شیوع یرسینیا انتروکولیتیکا و بررسی الگوی مقاومت آنتی¬بیوتیکی در گوشت مرغ و بوقلمون¬ عرضه‌شده در نجف‌آباد، اصفهان

الموضوعات :

محمد رضا جنتی ¹ , ابراهیم رحیمی ²

1 - دکتری عمومی دامپزشکی، گروه دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
2 - استاد، گروه بهداشت موادغذایی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

تاريخ الإرسال : 22 الأربعاء , محرم, 1445 تاريخ التأكيد : 08 الإثنين , جمادى الثانية, 1446 تاريخ الإصدار : 15 الإثنين , جمادى الثانية, 1446

الکلمات المفتاحية: گوشت مرغ, گوشت بوقلمون, یرسینیا انتروکولیتیکا, گاستروانتریت,

ملخص المقالة :

یرسینیا انتروکولیتیکا یک پاتوژن غذایی است که باعث بیماری گاستروانتریت در انسان می­شود. این باکتری همراه با مصرف موادغذایی آلوده، وارد بدن شده و تأثیرات مخرب خود را اعمال می­کند. هدف از مطالعه حاضر، تعیین فراوانی یرسینیا انتروکولیتیکا و مقاومت آنتی­بیوتیکی جدایه­ها در گوشت مرغ و بوقلمون­ عرضه‌شده در شهرستان نجف‌آباد، اصفهان بود. تعداد 100 نمونه، شامل: 50 نمونه گوشت مرغ و 50 نمونه گوشت بوقلمون، به‌صورت تصادفی از مراکز عرضه گوشت، جمع­آوری و به آزمایشگاه بهداشت موادغذایی دانشگاه آزاد اسلامی شهرکرد، منتقل شد. باکتری‌های یرسینیا انتروکولیتیکا با کشت و انجام آزمون‌های تشخیصی شناسایی و جداسازی شدند. الگوی مقاومت آنتی­بیوتیکی به روش انتشار دیسک تعیین شد. نتایج نشان داد که از مجموع 100 نمونه گوشت مرغ و گوشت بوقلمون، 22 درصد به یرسینیا انتروکولیتیکا آلودگی داشتند. بین شیوع آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت مرغ و گوشت بوقلمون، ارتباط معنی­داری مشاهده گردید (05/0P<). بیشترین مقاومت به ترتیب نسبت به جدایه­های آمپی‌سیلین، سفالوتین و آموکسی‌سیلین با مقاومت 20، 18 و 14 درصد و کمترین مقاومت مربوط به سیپروفلوکساسین، جنتامایسین و کلرامفنیکل بود. آنالیز آماری نشان داد که بین بیشترین و کمترین مقاومت ارتباط معنی­داری وجود نداشت. با توجه به شیوع بالای مقاومت آنتی‌بیوتیکی، پیشنهاد می‌گردد استفاده از آنتی­بیوتیک­ها، جهت درمان گاستروانتریت ناشی از یرسینیا انتروکولیتیکا محدود گردد.

 

المصادر:


1. Riu J, Giussani B. Electrochemical biosensors for the detection of pathogenic bacteria in food. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 2020;126:115863.
2. Mead G. Microbiological quality of poultry meat: a review. Brazilian Journal of Poultry Science. 2004;6:135-42.
3. Hameed S, Xie L, Ying Y. Conventional and emerging detection techniques for pathogenic bacteria in food science: A review. Trends in Food Science & Technology. 2018;81:61-73.
4. Majdinasab M, Hayat A, Marty JL. Aptamer-based assays and aptasensors for detection of pathogenic bacteria in food samples. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 2018;107:60-77.
5. Santovito E, Greco D, Logrieco AF, Avantaggiato G. Eubiotics for food security at farm level: Yeast cell wall products and their antimicrobial potential against pathogenic bacteria. Food borne Pathogens and Disease. 2018;15(9):531-7.
6. Rao M, Governale B, Esposito G, Francis MB, Michelen W. A Case of Yersinia Enterocolitica Enteritis. Journal of the American Medical Directors Association. 2023;24(5):B8.
7. French BW, Graeb BD, Chipps SR, Bertrand KN, Selch TM, Klumb RA. Vulnerability of age‐0 pallid sturgeon Scaphirhynchus albus to fish predation. Journal of Applied Ichthyology. 2010;26(1):6-10.
8. Annamalai T, Venkitanarayanan K. Expression of major cold shock proteins and genes by Yersinia enterocolitica in synthetic medium and foods. Journal of Food Protection. 2005;68(11):2454-8.
9. Fredriksson‐Ahomaa M, Meyer C, Bonke R, Stüber E, Wacheck S. Characterization of Yersinia enterocolitica 4/O:3 isolates from tonsils of Bavarian slaughter pigs. Letters in applied microbiology. 2010;50(4):412-8.
10. Martinez PO, Fredriksson-Ahomaa M, Pallotti A, Rosmini R, Houf K, Korkeala H. Variation in the prevalence of enteropathogenic Yersinia in slaughter pigs from Belgium, Italy, and Spain. Foodborne Pathogens and Disease. 2011;8(3):445-50.
11. Ikeuchi S, Bui HT, Sassa-O'brien Y, Niwa T, Okumura M, Hara-Kudo Y, Taniguchi T, Hayashidani H. Development of detection methods by multiplex real-time PCR for highly pathogenic Yersinia enterocolitica, low pathogenic Yersinia enterocolitica, and Yersinia pseudotuberculosis based on SYBR Green and TaqMan probes. Journal of Microbiological Methods. 2023;211:106779.
12. Ozdemir F, Arslan S. Biofilm formation, siderophore production, virulence-associated genes and genetic diversity of Yersinia enterocolitica from food. Journal of the Hellenic Veterinary Medical Society. 2022;73(2):4077-84.
13. Rahman A, Bonny TS, Stonsaovapak S, Ananchaipattana C. Yersinia enterocolitica: Epidemiological studies and outbreaks. Journal of Pathogens. 2011;2011:239391.
14. Riahi SM, Ahmadi E, Zeinali T. Global prevalence of Yersinia enterocolitica in cases of gastroenteritis: A systematic review and meta-analysis. International Journal of Microbiology. 2021;2021.
15. Heidarzadi M, Rahnama M, Alipoureskandani M, Saadati D, Afsharimoghadam A. Salmonella and Escherichia coli contamination in samosas presented in Sistan and Baluchestan province and antibiotic resistance of isolates. Food Hygiene. 2021;11(2 (42)):81-90.
16. Rahimi E, Sepehri S, Dehkordi FS, Shaygan S, Momtaz H. Prevalence of Yersinia species in traditional and commercial dairy products in Isfahan Province, Iran. Jundishapur Journal of Microbiology. 2014 Apr;7(4).
17. Mataragas M, Skandamis P, Drosinos E. Risk profiles of pork and poultry meat and risk ratings of various pathogen/product combinations. International Journal of Food Microbiology. 2008;126(1-2):1-2.
18. Saberianpour S, Tajbakhsh E, Dodi M. Isolation and determination of serotype O: 3 of Yersinia enterocolitica from chicken meat supplied to the market of Shahrekord city. Researcher's Journal. 2012;17(3):152-6.
19. Soltan Dallal MM, Izadpour F, Khalifeh Gholi M, Zeraati HO, Bakhtiari RO. Prevalence of Yersinia spp. in red meat and chicken marketed in southern Tehran. Journal of School of Public Health and Institute of Public Health Research. 2006;4(4):49-56.
20. Mahdavi S, Farshchian MR, Amini K, Abbasi M, Rad MG, Ebadi AR. Survey of Yersinia enterocolitica contamination in distributed broiler meats in Tabriz City, Iran. African J Microbiol Res. 2012;6(12):3019-23.
21. Ashrafi F. Study on percentage of Yersinia contamination in red and white meat in food markets in Shemiran athours. Journal of Microbiology Knowledge. 2009;1(2):49-52.
22. Soltandalal M, Vahedi S, Zarei H, Bakhtiari R, Izadpour F, Khalifehqoli M. Comparison of the prevalence of microbial contamination of packaged and non-packaged red meat and chicken in retailers and chain stores in south of Tehran. ournal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences. 2008; 15(1): 29-34.
23. Hadad A, Tajbakhsh E, Reiysi M. Identification of virulence genes in serotype O:3 Yersinia enterocolitica isolated from turkey meat by PCR method in Shahrekord. Journal of Food Microbiology. 2018;5(2):1-10.
24. Amirmozaffari N, Rahmani Z, Iesazadeh K. Evaluation of the level of contamination with Salmonella spp. in red meat, chicken, and domestic and industrial eggs produced in Talesh city and assessment of their antibiotic resistance pattern, Iran. Qom University of Medical Sciences Journal. 2013;7(5):60-5.

