تعیین فلورغالب قارچی و باکتریایی ریزوسفر و شناسایی ریز ساز واره‌های مولد آنزیم فسفولیپاز و کیتیناز در خاک‌های حاصلخیز ایرانشهر
محورهای موضوعی : پژوهش های زراعی در حاشیه کویرهادی حسینی 1 , ایمان هرمزی 2 , نجمه شکیب 3
1 - باشگاه پژوهشگران جوان، دانشگاه آزاد اسلامی، زاهدان، زاهدان-ایران
2 - کارشناس آزمایشگاه تشخیص طبی
3 - کارشناس آزمایشگاه تشخیص طبی
کلید واژه: قارچ, باکتری, فسفولیپاز, کیتیناز و آنزیم,
چکیده مقاله :
این پژوهش با هدف شناسایی و جدا سازی باکتری ها و قارچ های مولد آنزیم های فسفو لیپاز و کیتیناز در خاک منطق حاصلخیز ایرانشهر جهت شناسایی و تولید کود بیولوژیک برای استفاده ی کشاورزان استان با استفاده از ریزسازواره های سازگار با شرایط جغرافیایی منطقه (هدف ثانویه) انجام پذیرفت.نمونه گیری از خاک مزارع کشاورزی مناطق حاصلخیز شهر ایرانشهر بوده و خاک مناطق نمونه برداری به میزان 5+10 رقیق سازی شدند.در ادامه جهت خالص سازی به محیط های عمومیPda و Nutrient agarمنتقل گردیدند.برای سوبسترای کیتین، کیتین میگو از کمپانی سیگما آلدریچ آمریکا و برای سوبسترای فسفولیپاز از زرده ی استریل تخم مرغ استفاده شد.پس از ادغام سوبسترا های اختصاصی با محیط های عمومی، ریز ساز واره های آنزیم مثبت از طریق تولید هـاله شناسایی و جدا سازی شدند که در بین قارچ ها، قارچ موکور و در بین باکتری ها سودوموناس در صـدر قرار داشتند.آنزیم ها با تـست اسپکتوفتـومتری و سنـجش میزان جذب نوری در طـول موج های 410 و 280 نانو متر شناسایی و تاییـد شـدند.در این تسـت محـیط ها به صورت مایـع تـهیه و به عنوان بـلانک استفاده شـد و محیط های حاوی آنزیم جهت خالـص سازی از فیلتر های میکروبی عبور داده شدند. نمونه ها جهت شـناسایی مولکولی به شرکت میـکروژن کره جنوبی ارسـال گردیدند که پاسخ تست های شنـاسایی مولکولی نیز تایید کننده ی تست های بیو شیمیایی و مورفولوژیک بود.باکتری و قارچ غالب تولید کننده ی آنزیم فسفولیپاز به ترتیبBacillussubtilis و Mucorhiemalisبودند، همچنین بیش ترین میزان تولید آنزیم کیتیناز نیز در ریزسازواره هایPseudomonasputidaو Mucorhiemalisمشاهده شد. تغییراتpHنشان داد افزایشpHبه سمت قلیایی باعث کاهش شدید ترشح آنزیم میشود. بیش ترین میزان تولید هر دو آنزیم در قارچMucorhiemalisدیده شد.
The aim of this study was to identify and isolate bacteria and fungi that produce phospholipase and chitinase enzymes in Iranshahr fertile logic soil to identify and produce biological fertilizers for farmers in the province using microorganisms compatible with the geographical conditions of the region (secondary target). Sampling of soil from agricultural fields in fertile areas of Iranshahr city and soil sampling areas were diluted by 10+ 5. For Chitin, Shrimp substation, Sigma Aldrich USA and sterile egg yolk were used for phospholipase substrate. After merging the dedicated substrates bygeneral media culture, positive enzyme microstructures were identified and isolated by halo production. Enzymes were identified and confirmed by spectrophotometry testing and measurement of light absorption at 410 and 280 nm wavelengths. Samples were sent to South Korea's Macrogen Company for molecular identification. The predominant bacteria and fungi producing phospholipase were Bacillus subtilis and Mucor hiemalis, respectivelythe highest production of chitinase enzyme was observed in Pseudomonas putida and Mucor hiemalis microsatellites. Changes in pH showed that an increase in pH to alkalinity greatly reduced enzyme secretion. The highest levels of both enzymes were found in Mucor hiemalis
_||_