاوتی توسط سه نوع پرایمر أکثرهدف از این مطالعه ارزیابی تنوع درون گونه‌ای 10 سویه Lactobacillus plantarum جدا شده از موادغذایی مختلف شامل زیتون تخمیری، پنیرکوزه، شیر شتر و خمیر ترش به کمک روش RAPD-PCR همچنین مقایسه قابلیت پروبیوتیکی آنها بود. نتایج نشان داد که الگوی باندی متفاوتی توسط سه نوع پرایمر برای سویههای مختلف به وجود آمد و برطبق ماتریس تشابه رسم شده توسط نرم‌افزار NTSYS بر اساس ضریب جاکارد، به طورکلی 10 سویه در دو شاخه اصلی و 7 زیرگروه جانبی قرار گرفتند. دو سویه 17 KAOو 64KAO جدا شده از منشا یکسان زیتون تخمیری بیشترین شباهت را داشتند. علاوه بر این ویژگی پروبیوتیکی سویههای L. plantarum در سطح نژاد متفاوت ارزیابی شد. نتایج تست ایمنی نشان داد که همه نژادهای مختلف L. plantarum، گاما-همولتیک بودند و در برابر آنتی بیوتیک ونکومایسین مقاوم بودند و مقاومت آنها در برابر سایر آنتی بیوتیکهای رایج متفاوت بود. سویههای جدا شده از پنیر کوزه شامل 37KMC و 45 KMCاز بیشترین مقاومت در برابر اسید برخوردار بودند. از سوی دیگر مقاومت در برابر 3/0 درصد نمک صفراوی نشان داد که اختلاف معناداری از این نظر بین سویههای جدا شده از زیتون تخمیری وجود ندارد و سویه 5 KMM بیشترین مقاومت را داشت. به علاوه فعالیت ضدمیکروبی سویه ها در برابر باکتریهای بیماریزای گرم مثبت L. monocytogenes و گرم منفی E. coli متفاوت بود و بیشترین فعالیت ضدباکتریایی به سویه 45 KMCتعلق داشت. بنابراین با توجه به هدف مورد نظر میتوان هریک از سویههای L. plantarum به عنوان کشت پروبیوتیک در صنایع غذایی و دارویی پیشنهاد نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
182 - بررسی شیوع و مقاومت آنتی بیوتیکی گوشت پرندگان مختلف آلوده به آرکوباکتر در مراکز فروش استان اصفهان در چهارفصل سال 1397
رویا نجفی ابراهیم رحیمی امیر شاکریانجنس آرکوباکتر همراه با کمپیلوباکتر در خانواده کمپیلوباکتریاسه قرار دارد. آرکوباکترها باکتری های گرم منفی، بدون اسپور و میکروآئروفیلیک هستند که به وسیله رشد در حضور اکسیژن و دماهای پایین از جنس کمپیلوباکتر متمایز می شوند. این باکتری ها میله ای، به شکل S و یا مارپیچی شکل أکثرجنس آرکوباکتر همراه با کمپیلوباکتر در خانواده کمپیلوباکتریاسه قرار دارد. آرکوباکترها باکتری های گرم منفی، بدون اسپور و میکروآئروفیلیک هستند که به وسیله رشد در حضور اکسیژن و دماهای پایین از جنس کمپیلوباکتر متمایز می شوند. این باکتری ها میله ای، به شکل S و یا مارپیچی شکل هستند. آرکوباکتر بوتزلری رایج ترین گونه این جنس است به عنوان پاتوژن زئونوز و نوظهور شناخته شده است. هدف اصلی از این مطالعه ارزیابی فراوانی آرکوباکتر بوتزلری از گوشت ماکیان عرضه شده در مراکز فروش در استان اصفهان بود.این مطالعه به بررسی طیف وسیعی از انواع گوشت پرندگان از نظر آلودگی به گونههای آرکوباکتر پرداخت. نمونه ها در طول چهارفصل سال از استان اصفهان جمع آوری، در کنار یخ به آزمایشگاه کنترل کیفی مواد غذایی دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد منتقل شد. جهت جداسازی گونه های آرکوباکتر که 10 گرم از هر نمونه هموژن شده گوشت به آبگوشت غنی کننده آرکوباکتر (ASB ) حامل مکمل انتخابی CAT منتقل و به مدت 4-2 روز در دمای 42 درجه انکوبه، سپس به صورت خطی در محیط های اختصاصی ارکوباکتر ، آگار خون دار کشت داده و پلیت ها به مدت 4-2 روز در دمای 42 درجه تحت شرایط هوازی انکوبه گردید.کلونی های تیپیک در محیط Brucella Agar تحت همان شرایط کشت داده و کشت های خالص برای ویژگی های فنوتیپی، فعالیت کاتالاز و احیای نیترات مورد ارزیابی قرار گرفتند. جهت تائید تشخیص و تفکیک گونه های ارکوباکتر استخراج DNA با استفاده از کیت استخراج DNA ( شرکت سیناژن ایران) مطابق دستورالعمل شرکت سازنده کیت انجام شد. نتایج برای گوشت پرندگان نشان داد که میزان شیوع در مجموع (09/39درصد) بود. بیشترین میزان شیوع مربوط به بلدرچین 60درصد جوجه گوشتی (50 درصد) و اردک (50 درصد) بود، و کمترین میزان مربوط به شترمرغ (15 درصد) بود. بیشترین میزان شیوع در گونه ی A. butzleri برای تمام گونه ها مشاهده شد. در مجموع، بیشترین مقاومت مربوط به اریترومایسین (95/13درصد)، و تتراسایکلین (27/16درصد) و کمترین مقاومت مربوط به متی سیلین (37/88 درصد) و ونکومایسین (34/95درصد) بود. گونه ی A. butzleri) و A. cryaerophilus بیشترین مقاومت را به تتراسایکلین داشتند و کمترین مقاومت مربوط به ونکومایسین بود. تمام گونه ها برای فاکتورهای حدت cadF، ciaB، cj1349، Mvin، pldA و tlyA مثبت بود، که گونه های A. butzleri و A. skirrowii واجد تمام فاکتور های حدت مورد ارزیابی، بودند.، و گونه ی A. cryaerophilus واجد ژن ciaB و Mvin بود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
183 - دسته‌بندی ژنتیکی ایزوله‌های اشریشیاکلی O157:H7جدا شده از گوشت خام دام و طیور با روش RAPD-PCR
ماندانا لطفی حسن ممتاز الهه تاج بخشباکتری اشریشیاکلی O157:H7یکی از مهم ترین سویه های بیماری زای روده ای است که معمولا از طریق آب و غذای آلوده به انسان منتقل می شود. این سویه عامل ایجاد کولیت خونریزی دهنده، سندرم HUS، ترومبوتیک سیتوپنیک پورپورا و در مواردی مرگ است. مخزن اصلی این باکتری نشخوارکنندگان هستند أکثرباکتری اشریشیاکلی O157:H7یکی از مهم ترین سویه های بیماری زای روده ای است که معمولا از طریق آب و غذای آلوده به انسان منتقل می شود. این سویه عامل ایجاد کولیت خونریزی دهنده، سندرم HUS، ترومبوتیک سیتوپنیک پورپورا و در مواردی مرگ است. مخزن اصلی این باکتری نشخوارکنندگان هستند. هدف از این پژوهش دسته بندی ژنتیکی (ژنوتایپینگ) ایزوله های این سویه جدا شده از گوشت خام دام و طیور با روش RAPD-PCR است. 344 نمونه گوشت خام نشخوارکنندگان و طیور از مراکز عرضه گوشت تازه در شهرهای اصفهان و شهرکرد جمع آوری و پس از کشت و جداسازی اشریشیاکلی از آن ها، حضور سروتیپ O157:H7با استفاده از روش PCR تایید شد. جهت دسته بندی ژنتیکی ایزوله های O157:H7 جدا شده از روش RAPD-PCR استفاده شد. از مجموع 344 نمونه گوشت خام مورد مطالعه، 202 جدایه اشریشیاکلی (7/58درصد) جداسازی شد که میزان آلودگی به سویه O157:H7 در آن ها، 8/17 درصد (36 نمونه) بود.دسته بندی ژنتیکی جدایه های اشریشیاکلی O157:H7، 9 پروفایل مختلف را در میان این 36 جدایه نشان داد و قرابتی معادل 7/43 تا 100 درصد در بین ایزوله ها یافت شد. در این پژوهش تشابه مولکولی زیادی بین سویه‌هایاشریشیاکلی O157:H7جدا شده از گوشت حیوانات مختلف در شهرهای اصفهان و شهرکرد دیده شد. همچنین مشخص شد که روش RAPD-PCR روشی ساده، سریع و ارزان جهت توصیف تنوع ژنتیکی سویه های مختلف اشریشیاکلی ازجمله سویه O157:H7می باشد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
184 - بررسی میزان شیوع انگل نئوسپورا کنینوم در شیر گاوان استان یزد به روش Nested-PCR در تابستان سال 1400
محسن جعفریان نصیر رفعتینئوسپوروزیس عامل اصلی سقط جنین گاو در ایران و سایر نقاط جهان میباشد که به وسیله تک یاخته انگلی به نام Neospora caninum ایجاد میشود. اثرات اقتصادی نئوسپوروزیز کاهش میزان تولید شیر و گوشت در گاو است. انتقال نئوسپورا کنینوم از طریق راه‌های عمودی و افقی امکان پذیر است. بر أکثرنئوسپوروزیس عامل اصلی سقط جنین گاو در ایران و سایر نقاط جهان میباشد که به وسیله تک یاخته انگلی به نام Neospora caninum ایجاد میشود. اثرات اقتصادی نئوسپوروزیز کاهش میزان تولید شیر و گوشت در گاو است. انتقال نئوسپورا کنینوم از طریق راه‌های عمودی و افقی امکان پذیر است. برخی از مطالعات در مورد اهمیت انتقال عمودی در زمان شیرخواری، از طریق آغوز و شیر انجام شده است. بیشتر مطالعات انجام گرفته در ایران به منظور بررسی میزان آلودگی به نئوسپورا کنینوم در گاوها مبتنی بر جستجوی آنتی بادی‌های ضد انگل در سرم خون بوده و مطالعات محدودی روی شیر انجام شده است. هدف از این مطالعه بررسی وجود ژنوم نئوسپورا کنینوم در شیر خام گاو با استفاده از روش Nested-PCR جهت بررسی انتقال عمودی این انگل بوده است. در این مطالعه 300 نمونه شیر خام گاو از گاوداریهای سنتی استان یزد جمعآوری شد. نتایج این مطالعه نشان‌داد که 54 مورد (18 درصد) از 300 نمونه شیر گاو به ژنوم نئوسپورا کنینوم آلوده بوده‌اند. یافته‌های مطالعه حاضر نشان دهنده حضور بالایی از عفونت نئوسپورا کنینوم بوده و نشان داد که شیر گاوان آلوده نقش مهمی در انتقال نئوسپوروزیز در گوساله‌های تازه متولد شده دارد. بر اساس این یافتهها، برنامههای کنترلی و ریشه‌کنی از جمله واکسیناسیون جهت جلوگیری و کاهش تلفات اقتصادی این عفونت تک یاخته‌ای در گاو ضروری است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
185 - مطالعه فراوانی آلودگی گونههای ویبریو در ماهیان عرضه شده در شهر اصفهان
عباس کریمی علویجه علی شریف زادههر ساله موارد زیادی از وقوع مسمومیت های غذایی ناشی ازمصرف مواد غذایی دریایی آلوده به گونه های ویبریو ، گزارش می گردد. هدف از این تحقیق بررسی میزان فراوانی آلودگی ماهیان خام عرضه شده ، به گونه های ویبریو در شهر اصفهان بود. در این بررسی ماهیان خام خریداری شده از 64 فروشگا أکثرهر ساله موارد زیادی از وقوع مسمومیت های غذایی ناشی ازمصرف مواد غذایی دریایی آلوده به گونه های ویبریو ، گزارش می گردد. هدف از این تحقیق بررسی میزان فراوانی آلودگی ماهیان خام عرضه شده ، به گونه های ویبریو در شهر اصفهان بود. در این بررسی ماهیان خام خریداری شده از 64 فروشگاه ، به آزمایشگاه کنترل کیفی مواد غذایی دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرضا انتقال داده شد. نمونه ها از نظر شمارش ویبریو طبق روش استاندارد ملی ایران مورد آزمایش قرار گرفت . در آزمون مولکولی با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز آشیانه ای حضور گونه های پاراهمولیتیکوس، کلرا، ولنیفیکوس و میمیکوس جنس ویبریو مورد بررسی قرار گرفت . نتایج حاکی از آن بود که حدود ۹۵درصد نمونه ها ، آلودگی بیش از حد مجاز به جنس ویبریو داشتند. ویبریو پاراهمولیتیکوس بیشترین میزان فراوانی (35درصد) را نشان داد، در حالی که ویبریو میمیکوس کمترین میزان فراوانی (15 درصد( را در نمونه های مورد بررسی داشت . فراوانی گونه ها ی کلرا و ولنیفیکوس نیز به ترتیب 20 درصد و35 درصدگزارش گردید . نتایج بررسی های میکروبی ماهی های خام جمع آوری شده از فروشگاه های مختلف شهرستان اصفهان نمیتواند رضایت بخش باشد . فراوانی بالای گونه های ویبریو در نمونه ها تایید کننده عدم رعایت بهداشت در مراکز تهیه و توزیع ماهی و فرآورده های آن است .به تظر می رسد جایگاه های عمل آوری و نحوه حمل و نقل و توزیع ماهی در اصفهان از بهداشت مناسبی برخوردار نیست. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
186 - ردیابی و بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در ایزوله های لیستریا مونوسایتوژنژ جدا شده از کشک و پنیر
راحیل کیانپور برجویی حسن ممتاز لیدا لطف الهی زهرا بم زادهلیستریا مونوسایتوژنز یکی از عوامل بیماری زای منتقل شده از غذا و باعث لیستریوزیس در انسان و حیوان میباشد. آلودگی های میکروبی غذاها معمولا منجر به بروز مسمومیت های غذایی گسترده به شکل اپیدمی های فراگیر در سطح مناطق میشود که از نظر بهداشت عمومی بسیار قابل توجه است و از جمل أکثرلیستریا مونوسایتوژنز یکی از عوامل بیماری زای منتقل شده از غذا و باعث لیستریوزیس در انسان و حیوان میباشد. آلودگی های میکروبی غذاها معمولا منجر به بروز مسمومیت های غذایی گسترده به شکل اپیدمی های فراگیر در سطح مناطق میشود که از نظر بهداشت عمومی بسیار قابل توجه است و از جمله مسائل مهم و درخور توجه کشورهای درحال توسعه میباشد این مطالعه با هدف تعیین آلودگی لیستریا مونوسایتوژنز در لبنیات با استفاده از روش کشت و تایید نهایی با روش PCR میباشد. در این مطالعه 150 نمونه لبنی مختلف عرضه شده در بازار به طور تصادفی خریداری، تحت شرایط بهداشتی به آزمایشگاه انتقال و مورد بررسی قرار گرفتند. علاوه بر آزمایشات مبتنی بر محیط کشت نمونه های مثبت جهت تایید نهایی و شناسایی پاتوژن مذکور به روش مولکولی مورد ارزیابی قرار گرفتند. 14 (33/9 درصد) نمونه مثبت شامل 6 نمونه پنیر سفید (4 درصد)، 4 نمونه پنیر خامه ای (6/2 درصد) و 3 نمونه کشک (2 درصد) از نظر آلودگی مثبت گزارش شدند. سنجش حساسیت ضدمیکروبی در مقابل 16 آنتی بیوتیک حساسیت بالایی به کلیندامایسین (37/47 درصد) نشان داده شد. قابل توجه است که به چند دارو مقاوم بود. حضور لیستریا مونوسایتوژنز در محصولات لبنی (پنیر، پنیرخامهای وکشک) مورد مطالعه اثبات گردید، بر اساس نتایج به دستآمده افرادی که از لبنیات آلوده استفاده میکنند در معرض خطر بالقوه ابتلا به لیستریوزیس هستند در نتیجه متصدیان امور ایمنی موادغذایی باید استاندارد موثری را برای بررسی حضور لیستریا در موادغذایی ایجاد کنند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
187 - معرفی مخلوطی بهینه از عصاره‌های مرزنجوش، فوفل و دارفلفل با بالاترین میزان فعالیت علیه بیان ژن انتروتوکسین های A و B استافیلوکوکوس اورئوس
سیدجواد ندافی علی محمدی ثانی اسماعیل عطای صالحی رضا کاراژیانبا آگاهی یافتن مردم در رابطه با اهمیت عصاره‌های طبیعی با ویژگی‌های ضدمیکروبی و آنتی‌اکسیدانی، امروزه صنعت غذا به دنبال استفاده از این ترکیبات به جای نگهدارندههای سنتزی هستند. تا به امروز پژوهشی جهت یافتن یک مخلوط بهینه‌ای از عصاره‌های مرزنجوش، دارفلفل و فوفل علیه بیان أکثربا آگاهی یافتن مردم در رابطه با اهمیت عصاره‌های طبیعی با ویژگی‌های ضدمیکروبی و آنتی‌اکسیدانی، امروزه صنعت غذا به دنبال استفاده از این ترکیبات به جای نگهدارندههای سنتزی هستند. تا به امروز پژوهشی جهت یافتن یک مخلوط بهینه‌ای از عصاره‌های مرزنجوش، دارفلفل و فوفل علیه بیان ژن انتروتوکسینهایA و B S. aureus انجام نشده است، لذا در این پژوهش به دنبال یافتن مخلوطی از این عصاره‌ها با بیشترین فعالیت آنتی‌انتروتوکسین‌زایی به کمک Real-time PCR و روش آماری مخلوط می‌باشیم. در صورت موفقیت، این عصاره‌ها را به عنوان یک عامل آنتاگونیست در برابر رشد باکتریهای بیماریزا و بیان ژن انتروتوکسین S.aureus معرفی نماییم. در مرحله اول فعالیت ضد میکروبی سه عصاره مرزنجوش، دارفلفل و فوفل مورد بررسی قرار گرفت که در این میان عصاره مرزنجوش بیشترین فعالیت ضدمیکروبی را نشان داد. از سوی دیگر در میان باکتریهای مورد آزمون باکتریهای گرم مثبت حساسیت بیشتری نسبت باکتریهای گرم منفی داشتند. عصاره‌های مورد آزمون اثر سینرژیستی بر یکدیگر علیه بیان ژن انتروتوکسینهایA و B S. aureus داشتند. مخلوطی از عصاره‌ها شامل 47 درصد عصاره مرزنجوش، 27 درصد عصاره دارفلفل و 26 درصد عصاره فوفل بیشترین فعالیت علیه بیان ژن انتروتوکسین‌ها را نشان داد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
188 - بررسی لاکتوباسیل های جدا سازی شده از پنیر سنتی مراغه و بررسی قدرت تولید اسید توسط آنها در زمان و دماهای مختلف
امید میرزائی تاش محمدعلی شب خیزپروبیوتیک ها میکروارگانیسم‌های زنده‌ای هستند که وقتی در مقادیر مناسب در دستگاه گوارشی وجود داشته باشند، تاثیرات سودمندی بر میزبان برجای می‌گذارند. از میان باکتریهای پروبیوتیک، لاکتو باسیل‌ها متداول‌ترین باکتری‌هایی هستند که در محصولات لبنی وجود دارند. هدف از تحقیق، جدا أکثرپروبیوتیک ها میکروارگانیسم‌های زنده‌ای هستند که وقتی در مقادیر مناسب در دستگاه گوارشی وجود داشته باشند، تاثیرات سودمندی بر میزبان برجای می‌گذارند. از میان باکتریهای پروبیوتیک، لاکتو باسیل‌ها متداول‌ترین باکتری‌هایی هستند که در محصولات لبنی وجود دارند. هدف از تحقیق، جداسازی و شناسایی لاکتوباسیل‌ها، از فلور موجود در پنیر سنتی مراغه و تعیین ویژگی‌های تکنولوژیکی، فعالیت لیپولیتیکی و پروتئولیتیکی آنها بود. برای این منظور، باکتریهای لاکتیکی توسط روش-های متداول کشت و شناسایی بر اساس خواص بیوشیمیایی جداسازی شدند. سپس آزمایشات تکمیلی، به منظور شناسایی کامل ایزوله های موجود، از جمله رنگ آمیزی گرم، آزمون اکسیداز، کاتالاز و PCR انجام شد. در ادامه قدرت تولید اسید، تغییرات pH توسط جدایه های لاکتوباسیلوس طی زمان های مختلف و بهترین دما برای رشد این سویه ها مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد در همه نمونهها اسیدیته با گذشت زمان افزایش و pH کاهش پیدا کرد. اسیدیته در تمامی نمونه ها و در دماهای 30 ، 37، 42 و 45 درجه سانتیگراد طی زمان‌های صفر، 4، 8، 24 و 48 ساعت افزایش پیدا کرد و در زمان‌های 48 و 72 ساعت در چند نمونه روند کاهشی مشاهده گردید. همچنین pH در تمامی نمونه ها و در دماهای مذکور تا 48 ساعت، کاهش منظم و محسوسی داشت و در زمان‌های 48 و 72 ساعت در اکثر نمونه ها و دماها، مقدار ثابت بود. بنابراین پنیر سنتی مراغه، منبع با ارزشی از باکتریهای لاکتوباسیل بوده که وجود این نوع باکتریها به مصرف کنندگان، این اجازه را می‌دهد که راه جدیدی برای بهره‌مندی از سلامتی بیابند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
189 - استفاده از روش ERIC-PCR جهت دسته بندی ژنتیکی ایزوله های کمپیلوباکتر جدا شده از شیر خام
غلامرضا بنی شریف محمدحسین مرحمتی زاده حسن ممتازمقدمه و هدف: گونه های کمپیلوباکتر از مهم ترین پاتوژن های عامل گاستروآنتریت های باکتریایی هستند که عمومـاً از طریـق مـواد غـذایی بـا منـشاء حیوانی منتقل می شوند. مطالعه حاضر با هدف دسته بندی ژنتیکی ایزوله های کمپیلوباکتر جدا شده از شیر خام گاو، گوسفند و بز در استان چهارم أکثرمقدمه و هدف: گونه های کمپیلوباکتر از مهم ترین پاتوژن های عامل گاستروآنتریت های باکتریایی هستند که عمومـاً از طریـق مـواد غـذایی بـا منـشاء حیوانی منتقل می شوند. مطالعه حاضر با هدف دسته بندی ژنتیکی ایزوله های کمپیلوباکتر جدا شده از شیر خام گاو، گوسفند و بز در استان چهارمحال و بختیاری انجام شد. روش کار: تعداد 43 ایزوله کمپیلوباکتر که از شیر خام گاو، گوسفند و بز درسطح استان چهارمحال وبختیاری جدا شده بودند، انتخاب و به روش ERIC-PCR آزمایش شدند. نتایج: ایزوله های مورد مطالعه دارای الگوی باندی از محدوده 100تا 2000جفت باز بودند که در آنالیز الگوی باندینگ حاصله با ضریب تشابه تطابق ساده در سطح تشابه بالای 80 درصد در قالب 5 پروفایل اصلی طبقه بندی شدند. بجز قرابت 100 درصدی که در 1 مورد دیده شد، سایر ایزوله ها دارای قرابت ژنتیکی بین 54% تا 98% بودند. نتیجه گیری: قرار گرفتن ایزوله های مورد مطالعه در چند زیر گروه نشان گر قدرت تمایزدهی قابل قبول تکنیک ERIC-PCR در ژنوتایپینگ کمپیلوباکتر و وجود منابع مختلف آلودگی فراورده های لبنی با این پاتوژن می باشد. روش ERIC-PCR روشی ساده، سریع و کم هزینه جهت توصیف تنوع ژنتیکی سویه های مختلف کمپیلوباکتر ازجمله سویه های کمپیلوباکترژژونی و کمپیلوباکترکولی می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
190 - مطالعه فراوانی ژن حدتhlyAباکتری لیستریا مونوسیتوژنز در سبزیجات تازه با استفاده از واکنش زنجیرهای پلی مراز
حسین مومنی علی شریف زاده معصومه بشیریچکیده لیستریامونوسیتوژنز‌یک پاتوژن سرمادوست مهم غذایی است که ممکن است در سبزیجات تازه یافت شود. انواع سبزیجات مختلف میتوانند در انتقال لیستریابهانسان و همه گیریلیستریوز نقش داشته باشند. هدف از این مطالعه ارزیابی شیوع لیستریامونوسیتوژنز و مطالعه فراوانی ژن hlyA در سبزی أکثرچکیده لیستریامونوسیتوژنز‌یک پاتوژن سرمادوست مهم غذایی است که ممکن است در سبزیجات تازه یافت شود. انواع سبزیجات مختلف میتوانند در انتقال لیستریابهانسان و همه گیریلیستریوز نقش داشته باشند. هدف از این مطالعه ارزیابی شیوع لیستریامونوسیتوژنز و مطالعه فراوانی ژن hlyA در سبزیجات تازه در شهرستان شهرکرد بود.این مطالعه به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 145 نمونه سبزیجات تازه جمع آوری شده از شهرستان شهرکرد انجام گرفت. جداسازی لیستریامونوسیتوژنز با استفاده از محیط کشت اختصاصی صورت پذیرفت وسپس فراوانی ژن hlyAبا واکنش زنجیرهای پلی مراز و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی مورد مطالعه قرار گرفت.از مجموع نمونههای مورد مطالعه،81 نمونه (56 درصد) از نظر لیستریا مثبت تشخیص داده شدند که از این تعداد 54 نمونه (67درصد) دارای ژن hlyA بودند. یافته‌های ما نشان می‌دهد که لیستریامونوسیتوژنز در سبزیجات منطقه مورد مطالعه از فراوانی نسبتاً زیادی برخوردار است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
191 - بررسی آلودگی برخی انواع آب میوه به باکتری آلیسایکلوباسیلوس اسیدوترستریس با استفاده از روش PCR و RFLP
حسین معتمدی امیر تاج بخشچکیده آلیسایکلوباسیلوس باکتری اسپوردار و مقاوم به گرماست که موجب تغییر مزه و بوی آب میوه میشود و خسارات قابل توجهی را به صنایع آبمیوه سازی وارد می سازد. هدف از این تحقیق شناسایی این باکتری از آبمیوه های مختلف با واکنش زنجیرهای پلیمراز با استفاده از پرایمرهای اخ أکثرچکیده آلیسایکلوباسیلوس باکتری اسپوردار و مقاوم به گرماست که موجب تغییر مزه و بوی آب میوه میشود و خسارات قابل توجهی را به صنایع آبمیوه سازی وارد می سازد. هدف از این تحقیق شناسایی این باکتری از آبمیوه های مختلف با واکنش زنجیرهای پلیمراز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی بود. برای این منظور،پس از انتقال به محیط کشت و گرمخانه گذاری،استخراج DNAوواکنش زنجیرهای پلی مرازبر روی نمونه ها صورت گرفت.نتایج حاکی از آلودگی 5 نمونه از مجموع 24 نمونه بررسی شده بود.پس از برش با آنزیم EcoR1و انجام الکتروفورز باندهایی واضح در نواحی 118 و 528 جفت بازی مشاهده شد که این حالت مطابق با الگویRFLPحاصل از باکتری آلیسایکلوباسیلوس اسیدوترستریس میباشد. با توجه به نتایج این تحقیق می توان بیان کرد که آلودگی به این باکتری در صنایع تولید آبمیوه مشکل ساز است و برای تشخیص آن تکنیک PCRبا دقت بالا، موجب کاهش هزینه ها و صرفه جویی در زمان می شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
192 - ردیابی انواع ژن های حدت در سروتیپ های سالمونلا تیفی موریوم و سالمونلا انتریتیدیس جدا شده از گوشت مرغ در استان چهارمحال و بختیاری
حسن ممتاز رضا قائد امینی منوچهر مومنیسالمونلوز، توسط باکتری های جنس سالمونلا ایجاد شده و یکی از شایع ترین بیماری های ناشی از مواد غذایی است که با اسهال، تب خفیف، تهوع، دردهای شکم و حتی مرگ، همراهی میشود. این مطالعه به منظور جداسازی و شناسایی سروتیپ های شایع سالمونلا در گوشت مرغ و ردیابی عوامل حدت در آ أکثرسالمونلوز، توسط باکتری های جنس سالمونلا ایجاد شده و یکی از شایع ترین بیماری های ناشی از مواد غذایی است که با اسهال، تب خفیف، تهوع، دردهای شکم و حتی مرگ، همراهی میشود. این مطالعه به منظور جداسازی و شناسایی سروتیپ های شایع سالمونلا در گوشت مرغ و ردیابی عوامل حدت در آنها انجام شد. به این منظور 620 نمونه گوشت مرغ از سوپرمارکت ها در استان چهارمحال و بختیاری جمع آوری و پس از کشت و جداسازی سالمونلا و استخراج ژنوم، با روش واکنش زنجیرهای پلی مراز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که 28 مورد از مجموع 620 نمونه به گونه های سالمونلا آلوده بودند که از بین آنها 12 مورد سالمونلا تیفیموریوم، 10 مورد سالمونلا انتریتیدیس و 6 مورد به سروتیپ های دیگر سالمونلا بودند. نتایج به دست آمده نشان داد که همه ی سویه های سالمونلا تیفی موریوم و سالمونلا انتریتیدیس جدا شده دارای عوامل حدت هستند. نتایج همچنین نشان داد که گونه های سالمونلا قادر به آلوده کردن گوشت مرغ می باشند، لذا رعایت دقیق فرآیند کنترل کیفی و بهداشتی گوشت مرغ بخصوص در کشتارگاه ها ضروری به نظر می‌رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
193 - ردیابی انواع ژن های حدت در سروتیپ های سالمونلا تیفی موریوم و سالمونلا انتریتیدیس جدا شده از گوشت مرغ در استان چهارمحال و بختیاری
حسن ممتاز محسن قائد امینی منوچهر مؤمنیسالمونلوز، توسط باکتریهای جنس سالمونلا ایجاد شده و یکی از شایعترین بیماریهای ناشی از مواد غذایی است که با اسهال، تب خفیف، تهوع، دردهای شکم و حتی مرگ، همراهی میشود. این مطالعه به منظور جداسازی و شناسایی سروتیپهای شایع سالمونلا در گوشت مرغ و ردیابی عوامل حدت در آنها أکثرسالمونلوز، توسط باکتریهای جنس سالمونلا ایجاد شده و یکی از شایعترین بیماریهای ناشی از مواد غذایی است که با اسهال، تب خفیف، تهوع، دردهای شکم و حتی مرگ، همراهی میشود. این مطالعه به منظور جداسازی و شناسایی سروتیپهای شایع سالمونلا در گوشت مرغ و ردیابی عوامل حدت در آنها انجام شد. به این منظور 620 نمونه گوشت مرغ از سوپرمارکت‌ها در استان چهارمحال و بختیاری جمعآوری و پس از کشت و جداسازی سالمونلا و استخراج ژنوم، با روش واکنش زنجیرهای پلی مراز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که 28 مورد از مجموع 620 نمونه به گونههای سالمونلا آلوده بودند که از بین آنها 12 مورد سالمونلا تیفیموریوم، 10 مورد سالمونلا انتریتیدیس و 6 مورد به سروتیپهای دیگر سالمونلا بودند. نتایج به‌دست آمده نشان داد که همه‌ی سویههای سالمونلا تیفی موریوم و سالمونلا انتریتیدیس جدا شده دارای عوامل حدت هستند. نتایج همچنین نشان داد که گونه‌هایسالمونلا قادر به آلوده کردن گوشت مرغ میباشند، لذا رعایت دقیق فرآیند کنترل کیفی و بهداشتی گوشت مرغ بخصوص در کشتارگاه‌ها ضروری به‌نظر می‌رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
194 - مقایسه واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت برای تشخیص سودوموناس آئروجینوزا و اشریشیاکلی در آب‌های معدنی و آشامیدنی بسته بندی شده
مهوش پویان عباس دوستی حمیدرضا کبیری فاطمه دریسچکیده هدف از انجام این مطالعه، بررسی وجود سودوموناس آئروجینوزا و اشریشیاکلی در آب های معدنی و آشامیدنی بسته بندی شده با استفاده از دو روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت میکروبی بود. در این مطالعه 142 نمونه آب بسته بندی شده از انواع مختلف از کارخانجات تولیدی فعال در است أکثرچکیده هدف از انجام این مطالعه، بررسی وجود سودوموناس آئروجینوزا و اشریشیاکلی در آب های معدنی و آشامیدنی بسته بندی شده با استفاده از دو روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت میکروبی بود. در این مطالعه 142 نمونه آب بسته بندی شده از انواع مختلف از کارخانجات تولیدی فعال در استانهای مختلف کشور جمع آوری شد. جداسازی و تشخیص باکتری سودوموناس آئروجینوزا و اشرشیاکلی با دو روش کشت میکروبی و واکنش زنجیرهای پلیمراز انجام و نتایج مقایسه شد. آلودگی به اشریشیاکلی در روش PCR، در 12 نمونه (6/14%) آب معدنی مثبت ارزیابی شد در صورتی‌که در کشت میکروبی تمامی نمونهها منفی بودند (000/0p=). نتایج حاصل از بررسی آلودگی به اشرشیاکلی در نمونههای آب آشامیدنی بر اساس روش PCR و کشت میکروبی، منفی بود. آلودگی به سودوموناس آئروجینوزا نیز در روش PCR و کشت، بترتیب در10 (1/12%) و 7 نمونه (5/8%) آب معدنی مثبت بود. (176/0p=). این میزان در آب آشامیدنی در روش های PCR و کشت برابر با 2 (3/3%) و صفر بود. (496/0p=). نتایج مطالعه حاضر نشانگر این است که روش واکنش زنجیرهای پلیمراز میتواند تشخیصی با حساسیت و اختصاصیت بالا، آسان و سریع جهت شناسایی باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
195 - Methods of Embryo Sexing in Cattle Breeding: A Review
و. ساچان ب. کومار جی. کومار آگراوال آ. کومار آ. ساکسناDifferent livestock sectors as beef industries get benefit from the production of male animals while dairy industries get benefit from the milk production by the female animals. Therefore, it is obvious need to produce the animals of desired sex which can be achieved by أکثرDifferent livestock sectors as beef industries get benefit from the production of male animals while dairy industries get benefit from the milk production by the female animals. Therefore, it is obvious need to produce the animals of desired sex which can be achieved by predetermining the sex of conceptus at the time of conception i.e. pre determination of sex may be of great economic importance. Control of the sex ratio by sex prediction of the of pre implanted embryo would be beneficial not only in relation to the aspect of management, production and breeding programmes of livestock but also in diagnosing the genetic disorders at prenatal stage. Pre-implantation sexing of embryos not only improves efficiency of embryo transfer but also facilitate the transfer of embryos of desired sex. Sex-sorted sperm is a one of the technique fulfilling the requirement but it is well expensive and less efficient. Another concept of getting genetically improved animals of desired sex is embryo sexing. Embryo sexing has great potential to maximize the efficiency of dairy production through controlling the sex ratio of domestic species. There are many methods to determine the sex of embryo categorized as invasive and non-invasive techniques with varying efficiency and merits. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
196 - Utilization of a 17 Microsatellites Set For Bovine Traceability in Czech Cattle Populations
L. Putnova I. Vrtkova P. Srubarova L. StehlikFor identification of individuals and parentage control performed by cattle breeders in the Czech Republic, a novel Finnish Bovine Genotypes™ Panel 3.1was amplified by means of one multiplex polymerase chain reaction. Bovine Panel encompasses all the 12 STR loci r أکثرFor identification of individuals and parentage control performed by cattle breeders in the Czech Republic, a novel Finnish Bovine Genotypes™ Panel 3.1was amplified by means of one multiplex polymerase chain reaction. Bovine Panel encompasses all the 12 STR loci recommended by the International Society for Animal Genetics (ISAG) for routine use in parentage testing and identification, including TGLA227, BM2113, TGLA53, ETH10, SPS115, TGLA126, TGLA122, INRA23, ETH3, ETH225, BM1824 and BM1818. In addition, the kit included the following six microsatellites which were among the list of loci recommended by the Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) for genetic studies of domestic animals: SPS113, RM067, CSRM60, MGTG4B, CSSM66 and ILSTS006. Afterwards, the length of these microsatellite’s polymorphisms was examined by fragment analysis of the amplified products. The investigated population consisted of 125 animals of three bovine breeds (Fleckvieh, n=50; Charolais, n=50 and Beef Simmental, n=25). A total of 337 alleles were identified and all microsatellite DNA markers showed high polymorphism. The probabilities of paternity exclusion/one parental genotype unavailable/and parentage exclusion were 0.9942/0.9798/0.9999 (Fleckvieh), 0.9834/0.9744/0.9999 (Charolais), 0.9828/0.9682/0.9999 (Beef Simmental). Research data certified the possibility of using the Finnish panel of DNA microsatellites markers for the traceability purposes in the Czech cattle populations. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
197 - DNA Polymorphisms at Candidate Gene Loci and Their Relation with Milk Production Traits in Murrah Buffalo (<i>Bubalus bubalis</i>)
دی.اس. کاله بی.آر. یاداو جی. پراسادDNA polymorphism within diacylglycerol transferase 2 (DGAT2) / monoacyl glycerol transferases 2 (MOGAT2), leptin and butyrophilin genes were analysed using PCR-SSCP in Murrah buffalo. The single strand conformation polymorphism (SSCP) analysis of amplified gene fragment أکثرDNA polymorphism within diacylglycerol transferase 2 (DGAT2) / monoacyl glycerol transferases 2 (MOGAT2), leptin and butyrophilin genes were analysed using PCR-SSCP in Murrah buffalo. The single strand conformation polymorphism (SSCP) analysis of amplified gene fragment in exon 5 of MOGAT2, exon 3 of leptin and intron 1 of butyrophilin gene revealed different patterns. A, B and C showed the following frequencies for each candidate gene in 53 (A=0.49, B=0.36 and C=0.15), 65 (A=0.38 and B=0.62) and 55 samples (A=0.6, B=0.31 and C=0.09) from Murrah buffaloes, respectively. The strand conformation polymorphism (SSCP) followed by DNA sequencing revealed one single nucleotide polymorphism (SNP) that was (c.193T>C) in MOGAT2, one single nucleotide polymorphism (SNP) (c.25 T>C) in leptin and one single nucleotide polymorphism (SNP) (c.184C>T>G) in butyrophilin gene confirmed BTI1 SSCP.The statistical analysis using general linear model procedure for association study, indicated that Murrah buffalo monoacyl glycerol transferases 2 (MOGAT2)(c.193T>C) single nucleotide polymorphism (SNP)and (c.25 T>C) in leptingenotypes were not significantly different (P>0.01) in Murrah buffalo for milk production traits milk yield, fat percentage and single nucleotide polymorphism (SNP)percentage. However, the statistical analysis for association study indicated BTI1 SSCP was significantly (P≤0.05) associated with 305-days lactation milk yield. The Murrah buffaloes with BTI1BB genotypes had 683.93 kg and 320.48 kg higher milk yield as compared to BTI1AA and BTI1CC genotypes, respectively. The positive association of butyrophilin single strand conformation polymorphism (SSCP) polymorphism with milk yield will be a useful tool for future selection and breeding strategies and genetic improvement of buffaloes for milk yield. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
198 - Detection of New Silent Mutation at 348 bp Position in a CD18 Gene in Holstein Cattle Normal and Heterozygous for Bovine Leukocyte Adhesion Deficiency Syndrome
R.K. Patel R. Kotikalapudi P.S.S. SunkaraIn India, Holstein and its crosses are being used extensively in breeding programmes and all these breeding bulls are screened for autosomal recessive genes. Blood samples are collected in ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) coated tubes and DNA was isolated by using أکثرIn India, Holstein and its crosses are being used extensively in breeding programmes and all these breeding bulls are screened for autosomal recessive genes. Blood samples are collected in ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) coated tubes and DNA was isolated by using phenol-chloroform method. Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) wereperformed by using bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) specific primersand TaqI restriction enzyme for diagnosis of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) syndrome. The bull was found to be heterozygous for BLAD allele. The PCR product was sequenced by automated sequencer using the ABI big dye Ver 3.1 for detection of mutation at position 383 bp (A/G). Sequence analysis comparison was performed using the codon code aligner 4.0.4 software. The sequence of carrier animal confirmed polymorphism at 383 bp position. The sequence was also compared with sequence of normal Holstein as a control and the sequence available with NCBI (accession No. NC-007299). The comparison of sequences revealed a heterozygous polymorphism at 348 position (T>C) in a carrier animal whereas in homozygous in a control Holstein which was normal for BLAD. The new polymorphism at 348 position was found to be silent as it does not change amino acid (asparagine, AAT>AAC) within exon 4 of CD18 gene. The partial sequence of new polymorphism / silent mutation has already been submitted to NCBI (accession No. KF840683). Further studies have to be carried out to elucidate the possible association of the CD18 silent point mutation at 348 bp position as a potential molecular marker for milk production traits. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
199 - Polymerase Chain Reaction of Mgc2 and 16S rRNA Genes for Detection of <i>Mycoplasma gallisepticum</i>
ا. ذاکریMycoplasmas are very small bacteria lacking cell walls that belong to various genera within the class Mollicutes, and also the smallest organisms that can live independently. They are able to cause serious and chronic disease because of some unique characteristics. Myco أکثرMycoplasmas are very small bacteria lacking cell walls that belong to various genera within the class Mollicutes, and also the smallest organisms that can live independently. They are able to cause serious and chronic disease because of some unique characteristics. Mycoplasma gallisepticum (MG) is an important avian pathogen causing significant economical losses within the poultry industry. The aim of the present study was to investigate the prevalence of M. gallisepticum in poultry by PCR of mgc2 and 16 s rRNA. We examined the differentiating potential of diagnostic polymerase chain reaction (PCR) primers targeted to the 16S rRNA and mgc2 genes present in MG. For serological screaming test, we selected 26 farms and took blood samples for RSAT assay. For 16S rRNA and mgc2 PCR assay, we took 109 samples from 10 rapid slide agglutination test (RSAT) positive farms, including: lung, air sacs and tracheal swabs. The 16S rRNA and mgc2 PCR diagnostic primers are specific for MG in tests of all avian Mycoplasmas or bacteria present in the chicken trachea and are sensitive enough to readily detect MG in tracheal swabs from field outbreaks. 530 bp and 300 bp PCR products on electrophoresis gel appeared respectively with 16S rRNA and mgc2 PCR diagnostic primers, specific for MG. The test was successfully applied in vivo for detection of MG in clinical samples. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
200 - Polymorphism and Sequencing of DGAT1 Gene in Iranian Holstein Bulls
M. Hosseinpour Mashhadi M.R. Nassiri M. Mahmoudi M. Rastin N.E.J. Kashan R. Vaez Torshizi N. Tabasi S.E. NooraeeQuantitative traits locus for milk production traits has been described on centromeric end of bovine chromosome 14. Reports name the acyl coA: diacylglycerol acyltransferase (DGAT1) gene as a potential candidate gene with dinucleotide substitution (AA to GC) in exon VII أکثرQuantitative traits locus for milk production traits has been described on centromeric end of bovine chromosome 14. Reports name the acyl coA: diacylglycerol acyltransferase (DGAT1) gene as a potential candidate gene with dinucleotide substitution (AA to GC) in exon VIII which causes the change of lysine to alanine in amino acid (K232A).The aim of the present study was to estimate the frequency of DGAT1 K232A polymorphism in Iranian Holstein bulls as a potential quantitative trait locus (QTL) for marker assisted selection. Sample of 103 Holstein bulls from the Animal Breeding Center of Iran were genotyped for DGAT1 polymorphism (A and K allele). The PCR-RFLP technique was used to study the DGAT1 gene polymorphism. Frequency of KK, KA and AA genotypes were 0.59, 0.41 and zero respectively. The allele frequencies of the DGAT1 gene were 0.7961 and 0.2039 for K and A allele, respectively. The K allele was sequenced and registered in NCBI gene bank with EU075528 accession number. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
201 - Investigation of GDF8 Gene Promoter in Iranian Sheep
م. کمانگر ه.ا. روشنفکر ح. گله‌داری آ.س. صدر م. ممویی م.ت. بیگی نصیریMyostatin is a growth factor belonging to the TGFß superfamily. TGFß growth factors are active in the regulation of embryonic development and in tissue homeostasis in adults. Myostatin is a growth factor controlling proliferation of myoblasts in embryonic de أکثرMyostatin is a growth factor belonging to the TGFß superfamily. TGFß growth factors are active in the regulation of embryonic development and in tissue homeostasis in adults. Myostatin is a growth factor controlling proliferation of myoblasts in embryonic development. Mutations in coding sequences of the bovine myostatin (GDF8) gene lead to muscle hyperplasia suggesting its inhibitory function on myoblast proliferation. In bovines, loss of this gene activity has been associated with expression of the double-muscled phenotype observed in some European cattle breeds. Myostatin gene polymorphism has also been studied in sheep. Due to the role of the myostatin gene in muscle development, the objective of this study was to sequence the myostatin gene promoter and its probable mutations, which have the potential to alter myostatin gene expression. DNA from blood samples of fifteen Arabic and fifteen Kordi sheep were extracted and used to amplify a 1034bp fragment in the myostatin gene. Three mutations were observed in the myostatin gene promoter at positions 430, 450 and 530. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
202 - Investigation of Bovine Leukocyte Adhesion Deficiency (BLAD) and Complex Vertebral Malformation (CVM) in a Population of Iranian Holstein Cows
B. Hemati S. Gharaie-Fathabad M.H. Fazeli Z. Namvar M. RanjiIn the present research, molecular detection of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) and complex vertebral malformation (CVM)in a population of Iranian Holstein cows has been carried outusing milk somatic cells by polymerase chain reaction-restriction fragment le أکثرIn the present research, molecular detection of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) and complex vertebral malformation (CVM)in a population of Iranian Holstein cows has been carried outusing milk somatic cells by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP). The BLAD and CVM are monogenic and autosomal recessive heredity lethal syndrome in Holstein-Friesian cattle. BLAD characterized by affecting the haematopoietic system via reduced expression of the adhesion molecules on neutrophils. CVM characterized by intra-uterine mortality with disorders such as short neck, curved legs, abnormality of ribs and some certain heart abnormalities. In the first step of our research program,tank milk samples from 50 herds were collected. PCR-RFLP was performed to detect a point mutation of both CVM and BLAD genes. After DNA extraction, PCR was amplified using specific primers for 136 bp DNA (CD18 gene) and233 bp DNA (SLC35A3 gene).TaqIand EcoT22I enzymes were used to identify both BLAD and CVM alleles of both genes by digestion of PCR products.In these herds, we did not find any affected herd with the mutant allele of BLAD comparing with a positive evidence but the mutation of SLC35A3 gene found in 17 different herds. In the next step of our study a herd with 120 cows was randomly selected for individual test using blood samples. We showed two cows out of 120 were identified as carriers of this gene. In this herd, the total number of dominant homozygote (AA), heterozygote (Aa) and recessive homozygote (aa) genotypes for CVM were 118, 2 and 0, respectively and the frequency of A and a alleles were 0.992 and 0.008, respectively. The other affected herds will be tested in the next step of our research program. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
203 - Association of Melatonin Receptor 1A Gene Polymorphisms with Production and Reproduction Traits in Zandi Sheep
م. حاتمی ق. رحیمی میانجی ا. فرهادیMelatonin regulates some major physiological processes such as maturation and function of reproductive system, pubertal development, seasonal reproduction and adaptation. The activation of melatonin hormone is mediated by melatonin receptor. Previous studies showed mela أکثرMelatonin regulates some major physiological processes such as maturation and function of reproductive system, pubertal development, seasonal reproduction and adaptation. The activation of melatonin hormone is mediated by melatonin receptor. Previous studies showed melatonin receptor 1A gene (MTNR1A) is highly polymorphic in seasonally breeding species. The aim of the present study was detection of MTNR1Apolymorphism and its association with production (body weights at birth, 1, 3, 6, 9 and 12 month of age) and reproduction (litter size) traits in Zandi sheep using PCR-RFLP methodology. Hundred blood samples were randomly collected and genomic DNA was isolated using modified salting out method. A large fragment of exon 2 of MTNR1A gene was amplified by PCR using specific primer pairs. After amplification, the PCR product was digested with MnII endonuclease. Restricted digestion allowed the determination of two alleles (M, m) and two genotypes (MM, Mm) with frequencies of 0.91, 0.09 and 0.82, 0.18, respectively. Least square means showed that MM individuals had higher body weight at one month of age (BW1) than Mm individuals (P<0.05). No associations were found between observed genotypes and other studied traits.In the subsequent studies using a large number of samples along with the other important parameters such as sire effect and the lamb health status which may influence lamb body weight is recommended. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
204 - Genotyping of Lactoferrin and <i>CXCR1</i> Genes in Guilan Native Cows and Its Association with Milk Somatic Cell Score
S.H. Hosseini Moghaddam M. Ayatollahi O. Ahadzadeh S.Z. Mirhoseini R. Khataminejad H. AlaeiLactoferrin and CXCR1 genes are involved in immune responses related to mastitis infection. In this study, the polymorphism and association of lactoferrin (LF) and CXCR1 genes with milk somatic cell counts, as an indicator for mastitis detection, were investigated in Gu أکثرLactoferrin and CXCR1 genes are involved in immune responses related to mastitis infection. In this study, the polymorphism and association of lactoferrin (LF) and CXCR1 genes with milk somatic cell counts, as an indicator for mastitis detection, were investigated in Guilan native cow (Taleshi breed) using DNA blood samples of 100 cows from three different geographical zones (west, center, and east of Guilan province). The LF gene with a 301 bp fragment and CXCR1 with a fragment of 311 bp were amplified through PCR by using their specific primers. Then LF polymerase chain reaction (PCR) product was digested by EcoRI enzyme due to a single nucleotide polymorphism (SNP) at the related position (T>C) in intron 6 of LF and CXCR1 PCR product by BaeGI enzyme due to G > C SNP at position +735. Two alleles and three genotypes were observed for both genes in the studied populations. The observed genotypic frequencies of AA, AB, and BB were 52, 39, and 9% for LF and 67, 12, and 20% for CXCR1 locus, respectively. Three genotypes of LF locus were under Hardy-Weinberg equilibrium (P˃0.05) but it was not for CXCR1 locus. The mean of somatic cell counts was 138 × 103/mL, much lower than the reported data of pure-bred and crossbred cattle. Although there was no significant association (p <0.05%) between LF genotypes and somatic cell score (SCS), there was a tendency for association (p <0.1). The CXCR1c.+735 genotype had a significant association (p <0.05) with SCS. Sampling from different regions did not show a significant effect on SCS. The fix effects including lactation month, age, and lactation number had also no significant effect on SCS of the studied native cow. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
205 - Polymorphism of Β-Lactoglobulin (Β-Lg) Gene and Its Association with Milk Yield and Milk Composition on Senduro Goats
F.E. Wardani J. Palayukan A. Furqon S. Suyadi T.E. SusiloriniThe objective of this research was to examine the β-lactoglobulin gene polymorphism and its association with milk yield and composition in Senduro goats. A total of 60 lactation Senduro goats aged 2 to 4 years were used in this study. Milk yield and blood samples w أکثرThe objective of this research was to examine the β-lactoglobulin gene polymorphism and its association with milk yield and composition in Senduro goats. A total of 60 lactation Senduro goats aged 2 to 4 years were used in this study. Milk yield and blood samples were collected from dairy goat farms in Burno and Kandangtepus Senduro villages. The 480 bp β-lactoglobulin gene DNA fragments were amplified using the polymerase chain reaction (PCR) method at 60 ˚C annealing for 35 cycles. The genotypes of the β-lactoglobulin gene were determined using the restriction fragment length polymorphism (RFLP) technique with the Sac II restriction enzyme. Association of β-lactoglobulin genotypes with milk yield and composition were analyzed using the ANOVA test. The result showed that the single nucleotide polymorphism (SNP) c.497G > A was detected. The β-lactoglobulin was polymorphic in Senduro goats. There were three genotypes (AA, AG, GG) and two alleles (A and G). The frequency of AA, AG, GG genotypes were 0.4, 0.52, 0.08, respectively, while the frequencies of A and G alleles were 0.66 and 0.34, respectively. There was no association between β-lactoglobulin gene polymorphism and milk yield and composition on Senduro goats. In conclusion, the genotype of the β-lactoglobulin gene did not effect on milk yield, protein, fat, density, lactose, salt, SnF, and total solid. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
206 - Some Parts of the Feather Can be a Non-Invasive Genetic Sample for Sexing in Avian?