نص كامل:



Quality and Durability of Agricultural Products and Food Stuffs, Vol 4, No.2, 2024        79

 

Research Paper

The Prevalence of Yersinia enterocolitica and Antibiotic Resistance Patterns in Chicken and Turkey Meat Offered in Najafabad, Isfahan

 

Alireza Janati1, Ebrahim Rahimi2¹

1 General Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran

2 Professor, Department of Food Hygiene, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran

 

 

Received: 18/10/2024, Accepted: 23/11/2024

Abstract

Yersinia enterocolitica is a foodborne pathogen that causes gastroenteritis in humans. This bacterium enters the body through the consumption of contaminated food and exerts its harmful effects. The aim of the present study was to determine the prevalence of Yersinia enterocolitica and the determination of antibiotic resistance patterns of the isolates in chicken and turkey meat sold in Najafabad County, Isfahan. A total of 100 samples, including 50 chicken meat samples and 50 turkey meat samples, were randomly collected from meat supply centers and transferred to the Food Safety Laboratory of Islamic Azad University in Shahrekord. Yersinia enterocolitica isolates were identified and isolated through culturing and diagnostic tests. The antibiotic resistance pattern was determined using the disk diffusion method. The results showed that out of 100 samples of chicken and turkey meat, 22% were contaminated with Yersinia enterocolitica. A significant relationship was observed between the prevalence of Yersinia enterocolitica contamination in chicken and turkey meat (P<0.05). The highest resistance was observed against ampicillin, cephalothin, and amoxicillin, with resistance rates of 20%, 18%, and 14%, respectively, while the lowest resistance was related to ciprofloxacin, gentamicin, and chloramphenicol. Statistical analysis indicated that there was no significant relationship between the highest and lowest resistance. Given the high prevalence of antibiotic resistance, it is recommended that the use of antibiotics for the treatment of gastroenteritis caused by Yersinia enterocolitica be limited.

 

Keywords: Chicken meat, Turkey meat, Yersinia enterocolitica, Gastroenteritis

Citation: Citation: Janati A, Rahimi E. The prevalence of Yersinia enterocolitica and antibiotic resistance patterns in chicken and turkey meat offered in Najafabad, Isfahan. Quality and Durability of Agricultural Products and Food Stuffs, 2024; 4(2): 100-109.                    © The Author(s) Publisher: Islamic Azad University of Kerman, Iran   DOI: https://doi.org/10.71516/qafj.2024.915802

 

---

[1] Corresponding author: Ebrahim Rahimi, Email: [e-mail]

 

 

Extended Abstract

 

Introduction

Foodborne diseases remain a significant public health concern worldwide, with pathogens such as Yersinia enterocolitica being major contributors to gastroenteritis. This bacterium, commonly transmitted through contaminated food, can cause severe gastrointestinal symptoms, particularly in children and immunocompromised individuals. Poultry, including chicken and turkey, is often identified as a source of Y. enterocolitica contamination. The rapid consumption and increased use of poultry meat have raised concerns regarding the prevalence of foodborne pathogens and the growing resistance to antibiotics used for treatment. This study aims to determine the prevalence of Y. enterocolitica in chicken and turkey meat offered in Najafabad County, Isfahan, Iran and evaluate the antibiotic resistance patterns of isolated strains.

 

Methods

In this descriptive cross-sectional study, a total of 100 samples, including 50 samples each of chicken and turkey meat, were randomly collected from meat supply centers in Najafabad, Isfahan, Iran. The samples were transferred under sterile conditions to the Food Safety Laboratory. Isolation of Y. enterocolitica was performed using selective culturing techniques with PSB and CIN agar media. The antibiotic resistance profile of the isolated Y. enterocolitica strains was determined using the disk diffusion method against several antibiotics, including ampicillin, azithromycin, ciprofloxacin, tetracycline, cephalothin, nalidixic acid, gentamicin, amoxicillin, chloramphenicol, and kanamycin. Statistical analysis of the data was conducted using SPSS, with one-way ANOVA applied to assess the significance of differences between the prevalence in chicken and turkey meat.

 

Results and Discussion

The study found that 22% of the 100 meat samples (50 chicken and 50 turkey) were contaminated with Y. enterocolitica. Of these, 24% of chicken meat and 20% of turkey meat samples tested positive for the bacterium. The prevalence of Y. enterocolitica contamination was statistically significant between the two types of meat (P < 0.05). Antibiotic resistance testing revealed the highest resistance to ampicillin (20%), cephalothin (18%), and amoxicillin (14%), while the lowest resistance was observed against ciprofloxacin, gentamicin, and chloramphenicol, with no resistance detected. Statistical analysis showed no significant relationship between the highest and lowest antibiotic resistance levels. The findings of this study underscore the persistent problem of Y. enterocolitica contamination in poultry, especially in chicken and turkey meats. The prevalence observed in this research is consistent with previous studies that reported similar contamination rates in poultry products, though variations in contamination levels have been noted across different regions. The high prevalence of Y. enterocolitica in both chicken and turkey emphasizes the importance of proper handling, storage, and cooking of poultry to mitigate foodborne illnesses. The observed antibiotic resistance, particularly against commonly used antibiotics like ampicillin and amoxicillin, is concerning. It reflects a global issue of increasing antimicrobial resistance, which complicates the treatment of infections caused by Y. enterocolitica. The low resistance rates observed for ciprofloxacin, gentamicin, and chloramphenicol suggest these antibiotics may remain effective treatment options. However, their use should be monitored and restricted to avoid further resistance development. The study’s results align with global concerns regarding the overuse and misuse of antibiotics in both human medicine and agriculture.

 

Conclusion

This study reveals a significant presence of Y. enterocolitica in both chicken and turkey meats in Najafabad County, with notable antibiotic resistance observed in several strains. The results emphasize the need for improved food safety practices, including proper meat handling, hygiene, and cooking standards. Additionally, the high levels of antibiotic resistance in the isolates highlight the necessity of restricting antibiotic use in treating foodborne infections to preserve the efficacy of available treatments. Public health strategies should be enhanced to mitigate the risk of Y. enterocolitica contamination in poultry products, and further research is recommended to explore more effective control measures and monitor the evolving antibiotic resistance patterns in foodborne pathogens.

 

Keywords: Chicken meat, Turkey meat, Yersinia enterocolitica, Gastroenteritis

 

Funding: There was no external funding in this study.

 

Authors’ contribution: All authors contributed equally to the writing and preparation of this manuscript.

 

Conflict of interest: The authors do not have any conflicts of interest with any commercial or other association with the article.

 

 

مقاله پژوهشی

شیوع یرسینیا انتروکولیتیکا و بررسی الگوی مقاومت آنتی­بیوتیکی در گوشت مرغ و بوقلمون­ عرضه‌شده در نجف‌آباد، اصفهان

 

محمدرضا جنتی1، ابراهیم رحیمی2¹

 1 دکتری عمومی دامپزشکی، گروه دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

2 استاد، گروه بهداشت موادغذایی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

 

 

دریافت: 18/05/1402، پذیرش: 19/09/1403

چکیده

یرسینیا انتروکولیتیکا یک پاتوژن غذایی است که باعث بیماری گاستروانتریت در انسان می­شود. این باکتری همراه با مصرف موادغذایی آلوده، وارد بدن شده و تأثیرات مخرب خود را اعمال می­کند. هدف از مطالعه حاضر، تعیین فراوانی یرسینیا انتروکولیتیکا و مقاومت آنتی­بیوتیکی جدایه­ها در گوشت مرغ و بوقلمون­ عرضه‌شده در شهرستان نجف‌آباد، اصفهان بود. تعداد 100 نمونه، شامل: 50 نمونه گوشت مرغ و 50 نمونه گوشت بوقلمون، به‌صورت تصادفی از مراکز عرضه گوشت، جمع­آوری و به آزمایشگاه بهداشت موادغذایی دانشگاه آزاد اسلامی شهرکرد، منتقل شد. باکتری‌های یرسینیا انتروکولیتیکا با کشت و انجام آزمون‌های تشخیصی شناسایی و جداسازی شدند. الگوی مقاومت آنتی­بیوتیکی به روش انتشار دیسک تعیین شد. نتایج نشان داد که از مجموع 100 نمونه گوشت مرغ و گوشت بوقلمون، 22 درصد به یرسینیا انتروکولیتیکا آلودگی داشتند. بین شیوع آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت مرغ و گوشت بوقلمون، ارتباط معنی­داری مشاهده گردید (05/0P<). بیشترین مقاومت به ترتیب نسبت به جدایه­های آمپی‌سیلین، سفالوتین و آموکسی‌سیلین با مقاومت 20، 18 و 14 درصد و کمترین مقاومت مربوط به سیپروفلوکساسین، جنتامایسین و کلرامفنیکل بود. آنالیز آماری نشان داد که بین بیشترین و کمترین مقاومت ارتباط معنی­داری وجود نداشت. با توجه به شیوع بالای مقاومت آنتی‌بیوتیکی، پیشنهاد می‌گردد استفاده از آنتی­بیوتیک­ها، جهت درمان گاستروانتریت ناشی از یرسینیا انتروکولیتیکا محدود گردد.