N . Yimtragool P. ChangtorThe current animal research investigation emphasizes animal wellbeing. Therefore, the present study recommends using non-invasive sampling procedures in scientific studies. The purpose of this study was to evaluate DNA extracted from 7 different parts of the feather (ca أکثرThe current animal research investigation emphasizes animal wellbeing. Therefore, the present study recommends using non-invasive sampling procedures in scientific studies. The purpose of this study was to evaluate DNA extracted from 7 different parts of the feather (calamus tip, rachis (I-III) and barbs (I-III)) for sex identification using polymerase chain reaction (PCR) amplification. The study results showed that the calamus tip had the highest DNA concentration. DNA extracted from rachis and barbs can also be amplified and use for sex determination. Extracted DNA from the calamus tip, rachis (I), and barbs (I) showed accurate results for amplified PCR products when compared to the sex of known samples. The findings revealed that, in addition to the calamus tip, the rachis and barbs on the lower part of the feather surrounding on the calamus can be used to determine sex. Calamus tip collection by plucking is an invasive technique that could result in contusion and infection. The non-invasive sample collection method of cutting a portion of the feather is one option for supporting animal welfare guidelines. Furthermore, the non-invasive method presented in the study can be used to collect samples in other branches of molecular biology. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
207 - The Effects of Various Essential Oils of Medical Plant Seeds and Spices on Digestion Characteristics and Population Changes of Ruminal Anaerobic Fungi in <i>in vitro</i> Condition
م. سجادیان م. دانش مسگران ع.ر. وکیلیThe effect of essential oils (EO) of medical plant seeds and spices on rumen microbial fermentation of alfalfa hay, sugar beet pulp and barley grain (as substrate) were evaluated under in vitro conditions. In vitro incubations were carried out using the gas production m أکثرThe effect of essential oils (EO) of medical plant seeds and spices on rumen microbial fermentation of alfalfa hay, sugar beet pulp and barley grain (as substrate) were evaluated under in vitro conditions. In vitro incubations were carried out using the gas production method with glass syringes. Treatments were as follows; a control (no additive), monensin, EO of cinnamon, black pepper seed, cumin seed, fennel seed and garlic oil (200 and 400 µL/g DM). Monensin was used as a positive control in the medium at 5 µmol. Data on gas production were fitted using an exponential equation. Results showed that compared to control treatments, monensin had a significant increase on gas production (P<0.05), and cumin seed EO decreased gas production of the feed samples (200 and 400 µL). The effects of treatments on in vitro ruminal fermentation characteristics were tested using an in vitro culture inoculated by mixed rumen microbes. The test treatments were as follows; control (no additive), EO of cinnamon, black pepper seed, cumin seed and fennel seed. Evaluations were made for medium pH, ammonia nitrogen concentration and dry matter disappearance after a 48 h incubation period. To evaluate the effect of EO on in vitro ruminal fungi populations, a sample was taken from the medium after a 120 h incubation period and fungal population was determination by real-time polymerase chain reaction. Compared to the control treatment, cumin and cinnamon additions resulted in a significant decrease (P<0.05) on disappearance of dry matter in the feed samples. In the present study, additions of all tested EO to alfalfa hay treatment showed a significant increase in the final pH of the culture (P<0.05). However, cinnamon addition resulted in a significant decrease in medium ammonia nitrogen concentration for each of the feed samples (P<0.05). Results of the present study also demonstrate that addition all of the tested EO to alfalfa hay had a significantly decrease on in vitro ruminal fungal population (P<0.05). تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
208 - A Profile of Single Nucleotide Polymorphisms in Fecundity Genes Among Iranian Sheep Breeds by Using Polymerase Chain Reaction–Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) Method
پ. پتکی س.ض. میرحسینی ف. افراز س.م.ف. وحیدیOvulation rate and litter size are traits of fecundity and have a very remarkable economic value that leads to an increase in the production of meat, wool and milk. Therefore, exploring on the candidate and functional genes for these traits is very important. Growth dif أکثرOvulation rate and litter size are traits of fecundity and have a very remarkable economic value that leads to an increase in the production of meat, wool and milk. Therefore, exploring on the candidate and functional genes for these traits is very important. Growth differentiation factor 9 (GDF9), bone morphogenetic protein 15 (BMP15) and bone morphogenetic protein receptor-1B (BMPR1B) are the most important of these genes containing single nucleotide polymorphisms (SNPs) markers that are associated with high fertility in sheeps. The aim of this study was to determine the allelic and genotypic frequencies of seven of these SNPs including; G1, G4, G7 and G8 in GDF9 gene, B2 and B4 in BMP15 gene and FecB in BMPR1B gene among 532 sheeps from eleven of Iranian native breeds using polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. For each mutation region, polymerase chain reactions and digestion reactions with specific endonuclease enzymes, were performed. The results showed that G1 mutation presents among ten breeds except Zandi, G4 mutation in all breeds, and the FecB mutation in two breeds; Kalakuei and Zandi. The G7, G8, B2 and B4 mutations were not observed in any of breeds, and all sheeps were homozygote wild type for these four positions. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
209 - Investigation of Kappa Casein Gene Polymorphism by PCR-RFLP in Najdi Cattle Breed Population in Khuzestan Province
گ. فرهادی م.ت. بیگی نصیری ج. فیاضی ه. روشنفکرMore than 80% of the total milk protein contains caseins that are to forms α-s1, α-s2, β-casein and kappa casein. Kappa casein is smaller than other milk proteins but due to have a role in size and stability of micelles. The present study describes poly أکثرMore than 80% of the total milk protein contains caseins that are to forms α-s1, α-s2, β-casein and kappa casein. Kappa casein is smaller than other milk proteins but due to have a role in size and stability of micelles. The present study describes polymorphism of kappa casein gene. This is the first study of kappa casein gene polymorphism in Najdi cattle of Iran. We used the polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) technique to screen DNA polymorphism in cattle. We amplified the 453 fragment consisting on part of exon 4. The amplified fragment was digested with HinfI restriction endonuclease and subjected to electrophoretic separation in 3% agarose gel. Two alleles were observed, A and B. It gives frequencies of 0.54 and 0.46 for A and B alleles. Also, genotypes AA, AB and BB with frequencies of 35%, 37.5% and 27.5% of the total study population were diagnosed. Existence of Hardy-Weinberg equilibrium indicated that there was not any choice in order to increase or decrease the frequency of genotypes in the kappa-casein population in this herd. Also, in this population kappa-casein gene has medium level of heterozygosity. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
210 - Allele Frequency of c.486A>G Polymorphism of the <i>AA-NAT</i> Gene in Iranian Indigenous and Exotic Sheep Populations
S. Emanizadeh H. Alnajm A. Javanmard J. Shoja A. RafatTypically, lambing percentage is classified as a composite trait and is crucial to profitability in domestic sheep farming. In breeding programs, out-of-season reproduction of sheep is an important tool because seasonal reproduction limits productivity and flexibility. أکثرTypically, lambing percentage is classified as a composite trait and is crucial to profitability in domestic sheep farming. In breeding programs, out-of-season reproduction of sheep is an important tool because seasonal reproduction limits productivity and flexibility. Understanding the complexities of genetic aspects of the none- seasonal reproduction has received significant critical attention in the literature. In this puzzle, the arylalkylamine-N-acetyltransferase (AA-NAT) is a rate-limiting enzyme of the melatonin synthesis pathway and is highlighted as a candidate gene that is responsible for melatonin synthesis and is thus directly associated with out-of-season reproduction in sheep. With this scenario research, we aimed to examine the allele frequency of the polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) polymorphism in the AA-NAT gene in 11 native and exotic sheep populations. A total of 220 blood samples were taken from 11 breeds of sheep, including the exotic breeds Romanov (ROMV) and [Awassi (AWAS), Arabi (ARAB), Naaimi (NAIM) Iraqi native sheep] and [Ghezel (GHZL), Makui (MAKU)], Kurdi (KURD), Baluchi (BALCH), Afshari (AFSR) Iranian native sheep] and two Afshari-Booroola and Romanov-Ghezel F1 cross). Here, we describe the Smal-RFLP genotypes and allele frequency patterns of the (c.486A>G) casual single nucleotide polymorphism (SNP) in the exon of AA-NAT within and between the examined sheep breeds. In addition, PCR sequencing methods were used to double-check A/G and confirmation of PCR-RFLP results. This mutation changed the Arg > Gly structure from helix to helix-effective in improving non-seasonal reproduction. Interestingly, the observed variation of G allele ranged from 0.1 to 0.43 in all study breeds. ROMV is a candidate for non-seasonal sheep breeds and its cross expresses the highest G allele frequency among other breeds studied. The frequency of the AA-NAT genotype was significantly different between breeds in this study. Therefore, the exotic 486A>G mutation created a useful mirror to identify genomics aspects of seasonal/non-seasonal reproduction in sheep. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
211 - The Calpastatin Gene Polymorphism Study and Its Effect on Early Body Weight Traits in Zandi Sheep
ن. پیرویسی ع. نوشری ب. همتیThe goal of this study was investigation of the calpastatin gene polymorphism and its effect on early body weight traits in Zandi sheep by polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Calpastatin is the main inhibitors of calpain أکثرThe goal of this study was investigation of the calpastatin gene polymorphism and its effect on early body weight traits in Zandi sheep by polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Calpastatin is the main inhibitors of calpain-calpastatin enzyme system that play an important role in regulating the protein regeneration process. Genomic DNA was extracted by whole blood samples from 124 randomly selected Zandi breed sheep using salting out method. Birth weight, weight on 150 days old and daily weight gain from birth to 150 days old were recorded. The exon and intron 1 of ovine calpastatin gene were amplified to produce a 622 bp fragment. The PCR products were digested with MspI restriction enzyme and electrophoresised on agarose gel. Results showed 80.6% and 19.4% allele frequencies for A and B alleles and 65.32%, 4.04% and 30.64% genotype frequencies for AA, BB and AB genotypes, respectively. X2 and G2 tests showed the Hardy-Weinberg equilibrium for studied locus. The effect of calpastatin genotype on growth traits was insignificant, but genotype BB had the best performance among all the three traits, which indicates the better performance of normal allele (B) than mutant allele (A) for these traits. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
212 - RFLP Analysis of Beta‐Lactoglobulin Gene in Swamp and Murrah Buffaloes Using a Single Restriction Enzyme
W. Nualchuen K. Srisakwattana S. Chethasing K. Tasripoo S. Usawang R. Hengtrakulsin M. KamonpatanaAn attempt has been made to analyze the distribution of the beta-lactoglobulin genotype in swamp buffaloes and Murrah buffaloes utilizing polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP). Blood samples were taken from 50 swamp buffaloes and 5 أکثرAn attempt has been made to analyze the distribution of the beta-lactoglobulin genotype in swamp buffaloes and Murrah buffaloes utilizing polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP). Blood samples were taken from 50 swamp buffaloes and 50 Murrah buffaloes. The DNA was extracted by the phenol-chloroform method. The PCR-RFLP was performed using beta-lactoglobulin gene primers and a single restriction enzyme, Hae III. The enzyme digested products were separated by electrophoresis on 2.5%agarose gel. All the 100 DNA samples of swamp and Murrah buffaloes resulted in 398 bp product on amplifying beta-lactoglobulin gene. Those PCR products (398 bp fragment) were digested with Hae III produced only one type of restriction pattern yielding five fragments of 113, 99, 89, 73 and 24 bp. One hundred DNA samples of swamp and Murrah buffalo were examined in this study and revealed no polymorphism at the beta-lactoglobulin gene locus. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
213 - Identification of Complex Vertebral Malformation Carriers in Holstein and Guilan Native Cow Breeds in Iran Using SSCP Markers
H. Alaie S.Z. Mirhoseini M. Mehdizadeh S.B. DalirsefatComplex vertebral malformation(CVM) isanautosomal recessivehereditarydisorder caused bya point mutation in position 559 inexon 4 of the SLC35A3 gene on chromosome 3 inHolstein dairy cattle.This mutationchanges the function of uridine 5-diphosphate-N-acetylglucosamine tr أکثرComplex vertebral malformation(CVM) isanautosomal recessivehereditarydisorder caused bya point mutation in position 559 inexon 4 of the SLC35A3 gene on chromosome 3 inHolstein dairy cattle.This mutationchanges the function of uridine 5-diphosphate-N-acetylglucosamine transporter protein bythe substitution of valine for phenylalanine at position 180 of this protein. The disease causes premature birth, aborted fetuses and stillborn calves. Latentrecessivegenesinheterozygousindividualscan be identified withhigh accuracy and repeatability using PCR-SSCP technique. Inthe present study,blood samples fromtwodifferent cow populations,including 100 Holstein cows and100 Guilan native cattle were randomly collected. Specific primers were used to amplify the 177-bp fragment of exon 4 of the SLC35A3 gene. No heterozygous genotype was detected in the studied samples. The Lack of carriers could be a consequence of the selection against the defective gene and preventative programs for entering mutant genes into the populations or very low frequency of this gene in these populations. However, there is a risk for increased genetic defects prevalence and it is necessary to develop screening programs to identify the defective gene. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
214 - Survey of FecXL Locus of BMP15 Gene and Growth Hormone (GH) Gene and Their Effects on Lambing Rate in Zel Sheep
S. Yousefi L. Shahmohammadi M. Ahani Azari S. Zerehdaran E. DehnaviThe GH gene and BMP15 gene have been used as candidate genes for marker-assisted selection in different livestock species. Random blood samples were obtained from 180 Zel sheep breed to study genetic polymorphism of these genes. DNA was extracted from blood samples and أکثرThe GH gene and BMP15 gene have been used as candidate genes for marker-assisted selection in different livestock species. Random blood samples were obtained from 180 Zel sheep breed to study genetic polymorphism of these genes. DNA was extracted from blood samples and a 365 bp fragment from the exon V of the ovine growth hormone gene and a 312 bp region from exon II of BMP15 gene were amplified by polymerase chain reaction. SSCP analysis showed three conformational patterns (A, B and C) for GH gene but for FecXL locus of BMP15 no banding patterns were observed in the animals tested. Results indicated that there were no significant associations (P>0.05) between polymorphism of the GH loci and lambing rate. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
215 - Genotypic and Allelic Frequencies of <i>IGF1</i> and <i>IGF2</i> Genes in Broilers Analysed by Using PCR‐RFLP Techniques
T. Shah S. Deshpande U. Dasgupta K.M. Singh C.G. JoshiA polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) test was performed to investigate the allele frequencies of the insulin-like growth factor (IGF1 and IGF2 genes) in 90 broilerchickens. A 793 bp fragment of IGF1 gene and 1146 bp fragment of أکثرA polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) test was performed to investigate the allele frequencies of the insulin-like growth factor (IGF1 and IGF2 genes) in 90 broilerchickens. A 793 bp fragment of IGF1 gene and 1146 bp fragment of IGF2 gene were amplified and digested with HinfI and Hsp92II restriction enzymes,respectively. Two types of alleles of A and B and three types of genotypes of AA, AB and BB were observed in both genes. The results indicated predominant B-allele (0.85) was higher for IGF1 butA-allele (0.5611) IGF2 in the broiler population. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
216 - Detection of the eaeA Gene in <i>Escherichia coli</i> Isolated from Broiler Chickens by Polymerase Chain Reaction
ا. ذاکریThe aim of this study was to isolate Escherichia coli from chickens and to determine the presence of the eaeA gene, a virulence factor detected in Escherichia coli, in the isolates by polymerase chain reaction (PCR). Different chicken organs (lung, liver and spleen) wer أکثرThe aim of this study was to isolate Escherichia coli from chickens and to determine the presence of the eaeA gene, a virulence factor detected in Escherichia coli, in the isolates by polymerase chain reaction (PCR). Different chicken organs (lung, liver and spleen) were inoculated onto blood agar and biochemical tests were performed on the suspicious isolates. Escherichiacoliwas isolated from 67.5% (81/120) of the samples. DNA was extracted from these isolates and was amplified by PCR, using a pair of primers derived from the eaeA (virulence) gene. In the agarose gel examination of PCR products, 48.1% (39/81) of the isolates were determined to have this virulence factor. Correct amplification with a molecular length of 384 bp was obtained in the analysis of all the isolates by species-specific PCR, which confirmed the results of the detection of the eaeA gene in Escherichia coli. The eaeA gene, which is mainly responsible for the virulence of Escherichia coli, is commonly present in Escherichia coli strains isolated from this region and the significance of this situation for animal and public health was discussed. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
217 - Investigation of (Stearoyl-CoA Desaturase 1) SCD1 Gene Polymorphism in Khuzestan Buffalo Population Using PCR-RFLPMethod
ک. تقی‌زاده م.ت. بیگی نصیری ج. فیاضی م. بوجارپورStearoyl-CoA desaturase (SCD) is a rate-limiting enzyme in the biosynthesis of monounsaturated fatty acids (MUFA). A number of studies support the hypothesis that SCD gene regulation and polymorphism may affect fatty acid composition and fat quality in meat and milk. Si أکثرStearoyl-CoA desaturase (SCD) is a rate-limiting enzyme in the biosynthesis of monounsaturated fatty acids (MUFA). A number of studies support the hypothesis that SCD gene regulation and polymorphism may affect fatty acid composition and fat quality in meat and milk. Single nucleotide polymorphisms in the coding region of the bovine stearoyl-CoA desaturase gene have been predicted to result in p. 293A (alanine at amino acid 293) and p. 293V (valine at amino acid 293) alleles at the stearoyl-CoA desaturase1 locus. The objective of this study was to characterize polymorphisms of stearoyl-CoA desaturase 1 (SCD1) gene in Khuzestan buffalo population. This is the first study of SCD1 gene polymorphism in Iranian buffalo. The blood samples were taken from 85 buffalo of Khuzestan-Iran population. Genomic DNA was extracted using a kit DIAtom DNA prep. After this, PCR reactions were made by using primers that encloses exon V. A 400 bp fragment amplified with standard PCR method. The PCR products were digested by NCO1 restriction enzyme with PCR-RFLP method. All samples were genotyped on 3% agarose gels stained with ethidium bromide. Electrophoretic mobility shift determined that there were not genetic differences between these animals in the studied region by using NCOI enzyme. Also, this study showed that genotype frequencies were not in Hardy-Weinberg equilibrium for SCD1 gene. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
218 - The Influence of Growth Hormone Gene Polymorphism on Growth Rate of Young Cattle
ت.ا. سدیخ ای.ی. دولماتووا ف.ر. والیتوو ر.س. گیزاتولین ل.ا. کالاشینکوواBeef production is an important development area in animal breeding with meat quality being determined by both paratypic and genetic factors. In this regard evaluating genetic material for the presence of desirable allele combinations of genes associated with growth and أکثرBeef production is an important development area in animal breeding with meat quality being determined by both paratypic and genetic factors. In this regard evaluating genetic material for the presence of desirable allele combinations of genes associated with growth and development indicators, as well as meat qualities of animals have a certain scientific and practical significance. The aim of the study was to determine the influence of growth hormone gene polymorphism on the growth rate of bull calves of different breeds kept in the Bashkortostan Republic. The method of polymerase chain reaction (PCR) followed by the analysis of restriction fragment length polymorphism (PFLP) (SNP GH-L127V) was used to genotype Hereford (115 heads), Limousine (114 heads), Black-and-White (200 heads), Bestuzhev (200 heads) bull calves being fattened. The conducted research showed that there is a similar distribution of genotypes among bull calves of meat breeds with GHLL homozygous genotype being more common (47.83% and 52.63%). Black-and-White and Bestuzhev bull calves have a higher frequency of GHLV heterozygous genotype (62.50% and 59.0%). Hereford, Limousine and black-and-white bulls have a greater frequency of GHL allele (0.69; 0.71; 0.51), Bestuzhev animals have a higher rate of GHV allele (0.62). The paper presents the influence of somatotropin hormone gene polymorphism on some meat productivity and growth rate indicators of young animals. Thus, GHLL-genotyped Hereford, Limousine, and Black-and-White bull calves had significantly higher live weight (pre-slaughter live weight) as well as absolute and average daily live weight gains at the end of rearing. According to the results GHLV-genotyped animals were in the second place and GHVV-genotyped bulls ranked the last. As a result of the one-way analysis of variance, there has been found a high proportion of the studied polymorphism factor in developing meat productivity and growth rate indicators for Limousine, Black-and-White and Hereford bull calves. Genotyping by the GH gene as an additional criterion can be used in the selection of animals to improve cattle meat quality. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
219 - Calpastatin Gene Polymorphism in Raini and Tali Goat in the Kerman Province
و. بهرام‌پور ا. محمدیRestriction fragment length polymorphisms (RFLP) have been identified at the goat. The objective of the present study was to determine polymorphisms of calpastatin locus in Raini and Tali goats of the goats in Kerman Province, improving meat quality traits superior meat أکثرRestriction fragment length polymorphisms (RFLP) have been identified at the goat. The objective of the present study was to determine polymorphisms of calpastatin locus in Raini and Tali goats of the goats in Kerman Province, improving meat quality traits superior meat quality by selection. Calpastatin gene effect on quality and tenderness meat, to identify different genotype of this gene was randomly selected 150 Tali and 150 Raini goats, and blood samples were collected from total of animals using ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) tubes. DNA was extracted from blood according to DNA preparation kit to determine the genetic relationship among studied goat animals. Amplification was performed using polymerase chain reaction (PCR). Two alleles (A and B) and three genotypes, (AA, BB and AB) were observed. The frequencies of the observed genotypes for Tali and raini were 38.4, 9.6, 52 and 17, 71, 12 for AA, BB and AB, respectively. And allele frequencies were 0.47, 0.53 and 0.12, 0.88 for A and B, in Tali and Raini goats respectively. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
220 - Allelic Variation of MYF5 Gene Detected in the <i>Camelus bactrianus</i>
ن. هدایت-ایوریق س.ر. میرایی-آشتیانی م. مرادی شهر بابک و. واحدی ح. عبدیThe myogenic factors (MYF) 5 gene has been reported to contribute to muscle growth and development, therefore they are considered as candidate genes for growth and meat quality related traits. The MYF5 gene is expressed during proliferation of myoblasts and comprises 3 أکثرThe myogenic factors (MYF) 5 gene has been reported to contribute to muscle growth and development, therefore they are considered as candidate genes for growth and meat quality related traits. The MYF5 gene is expressed during proliferation of myoblasts and comprises 3 exons. To ascertain whether there is any variation in the camel MYF5 gene, we have used a polymerase chain reaction-single strand conformational polymorphism (PCR-SSCP) method for the analysis. In this study, coding region (exon 1) of the MYF5gene was investigated. Four unique SSCP patterns were detected in exon 1. Two Single nucleotide polymorphisms (SNPs) were detected - A/G and G/A in 98 and 366 position, respectively that create four haplotype, related to banding patterns. The variations detected in this study leads to a serin/asparagine and tryptophan/stop codon amino acid changes, respectively and could be considered for the development of gene-assisted selection in camel breeding. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
221 - <i>CSN1S1</i> Gene: Allele Frequency, and the Relationship with Milk Production Traits in Three Indigenous Cattle Breeds and Holstein
S. Zakizadeh E.M. Prinzenberg M. Reissmann S.R. Miraei Ashtiani P. Reinecke G. ErhardtCSN1S1is one of the major genes encoding milk proteins of mammals. In this study we determined allele frequencies of CSN1S1-5` flanking region as well as exon 17 variants and their effects on milk traits in three indigenous cattle breeds Mazandarani, Golpaygani (Bos ind أکثرCSN1S1is one of the major genes encoding milk proteins of mammals. In this study we determined allele frequencies of CSN1S1-5` flanking region as well as exon 17 variants and their effects on milk traits in three indigenous cattle breeds Mazandarani, Golpaygani (Bos indicus) and Sarabi (Bos taurus) and Holstein cattle in Iran. CSN1S1*B variant was nearly fixed in Holstein but ranged from 0.40 to 0.66 in indigenous breeds. CSN1S1*C allele had higher frequency inindigenous breeds, especially inBos indicus. Four genetic variants of the promoter were found in all breeds in different frequencies with allele 2 being the prevalent in all breeds (frequency 0.359 to 0.711) and allele 4 the least frequent (0.074 to 0.011). Allele B of the coding region was found in combination with all four promoter alleles. Allele 4 of the promoter was not found in any cow having the exon 17 allele C in all breeds except Mazandarani. BC / 23 genotype yielded the highest fat percentage (P<0.05) in Holstein but it had no significant effect in Golpaygani. There was not any homozygous CSN1S1*CC cow, to investigate the influence of C variant for fat content. None of the genetic combinations had significant effect on fat yield, although variant '2' of promoter indicated a negative effect. No significant effect among various combined genotypes on milk yield was found, but CSN1S1*B tended to higher milk production. Differences of allelic frequencies and milk production traits found among these breeds might be due to differences in origin of breeds or selection breeding programs. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
222 - Study of <i>DGAT1</i> Gene Polymorphisms with Carcass Traits in Iranian Zel and Lori-Bakhtiari Sheep Breeds
م. صادقی م. مخبر م. مرادی-شهر بابک و. سلطانی م. بهروزلکDiacylglycerol acyltransferase1 (DGAT1) plays an important role in the metabolism of triglycerides which catalyze the final step of triglyceride synthesis in animals. The objective of this study was to investigate the single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in 5'UTR, exon أکثرDiacylglycerol acyltransferase1 (DGAT1) plays an important role in the metabolism of triglycerides which catalyze the final step of triglyceride synthesis in animals. The objective of this study was to investigate the single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in 5'UTR, exon-1, and exon-2 of DGAT1 in two Iranian indigenous sheep breeds. A total of 309 animals including fat-tailed Lori-Bakhtiari (n=152) and thin-tailed Zel (n=157) were used in this study. The genotypic patterns were detected by polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP). Five SSCP patterns were detected for 5'UTR and exon-1 fragment by PCR-SSCP and subsequently confirmed by sequencing PCR products. The sequencing results revealed that there are three novel polymorphisms in 5'UTR and exon-1fragment of DGAT1 at the studied breeds. Out of the detected polymorphisms only A277G substitution in exon-1 of DGAT1 leads to the changes in amino acids (p.Arg26Gly). There was significant correlation (p < 0.05) between fat-tail weight (FTW) and back-fat thickness (BFT) and the observed genotypes in Lori-Bakhtiari breed; therefore, animals with G5 pattern had higher FTW and BFT compared to G1 pattern. The G1 and G5 genotypic patterns or haplotypes were different at their position 101 of 5'UTR region. No significant relationship (p < 0.05) was found between the detected genotypes of 5'UTR and exon-1 fragment of DGAT1 in Zel breed and carcass traits. These results revealed that detected DGAT1 novel SNPs had significant effects on carcass traits and they can be used as a marker for these traits. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
223 - DRB1 Gene Patterns of Two Iranian Sheep Breeds
M. Sohrabi V. Molaee R. Osfoori M. Nikmard M.P. Eskandari NasabGenetic improvement programs may improve disease resistance in animal production. The best-characterized genetic control of disease resistance and immune response in animals is the one associated with the Major Histocompatibility Complex (MHC). The ovine lymphocyte anti أکثرGenetic improvement programs may improve disease resistance in animal production. The best-characterized genetic control of disease resistance and immune response in animals is the one associated with the Major Histocompatibility Complex (MHC). The ovine lymphocyte antigenof DRB1 gene encodes cell surface glycoproteins that initiate immune responses by presenting processed antigenic peptides to CD4 + T helper cells. DRB1 is the most polymorphic gene in sheep and it has been extensively evaluated as a candidate marker for associations with various ovine diseases and immunological traits. Aim of this study was to analyze exon 2 Ovar-DRB1 gene polymorphism in two Iranian native sheep breeds (Afshari and Zel). PCR products were characterized by the restriction fragment length polymorphism (RFLP) technique using two restriction enzymes, RsaI and HaeIII. In the studied groups of Afshari Sheep and Zel Sheep of Iran we were able to identify 9 restriction patterns (a, b, c, d, e, f, g, h and i) for the fragments of exon 2 Ovar-DRB1 gene with RsaI enzymatic digestion and 5 patterns (a, b, c, d and e) with HaeIII enzyme, including one previously unrecognized allele (c).Our results indicate that exon 2 of the Ovar-DRB1 gene is highly polymorphic in both breeds. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
224 - Association of PIT1 Gene with Milk Fat Percentage in Holstein Cattle
ز. ابراهیمی حسین‌زاده م.ر. محمدآبادی ع. اسمعیلی‌زاده الف خضری ع. نجمی نوریThe pituitary-specific transcription factor (PIT1) gene is responsible for pituitary development and hormone secreting gene expression in mammals. PIT-1 is studied as a candidate genetic marker for growth, carcass and also for milk yield traits. In dairy farm animals, t أکثرThe pituitary-specific transcription factor (PIT1) gene is responsible for pituitary development and hormone secreting gene expression in mammals. PIT-1 is studied as a candidate genetic marker for growth, carcass and also for milk yield traits. In dairy farm animals, the principal goal of the selection is the improvement of milk yield and composition. The genes of milk proteins and hormones are excellent candidate genes for linkage analysis with quantitative trait loci (QTL) because of their biological significance on the quantitative traits of interest. Thus, in this study association between polymorphism of the pituitary transcription factor 1 (PIT1) gene and milk fat percentage of Holstein cattle in Khorasan Razavi province of Iran were analyzed. A total of 100 dairy cows from a herd containing 1000 animals were included in the study. Genomic DNA was extracted from the whole blood. One pair primers were used for amplification of PIT1 gene and PCR products were electrophoresed on 1% agarose gel. Then, PCR products were digested with HinfI restriction enzyme. Results were analyzed using PopGene software and allele frequencies A and B were 0.25 and 0.75, respectively. Frequencies of AA, AB and BB genotypes, number of observed alleles, number of effective alleles, expected heterozygosity, observed heterozygosity, mean of heterozygosity, expected hemozygosity, observed hemozygosity, Nei’s index and Shanon’s index were 6, 40 and 54%, 2, 1.6, 0.37, 0.40, 0.37, 0.62, 0.59, 0.37 and 0.56, respectively. Results of k-square shown that population is in Hardy-Weinberg equilibrium. SAS software with GLM procedure was used for calculation of association between milk fat percentage and observed genotypes and results indicated that the effect of genotype on fat percentage was significant (P<0.01) and AB genotype had the highest effect on milk fat percentage. These results imply that the PIT1 genotypes affected milk fat percentage, suggesting that this polymorphism can be used as a molecular marker for this trait. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
225 - Allelic Polymorphism of Calpastatin Gene (CAST) in Khalkhali Goats: A Possible Marker for Meat Tenderness
ا. زارعیان جهرمی M. رنجبری س. خالقی‏زاده س. احراری ا. احراری م. قوی‏پیشهCalpastatin (CAST) is a specific inhibiter of Calpains, playing a role in meat tenderization and myogenesis. In the present study the polymorphism of the CAST gene ofKhalkhali goat in Azerbaijan province in Iran was investigated by polymerase chain reaction and restrict أکثرCalpastatin (CAST) is a specific inhibiter of Calpains, playing a role in meat tenderization and myogenesis. In the present study the polymorphism of the CAST gene ofKhalkhali goat in Azerbaijan province in Iran was investigated by polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism technique (PCR-RFLP). Genomic DNA was extracted from whole blood samples collected from 200 Khalkhali goats. A 1552 bp in the region between exons 6 and 7 of the CAST gene was amplified by standard PCR, using the locus specific primers. Two alleles (A and B) and three genotypes (AA, BB and AB) were observed. The frequencies of the observed genotypes were49.7, 0.09 and 41.4 for AA, BB and AB, respectively. Allele frequencies were 0.705, 0.295 for A and B, respectively. The average heterozygosity for CAST gene was 0.416 and the expected heterozygosity was 0.417. For homozygosity these numbers were 0.91 and 0583, respectively and the chi-square test showed significant (P<0.01) deviation from Hardy-Weinberg equilibrium for this locus in this population. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
226 - Myostatin Gene Polymorphism and Its Association with Production Traits in Western Azerbaijan Native Chickens
S. Zandi P. Zamani K. MardaniIn the present study, the polymorphism of myostatin gene (MSTN) in native chickens of Western Azerbaijan Rearing and Breeding Institute was investigated. The blood samples were collected from eighty two randomly selected hens. Genomic DNA was extracted from blood sample أکثرIn the present study, the polymorphism of myostatin gene (MSTN) in native chickens of Western Azerbaijan Rearing and Breeding Institute was investigated. The blood samples were collected from eighty two randomly selected hens. Genomic DNA was extracted from blood samples and a fragment of myostatin including 599 bp in promoter and exon 1 was amplified using PCR method. Breeding values for body weight and carcass traits were predicted by univariate animal mixed model analysis, using WOMBAT software. The effects of different SSCP genotypes on breeding and phenotypic values of the studied traits were evaluated by general linear model analysis. Three different single strand conformational polymorphism(SSCP) genotypes as AA, AB and AC were identified, with frequencies of 0.244, 0.549 and 0.207, respectively. Shannon and Nei gene diversity indices and number of effective alleles in the studied population were 0.88, 0.53 and 2.2, respectively, which indicated a high diversity of the studied population. Moreover, the studied population was not in Hardy-Weinberg equilibrium. The effect of the SSCP genotypes on breeding and phenotypic values was significant only in the case of breeding value for body weight at 12 weeks of age, whereas, the AC genotype individuals, significantly (P<0.05) had the lowest breeding value for body weight at 12 weeks of age. Based on the results obtained, it could be concluded that the studied fragment of myostatin gene is polymorphic in native chickens of Azerbaijan and could be used for marker assisted selection. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
227 - Polymorphisms in GDF9 Gene and Its Relationship with Litter Size in Five Breeds of Black Goats
G.Q. Zhu Q.I. Wang Y.G. Kang Y.Z. Lv B.Y. CaoIn this study, we investigated the relationship between the genetic polymorphism of growth differentiation factor 9 (GDF9) genes and the litter size in 384 individuals of five breeds of black goats. Four pairs of primers were designed to detect single nucleotide polymor أکثرIn this study, we investigated the relationship between the genetic polymorphism of growth differentiation factor 9 (GDF9) genes and the litter size in 384 individuals of five breeds of black goats. Four pairs of primers were designed to detect single nucleotide polymorphism of GDF9 gene in goats by PCR-SSCP. The least square was used to analyze the relation between different genotypes and the litter size. The results showed that the PCR products from primer pair 1 (P1) displayed polymorphisms in three genotypes (AA, AB and BB) in big foot (BF) and Jintang (JT) black goats. For primer pairs of P2, P3 and P4, there was no polymorphism. The sequencing results revealed that there was a single nucleotide mutation (A792→G) in exon 2 of GDF9 gene in BF and JT black goats, and this mutation resulted in an amino acid change: valine→isoleucine. In BF and JT black goats, the average litter size in the third parity was significantly higher in genotype AA than both genotypes of AB and BB while the average little size of genotype AB was higher than that of genotype BB in the same parity. GDF9 gene could be therefore considered as a candidate gene for marker-assisted selection of litter size trait in goats. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
228 - Polymorphism of the Growth Hormone Gene and Its Effect on Production and Reproduction Traits in Goat
ف. غلامحسین زاده گوکی م.ر. محمدآبادی م. اسدی فوزیGrowth hormone (GH) has an effect on a broad variety of physiological parameters such as lactation, reproduction, growth and metabolism. Thus, the aim of this study was to detect GH gene polymorphism and its association with breeding values of production and reproductio أکثرGrowth hormone (GH) has an effect on a broad variety of physiological parameters such as lactation, reproduction, growth and metabolism. Thus, the aim of this study was to detect GH gene polymorphism and its association with breeding values of production and reproduction traits in Raini Cashmere goat. Breeding values were estimated using records on 26731 Raini Cashmere goats. To study GH gene polymorphism, 300 animals were selected based on their estimated breeding values (EBVs) for these traits. Then the animal’s genotype was determined using PCR-RFLP. The genotype frequencies for AA, AB and BB were 0.15, 0.85 and 0, respectively. The number of observed alleles, number of effective alleles, expected heterozygosity, observed heterozygosity, mean of heterozygosity, expected homozygosity, observed homozygosity, Nei’s index, Shanon’s index and Fixation index (Fis) were 2, 1.96, 0.49, 0.85, 0.49, 0.51, 0.15, 0.49, 0.69 and -0.74, respectively. Results showed that mean estimated breeding values for birth type, fleece weight and birth weight traits in different genotypes varies, of course these differences were not statistically significant (P>0.05). However, for fleece weight and birth type traits AB genotype had higher EBV. Due to the relatively high diversity of growth hormone gene in Raini Cashmere goat and its association with important economic traits, using growth hormone gene in breeding programs of this breed can lead to acceptable genetic progress and applying AA genotype for birth weight trait and AB genotype for fleece weight and birth type traits can be used as an indirect marker for selection of superior animals. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
229 - Polymorphism of some Genes Associated with Meat-Related Traits in Egyptian Sheep Breeds
کا.ف. ماهروس م.اس. حسنان م. ابدل مردی اچ.آی. شافی اچ.ای. روشدیThe genetic polymorphism of some genes related to meat production in three Egyptian sheep breeds (Barki, Rahmani and Osseimi) was studied. The candidate genes were: Calpastatin, Myostatin, Diacylglycerol-acyltransferase1, Insulin-like growth factor binding protein-3 and أکثرThe genetic polymorphism of some genes related to meat production in three Egyptian sheep breeds (Barki, Rahmani and Osseimi) was studied. The candidate genes were: Calpastatin, Myostatin, Diacylglycerol-acyltransferase1, Insulin-like growth factor binding protein-3 and Booroola fecundity gene. The technique applied was the restriction fragment length polymorphism for the polymerase chain reaction products. Polymorphism was found in the genes: Calpastatin, MyostatinandDiacylglycerol-acyltransferase 1, while no polymorphism was exhibited by the other two genes, Insulin-like growth factor binding protein-3 and the Booroola fecundity in the three breeds understudy. Calpastatin locus digested with MspI had two genotypes MM and MN. The highest allelic frequency was for allele M. The same locus Calpastatin digested with NcoI also exhibited two genotypes MM and MN. The NN genotype was absent with both the MspI and the NcoI enzymes in all breeds. Myostatin digested with DraI had two genotypes AB and BB. The AA genotype cannot be detected. The highest allelic frequency was for allele B. Diacylglycerol-acyltransferase1 digested with AluI showed two genotypes CC and CT. The highest allelic frequency was for allele C. The detected CT genotype might explain the moderate intramuscular fat content and muscle marbling in the Egyption sheep breeds. Each of the remaining two loci (Insulin-like growth factor binding protein-3 and the Booroola fecundity) had only one genotype, BB genotype for Insulin-like growth factor binding protein-3 digested with HaeIII and ++ genotype for the Booroola fecundity digested with AvaII enzyme, therefore they are not recommended in the selection program. The result of Chi-square analysis indicated that the three Egyptian sheep breeds were in Hardy-Weinberg equilibrium. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
230 - <i>Dlk1</i> Gene Expression in Different Tissues of Lamb
S.H. Masoudzadeh M.R. Mohammadabadi A. Khezri O.A. Kochuk-Yashchenko D.M. Kucher O.I. Babenko M.V. Bushtruk S.V. Tkachenko R.V. Stavetska N.I. Klopenko V.P. Oleshko M.V. Tkachenko I.V. TitarenkoDelta-like 1 homolog or pre-adipocyte factor 1 (Dlk1) is one of the most significant genes and widely expresses all over mammal’s development. Some of the functions identified for Dlk1gene are development of muscle, healing of wound, adipocytes proliferation, live أکثرDelta-like 1 homolog or pre-adipocyte factor 1 (Dlk1) is one of the most significant genes and widely expresses all over mammal’s development. Some of the functions identified for Dlk1gene are development of muscle, healing of wound, adipocytes proliferation, liver, lung and pancreas development. It also prevents Notch gene conducting toward to govern several operations such like cellular proliferation and differentiation. The aim of this study was to assay the expression of Dlk1 gene in liver, humeral and femur muscles, brain, adipose, testis and rumen tissues of Kermani lambs. Tissue samples from thirty male lambs of Kermani sheep with approximately the similar weight and age from the Animal Science Research and Training Station of Shahid Bahonar University of Kerman were picked up. Total RNA was isolated, cDNA was synthesized and Real-Time PCR was performed. SAS and REST softwares were used for analyzing the results. The Dlk1 gene was expressed in all studied tissues of Kermani sheep. The highest expression of Dlk1 gene expression was observed in liver tissue. There was no statistically significant difference between rumen and femur (leg) muscle, between humeral muscle and liver and between adipose and brain tissue (P>0.05). The lowest expression was related to testicular tissue. Based on results of current study, it can be concluded that this gene has pleiotropic effects with different major and minor outcomes in different tissues. But, for reaching to more decisive conclusion for any tissue, it is necessary to carry out further research noticing various physiological, epigenetic and genetic conditions. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
231 - Effect of Single Nucleotide Polymorphisms in <i>IGF-1R</i> Gene on Growth Rate Traits in Makooei Sheep
م. پسندیده ق. رحیمی و. همتیInsulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) is a main receptor of IGFs family which plays a critical role in the postnatal growth and skeletal growth in many species. However, there are few reports of IGF-1R gene structure and its effects on growth traits in sheep. T أکثرInsulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) is a main receptor of IGFs family which plays a critical role in the postnatal growth and skeletal growth in many species. However, there are few reports of IGF-1R gene structure and its effects on growth traits in sheep. The objectives of this study were detection of IGF-1R polymorphisms and assessment of their associations with growth traits in Iranian Makooei Sheep. Hence, 200 Makooei lambs were genotyped through polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP). The studied traits were birth weight (BW), weaning weight (WW), 6 months weight (6MW), average daily gains from birth to 3 months (ADG0-3), from 3 months to 6 months (ADG3-6), from birth to 6 months (ADG0-6) and corresponding Kleiber ratios (KR0-3, KR3-6, KR0-6).For this genetic position, three types of banding patterns (AA, AB and BB) were identified with the frequencies of 0.69, 0.16 and 0.15, respectively. In this study, IGF-1R genotypes indicated the significant associations with 6MW, ADG0-6, KR0-3 (P<0.05) and ADG0-3 (P<0.01). In all of the significant traits, The AAgenotype was linked to the highest values, while the BBgenotype was linked to the lowest values. The results of this study indicated that single nucleotide polymorphism (SNP) variation in IGF-1R gene can be used as a molecular marker for improving of growth traits in marker assisted selection programs in sheep. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
232 - The Effect of Uncoupling Protein Polymorphisms on Growth, Breeding Value of Growth and Reproductive Traits in the Fars Indigenous Chicken
آ. محمدی‌فر م.ر. محمدآبادیThe avianuncoupling protein (avUCP) is a member of the mitochondrial transporter superfamily that uncouples proton entry in the mitochondrial matrix from ATP synthesis. The polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method was used to أکثرThe avianuncoupling protein (avUCP) is a member of the mitochondrial transporter superfamily that uncouples proton entry in the mitochondrial matrix from ATP synthesis. The polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method was used to estimate the allele and genotype frequencies of the UCP/HhaI polymorphisms and to determine associations between these polymorphisms and the growth traits, breeding value of growth and reproductive traits in the Fars indigenous chicken. For this purpose phenotype information of 18 successive generations from 200 birds were analyzed using a univariate animal model in ASREML procedure. The evaluation of the association between this single nucleotide polymorphisms (SNP) with reproductive traits suggests a positive effect of TC genotype with age at first egg (ASM) compared with CC genotype. In addition, TC genotype was significantly associated with the breeding value of age at first egg compared with the CC genotype (P<0.05). In conclusion, our results suggest that the TC genotype of the UCP gene is associated with age at sexual maturity (ASM) and breeding value of age at sexual maturity and UCP polymorphisms may be used as DNA markers for selection in the breeding process of the Fars indigenous chicken. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
233 - The Effect of SNP c.100800G > A on <i>CAST</i>|<i>Cfr</i>13I Gene Polymorphisms with Ultrasound Imaging of Meat Characteristics and Growth Traits in Bali Cattle
N.M.P. Setyani R. Priyanto J. JakariaBali cattle are known as native cattle from Indonesia, which commonly utilized as beef-producing animals. Calpastatin gene (CAST) plays essential role in meat quality. The aim of this study was to verify the effect of single-nucleotide polymorphism (SNP) c.100800G>A أکثرBali cattle are known as native cattle from Indonesia, which commonly utilized as beef-producing animals. Calpastatin gene (CAST) plays essential role in meat quality. The aim of this study was to verify the effect of single-nucleotide polymorphism (SNP) c.100800G>A on the CAST|Cfr13I gene associated with meat characteristics and growth traits in Bali cattle. The meat characteristics, growth traits profile, and blood samples of Bali cattle (n=52 animals) obtained from BPTU Bali Cattle Denpasar, Bali Province. Comparison used were Belgian Blue (n=30 animals), Wagyu (n=7 animals), Limousin (n=14 animals), and Peranakan Onggole (PO) (n=30 animals). Ultrasound measurement was conducted to study the meat characteristics. The examination of the CAST gene polymorphisms used polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method digested by Cfr13I enzyme and the analysis of effect of the CAST|Cfr131 gene on meat characteristics and growth traits in Bali cattle used t test with SAS 9.4 program. Bali cattle revealed polymorphic homozygous genotype (GG) and heterozygous genotype (GA) with allele frequencies of G and A were 0.923 and 0.077, respectively. In comparison, other breeds beef cattle, including Belgian Blue, Limousin, Wagyu, and PO, showed only the GG genotype with allele frequency of G was 1.000. The CAST|Cfr13I gene showed no significant association (P>0.05) with Bali cattle meat characteristics and growth traits. In conclusion, the SNP c.100800G > A may not be purposed as a marker for Bali cattle meat characteristics and growth traits. It was suggested that further study with a higher number of animals would be necessary to validate the effect of the SNP c.100800G > A on the CAST gene with the actual beef cutting of Bali cattle. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
234 - Association of Kappa-Casein Gene Polymorphism with some Biochemical Blood Indicators in Guilan Native Cattle of Iran (<i>Bos indicus</i>)
A. Sobar Poorrajabi Ghaziyani S.Z. Mirhoseini N. Ghavi Hossein-Zadeh Z. Ansari Pirsaraei H. DehghanzadehEvaluation of the blood and milk biochemical parameters always is considered as effective key factor for animal health and dairy products. In order to assess the association of kappa-casein (K-CN) genetic variants with blood biochemical indicators, blood samples were ra أکثرEvaluation of the blood and milk biochemical parameters always is considered as effective key factor for animal health and dairy products. In order to assess the association of kappa-casein (K-CN) genetic variants with blood biochemical indicators, blood samples were randomly and individually collected from 126 Iranian Guilan native cattle. Blood plasma was used to measure blood glucose, urea, cholesterol, triglycerides and thyroxine concentrations. The genomic DNA was extracted from the whole blood by the modified Salting Out method. The 350 bp fragment of kappa-casein gene was amplified using polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) and a pair of specific primers was digested by HinfI restriction enzyme. In general, two alleles of A and B with the frequencies of 0.726 and 0.274 and two genotypes of AA and AB with frequencies of 0.452 and 0.548 were detected, respectively. The chi-square test result showed that the studied population was not in Hardy-Weinberg equilibrium. Results of statistical analysis revealed that there was significant difference between glucose, cholesterol and thyroxin levels in both sexes which are associated with the greater levels of testosterone and thyroid hormones in bulls than cows. However, there was no significant difference between males and females for urea and triglyceride levels (P>0.05). There was no significant difference between AA and AB genotypes of kappa-casein (K-CN) gene in Guilan native cattle for the blood parameters measured (P>0.05). According to the current results, kappa casein gene singly cannot be an appropriate marker to study the blood parameters in native cattle of Guilan. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
235 - Serological and Molecular Detection of Akabane Virus in Iran
غ.ع. کجوری ز. داوودی ح. ممتازThe present study was conducted on sixty healthy female domestic ruminants that suffered from still births or abortion, to find sero-positive cases and also to determine the probable role of uterine tissue in diagnosis of akabane viral infection and viral persistency. B أکثرThe present study was conducted on sixty healthy female domestic ruminants that suffered from still births or abortion, to find sero-positive cases and also to determine the probable role of uterine tissue in diagnosis of akabane viral infection and viral persistency. Because of this, a serological test (ELISA) and molecular (RT-PCR) diagnostic methods were used to find the seropositive cases and also the presence of the akabane viral genome in uterine samples. Among 2400 head, sixty female animals (20 cattle, 20 sheep and 20 goats) with a history of still births or abortion (suspected group) and sixty healthy ones (control group) were selected and referred to the slaughter house for further evaluations. Blood and uterine body samples were taken and stored at -20 and -70 ˚C, respectively. At the beginning of the experiment all serum samples were tested for brucellosis and 3 sheep of the suspected group and 1 sheep of the control group were positive. The remaining samples were selected for further study. Results of ELISA showed that among 17 suspected sheep only one of them was positive for akabane virus and among 20 suspected goats only three of them were inconclusive. It’s notable that no positive or inconclusive cases were found in suspected cattle and also the control group. The prevalence rate of akabane virus antibody among 57 suspected animals was 1.75 percent. RT-PCR assay was conducted on uterine tissues from the suspected animals and results showed that all samples were free of the akabane genome. According to the obtained results the presence of antibody against akabane virus in suspected sheep and goats was proven or substantiated for the first time in Iran. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
236 - Typing of Toxigenic Isolates of <i>Clostridium perfringens</i> by Multiplex PCR in Ostrich
E. Zandi M.R. Mohammadabadi M. Ezzatkhah A.K. EsmailizadehClostridium perfringens is an important pathogen that provokes numerous different diseases. This bacterium is classified into five various types, each of which capable of causing a distinct disease. There are various methods for the bacterial identification, many are la أکثرClostridium perfringens is an important pathogen that provokes numerous different diseases. This bacterium is classified into five various types, each of which capable of causing a distinct disease. There are various methods for the bacterial identification, many are labor-intensive, time-consuming, expensive and also show low sensitivity and specificity. The aim of this research was to identify the unlike types of Clostridium perfringens using PCR method. In this study, 120 ostrich-dung samples were randomly collected from areas around the city of Kerman, southeastern Iran. After processing and culturing of samples, the produced colonies were morphologically studied, gram stain test was also carried out and the genera of these bacteria were identified through biochemical tests. DNA extracted from isolated bacteria for genotyping was tested by multiplex PCR with specific primers. Based on length of synthesized fragments by PCR, toxin types and bacterial strains were detected. Clostridium perfringens isolated types were divided as follows: 100% type A, 0% type B, 0% type C and 0% type D. It should be emphasized that, up to now, Clostridium perfringens type A has not been reported in Iran. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
237 - Lack of Association between Somatotropin Receptor Gene Polymorphism and Birth Weight of Iranian Indigenous Sistani Cattle
آ. جوانمرد س. ر. میرایی آشتیانی آ. ترکمن زهی م. مرادی شهر بابکThe objective of the present study was to determine polymorphism within the promoter region of somatotropin receptor genes in indigenous Sistani cattle (Bos indicus) and associations between this polymorphism and breeding value of birth weight. The pedigree structure wa أکثرThe objective of the present study was to determine polymorphism within the promoter region of somatotropin receptor genes in indigenous Sistani cattle (Bos indicus) and associations between this polymorphism and breeding value of birth weight. The pedigree structure was included by considering 1173 animals with 600 progeny birth weight data obtained from a Zhark breeding station in Sistan and Baluchistan. Heritability was estimated for birth weight using different univariate models with the derivative-free approach of restricted maximum likelihood algorithm (DFREML). The average weight of each birth was 23.9 ± 3.16 kg. The effects of non-genetic factors were significant (P<0.01) for birth weight. Direct heritabilities (h2) in single trait analyses were 0.31 ± 0.06. Genomic DNA was isolated from blood and semen using conventional methods. Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) assays were used to genotype this candidate gene in 72 individuals with the birth weight record. The observed allele size was similar to that reported in the literature. The Sistani cattle showed higher frequency of alleles ALuI (+) than ALuI (-) in population. Statistical analysis was conducted to test the association of this polymorphism with the breeding value of birth weight data. There was not significant association between producing genotypes and birth weight trait. Future research on another candidate gene and growth trait strongly is encouraged to deep in the understanding of growth pattern in this breed. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
238 - Dual Promoter Vector Construction for Simultaneous Gene Expression Using Spliced Overlap Extension by Polymerase Chain Reaction (SOE-PCR) Technique
م.ه. سخاوتی م. طهمورثپور ط. عباسی-دلوئی س. یوسفی ع.ا. خبیری ر. اکبری E. شکاریThere are two different co-expression systems including bicistronic; dual-vector or two-promoter to express two different genes simultaneously and also to study protein-protein interactions. Bicistronic system has disadvantages e.g. compared with two-promoter system. In أکثرThere are two different co-expression systems including bicistronic; dual-vector or two-promoter to express two different genes simultaneously and also to study protein-protein interactions. Bicistronic system has disadvantages e.g. compared with two-promoter system. In this paper, a simple method based on spliced overlap extension by polymerase chain reaction (SOE-PCR) technique was demonstrated for construction of two-promoter vector to express two genes equally. To construct two-promoter vector, two pairs of mega-primer containing enzymatic restriction sites, T7 promoter, Lac operator and ribosome binding site (RBS) sequences were used in SOE-PCR. The constructed vector can be used in order to co-expression of other genes properly in a variety of bacterial expression hosts. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
239 - Association of Bovine Lactoferrin Gene with Mastitis in Frieswal Cattle
پ. شارما اس.ان.اس. پارمار ام.اس. تاکور د.اس. نایوریال ر. رنجانThirtyFrieswal lactating cows were screened for clinical and subclinical mastitis and subsequently classified into healthy, subclinically affected and clinically affected groups each group comprising of 10 cows. Polymorphism of cow lactoferrin (LTF) gene promoter was de أکثرThirtyFrieswal lactating cows were screened for clinical and subclinical mastitis and subsequently classified into healthy, subclinically affected and clinically affected groups each group comprising of 10 cows. Polymorphism of cow lactoferrin (LTF) gene promoter was determined by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). The results showed that LFT gene promoter was polymorphic among different groups which indicated that its polymorphism was correlated to mastitis infection. The allelic frequency of C and G allele was 0.42 and 0.58 and they were associated with clinical and subclinical mastitis. It was found that LTF gene polymorphism and mastitis are highly associated with each other. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
240 - The Expression of Myogenin and Myostatin Genes in Baluchi Sheep
ک. فروتن م. امین افشار ک. زرگری م. چمنی ن. امام جمعه کاشانMyogenin gene (MYoG) affects the synthesis of muscle myofibrillar growth and increase of meat production. The myostatin (MSTN) gene is identified as a specific negative regulator of skeletal muscle growth. Reduction of the expression level of MSTN throughmutation in the أکثرMyogenin gene (MYoG) affects the synthesis of muscle myofibrillar growth and increase of meat production. The myostatin (MSTN) gene is identified as a specific negative regulator of skeletal muscle growth. Reduction of the expression level of MSTN throughmutation in the sequence of this gene leads to an increase of myogenesis and regeneration of muscle cells during the postnatal growing period of sheep. The Baluchi sheep are among the most popular breeds of sheep for breeding in Iran and have an important portion in meat production industry of the country. In present work the relative expression level of the two candidate genes have been studied at two age intervals (9 and 12 months) in male and female Baluchi sheep. In order to analyze the relative expression level of MYoG and MSTN gene in Baluchi sheep’s longissimus muscles, quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) reaction has been applied. Results of RT-PCR for sex effect showed MSTN and MYoG expression were not highly expressed in ram’ longissimus dorsi compared to ewe at the same age stages (P>0.05) and there were no significant differences between male 12 months comparing to female 12 months (P>0.05) and male 9 months with female 9 months (P>0.05). For the effect of age, relative expression of MYoG and MSTN genes on Baluchi sheep longissimus muscles did not show significant differences between males or females (P>0.05). تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
241 - Genetic Polymorphism of GDF9 Gene in Iranian Moghani Sheep Breed
F. Ala Noshahr A. RafatThe families of TGF-β proteins are the most important growth factors in the ovary for growth and differentiation of early ovarian follicles. Three related oocyte-derived members of the transforming growth factor-β superfamily namely growth differentiation fact أکثرThe families of TGF-β proteins are the most important growth factors in the ovary for growth and differentiation of early ovarian follicles. Three related oocyte-derived members of the transforming growth factor-β superfamily namely growth differentiation factor 9 (GDF9), BMP15 and BMPR-IB have been shown to be essential for follicular growth and ovulation. Different mutations in the GDF9 gene cause increased ovulation rate and infertility in a dosage-sensitive manner in sheep. In this study, blood samples were collected from 150 Moghani sheep breed using venojects treated with the anti-clot substance (EDTA) and subsequently their DNA content were salted out and extracted. The quantity and quality of extracted DNA was examined using spectrophotometery and gel electrophoresis, respectively. With using a pair of specific primers, the DNA fragment was amplified from exon 1 of GDF9 (462 bp). Digested PCR products with HhaI enzyme showed a G to A substiuation in GDF9 locus. The wild type allele of this gene (G/+) with two restriction site resulted DNA fragments of 156, 52 and 254 bp while the mutant allele (G/-) with one restriction site resulted two DNA fragments with the size of 52 and 410 bp. Genotype frequencies for G (+/+), G (+/-) and G (-/-) were 0.66, 0.24 and 0.1, respectively. From studied luci, GDF9 was polymorphic in Iranian Moghani sheep breed. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
242 - Polymorphisms in Melanocortin Receptor 1 Gene in Goat Breeds: A Window for Coat Color Controling Mechanism
آ. جوانمرد ب. عارف نژاد ر. عبداللهی آرپناهی م.ح. مرادیThe broad goal of this research was to examine the nature of the Melanocortin receptor 1 (MC1R) locus on the coat color phenotype of seven goat breeds with different color coat. Blood samples were collected from five Iranian indigenous (Khalkhal, Markhor, Naeini, Najdi أکثرThe broad goal of this research was to examine the nature of the Melanocortin receptor 1 (MC1R) locus on the coat color phenotype of seven goat breeds with different color coat. Blood samples were collected from five Iranian indigenous (Khalkhal, Markhor, Naeini, Najdi and Tali) and two exotic (Cashmere and Saanen) goat breeds. Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) technique and DNA sequencing were used to detect polymorphism of theMC1Rgene. Digestion of polymerase chain reaction products with EarI revealed two alleles of A and B and three genotypes of AA, AB and BB. The observed allele size was similar to previous reports. The genotype and gene frequencies for each breed were determined and shown to be variable among the breeds. In the goat breeds with black / brown coat color, AA genotype showed a higher frequency than white color goat breeds. In this aspect, Tali had only AA and AB genotypes and Cashmere had AB and BB genotypes. Comparison of genotype frequencies using χ2 test showed significant (P<0.01) differences between colored and white coat phenotypes. The Lys226Arg (A676G) mutation of the MC1R was verified by sequencing distinguished the B allele from the A allele. The phylogenetic tree also separated these breeds into two clusters, including exotic breeds with white / yellow coat color and indigenous breeds with black/brown phenotype. A replacement mutation was verified in Lys to Arg at position 676 bp. In conclusion, the results of this study confirmed the previous findings onMC1R gene as a useable tool for breed identification and white mohair marketing and production. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
243 - Evaluation of Gibberellin Synthesis Genes (GA3OX) expression and Antioxidant Capacity in Common Bean (Phaseolus vulgaris L. cv. Sadri) Seeds induced by Chitosan under Salinity
Haniyeh Saadat Mohammad Sedghi raouf Seyed Sharifi salim farzanehA factorial experiment was conducted based on a completely randomized design with four replications. Treatments included four salinity levels (0, 50, 100 and 150 mM) and four chitosan levels (0, 0.25, 0.50 and 0.75% by weight-volume all of which were dissolved in 1% ace أکثرA factorial experiment was conducted based on a completely randomized design with four replications. Treatments included four salinity levels (0, 50, 100 and 150 mM) and four chitosan levels (0, 0.25, 0.50 and 0.75% by weight-volume all of which were dissolved in 1% acetic acid). After RNA extraction and cDNA synthesis, the expression of gibberellin synthesis genes (GA3OX1, GA3OX2, GA3OX3, GA3OX4, GA3OX5 and GA3OX6) was assessed using qRT-PCR, and also some biochemical indicators were measured. The results showed that salinity stress increased the activity of peroxidase and malondialdehyde (MDA) content. Seed pretreatment with chitosan at a concentration of 0.75% increased peroxidase activity and decreased MDA content. Phosphate content in seed pretreatment with 0.75% chitosan and 0 mM salinity levels increased by 57% compared to the control. With increasing salinity, the activity of superoxide dismutase, ascorbate peroxidase and glutathione reductase increased, while catalase activity decreased. The activity of superoxide dismutase in pretreatment with 0.25% chitosan, ascorbate peroxidase and glutathione reductase in pretreatment with 0.75% Chitosan increased at 150 mM salinity stress by 14%, 46% and 34%, respectively. Also, the activity of catalase enzyme in pretreatment with 0.75% chitosan and the level of 0 mM salinity stress increased by 39% compared to the control. GA3OX1 gene expression in priming treatment with 0.75% chitosan at 0 mM salinity level was higher than GA3OX2, GA3OX3, GA3OX4, GA3OX5 and GA3OX6. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
244 - Enhancement of valerenic acid production in Valeriana officinalis roots by methyl jasmonate -mediated transcriptional changes of sesquiterpene synthase genes
Hengameh Taheri Mansour GhesmatiValeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is the active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate t أکثرValeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is the active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the effect of methyl jasmonate (MeJA) concentrations (50 and 100 µM) in the modulation of expression patterns of the genes involved in valerenic acid (VA) biosynthesis, transcript abundance of identified sesquiterpene synthase (Sesqui-TPS) genes in the root of V. officinalis was monitored by quantitative real time PCR (qRT-PCR) within a 144 h time period. In addition, Valerenic acid contents were measured by high-performance liquid chromatography (HPLC). The highest amount of VA (12.45 mg/g dry weight (DW)) was found at 100 µM MeJA with a 12 fold increase over control culture (1.03 mg/g DW) at exposure time of 72 h. Moreover, MeJA in a concentration dependent manner enhanced transcription rate of VoTPS1 and VoTPS7 genes. Accordingly, exposure to 100 µM MeJA for 24 h can be more effective in the induction of these genes than that observed for 50 µM. Such enhancement was correlated with increased VA accumulation suggesting that these genes may be responsible for the biosynthesis of intermediates involved in the VA-biosynthetic pathway. However, MeJA treatment seemed to have a less significant effect on VoTPS3 expression than VoTPS1 and VoTPS7 genes. This results provide insights for more effective biosynthesis of VA by MeJA-mediated transcriptional changes of putative sesqui-TPS. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
245 - The effect of biosynthesized silver nanoparticles on FAE1 and FAD2 gene expression in Camelina sativa
Tayebehalsadat Mirmoeini Leila Pishkar Danial Kahrizi Giti Barzin Naser KarimiNanotechnology is a field of research related to physics, chemistry, engineering sciences with the application of new techniques and production of nanoscale materials and an emerging field in interdisciplinary research especially biotechnology. Camelina is an oilseed an أکثرNanotechnology is a field of research related to physics, chemistry, engineering sciences with the application of new techniques and production of nanoscale materials and an emerging field in interdisciplinary research especially biotechnology. Camelina is an oilseed and re-emerging plant that requires a lot of research on its oil production process. This study was conducted to investigate the effect of biosynthesized silver nanoparticles on the expression level of FAE1 and FAD2 in Soheil cultivar of Camelina oilseed plant based on a completely randomized design with four replications in 2018-2019. The aqueous extract of Camelina leaf and silver nitrate salt was used to prepare the nanoparticles. Experimental treatments included 0.5, 1, 2 and 3 mg / L of silver nanoparticles. After the preparation of foliar samples for all treatments, RNA extraction, cDNA synthesis and temperature gradient determination, the Real Time PCR reaction was used to study gene expression patterns. Data were then analyzed using GenEX and SAS software. The results showed that the effect of silver nanoparticles on FAE1 and FAD2 gene expression was significant (p<0.05) and the effect was increased with increasing silver nanoparticle concentration. The highest enhancement was observed at 3 mg / L silver nanoparticles. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
246 - Improvement of lignans production in hairy root culture of Linum mucronatum using abiotic and biotic elicitors .
Afsaneh Samadi Mohammad Reza Dini TorkamaniElicitors could be used as the enhancer of plant secondary-metabolite synthesis and could play an important role in biosynthetic pathways of important medicinal compounds. The present study investigated the effect of abiotic elicitor (fungal extract of Fusarium graminea أکثرElicitors could be used as the enhancer of plant secondary-metabolite synthesis and could play an important role in biosynthetic pathways of important medicinal compounds. The present study investigated the effect of abiotic elicitor (fungal extract of Fusarium graminearum) and two abiotic elicitors (methyl jasmonate and salicylic acid) at different concentrations in 18- and 30-day-old cultures of hairy roots infected with two strains of Agrobacterium rhizogenes, A13 and 9534. The hairy roots were harvested 48 and 96 h after inoculation. Polymerase chain reaction analysis (PCR) with specific primers rolB and virD genes was performed to confirm the transgenic hairy roots production. Detection and identification of lignan was carried out by high performance liquid chromatography (HPLC) method. The results of PCR analysis showed diagnostic bands 780 bp in size related to specific reproduction of rolB gene. Also maximum lignan production for each elicitor was as follow: fungal extract at 1% v/v (12.87 ± 0.66 and 89.65 ± 3.9 mg/gr DW ± SD podophyllotoxin and 6-methoxypodophyllotoxin, respectively for), methyl jasmonat at 100 µm (11.37± 0.65 and 75.65 ± 3.9 mg/gr DW± SD for podophyllotoxin and 6-methoxypodophyllotoxin, respectively), and salicylic acid at 200 µm (7.97 ± 0.33 and 51.68 ±2.1 mg/gr DW ± SD for podophyllotoxin and 6methoxypodophyllotoxin, respectively). Important factors such as strain of agrobacterium (A13), duration of exposure time (48 h), and age of culture (18-day-old culture) affected lignan accumulation. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
247 - Resistance of various biotypes of Canary grass (phalaris. Spp) to acetyl-CoA carboxylase-inhibiting herbicides.