 

 

واژه‌های کلیدی: گوشت مرغ، گوشت بوقلمون، یرسینیا انتروکولیتیکا، گاستروانتریت

استناد: محمدرضا جنتی، ابراهیم رحیمی، شیوع یرسینیا انتروکولیتیکا و بررسی الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی در گوشت مرغ و بوقلمون عرضه‌شده در نجف‌آباد، اصفهان، کیفیت و ماندگاری تولیدات کشاورزی و مواد غذایی، (1403)، دوره4، شماره2، صفحات 100- 109. DOI: https://doi.org/10.71516/qafj.2024.915802      © نویسندگان                                                          ناشر: دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرمان، ایران

 

---

[1]  نویسنده مسئول: ابراهیم رحیمی، پست الکترونیک: [e-mail]

مقدمه

بیماری ناشی از غذا زمانی رخ می­دهد که یک پاتوژن همراه با غذا خورده شود و خود را در میزبان انسان مستقر و معمولاً تکثیر می­کند، یا زمانی که یک پاتوژن سمی خود را در یک محصول غذایی مستقر کرده و سمی تولید می‌کند که سپس توسط میزبان انسان بلعیده می‌شود. بیماری‌های ناشی از غذا به‌طورکلی به عفونت ناشی از غذا و مسمومیت ناشی از غذا، طبقه‌بندی می­شوند. در عفونت‌های ناشی از غذا، به‌واسطه طی دوره کمون، زمان از مصرف تا بروز علائم بسیار بیشتر از مسمومیت­های غذایی است (1). گوشت طیور می‌تواند با انواع میکروارگانیسم‌ها، ازجمله میکروارگانیسم‌هایی که قادر به فاسد کردن محصول در زمان نگهداری در سرما هستند و پاتوژن‌های غذایی، آلوده شود. بیماری انسان ممکن است به خاطر دست زدن به گوشت خام، پخت ناکافی یا سوءاستفاده از محصول پخته شده، به وجود آید. گونه­های سالمونلا، یرسینیا، کمپیلوباکتر، باسیلوس سرئوس و گاهی اشرشیا کلی وروتوکسیژنیک از اهمیت ویژه‌ای برخوردار می‌باشند. از سوی دیگر، مشکل رو به رشد مقاومت ضدمیکروبی در میان پاتوژن‌های مرتبط با طیور موردتوجه خاص محققین، قرار گرفته است. به دلیل نیاز به یک رویکرد سیستماتیک و قابل اجرا جهانی برای کنترل ایمنی موادغذایی، مفهوم نقطه کنترل بحرانی تجزیه‌وتحلیل خطر (HACCP¹) به‌طور فزاینده‌ای در صنعت طیور معرفی می‌شود و ارزیابی ریسک کمی (QRA²)، برای خطرات میکروبی، اعمال می­شود (2). عوامل بیماری­زا از طریق غذا باعث ایجاد تعداد زیادی بیماری با اثرات قابل‌توجهی بر سلامت و اقتصاد انسان می­شوند. از ارگانیسم‌های مرتبط با غذا می‌توان به باکتری­های باسیلوس سرئوس، کمپیلوباکتر ژژونی، کلستریدیوم بوتولینوم، کلستریدیوم پرفرینجنس، کرونوباکتر ساکازاکی، اشریشیا کلی، لیستریا مونوسیتوژنز، سالمونلا، شیگلا، استافیلوکوکوکوس، هپاتیت A، نوروویروس­ها، توکسوپلاسما گوندی و سیکلوسپورا کایتانزیز، اشاره کرد. ثابت شده است که سیستم­های مدیریت ایمنی موادغذایی مبتنی بر رویکرد مبتنی بر خطر کلاسیک ناکارآمد هستند و رویکرد ایمنی موادغذایی مبتنی بر ریسک اکنون از سوی محققان و سازمان­های پیشرو، پیشنهاد شده است. در این زمینه، یک سیستم مدیریت ایمنی موادغذایی باید به‌گونه‌ای طراحی شود که خطرات ناشی از مصرف موادغذایی برای سلامت انسان را برآورد کرده و راهبردهای کاهش را به‌منظور کنترل و کاهش این خطرات شناسایی، انتخاب و اجرا کند. همچنین استفاده از برنامه‌های آموزشی مناسب ایمنی موادغذایی برای تمامی دست‌اندرکاران تولید و مصرف موادغذایی، پیشنهاد می­شود (3-5). یرسینیا انتروکولیتیکا یک پاتوژن زئونوز است که باعث گاستروانتریت حاد و گاهاً بیماری­های جدی­تر در انسان می­شود. در برخی از کشورها با سالمونلا به‌عنوان یک پاتوژن منتقله از غذا رقابت می­کند و به دلیل اینکه می­تواند در دمای یخچال رشد کند. این یک نگرانی فزاینده ازنظر ایمنی موادغذایی است. عفونت با یرسینیا انتروکولیتیکا، بسته به سن فرد مبتلا، می­تواند علائم مختلفی ایجاد کند. این عفونت اغلب در کودکان با سن کمتر از 5 سال، رخ می­دهد. بیشتر موارد یرسینیوز به‌صورت پراکنده در کودکان، رخ می­دهد. علائم غالب در انسان، به‌ویژه در کودکان خردسال، تب، درد شکم و اسهال است که اغلب اسهال خونی مشاهده می‌شود. در کودکان بزرگ‌تر و بزرگسالان، عواقب یرسینیوز شدید است و شامل عفونت‌های حاد، آپاندیسیت کاذب و عواقب طولانی‌مدت خارج روده‌ای مانند آرتریت واکنشی است (6-8). یرسینیا انتروکولیتیکا یک پاتوژن منتقل­شونده از طریق موادغذایی می­باشد، حتی اگر سویه­های بیماری­زا به‌ندرت از غذاها جدا شده باشند. خوک­ها، مخزن اصلی یرسینیا انتروکولیتیکای بیماری­زا فرض می­شوند زیرا خوک تاکنون تنها گونه جانوری است که اغلب گونه­های بیماری‌زا از آن جدا شده­اند. چندین حیوان اهلی مانند: سگ، گربه، گاو، گوسفند و اسب و چندین حیوان وحشی مانند: جوندگان (عمدتاً موش)، میمون، آهو و روباه نیز به‌عنوان مخازن احتمالی متهم شده‌اند (10،9). توزیع جغرافیایی یرسینیا انتروکولیتیکا، متنوع است. یرسینیا انتروکولیتیکا بیش از 50 سروتیپ مجزا دارد (بر اساس تغییرات آنتی‌ژنی در لیپوپلی‌ساکارید دیواره سلولی) و تعداد کمی از آن‌ها بیماری‌زا هستند. O:8 سروتیپ عفونی اولیه در ایالات‌متحده است و به دنبال آن O:3، O:5،27، O:13a، 13b، O:20، O:9، از سروتیپ‌های عفونی محسوب می‌شوند (11-13). منشأ اصلی بوقلمون از آمریکای لاتین و مکزیک بوده است، گوشت بوقلمون ازنظر ترکیبات دارای پروتئین بالا، کمترین کلسترول املاح و اسیدآمینه­های ضروری، می­باشد­. لذا یک منبع مناسب پروتئین جهت پخت و تهیه انواع خوراک­ها و غذاهای مختلف و همچنین برای افراد مسن، کودکان در حال رشد­، مبتلایان به امراض قلبی و عروقی سایر احاد جامعه می­توانند نیز از گوشت بوقلمون به‌عنوان منبع پروتئین مناسب، استفاده نماید. در سال­های اخیر، گوشت طیور به‌عنوان یک منبع پروتئین حیوانی به‌طور سریعی در تغذیه انسان مورداستفاده قرار گرفته و در بعضی از کشورها که ازنظر شرایط طبیعی و مرتع با کمبود مواجه هستند، گوشت طیور به‌سرعت جانشی گوشت دام­های دیگر شده است و این گوشت از لحاظ کمبود کلسترول حائز اهمیت است. هدف از این تحقیق، تعیین فراوانی یرسینیا انتروکولیتیکا و مقاومت آنتی‌بیوتیکی جدایه‌ها در گوشت مرغ و بوقلمون عرضه‌شده در شهرستان نجف‌آباد، اصفهان بوده است.

 

روش کار

نمونه­گیری

تعداد 100 نمونه گوشت شامل 50 نمونه گوشت مرغ و 50 گوشت بوقلمون از مراکز عرضه این محصول واقع در شهرستان نجف­آباد، اصفهان به‌صورت تصادفی تهیه شد و سپس با رعایت زنجیره سرد، در شرایط سترون جهت جلوگیری از بروز آلودگی­های ثانویه به آزمایشگاه میکروبی بهداشت موادغذایی، منتقل گردید.

 

 کشت یرسینیا انتروکولیتیکا

کشت اولیه نمونه‌ها در محیط کشت PSB 
(Mirmedia, Iran) انجام شد. سپس هر نمونه به محیط کشت اصلی و انتخابی یرسینیا انتروکولیتیکا، 
CIN (Mirmedia, Iran) انتقال داده شدند. محیط کشت انتخابی CIN آگار شامل آنتی­بیوتیک­هایی ازجمله: سفسولودین، ایرگاسان و نووبیوسین است. ظهور کلنی­های چشم­گاوی به‌عنوان آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در نظر گرفته شد (14).

 

تعیین الگوی مقاومت آنتی­بیوتیکی

ابتدا 10 سی‌سی محیط لاکتوز براث، به لوله‌های استریل منتقل شده و اپندرف­ها از فریزر خارج و اجازه داده شد تا به دمای محیط برسد. سپس با سمپلر به لوله منتقل کرده پس 24 ساعت کشت در انکوباتور لوله‌ها را سانتریفیوژ کرده و رسوب باکتری را با آب مقطر استریل به غلظت استاندارد نیم مک‌فارلند (cfu /ml ۱۰۸× 5/1)، رسانده و با سواپ استریل، بر روی محیط کشت مولرهینتون آگار (مرک، آلمان)، به­صورت یکنواخت کشت داد شد. سپس با پنس استریل شده در مجاورت شعله، دیسک‌های آنتی‌بیوتیکی شامل: آمپی‌سیلین، آزیترومایسین، سیپروفلوکساسین، تتراسیکلین، سفالوتین، نالیدیکسیک اسید، جنتامایسین، آموکسی‌سیلین، کلرامنفیکل و کانامایسین را به روی محیط کشت منتقل گردید. کشت‌ها را در انکوباتور قرار داده و بعد 24 ساعت، قطر هاله ممانعت از رشد، با استفاده از خط کش کولیسس، سنجیده شد (15).

 

واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR³)