Rahil Abdi Eskandar Zand Mohammad Reza Naghavi Jahanfar Daneshiyan Nour Ali GhiasiLittle seed canary grass (Phalaris minor L.) is a major weed in wheat fields in some parts of Iran. To evaluate the efficacy of molecular and greenhouse methods in detecting the resistance of 49 biotypes of canary grass(Phalaris. Spp) to acetyl-CoA carboxylase-inhibitin أکثرLittle seed canary grass (Phalaris minor L.) is a major weed in wheat fields in some parts of Iran. To evaluate the efficacy of molecular and greenhouse methods in detecting the resistance of 49 biotypes of canary grass(Phalaris. Spp) to acetyl-CoA carboxylase-inhibiting herbicides, two methods including whole plant screening and PCR-based molecular methods were applied. Results showed that there were resistant biotypes (ile-1781-Leu) among the studied weed populationand the similarity between greenhouse and molecular methods was 67%. According to the molecular method, an isoleucine (ile) 1781 to leucine (leu) mutation in plastidicACCase enzyme of 30 biotypes (67% of biotypes) was identifiedas a mutation endowing to the clodinafop-propargyl resistance. The partial differences of about 33% between greenhouse and molecular methods can be explained by mutation in another location or through another metabolism –based mechanism. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
248 - Enhancement of valerenic acid production in Valeriana officinalis roots by methyl jasmonate-mediated transcriptional changes of sesquiterpene synthase genes
Hengameh Taheri Mansour GhesmatiValeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the e أکثرValeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the effect of methyl jasmonate (MeJA) concentrations (50 and 100 µM) in the modulation of expression patterns of the genes involved in valerenic acid (VA) biosynthesis, transcript abundance of the identified sesquiterpene synthase (Sesqui-TPS) genes in the root of V. officinalis was monitored by quantitative real time PCR (qRT-PCR) within a 144 h time period. In addition, valerenic acid contents were measured by high-performance liquid chromatography (HPLC). The highest amount of VA (12.45 mg/g dry weight (DW)) was found at 100 µM MeJA with a 12-fold increase over control culture (1.03 mg/g DW) at exposure time of 72 h. Moreover, MeJA in a concentration dependent manner, enhanced transcription rate of VoTPS1 and VoTPS7 genes. Accordingly, exposure to 100 µM MeJA for 24 h can be more effective on induction of these genes than observed for 50 µM. Such enhancement correlated with increased VA accumulation suggesting that these genes may be responsible for the biosynthesis of intermediates involved in the VA-biosynthetic pathway. However, MeJA treatment seemed to have a less significant effect on VoTPS3 expression than VoTPS1 and VoTPS7 genes. These results provide insights for more effective biosynthesis of VA by MeJA-mediated transcriptional changes of putative sesqui-TPS. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
249 - استفاده از Multiplex PCR جهت تشخیص کوکسی های گرم مثبت ایجاد کننده بیماری در مزارع پرورشی قزل آلای رنگین کمان(Oncorhynchus mykiss), ایلام
سیده سعیده حیدری نژاددر پنج سال اخیر بیماری مشکوک به streptococosisدر مزارع پرورشی قزل آلای رنگین کمان شهر ایلام به صورت اپیدمی شایع شد. در مطالعه حاضر، 60 قطعه ماهی با علائم بالینی نظیر بی حالی، شنای نامنظم، تیرگی پوست و اگزوفتالمی، از مزارع پرورش قزل آلای رنگین کمان ایلام(جنوب غربی ایران) أکثردر پنج سال اخیر بیماری مشکوک به streptococosisدر مزارع پرورشی قزل آلای رنگین کمان شهر ایلام به صورت اپیدمی شایع شد. در مطالعه حاضر، 60 قطعه ماهی با علائم بالینی نظیر بی حالی، شنای نامنظم، تیرگی پوست و اگزوفتالمی، از مزارع پرورش قزل آلای رنگین کمان ایلام(جنوب غربی ایران) جمع آوری شد. جهت تشخیص عامل اصلی بیماری، نمونه‌هایی از کبد، کلیه و طحال برداشته و در محیط کشت آگار خوندار ( blood agar) در دمای 22 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت انکوبه شد. بر اساس تست های بیوشیمیایی نمونه های جدا شده Lactococcus garvieae شناسایی شدند جهت تایید ایزولهها از multiplex PCR و ژنهای lctO ، 16S rRNA و 16S- 23S rRNA که به ترتیب جهت شناسایی Lactococcus garvieae, Streptococcus iniae و Streptococcus dysgalactiae به کار می رود استفاده شد. در این مطالعه برای غالب ایزولهها باندی به طول bp 1100 تشکیل شد که مربوط به باکتری L. garvieae می باشد. بر این اساس می توان نتیجه گرفت که عامل اصلی بروز سپتی سمی L. garvieaeبوده است. در نتیجه Multiplex PCR روش تشخیصی قطعی جهت شناسایی سریع باکتری به ویژه در عفونت های ترکیبی می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
250 - مقایسه روش میکروسکوپی وPCR در تشخیص آلودگی گوسفندان حامل تیلریا و بابزیا در پنج منطقه شهرستان خرم آباد
شهریار یاوری پرویز شایان سعید بکایی نرگس امینی نیااین مطالعه به بررسی میزان گوسفندان آلوده و حامل تک یاخته تیلریا و بابزیا در خرم آباد باروش PCR و مقایسه آن با روش میکروسکوپی می پردازد. در طی تحقیق از نمونه خون 100 رأس گوسفند 5 منطقه دامپروری این شهرستان DNA استخراج و با آنالیز برروی ژل آگارز تأیید و طی PCR با پرایمرها أکثراین مطالعه به بررسی میزان گوسفندان آلوده و حامل تک یاخته تیلریا و بابزیا در خرم آباد باروش PCR و مقایسه آن با روش میکروسکوپی می پردازد. در طی تحقیق از نمونه خون 100 رأس گوسفند 5 منطقه دامپروری این شهرستان DNA استخراج و با آنالیز برروی ژل آگارز تأیید و طی PCR با پرایمرهای ß.actinاز لحاظ کمی و کیفی آزمایش شد. سپس برای تشخیص وجود پیرو پلاسم‌ها، DNA استخراج شده از نمونه های خونی با پرایمرهای طراحی شده از توالی نوکلئوتیدی محیط کننده ناحیه متغیر ژن 18S rRNA بابزیا و تیلریا با روش PCR تکثیر داده بر روی ژل آگارز با استفاده از اتیدیوم بروماید تحت اشعه UV ارزیابی گردید. در این مطالعه نمونه ها ابتدا با روش مشاهده میکروسکوپی گسترش نازک خون محیطی رنگ‌آمیزی شده بررسی شدند که در 15 گسترش خونی اجرام پیروپلاسمی قابل رویت بودند. در 12 گسترش خونی از نمونه های مثبت اجرام تیلریایی و در 3 نمونه اجرام بابزیایی مشاهده گردیدند. با روش PCR ، 28 نمونه خونی مثبت ارزیابی شدند که 22 نمونه (22%) از آن به تیلریا و 6 نمونه (6%) به بابزیا آلوده بودند. میزان توافق ظاهری دوتست برابر 81% می باشد ودرصورتیکه PCR به عنوان یک آزمون طلایی درنظر گرفته شود میزان حساسیت و ویژگی تست آزمایش مستقیم به ترتیب 9/42% و 8/95% محاسبه می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
251 - Chalcone Isomerase Gene Expression in Different Stages of <i>Petunia Hybrida</i> Flowering and Various Flower Colors
Fatemeh Keykha Akhar Abdolreza Bagheri Nasrin Moshtaghi Masoud FakhrfeshaniPetunia (Petunia hybrida) is one of the important plants in horticultural industry. This plant is being used as a model ornamental plant and is one of the most important plants in floriculture market. Flavonoids are the main pigment in this plant. So, genetic engineerin أکثرPetunia (Petunia hybrida) is one of the important plants in horticultural industry. This plant is being used as a model ornamental plant and is one of the most important plants in floriculture market. Flavonoids are the main pigment in this plant. So, genetic engineering with the goal of color alteration in petunia is focused on flavonoids. To gain a global perspective on genes differentially expressed in petunia’s flowers pigment pathway, we investigated the expression of chalcone isomerase (chi) as an essential gene in biosynthesis pathway of pigment production in different types of flower color of petunia and various stages of flowering in this plant. Also, we measured the concentration of total flavonoids, anthocyanins and naringenin to evaluate the probably relationship between the expression profile of chi gene and the concentration of mentioned pigments. The results indicated that chalcone isomerase expression had different profile in different petal color of P. hybrida. So that, the most chi expression observed in red petunia flowers. Naringenin concentrations was the most value in this color flower. In comparison of flowering stages, stage 1, had the most expression. In other words, when the flowers fully closed (bud stage), chi expression and concentration was in the highest value. Our results showed that chi is a key gene in pigment biosynthesis pathway so that in absence of this gene, pigment pathway will be stopped. Identification of effective genes in different pathways of secondary metabolite production will assist in accurate selection of genes for genetically modification of pathways and production of various metabolites. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
252 - Detection and Identification of <i>Tomato Spotted Wilt Virus</i> in Ornamental Plants in North Khorasan Province
Javad Mahmodi Safa Saeed Nasrolahnejad Mohamad Rezaei Farve Sadat Mostafavi NeishaburiIn recent years, the symptoms of viral diseases such as dwarfism, mosaic, discoloration, necrosis, and circular spots have been prevalent in ornamental plants in parks, gardens, and streets in North Khorasan Province. Tomato spotted wilt virus (TSWV), the type species o أکثرIn recent years, the symptoms of viral diseases such as dwarfism, mosaic, discoloration, necrosis, and circular spots have been prevalent in ornamental plants in parks, gardens, and streets in North Khorasan Province. Tomato spotted wilt virus (TSWV), the type species of the genus Orthotospovirus, the family Tospoviridae, and the order Bunyavirales, is a tripartite negative/ambisense ssRNA virus. This virus is a major cause of the infection of ornamental plants in the world. In this study, to evaluate the percentage of infection to TSWV, in the early autumn of 2020, 350 samples of ornamental plants were collected based on the suspicious viral symptoms from parks, gardens, and streets of North Khorasan province (Bojnord and Shirvan cities) and were transported to the laboratory in cold conditions. In the laboratory, DAS-ELISA serological test was performed to evaluate the presence of virus in the suspected samples. Then, the infected samples identified by ELISA test were inoculated to the test plants of Chenopodium album L. (lamb's quarters), Vigna unguiculata L. (cowpea) and Datura stramonium L. (jimsonweed). After the appearance of symptoms, in order to verify the infection, they were tested again using DAS-ELISA. The molecular identification of the infected samples was done by Qiagene RNA extraction kit. Using specific primers in RT-PCR reaction, a fragment was amplified in the band of 276 bp. The results of DAS-ELISA and RT-PCR tests proved the presence of the virus on ornamental plants in North Khorasan province. In the mechanical inoculation of the virus, three above-mentioned plants showed the symptoms of the disease. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
253 - Detection and Identification of Tomato Ring Spot Virus in Ornamental Plants in North Khorasan Province
Javad Mahmoodi Safa Saeed Nasrolahnejad Farveh Sadat Mostafavi NeishaburiIn recent years, the symptoms of viral diseases such as dwarfism, mosaic, discoloration, necrosis, and circular spots have been prevalent in ornamental plants in parks, gardens, and streets in North Khorasan Province. Tomato ring spot virus (ToRSV) belongs to the Nepovi أکثرIn recent years, the symptoms of viral diseases such as dwarfism, mosaic, discoloration, necrosis, and circular spots have been prevalent in ornamental plants in parks, gardens, and streets in North Khorasan Province. Tomato ring spot virus (ToRSV) belongs to the Nepovirus genus of Secoviridae family. This virus is a major cause of the infection of ornamental plants in the world. In this study, to evaluate the percentage of infection to ToRSV, in the early autumn of 2014, 400 samples of ornamental plants were collected based on the suspicious viral symptoms from parks, gardens, and streets of North Khorasan province (Bojnord and Shirvan Cities) and were transported to the laboratory in cold conditions. In the laboratory, DAS-ELISA serological test was performed to evaluate the presence of virus in the suspected samples. Then, the infected samples identified by ELISA test were inoculated to the test plants of Cucumis sativus L. (Cucumber), Vigna unguiculata L. (Cowpea) and Nicotiana glutinosa L. (Tobacco). After the appearance of symptoms, in order to verify the infection, they were tested again using DAS-ELISA. The molecular identification of the infected samples was done by Qiagene RNA extraction kit. Using specific primers in RT-PCR reaction, a fragment was amplified in the band of 449bp. The results of DAS-ELISA and RT-PCR tests proved the presence of the virus on ornamental plants in North Khorasan Province. In the mechanical inoculation of the virus, three above-mentioned plants showed the symptoms of the disease. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
254 - بررسی ارتباط واریانت های ژن UBE2B با تاثیر بر تکامل اسپرم و ناباروری ادیوپاتیک در جمعیتی از مردان شمال ایران
الهام سیاسی محمد صادق صفاییناباروری یک مشکل کلینیکی عمده است که حدود 10 تا 15 درصد زوج ها را در سراسر جهان درگیر می کند. 40 تا 50 درصد ناباروری زوجین مربوط به مردان است که می تواند ناشی از برهم کنش بین فاکتورهای ژنتیکی و محیطی باشد. در %58 -37 از موارد ناباروری در مردان هیچ دلیل قابل شناسایی دیده أکثرناباروری یک مشکل کلینیکی عمده است که حدود 10 تا 15 درصد زوج ها را در سراسر جهان درگیر می کند. 40 تا 50 درصد ناباروری زوجین مربوط به مردان است که می تواند ناشی از برهم کنش بین فاکتورهای ژنتیکی و محیطی باشد. در %58 -37 از موارد ناباروری در مردان هیچ دلیل قابل شناسایی دیده نمی شود. این گروه در جایگاه ناباروری با منشأ ناشناخته قرار می‌گیرند. ژن UBE2B و تغییرات آن به عنوان یکی از این عوامل ژنتیکی ناشناخته محسوب می گردند. هدف این مطالعه بررسی ارتباط پلی مورفیسم های T293G و A20016G از ژن UBE2B با ناباروری در جمعیت مردان شمال ایران بود.در این مطالعه نمونه خون 60 مرد بارور و60 مرد نابارور گرفته شد. پس از استخراج DNA از نمونه ها، فراوانی اللی و ژنوتیپی واریانت‌های مذکور به روش PCR-RFLP تعیین گردید. نتایج مطالعه ما اختلاف معنی داری در فراورنی آللی بین افراد بیمار و سالم در پلی مورفیسم هایT293G ( P=0.66) و A20016G ( P=0.52 ) از ژن UBE2B نشان نداد. با توجه به اینکه در فراوانی آلل های مورد مطالعه در گروه بیمار و کنترل تفاوت معنیداری وجود نداشت، به نظر می‌رسد بین این پلی مورفیسم ها و ناباروری ادیوپاتیک مردان شمال ایران ارتباطی وجود نداشته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
255 - بررسی ارتباط چند شکلی ژن pik3cA (rs7640662) با ابتلا به سرطان تخمدان در استان آذربایجان شرقی
ابوالفضل قربانی سید رقیه تیزمغزسرطان تخمدان ششمین سرطان شایع در زنان است که برخی از عوامل محیطی و ژنتیکی در بروز این سرطان نقش دارند. اطلاعات نشان می دهد که تغییرات سوماتیک در pik3cA از طریق جهش یا تقویت ژن کاملاً در سرطان تخمدان با 30 درصد متداول تر است. بنابراین در پژوهش حاضر، ارتباط چند شکلی جایگا أکثرسرطان تخمدان ششمین سرطان شایع در زنان است که برخی از عوامل محیطی و ژنتیکی در بروز این سرطان نقش دارند. اطلاعات نشان می دهد که تغییرات سوماتیک در pik3cA از طریق جهش یا تقویت ژن کاملاً در سرطان تخمدان با 30 درصد متداول تر است. بنابراین در پژوهش حاضر، ارتباط چند شکلی جایگاه (rs7640662) ژنpik3cA با ابتلا به سرطان تخمدان در زنان استان آذربایجان شرقی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: در این مطالعه چند شکلی ژن فوق در 70 خانم مبتلا به سرطان تخمدان و 70 خانم سالم استان آذربایجان شرقی توسط روش ARMS-PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: با بررسی توزیع چندشکلی جایگاه مورد نظر تفاوت فراوانی ژنوتیپ ها در دو گروه سالم و بیمار با استفاده از آزمون کای مربع، معنیدار نبود (P=0/128) که نشان دهنده عدم ارتباط این جایگاه با بروز بیماری سرطان تخمدان می باشد. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که چند شکلی ژن pik3cA در جایگاه فوق با ریسک ابتلا به سرطان تخمدان ارتباطی وجود ندارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
256 - بررسی ارتباط سرطان سینه و پلی مورفیسم rs 3803662 از ژن TOX3 درجمعیت زنان ایرانی با روش Tetra Arms PCR
الهام سیاسی بهاره قانع فاطمه اشرفیمقدمه: ژن TOX3نقش مهمی در خطر بروز سرطان سینه در زنان دارد. پلی مورفیسم هایی در این ژن شناسایی شده اند که می توانند با ایجاد سرطان سینه مرتبط باشند. هدف این مطالعه بررسی ارتباط سرطان سینه و پلی مورفیسم rs3803662 از ژن TOX3 در جمعیت زنان ایرانی با روش Tetra Arms PCR بود. أکثرمقدمه: ژن TOX3نقش مهمی در خطر بروز سرطان سینه در زنان دارد. پلی مورفیسم هایی در این ژن شناسایی شده اند که می توانند با ایجاد سرطان سینه مرتبط باشند. هدف این مطالعه بررسی ارتباط سرطان سینه و پلی مورفیسم rs3803662 از ژن TOX3 در جمعیت زنان ایرانی با روش Tetra Arms PCR بود. مواد و روش ها: نمونه گیری از خون 50 نفر فرد سالم و 50 نفر بیمار مبتلا به سرطان سینه انجام شد. پس از استخراج ژنوم از نمونه ها فراوانی این پلی مورفیسم در ژن TOX3 با روش Tetra Arms PCR بررسی شد. نتایج: فراوانی ژنوتیپ های TT، TC و CC به ترتیب در افراد سالم 10% ، 88% و 2% و در بیماران 6% ، 50% و 44% بدست آمد. بین فراوانی حضور ژنوتیپ هموزیگوت مغلوب CC از پلی مورفیسم rs3803662 در ژن TOX3 بین افراد سالم و مبتلا به سرطان سینه اختلاف معنادار مشاهده شد (P<0.05). بحث: تحقیق حاضر برای اولین بار به بررسی ارتباط خطر ابتلا به سرطان پستان و حضور پلی مورفیسم rs3803662 از ژن TOX3 در جامعه زنان ایرانی انجام گرفت. نتایج این پژوهش نشان داد که حضور پلی مورفیسم rs3803662 از ژن TOX3 می تواند به عنوان مارکر ژنتیکی، با سرطان سینه در زنان ایرانی مرتبط باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
257 - بررسی بیان ژن NKP46 در بیماران مبتلا به بیماری سلیاک تحت رژیم غذایی بدون گلوتن
مریم خداپناه محمد رستمی نژاد مهرداد هاشمی حمید اسدزاده عقدائیگیرنده های سایتوتوکسیک طبیعی از جمله NKP46 می توانند در تقویت و تداوم پاسخ های ایمنی علیه عفونت ویروسی، که از جمله عوامل موثر بر پیشرفت التهاب در بیماری سلیاک است، نقش مهمی داشته باشند. از طرفی اینترلوکین 15، که از جمله سایتوکاین های التهابی مهم در بیماری زایی سلیاک است أکثرگیرنده های سایتوتوکسیک طبیعی از جمله NKP46 می توانند در تقویت و تداوم پاسخ های ایمنی علیه عفونت ویروسی، که از جمله عوامل موثر بر پیشرفت التهاب در بیماری سلیاک است، نقش مهمی داشته باشند. از طرفی اینترلوکین 15، که از جمله سایتوکاین های التهابی مهم در بیماری زایی سلیاک است، نیز میتواند با تاثیر بر تغییر بیان این نوع از گیرنده ها سبب آتروفی پرزهای روده ای گردد. هدف از انجام این مطالعه بررسی بیان ژن NKP46 در بیماران مبتلا به بیماری سلیاک تحت رژیم غذایی بدون گلوتن در مقایسه با افراد سالم بود. ابتدا تعداد 20 نمونه بیوپسی روده باریک از بیماران مبتلا به سلیاک و 20 نمونه از افراد سالم جمع آوری شد. پس از استخراج RNA و سنتز cDNA ، جفت پرایمر اختصاصی ژن طراحی و PCR انجام گردید و سپس بررسی بیان ژنNKP46 با روش Real-time PCR صورت گرفت .8 نفر زن (40%) و 12 نفر مرد (60%) در گروه بیمار و تعداد 7 نفر زن (35%) و 13 نفر مرد (65%) در گروه کنترل بررسی شدند. بیان ژن NKP46 در بیماران سلیاکی تحت رژیم فاقد گلوتن در مقایسه با افراد سالم اختلاف معناداری نشان نداد. عدم مشاهده اختلاف معنادار بین گروه بیمار و کنترل میتواند ناشی از تاثیرات رعایت رژیم غذایی توسط این بیماران باشد. انجام مطالعات تکمیلی جهت دستیابی به پروفایل بیان کامل تری از این گیرنده ها و همچنین ارزیابی جهش های موثربر بیان آنها در بیماران مبتلا به بیماری سلیاک درمان شده و درمان نشده در مطالعات بعدی توصیه میگردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
258 - ارتباط پلی مورفیسم های T886C در ژن TAS2R38 و C109869T در ژن SLC6A14 با ناباروری ادیوپاتیک مردان ایرانی
الهام سیاسی احمد ال یاسین جواد مولامقدمه: میزان شیوع ناباروری در مردان 15- 10درصد است و برای حدود 50% موارد ناباروری مردان نمی‌توان علت خاصی یافت. این وضعیت به عنوان ناباروری ایدیوپاتیک نامیده میشود و یکی از علل ناباروری ادیوپاتیک در مردان عوامل ژنتیکی می باشد. بنابراین هدف این تحقیق بررسی ارتباط بین دو أکثرمقدمه: میزان شیوع ناباروری در مردان 15- 10درصد است و برای حدود 50% موارد ناباروری مردان نمی‌توان علت خاصی یافت. این وضعیت به عنوان ناباروری ایدیوپاتیک نامیده میشود و یکی از علل ناباروری ادیوپاتیک در مردان عوامل ژنتیکی می باشد. بنابراین هدف این تحقیق بررسی ارتباط بین دو پلی مورفیسم T886C در ژن TAS2R38 و C109869T در ژن SLC6A14 با ناباروری ادیوپاتیک مردان در جمعیتی از بیماران ایرانی بود.مواد و روش ها: در این تحقیق از 200 نمونه خون، شامل گروه بیمار که 100 مرد با نابابروری ادیوپاتیک (الیگواسپرم و ازواسپرم) و 100 نفر گروه کنترل بودند استخراج DNA، انجام گرفت. ژنوتایپینگ دو پلی مورفیسم مورد مطالعه، با استفاده از روش های مولکولی HRM-PCR Corbett ، PCR-RFLP و Sequencing انجام گرفت، سپس نتایج انالیز اماری شد.نتایج: برای پلی مورفیسم T886C در ژن TAS2R38 تفاوت معنی دار بین گروه بیماران و گروه کنترل مشاهده نشد (P=0.9) و نتایج نشان داد که بین این پلی مورفیسم با جمعیت مردان نابارور ایرانی ارتباطی وجود ندارد. فراوانی پلی مورفیسم C109869T در ژن SLC6A14 دارای تفاوت معنی دار بین گروه بیمار و کنترل بود (P=0.04) و با ناباروری آدیوپاتیک در جمعیت مردان ایرانی مورد مطالعه ارتباط معنی دار نشان داد. بحث: بنابر نتایج این مطالعه، پلی مورفیسم C109869Tدر ژن SLC6A14 در ایجاد ناباروری آدیوپاتیک در جمعیت مردان ایرانی موثر است و می تواند با ایجاد اولیگواسپرمی و آزواسپرمی، سبب ناباروری در مردان ایرانی گردد. برای تایید نتایج مطالعات در نمونه های بیشتر توصیه می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
259 - بررسی فراوانی ژن های exoA و exoT در سویه های بالینی سودوموناس آئروژینوزا و مقاومت آنتی بیوتیکی سویه ها
شادی محبوبی سمیه عطائی جلیسهسودوموناس آئروژینوزا باسیلی گرم منفی و یک پاتوژن فرصت طلب است.این باکتری سومین عامل شایع عفونتهای بیمارستانی است. اگزوآنزیم های T,S,U,Y به وسیله سیستم ترشحی نوع III که از فاکتورهای بیماریزای مهم این باکتری است و اگزوتوکسین A به وسیله سیستم ترشحی نوع II ترشح می شوند. سود أکثرسودوموناس آئروژینوزا باسیلی گرم منفی و یک پاتوژن فرصت طلب است.این باکتری سومین عامل شایع عفونتهای بیمارستانی است. اگزوآنزیم های T,S,U,Y به وسیله سیستم ترشحی نوع III که از فاکتورهای بیماریزای مهم این باکتری است و اگزوتوکسین A به وسیله سیستم ترشحی نوع II ترشح می شوند. سودوموناس آئروژینوزا به بسیاری از آنتی بیوتیک ها حساس نیست. همچنین استفاده ی بیش از حد و خود سرانه از آنتی بیوتیک ها، باعث ظهور سودوموناس آئروژینوزاهای مقاوم به چند دارو می شود. در این پژوهش فراوانی ژنهای exoA و exoT درسویه های بالینی سودوموناس آئروژینوزا و مقاومت آنتی بیوتیکی سویه ها مورد بررسی قرار گرفت. در این تحقیق 29 سویه ی باکتری سودوموناس آئروژینوزا از بیماران بستری در بیمارستان رازی رشت ، با استفاده از روش های متداول میکروبیولوژی مشخص شدند و به همراه سویه استاندارد ATCC27853 مورد بررسی قرار گرفتند. مقاومت این سویه ها به 6 نوع آنتی بیوتیک با استفاده از روش انتشار از دیسک مشخص شد. سپس استخراج DNA و PCR جهت تعیین فراوانی ژن های exoA وexoT انجام شد. در این تحقیق بالاترین میزان مقاومت آنتی بیوتیکی برای ایمی پنم (86/75) مشاهده شد. نتایج به دست آمده از PCR نشان دهنده ی فراونی93/37% برای exoA و 96/68% برایexoT بود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
260 - ارزیابی بیان miR-192 در لنف نودهای بیماران سارکوئیدوزی به روش Real-timePCR و مقایسه بیان آنها با گروه کنترل
سمانه سادات راثی ورعی عبدالرضا محمدنیا منیره موحدی نغمه بهرامی صادق شیریانسارکوئیدوز (Sarcoidosis) بیماری با علت ناشناخته و بروز بیماری اغلب تدریجی است. بیماری ممکن است بی‌نشانه یا مزمن باشد. بررسی وجود فاکتورهایی مثل میکرو RNA ها ممکن است باعث تشخیص های بهتر سارکوئیدوز شوند و به درک بهتر مکانیسم ایجاد بیماری سارکوئیدوز کمک خواهند کرد.این مطا أکثرسارکوئیدوز (Sarcoidosis) بیماری با علت ناشناخته و بروز بیماری اغلب تدریجی است. بیماری ممکن است بی‌نشانه یا مزمن باشد. بررسی وجود فاکتورهایی مثل میکرو RNA ها ممکن است باعث تشخیص های بهتر سارکوئیدوز شوند و به درک بهتر مکانیسم ایجاد بیماری سارکوئیدوز کمک خواهند کرد.این مطالعه از نوع مورد – شاهد می باشد که پس از اخذ مجوز از کمیته اخلاق ، تهیه 40 نمونه بافت از گره های لنفاوی بیماران مبتلا به سارکوئیدوز و 40 نمونه کنترل ، با نظر پزشک متخصص جمع آوری گردید و سپس استخراج RNA از گره های لنفاوی انجام و نهایتا Realtime PCR برای مارکر miR-192 انجام شد .بیومارکر miR-192 در نمونه های گره های لنفاوی بیماران مبتلا به سارکوئیدوز در 28 نفر از 40 نفر مثبت بود . میزان مثبت بودن این بیومارکر در افراد سالم 17 نفر از 40 نفر بود. بیومارکر miR-192 در بیماران سارکوئیدوزی نسبت به نمونه های سالم افزایش بیان نشان داد .با توجه به نتایج این مطالعه، miR-192 ممکن است به عنوان نشانگر مولکولی برای بیماری سارکوئیدوزاستفاده شود. همچنین پتانسیل قابل توجهی برای تشخیص، پیش آگهی و حتی درمان سارکوئیدوز دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
261 - ارزیابی تاثیر اوژنول، جزء فعال میخک، بر مهار رشد جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین از طریق میان کنش احتمالی با PBP2a و کاهش بیان بیان ژن mecA
ناهید خدادادی سمیه عطایی جلیسهپیشزمینه و هدف: اوژنول ، جزء اصلی روغن میخک است که به عنوان یک عامل ضدباکتریایی و آنتی اکسیدان شناخته شده است. استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان یکی از شایعترین پاتوژنهایی است که باعث عفونتهای بیمارستانی و برخی مرگ های ناشی از عفونتهای باکتریایی است. در این مطالعه اثر اوژن أکثرپیشزمینه و هدف: اوژنول ، جزء اصلی روغن میخک است که به عنوان یک عامل ضدباکتریایی و آنتی اکسیدان شناخته شده است. استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان یکی از شایعترین پاتوژنهایی است که باعث عفونتهای بیمارستانی و برخی مرگ های ناشی از عفونتهای باکتریایی است. در این مطالعه اثر اوژنول بر بیان ژن mecA و اتصال با پروتئین mecA (PBP2a) در جدایههای استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین ارزیابی شد. مواد و روشها: فعالیت ضدباکتریایی اوژنول به روش انتشار از دیسک، MIC و MBC در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس بررسی شد. میان کنش بین اوژنول و پروتئین mecA(PBP2a) به کمک روشهای بیوانفورماتیکی مورد ارزیابی قرار گرفت. بیان ژن mecAدر جدایه های تحت تیمار و بدون تیمار با اوژنول به روش Q-RT-PCR بررسی شد. یافته ها: نتایج این مطالعه نشان داد که اوژنول رشد باکتریایی در 80 درصد از جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس در دیسک ها مهار کرد. MIC و MBC اوژنول در اغلب جدایه ها به ترتیب mg/ml 22/5 وmg/ml 44/10 تعیین شد. آنالیز in silico میان کنش بین اوژنول و پروتئین mecA(PBP2a) را نشان داد. ژن mecAدر جدایه های تحت تیمار با اوژنول (mg/ml 22/5) در مقایسه با کنترل کاهش بیان داشت. بحث و نتیجه گیری: به نظر می رسد اوژنول هم از طریق میان کنش با PBP2a و هم از طریق کاهش بیان ژن mecA باعث مهار رشد جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
262 - بررسی ارتباط چهار پلی مورفیسم در ژن TNP2 با روند اسپرماتوژنز و ایجاد ناباروری مردان
الهام سیاسی احمد آل یاسین جواد مولادر اسپرماتوژنز انسان، پروتامین ها به عنوان پروتئین های متصل شونده به DNA اسپرم جایگزین هیستون ها می شوند. برای تمایز و بلوغ اسپرم جایگزینی هیستون ها با پروتامین ها ضروری است. آسیب در ژن های کد کننده پروتامین ها می تواند منجر به تخریب اسپرماتوژنز و عدم تشکیل اسپرم کامل أکثردر اسپرماتوژنز انسان، پروتامین ها به عنوان پروتئین های متصل شونده به DNA اسپرم جایگزین هیستون ها می شوند. برای تمایز و بلوغ اسپرم جایگزینی هیستون ها با پروتامین ها ضروری است. آسیب در ژن های کد کننده پروتامین ها می تواند منجر به تخریب اسپرماتوژنز و عدم تشکیل اسپرم کامل شده و در نتیجه سبب ناباروری مردان گردد. در این تحقیق به بررسی حضور چهار پلی مورفیسم در ژن TNP2 از ژن های خانواده پروتامین ها و ارتباط آن با ایجاد ناباروری ادیوپاتیک در مردان ازواسپرمی و الیگواسپرمی ایرانی پرداخته شده است. حضور چهار پلی مورفیسم T1019G،G1272C، G deletion at 1036 and 1046در ژن TNP2، پس از استخراج DNA از نمونه خون 96 مرد ازواسپرم و اولیگو اسپرم با ناباروری ادیوپاتیک و 100 نفر گروه کنترل با روش PCR-RFLP و PCR-SSCP بررسی شد و سپس با روش Sequencing نتایج تایید شد.فراوانی ژنوتایپ CC از پلی مورفیسم G1272C بین گروه بیمار و کنترل تفاوت نشان داد ولی با آنالیز آماری اختلاف معنی دار بین حضور این پلی مورفیسم در مقایسه گروه بیمار با کنترل مشاهده نشد (P>0/05). همچنین پلی مورفیسم های T1019G و G deletion at 1036 and 1046در هیچ یک از گروه بیمار و کنترل مشاهده نشد. مقایسه نتایج این تحقیق با مطالعات انجام شده در این زمینه نشان داد که بین حضور این چهار پلی مورفیسم بررسی شده در ایجاد ازواسپرمی و اولیگواسپرمی با ناباروری ادیوپاتیک در جمعیت مردان ایرانی ارتباط معنی داری وجود ندارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
263 - انگشت نگاری ژنومی گونه های مختلف آزوسپیریلوم جدا شده از مزارع گندم و ذرت با استفاده از روش Rep-PCR
محمود شهابی ناصر پنجه که هادی اسدی رحمانی محمد سالاریسابقه و هدف: بیماری فیتوپلاسمایی تورم جوانه گوجه فرنگی در سال های اخیر در مناطق مختلف کشور شیوع پیدا کرده است. این پژوهش با هدف تعیین غلظت و الگوی گسترش کاندیداتوس فیتوپلاسما استرالیزیا در گوجه فرنگی، به منظور ردیابی سریع تر بیمارگر به ویژه در دوره کمون بیماری و مدیریت أکثرسابقه و هدف: بیماری فیتوپلاسمایی تورم جوانه گوجه فرنگی در سال های اخیر در مناطق مختلف کشور شیوع پیدا کرده است. این پژوهش با هدف تعیین غلظت و الگوی گسترش کاندیداتوس فیتوپلاسما استرالیزیا در گوجه فرنگی، به منظور ردیابی سریع تر بیمارگر به ویژه در دوره کمون بیماری و مدیریت بهتر آن انجام شد.مواد و روش ها: در یک آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی، سه گیاه گوجه فرنگی به وسیله پیوند به کاندیداتوس فیتوپلاسما استرالیزیا آلوده شدند. در فواصل زمانی 10، 20، 40 و 70 روز پس از مایه زنی، نمونه برداری از برگ های انتهایی گیاهان تیمار، برگ ها از ساقه های بالا و پایین محل پیوند و نیز ریشه های فرعی انجام شد. سپس با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز در زمان واقعی، غلظت و الگوی گسترش فیتوپلاسما در گیاهان یاد شده تعیین شد. همچنین، روش های واکنش زنجیره ای پلی مراز مستقیم و آشیانه ای در ردیابی فیتوپلاسمای همراه با بیماری استفاده و مقایسه شدند.یافته ها: نتایج نشان دادند که کاندیداتوس فیتوپلاسما استرالیزیا پس از ورود به گیاه، به سمت بالا و پایین حرکت کرده و به همین دلیل در برگ های بالایی و ریشه های گیاهان آلوده، غلظت آن بیشتر از برگ های میانی و پایینی بود. براساس یافته های این پژوهش، میانگین دوره کمون بیماری حدود 40 روز تخمین زده شد. واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانه ای حساس تر از واکنش زنجیره ای پلی مراز مستقیم در ردیابی این فیتوپلاسما به ویژه در دوره کمون بیماری بود.نتیجه گیری: برای ردیابی و تشخیص بیماری تورم جوانه گوجه فرنگی ناشی از کاندیداتوس فیتوپلاسما استرالیزیا، بهتر است از برگ های انتهایی و ریشه ها نمونه برداری و از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانه ای استفاده شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
264 - شناسایی فعالیت و بیان ژن پمپ افلاکس سویه های مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس
زهرا توکلی حسن صاحب جمعی لیلا پیشکار زهره علی مددی حسن نوربازرگان امیر میرزاییسابقه و هدف: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل عفونت‌زای بیمارستانی میباشد. اخیرا سویههای استافیلوکوکوس اورئوس نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین مقاوم شدهاند و پمپ افلاکس در این مقاومت نقش مهمی را ایفا میکند. هدف از این مطالعه، بررسی وجود ژن های پمپ أکثرسابقه و هدف: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل عفونت‌زای بیمارستانی میباشد. اخیرا سویههای استافیلوکوکوس اورئوس نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین مقاوم شدهاند و پمپ افلاکس در این مقاومت نقش مهمی را ایفا میکند. هدف از این مطالعه، بررسی وجود ژن های پمپ افلاکس (norA و norB)، بیان و فعایت آن در سویههای مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس بود .مواد و روش ها: در این مطالعه، تعداد 250 نمونه بالینی به منظور جداسازی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس، بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی، وجود و بیان ژنهای پمپ افلاکس norA و norB در آنها به ترتیب توسط روش های PCR و real-time PCR مورد مطالعه قرار گرفت. در انتها، پمپ افلاکس فعال در سویههای مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس توسط روش اتیدیوم بروماید بررسی شد.یافته ها: از مجموع نمونه های مورد برررسی، 50 سویه استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شد که از این میان 12 جدایه (24%) مقاوم به سیپروفلوکساسین بودند. میزان شیوع ژن های norA و norB در سویههای مقاوم به سیپروفلوکساسین به ترتیب 100% و 83% بود. همچنین تمامی سویههای مقاوم به سیپروفلوکساسین دارای پمپ افلاکس فعال بودند. نتایج real-time PCR نشان داد که اختلاف معنی داری در میزان بیان پمپ های افلاکس در سویههای مقاوم به سیپروفلوکساسین وجود دارد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که پمپ‌های افلاکس norA و norB نقش مهمی در ایجاد مقاومت به سیپروفلوکساسین ایفا میکند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
265 - مقایسه حساسیت ایمونوسنسور مبتنی بر نانوذرات سیلیکای رنگی با روش کشت و واکنش زنجیره ای پلی مراز در تشخیص بروسلا آبورتوس
آرش شمس بهاره رحیمیان ظریف مجتبی صلوتی رضا شاپوری ساکو میرزایىسابقه و هدف: بروسلوز، همواره به عنوان تهدیدی بر سلامت و اقتصاد جامعه مطرح بوده است. وجود محدودیت در روش های تشخیص بیماری در انسان و حیوان لزوم استفاده از روش های نوین شناسایی را توجیه می کند. این مطالعه با هدف مقایسه بین میزان حساسیت روش کشت و PCR با ایمونوسنسور با استف أکثرسابقه و هدف: بروسلوز، همواره به عنوان تهدیدی بر سلامت و اقتصاد جامعه مطرح بوده است. وجود محدودیت در روش های تشخیص بیماری در انسان و حیوان لزوم استفاده از روش های نوین شناسایی را توجیه می کند. این مطالعه با هدف مقایسه بین میزان حساسیت روش کشت و PCR با ایمونوسنسور با استفاده از راهبرد رنگ سنجی به منظور تشخیص بروسلا آبورتوس انجام شد.مواد و روشها: نانوذرات سیلیکای رنگی و نانوذرات پارامغناطیس پس از سنتز، با آنتی بادی پلی کلونال ضد بروسلا آبورتوس فعال شده با کمپلکس EDC/NHS کونژوگه گردیدند تا به ترتیب پروب های شناساگر و تسخیری تشکیل گردند. این پروب ها پس از اضافه شدن به رقت های سریالی از بروسلا آبورتوس و تکمیل واکنش، جمع آوری شده و در ادامه، با رها سازی رنگ آلی از ساختار سیلیکا شدت جذب در670 نانومتر قرائت گردید. از سوی دیگر، هم زمان با کشت هر رقت، DNA کروموزومی مربوط به آن توسط کیت استخراج و آزمون PCR انجام گرفت. نتایج هرسه آزمون در نهایت با یکدیگر مقایسه شد.یافتهها: بر اساس مشاهدات، دامنه تشخیص در ایمونوسنسور و کشت یکسان و برابر CFU.ml-1 108×1.5 - 103×1.5 گزارش گردید. حداقل میزان تشخیص در ایمونوسنسور CFU.ml-1450 و در کشت CFU.ml-1400 تعیین شد. دامنه تشخیص PCR نیز CFU.ml-1 108×1.5 - 104×1.5 با حداقل میزان تشخیص CFU.mL-1 5000 به دست آمد.نتیجه گیری: مقایسه نتایج این تحقیق نشان داد که ایمونوسنسور پیشنهادی قابلیت جایگزینی روش های مرسوم شناسایی بروسلا آبورتوس را دارد و می تواند به عنوان یک ابزار تشخیص در محل با داشتن حساسیت بالا مطرح گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