از کشت 24 ساعته باکتری‌ها در محیط آب پپتونه در دمای 37 درجه سانتی‌گراد، استخراج DNA با استفاده از کیت تجاری (سیناژن، ایران)، با توجه به دستورالعمل شرکت سازنده انجام شد و تا زمان انجام آزمایش، در فريزر منفی 20 درجه سانتی‌گراد نگه‌داری شدند. سپس برای انجام واکنش پی سی ار، از جفت پرایمرهای مناسب بر اساس ردیف نوکلئوتیدی ژن 16SrRNA باکتری یرسینیا انتروکولیتیکا، استفاده شد (16). برای انجام آزمايش پی سی ار، جهت تشخیص ژن rRNA،S،16 از دستگاه Master cycler gradient استفاده شد. حجم کلی واکنش پی سی ار، 30 میکرولیتر و شامل: 90 نانوگرم پرایمر، 2/0 میلی‌مول dNTP، 10 میلی‌مول تریس ­HCl، 5/1 میلی‌مول کلرید منیزیوم، 50 میلی‌مول کلرید
پتاسیم و 1 واحد آنزیم DNA تک پلیمراز است. برنامه حرارتی مورد استفاده شامل: یک سیکل 95 درجه سانتی‌گراد 3 دقيقه، 35 سیکل دمایی به ترتیب 94 درجه سانتی‌گراد 1 دقیقه، 53 درجه سانتی‌گراد 1 دقیقه، 72 درجه سانتی‌گراد 1 دقیقه و درنهایت یک سیکل 72 درجه سانتی‌گراد به مدت 8 دقیقه، بود. جهت تأييد وجود قطعه تكثير يافته، از ژل آگارز 1 درصد، استفاده شد. براي اين منظور، 1 گرم از پودر آگارز در 100 میلی‌لیتر بافر TBE حل نموده و پس از ذوب شدن، مقدار 2 ميكروليتر اتيديوم برومايد به آن افزوده و در سيني مخصوص الكتروفورز ريخته شد. سپس 15 ميكروليتر از محصول پی سی ار همراه با 1 میکرولیتر بافر لودینگ مخلوط و با ژل 1 درصد آگارز در حضور ماركر 100 جفت بازي (فرمنتاز، ایران)، در ولتاژ ثابت 90 ولت بارگذاری شد.

 

---

[1]  Hazard Analysis Critical Control Point

[2]  Quantitative Risk Assessments

[3]  Polymerase chain reaction

جدول 1- توالی پرایمر مورد استفاده برای شناسایی ­ژن­ هدف در یرسینیا انتروکولیتیکا (16).

ژن	توالی پرایمر	اندازه محصول (bp)
16S rRNA	5’-AATACCGCATAACGTCTTCG-3′ 5’-CTTCTTCTGCGAGTAACGTC-3′	330

 

 

آنالیز آماری

در مطالعه حاضر برای بررسی داده‌ها، از نرم‌افزار آماری SPSS نسخه 23 استفاده شد. آنالیزهای آماری از نوع واریانس یک‌طرفه بود. در این مطالعه روابط آماری بین نوع گوشت و ارتباط معنی‌دار بودن یا نبودن مقایسه شد.

 

 

نتایج

نتایج نشان داد که از مجموع 100 نمونه شامل 50 نمونه گوشت مرغ و 50 نمونه گوشت بوقلمون، 22 درصد به یرسینیا انتروکولیتیکا آلودگی داشتند (جدول 1). بین شیوع آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت مرغ و گوشت بوقلمون ارتباط معنی­داری وجود دارد (05/0P<).

 

جدول 2- شیوع یرسینیا انتروکولیتیکا در مرغ و بوقلمون

نوع نمونه	تعداد نمونه	نمونه­های مثبت	نمونه­های منفی
بوقلمون	50	10 (20 درصد)	40 (80 درصد)
مرغ	50	12 (24 درصد)	38 (76 درصد)
مجموع	100	22 (22 درصد)	78 (78 درصد)

 

 

نتایج تست­های آنتی‌بیوتیکی، نشان داد که بیشترین مقاومت به ترتیب نسبت به جدایه­های آمپی‌سیلین، سفالوتین و آموکسی‌سیلین با مقاومت 20، 18 و 14 درصد و کمترین مقاومت مربوط به سیپروفلوکساسین، جنتامایسین و کلرامنفیکل بود که هیچ مقاومتی را، نشان ندادند. آنالیزهای آماری نشان داد که بین بیشترین و کمترین مقاومت، ارتباط معنی­داری وجود ندارد (جدول 3). شکل (1)، نتایج ژل الکتروفورز تکثیر ژن 16S rRNA را نشان می‌دهد.

 

 

 

جدول 3- الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی جدایه­های یرسینیا انتروکولیتیکا نسبت به آنتی‌بیوتیک‌های مختلف

آنتی‌بیوتیک	آمپی‌سیلین	آزیترومایسین	سیپروفلوکساسین	تتراسیکلین	سفالوتین	نالیدیکسیک اسید	جنتامایسین	آموکسی‌سیلین	کلرامنفیکل	کانامایسین
درصد مقاومت	20	4	0	6	8	10	0	14	0	2

 

 

 

شکل 1- نتایج ژل الکتروفورز تکثیر ژن 16S rRNA، چاهک 1، کنترل منفی، شماره 2، چاهک مثبت،

از چاهک 3 تا 7، نمونه­های مثبت با اندازه باند 330 جفت بازی، M: مارکر 100pb.

 

بحث

 