266 - ارزیابی بیماری زایی و پلی مورفیسم ژن omph پاستورلا مولتاسیدا
مریم اولاد یحیی تهمتن نوشین سهرابیسابقه و هدف: پاستورلا مولتاسیدا باکتری گرم منفی است که باعث بیماری های تنفسی در حیوانات اهلی و وحشی می شود. این مطالعه با هدف جداسازی و شناسایی باکتری پاستورلا مولتاسیدا و نیز بررسی پلی مورفیسم ژن ompH در این باکتری انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی تعداد 160 أکثرسابقه و هدف: پاستورلا مولتاسیدا باکتری گرم منفی است که باعث بیماری های تنفسی در حیوانات اهلی و وحشی می شود. این مطالعه با هدف جداسازی و شناسایی باکتری پاستورلا مولتاسیدا و نیز بررسی پلی مورفیسم ژن ompH در این باکتری انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی تعداد 160 نمونه سوآب بینی و حلق از بزهای مبتلا به پاستورلوز در استان فارس جمع آوری گردید. طبقه بندی مولکولی و پلی مورفیسم 26 جدایه با روش RFLP-PCR و به کمک آنزیم های برش دهنده HindIII و EcoRI انجام گرفت. هر نمونه با غلظت نیم مک فارلند به دو سر موش تزریق شد. پس از برش ژن ompH توسط آنزیم های اندونوکلئاز، در نهایت الگوهای ایجاد شده با مدت زمان مرگ موش ها مقایسه گردید. یافته ها: آنزیم های HindIII و EcoRI هر کدام الگوهای متفاوتی ایجاد کردند که در مقایسه با میانگین زمان مرگ موش ها قابل توجه بود. تمامی جدایه های کشنده میانگین زمان مرگ زیر 24 ساعت داشتند. همچنین از مجموع 29 پاستورلا مولتاسیدا جدا شده، 89.6 درصد قادر به مرگ موش ها بودند. نتیجه گیری: با توجه به الگوهای ایجاد شده، مدت زمان مرگ در موش ها نیز متفاوت بود. بر این اساس نمونه های دارای الگوهای پر تکرار موش ها را در زمان کوتاهتری از بین بردند و کشنده تر بودند. الگوهای ناشی از هضم آنزیمی به منظور شناسایی سویه های حاد و بیماری زا و در نتیجه تهیه سویه های واکسینال به کار می رود. بنابراین با توجه به تنوع پذیری این سویه ها تهیه واکسن های چندگانه ضرورت پیدا می کند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
267 - خصوصیات فنوتیپی و ژنوتیپی سودوموناس ساواستانوی، جدا شده از یاسمن زمستانی در شیراز، با استفاده از روشBOX-PCR
گیلدا نجفی پور سولماز حسنی سید محسن تقویسابقه و هدف: یاسمن زمستانی، گیاهی از خانواده زیتون می باشد که در زیباسازی فضاهای شهری کاربرد دارد. گال سرشاخه ناشی از سودوموناس ساواستانوی یکی از بیماری های مهم در این گیاه می باشد. این مطالعه با هدف ارزیابی تنوع فنوتیپی و ژنوتیپی سودوموناس ساواستانوی جدا شده از یاسمن ز أکثرسابقه و هدف: یاسمن زمستانی، گیاهی از خانواده زیتون می باشد که در زیباسازی فضاهای شهری کاربرد دارد. گال سرشاخه ناشی از سودوموناس ساواستانوی یکی از بیماری های مهم در این گیاه می باشد. این مطالعه با هدف ارزیابی تنوع فنوتیپی و ژنوتیپی سودوموناس ساواستانوی جدا شده از یاسمن زمستانی در شیراز، با استفاده از روش BOX-PCR انجام گردید. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت تجربی بر روی 23 جدایه سودوموناس ساواستانوی جدا شده از یاسمن زمستانی شیراز انجام شد. به منظور ردیابی مستقیم از آغازگر IAAL و روش PCR استفاده گردید. بررسی تنوع ژنتیکی سودوموناس ساواستانوی با روش rep-PCR و آغازگر BOX انجام شد. در ادامه داده‌های مرتبط با خصوصیات فنوتیپ جدایه های مورد بررسی به کمک نرم افزار NTsys-PC آنالیز گردید. یافته ها: بر اساس آنالیز عددی خصوصیات فنوتیپی، سویه ها در سطح 88% با یکدیگر تشابه داشتند، اما گروه بندی خاصی برای آن ها مشاهده نگردید. با استفاده از آغازگر اختصاصی IAAL و عصاره گال در بافر GES، قطعه DNA با اندازه تقریبی 454 جفت باز تکثیر شد. با استفاده از نرم‌افزارNTsys-pc در آزمون rep-PCR و آغازگر BOX، مشخص شد که جدایه ها در سطح تشابه 81%، به سه کلاستر تقسیم می شوند. کلاستر اول شامل جدایه های یاسمن زمستانه شیراز، کلاستر دوم شامل جدایه خرزهره تهران و کلاستر سوم دربرگیرنده جدایه زیتون تهران و جدایه استاندارد بود. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده در این مطالعه نشان داد که با استفاده از آغازگر BOX می توان جدایه های سودوموناس ساواستانوی متعلق به مناطق مختلف و میزبان های متفاوت را از یکدیگر تفکیک نمود. همچنین مطالعه حاضر اولین گزارش ردیابی مستقیم باکتری سودوموناس ساواستانوی از گال گیاهان آلوده در ایران می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
268 - تشخیص سریع ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV) با استفاده از روش Real-time PCR مبتنی بر ژن اختصاصی UL27
سمانه ظهیری یگانه محمد صادق هاشم زاده احسان ظفری مهدی تات محمد نجاراصل بنت الهدی زهرایی روح الله درستکارسابقه و هدف: ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV)، از مهمترین عوامل بیماری زا از نظر اقتصادی در صنعت طیور است. ماکیان تنها مخزن اصلی این ویروس به شمار می آیند. در حال حاضر برای تشخیص این ویروس روش سریع، حساس و دقیقی وجود ندارد. این مطالعه با هدف ارزیابی و معرفی یک روش دقی أکثرسابقه و هدف: ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV)، از مهمترین عوامل بیماری زا از نظر اقتصادی در صنعت طیور است. ماکیان تنها مخزن اصلی این ویروس به شمار می آیند. در حال حاضر برای تشخیص این ویروس روش سریع، حساس و دقیقی وجود ندارد. این مطالعه با هدف ارزیابی و معرفی یک روش دقیق مولکولی با استفاده از تکنیک Real-time PCR و مبتنی بر ژن اختصاصی UL27 ویروس ILT، به منظور تشخیص سریع این ویروس انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، پس از تهیه نمونه ویروسی، DNA مربوطه با استفاده از کیت استخراج اسیدهای نوکلئیک از ویروس استخراج گردید. سپس حضور ژن اختصاصی UL27 ویروس، ابتدا با روش PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و در نهایت با تکنیک Real-time PCR با استفاده از پرایمرها و پروب اختصاصی مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: مشاهده قطعه مورد انتظار 96 جفت بازی در آنالیز ژل الکتروفورز، حضور ژن اختصاصی UL27 را در نمونه های ویروسی تأیید نمود. همچنین نتایج ارزیابی سنجش Real-time PCR نیز بر روی نمونه های یاد شده مثبت بود. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که روش مولکولی Real-time PCR روش مناسبی برای تشخیص سریع و دقیق ویروس لارینگو تراکئیت عفونی، به واسطه ردیابی ژن اختصاصی UL27 می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
269 - شناسایی مولکولی سروتیپ های ویروس عامل برونشیت عفونی در جوجه های گوشتی استان گیلان
لیلا اسدپورسابقه و هدف: ویروس برونشیت عفونی متعلق به خانواده کرونا ویریده عامل بیماری برونشیت عفونی ماکیان است. این بیماری به شدت واگیردار بوده و موجب تلفات بالا و خسارات اقتصادی گسترده در صنعت پرورش طیور می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی فراوانی سروتایپ های ویروس برونشیت عفونی د أکثرسابقه و هدف: ویروس برونشیت عفونی متعلق به خانواده کرونا ویریده عامل بیماری برونشیت عفونی ماکیان است. این بیماری به شدت واگیردار بوده و موجب تلفات بالا و خسارات اقتصادی گسترده در صنعت پرورش طیور می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی فراوانی سروتایپ های ویروس برونشیت عفونی در گله های گوشتی مرغداری های اطراف رشت انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی- توصیفی بر روی نمونه های نای و ریه جوجه های گوشتی از 50 گله مختلف از مرغداری های گوشتی اطراف شهرستان رشت انجام شد. در ابتدا نمونه های مثبت برونشیت عفونی با روش RT-PCR شناسایی شدند. سپس سروتیپ این جدایه ها با واکنش nested PCR اختصاصی تیپ های ماساچوست و 793B تعیین گردید. یافته ها: از 50 نمونه مورد بررسی 32 نمونه (64%) آلوده به برونشیت عفونی بودند. واکنش nested PCR نشان داد که 10 مورد (31.25 درصد) از نمونه های مثبت برونشیت عفونی آلوده به سروتیپ 793B و 22 نمونه (68.75 درصد) آلوده به سروتیپ ماساچوست بودند. نتیجه گیری: واکسن H120 سروتیپ ماساچوست تنها محافظت نسبی در برابر سایر سروتیپ ها ایجاد می کند. حضور سروتیپ 793B در منطقه ضرورت وارد کردن این سروتیپ در ترکیب با سروتیپ ماساچوست در برنامه واکسینایسون را به منظور ایجاد ایمنی مناسب در گله ها مشخص می نماید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
270 - اپیدمیولوژی ویروس پاپیلومای انسانی تایپ های 16 و 18 جدا شده از بیماران مبتلا به سرطان دهانه رحم
خدیجه عنصری علیرضا احمدی الهه جلیلوندسابقه و هدف: انواع مختلفی از تایپ های ویروس پاپیلومای انسانی با ضایعات ناحیه ژنیتال در ارتباط است. تایپ های 16 و 18 از مهم ترین عوامل اتیولوژیک مرتبط با دیسپلازی و کارسینومای سرویکس می باشند. این مطالعه با هدف شناسایی و اپیدمیولوژی ویروس پاپیلومای انسانی تایپ های 16 و 1 أکثرسابقه و هدف: انواع مختلفی از تایپ های ویروس پاپیلومای انسانی با ضایعات ناحیه ژنیتال در ارتباط است. تایپ های 16 و 18 از مهم ترین عوامل اتیولوژیک مرتبط با دیسپلازی و کارسینومای سرویکس می باشند. این مطالعه با هدف شناسایی و اپیدمیولوژی ویروس پاپیلومای انسانی تایپ های 16 و 18 جدا شده از بیماران مبتلا به سرطان دهانه رحم مراجعه کننده به بیمارستان امام خمینی تهران انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه مورد - شاهدی بر روی 100 بیمار مبتلا به سرطان دهانه رحم و 48 فرد سالم به عنوان کنترل انجام گرفت. در ابتدا استخراج DNA به روش فنل-کلروفرم صورت گرفت. سپس ژن مربوطه با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر یافت. یافته ها: از مجموع 100 نمونه مورد بررسی، 79 درصد از نظر ابتلا به HPV مثبت بودند. با بررسی ژنوتایپ نمونه های مثبت مشخص گردید که 53 درصد از نمونه ها آلوده به تایپ 16 و 14 درصد آلوده به تایپ HPV18 بودند. نتیجه گیری: از آنجایی که ویروس HPV علامت و نشانه ای ندارد و با توجه به شیوع بالای آن در ایران، تشخیص به موقع و درمان سریع آن می تواند از تبدیل زخم های پیش سرطانی به سرطان پیشرفته جلوگیری نماید. روش های مولکولی مانند PCR می تواند به عنوان روشی سریع و مطمئن در تشخیص بیماری در مراحل اولیه مطرح باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
271 - شناسایی مولکولی سروتیپ ها و ژن های بیماری زای کپسولی موجود در مجموعه ژنی cps کلبسیلا نمونیه جمع آوری شده از بیمارستان های تهران
مرضیه توکل حسن ممتازسابقه و هدف: کلبسیلا نمونیه یکی از عوامل بیماری زای مهم بالینی و ایجاد کننده تعدادی از عفونت های بیمارستانی به ویژه پنومونی، سپتی سمی و عفونت دستگاه ادراری است. مطالعه ویژگی های فنوتیپی و ژنوتیپی مرتبط با فاکتورهای بیماری زای موثر در ایجاد بیماری در کلبسیلا نمونیه جدا ش أکثرسابقه و هدف: کلبسیلا نمونیه یکی از عوامل بیماری زای مهم بالینی و ایجاد کننده تعدادی از عفونت های بیمارستانی به ویژه پنومونی، سپتی سمی و عفونت دستگاه ادراری است. مطالعه ویژگی های فنوتیپی و ژنوتیپی مرتبط با فاکتورهای بیماری زای موثر در ایجاد بیماری در کلبسیلا نمونیه جدا شده از موارد بالینی حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی سروتیپ ها و ژن های بیماری زای کپسولی موجود در مجموعه ژنی cps کلبسیلا نمونیه انجام شد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی- توصیفی بر روی 50 جدایه بالینی کلبسیلا نمونیه جمع آوری شده از بیماران بستری در بیمارستان های پیامبران و بقیه الله (عج) تهران انجام شد. از روش PCR چندگانه برای شناسایی تیپ های کپسولی K1، K2، K5، K54 و K57 و ردیابی ژن های بیماری زای rmpA و wcaG از مجموعه ژنی cps (کپسول پلی ساکاریدی) استفاده گردید. یافته ها: در این مطالعه K54 (68 درصد) بیشترین فراوانی سروتیپ کپسولی و K1 (8 درصد) کمترین فراوانی را دارا بود. همچنین بیشترین فراوانی ژن بیماری زایی rmpA در سروتیپ کپسولی K5 (60 درصد) و بیشترین فراوانی ژن wcaG در سروتیپ K54 (17.64 درصد) مشاهده گردید. نتیجه گیری: روش PCR چندگانه می تواند به عنوان یک روش سریع در شناسایی و تیپ بندی جدایه های باکتریایی ایجاد کننده عفونت های بیمارستانی مورد استفاده قرار گیرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
272 - ارزیابی جهش در ژن oprD و مقاومت به ایمی پنم در جدایه های سودوموناس آئروژینوسا در استان گیلان
حسین مطهری طشی نجمه رنجیسابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوسا یک پاتوژن فرصت طلب گرم منفی و یکی از عوامل مرگ و میر عفونت های بیمارستانی به خصوص در بیماران با سوختگی های شدید می باشد. یکی از مکانیسم های مقاومت دارویی در سودوموناس آئروژینوسا، جهش و یا کاهش بیان ژن oprD می باشد. این مطالعه با هدف برر أکثرسابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوسا یک پاتوژن فرصت طلب گرم منفی و یکی از عوامل مرگ و میر عفونت های بیمارستانی به خصوص در بیماران با سوختگی های شدید می باشد. یکی از مکانیسم های مقاومت دارویی در سودوموناس آئروژینوسا، جهش و یا کاهش بیان ژن oprD می باشد. این مطالعه با هدف بررسی جهش های ژن oprD در جدایه های سودوموناس آئروژینوسا مقاوم به ایمی پنم در استان گیلان انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی، تعداد 45 سویه سودوموناس آئروژینوسا از نمونه های بالینی از بیمارستان ها و آزمایشگاه های شهر رشت و لاهیجان جداسازی گردید. مقاومت و حساسیت سویه ها نسبت به آنتی بیوتیک با روش های کربی باوئر (Kirby Bauer) و حداقل غلظت مهار کنندگی (MIC) تعیین گردید. سپس به منظور ارزیابی جهش در ژن oprD در جدایه های مقاوم به ایمی پنم، از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) و توالی یابی استفاده شد. یافته ها: در این مطالعه در مجموع 44.4 درصد جدایه ها مقاوم به ایمی پنم بودند. بالاترین میزان مقاومت در غلظت 512 میکروگرم در میلی لیتر ایمی پنم مشاهده گردید. همچنین توالی یابی نشان داد که 5 جدایه دارای جهش های اشتباه T103S وK115T در ژن oprD بودند. همچنین جهش های خاموش L92L در 7 نمونه، S100S در 7 نمونه، P116P در 5 نمونه و G151G در 3 نمونه شناسایی شد. نتیجه گیری: از آنجایی که oprD در ورود ایمی پنم به سلول نقش دارد، بنابراین ایجاد جهش در این ژن می تواند دلیل مقاومت جدایه های سودوموناس آئروژینوسا نسبت به ایمی پنم باشد. همچنین ممکن است جهش در oprD باعث تغییر تمایل به ایمی پنم در برخی از جدایه ها شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
273 - تعیین فراوانی آلل های تیپ های آمیزشی در جمعیت های آلترناریا آلترناتا مرکبات جنوب کشور با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز
علیرضا نیازمند شهاب حاج منصورسابقه و هدف: تاکنون فرم جنسی برای گونه آلترناریا آلترناتا گزارش نشده است. اما سطوح بالایی از تنوع ژنتیکی و ریخت شناسی مشاهده شده در بین جمعیت های این قارچ بیانگر وجود مکانیسم های ناشناخته و مرموز تولید مثل جنسی است. در قارچ های آسکومیستی مشابه با این قارچ، تولید مثل جنس أکثرسابقه و هدف: تاکنون فرم جنسی برای گونه آلترناریا آلترناتا گزارش نشده است. اما سطوح بالایی از تنوع ژنتیکی و ریخت شناسی مشاهده شده در بین جمعیت های این قارچ بیانگر وجود مکانیسم های ناشناخته و مرموز تولید مثل جنسی است. در قارچ های آسکومیستی مشابه با این قارچ، تولید مثل جنسی توسط یک ژن گاه منفرد به نام MAT1 کنترل می شود که دارای دو آلل MAT1-1 و MAT1-2 می باشند. این مطالعه با هدف تعیین فراوانی و نحوه پراکنش آلل های ژن MAT1 در جمعیت قارچ آلترناریا آلترناتا مرکبات جنوب کشور انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه مقطعی- توصیفی، استخراج DNA با روش CTAB، از ریسه های جوان نمونه های برگی 45 جدایه قارچ آلترناریا آلترناتا که قبلاً از گونه ها و ارقام مختلف باغات مرکبات جنوب کشور جمع آوری و خالص سازی شده بودند، انجام گردید. به منظور تعیین تیپ های آمیزشی، از آغازگرهای اختصاصی برای تکثیر ناحیه های MAT1-1 و MAT1-2 در واکنش زنجیره ای پلی مراز استفاده شد. یافته ها: جدایه های تیپ های آمیزشی MAT1-1 و MAT1-2 به ترتیب تکثیر قطعات 642 و 882 جفت بازی را داشتند. به طور کلی تیپ های آمیزشی در این ناحیه از فراوانی مساوی برخوردار نبودند. در مجموع، 16 جدایه دارای تیپ آمیزشی MAT1-1 و 29 جدایه دارای تیپ آمیزشی MAT1-2 بودند. فراوانی های تیپ های آمیزشی در شهرستان های مختلف و در گونه های مختلف مرکبات متفاوت بود. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که در برخی از مناطق جنوب کشور و در برخی از میزبان ها عوامل ناشناخته ای در القای مرحله جنسی قارچ آلترناریا آلترناتا دخالت دارند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
274 - ژنوتایپینگ جدایه های سودوموناس آئروژینوسای جدا شده از عفونت های بیمارستانی
غلامرضا بنی شریف حسن ممتازسابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوسا یک پاتوژن فرصت طلب شایع بیمارستانی است که مسئول طیف وسیعی از عفونتهای انسانی میباشد. مطالعه حاضر با هدف دسته بندی ژنتیکی جدایه های سودوموناس آئروژینوسا جدا شده از عفونت های بیمارستانی انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه مقطعی توصیفی ب أکثرسابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوسا یک پاتوژن فرصت طلب شایع بیمارستانی است که مسئول طیف وسیعی از عفونتهای انسانی میباشد. مطالعه حاضر با هدف دسته بندی ژنتیکی جدایه های سودوموناس آئروژینوسا جدا شده از عفونت های بیمارستانی انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه مقطعی توصیفی بر روی 18 جدایه سودوموناس آئروژینوسا جداسازی شده از بیماران بستری در بیمارستان های سطح شهرستان شهرکرد انجام گرفت. به منظور ژنوتایپینگ آن ها از سه روش RAPD-PCR، ERIC-PCR و Rep-PCR استفاده گردید.یافته ها: در آزمون RAPD-PCR، 86 باند مختلف DNA از حدوداً 300 تا 10000 جفت باز در جدایه های مورد بررسی ایجاد شد. از این میان تعداد 74 باند از آن ها پلی مورفیک بود. در آنالیز جدایه های سودوموناس آئروژینوسا با روش ERIC-PCR تعداد 98 باند مختلف با حدود 150 تا 8000 جفت باز مشاهده شد که الگوی باندینگ 14 جدایه از 18 جدایه مورد بررسی پلی مورفیک بود. در آزمایش Rep-PCR، 16پروفایل ژنومی حاصل گردید که در مجموع شباهتی بین حدود 30 تا 86 درصد بین جدایه ها مشاهده شد و تعدادی از نمونه ها دارای شباهت 100 درصد بودند. نتیجه گیری: به طور کلی تمام جدایه های مورد بررسی دارای الگوی باندی پلی مورفیک بودند. هیچ باند مونوفورمیکی در جدایه ها مشاهده نشد. وجود الگوی باندی پلی مورفیک در استفاده از تکنیک های مورد بررسی نشان می دهد که سرعت بالایی از پلی مورفیسم در ژنوم سودوموناس آئروژینوسا وجود دارد و روش های مورد استفاده در این مطالعه هر کدام ابزارهایی قدرتمند در دسته بندی سودوموناس آئروژینوسا می باشند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
275 - مقایسه روش های پاپ اسمیر و واکنش زنجیره ای پلی مراز چندگانه به منظور تشخیص پاپیلوما ویروس انسانی جدا شده از زنان دارای زخم سرویکس
فاطمه زندنیا عباس دوستی عباس مختاری فارسانی محمد چهل گردی شهرزاد سلیمانیسابقه و هدف: ویروس HPV پر خطر عامل اصلی ابتلا به سرطان دهانه رحم در زنان است. تشخیص سریع و درمان به موقع آن می تواند بسیار کمک کننده باشد. با توجه به اینکه شناسایی این ویروس از طریق روش های سنتی مانند پاپ اسمیر ناکارآمدی های مخصوص به خود را دارد، این مطالعه با هدف ارزیا أکثرسابقه و هدف: ویروس HPV پر خطر عامل اصلی ابتلا به سرطان دهانه رحم در زنان است. تشخیص سریع و درمان به موقع آن می تواند بسیار کمک کننده باشد. با توجه به اینکه شناسایی این ویروس از طریق روش های سنتی مانند پاپ اسمیر ناکارآمدی های مخصوص به خود را دارد، این مطالعه با هدف ارزیابی عفونت HPV های پرخطر در زنان دارای زخم سرویکس با روش Multiplex-PCR و نیز کارآمدی این روش در مقایسه با روش پاپ اسمیر انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه مقطعی-توصیفی بر روی 50 نمونه زخم سرویکس از افراد مراجعه کننده به بیمارستان خانواده اصفهان انجام گرفت. پس از استخراج و تخلیص DNA ژنومی، پنج نوع پرخطر از ویروس HPV به کمک روش Multiplex-PCR شناسایی شدند. در نهایت مقایسه ای بین نتایج به دست آمده از روش مولکولی و روش پاپ اسمیر انجام گرفت. یافته ها: نتایج نشان دادند که از 50 نمونه مورد مطالعه 41 مورد به تیپ های مختلف ویروس HPV آلوده بودند. تمامی 41 مورد با روشMultiplex-PCR مثبت تشخیص داده شدند. درحالی که در روش پاپ اسمیر تنها 14 مورد آلودگی گزارش گردید. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان می دهد که روش پاپ اسمیر دارای درصد خطای بسیار بالایی در تشخیص ویروس HPV می باشد. اما روش Multiplex-PCR در تشخیص و غربالگری این ویروس بسیار اختصاصی، سریع و مقرون به صرفه عمل می نماید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
276 - ژنوتایپینگ کلستریدیوم پرفرنجنس جدا شده از مناطق سردسیر استان کرمان
بابک خیرخواه مریم حاتم جهرمیکلستریدیوم پرفرنجنس یک باکتری بی هوازی، گرم مثبت، تولید کننده سم و عامل بیماری انتروتوکسمی در دام ها است. خاک به عنوان مخزن اسپور این باکتری مطرح می باشد. این مطالعه با هدف ژنوتایپینگ کلستریدیوم پرفرنجنس جدا شده از روده گوسفندان مبتلا به آنتروتوکسمی و خاک مناطق سردسیر ا أکثرکلستریدیوم پرفرنجنس یک باکتری بی هوازی، گرم مثبت، تولید کننده سم و عامل بیماری انتروتوکسمی در دام ها است. خاک به عنوان مخزن اسپور این باکتری مطرح می باشد. این مطالعه با هدف ژنوتایپینگ کلستریدیوم پرفرنجنس جدا شده از روده گوسفندان مبتلا به آنتروتوکسمی و خاک مناطق سردسیر استان کرمان با روش Multiplex PCR انجام شد. این پژوهش به صورت مقطعی- توصیفی بر روی 50 نمونه خاک و 50 نمونه روده دام جمع آوری شده از سه شهرستان سردسیر استان کرمان به منظور جداسازی جدایه های کلستریدیوم پرفرینجنس انجام شد. پس از غنی سازی نمونه ها و کشت در محیط اختصاصی و انجام آزمون های تاییدی با استفاده از ازمون های بیوشیمیایی سویه های احتمالی کلستریدیوم شناسایی گردید. سپس ژنوتایپنگ سویه های کلستریدیوم پرفرینجنس با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز چندگانه انجام شد. از مجموع نمونه های مورد پژوهش، 42 جدایه کلستریدیوم شناسایی شدند که 27 مورد آن مربوط به محتویات روده دام بود. همچنین از 10 نمونه خاک آلوده به کلستریدیوم در 5 نمونه کلستریدیوم پرفرینجنس تایید گردید. ژنوتایپ های D و A به ترتیب با فراوانی 52 و 30 درصد به ترتیب فراوان ترین ژنوتایپ های شناسایی شده از روده و خاک بودند. پژوهش حاضر نشان داد که کلستریدیوم پرفرینجنس شایع ترین گونه جدا شده در بین سایر گونه ها در گوسفندان مبتلا و خاک است. همچنین تایپ D نسبت به سایر تایپ ها از شیوع بیشتری برخوردار بود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
277 - جداسازی و تعیین توالی ژن مقاومت به جیوه در باکتری رائولتلا پلانتی کولا
اشرف رضایی مجید مقبلیسابقه و هدف: جیوه یکی از منابع آلوده کننده محیط زیست، گیاهان و انسان می باشد. میکروارگانیسم ها با مکانیسم های مختلف نسبت به جیوه مقاومند که اصلی ترین این مکانیسم ها احیای جیوه سمی به جیوه عنصری می باشد. این توانمندی با واسطه ژن های مختلف در باکتری ها می باشد. هدف از این أکثرسابقه و هدف: جیوه یکی از منابع آلوده کننده محیط زیست، گیاهان و انسان می باشد. میکروارگانیسم ها با مکانیسم های مختلف نسبت به جیوه مقاومند که اصلی ترین این مکانیسم ها احیای جیوه سمی به جیوه عنصری می باشد. این توانمندی با واسطه ژن های مختلف در باکتری ها می باشد. هدف از این تحقیق بررسی وجود ژن مقاومت به جیوه در باکتری رائولتلا پلانتی کولا از طریق واکنش زنجیره ای پلی مراز و تعیین توالی می باشد. مواد و روش ها: از باکتری رائولتلا پلانتی کولا که قبلا از پساب جدا شده بود، DNA ژنومی و پلاسمید جدا شد. سپس با استفاده از پرایمرهایی که بر اساس وجود ژن merA در باکتری کلبسیلا اکسی توکا طراحی شده بود واکنش زنجیره پلی مراز انجام پذیرفت. محصول به دست آمده تعیین توالی گردید و با استفاده از سایت NCBI، توالی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. یافته ها: با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز بر روی پلاسمید و DNA ژنومی جدا شده از باکتری، باند 1700 جفت بازی به دست آمد. از Blast توالی به دست آمده مشخص گردید که ژن تکثیر شده 99 درصد مشابه ژنmerA در باکتری های انتروباکتر کلوآکه، اشریشیا کلی، سراشیا مارسسنس، کلبسیلا اکسی توکا و آسینتوباکتر است. نتیجه گیری: برای اولین بار در این تحقیق مشخص گردید که رائولتلا پلانتی کولا جدا شده از منابع طبیعی ایران با داشتن ژن merA نسبت به جیوه مقاوم است. به همین دلیل این باکتری می تواند کاندید مناسبی به منظور استفاده در کاهش یا حذف جیوه در پساب های صنعتی باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
278 - شناسایی و آنالیز ژن های بیماری زای یرسینیا انتروکولیتیکا جداسازی شده از شیر گوسفند و بز در شهرکرد
سید محمد علوی ابراهیم رحیمی الهه تاجبخشیرسینیا انتروکولیتیکا یک باکتری گرم منفی و پاتوژن روده ای است که از طریق آب و مواد غذایی به انسان منتقل می شود. شیر از منابع عمده انتقال عفونت به انسان بوده و آلودگی آن با باکتری مانند یرسینیا انتروکولیتیکا می تواند برای انسان عوارض زیان باری داشته باشد. این مطالعه با ه أکثریرسینیا انتروکولیتیکا یک باکتری گرم منفی و پاتوژن روده ای است که از طریق آب و مواد غذایی به انسان منتقل می شود. شیر از منابع عمده انتقال عفونت به انسان بوده و آلودگی آن با باکتری مانند یرسینیا انتروکولیتیکا می تواند برای انسان عوارض زیان باری داشته باشد. این مطالعه با هدف جداسازی یرسینیا انتروکولیتیکا و ارزیابی ژن های بیماری زایی آن از شیر نشخوارکنندگان کوچک در شهرستان شهرکرد به روش کشت میکروبی و PCR انجام شد. در این مطالعه مقطعی-توصیفی تعداد 100 نمونه شیر گوسفند و بز به تفکیک و به شکل تصادفی در سطح شهرستان شهرکرد جمع آوری گردید و به روش کشت در محیط CIN مورد بررسی قرار گرفت. به منظور شناسایی سروتیپ O:3 یرسینیا انتروکولیتیکا و نیز بررسی حضور ژنهای بیماری زا، نمونه های مثبت به روش PCR در حضور پرایمرهای اختصاصی مورد بررسی قرار گرفتند. از مجموع نمونه های شیر گوسفند و بز مورد ارزیابی با روش کشت در 9 نمونه (9 درصد) حامل یرسینیا انتروکولیتیکا بود. تمامی نمونه های آلوده از شیر گوسفند بودند. از این میان، 5 مورد از نظر سروتیپ O:3 با روش PCR مثبت گزارش گردید. همچنین 4 مورد حامل ژن ail، 3 مورد حامل ژن yadA و دو نمونه حامل ژن های virF و ystA بودند. با توجه به نتایج حاصله شیر گوسفند میتواند به عنوان منبع بالقوه ای برای آلودگی انسان به یرسینیا انتروکولیتیکا مطرح باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
279 - فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین و شناسایی ژن mec A با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز در نمونه های بالینی بیمارستان آیت ا... موسوی زنجان
رسول شکری مجتبی صلوتی رحیم سروری زنجانی زهرا حیدریسابقه و هدف: امروزه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین به دلیل مقاومت به عوامل و داروهای ضد میکروبی به یکی از نگرانی های عمده سلامت عمومی تبدیل شده است. این مطالعه با هدف بررسی فراوانی و الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سی أکثرسابقه و هدف: امروزه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین به دلیل مقاومت به عوامل و داروهای ضد میکروبی به یکی از نگرانی های عمده سلامت عمومی تبدیل شده است. این مطالعه با هدف بررسی فراوانی و الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین در نمونه های بالینی جمع آوری شده از بیمارستان آیت ا... موسوی زنجان و شناسایی ژن mec A با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز انجام شده است. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی - توصیفی بر روی 176 نمونه بالینی جمع آوری شده از بخش های مختلف بیمارستان آیت ا... موسوی زنجان انجام شد. پس از شناسایی سویه ها، مقاومت جدایه ها نسبت به 12 نوع آنتی بیوتیک با روش انتشار دیسک بررسی گردید. در نهایت پس از استخراج DNA، با استفاده از روش PCR، ژن مقاومت به متی سیلین (mec A) مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: از مجموع نمونه های مورد بررسی 25/56 درصد (45 مورد) آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بودند. از این میان به کمک روش PCR مشخص گردید که 26 مورد (57.77%) حاوی ژن مقاومت به متی سیلین می باشند. بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی نشان داد که سویه ها بیشترین مقاومت را نسبت به آنتی بیوتیک های پنی سیلین (100%) و کلوگزاسیلین (80.76%) و کمترین میزان را نسبت به ونکومایسین (7.69%) دارند. نتیجه گیری: نتایج نشان می دهد که میزان شیوع باکتری استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های بیمارستانی قابل توجه بوده و مقاومت به متی سیلین در سویه های این باکتری افزایش یافته است. این امر می تواند به عنوان یک هشدار در درمان عفونت های ناشی از این باکتری مطرح باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
280 - بررسی فراوانی ژن ctpA در باکتری های لیستریا مونوسیتوژنز جدا شده از طیور به روش PCR
صغرا مقصودی عباس دوستی هاشم نیری محمد چهلگردیسابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز توانایی ایجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حیوانات را دارد. گوشت و فرآورده های گوشتی نقش بالقوه ای در انتقال لیستریا به انسان دارند و باعث ایجاد بیماری لیستریوز می گردند. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی طیور به لیستریا مونوسیتوژ أکثرسابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز توانایی ایجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حیوانات را دارد. گوشت و فرآورده های گوشتی نقش بالقوه ای در انتقال لیستریا به انسان دارند و باعث ایجاد بیماری لیستریوز می گردند. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی طیور به لیستریا مونوسیتوژنز و بررسی فراوانی ژن ctpA می باشد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 410 نمونه جمع آوری شده از طیور در شهرکرد شامل 110 نمونه مدفوع و 100 نمونه از هر یک از بافت های کبد، طحال و مغز انجام شد. جداسازی لیستریا مونوسیتوژنز با استفاده از محیط های کشت اختصاصی صورت پذیرفت. آزمایشات PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن های 16S rRNA و ctpA لیستریا مونوسیتوژنز انجام شد. همچنین تمامی 410 نمونه به صورت مستقیم نیز با روش PCR ارزیابی گردیدند. یافته ها: از مجموع نمونه های مورد پژوهش، با روش کشت 20.24 درصد از نظر لیستریا مثبت تشخیص داده شدند. حضور لیستریا با روش کشت در نمونه های مدفوع، کبد، طحال و مغز به ترتیب 36.30%، 19%، 19% و 12% تعیین گردید. اما با استفاده از روش PCR از مجموع 410 نمونه، 25.12 درصد آلوده به لیستریا بودند. همچنین ژن ctpA در 34/95% از لیستریا ها مشاهده شد. نتیجهگیری: یافته های ما نشان می دهد که لیستریا مونوسیتوژنز در طیور منطقه مورد مطالعه از فراوانی نسبتاً بالایی برخوردار است. با استفاده از روش PCR امکان شناسایی مستقیم آلودگی لیستریا مونوسیتوژنز در نمونه های تهیه شده از طیور وجود دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
281 - مطالعه تنوع ژنتیکی جدایه های بالینی مایکوباکتریوم فورچوئیتوم بر اساس تکنیک RAPD-PCR
رسا شینی محراب زاده آذردخت خسروی عبدالرزاق هاشمی هوشنگ جمالیسابقه و هدف: امروزه مایکوباکتریوم های غیرتوبرکلوزی (NTM)، به دلیل افزایش شیوع بیماری زایی و ظهور مقاومت های آنتی بیوتیکی اهمیت فراوان یافته اند. رایج ترین مایکوباکتریوم غیرسلی در ایران ، مایکوباکتریوم فورچوئیتوم می باشد. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی و بررسی تنوع ژن أکثرسابقه و هدف: امروزه مایکوباکتریوم های غیرتوبرکلوزی (NTM)، به دلیل افزایش شیوع بیماری زایی و ظهور مقاومت های آنتی بیوتیکی اهمیت فراوان یافته اند. رایج ترین مایکوباکتریوم غیرسلی در ایران ، مایکوباکتریوم فورچوئیتوم می باشد. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی و بررسی تنوع ژنتیکی در میان جدایه های بالینی مایکوباکتریوم فورچوئیتوم در ایران با استفاده از روش RAPD-PCR انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی- توصیفی بر روی 81 ایزوله NTM جداسازی شده از نمونه های مختلف بالینی انجام شد. به منظور شناسایی اولیه مایکوباکتریوم فورچوئیتوم از رنگ آمیزی اسیدفست و تست های رایج بیوشیمیایی استفاده گردید. جدایه ها با روش PCR تایید شدند و محصولات PCR به وسیله 3 آنزیم برش دهنده AvaII، HphI وHpaII هضم گردیدند. در نهایت تیپ بندی مولکولی جدایه های مایکوباکتریوم فورچوئیتوم به کمک آنالیز RAPD انجام شد. یافته ها: از مجموع 81 ایزوله NTM بررسی شده، 36 سویه به عنوان مایکوباکتریوم فورچوئیتوم شناسایی شدند. این سویه ها بر اساس پرایمرهای RAPD در 10 خوشه اصلی قرار گرفتند. بیشتر جدایه ها در رپید تایپ 1 (9 عضو ، 25%)، 2 (8 عضو ، 22.2%) و 6 (6 عضو ، 16.6%) طبقه بندی شدند. در آنالیز رپید، قطعه اصلی 300 جفت بازی (94.4%) و پس از آن قطعه 1000 جفت بازی (66.6%) وجود داشت. نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر، قدرت تمایزی بالای RAPD-PCR را نشان می دهد. این آنالیز می تواند تنوع ژنتیکی و اطلاعات اپیدمیولوژیکی را در مورد جدایه های مایکوباکتریوم فورچوئیتوم ارائه دهد. آنالیز RAPD ساده، سریع، ارزان و پیچیدگی کمتری نسبت به سایر روش های تیپ بندی مولکولی دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
282 - بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی و شناسایی ژن qnr در سویه های شیگلا جدا شده از بیماران مراجعه کننده به مرکز طبی کودکان مفید تهران
مجید مقبلی وحید بهنود رضا رنجبرسابقه و هدف: فلوروکینولون ها به طور موفقیت آمیزی برای درمان شیگلوزیس و عفونت های ناشی از سویه های مقاوم به چند آنتی بیوتیک استفاده می گردند. جهش در ژن gyrA و حمل ژن qnr ، از مکانیسم های اصلی ایجاد مقاومت کینولونی در سویه های مقاوم به فلوروکینولون به شمار می رود. این مطا أکثرسابقه و هدف: فلوروکینولون ها به طور موفقیت آمیزی برای درمان شیگلوزیس و عفونت های ناشی از سویه های مقاوم به چند آنتی بیوتیک استفاده می گردند. جهش در ژن gyrA و حمل ژن qnr ، از مکانیسم های اصلی ایجاد مقاومت کینولونی در سویه های مقاوم به فلوروکینولون به شمار می رود. این مطالعه با هدف بررسی حضور ژن های پلاسمیدی مقاومت (qnr) و نیز ارزیابی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های شیگلای جدا شده از بیماران انجام شده است. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی بر روی 73 نمونه شیگلا جدا شده از بیماران مراجعه کننده به مرکز طبی کودکان مفید تهران انجام گردید. در ابتدا جنس و گونه سویه های جداسازی شده با استفاده از آزمون های بیوشیمیایی و سرولوژیک مورد تایید قرار گرفت. ارزیابی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه ها بر اساس روش کربی بائر انجام شد. در نهایت حضور ژن های qnr با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) بررسی گردید. یافته ها: الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی نشان داد که 97.2% از سویه ها حداقل به یکی از 18 آنتی بیوتیک مقاوم بودند. بیشترین میزان مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک تری متوپریم+ سولفامتوکسازول (94.5%) و کمترین مقاومت نسبت به سیپروفلوکسازین و سفتی زوکسیم با 100% حساسیت بود. 23 عدد از شیگلاهای جداسازی شده مقاوم به نالیدیکسیک اسید بودند. از این میان 4 نمونه دارای ژن qnrS بود که مربوط به سروتایپ های شیگلا فلکسنری (2 سویه)، شیگلا سونئی (1 سویه) و شیگلا بوئیدی (1 سویه) بودند. هیچ یک از ژن های qnrA و qnrB در سویه های مورد بررسی مشاهده نگردید. نتیجه گیری: یافته های حاصل از این مطالعه نشان داد که فراوانی مقاومت به نالیدیکسیک اسید و وجود ژن qnrS در میان نمونه های شیگلا جدا شده شیوع چشم گیری داشته است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
283 - ارزیابی ژن actA در لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده از لبنیات
جمیله نوروزی سهیلا مرادی بیدهندی مرضیه شفیعیسابقه و هدف: : لیستریا باکتری گرم مثبت و درون سلولی اختیاری است. یکی از مهم ترین ژن های این باکتری actA می باشد که موجب حرکت باکتری در سلول میزبان و در نتیجه بیماری زایی آن می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی حضور ژن actA در سویه های لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده از فر أکثرسابقه و هدف: : لیستریا باکتری گرم مثبت و درون سلولی اختیاری است. یکی از مهم ترین ژن های این باکتری actA می باشد که موجب حرکت باکتری در سلول میزبان و در نتیجه بیماری زایی آن می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی حضور ژن actA در سویه های لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده از فرآورده های لبنی انجام شده است. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 70 نمونه جمع آوری شده از فرآورده های لبنی مختلف در شهرهای تهران و بابلسر از خرداد ماه 1391 تا مرداد ماه 1391 انجام شد. برای جداسازی گونه های لیستریا از محیط هایBHI آگار و مولر آگار استفاده گردید. به منظور بررسی حضور ژن actA در گونه های لیستریای جداسازی شده از روش PCR استفاده شد. همچنین برای تعیین ویژگی تهاجمی لیستریا مونوسیتوژنز از محیط TSA حاوی 0/0015% رنگ قرمز کنگو استفاده گردید. یافته ها: در مجموع 10 مورد آلودگی با لیستریا مونوسیتوژنز، 4 مورد لیستریا اینوکوآ، 2 مورد لیستریا ولشیمری و 1 مورد لیستریا سلیگری در نمونه های شیر، پنیر معمولی و پنیر نرم شناسایی گردید. همچنین در این مطالعه در هیچ یک از نمونه های ماست و کره آلودگی لیستریایی مشاهده نگردید. در تمامی نمونه های مورد بررسی فراوانی ژن actA به صورت 100% مشاهده گردید. تنها در نمونه های کنترل مربوط به سبزیجات حضور ژن 14% بود. از مجموع 10 مورد لیستریا مونوسیتوژنز جداسازی شده، 100% سویه های کلینیکی، 70% سویه های غذایی و 100% سویه های استاندارد خریداری شده از موسسه رازی دارای فنوتیپ قرمز کنگو مثبت بودند. نتیجه گیری: با توجه به نتایج به دست آمده در این مطالعه پیشنهاد می گردد که بدون نیاز به انجام کشت از روش PCR برای شناسایی ژن actA و نیز اثبات وجود لیستریا مونوسیتوژنز در انواع نمونه ها استفاده شود. همچنین به دلیل مصرف گسترده لبنیات توسط جامعه، نظارت دقیق بر مراحل تولید، حمل و نقل و توزیع آن با هدف کاهش آلودگی باکتریایی ضروری به نظر می رسد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