از مهم­ترین و اساسی‌ترین مسائل و بحران­هایی که در کشورهای درحال‌توسعه وجود دارد، آلودگی موادغذایی مصرفی مانند گوشت، مرغ و تخم­مرغ به باکتری‌های مختلف ازجمله: سالمونلا، یرسینیا، شیگلا و اشرشیا کلی است. همه ساله در دنیا حدود 20 تا 30 درصد از موادغذایی تولید شده به علت عدم استفاده از روش‌های صحیح نگهداری، تولید و عرضه، دستخوش آلودگی و فساد می‌شود، لذا از این طریق خسارات مالی، جانی و بهداشتی زیادی به وجود می­آید. در یک مطالعه در سال 2008 بر روی پروفایل مخاطرات گوشت پرندگان به یرسینیا انتروکولیتیکا و رتبه‌بندی آن، دریافتند که از تعداد 3450 نمونه اخذ شده از گوشت طیور، 8/7 درصد در گوشت مرغ و 5 درصد در گوشت بوقلمون به یرسینیا انتروکولیتیکا آلودگی داشتند(17) که با نتایج به‌دست‌آمده از تحقیق حاضر مطابقت ندارد زیرا در مطالعه حاضر، میزان آلودگی به این باکتری در گوشت مرغ 12 درصد و در گوشت بوقلمون 10 درصد، بود. صابریان‌پور و همکاران در مطالعه‌ای با هدف جداسازی یرسینیا انتروکولیتیکا از گوشت مرغ عرضه‌شده به بازار مصرف شهرستان شهرکرد، دریافتند که از مجموع 300 نمونه گوشت مرغ مورد آزمایش، 65 نمونه از آن‌ها به باکتری یرسینیا انتروکولیتیکا، آلوده بودند (18) که در مطالعه حاضر بالاترین میزان آلودگی در گوشت مرغ با 12 درصد آلودگی بود که درنتیجه ارتباط مستقیمی با مطالعه حاضر ندارد. شیوع یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت‌های قرمز و مرغ عرضه‌شده در قصابی‌ها و مرغ فروشی‌های تحت نظارت دانشگاه علوم پزشکی تهران، توسط سلطان‌دلال و همکاران مورد بررسی قرار گرفت، در این مطالعه، 250 نمونه گوشت مرغ و 158 نمونه گوشت قرمز طی 7 ماه از سه منطقه شهر ری، اسلامشهر و جنوب تهران بررسی شد. از 250 نمونه گوشت قرمز و مرغ مورد بررسی، 111 نمونه 44 درصد آلوده به یرسینیا انتروکولیتیکا بودند که شامل 46 نمونه (41 درصد) گوشت قرمز و 65 نمونه (58 درصد) گوشت مرغ بودند (19) که با نتایج حاصل از مطالعه حاضر اختلاف بالایی دارد. در مطالعه حاضر، مجموع آلودگی از 100 نمونه 22 درصد بود. در تحقیقی مشابه در ایران توسط مهدوی و همکاران در سال 1386 در دانشکده بهداشت و تغذیه دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تعیین فراوانی یرسینیا انتروکولیتیکا در انواع مختلف گوشت قرمز و گوشت مرغ در شهر تبریز، انجام گرفت. نتایج نشان داد که 13 درصد گوشت قرمز و 15 درصد گوشت مرغ به یرسینیا انتروکولیتیکا آلوده بودند(20) که با نتایج به‌دست‌آمده از مطالعه حاضر تا حدودی ارتباط دارد. اشرفی در سال 1388، پژوهشی بر روی آلودگی گوشت مرغ و گوشت گاو به یرسینیا انتروکولیتیکا انجام داد و مشخص گردید که از 100 نمونه مورد مطالعه 16 نمونه به یرسینیا انتروکولیتیکا، آلودگی داشته است (21)؛ که با نتایج مطالعه حاضر ارتباط معنی­داری ندارد. در مطالعه دیگری که سلطان‌دلال و همکاران بر روی آلودگی موادغذایی به میکروارگانیسم‌های پاتوژن انجام دادند دریافتند که از 630 نمونه اخذ شده موادغذایی 183 نمونه (29 درصد) آلودگی داشتند و 2/49 درصد آلودگی مختص به گوشت مرغ بود که 1/4 درصد به یرسینیا آلودگی در گوشت مرغ، به اثبات رسید (22) که میزان آلودگی مطالعه حاضر از نتایج به‌دست‌آمده از مطالعه مذکور، بالاتر است. در یک مطالعه دیگر که توسط حدادسامانی و همکاران در سال 1396 بر روی میزان آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت مرغ و بوقلمون شهرکرد انجام شد از 300 نمونه، 55 نمونه از گوشت بوقلمون و در گوشت مرغ 40 نمونه آلوده به یرسینیا انتروکولیتیکا بودند (23) که با نتایج این تحقیق مطابقت ندارد. مطالعه­ای توسط مظفری و همکاران در سال 1392 با هدف بررسی تعیین آلودگی گوشت قرمز، گوشت مرغ و تخم‌مرغ به گونه‌های باکتریایی و ارزیابی الگوی مقاومت میکروبی، انجام گرفت. در این مطالعه، تعداد 100 نمونه گوشت مرغ و تخم‌مرغ محلی و صنعتی و گوشت قرمز به تعداد 150 نمونه به‌صورت تصادفی در شهرستان تالش، جمع‌آوری شد که در تخم‌مرغ‌های محلی و صنعتی، هیچ نوع باکتری مشاهده نشد ولی در مورد گوشت مرغ 10 درصد از باکتری­های انتروباکتریاسه جداسازی شدند (24) که با نتایج حاصل از مطالعه حاضر، مطابقت دارد و همچنین ازلحاظ مقاومت آنتی‌بیوتیکی در باکتری‌های ایزوله شده، بیشترین مقاومت مربوط به اریترومایسین، نالیدیکسیک اسید و سولفامتاکسازول و کمترین مقاومت نسبت به سیپروفلاکساسین، سفالکسین و جنتامایسین مشاهده گردید که با نتایج حاصل از مطالعه حاضر ازلحاظ کمترین میزان مقاومت به آنتی­بیوتیک­ها، مطابقت دارد.

نتیجه­گیری

آلودگی به یرسینیا انتروکولیتیکا در گوشت مرغ و بوقلمون یک مشکل قابل‌توجه است. بر اساس یافته‌های به‌دست‌آمده از تحقیق حاضر و مشاهده فراوانی میزان آلودگی به باکتری­ یرسینیا انتروکولیتیکا، با توجه به ویژگی سایکروتروفی این باکتری و حساسیت به گرما، توصیه می­گردد از
خام­خواری کردن و استفاده از گوشت­هایی که به‌صورت کامل مغز­پخت نشده است، خودداری گردد، همچنین جهت درمان گاستروانتریت ناشی از یرسینیا انتروکولیتیکا استفاده از آنتی­بیوتیک­ها محدود گردد. این نتایج می‌توانند به بهبود استراتژی‌های کنترل آلودگی و استفاده بهینه از آنتی‌بیوتیک‌ها در صنعت گوشت کمک کنند.

 

سپاسگزاری

بدین‌وسیله نویسندگان از همه‌کسانی که در انجام این حوزه تحقیق، کمک نموده‌اند سپاسگزاری می‌نماید.

 

تعارض منافع

نویسندگان هیچ‌گونه تعارض منافعی ندارند.