284 - تنوع ژنتیکی سویه های اسینتوباکتر بامانی مقاوم به آنتی بیوتیک کولیستین جدا شده از بیمارانِ بیمارستان ترومای شهید رجایی شیراز
شهریار سپهوند محبوبه مدنی محمد علی داورپناه فرشته قندهاریسابقه و هدف: اسینتوباکتر بامانی یکی از باکتری های مهم بیمارستانی می باشد که به راحتی در برابر آنتی بیوتیک های مختلف مقاومت کسب می کند. هدف از این پژوهش ارزیابی الگوی مقاومت، ژن های مقاومت به آنتی بیوتیک کولیستین و همچنین بررسی تنوع ژنتیکی سویه های مقاوم به کولیستین می ب أکثرسابقه و هدف: اسینتوباکتر بامانی یکی از باکتری های مهم بیمارستانی می باشد که به راحتی در برابر آنتی بیوتیک های مختلف مقاومت کسب می کند. هدف از این پژوهش ارزیابی الگوی مقاومت، ژن های مقاومت به آنتی بیوتیک کولیستین و همچنین بررسی تنوع ژنتیکی سویه های مقاوم به کولیستین می باشد.مواد و روش ها: شناسایی و تایید سویه های اسینتوباکتر بامانی توسط کیت میکروژن و ژنblaOXA-51 صورت گرفت. حساسیت آنتی بیوتیکی به روش انتشار دیسک وMIC بر اساس دستورالعملCLSI 2020 انجام شد. ژن های pmrA و pmrB با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز و تنوع ژنتیکی سویه ها به روشrep-PCR بررسی شد. آنالیز داده ها با استفاده از نرم افزارSPSS وNTSYS version2.10e انجام شد.یافته ها: سویه های اسینتوباکتر بامانی داری مقاومت چندگانه بودند و در برابر بیشتر آنتی بیوتیک ها مقاومت بالایی نشان دادند. کمترین میزان مقاومت در برابر آنتی بیوتیک های کولیستین و تیگه سیکلین مشاهده شد. در بررسی ژن های مقاومت به کولیستین، سویه های حساس و مقاوم اسینتوباکتر بامانی در برابر کولیستین حامل ژن هایpmrA و pmrB بودند.سویه های مقاوم به کولیستین در کنار سویه های حساس در یک گروه در دندوگرام قرار گرفتند.نتیجه گیری: نتایج تحقیق حاضر نشان دهنده فراوانی سویه های اسینتوباکتر بامانی مقاوم به چنددارو در بیمارستان مورد مطالعه بود که این سویه ها متعلق به یک کلون مشترک و در حال گردش و گسترش می باشند. بنابراین اجرای برنامه های کنترل عفونت در بخش‌های بیمارستان لازم و ضروری است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
285 - بررسی میزان فراوانی آلودگی کلامیدیایی اسپرم های مورد استفاده درتلقیح مصنوعی
علی شریف زاده محسن فروغیسابقه و هدف: کلامیدیاسه ها ازباکتری های داخل سلولی اجباری می باشند که باعث طیف وسیعی ازبیمارنی ها در حیوانات و انسان می گردند. عفونت های کلامیدیایی در گاو باعث سقط جنین، ناباروری و طیفی از دیگر علایم می گردد. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی آلودگی کلامیدیایی دراسپرم های أکثرسابقه و هدف: کلامیدیاسه ها ازباکتری های داخل سلولی اجباری می باشند که باعث طیف وسیعی ازبیمارنی ها در حیوانات و انسان می گردند. عفونت های کلامیدیایی در گاو باعث سقط جنین، ناباروری و طیفی از دیگر علایم می گردد. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی آلودگی کلامیدیایی دراسپرم های مورد استفاده حاصل ازتلقیح مصنوعی می باشد.مواد و روشها: دراین تحقیق توصیفی،100نمونه اسپرم ازگاوهای نر اعم از سالم یا از مراکز عرضه اسپرم جمع آوری شد. سپس اقدام به استخراج DNA با استفاده از کیت شرکت سیناژن گردید. برای Nested PCR از ژن 16S rRNA پرایمر تهیه و سپس محصول PCR، الکتروفورز گردیده و موارد مثبت به تفکیک جنس و گونه مشخص گردید.یافته ها: یافته هایاین بررسی حاکی از شیوع آلودگی گونه های مختلف کلامیدیا در نمونه های اسپرم بود. از مجموع 100 نمونه بررسی شده، 23 نمونه برای جنس کلامیدیا مثبت اعلام شد که به تفکیک برای گونه کلامیدیاپکوروم12 نمونه مثبت، گونه کلامیدیا آبورتوس 7 نمونه مثبت و برای گونه کلامیدیا پسیتاسی4 نمونه مثبت مشخص گردید.نتیجهگیری: بررسی حاضر نشان داد که نمونه های اسپرم می تواند به عنوان یکی از منابع مهم انتقال آلودگی کلامیدیایی درمورد گاوهای نر نقش داشته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
286 - غربالگری مولکولی مخمرهای مولد آستاگزانتین تراوشات درختان توس استان البرز
فائزه اجرلو محسن واعظ جعفر همتسابقه و هدف: مخمرهای مولد کاروتنوئید دارای پراکنش وسیعی در مناطق مختلف دنیا میباشند. در این بین جداسازی مخمرهای مولد کاروتنوئید با ارزش آستاگزانتین تنها از مناطق محدود و زیستگاه‌های خاص گزارش شدهاند. این مطالعه با هدف بکارگیری روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه برای أکثرسابقه و هدف: مخمرهای مولد کاروتنوئید دارای پراکنش وسیعی در مناطق مختلف دنیا میباشند. در این بین جداسازی مخمرهای مولد کاروتنوئید با ارزش آستاگزانتین تنها از مناطق محدود و زیستگاه‌های خاص گزارش شدهاند. این مطالعه با هدف بکارگیری روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه برای غربالگری مولکولی سریعتر جدایهها با توان تولید آستاگزانتین از تراوشات درختان توس استان البرز و بررسی کارآیی آن انجام شد.مواد و روشها: این پژوهش بصورت مقطعی با نمونه‌برداری در اردیبهشت ماه 1397 از یکی از رویشگاه‌های طبیعی درختان توس گونه بتولا پندولا در استان البرز صورت پذیرفت. پس از جداسازی مخمرها بر روی محیط‌های انتخابی و خالص‌سازی کلنی‌هایی با رنگ‌های متنوع صورتی تا قرمز، اسیدنوکلئیک ژنومی مخمرها استخراج و غربالگری مولکولی جدایهها از نظر قابلیت تولید آستاگزانتین با واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه بررسی گردید.یافته ها: از مجموع 42 کلنی واجد رنگدانه در هنگام نمونه‌برداری و جداسازی اولیه، تعداد 23 کلنی به رنگ‌های صورتی تا قرمز با روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه مورد ارزیابی قرار گرفتند. از بین این جدایهها سه مورد مثبت و بقیه منفی تشخیص داده شدند. صحت نتایج با تعیین ترادف ریبوزومی تایید شد.نتیجهگیری: مطالعه حاضر بیانگر قابلیت روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه در غربالگری مولکولی سریع و مقرون به صرفه جدایههای مخمری مولد آستاگزانتین و امکان بکارگیری این روش برای بررسی زیستگاه‌های طبیعی دیگر این مخمرها میباشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
287 - جذب زیستی آرسنیک در شرایط آزمایشگاهی از فاضلاب‌های شهری تصفیه خانه شاهین‌شهر و شرکت پلی‌اکریل در اصفهان
ندا حیدری خویی منیر دودیآلودگی محیط زیست با فلزات تهدیدی جدی برای سلامت انسان و محیط است. هدف از این بررسی جذب زیستی آرسنیک از چندین فاضلاب صنعتی بود. در این مطالعه تحلیلی نمونه‌گیری از تصفیه خانه شاهین‌شهر(1) و شرکت پلی‌اکریل (2) انجام شد. پس از اندازه‌گیری فاکتورهای دما، pH، BOD، COD و آرسنی أکثرآلودگی محیط زیست با فلزات تهدیدی جدی برای سلامت انسان و محیط است. هدف از این بررسی جذب زیستی آرسنیک از چندین فاضلاب صنعتی بود. در این مطالعه تحلیلی نمونه‌گیری از تصفیه خانه شاهین‌شهر(1) و شرکت پلی‌اکریل (2) انجام شد. پس از اندازه‌گیری فاکتورهای دما، pH، BOD، COD و آرسنیک از پساب ها شمارش باکتری های هتروتروف انجام شد و باکتریهای مقاوم به آرسنیک در محیط PHGII جداسازی و آنتی بیوگرام شدند. جهت تعیین (MIC) و (MBC) از روش کشت سطحی و برای شناسایی باکتری ها از کلنی-PCR استفاده شد. بمنظور مقایسه میانگین جمعیت هتروتروف ها از آنالیز آماری آنوا و نرم افزار SPSS 19 استفاده گردید. مقدار آرسنیک در پساب های (1) و (2) به ترتیب mg/L 0/073 و 1/895 وpH هر دو پساب خنثی بود. BOD و COD پساب (2) در محدوده مشابه پساب های صنعتی ولی پساب (1) برای BOD و COD بترتیب در حدود 400 و 2700 واحد بالاتر بود. تعداد هتروتروف ها در پساب (1) بیشتر از (2)، اما تفاوت معنی داری مشاهده نشد. جدایه های مقاوم به آرسنیک در هر دو پساب مربوط به باسیلوس سفنسیس OPL، سودوموناس آئروژینوزا IAUF-11ZBK، استنوتروفوموناس مالتوفیلیا IR-Isfahan (G) و 5633 بودند. سودوموناس آئروژینوزا ZBK بیشترین حساسیت را نسبت به آنتیبیوتیک ها نشان داد و قادر به جذب زیستی آرسنیک تا حد ppm 1/4 در شرایط آزمایشگاهی بود. سودوموناس آئروژینوزاZBK دارای قابلیت زیادی برای جذب زیستی آرسنیک و در عین حال مقاومت پایینی نسبت به آنتیبیوتیک ها داشت. این سویه جهت جذب زیستی آرسنیک از فاضلاب ها پیشنهاد می شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
288 - ارتباط بین بیان ژن هایaflO وaflQ با میزان آفلاتوکسینB1 از گونه های آسپرژیلوس جدا شده از خوراک دام
نوشین سهرابی مرتضی تقی زادهسابقه و هدف: آفلاتوکسین ها به عنوان متابولیت های ثانویه سمی، توسط برخی از گونه های آسپرژیلوس تولید می شوند. از آنجا که این گونه های قارچی می توانند باعث آلودگی مواد غذایی و خوراک دام شوند، لذا ردیابی و کنترل آلاینده های میکروبی آن ها اهمیت فراوانی دارند. در مطا أکثرسابقه و هدف: آفلاتوکسین ها به عنوان متابولیت های ثانویه سمی، توسط برخی از گونه های آسپرژیلوس تولید می شوند. از آنجا که این گونه های قارچی می توانند باعث آلودگی مواد غذایی و خوراک دام شوند، لذا ردیابی و کنترل آلاینده های میکروبی آن ها اهمیت فراوانی دارند. در مطالعه حاضر ضمن بررسی آلودگی خوراک دام، ارتباط بین میزان آفلاتوکسین B1 تولید شده توسط گونه های قارچ آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین و میزان بیان ژن های aflO وaflQ بررسی گردید. مواد و روش ها: تعداد 67 نمونه از گونه های مختلف آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین جداسازی و انتخاب شدند. ضمن بررسی وجود توالی های مربوط به ژن هایaflO وaflQ به روش PCR، میزان بیان آن ها به روشReal Time RT-PCR کمی بررسی شد. علاوه بر این، میزان آفلاتوکسینB1 به روش کروماتوگرافی معکوس با کارآیی بالا RP - HPLC)) و با استفاده از دتکتور فلورسنت اندازه گیری شد. یافته ها: درمیان 67 گونه جدا شده، 41 نمونه دارای هر دو ژن aflO وaflQ بودند. 17 نمونه از 26 گونه بررسی شده (65 درصد) مقادیر بالاتر از 5 نانوگرم بر گرم آفلاتوکسینB1 و 6 نمونه (23 درصد) نیز مقادیر بسیار بالایی از این توکسین (بیش از 100 نانوگرم بر گرم) را تولید کرده بودند. نتیجه گیری: با توجه به ارتباط نسبی بین میزان بیان ژن های مولد آفلاتوکسین و تولید آفلاتوکسینB1 در نمونه های خوراک دام، به نظر می رسد که بررسی سایر ژن های مولد آفلاتوکسین می تواند منجر به تکمیل این مطالعه و تقویت ارتباط بین بیان ژن های مولد آفلاتوکسین و میزان توکسین تولید شده شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
289 - کلون سازی و بیان ژن flab هلیکوباکتر پیلوری در سیستم یوکاریوتی به منظور تهیه واکسن
پویا خدادادی محمد کارگر مهدی بیژن زاده عباس دوستی شاپور آقاییسابقه و هدف: داشتن فلاژل و تحرک از عوامل مهم در استقرار و بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری می باشد. flaB ، یکی از ژن های مهم کد کننده پروتئین تاژکی است که آنتی بادی تولید شده علیه آن نقش عمده ای در ایمنی زایی ایفا می کند. هدف از این پژوهش، ساخت سازواره ژنی حامل ژن flaB و ب أکثرسابقه و هدف: داشتن فلاژل و تحرک از عوامل مهم در استقرار و بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری می باشد. flaB ، یکی از ژن های مهم کد کننده پروتئین تاژکی است که آنتی بادی تولید شده علیه آن نقش عمده ای در ایمنی زایی ایفا می کند. هدف از این پژوهش، ساخت سازواره ژنی حامل ژن flaB و بررسی بیان آن در سلول های یوکاریوتی به عنوان گزینه ای برای تولید واکسن می باشد.مواد و روش ها: کلون سازی و ساب کلونینگ ژن flaB در پلاسمیدهای pTZ57RT و pBudCE4.1 انجام شد. سپس صحت کلون های بدست آمده با روش های PCR، هضم آنزیمی دوگانه و توالی یابی تایید شد. پس از انتقال سازواره تایید شده به سلول های HDF، بیان ژن در سطح ترانس کریپتوم و پروتئوم به دو روش RT-PCR و SDS-PAGE بررسی شد.یافته ها: نتایج PCR نشان دهنده تکثیر قطعه 1563 جفت بازی مربوط به ژن flaB بود. کلون سازی ژن مورد نظر با استفاده از سه روش PCR، هضم آنزیمی دوگانه و توالی یابی تایید گردید. مشاهده باند های 1563 جفت بازی و 56 کیلودالتونی حاصل از RT-PCR و SDS-PAGE نشان دهنده بیان موفق این سازواره در سلول های HDF بود.نتیجه گیری: سازواره نوترکیب توانایی تولید پروتئین FlaB را در سلول های جانوری دارد، بنابراین با توجه به نتایج بدست آمده این سازواره می تواند به عنوان یک انتخاب به منظور تولید واکسن ژنی موثر علیه هلیکوباکتر پیلوری استفاده گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
290 - مقایسه دو روش ICC-RT-PCR و کشت سلولی به منظور تشخیص انتروویروس‌ها در نمونههای فاضلاب
محمد کارگر سارا صادقی پور حمیده طباطبایی رخشنده ناطقسابقه و هدف: انتروویروس‌ها یکی از مهم‌ترین ویروس‌های روده‌ای هستند که طیف وسیعی از بیماری‌ها را در انسان ایجاد می کند. اخیرا با توجه به زمان‌بر بودن و همچنین نیاز به انجام تست‌های تاییدی، استفاده از روش‌های مولکولی جهت تشخیص انترو أکثرسابقه و هدف: انتروویروس‌ها یکی از مهم‌ترین ویروس‌های روده‌ای هستند که طیف وسیعی از بیماری‌ها را در انسان ایجاد می کند. اخیرا با توجه به زمان‌بر بودن و همچنین نیاز به انجام تست‌های تاییدی، استفاده از روش‌های مولکولی جهت تشخیص انتروویروس‌ها مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این پژوهش ارزیابی روش‌های ICC-RT-PCR و کشت سلولی برای تشخیص انتروویروس‌های موجود در سیستم فاضلاب است. مواد و روش‌ها: در این پژوهش 63 نمونه فاضلاب با روش Grab sample تهیه و با روش‌های Pellet و Two-Phase تغلیظ و در رده‌های سلولی RD و HEp-2 کشت داده شد. در مرحله بعد، تمامی نمونه‌ها به کشت‌های سلولی حساس RD و HEp-2 تلقیح و پس از 24 ساعت گرمخانه گذاری در حرارت 36 درجه سانتی‌گراد، با استفاده از پرایمرهای Pan E.V، Pan P.V و پرایمرهای اختصاصی Sabin بر روی نمونه‌های کشت سلولی تست RT-PCR انجام شد. یافته‌ها: از مجموع نمونه‌های مورد بررسی، با استفاده از روش کشت سلولی از 33 نمونه انتروویروس (38/52 درصد) و توسط روش ICC-RT-PCR از 41 نمونه انتروویروس (07/65درصد) و از 6 نمونه ویروس پولیو (52/9 درصد) جداسازی گردید. نتیجه‌گیری: با آنالیز آماری مشخص شد که بین روش‌های کشت سلولی و ICC-RT-PCR ارتباط معنی داری در سطح 05/0 برای جداسازی انتروویروس‌ها وجود دارد. همچنین حساسیت روش ICC-RT-PCR برای تشخیص انتروویروس‌ها کمتر از 01/0، TCID50 ارزیابی شد که می‌تواند نشان دهنده قابل قبول بودن و حساسیت این روش برای تشخیص انتروویروس‌های موجود در فاضلاب باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
291 - تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس به روش Nested PCR در گاوهای شیری مشکوک به بیماری یون
عباس دوستی سعادت مشکلانیسابقه و هدف: یون یک بیماری مزمن روده ای در نشخوار کنندگان اهلی و وحشی می باشد که عامل ایجاد آن مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس است. این باکتری عامل بیماریزای مشترک بین انسان و دام است که گسترش جهانی دارد و نیازمند روشی مطمئن برای پیشگیری و کنترل می باشد. هدف از این پژوهش، أکثرسابقه و هدف: یون یک بیماری مزمن روده ای در نشخوار کنندگان اهلی و وحشی می باشد که عامل ایجاد آن مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس است. این باکتری عامل بیماریزای مشترک بین انسان و دام است که گسترش جهانی دارد و نیازمند روشی مطمئن برای پیشگیری و کنترل می باشد. هدف از این پژوهش، ارائه روشی سریع و دقیق براساس Nested PCR برای تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس در مدفوع گاو می باشد. مواد و روش ها: از تعداد 120 نمونه مدفوع گاو های مشکوک به بیماری یون، استخراج DNA صورت گرفت سپس با استفاده از پرایمر های اختصاصی ژن IS900واکنش Nested PCR تنظیم و انجام شد. محصولات PCR بدست آمده روی ژل آگارز الکتروفورز گردید. یافته ها: از مجموع 120 نمونه مورد بررسی، 22 مورد (33/18 درصد) به مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس آلوده بودند که در آزمون PCR مثبت تشخیص داده شدند. نتیجه گیری: تکنیک Nested PCR یکی از روش های سریع، مطمئن و کم هزینه برای تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس محسوب می شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
292 - جداسازی و پاتوتیپینگ ویروسهای نیوکاسل با استفاده از روشهای RT- PCR وMDT در جوجه‌های گوشتی مرغداریهای استان فارس
ستاره خوب یار محمد باقر نظری عبدالله رحیمیان محمدجواد مهربان پورسابقه و هدف: بیماری نیوکاسل یکی از بیماری‌های ویروسی حاد و مسری در ماکیان می‌باشد که همواره خسارات اقتصادی جبران ناپذیری را بر صنعت طیور وارد کرده است. با توجه به تلفات ایجاد شده توسط این ویروس، تشخیص بیماری و نیز اطلاع کافی از سویه‌های در حال گردش ویروسی أکثرسابقه و هدف: بیماری نیوکاسل یکی از بیماری‌های ویروسی حاد و مسری در ماکیان می‌باشد که همواره خسارات اقتصادی جبران ناپذیری را بر صنعت طیور وارد کرده است. با توجه به تلفات ایجاد شده توسط این ویروس، تشخیص بیماری و نیز اطلاع کافی از سویه‌های در حال گردش ویروسی امری حیاتی به نظر می‌رسد. هدف از این پژوهش، جداسازی و پاتوتایپینگ ویروس نیوکاسل در مرغداری‌های گوشتی استان فارس با استفاده از روش‌های RT-PCR و MDT بود. مواد و روش‌ها: در مطالعه حاضر 300 نمونه سواب کلواک و بافت نای از 30 واحد مرغداری با آمار تلفات بالا و درگیر با بیماری‌های تنفسی در استان فارس جمع آوری گردید. نمونه‌ها به تخم مرغ‌های جنین دار 11-9 روزه تلقیح و پس از 72 ساعت مایع آلانتوئیک با استفاده از آزمون هماگلوتیناسیون، RT-PCR و MDT از نظر وجود ویروس نیوکاسل و نیز تایپ بندی سویه‌ها مورد بررسی قرار گرفتند. یافته‌ها: از مجموع نمونه‌های مورد بررسی با روش مولکولی، 10 نمونه با تکثیر قطعه 535 جفت بازی آلوده به ویروس نیوکاسل شناخته شدند. سپس با روش MDT سویه‌های ولوژنیک، مزوژنیک و لنتوژنیک به ترتیب در 6، 3 و 1 نمونه شناسایی گردید. نتیجه گیری: به دلیل جداسازی ویروس‌های ولوژنیک و مزوژنیک از مرغداری‌ها،ضرورت پایش مستمر سویه‌های واکسن وارزیابی ایمنی زایی آنها وجود دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
293 - ارزیابی نقش آزمون اوره آز سریع در مقایسه با PCR به منظور تشخیص عفونت هلیکوباکتر پیلوری
محمد کارگر سید هادی رضوی زادگان کاووس اشراقیان محمد یعقوب راجپوت صادق قربانی دالینی مهدی کارگرسابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری یک ارگانیسم گرم منفی، مارپیچی شکل و غیر مهاجم است. این باکتری عامل زخم معده است و نقش مهمی در ایجاد سرطان ولنفوم معده دارد. هدف از این پژوهش ارزیابی حساسیت و ویژگی آزمایش اوره‌آز سریع در مقایسه باPCR است. مواد و روش ها: تعداد30 بیمار أکثرسابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری یک ارگانیسم گرم منفی، مارپیچی شکل و غیر مهاجم است. این باکتری عامل زخم معده است و نقش مهمی در ایجاد سرطان ولنفوم معده دارد. هدف از این پژوهش ارزیابی حساسیت و ویژگی آزمایش اوره‌آز سریع در مقایسه باPCR است. مواد و روش ها: تعداد30 بیماردارای زخم پپتیک (تست) و30 بیمار دارای سوء هاضمه (شاهد) در سال های 1385و 1386 از دو مرکز اندوسکوپی استان فارس انتخاب شدند. از هر بیمار یک نمونه ی بیوپسی معده تهیه و وجود عفونت هلیکوباکتر پیلوری با آزمون های اوره آز سریع و PCR به عنوان استاندارد طلایی بررسی گردید. یافته ها: میزان آلودگی، حساسیت، ویژگی ،ارزش پیش بینی مثبت (PPV) و ارزش پیش بینی منفی (NPV) با استفاده از اوره آز سریع به ترتیب در گروه تست 67/76% ،76/80% ،23/69% ، 92/85% و 65/60% و در گروه شاهد 67/46% ، 94/52% ، 18/68% ،62/41% ، 17/77%تشخیص داده شد. نتیجه گیری: این تحقیق نشان داد که ارزیابی آلودگی ، حساسیت و ویژگی آزمون اوره آز سریع برای تشخیص هلیکوباکتر پیلوری در بیمارانی که تحت درمان قرار نگرفته اند قابل قبول می باشد. اما استفاده از این آزمون در بیماران تحت درمان با آنتی بیوتیک ها و به ویژه داروهای مهار کننده ی پمپ پروتونی در زمان استاندارد (2 ساعت) ، حساسیت و ویژگی قابل قبولی را برای تشخیص باکتری ندارد. به همین دلیل انجام آزمون های تکمیلی دراین بیماران پیشنهاد می گردد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
294 - ارزیابی شیوع ژنهای بیماریزای سویههای اشریشیا کلی تولید کننده شیگا توکسین در فروشگاه‌های عرضه کننده آب میوه و سبزیجات در شهرستان شیراز
مرجان شاه ایلی محمد کارگر عباسعلی رضاییان مریم همایون مهدی کارگر صادق قربانی دالینیزمینه و هدف: سویه‌های اشریشیا کلی تولید کننده شیگا توکسین می‌توانند انسان‌ها را از طریق مصرف غذاهای حیوانی و گیاهی آلوده نمایند و عامل ایجاد مسمومیت‌های غذایی همراه با اسهال، کولیت هموراژیک، سندرم اورمی همولیت و حتی مرگ باشند. هدف از این پژوهش، جداسا أکثرزمینه و هدف: سویه‌های اشریشیا کلی تولید کننده شیگا توکسین می‌توانند انسان‌ها را از طریق مصرف غذاهای حیوانی و گیاهی آلوده نمایند و عامل ایجاد مسمومیت‌های غذایی همراه با اسهال، کولیت هموراژیک، سندرم اورمی همولیت و حتی مرگ باشند. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی ژن‌های بیماری‌زای سویه‌های اشریشیا کلی O157:H7 از نمونه‌های آب میوه و سبزیجات شهرستان شیراز بود. مواد و روش‌ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 89 نمونه آب میوه و سبزیجات جمع آوری شده از چهار منطقه شیراز انجام شد. نمونه‌ها پس از غنی‌سازی در محیط ECB واجد نووبیوسین در دمای 37 درجه سانتی‌گراد مورد بررسی قرار گرفتند. سپس از محیط CT-SMAC و VRBA به‌منظور بررسی تخمیر سوربیتول و لاکتوز و از محیط کروموآگار برای بررسی فعالیت بتاگلوکورونیدازی جدایه‌های باکتریایی استفاده شد. با استفاده از آنتی‌سرم اختصاصی باکتری اشریشیا کلی O157 تایید گردید. در نهایت وجود ژن‌های بیماری‌زای stx1، stx2، eae و hly با استفاده از Multiplex PCR و ژن‌های rfb O157 و fliC H7 با روش single PCR بررسی شد. یافته‌ها: از مجموع نمونه‌های مورد بررسی 69 باکتری سوربیتول منفی (53/77%) جداسازی گردید که پس از بررسی‌های سرولوژیکی 21 باکتری (60/23%) به عنوان اشریشیا کلی O157 شناسایی شدند. از باکتری های یاد شده 17 باکتری (95/80%) ژن rfb O157 و 9 باکتری (84/42%) ژن fliC H7 را داشتند. با ارزیابی مارکرهای بیماری‌زایی، در 3 نمونه ژن stx1 و در یک نمونه ژن‌های stx1 و eaeشناسایی شد. نتیجه گیری: مطالعات گسترده‌تر بر روی منابع، میزان شیوع، سرنوشت و انتقال اشریشیا کلی O157:H7 در نزدیکی محیط‌های تامین سبزیجات به‌منظور تعیین مکانیسم‌های آلودگی قبل از برداشت محصول و توانایی انتقال آلودگی و بیماری‌زایی برای انسان ضروری است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
295 - مطالعه شیوع فصلی کوکسیلا بورنتی در شیر گاو به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانه ای در استان اصفهان
ابراهیم رحیمی زینب ترکی باغبادرانی عباس دوستیسابقه و هدف: تب کیو یک بیماری مشترک انسان و دام با انتشار جهانی است که توسط یک ریکتزیای اجباری داخل سلولی به‌نام کوکسیلا بورنتی ایجاد می‌شود. این مطالعه با هدف تعیین میزان شیوع فصلی کوکسیلا بورنتی در شیر خام جمعآوری شده از گاوهای شیری در اصفهان انجام شد. موا أکثرسابقه و هدف: تب کیو یک بیماری مشترک انسان و دام با انتشار جهانی است که توسط یک ریکتزیای اجباری داخل سلولی به‌نام کوکسیلا بورنتی ایجاد می‌شود. این مطالعه با هدف تعیین میزان شیوع فصلی کوکسیلا بورنتی در شیر خام جمعآوری شده از گاوهای شیری در اصفهان انجام شد. مواد و روش‌ها: این مطالعه به‌صورت مقطعی-توصیفی از دی ماه 1387تا دی ماه 1388 انجام شد. در مجموع 247 نمونه شیر از 90 مجتمع پرورش گاو شیری جمعآوری و از نظر حضور کوکسیلا بورنتی به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانه‌ای (Nested PCR) مورد آزمایش قرار گرفت. یافته‌ها: در این مطالعه در مجموع 8 نمونه از 247 نمونه (2/3 درصد) از نظر کوکسیلا بورنتی مثبت بود. شیوع کوسیلا بورنتی در فصول مختلف سال متفاوت بود. بالاترین میزان وقوع (6/8 درصد) در فصل زمستان مشاهده شد در حالی که تمام 65 نمونه شیر مربوط به فصل تابستان منفی بودند. نتیجه‌گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که شیر گاو می‌تواند یکی از مخازن بالقوه کوکسیلا بورنتی در ایران باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
296 - ارزیابی تکنولوژی ریزآرایه های الیگونوکلئوتیدی در تشخیص باکتری های پاتوژن منتقله از طریق غذا
میثم سرشار عباس دوستی انیس جعفری نادر شاهرخیسابقه و هدف: روش های سنتی در تشخیص باکتری های پاتوژن منتقله از طریق غذا بسیار وقت گیر و زمانبر می باشند، بنابراین استفاده از روش های دقیق و قابل اطمینان در تشخیص پاتوژن های میکروبی مورد نیاز است. هدف از این پژوهش طراحی پرایمرهای یونیورسال برای تکثیر ژن 23S rDNA و هیبرید أکثرسابقه و هدف: روش های سنتی در تشخیص باکتری های پاتوژن منتقله از طریق غذا بسیار وقت گیر و زمانبر می باشند، بنابراین استفاده از روش های دقیق و قابل اطمینان در تشخیص پاتوژن های میکروبی مورد نیاز است. هدف از این پژوهش طراحی پرایمرهای یونیورسال برای تکثیر ژن 23S rDNA و هیبریدیزاسیون ریز آرایه های الیگونوکلئوتیدی به منظور ارزیابی کارایی و عملکرد توالی 23S rDNA در تشخیص باکتری های منتقل شونده از طریق غذا می باشد. مواد و روش ها: با مقایسه نواحی ثابت و متغیر ژن 23S rDNA از 9 گونه باکتری پاتوژن منتقله از طریق غذا و با استفاده از اطلاعات موجود در بانک ژنی، طراحی پروب های الیگونوکلئوتیدی با استفاده از نرم افزار Vector NTI صورت گرفت. پروب های الیگونوکلئوتیدی برای هر گونه از باکتری ها (مجموعاً 28 پروب) برای اتصال به غشای نیتروسلولزی استفاده شد. PCR از ژن مذکور با استفاده از یک جفت پرایمر یونیورسال نشاندار شده توسط Digoxigenin صورت گرفت. سپس محصولات بدست آمده با آرایه های نوکلئوتیدی متصل به غشای نیتروسلولزی هیبربد گردیدند. یافته ها: در این مطالعه از اشریشیا کلی، لیستریا مونوسیتوژنز، انتروکوکوس فکالیس، ویبریو کلرا، شیگلا دیسانتری، استافیلوکوکوس اورئوس، سالمونلا انتریکا، پروتئوس ولگاریس و باسیلوس سرئوس به عنوان شایع ترین باکتری های پاتوژن منتقله از طریق غذا استفاده گردید. نتایج نشان داد که به استثنای شیگلا دیسانتری سایر باکتری ها قادر به تشخیص و شناسایی توسط ریز آرایه های الیگونوکلئوتیدی می باشند. حساسیت روش ریز آرایه ها 103 واحد تشکیل دهنده کلنی (CFU) محاسبه گردید. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که 23S rDNA، به دلیل داشتن نواحی متغییر کافی و همچنین با استفاده از پرایمرهای یونیورسال و تکثیر نواحی حفاظت شده ژن یاد شده می توان در تشخیص باکتری های پاتوژن استفاده نمود. بنابراین تکنیک ریزآرایه های الیگونوکلئوتیدی یک روش سریع و قدرتمند در تشخیص این پاتوژن ها می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
297 - طراحی کنترل داخلی به منظور تشخیص مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس در روش PCR
محمد حسن شاه حسینی مریم قهری الهام مسلمیسابقه و هدف: سل به عنوان دومین علت مرگ و میر ناشی از عفونت شناخته شده است. روش های مولکولی مانند PCR، تکنیک های مناسبی برای شناسایی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس (MTB) هستند. بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاه های مختلف، از معایب این تکنیک مولکولی است. این مطالعه با هدف طراحی، أکثرسابقه و هدف: سل به عنوان دومین علت مرگ و میر ناشی از عفونت شناخته شده است. روش های مولکولی مانند PCR، تکنیک های مناسبی برای شناسایی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس (MTB) هستند. بروز نتایج متفاوت در آزمایشگاه های مختلف، از معایب این تکنیک مولکولی است. این مطالعه با هدف طراحی، ساخت و کاربرد کنترل داخلی در روش PCR به منظور تشخیص MTB انجام شد. مواد و روش ها: به منظور ساخت کنترل داخلی ویژه MTB ، ابتدا پرایمرهای ویژه آزمون PCR برای تشخیص مولکولی بهینه و سپس حساسیت و ویژگی آن مشخص گردید. پرایمرهای مرکب (Composite Primer) برای IC-MTB نیز طراحی، تکثیر و سپس کلون شد. IC-MTB تکثیر شده در پلاسمید pTZ57R الحاق و در باکتری اشریشیا کلی JM107 ترانسفورم و کلون گردید. تعداد حداقل IC در هر واکنش PCR از طریق رقیق سازی و همچنین طیف پاسخ PCR همراه با کنترل داخلی مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: اندازه محصول تشخیصی MTB با پرایمرهای اختصاصی آن برابر با 245 جفت باز و محصول IC-MTB برابر با 660 جفت باز بود. که از نظر اندازه، اختلاف مطلوب را با هم دارند. تعداد حداقل IC در هر واکنش 1000 عدد تعیین شد. حداقل و حداکثر حساسیت روش PCR همراه با IC برای DNA باکتری مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس بین 10 میلیون تا 10 باکتری محاسبه گردید. در ارزیابی ویژگی با عوامل مختلف نیز هیچ محصول ناخواسته ای مشاهده نشد. نتیجه گیری: استفاده از یک کنترل داخلی در روش PCR می تواند خطاها را در آزمون تشخیص مولکولی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس شناسایی نماید. در واقع تکثیر IC نشان دهنده انجام صحیح تمامی مراحل تکثیر و تشخیص می باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
298 - مقایسه روشهای کشت و مولکولی در تشخیص عوامل سقط جنین بروسلایی و سالمونلایی در گوسفندان شهرستان شهرکرد
علی شریف زاده عباس دوستی محسن جعفریانسابقه و هدف: باکتری‌های سالمونلا ابورتوس اویس و بروسلا از مهم‌ترین عوامل سقط جنین گوسفند در سراسر دنیا می‌باشند. روش‌های مستقیم جداسازی باکتری شناسی برای تشخیص این آلودگی‌ها قابل انجام است اما این روش‌ها مشکل، زمان‌بر و خطرناک می‌ أکثرسابقه و هدف: باکتری‌های سالمونلا ابورتوس اویس و بروسلا از مهم‌ترین عوامل سقط جنین گوسفند در سراسر دنیا می‌باشند. روش‌های مستقیم جداسازی باکتری شناسی برای تشخیص این آلودگی‌ها قابل انجام است اما این روش‌ها مشکل، زمان‌بر و خطرناک می‌باشند. هدف از این پژوهش، مقایسه روش‌های متداول باکتری شناسی و مولکولی برای شناسایی باکتری‌های یاد شده می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی، 38 نمونه جنین سقط شده از گله‌های مختلف گوسفند در استان چهارمحال و بختیاری جمع آوری گردید. سپس با استفاده از روش‌های مستقیم کشت و PCR چندگانه (mPCR) نمونه‌ها مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته‌ها: 5 مورد (1/13%) از نمونه‌ها به بروسلا، 19 مورد (50%) از نمونه‌ها به سالمونلا ابورتوس اویس و 4 مورد (6/10%) از نمونه‌ها به بروسلا و سالمونلا ابورتوس اویس به شکل توام آلوده بودند. در 10 مورد (3/26%) از نمونه‌ها نیز هیچ آلودگی در روش mPCR تشخیص داده نشد. در بررسی‌های باکتری شناسی 5 مورد (1/13%) از نمونه‌ها آلوده به بروسلا، 9 مورد (7/23%) آلوده به سالمونلا ابورتوس اویس و در 24 (2/63%) نمونه نیز هیچ آلودگی تشخیص داده نشد. نتیجه گیری: با توجه به سادگی و توانایی جستجوی هم‌زمان باکتری‌ها با روش PCR چندگانه، استفاده از آن برای تشخیص هم‌زمان سالمونلا ابورتوس اویس و بروسلا پیشنهاد می‌شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
299 - شناسایی ژن آلکان هیدروکسیلاز در باکتری های تجزیه کننده ترکیبات آلیفاتیک جدا شده از پساب های نفتی
حمید تبیانیان مهدی حسن شاهیان اشرف کریمی نیکسابقه و هدف: امروزه آلودگی های هیدروکربنی یکی از مهم ترین معضلات زیست محیطی به شمار می آیند. روش های بیولوژیک می توانند نقش مهمی در حذف این آلاینده های محیطی ایفا نمایند. این مطالعه با هدف جداسازی باکتری های تجزیه کننده ترکیبات آلیفاتیک و نیز شناسایی بهترین سویه تجزیه ک أکثرسابقه و هدف: امروزه آلودگی های هیدروکربنی یکی از مهم ترین معضلات زیست محیطی به شمار می آیند. روش های بیولوژیک می توانند نقش مهمی در حذف این آلاینده های محیطی ایفا نمایند. این مطالعه با هدف جداسازی باکتری های تجزیه کننده ترکیبات آلیفاتیک و نیز شناسایی بهترین سویه تجزیه کننده انجام شد. مواد و روش ها: نمونه برداری از پساب انبار نفت در شهرهای کرمان، تهران و خاک های آلوده به هیدروکربن صورت گرفت. با استفاده از روش های غنی سازی در محیط بوشنل هاس حاوی هگزادکان (به عنوان منبع کربن) باکتری های تجزیه کننده جداسازی شدند. به منظور شناسایی سویه های برتر قسمتی از ژن 16SrDNA با روش PCR تکثیر و سپس تعیین توالی گردید. همچنین حضور ژن آلکان هیدروکسیلاز در سویه های یاد شده با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تأیید شد. یافته ها: در مجموع 15 سویه باکتریایی تجزیه کننده جداسازی گردید که از این میان 8 مورد از آن ها به عنوان سویه های برتر شناخته شدند. این سویه ها متعلق به گونه های: jostii Rhodococcus، Achromobacter piechaudii، Pseudomonas aeruginosa،Pseudomonas fluorescens ، Rhodococcus erythropolis،Tsukamurella tyrosinosolvens ، Stenotrophomonas maltophilia strain M2 و Stenotrophomonas maltophilia strain Q1 بودند. در این مطالعه بیشترین میزان رشد سویه ها در غلظت 2/5 درصد هگزادکان و کمترین آن در غلظت 7 درصد مشاهده گردید. همچنین تمامی باکتری های تجزیه کننده دارای ژن آلکان هیدروکسیلاز بودند. نتیجه گیری: در مجموع نتایج این تحقیق نشان دهنده تنوع بالای باکتری های تجزیه کننده در اکوسیستم ایران و نیز توانایی آن ها در تخریب پساب های نفتی است. بنابراین با یک مدیرت مناسب می توان با استفاده از این باکتری ها، آلودگی های ناشی از پساب صنایع نفتی را به حداقل رساند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
300 - مقایسه روش PCR-RFLP با روشهای بیوشیمیایی در تشخیص عوامل سل ریوی انسانی
بهنام رفیعی علی اصغر فرازی داود صادقی سپیده غنی راضیه نظری روح اله کشاورز کیوان تدین نادر مصوری مصوریسابقه و هدف: بیماری سل هنوز هم یکی از مهم‌ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه‌ای از باکتری‌ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن‌ها بسیار مشکل است. أکثرسابقه و هدف: بیماری سل هنوز هم یکی از مهم‌ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه‌ای از باکتری‌ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن‌ها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش PCR-RFLP برای افتراق مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس و مایکوباکتریوم بویس و مقایسه نتایج آن با آزمون‌های بیوشیمیایی است. مواد و روش‌ها: 68 نمونه خلط از بیماران سل ریوی با اسمیر مثبت از مراکز بهداشتی و درمانی استان مرکزی جمع آوری و در محیط کشت‌های اختصاصی کشت شد. همچنین 10 جدایه مایکوباکتریوم بویس مربوط به مناطق مختلف ایران و 6 سویه استاندارد مایکوباکتریوم برای مقایسه استفاده گردید. پس از انجام تست‌های بیوشیمیایی، آزمون PCR براساس ژن کاذب oxyR انجام گرفت. سپس الگوی برش محصول تکثیر یافته با استفاده از آنزیم AluI مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: در همه جدایه‌های انسانی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس یک قطعه و در جدایه‌های گاوی 3 قطعه پس از برش توسط آنزیم مشاهده شد. از نمونه‌های مورد پژوهش تنها در یک مورد مایکوباکتریوم بویس تشخیص داده شد. همچنین نتایج حاصل از آزمون PCR-RFLP با نتایج حاصل از تست‌های بیوشیمیایی هماهنگی 100% داشت. نتیجه گیری: روش PCR-RFLP روشی سریع و دقیق به‌منظور افتراق مایکوباکتریوم بویس از سایر اعضای کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس می‌باشد و می‌تواند در تشخیص اولیه و درمان مورد استفاده قرار گرفت. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
301 - شناسایی لیشمانیا اینفانتوم با روش واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانه‌ای در مخازن حیوانی شهرستان بویراحمد
حسین انصاری عبدالعلی مشفع کاوس صلح جو پویا خدادادیسابقه و هدف: لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) از جمله بیماری‌های انگلی مشترک بین انسان و حیوان است که عامل آن لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی آن سگ و سگ‌سانان می‌باشد. هدف از این پژوهش، شناسایی مولکولی انگل مولد لیشمانیوز احشایی در سگ‌های شهرستان بویراحمد أکثرسابقه و هدف: لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) از جمله بیماری‌های انگلی مشترک بین انسان و حیوان است که عامل آن لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی آن سگ و سگ‌سانان می‌باشد. هدف از این پژوهش، شناسایی مولکولی انگل مولد لیشمانیوز احشایی در سگ‌های شهرستان بویراحمد بود. مواد و روش‌ها: در این پژوهش برای جداسازی انگل لیشمانیا، از گسترش‌های تماسی تهیه شده از طحال و کبد 15 قلاده سگ دارای علایم بالینی لیشمانیوز احشایی شهرستان بویراحمد در سال 89 استفاده گردید. همچنین جنس و گونه انگل پس از تهیه مقاطع بافتی از اندام‌های حیوانات مورد پژوهش با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز آشیانه‌ای شناسایی گردید. یافته‌ها: از مجموع نمونه‌های مورد بررسی لیشمانیا اینفانتوم در 14 مورد (3/93%) از بافت‌های کبد، طحال و اسمیرهای آن‌ها و لیشمانیا ماژور در 1 نمونه (7/6%) با روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز آشیانه‌ای تشخیص داده شدند. نتیجه‌گیری: نتایج مولکولی نشان داد که عامل اصلی لیشمانیوز احشایی در مخازن حیوانی (سگ) شهرستان بویراحمد لیشمانیا اینفانتوم می‌باشد. اما لیشمانیا ماژور نیز می‌تواند به عنوان یکی از عوامل ایجاد کننده لیشمانیوز احشایی در سگ وسگ‌سانان به شمار آید. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