 

 

References

1.       Riu J, Giussani B. Electrochemical biosensors for the detection of pathogenic bacteria in food. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 2020;126:115863.

2.       Mead G. Microbiological quality of poultry meat: a review. Brazilian Journal of Poultry Science. 2004;6:135-42.

3.       Hameed S, Xie L, Ying Y. Conventional and emerging detection techniques for pathogenic bacteria in food science: A review. Trends in Food Science & Technology. 2018;81:61-73.

4.       Majdinasab M, Hayat A, Marty JL. Aptamer-based assays and aptasensors for detection of pathogenic bacteria in food samples. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 2018;107:60-77.

5.       Santovito E, Greco D, Logrieco AF, Avantaggiato G. Eubiotics for food security at farm level: Yeast cell wall products and their antimicrobial potential against pathogenic bacteria. Food borne Pathogens and Disease. 2018;15(9):531-7.

6.       Rao M, Governale B, Esposito G, Francis MB, Michelen W. A Case of Yersinia Enterocolitica Enteritis. Journal of the American Medical Directors Association. 2023;24(5):B8.

7.       French BW, Graeb BD, Chipps SR, Bertrand KN, Selch TM, Klumb RA. Vulnerability of age‐0 pallid sturgeon Scaphirhynchus albus to fish predation. Journal of Applied Ichthyology. 2010;26(1):6-10.

8.       Annamalai T, Venkitanarayanan K. Expression of major cold shock proteins and genes by Yersinia enterocolitica in synthetic medium and foods. Journal of Food Protection. 2005;68(11):2454-8.

9.       Fredriksson‐Ahomaa M, Meyer C, Bonke R, Stüber E, Wacheck S. Characterization of Yersinia enterocolitica 4/O:3 isolates from tonsils of Bavarian slaughter pigs. Letters in applied microbiology. 2010;50(4):412-8.

10.       Martinez PO, Fredriksson-Ahomaa M, Pallotti A, Rosmini R, Houf K, Korkeala H. Variation in the prevalence of enteropathogenic Yersinia in slaughter pigs from Belgium, Italy, and Spain. Foodborne Pathogens and Disease. 2011;8(3):445-50.

11.       Ikeuchi S, Bui HT, Sassa-O'brien Y, Niwa T, Okumura M, Hara-Kudo Y, Taniguchi T, Hayashidani H. Development of detection methods by multiplex real-time PCR for highly pathogenic Yersinia enterocolitica, low pathogenic Yersinia enterocolitica, and Yersinia pseudotuberculosis based on SYBR Green and TaqMan probes. Journal of Microbiological Methods. 2023;211:106779.

12.       Ozdemir F, Arslan S. Biofilm formation, siderophore production, virulence-associated genes and genetic diversity of Yersinia enterocolitica from food. Journal of the Hellenic Veterinary Medical Society. 2022;73(2):4077-84.

13.       Rahman A, Bonny TS, Stonsaovapak S, Ananchaipattana C. Yersinia enterocolitica: Epidemiological studies and outbreaks. Journal of Pathogens. 2011;2011:239391.

14.       Riahi SM, Ahmadi E, Zeinali T. Global prevalence of Yersinia enterocolitica in cases of gastroenteritis: A systematic review and meta-analysis. International Journal of Microbiology. 2021;2021.

15.       Heidarzadi M, Rahnama M, Alipoureskandani M, Saadati D, Afsharimoghadam A. Salmonella and Escherichia coli contamination in samosas presented in Sistan and Baluchestan province and antibiotic resistance of isolates. Food Hygiene. 2021;11(2 (42)):81-90.

16.       Rahimi E, Sepehri S, Dehkordi FS, Shaygan S, Momtaz H. Prevalence of Yersinia species in traditional and commercial dairy products in Isfahan Province, Iran. Jundishapur Journal of Microbiology. 2014 Apr;7(4).

17.       Mataragas M, Skandamis P, Drosinos E. Risk profiles of pork and poultry meat and risk ratings of various pathogen/product combinations. International Journal of Food Microbiology. 2008;126(1-2):1-2.

18.       Saberianpour S, Tajbakhsh E, Dodi M. Isolation and determination of serotype O: 3 of Yersinia enterocolitica from chicken meat supplied to the market of Shahrekord city. Researcher's Journal. 2012;17(3):152-6.

19.       Soltan Dallal MM, Izadpour F, Khalifeh Gholi M, Zeraati HO, Bakhtiari RO. Prevalence of Yersinia spp. in red meat and chicken marketed in southern Tehran. Journal of School of Public Health and Institute of Public Health Research. 2006;4(4):49-56.

20.       Mahdavi S, Farshchian MR, Amini K, Abbasi M, Rad MG, Ebadi AR. Survey of Yersinia enterocolitica contamination in distributed broiler meats in Tabriz City, Iran. African J Microbiol Res. 2012;6(12):3019-23.

21.       Ashrafi F. Study on percentage of Yersinia contamination in red and white meat in food markets in Shemiran athours. Journal of Microbiology Knowledge. 2009;1(2):49-52.

22.       Soltandalal M, Vahedi S, Zarei H, Bakhtiari R, Izadpour F, Khalifehqoli M. Comparison of the prevalence of microbial contamination of packaged and non-packaged red meat and chicken in retailers and chain stores in south of Tehran. ournal of Shahid Sadoughi University of Medical Sciences. 2008; 15(1): 29-34.

23.       Hadad A, Tajbakhsh E, Reiysi M. Identification of virulence genes in serotype O:3 Yersinia enterocolitica isolated from turkey meat by PCR method in Shahrekord. Journal of Food Microbiology. 2018;5(2):1-10.

24.       Amirmozaffari N, Rahmani Z, Iesazadeh K. Evaluation of the level of contamination with Salmonella spp. in red meat, chicken, and domestic and industrial eggs produced in Talesh city and assessment of their antibiotic resistance pattern, Iran. Qom University of Medical Sciences Journal. 2013;7(5):60-5.