302 - راه‌اندازی روش real-time PCR به منظور شناسایی مستقیم حساسیت به کلاریترومایسین در هلیکوباکتر پیلوری
صادق قربانی دالینی محمد کارگر عباس دوستی پژمان عباسی نگار صعودسابقه و هدف: مقاومت هلیکوباکتر پیلوری به کلاریترومایسین تا حد قابل توجهی باعث کاهش اثرات درمانی داروی مذکور گردیده است. هدف از این پژوهش ارزیابی روش مستقیم real-time PCR و مقایسه آن با روش دیسک دیفیوژن برای شناسایی مقاومت به کلاریترومایسین در هلیکوباکتر پیلوری می باشد. أکثرسابقه و هدف: مقاومت هلیکوباکتر پیلوری به کلاریترومایسین تا حد قابل توجهی باعث کاهش اثرات درمانی داروی مذکور گردیده است. هدف از این پژوهش ارزیابی روش مستقیم real-time PCR و مقایسه آن با روش دیسک دیفیوژن برای شناسایی مقاومت به کلاریترومایسین در هلیکوباکتر پیلوری می باشد. مواد و روش‌ها: این پژوهش به‌صورت تجربی برروی 45 نمونه بیوپسی تهیه شده از بیماران دارای اختلالات گوارشی انجام شد. در تمامی نمونه‌های مورد بررسی وجود هلیکوباکتر پیلوری با کشت، RUT و PCR معمولی تایید گردید. همچنین مقاومت به کلاریترومایسین با استفاده از روش CLSI (Clinical and Laboratory Standard Institute) و real-time PCR با استفاده از پروب اختصاصی ناحیه پپتیدیل ترانسفراز ژن 23S rRNA هلیکوباکتر پیلوری انجام شد. یافته‌ها: با استفاده از روش دیسک دیفیوژن، 20 نمونه حساس (44/44%) و 25 نمونه مقاوم (56/55%) به کلاریترومایسین شناسایی گردید. اما با استفاده از روش real-time PCR در 20 نمونه ژنوتیپ مقاوم (44/44%)، 5 نمونه ژنوتیپ مخلوط (11/11%) و در 20 نمونه ژنوتیپ حساس (44/44%) به کلاریترومایسین شناسایی گردید. همچنین نتایج نشان داد که حساسیت این تکنیک برابر 40 باکتری یا 80 کپی از ژن 23S rRNA می باشد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که روش real-time PCR دارای حساسیت و دقت مناسبی برای شناسایی مقاومت به کلاریترومایسین در کمترین زمان ممکن است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
303 - شناسایی سریع و هم زمان عوامل بیماریزا و تیپ های کپسولی پاستورلا مالتوسیدا جدا شده از گوسفند و بز با روش Multiplex PCR
سمانه دانش لاری یحیی تهمتن معصومه حیاتی محمد کارگرسابقه و هدف: باکتری پاستورلا مالتوسیدا به صورت هم زیست در دستگاه تنفسی فوقانی و سیستم گوارشی بسیاری از حیوانات اهلی و وحشی وجود دارد. سروتیپ هایA و D این باکتری از مهم ترین عوامل ایجاد کننده ذات الریه در گوسفند و بز به شمار می روند. فیمبریه و ادهسین، کپسول، توکسین، فاکت أکثرسابقه و هدف: باکتری پاستورلا مالتوسیدا به صورت هم زیست در دستگاه تنفسی فوقانی و سیستم گوارشی بسیاری از حیوانات اهلی و وحشی وجود دارد. سروتیپ هایA و D این باکتری از مهم ترین عوامل ایجاد کننده ذات الریه در گوسفند و بز به شمار می روند. فیمبریه و ادهسین، کپسول، توکسین، فاکتور جذب آهن، پروتئین غشای خارجی از مهم ترین فاکتورهای بیماریزای این باکتری محسوب می شوند. هدف از این پژوهش طراحی روشMultiplex PCR برای تشخیص هم زمان و سریع مهم ترین ژن های بیماریزا، تیپ بندی کپسولی و نیز شناسایی پاستورلامالتوسیدا جدا شده از گوسفند و بز دارای علائم تنفسی در استان فارس بود. مواد و روش ها: در مجموع 500 سوآب از لوزه و بینی گوسفند و بز دارای علائم تنفسی و مشکوک به پاستورولوز تنفسی از استان فارس جمع آوری گردید. در ابتدا با استفاده از تست های های بیوشیمیایی گونه باکتری شناسایی و تأئید گردید. سپس به کمک پرایمرهای اختصاصی مهم ترین فاکتورهای حدت باکتری به همراه تیپ کپسولی مورد بررسی قرار گرفتند. یافته ها: در این مطالعه 8/83 درصد از سویه های پاستورلا مالتوسیدا سروتیپ کپسولی A و 4/6 درصد سروتیپ D بودند. همچنین میزان فراوانی ژن های omph, ptfA, hgbA, toxA به ترتیب 4/77%، 19/74%، 74/67% و 74/67% گزارش گردید. نتیجه گیری: اکثر سویه های پاستورلا مالتوسیدا جدا شده از گوسفندان و بزها در استان فارس توکسیژن بودند و سروتیپ کپسولیA در بین جدایه ها شیوع بیشتری داشت. از میان ژن های بیماریزای مورد بررسی، دو ژن toxA وompH کد کننده درمونکروتوکسین و پروتئین غشای خارجی، بیشترین میزان شیوع را در سویه های جداسازی شده از گوسفند و بزها داشتند. بنابراین پایش دو ژن یاد شده می تواند نقش موثری در اپیدمیولوژی و عفونت تنفسی گوسفند و بز داشته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
304 - ارزیابی فراوانی کمپیلوباکترها و آرکوباکترها در آب دریای خزر با استفاده از روش های کشت و PCR
فهیمه قربانی معین مسعود قانعمقدمه و هدف: کمپیلوباکترها یکی از مهمترین عوامل ایجاد کننده عفونت های گوارشی در دنیا معرفی می شوند. آب و مواد غذایی آلوده اصلی ترین راه ورود این باکتری به انسان می باشد. هدف از این پژوهش، جداسازی، شناسایی و تشخیص گونه های مختلف کمپیلوباکتر و آرکوباکتر از آب دریای خزر در أکثرمقدمه و هدف: کمپیلوباکترها یکی از مهمترین عوامل ایجاد کننده عفونت های گوارشی در دنیا معرفی می شوند. آب و مواد غذایی آلوده اصلی ترین راه ورود این باکتری به انسان می باشد. هدف از این پژوهش، جداسازی، شناسایی و تشخیص گونه های مختلف کمپیلوباکتر و آرکوباکتر از آب دریای خزر در شمال ایران بود. مواد و روش ها: تعداد 263 نمونه آب در 4 فصل سال جمع آوری گردید. گونه های کمپیلوباکتر و آرکوباکتر با استفاده از روش استاندارد کشت جداسازی شد و سپس به وسیله ی تست های فنوتایپینگ شناسایی شدند. تائید فنوتایپینگ سویه ها بوسیله روش PCR صورت گرفت. یافته ها: بعد از انجام روش های فنوتایپینگ و استفاده از تکنیک های مولکولی 7 سویه از کمپیلوباکتر ججونی و 14 سویه از آرکوباکتر بوتزلری شناسایی شدند. با توجه به نتایج حاصل، شیوع کمپیلوباکتر ججونی و آرکوباکتر بوتزلری در آب های ساحلی جنوب دریای خزر به ترتیب به میزان 66/2 درصد و 32/5 درصد ارزیابی گردید. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این تحقیق به عنوان اولین گزارش جداسازی کمپیلوباکتر ججونی و آرکوباکتر بوتزلری از دریای خزر می باشد. مطلع بودن از چگونگی ورود و گستره زمانی انتشار و بقای کمپیلوباکترها در محیط های آبی می تواند در کنترل کیفیت آب و جلوگیری از بیماری اهمیت داشته باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
305 - شناسایی ویروس هپاتیت B در بیماران همودیالیزی با استفاده از روش تکثیر هم‌دمایی به واسطه حلقه (LAMP)
محمد حسن شاه حسینی زهره اسماعیلی الهام مسلمی پریچهر یغماییسابقه و هدف: شناسایی بیماری هپاتیت B یکی از مشکلات اساسی مراکز همودیالیز محسوب می‌شود. هدف از این پژوهش راه‌اندازی و بهینه‌سازی روش مولکولی تکثیر هم‌دمایی به‌واسطه حلقه (LAMP) برای ارزیابی شیوع ویروس هپاتیت B در نمونه‌های سرمی افراد همودیال أکثرسابقه و هدف: شناسایی بیماری هپاتیت B یکی از مشکلات اساسی مراکز همودیالیز محسوب می‌شود. هدف از این پژوهش راه‌اندازی و بهینه‌سازی روش مولکولی تکثیر هم‌دمایی به‌واسطه حلقه (LAMP) برای ارزیابی شیوع ویروس هپاتیت B در نمونه‌های سرمی افراد همودیالیزی است. مواد و روش‌ها: این پژوهش به‌صورت مقطعی-توصیفی بر روی سرم 136 بیمار مراجعه کننده به 3 مرکز همودیالیز بیمارستان مصطفی خمینی (53 نمونه)، بیمارستان چمران (54 نمونه) و بیمارستان عرفان (31 نمونه) انجام شد. پس از استخراج DNA با استفاده از 6 پرایمر اختصاصی ژن HBsAg شرایط واکنش و غلظت مواد برای تشخیص HBV بهینه سازی گردید. همچنین محصولات واکنش با استفاده از روش ژل الکتروفورز با استفاده از اتیدیوم بروماید و سایبرگرین ارزیابی گردید. یافته ها: در این مطالعه حساسیت روش بهینه‌سازی شده LAMP، 4 ذره ویروسی بود. همچنین این روش ویژگی بسیار بالایی داشت. از افراد مراجعه کننده به بیمارستان مصطفی خمینی 13 مورد به‌وسیله تکنیک LAMP و 7 مورد به‌وسیله PCR و از افراد مراجعه کننده به بیمارستان چمران 4 مورد به‌وسیله تکنیک LAMP و 2 مورد به‌وسیله PCR مثبت بودند. اما میزان شناسایی ویروس در افراد مراجعه کننده به بیمارستان عرفان با استفاده از هر دو تکنیک یکسان (2 مورد) بود. نتیجه گیری: برای شناسایی ویروس هپاتیت B، روش LAMP در مقایسه با روش PCR معمولی بسیار سریع‌تر، مقرون به صرفه‌تر و دقیق‌تر است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
306 - راه اندازی روش Real-time PCR برای تشخیص و تعیین کمی ویروس سرخک با استفاده از ژن F
طاهره زارعی خسرو آقایی‌پور فرشید کفیل‌زاده عبدالحمید شوشتریسابقه و هدف: با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان، اما گزارش‌هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت‌های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به‌موقع این ویروس ضروری است. روش‌های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویرو أکثرسابقه و هدف: با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان، اما گزارش‌هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت‌های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به‌موقع این ویروس ضروری است. روش‌های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویروس را ندارند. هدف از این پژوهش راه اندازی روش Real-time PCR با استفاده از ژن F ویروس سرخک می‌باشد. مواد و روش‌ها: این مطالعه با طراحی دو پرایمر و یک پروب راه اندازی و از ژن F کلون شده در داخل پلاسمید pET-22b(+) استفاده گردید. رقت‌های متوالی در مبنای 10 از پلاسمید استاندارد حاوی ژن آماده شد و منحنی استاندارد رسم گردید. جهت انجام پروژه از کیت Taq Man ساخت شرکت ABI استفاده گردید. یافته‌ها: حداقل 30 ذره ویروسی در هر واکنش مشخص گردید و در محدوده رقت‌های 4-10تا 9- 10 معادل ( 101×3- 106×3) نسخه بهترین حالت خطی برای منحنی استاندارد دیده شد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که تکنیک Real-time PCR می‌تواند به عنوان روشی بسیار اختصاصی و سریع برای تشخیص و تعیین تعداد ویروس سرخک از نمونه‌های حاوی این ویروس به‌کار رود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
307 - مقایسه برخی از فاکتورهای حدت اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک 99K با دو روش PCR و SDS-PAGE
یاسمین کیانی یحیی تهمتن محمد حسین حسینی معصومه حیاتیسابقه و هدف: اسهال ناشی از اشریشیاکلی 99K در گوساله‌ها به ویژه در نخستین روزهای پس از تولد، به علت تلفات و خسارات اقتصادی حاصله از اهمیت زیادی برخوردار است. در این مطالعه شیوع ژنهای عوامل بیماریزایی اشریشیاکلی 99 K با استفاده از تکنیک Multiplex PCR و سپس الگوی پروتئینی أکثرسابقه و هدف: اسهال ناشی از اشریشیاکلی 99K در گوساله‌ها به ویژه در نخستین روزهای پس از تولد، به علت تلفات و خسارات اقتصادی حاصله از اهمیت زیادی برخوردار است. در این مطالعه شیوع ژنهای عوامل بیماریزایی اشریشیاکلی 99 K با استفاده از تکنیک Multiplex PCR و سپس الگوی پروتئینی این باکتری ها با روش های مختلف بید، اوره و پودر شیشه با SDS- PAGE ارزیابی گردید. موادوروش ها: 300 سواب رکتوم از گوساله‌های 1 تا 30 روزه مبتلا به اسهال طی سال های 1390-1389 جمعآوری شد. یک بخش جهت انجام Multiplex PCR برای شناسایی ژنهای عوامل بیماریزایی 99K، 41F و STa استفاده گردید و بخش دیگر جهت کشت بر روی محیط‌های مختلف جهت جداسازی اشریشیا کلی و SDS-PAGE مورد استفاده قرار گرفت. یافته ها: نتایج PCR نشان داد از 200 اشریشیاکلی جداشده، 16مورد دارای ژنهای عوامل بیماریزایی 99K، 41 Fو STa میباشند و در هیچکدام از نمونه های جدا شده از گوساله ها سم حساس به حرارت LT))وجود نداشت. همچنین نتایج حاصل از SDS-PAGE نشان داد که الگوهای پروتئینی باکتری های مختلف اشریشیا کلی متفاوت می باشد. نتایج SDS-PAGE حاصل از ستون بیانگر وجود تنها یک باند مربوط به آنتی ژن 99K بود. نتیجه گیری: مشاهده فاکتورهای حدت باکتری های اشریشیا کلی 99K جدا شده نشان داد که همه باکتری ها حداقل دارای سه ژن 99K، 41F و Staمی باشند. با وجود این که از نظر مولکولی تفاوت معنی داری در بین نمونه ها مشاهده نشد. اما از نظر الگوی پروتئینی تفاوت های قابل ملاحظه ای در بین باکتری های جدا شده وجود داشت. بنابر این میتوان نتیجه گرفت که باکتری های متفاوت الگوهای پروتئینی مختلف و در نتیجه بیماریزایی متفاوتی دارند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
308 - تعیین گروه های فیلوژنتیک سویه های اشریشیا کلی عامل عفونت دستگاه ادراری درجنوب ایران
سارا اسعدی کاووس صلح جو محمد کارگر عباسعلی رضائیانسابقه و هدف: اشریشیا کلی عامل بیش از 80% از عفونت های ادراری در تمام گروه‌های سنی جامعه است. سویه های اشریشیاکلی به چهار گروه فیلوژنتیک تقسیم می شوند. اغلب جدایه های های بیماریزای خارج روده ای متعلق به گروه B2 وD هستند. هدف از این پژوهش، تعیین گروه های فیلوژنتیک اشریشیا أکثرسابقه و هدف: اشریشیا کلی عامل بیش از 80% از عفونت های ادراری در تمام گروه‌های سنی جامعه است. سویه های اشریشیاکلی به چهار گروه فیلوژنتیک تقسیم می شوند. اغلب جدایه های های بیماریزای خارج روده ای متعلق به گروه B2 وD هستند. هدف از این پژوهش، تعیین گروه های فیلوژنتیک اشریشیاکلی جدا شده از بیماران با عفونت ادراری در جنوب ایران بود. مواد و روشها: این پژوهش به صورت مقطعی _ توصیفی بر روی اشریشیاکلی جداشده از کشت ادرار بیماران مراجعه کننده به آزمایشگاه بیمارستان پیمانیه جهرم در سال 1389 انجام شد. از آزمون های بیوشیمیایی برای تعیین هویت باکتری های جداشده استفاده شد. سپس طبقه بندی گروه های فیلوژنتیک سویه های اشریشیاکلی با استفاده ازپرایمرهای اختصاصی ChuA وyjaA وTspE4.C2 و آزمون PCR انجام شد. یافته ها: از60 باکتری اشریشیاکلی شناسایی شده، 47 مورد (34/78%) مربوط به زنان و 13 مورد (76/21%) مربوط به مردان بود. شایع ترین گروه های فیلوژنتیک شناسایی شده D ،A و B1 به ترتیب با فراوانی70% ،3/23% و7/6 % بودند. اما درهیچ کدام از نمونه های مورد بررسی گروه B2 شناسایی نشد.همچنین بین گروه فیلوژنتیکی و متغیرهای سن، جنس، سابقه عفونت ادراری، سابقه مصرف آنتی بیوتیک و سابقه بستری شدن در بیمارستان ارتباط معناداری مشاهده نشد. نتیجه گیری: اشریشیاکلی جدا شده از عفونت های دستگاه ادراری در این منطقه، بیشتر متعلق به گروه فیلوژنتیک D بودند که در مقایسه با سایر مناطق از نظر نوع گروه فیلوژنتیکی متفاوت می باشند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
309 - ارزیابی میزان بقای فرم های غیر قابل کشت هلیکوباکتر پیلوری در نمونه های آب
پرستو چمن رخ محمد حسن شاه حسینی مهناز مظاهری اسدی طاهر نژاد ستاری داوود اسماعیلیهلیکوباکتر پیلوری عامل مهمی در ایجاد زخم های پپتیک و سرطان معده در انسان است. هنگامی که این باکتری در درون آب قرار می گیرد به فرم زنده اما غیرقابل کشت کوکوئید در می آید. این امر می تواند یکی از عوامل مهم انتقال آلودگی محسوب گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی میزان بقای فرم أکثرهلیکوباکتر پیلوری عامل مهمی در ایجاد زخم های پپتیک و سرطان معده در انسان است. هنگامی که این باکتری در درون آب قرار می گیرد به فرم زنده اما غیرقابل کشت کوکوئید در می آید. این امر می تواند یکی از عوامل مهم انتقال آلودگی محسوب گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی میزان بقای فرم های کوکوئید هلیکوباکتر پیلوری در نمونه های آب توسط روش های کشت و PCR انجام شد. این پژوهش به صورت تجربی بر روی 10 سویه هلیکوباکتر پیلوری جدا شده از نمونه های بالینی انجام گرفت. سویه های جدا شده به آب اضافه و در دماهای 4، 22 و 37 درجه سلیسیوس و به فواصل زمانی 1 و 2 ماه گرماگذاری شدند. در هر بار، نمونه ها بر روی محیط بروسلا بلاد آگار کشت داده شدند. پس از استخراج DNA، به منظور تکثیر ژن glmM از روش PCR استفاده گردید. همچنین حساسیت و اختصاصیت روش PCR مورد ارزیابی قرار گرفت. در مطالعه حاضر با استفاده از روش کشت در دمای 4 درجه در ماه اول هیچ فرم کوکوئیدی از باکتری در محیط کشت مشاهده نشد. اما درصد شناسایی باکتری در دمای 22 و 37 درجه سلیسیوس برابر با 10% و 20% بود. در ماه دوم نتیجه مثبتی تشخیص داده نشد. با استفاده از روش PCR مشخص گردید که این روش با حساسیت بیشتر نسبت به کشت در ماه اول و در دماهای 22، 4 و 37 درجهسلیسیوس به ترتیب قادر به شناسایی فرم های کوکوئید در 10%، 30% و 40% موارد هلیکوباکتر پیلوری بود. این گزارش در ماه دوم به صورت 0%، 20% و 30% بود. یافته های این مطالعه نشان می دهد که فرم های کوکوئید غیرقابل کشت هلیکوباکترپیلوری در آب، توسط روش های حساس، دقیق و اختصاصی مانند PCR قابل شناسایی می باشند. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
310 - Discrimination and preliminary selection of self-compatible progenies among controlled crosses in almond using Sf specific primer
M. Shahmoradi M. Rasouli R. Footuhi Ghazvini A. Imani Y. HamidogliSelf-incompatibility in almond and Prunus species is an important trait that prevents self-fertilization. Selfincompatibility in almond is controlled gametophytically by the multiallelic S-locus. Present study was done in order to identification and preliminary selectio أکثرSelf-incompatibility in almond and Prunus species is an important trait that prevents self-fertilization. Selfincompatibility in almond is controlled gametophytically by the multiallelic S-locus. Present study was done in order to identification and preliminary selection of self compatible progenies resulted from controlled crosses in almond using specific primer SfF/SfR. Some important morphological traits of parental crosses were evaluated using almond descriptor. Also, progenies (F1) of five crosses inculding; A (Tuono × 101 Genotype), B (Supernova × 101 Genotype), C (Genco × Shahrood 21), D (Tuono × Shahrood 12) and E (Tuono × shahrood 17) were tested using PCR in order to DNA amplification and self-compatibility evaluation. The result of PCR method found that using SfF/SfR pair primer, self-compatible progenies showed 449 bp bands, while this band not observed in self-incompatible progenies. In addition, all self- incompatible progenies appeared no S1 allele at any condition. According to Chi-square test, ratios of self-compatible to self-incompatible progenies were to Mendelian principles. It can be suggested that PCR method of this research has high potential in order to distinguish self-compatible and incompatible genotypes. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
311 - Study of Compatibility Relationships Among Some Almond Cultivars and Genotypes Using of SAlleles Identification
M. Fallah M. Rasouli Y. Sharaf A. ImaniAlmond (Prunus dulcis L.) is one of the most important nut crops in Iran. Most almond cultivars and genotypes are self-incompatible. However, research on S-alleles indicates that it is very efficient in cultivar selection. Selfincompatibility in almond is gametophytic a أکثرAlmond (Prunus dulcis L.) is one of the most important nut crops in Iran. Most almond cultivars and genotypes are self-incompatible. However, research on S-alleles indicates that it is very efficient in cultivar selection. Selfincompatibility in almond is gametophytic and controlled by a single S-locus with multiple codominant alleles. In this study, compatibility relationships among cultivars, “Tuono”, “Shokofeh”, “Sahand” and five improved genotypes “A1.16”, “A9.7”, “A8.39”,“A10.11” and “A230,” was investigated by the PCR of S-alleles. Degenerate primers (PaConsI-F, EMPC1consRD, EM-PC2consFD, and EM-PC3consRD) were used for amplification of S-alleles. Results showed that only “A10.11” and “A8.39” were completely cross-incompatible, but all of the other studied cultivars and genotypes were crosscompatible. Furthermore, cultivar “Tuono” and genotype “A1.16” had a self-fertility allele. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
312 - RAPD Analysis for Sex Determination in Pistacia vera L.
F. Kamiab A. Ebadi B. Panahi A. TajabadiRandom Amplified Polymorphic DNA (RAPD) analysis of Pistacia vera L. was used to distinguishing sex type in progeny plants. Varied genotypes of the pistachio were analyzed by PCR amplification of a ten base primer previously found to be linked to the expression of a 945 أکثرRandom Amplified Polymorphic DNA (RAPD) analysis of Pistacia vera L. was used to distinguishing sex type in progeny plants. Varied genotypes of the pistachio were analyzed by PCR amplification of a ten base primer previously found to be linked to the expression of a 945bp amplification band in female trees and its absence in males. Results revealed that genetic material from cultivar samples amplified well with relative primer, but some male progeny produced the 945bp band when amplified with the 10bp primer. Despite numerous subsequent tests for reamplification of the DNA, unfortunately, these male progeny failed to give reproducible results from its sample. None the less, presence of the 945bp amplification band in a male sample proved that an error rate of 15% is possible in sex determination of P. vera by RAPD analysis with the 10bp primer. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
313 - Genetic Diversity and Phylogenetic Study of Xanthomonas arboricola pv. juglandis the Causal Agent of Walnut Bacterial Blight Disease
M. Shami A. Ghasemi A. Alizade Ali-Abadi A. EskandariBacterial blight (Xanthomonas arboricola pv.juglandis) is one of the main diseases of walnut that reduce the yield in the central, western and northern regions of Iran. This disease was first reported form, Qazvin and Mazandaran, then widely reported from northern, cent أکثرBacterial blight (Xanthomonas arboricola pv.juglandis) is one of the main diseases of walnut that reduce the yield in the central, western and northern regions of Iran. This disease was first reported form, Qazvin and Mazandaran, then widely reported from northern, central and western provinces. To identify the cause of the disease in different provinces, infected leaves collected from Alborze, Lorestan and Kurdestan provinces during spring-summer . Based on the conventional methods of bacteriology, some strains purified and Pathogenicity was proved on three-year plant leaves and on detached fruits of walnut. Based on the biochemical and pathogenesity tests, the yellow colored colonies identified as Xanthomonas arboricola pv. juglandis. According to the results of cluster analysis model of the rep-PCR method, the strains were categorized in three groups with similarity. On the basis of the sequence of RNA polymerase, beta subunit and dendrogram of NJ method, the strains were differentiated in a separate category. Three strains ( , and ) were collected from Lorestan and Kordestan and completely separated from other Xanthomonas in independent group تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
314 - The Study of Morphological Traits and Identification of Self-incompatibility Alleles in Almond Cultivars and Genotypes
Mousa RasouliThe evaluation of an almond collection using morphological variables and identification of self-incompatibility genotype is useful for selecting pollinizers and for the design of crossing in almond breeding programs. In this study, important morphological traits and sel أکثرThe evaluation of an almond collection using morphological variables and identification of self-incompatibility genotype is useful for selecting pollinizers and for the design of crossing in almond breeding programs. In this study, important morphological traits and self-incompatibilities in 71 almond cultivars and genotypes were studied. Simple and multiplex specific PCR analyses were used in order to identify self-incompatibility alleles. Based on the results, cultivars and genotypes including ‘Dir Ras–e-Savojbolagh’, ‘D-124’, ‘D-99’, ‘Shahrood 12’, ‘Tuono’, ‘Nonpareil’, ‘Price’, ‘Mirpanj-e-Tehran’, ‘Pakotahe-e- Taleghan’, ‘V-13-34’, ‘V-16-8, ‘V-11-10’, ‘Zarghan 10’, ‘Uromiyeh 68’, ‘Barg dorosht-e-Hamedan’ and ‘Yazd 60’ were late flowering and had the highest quality of nut and kernel characters. The result of the PCR method using combined primers AS1II and AmyC5R showed amplification of ten self-incompatibility alleles (S1, S2, S3, S5, S6, S7, S8, S10, S12,and S unknown allele) and three Sfalleles. Moreover, S1 had the highest frequencies in comparison with other known S-alleles. Also, unknown alleles with different sizes were detected and 58 new bands were found in some cultivars. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
315 - Identification of Self- incompatibility Alleles in Some Almond Genotypes by Degenerate S-RNase Primers
A. Kamareh Y. Sharafi A. GhanbariThe almond, Prunus dulcis Miller which belongs to Rosaceae family, is one of the most important commercial and oldest cultivated tree nut crops. Almonds are classified as a ‘nut’ in which the edible seed is the commercial product. Therefore, pollination and أکثرThe almond, Prunus dulcis Miller which belongs to Rosaceae family, is one of the most important commercial and oldest cultivated tree nut crops. Almonds are classified as a ‘nut’ in which the edible seed is the commercial product. Therefore, pollination and fertilization are necessary in almond. The characteristic of cultivated almond to express gametophytic self- incompatibility discourages self-fertilization and favors cross pollination. Genetic control of pollen-pistil self-incompatibility is through a single gene (S) which exists in a series of alleles S1 to Sx. Compatibility of pollen-pistil in almond is an important consideration in planning crosses in breeding program and in choosing pollinizers for orchard planting. Identification of self-(in) compatibility in almond carried out by molecular and controlled pollination methods. In this study, identification of S-alleles in 37 Iranian almond cultivars and genotypes was carried out by PCR method with using degenerate primers of EM-PC3consRDEMPC2cons FD, PaconsI-Fand EM-PC1consRD. In this way the size of S -alleles were estimated based on bands which amplified with second intron. The results confirmed self-incompatibility in cultivars and most genotypes. However, the Sf-like allele (in size) was observed in A9 and A36 genotypes. If these results are confirmed by sequencing the Sf allele, it will be first time to identify self-compatible genotype in Iranian almond genotypes. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
316 - Investigation of Cosenza Mutation in Patients with Deficiency of Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase (G6PD) in North West of Iran
Omolbanin Javadi omoalbanin Javadi Habib Onsori habib onsoriGlucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) is a greatly polymorphic enzyme encoded by human X-linked gene. G6PD deficit is the most public enzymopathy in human with about 400 million people affected globally. It is the main controlling enzyme in the hexose monophosphate s أکثرGlucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) is a greatly polymorphic enzyme encoded by human X-linked gene. G6PD deficit is the most public enzymopathy in human with about 400 million people affected globally. It is the main controlling enzyme in the hexose monophosphate shunt catalase the oxidation of glucose-6-phosphate to 6-phosphogluconolacton and the creation of reducing equals in the form of NADPH to meet the cellular redox formal and its absence origin hemolytic anemia - favism and newborn jaundice. Mutation in this enzyme cause three major types of unusual phenotype, including Mediterranean, Chatham and Cosenza. In this study, by Rapid Genomic DNA Extraction (RGDE) method, from 90 blood samples of unrelated male and female patients with genetic deficiency of G6PD, DNA was removed and next digestion by Eco81I enzymes, in order to research for Cosenza mutation, they were analyzed by means of PCR-RFLP. Sequencing methods were used. Of 90 patients, one patient had a Cosenza mutation frequency of 1.01%. Eighty-nine patients (98.99%) were not affected by the Cosenza-type mutation. Accordingly, Cosenza mutation is not regarded as the most common mutation in Iranian North-west population.   تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
317 - The Prevalence of Salmonella Enteritidis in Packaged and Tray Eggs Samples, Qazvin, Iran
Zahra Rahimi Razzagh Mahmoudi Peyman Ghajarbeyg Shaghayegh Mosavi Ali MehrabiSalmonella serotypes are considered as one of the most important foodborne pathogens. Eggs are a main source of the contamination caused by these pathogens and diseases in humans and the prevalence of the salmonellosis. This study was aimed to isolate Salmonella enterit أکثرSalmonella serotypes are considered as one of the most important foodborne pathogens. Eggs are a main source of the contamination caused by these pathogens and diseases in humans and the prevalence of the salmonellosis. This study was aimed to isolate Salmonella enteritidis from industrial eggs collected from different areas of Qazvin city, Iran in the year 2020.In this cross-sectional study, 200 eggs were collected randomly (including 100 industrial packaged eggs and 100 industrial tray eggs) from the retail and stores located in Qazvin city, Iran. After culturing of eggshells and egg contents according to the classic methods, suspected colonies were confirmed by PCR assay. Salmonella was detected in 10% (4/40) among the egg samples. Salmonella was isolated from 0% (0/40) and 10% (4/40) of eggshells and egg contents, respectively. Isolates from positive egg samples were characterized as S. Typhimurium.Salmonella Typhimurium is the most prevalent serotype of egg contamination in Qazvin city, Iran. It can be regarded as the risk evaluation of possible human foodborne diseases associated with the consumption of contaminated eggs. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
318 - The Prevalence of Clostridium difficile and Clostridium perfringens in Minced and Ground Beef in Iran
Samaneh Hassani Razzagh Mahmoudi Ata Kabudari Peyman Ghajarbeygi Amir Peymani Shagahyegh Moosavi Saeed ShahsavariIn this study, due to the importance of human societies, the prevalence of Clostridium difficile and Clostridium perfringens in minced and ground beef was investigated in Qazvin city, Iran. All samples were collected randomly by sampling method. The number of samples ta أکثرIn this study, due to the importance of human societies, the prevalence of Clostridium difficile and Clostridium perfringens in minced and ground beef was investigated in Qazvin city, Iran. All samples were collected randomly by sampling method. The number of samples taken was estimated based on statistical methods and according to previous studies. Clostridium difficile moxalactam norfloxacin (CDMN) culture media was used to isolate Clostridium difficile and TCS Agar and TPGY culture media was used for Clostridium perfringens. After isolation, a PCR (Polymerase Chain Reaction) test was used to confirm the species diagnosis. According to the results, 21.26% of all samples were infected with these two bacteria. The prevalence of Clostridium perfringens (18.04%) was significantly (p < 0.05) higher than Clostridium difficile (3.22%). Given the results and the pathogenicity of Clostridium species, especially Clostridium difficile and Clostridium perfringens, special attention should be paid to the methods reducing the contamination of these pathogenic bacteria in raw food. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
319 - تعیین جمعیت نسبی سالمونلا در دستگاه گوارش طیور با استفاده از روش PCR
علیرضا صیداویاین تحقیق با هدف تعیین جمعیت نسبی باکتری های جنس سالمونلا در بخش های مختلف دستگاه گوارش طیور با استفاده از روش PCRانجام گردید.محتویات گوارشی جوجه ها خارج و DNAمربوطه استخراج شد. از واکنش زنجیره ای پلیمراز و شیوه PCRبرای بررسی جمعیت نسبی این باکتری استفاده گردید. با استف أکثراین تحقیق با هدف تعیین جمعیت نسبی باکتری های جنس سالمونلا در بخش های مختلف دستگاه گوارش طیور با استفاده از روش PCRانجام گردید.محتویات گوارشی جوجه ها خارج و DNAمربوطه استخراج شد. از واکنش زنجیره ای پلیمراز و شیوه PCRبرای بررسی جمعیت نسبی این باکتری استفاده گردید. با استفاده از یک آغازگر اختصاصی، باند اختصاصی مربوط به این باکتری و با استفاده از یک آغازگر عمومی باند اختصاصی کل باکتری های دستگاه گوارش به دست آمد. سپس به کمک تکنیک PCR، جمعیت نسبی باکتری های جنس سالمونلا نسبت به کل باکتری های دستگاه گوارش تعیین گردید. تجزیه و تحلیل نتایج حاصل نشان داد که از کل باکتری های دوازدهه و ژئوژنوم به ترتیب 12/0 و 11/0 درصد متعلق به جنس سالمونلا بودند. همچنین از کل باکتری های موجود در ایلئوم و روده کور هم به ترتیب 16/0 و 39/0 درصد کل باکتری ها از گروه سالمونلاها بودند. علاوه بر این در چهار، چهارده و سی روزگی، به ترتیب 38/0، 18/0 و 06/0 درصد کل باکتری های دستگاه گوارش جوجه ها، باکتری های جنس سالمونلا بودند. علاوه بر این معلوم شد در چهار روزگی در دوازدهه، ژوژنوم، ایلئوم و روده کور به ترتیب 28/0، 11/0، 16/0 و 91/0 درصد کل باکتری ها از جنس سالمونلا بودند. بنابراین می توان بیان کرد جمعیت نسبی این باکتری ها در بخش های تحتانی روده (ایلئوم و روده کور) نسبت به بخش های فوقانی روده باریک بیشتر است. نتایج حاصل نشاندهنده متغیر بودن جمعیت باکتری های جنس سالمونلا در بخش های مختلف دستگاه گوارش طیور بود که با عملکرد، وظایف و محیط فیزیکوشیمیایی این بخش ها مرتبط است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
320 - جداسازی و شناسایی باکتری های کوکسی شکل بیماری زا در ماهیان قزل آلای رنگین کمانی در مزارع پرورشی شمال غرب استان فارس با استفاده از روش های کشت و PCR
فرشید کفیل زاده یلدا بناکار ایرج نامدارییکی از بیماری هایمهم در آبزی پروری بیماری استرپتوکوکوزیس/ آنتروکوکوزیس است که یک بیماری عفونی سپتی سمیک ناشی از کوکسی های گرم مثبتدر ماهیان آب های شیرین و شور بوده و در چند دهه اخیر خسارات اقتصادی جبران ناپذیری را به بار آورده است. از جمله باکتری های مهم، لاکتیک اسید با أکثریکی از بیماری هایمهم در آبزی پروری بیماری استرپتوکوکوزیس/ آنتروکوکوزیس است که یک بیماری عفونی سپتی سمیک ناشی از کوکسی های گرم مثبتدر ماهیان آب های شیرین و شور بوده و در چند دهه اخیر خسارات اقتصادی جبران ناپذیری را به بار آورده است. از جمله باکتری های مهم، لاکتیک اسید باکتری ها هستند که مزارع پرورشی را مورد هجوم قرار داده و تلفات سنگینی را به جای می گذارند. هدف از این پژوهش شناسایی کوکسی های گرم مثبت بیماری زا در مزارع پرورشی قزل آلای رنگین کمانیی در قسمت شمال غربی استان فارس با استفاده از روش های کشت و PCRاست. از مزارع مشکوک به بیماری تعداد 90 نمونه ماهی قزل آلای رنگین کمانی برداشته شد. پس از بررسی و ثبت مشخصات بالینی ماهیان بیمار و تلف شده، از اندام داخلی که شامل بافت کلیه ماهیان بیمار می باشد نمونه برداری و با انجام کشت و تست های بیوشیمیایی لازم شناسایی باکتری ها صورت گرفت. در مرحله بعدی جهت تعیین نوع آنتی بیوتیک موثر بر باکتری های شناخته شده، تست آنتی بیوگرام صورت گرفت. در نهایت با استفاده از روش مولکولیPCR بر پایه ژن 16srRNAشناسایی باکتری ها انجام شد.از بین 43 نمونه که کوکسی گرم مثبت شناخته شدند، 3 گونه باکتری شامل 6/4 درصد استرپتوکوکوس اینیایی، 3/23 درصد لاکتوکوکوس گارویه آ و 1/72 درصد استرپتوکوکوس میلری تشخیص داده شدند. نتایج تست PCRنشان داد کهباکتری های شناخته شده جزو باکتری های لاکتیک اسید بوده که باعث ایجاد بیماری در ماهیان می شوند. با توجه به اینکه بیماری مذکور از لحاظ اقتصادی و مشترک بودن بین انسان و آبزیان بسیار مهم می باشد لذا شناسایی و درمان این عوامل عفونی حائز اهمیت است.از آنجا که علائم بالینی تمامی باکتری های مسبب بیماری بسیار شبیه بوده و با استفاده از روش های بیوشیمیایی امکان تشخیص نادرست وجود دارد بنابراین دقیق ترین روش ممکن استفاده از روش مولکولی PCRاست. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
321 - بررسی مقاومتهای دارویی در بیماران مبتلا به سل با استفاده از تکنیک Real Time PCR
محیا موسوی هادی امراللهیسل یک بیماری واگیردار بوده و عامل آن مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است. مقاومت به دو داروی اصلی ایزونیازید و ریفامپین را مقاومت چند دارویی سل (MDR-TB) می‌نامند. این مطالعه به بررسی گونه آلوده کننده بیماران استان سمنان از طریق بررسی حضور یا عدم حضور قطعه IS6110در نمونه ها و أکثرسل یک بیماری واگیردار بوده و عامل آن مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است. مقاومت به دو داروی اصلی ایزونیازید و ریفامپین را مقاومت چند دارویی سل (MDR-TB) می‌نامند. این مطالعه به بررسی گونه آلوده کننده بیماران استان سمنان از طریق بررسی حضور یا عدم حضور قطعه IS6110در نمونه ها و همچنین بررسی وجود مقاومت یا عدم وجود آن در نمونهها نسبت به دو آنتی بیوتیک ریفامپین و ایزونیازید از طریق تکنیک Real Time PCRپرداخته است.نمونه های بزاق جمعاوری شده از بیماران مسلول در محیط کشت L-Jکشت داده شدند و سپس استخراج DNAاز باکتریها با استفاده از تکنیک CTABانجام شد و نمونه ها جهت تعیین مقاومت یا عدم مقاومت از طریقReal Time PCR مورد بررسی قرار گرفتند. همچنین نمونه ها با استفاده از تکنیک PCRمعمولی با استفاده از پرایمر اختصاصی IS6110جهت تعیین توبرکلوزیس بودن یا نبودن مورد بررسی قرار گرفتند. از 21 نمونه بالینی مورد مطالعه، 17 مورد مایکوباکتریوم توبر کلوزیس و 4 مورد غیرتوبرکلوزیس بودند همچنین تمامی نمونه ها حساس به آنتیبیوتیک تشخیص داده شدند. با کمک تکنیک تشخیصی Real Time PCRبررسی ژنهای مربوط به مقاومت آنتی بیوتیکی در کوتاهترین زمان ممکن (کمتر از یک روز) و با دقت و اختصاصیت بالا در همان بدو تشخیص بیماری انجام می پذیرد، در این تحقیق خوشبختانه تمامی نمونه های بالینی حساس به دو آنتی بیوتیک ریفامپین و ایزونیازید بودند که از علل احتمالی این امر میتوان بهکنترل موفق این بیماری توسط مراکز درمانی از طریق معاینات پی درپی بیماران و همچنین امار کم مهاجرین در این استان اشاره کرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
322 - تاثیر نانوالیاف ژلاتین آلوئه ورا بر بیان ژن کلاژن І در پوست موش نر آزمایشگاهی پس از میکرونیدلینگ
اسداله شهرانی مریم بنانج پروین منصوری هنگامه علی بیک ناهید نیکخواهپوست در معرض جراحات و صدمات مکانیکی است و با افزایش سن، کلاژن پوست دچار تغییرات می گردد. در ترمیم و جوان سازی پوست، از گیاهان دارویی و ژل آلوئه ورا به صورت تجربی و سنتی، استفاده می شود. در این مطالعه به تاثیر نانوالیاف ژلاتین آلوئه ورا بر بیان ژن کلاژن І پس از میکرو أکثرپوست در معرض جراحات و صدمات مکانیکی است و با افزایش سن، کلاژن پوست دچار تغییرات می گردد. در ترمیم و جوان سازی پوست، از گیاهان دارویی و ژل آلوئه ورا به صورت تجربی و سنتی، استفاده می شود. در این مطالعه به تاثیر نانوالیاف ژلاتین آلوئه ورا بر بیان ژن کلاژن І پس از میکرونیدلینگ در پوست موش نر آزمایشگاهی پرداخته شد. این مطالعه، در شرایط آزمایشگاهی استاندارد انجام گرفت، موش های تحت آزمایش، میکرونیدلینگ شدند. گروه ها به مدت 48 ساعت، تحت تاثیر تیمارهای، سالین، ژل آلوئه ورا و نانوالیاف ژلاتین- آلوئه ورا قرار گرفتند. پس از نمونه برداری و تخلیص RNA بافتی، میزان بیان ژن کلاژن Іبه روشReal time PCR مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج بدست آمده نشان داد: به علت جراحت پوستی، بیان ژن کلاژن І در گرو ه های تحت آزمایش نسبت به گروه شاهد، کاهش معنا دار داشت. اما تیمار با ژل آلوئه ورا و نانوالیاف ژلاتین آلوئه ورا، باعث افزایش معنا دار بیان ژن کلاژن І، نسبت به گروه مدل شد. میکرونیدلینگ باعث تحریک پوست شد. گلومانان موجود در نانو الیاف به صورت تدریجی آزاد شده و با عبور از منافذ ریز پوست، با تاثیر بر مسیر MAP/ERK باعث کاهش التهاب و افزایش بیان ژن کلاژنІ در محل جراحت شد.این روش افزایش کلاژن پوست، باعث ترمیم و فرآیند جوان سازی پوست می گردد.. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
323 - تشخیص ژن B1 توکسوپلاسما گوندی در گوسفندان کشتار شده اصفهان با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز آشیانه ای
حمید رئیس زاده عبدالله جمشیدی وحید نعمان غلامرضا رزمیتوکسوپلاسما گوندی یکی از عوامل بیماریزای مشترک انسان و دام است که با منشأ غذا می تواند انسان را آلوده کند. در ایران مصرف گوشت گوسفند نسبت به سایر منابع پروتئین حیوانی از محبوبیت بیشتری برخوردار است. ازآنجایی‌که معمولاً قلب گوسفند به‌صورت نیم پز و کبابی مصرف میشود انتق أکثرتوکسوپلاسما گوندی یکی از عوامل بیماریزای مشترک انسان و دام است که با منشأ غذا می تواند انسان را آلوده کند. در ایران مصرف گوشت گوسفند نسبت به سایر منابع پروتئین حیوانی از محبوبیت بیشتری برخوردار است. ازآنجایی‌که معمولاً قلب گوسفند به‌صورت نیم پز و کبابی مصرف میشود انتقال توکسوپلاسما از طریق مصرف قلب گوسفند بیشتر رخ می دهد. از طرفی با توجه به اینکه تراکم کیست های انگل در بافت مغز و قلب بیشتر از سایر ارگانهای خوراکی است، در این مطالعه از نمونههای قلب گوسفندان استفاده‌شده است. در مطالعه اخیر بهمنظور ردیابی توکسوپلاسما در قلب گوسفندان کشتار شده در اصفهان 250 نمونه قلب گوسفند در طی یک سال در فصول مختلف از جنس و سن‌های متفاوت جمعآوری شد و پس از استخراجDNA انگل، با دو جفت پرایمر مربوط به ژن B1 به شناسایی این انگل با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز آشیانه ای پرداخته شد. نتایج نشان داد 78% نمونهها به‌طورکلی آلوده به توکسوپلاسما گوندی بودند. در این مطالعه رابطه معنیداری بین درصد آلودگی و سن و جنس وجود نداشت اما میزان آلودگی در فصول سرد به‌طورمعنی‌دار بیشتر از فصول گرم بود. از آنجا که بقای این انگل در برودت هوا و رطوبت بالا بیشتر می باشد بنابراین در فصول سرد امکان مواجه گوسفندان با اووسیست انگل افزایش یافته و آلودگی در فصول سرد بیشتر است. با توجه به نقش این بیماری در تلفات و سقطجنین گوسفند و اهمیت بهداشت عمومی آن، باید برنامههای کنترلی مناسب جهت پیشگیری از این بیماری مشترک در سطح استان در سیاست‌های دامپزشکی گنجانده شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
324 - بررسی بیان ژنSCAMP5 وmiR هدف آن در بافت بیماران گلیوبلاستوما مولتی‌فرم
نسرین کریمی حمیدرضا خیری منجیلی وجیهه زرین پور محمدمهدی فرقانی فردگلیوبلاستومامولتی فرم (GBM) یکی از بدخیم ترین و رایج ترین تومورهای مغزی است و پس از درمان ترکیبی فعلی، بقای بیمار نسبتاً ضعیف است و این بیماری همواره کشنده است. هدف ازاین مطالعه بررسی بیانSCAMP5 به عنوان بیومارکر احتمالی در گلیوبلاستوما مولتی فرم و بررسی miR هدف این ژن أکثرگلیوبلاستومامولتی فرم (GBM) یکی از بدخیم ترین و رایج ترین تومورهای مغزی است و پس از درمان ترکیبی فعلی، بقای بیمار نسبتاً ضعیف است و این بیماری همواره کشنده است. هدف ازاین مطالعه بررسی بیانSCAMP5 به عنوان بیومارکر احتمالی در گلیوبلاستوما مولتی فرم و بررسی miR هدف این ژن می باشد. در این مطالعه 50 نمونه بافت مبتلا به گلیوبلاستوما مولتی فرم قبل از درمان و 50 نمونه بافت سالم حاشیه تومور GBM به عنوان نمونه کنترل جمع آوری شد. برای تمام نمونه ها، استخراج RNA و سنتز cDNA صورت گرفت. بیان ژن SCAMP5 با استفاده از روشReal-time PCR بررسی شد و از ژنACTB به عنوان کنترل داخلی استفاده شد. تجزیه وتحلیل آماری داده ها با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism نسخه8 انجام شد. برای بررسی ارزش بیومارکری ژن SCAMP5 از منحنیRoc استفاده شد. کاهش بیان ژن SCAMP5 در نمونه های گلیوبلاستوما مولتی فرم مشاهده شد و بیان آن با مشخصات پاتولوژی بیماران مقایسه شد. بیان ژن SCAMP5 با سن بیماران با 05/0 p ˂از لحاظ آماری معنادار بود و بیان ژن با جنسیت با 005/0 p ˃از لحاظ آماری معنادار نمی باشد. SCAMP5 در بافت توموری بیماران مبتلا بهGBM به مراتب کمتر از بافت سالم اطراف تومور بیان شده بود. نتایج نشان داد که در بیمارانی با سن بیشتر از 50 سال میزان بیان ژن SCAMP5 کاهش یافت. بررسی منحنی ROC نشان داد که ژن SCAMP5 می تواند دارای ارزش بیومارکری باشد. با توجه به این بررسی شاید بتوان از بیان این ژن به عنوان مارکر یک راه تشخیصی زودهنگام استفاده کرد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
325 - بررسی تغییرات بیان ژن SMC4 در بافت بیماران مبتلا به گلیوبلاستوما مولتی فرم
عطیه توکلی حمیدرضا خیری منجیلی وجیهه زرین پور محمدمهدی فرقانی فردگلیوبلاستوما مولتی فرم (که به آن گلیوبلاستوما، GBM یا آستروسیتومای درجه چهار نیز گفته می شود) یک سرطان غیرمعمول است و بیش از نیمی از تومورهای بدخیم مغزی اولیه تشخیص داده شده را تشکیل می دهد. بررسی بیان ژن های دخیل در گلیوبلاستوما می تواند در تشخیص زودهنگام موثر باشد، از أکثرگلیوبلاستوما مولتی فرم (که به آن گلیوبلاستوما، GBM یا آستروسیتومای درجه چهار نیز گفته می شود) یک سرطان غیرمعمول است و بیش از نیمی از تومورهای بدخیم مغزی اولیه تشخیص داده شده را تشکیل می دهد. بررسی بیان ژن های دخیل در گلیوبلاستوما می تواند در تشخیص زودهنگام موثر باشد، از این رو به اهمیت بالینی و نقش بیولوژیکی رونوشت ژن SMC4 در سرطان گلیوبلاستوما که ناشناخته است پرداختیم. در مطالعه حاضر، 50 نمونه بافت سالم حاشیه تومور گلیوبلاستوما عنوان گروه کنترل استفاده شد و 50 نمونه بافت گلیوبلاستوما به عنوان گروه بیمار، قبل از درمان به دست آمد. استخراج RNA و سنتز cDNA انجام شد. سطح بیان SMC4توسط qRT-PCR ارزیابی شد. ACTB به عنوان کنترل داخلی استفاده شد. تجزیه و تحلیل آماری توسط GraphPad Prism v.8.0.1 انجام شد. منحنی ROC رسم شد. بیان بیش از حد SMC4 (0001/0P****<) در نمونه های بافت گلیوبلاستوما در مقایسه با بافت سالم حاشیه تومور قابل توجه است. در حالی که در سن (7507/0P<) و جنس (2270/0P<) بیان معنی داری مشاهده نشد. افزایش بیان ژن SMC4 می تواند نقش مهمی در سرطان گلیوبلاستوما داشته باشد. کار ما دیدگاه جدیدی در رونوشت ژن SMC4 با توجه به آنالیز منحنی ROC به عنوان یک مارکر زیستی فراهم می کند، اما نیاز به مطالعه بیشتری دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
326 - اثر بازدارنده رشد تایموکوئینون بر سلولهای سرطانی راجی در لنفوم بورکیت
مرتضی داودی شهریار سعیدیان رضا صغیری زهرا زمانی غلامرضا بخشی خانیکیگیاهان دارویی به علت ارزانی و قابل دسترس بودن و پذیرش بهتر بیماران، مورد توجه هستند. یکی از این گیاهان سیاه دانه (Nigella sativa) است. در این مطالعه اثر ضد تکثیری تایموکوئینون که ترکیب اصلی روغن دانه های سیاه دانه است، بر روی رده‌ی سلولهای راجی بررسی می شود. سلولهای ر أکثرگیاهان دارویی به علت ارزانی و قابل دسترس بودن و پذیرش بهتر بیماران، مورد توجه هستند. یکی از این گیاهان سیاه دانه (Nigella sativa) است. در این مطالعه اثر ضد تکثیری تایموکوئینون که ترکیب اصلی روغن دانه های سیاه دانه است، بر روی رده‌ی سلولهای راجی بررسی می شود. سلولهای راجی لنفوسیت‌های B سرطانی هستند که در لنفوم بورکیت در مراکز زایای این سلولها دیده می شوند. در تحقیق حاضر، سلولهای راجی با رقت های مختلف تایموکوئینون از صفر تا 1000 میکروگرم در میلی لیتر تیمار شدند و تعیین درصد سلولهای زنده با روش تریپان بلو و تست MTT صورت گرفت. همچنین جهت نشان دادن درصد سلولها در مراحل مختلف رشد از روش فلوسایتومتری و کیت Annexin V-FITC/PI استفاده شد. بیان ژن c-Myc که مهمترین ژن تغییر یافته در ایجاد لنفوم بورکیت است با روش Real Time - PCR مورد بررسی قرار گرفت. آنالیز آماری نیز با استفاده از نرم افزار SPSS 2020 انجام شد. این مطالعه نشان داد که تایموکوئینون می تواند بطور وابسته به غلظت و وابسته به زمان موجب مهار رشد سلولهای راجی شود. تایموکوئینون ضمن سرکوب بیان ژن c-Myc با درصد قابل توجهی موجب ورود سلولهای راجی به مرحله مرگ برنامه ریزی شده و یا آپوپتوز می شود و توان بالقوه در درمان های جانبی بیماری لنفوم بورکیت را دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
327 - بررسی تغییرات بیانLncRNA SNHG15 در بافت بیماران گلیوبلاستوما مولتی فرم با روش Real Time PCR
سحر شاکری یکتا الهام مسلمی سویار ساری فاطمه روح اله حمیدرضا خیریگلیوبلاستوما یک تومور بدخیم تهاجمی مغز و نخاع است. شواهد متعدد نقش انکوژنی مولکول های RNA طولانی غیرکدکننده (lncRNA) را در طیف گسترده ای از انواع سرطان ها از جمله گلیوما نشان می دهد و بسیار مهم است، با این حال، عملکرد تومورزایی lncRNA در گلیوم تا حد زیادی نامشخص است. شو أکثرگلیوبلاستوما یک تومور بدخیم تهاجمی مغز و نخاع است. شواهد متعدد نقش انکوژنی مولکول های RNA طولانی غیرکدکننده (lncRNA) را در طیف گسترده ای از انواع سرطان ها از جمله گلیوما نشان می دهد و بسیار مهم است، با این حال، عملکرد تومورزایی lncRNA در گلیوم تا حد زیادی نامشخص است. شواهد فزاینده نشان داده که lncRNA ها ازجمله LncRNA SNHG15، نقش مهمی در پاتوفیزیولوژی بیماری های انسانی، به ویژه در پاتوژنز و پیشرفت سرطان ها دارند. در این مطالعه 25 بلوک بافت پارافینه مبتلایان به گلیوبلاستوما مولتی فرم و بافت حاشیه توموری جمع آوری و استخراج RNA انجام شد. سنتز cDNA و بررسی بیان SNHG15 با تکنیک Real Time PCR انجام گرفت. منحنی ROC جهت بررسی ارزش بیومارکری رسم و تجزیه و تحلیل آماری توسط GraphPad Prism v.8.0.1 انجام شد. افزایش بیان بالای SNHG15 در نمونه بافت افراد بیمار نسبت به بافت حاشیه توموری به ثبت رسید (0001/0>p ) ارتباط معناداری در بیان این ژن، در بیماران با سنین بیش از 50 سال و کمتر از 50 سال (6573/0p =)، در لوب های پیشانی، گیجگاهی، آهیانه، پس سری (9802/0 p =)، بقا در بیش از 12 ماه و کمتر از 12 ماه (5007/0p =) مشاهده نشد و فقط در جنسیت زن و مرد ارتباط معنادار به ثبت رسید (0001/0p =). بیان LncRNA SNHG15 در بافت توموری بیماران مبتلا به گلیوبلاستوما مولتی فرم بیشتر از بافت حاشیه توموری به ثبت رسید. با بررسی منحنی ROC این احتمال می رود که LncRNA SNHG15 بتواند به عنوان مارکر زیستی مطرح شود اما نیاز به مطالعات بیشتری دارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
328 - بررسی پلی مورفیسم C23237T ژن Cyp3a4 در افراد سالم غرب مازندران از نظر سن و جنسیت
فاطمه حیدریان ویدا حجتی رضا گلیجانی مقدمCyp3a4 Cyp3a4 (سیتوکروم P450 3A4) یک آنزیم مهم در بدن است که عمدتاً در کبد و روده یافت می شود. مولکول های آلی کوچک خارجی مانند سموم یا داروها را اکسید می کند تا بتوان آنها را از بدن خارج کرد. از آنجا که مطالعات چندانی روی پلی مورفیسم های این ژن صورت نگرفته این مطالعه ب أکثرCyp3a4 Cyp3a4 (سیتوکروم P450 3A4) یک آنزیم مهم در بدن است که عمدتاً در کبد و روده یافت می شود. مولکول های آلی کوچک خارجی مانند سموم یا داروها را اکسید می کند تا بتوان آنها را از بدن خارج کرد. از آنجا که مطالعات چندانی روی پلی مورفیسم های این ژن صورت نگرفته این مطالعه به منظور بررسی پلی مورفیسم C23237T ژن Cyp3a4در افراد سالم مذکر و مونث هفت ماهه تا 79 ساله در غرب مازندران انجام شد. در این تحقیق، خون تام از افراد مذکر و مونث سالم شهرهای غرب استان مازندران دریافت شد. برای هر فرد اطلاعات مربوط به سن، جنس، سابقه فامیلی، مصرف الکل و دخانیات ثبت شد. در این بررسی از تکنیک ARMS-PCR استفاده شد. تجزیه و تحلیل داده ها با استفاده از نرم افزار SPSS 2016 و آزمون مربع کای انجام شد. در جمعیت مورد مطالعه 50 نفر مونث و 38 نفر مذکر بودند. نتایج نشان داد در جنس مونث، 33 نفر دارای ژنوتیپ هتروزیگوت با درصد فراوانی 66 درصد، 11 نفر دارای ژنوثیپ هموزیگوت غالب با درصد فراوانی 22 درصد، 5 نفر دارای ژنوتیپ هموزیگوت مغلوب با درصد فراوانی 10 درصد و 1 نفر فاقد جهش با درصد فراوانی 2 درصد بودند. در جنس مذکر، 22 نفر دارای ژنوتیپ هتروزیگوت با فراوانی 89/57 درصد، 5 نفر دارای ژنوتیب هموزیگوت غالب با درصد فراوانی 15/13 درصد، 8 نفر دارای ژنوتیپ هموزیگوت مغلوب با درصد فراوانی 05/21 درصد و 3 نفر فاقد جهش با درصد فراوانی 89/7 درصد بودند. از نظر جنسیت هم در جنس مونث و هم در جنس مذکر ژنوتیپ هتروزیگوت بالاترین درصد فراوانی را به خود اختصاص داد. همچنین بین پلی مورفیسم C23237Tژن Cype3a4 با سن افراد (81/0 = p) و با جنسیت افراد (845/0 = p) ارتباط معناداری وجود ندارد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
329 - آنالیز مولکولی و تبدیل میکوتوکسین دی اکسی نیوالنول به فرم 3- استیل در 20 رقم گندم دوروم خوزستان از طریق تکنیک PCR و تعیین ژن مقاومت AYT1
سید سعید نوری نیا ندا باغستانیاین پژوهش به منظور ارزیابی واکنش 20 توده گندم دوروم بومی خوزستان، موجود در کلکسیون بخش تحقیقات غلات مؤسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر نسبت به بیماری بلایت فوزاریومی سنبله طی دو سال زراعی 96-1395 و 98-1397 در شرایط مزرعه در دو منطقه‌ی مختلف، خوزستان، با دو شرایط آب و أکثراین پژوهش به منظور ارزیابی واکنش 20 توده گندم دوروم بومی خوزستان، موجود در کلکسیون بخش تحقیقات غلات مؤسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر نسبت به بیماری بلایت فوزاریومی سنبله طی دو سال زراعی 96-1395 و 98-1397 در شرایط مزرعه در دو منطقه‌ی مختلف، خوزستان، با دو شرایط آب و هوایی، اجرا گردید. صفات مورد مطالعه شامل خوشه‌‌های آلوده، آلودگی سنبلچه، آلودگی بذر، تراکم خوشه، ارتفاع بوته و عملکرد بیولوژیک بود که به منظور اندازه گیری و تعیین فواصل ژنتیکی و نیز الگو پذیری تنوع در اجزاء مقاومت به فوزاریوم سنبله گندم، از روش تجزیه خوشه‌ای استفاده شد. ارزیابی توده‌های آزمایشی با استفاده از روش اسپورپاشی در مزرعه نشان داد که بیشتر توده‌های مورد بررسی، از نظر میانگین شاخص بیماری از مقاومت مطلوبی در برابر بیماری برخوردار هستند. به نظر می‌رسد که علت مقاومت اساس ژنتیکی داشته و به وجود مقاومت نوع I در آنها مربوط میشود. از بیست رقم گندم دوروم مورد بررسی میتوان به عنوان والدهای مقاوم به بیماری در تلاقی‌های مربوط به برنامههای اصلاح گندم استفاده نمود، نتایج نشان داد، که ژن AYT1 در ارقام گندم مورد بررسی به عنوان ژن مقاوم، بیان میشود همچنین با استفاده و معرفی تکنیک PCRو استفاده از نشانگرهای ملکولی SSR در این تحقیق به منظور تکثیر یک نسخه منفرد یا نسخه‌های کمی از یک قطعه DNA با توالی خاص به تعداد هزار یا میلیون‌ها نسخه، جهت دستیابی به ماهیت ژنتیکی ارقام میتوان این روش را به عنوان روش مطلوب جهت ثکثیر ژنهای مقاوم در این پژوهش معرفی نمود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
330 - مطالعه ژنهای Spicو rfbjBدر سویههای سالمونلا جدا شده از روده طیور در کشتارگاههای شهرستان ساری
میترا صالحی سمیه محمدیسالمونلا باکتری گرم منفی میباشد که قادر به ایجاد عفونت در طیف وسیعی از و حیوانات مزرعه مانند گاو، مرغ، خوک، خزندگان و انسان است که از طریق مواد غذایی آلوده قابل انتقال به انسان میباشد. در این مطالعه از روش PCRبرای تشخیص سالمونلا در روده مرغ استفاده شد. در این پژوهش، 10 أکثرسالمونلا باکتری گرم منفی میباشد که قادر به ایجاد عفونت در طیف وسیعی از و حیوانات مزرعه مانند گاو، مرغ، خوک، خزندگان و انسان است که از طریق مواد غذایی آلوده قابل انتقال به انسان میباشد. در این مطالعه از روش PCRبرای تشخیص سالمونلا در روده مرغ استفاده شد. در این پژوهش، 100نمونه روده مرغ بعد کشتار از مرغداریهای اطراف شهرستان ساری تهیه گردید. همه نمونهها با استفاده از آزمایشهای میکروبی و بیوشیمیایی مورد بررسی قرار گرفت. DNAنمونهها به وسیله کیت MBSTاستخراج و PCRبا استفاده از پرایمرهای اختصاصی مربوط به ژنهای Spicو rfbjBانجام گردید. نتایج روش کشت و آزمایشهای بیوشیمیایی بر روی 100نمونه روده مرغ جمع آوری شده، 30نمونه سالمونلا شناسایی و تشخیص داده شد. بررسی نتایج بر روی 30نمونه سالمونلا، حضور ژنهای اختصاصی rfbjBو SpiCرا 50و 100درصد نشان داد. نتایج این بررسی نشان دادکه با توجه به طولانی بودن روشهای مرسوم کشت، واکنش زنجیرهای پلی مراز میتواند یک شیوه تشخیصی دقیق و حساس و سریع در شناسایی و غربالگری باکتری سالمونلا باشد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
331 - شناسایی مولکولی باکتری های E.coliانتروتوکسیژنیک جدا شده از گوساله های مبتلا به اسهال استان البرز درسال1
هادی پورتقی شتربان وحید ده پهلوان علیرضا شقایق آریا بدیعیباکتری اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک ( )ETECمعمول ترین نوع کلی باسیلوز در گوساله هاست که باعث بروز اسهال می شود. مهمترین عوامل مرتبط بابیماری زایی ETECتوانایی چسبیدن به انتروسیت ها به خصوص از طریق فیمبریه K99و F41و تولید انتروتوکیسن های مختلف به خصوص انتروتوکسینمقاوم به ح أکثرباکتری اشریشیا کولی انتروتوکسیژنیک ( )ETECمعمول ترین نوع کلی باسیلوز در گوساله هاست که باعث بروز اسهال می شود. مهمترین عوامل مرتبط بابیماری زایی ETECتوانایی چسبیدن به انتروسیت ها به خصوص از طریق فیمبریه K99و F41و تولید انتروتوکیسن های مختلف به خصوص انتروتوکسینمقاوم به حرارت Stاست. در مطالعه حاضر حضور باکتری ETECدر بین E.coliهای جدا شده از موارد اسهال در گوساله های زیر یک ماه در استان البرزبررسی شد. برای این منظور مطالعه مولکولی بر روی سه ژن حدت K99، F41و Staمربوط به عوامل بیماری زای ETECطی دوره زمانی خرداد تا آذر 1389انجام گرفت. بر این اساس در بین E.coli 60جداسازی شده، شش مورد ( )%10باکتری ETECشناسایی شد. همه نمونه های مثبت از نظر سن، کمتر از یکهفته و پنج مورد ( )%83/3نیز سن کمتر از چهار روز داشتند. تمام ETECهای شناسایی شده واجد هر سه ژن حدت بودند تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
332 - ردیابی سروتیپ B/793ویروس برونشیت عفونی از گلههای گوشتی دارای علائم تنفسی در غرب مازندران
علیاوسط حسینیعلی آباد رضا ممیز محسن محمودزاده اصغر یوسفی امینبه منظور شناسائی سروتیپ B/793ویروس برونشیت عفونی در عفونتهای تنفسی گلههای گوشتی واقع در غرب مازندران در پاییز و زمستان 1389از11گله جوجه گوشتی که دارای علائم تنفسی بودند نمونه گیری از نای، ریه ها، کلیهها و لوزههای سکومی به عمل آمد. پس از تزریق نمونهها به تخم مرغجنین دار، أکثربه منظور شناسائی سروتیپ B/793ویروس برونشیت عفونی در عفونتهای تنفسی گلههای گوشتی واقع در غرب مازندران در پاییز و زمستان 1389از11گله جوجه گوشتی که دارای علائم تنفسی بودند نمونه گیری از نای، ریه ها، کلیهها و لوزههای سکومی به عمل آمد. پس از تزریق نمونهها به تخم مرغجنین دار، ابتدا از نظر خاصیت هماگلوتیناسیون ( )HAبرای ویروسهای NDو AIارزیابی شدند و نمونههای مثبت با آنتی سرم اختصاصی نیوکاسل وآنفلوانزا مجاور شده و از نظر وجود ویروس نیوکاسل یا آنفلوانزا به روش HIمورد بررسی قرار گرفتند. برای شناسائی ویروس برونشیت عفونی یک میلی لیترمایع آلانتوئیک از تخم مرغهای تلقیح شده برداشت شد و RNAویروس با استفاده از کیت تخلیص RNAاز مایع آلاتنوئیک استخراج شد و با پرایمرهایعمومی ویروس برونشیت عفونی به روش RT- PCRمورد شناسائی قرار گرفت و قطعهای از ژن S1با 464bpتکثیر شد. در ادامه محصول RT-PCRجهت شناسائی سروتیپهای ویروس برونشیت عفونی به روش Nested PCRبا پرایمراختصاصی سروتیپ های massو B/793مورد استفاده قرار گرفت.از مجموع نمونههای مثبت اخذ شده از مزارع طیور گوشتی، در واکنش RT-PCRبا پرایمر عمومی برونشیت عفونی 7مورد مثبت شدند و در واکنش5 ،Nested PCRمورد از نظر سروتیپ B/793مثبت شدند. با توجه به اینکه در گلههای مبتلا واکسن B/793مصرف نشده است، نمونهها از نطر آلودگیبا ویروس B/793به طور قطعی مثبت قلمداد شدند. از نمونههای مثبت در آزمایش HIیک مورد آلودگی به ویروس نیوکاسل و یک مورد نیز آلودگیبه ویروس آنفلوانزا مشاهده شد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
333 - شناسایی ژنهای انتروتوکسین Aو Bدر استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر خام و شیر ورم پستان گاوداریهای صنعتی استان تهران
سپیده ولی فرهاد موسی خانی آریا بدیعی علیرضا جمالی سمیرا قلمبردزفولیشیر به عنوان یک غذای مغذی در نظر گرفته میشود زیرا حاوی چندین ماده مغذی مهم از جمله پروتتئینها و ویتامینها است. در مقابل، شیر میتواندناقل چندین باکتری پاتوژن همچون استافیلوکوکوس اورئوس باشد. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس ( )Staphylococcus aureusیکی از مهمترین عواملمسمومیت أکثرشیر به عنوان یک غذای مغذی در نظر گرفته میشود زیرا حاوی چندین ماده مغذی مهم از جمله پروتتئینها و ویتامینها است. در مقابل، شیر میتواندناقل چندین باکتری پاتوژن همچون استافیلوکوکوس اورئوس باشد. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس ( )Staphylococcus aureusیکی از مهمترین عواملمسمومیت غذایی ( )FPدر محصولات لبنی میباشد. انتروتوکسینهای استافیلوکوکی ( )SEعامل اصلی ایجاد مسمومیت غذایی میباشد که از تیپهای مختلفیتشکیل شدهاند مهمترین آنها انتروتوکسینهای تیپ ( A(SEAو ( B(SEBمیباشد.هدف از این مطالعه شناسایی ژنهای انتروتوکسین Aو Bدر استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر خام و شیر ورم گاوداریهای صنعتی استان تهرانمیباشد. در این تحقیق 40نمونه شامل 20نمونه شیر خام و 20نمونه شیر ورم پستان در شرایط استریل به آزمایشگاه ارسال گردید. نمونهها از طریق روشهایباکتری شناسی مورد کشت و تشخیص قرار گرفت. باکتریهای جداشده برای تشخیص ژن کد کننده SEAو SEBبه وسیله آزمایشات PCRارزیابی شد.نتایج آزمایش PCRنشان داد که از میان استافیلوکوکهای جدا شده %25دارای ژن %15 ،SEAدارای ژن SEBهستند. از این روحرارت دادن هیچ تاثیریبر روی محصولات لبنی آلوده به انتروتوکسین و ورم معده که ممکن است در زمان کوتاه رخ بدهد، ندارد. در نتیجه PCRبه عنوان یک روش سریع، حساس،اختصاصی و ارزان قیمت پیشنهاد میشود که میتواند جایگزین خوبی برای روشهای قدیمی تشخیص SEباشد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
334 - تعیین میزان شیوع لپتوسپیرا در جنین های سقط شده گاوداریهای استان تهران به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز
آریا بدیعی فرهاد موسی خانی محمد ملکان محسن ظفریلپتوسپیروزیس یک بیماری زئونوز بوده که از طریق ایجاد عوارضی مانند سقط، مرده زایی، ناباروری، کاهش تولید شیر و... می تواندخسارات اقتصادی سنگینی به بار آورد. در این تحقیق تعداد 251نمونه جنین سقط شده ارجاعی از گاوداریهای صنعتی استان تهرانبه آزمایشگاه در مدت یکسال مورد بررسی أکثرلپتوسپیروزیس یک بیماری زئونوز بوده که از طریق ایجاد عوارضی مانند سقط، مرده زایی، ناباروری، کاهش تولید شیر و... می تواندخسارات اقتصادی سنگینی به بار آورد. در این تحقیق تعداد 251نمونه جنین سقط شده ارجاعی از گاوداریهای صنعتی استان تهرانبه آزمایشگاه در مدت یکسال مورد بررسی قرار گرفت. نمونه های مورد آزمایش شامل مخلوطی هموژن از بافتهای قلب، کلیه، کبد وطحال جنین بود. جهت استخراج DNAاز روش پروتئیناز Kاستفاده شد. سپس آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز ( )PCRبا استفاده ازپرایمرهای اختصاصی ژن s r RNA 16جهت شناسایی جنس لپتوسپیرا .( )Leptospira Sppانجام گرفت.. پس از PCRنمونه های دارایباند bp331در ژل الکتروفورزیس مثبت قلمداد گردیدند. شیوع تقریبی سقط جنین ناشی از لپتوسپیروزیس در استان تهران بطور میانگیندر طول سال %12/8و براساس فصل به ترتیب در بهار ،%15تابستان ،%9/08پائیز %10و زمستان %19/2بود. بر اساس نتایج بدست آمدهبیشترین شیوع در فصول بهار و زمستان می باشد که احتمالا ناشی از رطوبت بالاتر محیط و آبدوست بودن لپتوسپیرا و فعالیت بیشتر باکتریاست. بطور کلی با توجه به میانگین شیوع 12/8درصدی، یکی از مهمترین عوامل سقط در گاوداریهای صنعتی استان تهران لپتوسپیرا میباشد؛ در نتیجه افدام جهت کنترل و ریشه کنی این بیماری با توجه به زئونوز بودن و خسارات اقتصادی سنگین، بسیار ضروری است تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
335 - تعیین تیپ های 1و 2ویروس اسهال ویروسی گاوان در سرم گوساله های PIدر گاوداری های استان تهران به روش PCR Multiplex
فرهاد موسی خانی آریا بدیعی مهدی لقمانی علیرضا شقایق محسن ظفریبیماری مخاطی ( )MDو اسهال ویروسی گاو ( )BVDبیماری های ویروسی هستند که از نظر بالینی به هم شباهتی ندارند اما سبب شناسی ویروسییکسانی دارند. با توجه به اینکه در کشور ما هنوز تیپ های ویروس شناسایی نشده اند، بنابراین با انجام این تحقیق و مشخص شدن درصد فراوانی تیپ ها،با استفا أکثربیماری مخاطی ( )MDو اسهال ویروسی گاو ( )BVDبیماری های ویروسی هستند که از نظر بالینی به هم شباهتی ندارند اما سبب شناسی ویروسییکسانی دارند. با توجه به اینکه در کشور ما هنوز تیپ های ویروس شناسایی نشده اند، بنابراین با انجام این تحقیق و مشخص شدن درصد فراوانی تیپ ها،با استفاده از واکسن های مناسب می توان کنترل موثرتری بر میزان شیوع بیماری داشت.در این مطالعه، به طور تصادفی از 20گاوداری استان تهران تعداد 20گوساله )PI( Persistently-infectedپس از دو بار خونگیری و آزمایش الایزاجهت تشخیص BVD-Agانتخاب و جدا شد. سپس از سرم گوساله هایPI،RNAویروس استخراج گردید. در مرحله بعد اقدام به انجام Multiplex PCRبا دو جفت پرایمر اختصاصی برای تیپ 1و 2ویروس BVDگردید.پرایمرها بر اساس ناحیه UTR-’5ژنوم ویروس انتخاب شد. با توجه به نتایج 3 ،-RT PCRمورد )%15( BVDV type IIو 20مورد BVDV type)%100( Iشناسایی شد. همخوانی بین آزمایش الایزای BVDبا RT-PCRصد درصد بود و کلیه نمونه های مثبت و منفی همخوانی داشتند. با توجه بهحضور تیپ IIتوصیه به بررسی های تکمیلی و ملکولی می گردد تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
336 - بررسی تاثیر کورکومین انکپسوله در نانوذرات پلیمرزومی بر بیان ژن افلاکس پمپ MDR1 در جدایه های کاندیدا آلبیکنس مقاوم به فلوکونازول
سحر پوراصغر آیدا بجاری مهکامه هدایت صفا مهدی شهریاری نور نجمه رنجیکورکومین، یک ترکیب طبیعی از زردچوبه است که به عنوان یک عامل ضدباکتریایی و ضدقارچی شناخته می شود. کاندیدا آلبیکنس یکی از پاتوژنهای قارچی مهم با میزان کشندگی بالا در بیماران با نقص ایمنی است. شایع ترین پاتوژن فرصت‌طلب قارچی است که مصرف پیوسته ضد قارچ‌ها در درمان آن منجر أکثرکورکومین، یک ترکیب طبیعی از زردچوبه است که به عنوان یک عامل ضدباکتریایی و ضدقارچی شناخته می شود. کاندیدا آلبیکنس یکی از پاتوژنهای قارچی مهم با میزان کشندگی بالا در بیماران با نقص ایمنی است. شایع ترین پاتوژن فرصت‌طلب قارچی است که مصرف پیوسته ضد قارچ‌ها در درمان آن منجر به ظهور و افزایش مقاومت چند‌دارویی شده است. در این مطالعه اثر کورکومین محبوس‌شده در نانوذرات پلیمرزومی و فلوکونازول بر بیان ژن MDR1 در جدایههای کاندیدا آلبیکنس مقاوم به دارو ارزیابی شد. در این مطالعه مقطعی توصیفی، 50 نمونه بالینی از زنان با عفونت ولووواژینیت از بیمارستان الزهرا (رشت) تهیه شد. بعد از تعیین هویت جدایه ها، مقاومت به فلوکونازول به روش انتشار از دیسک و براث دایلوشن بررسی شد. شش جدایه کاندیدا آلبیکنس مقاوم به فلوکونازول، تحت تیمار با فلوکونازول به تنهایی (1/2MIC) (نمونه شاهد) و در ترکیب با کورکومین محبوس‌شده در نانوذرات (نمونه تست) قرار گرفت. بعد از 24 ساعت، دو گروه سلولی جهت تخمین نرخ مرگ سلولی در محیط کشت سابوروددکستروز آگار کشت داده شد. بیان ژن MDR1 بطور کمی به روش Q-RT-PCR در سلول های تیمار‌شده و تیمار‌نشده با کورکومین مورد بررسی قرارگرفت. نتایج ما نشان داد که درمان ترکیبی فلوکونازول (1/2MIC) و کورکومین محبوس‌شده در نانوذرات(400µg/ml) طی 24 ساعت رشد قارچی را تا 50% کاهش داد. در سلولهای تیمار‌شده با کورکومین، آنالیز Q-RT-PCR کاهش بیان ژن MDR1 را در مقایسه با سلولهای تیمار‌نشده با کورکومین نشان داد. به نظر می رسد کورکومین بتواند از طریق کاهش بیان ژن MDR1 در جدایههای مقاوم به فلوکونازول، اثربخشی قلوکونازول را افزایش دهد. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
337 - فراوانی آللی و ژنوتیپی ژن کالپاستاتین در گوسفندان قزل، آرخامرینو و آمیخته‌های آنها
قربان الیاسی زر‏‎‎ین‌قبایی جلیل شجاع محمدرضا نصیری ام‌البنین پیراهری آرش جوانمردکالپاستاتین نقش تنظیمی در رشد ماهیچه‌ها و تردی گوشت بعد از کشتار دام دارد که ژن کنترل کننده آن بر روی کروموزوم شماره 5 گوسفند جای گرفته است. ارتباط برخی از شکل های آللی این ژن با افزایش وزن و صفات لاشه در گوسفند کشف شده است که این امر در نتیجه جانشینی ساده 1 نوکلئوتید د أکثرکالپاستاتین نقش تنظیمی در رشد ماهیچه‌ها و تردی گوشت بعد از کشتار دام دارد که ژن کنترل کننده آن بر روی کروموزوم شماره 5 گوسفند جای گرفته است. ارتباط برخی از شکل های آللی این ژن با افزایش وزن و صفات لاشه در گوسفند کشف شده است که این امر در نتیجه جانشینی ساده 1 نوکلئوتید در اگزون I ژن کالپاستاتین است که با تکنیک RFLP با آنزیم های برشی MspI و یا NcoI تشخیص داده میشود و میتواند به عنوان نشان گری در جهت اصلاح نژاد به کار گرفته شود. هدف از این تحقیق بررسی تنوع ژنتیکی ژن کالپاستاتین در گوسفند با روش MspI/RFLP است. در این تحقیق نمونههای خون از 137 رأس گوسفند (65 رأس گوسفند قزل، 42 رأس گوسفند آرخامرینو و 30 رأس گوسفند آمیخته آرخامرینو× قزل) جمعآوری گردید. DNA ژنومی از 50 میکرولیتر خون با روش سیلیکاژل استخراج گردید و برای ارزیابی کیفیت و کمیت DNA روش های ژل مونیتورینگ و اسپکتروفوتومتری مورد استفاده قرار گرفت. پس از استخراج DNA ژنومی، تکثیر ناحیه چندشکل ژن کالپاستاتین به طول 570 جفت باز با آغازگرهای اختصاصی Ovine Calp-F و Ovine Calp-R صورت گرفت. جهت برش آنزیمی قطعات DNA تکثیر شده، از آنزیم MspI استفاده گردید. محصولات هضم شده، بر روی ژل آگارز 5/1% الکتروفورز شده و با اتیدیوم‌بروماید رنگ‌آمیزی گردید. پس از تعیین ژنوتیپ تمامی نمونههای مورد مطالعه، از نرم‌افزار Popgene 1.32 برای بررسی آماری دادهها استفاده گردید که فراوانی آلل M در گوسفند قزل 69%، گوسفند آرخامرینو 48%، و آمیخته‌های F1 این دو نژاد 50% به دست آمد. بر اساس نتایج این مطالعه، جمعیت های مورد مطالعه در تعادل هاردی- واینبرگ قرار داشتند و این نشان می دهد که در جمعیت های گوسفندان مورد مطالعه، انتخاب ژنتیکی در راستای اصلاح نژاد برای ژن کالپاستاتین صورت نگرفته است. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
338 - مقایسه چندشکلی موجود در ناحیه اینترون 2 ژن لپتین (Leptin) در گاوهای تالشی و هلشتاین با استفاده از تکنیک PCR-RFLP
علیرضا دهناد آرش جوانمرد فضل‏ اله افراز قربان الیاسی زرین‌قبایی اختلافات عمده‌ای در تولید شیر، گوشت و صفات تولیدمثلی گاوهای تالشی و هلشتاین مشاهده میشود. در این تحقیق به منظور شناخت مکانیزم های مولکولی به وجود آورنده این تفاوت ها در سطح ژن ها، چندشکلی موجود در ناحیه اینترون2 ژن لپتین در دو جمعیت گاو مذکور مورد مقایسه قرا أکثر اختلافات عمده‌ای در تولید شیر، گوشت و صفات تولیدمثلی گاوهای تالشی و هلشتاین مشاهده میشود. در این تحقیق به منظور شناخت مکانیزم های مولکولی به وجود آورنده این تفاوت ها در سطح ژن ها، چندشکلی موجود در ناحیه اینترون2 ژن لپتین در دو جمعیت گاو مذکور مورد مقایسه قرار گرفت. برای این منظور استخراج DNA به کمک روش تغییر یافته نمکی از نمونههای خون 100 رأس گاو (70 رأس گاو تالشی و 30 رأس گاو هلشتاین) صورت گرفت و واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) جهت تکثیر قطعه 422 جفت بازی از اینترون 2 ژن لپتین انجام گرفت. قطعه تکثیر شده سپس به وسیله آنزیم محدودالاثر Sau3AI جهت تشخیص ژنوتیپ های این ژن مورد هضم آنزیمی قرار گرفت. فراوانی ژنوتیپ های AA، AB و BB به ترتیب 42/61، 42/31 و 16/7 درصد در گاوهای تالشی و 7/56، 3/43 و صفر درصد در گاوهای هلشتاین به دست آمد. فراوانی های آللی برای آلل های A و B نیز به ترتیب 1/77 و 9/22 درصد در گاوهای تالشی و 3/78 و 7/21 درصد در گاوهای هلشتاین برآورد گردید. در هیچ کدام از دو جمعیت مورد مطالعه از نظر جایگاه ژنی لپتین تعادل هاردی- واینبرگ برقرار نبود. هم چنین هتروزیگوتی پایین بود و این امر ممکن است در آینده مشکلات اصلاح نژادی را سبب شود. تفاصيل المقالة -
حرية الوصول المقاله
339 - بررسی تنوع ژنتیکی قارچ عامل بیماری آنتراکنوز گردو Ophiognomonia leptostyla (Fr.) Sogonov در منطقه ITS و IGS با استفاده از نشانگر CAPS در شمال غرب ایران
مهدی میانجی حمید عبدالهی سلیمان جمشیدیبه منظور ارزیابی تنوع ژنتیکی قارچ عامل بیماری آنتراکنوز گردو Ophiognomonia leptostyla در شمال غرب ایران تعداد 25 جدایه از مناطق مختلف جمع آوری و با استفاده از روش تک اسپورسازی خالص شدند. استخراج DNA از میسلیوم قارچ با استفاده از روش لیو و همکاران انجام شد. تکثیر منطقه I أکثربه منظور ارزیابی تنوع ژنتیکی قارچ عامل بیماری آنتراکنوز گردو Ophiognomonia leptostyla در شمال غرب ایران تعداد 25 جدایه از مناطق مختلف جمع آوری و با استفاده از روش تک اسپورسازی خالص شدند. استخراج DNA از میسلیوم قارچ با استفاده از روش لیو و همکاران انجام شد. تکثیر منطقه ITS-rDNA توسط جفت آغازگر اختصاصی، ITS1 و ITS4 انجام گردید. هم‎چنین منطقه IGS-rDNA با استفاده از جفت آغازگر NS1R و LR13R تکثیر شد. نوارهایی به طول 600 جفت باز و 2320-2300 جفت باز از تکثیر منطقه ITS و IGS به دست آمد. قطعات تکثیر شده توسط پنج آنزیم برش دهنده EcoRI، HindIII، TagI، HinfI و BamHI مورد هضم قرار گرفتند. از مجموع آنزیم های برشی مورد استفاده EcorI، TagI و BamHI فاقد محل برش بر محصولات تکثیری منطقه ITS و HinfI و BamHI نیز فاقد محل برش بر محصولات تکثیری منطقه IGS بودند. گروه بندی جدایه های مورد مطالعه بر اساس الگوهای نواری هر دو منطقه در سطح شباهت 75 درصد، آن‎ها را در چهار گروه طبقه بندی نمود. تفاصيل المقالة
سند
Sanad is a platform for managing Azad University publications
الروابط
المراكز ذات الصلة
دعامة
الصفحات الرسمية
حقوق هذا الموقع الإلكتروني مملوكة لنظام SANAD Press Management. © 1442-1445