لارنگوتراکئیت عفونی (ILT)یک بیماری ویروسی حاد دستگاه تنفسی ماکیان است که در مواردی می تواند باعث کاهش شدید تولید گردد. ویروس لارنگوتراکئیت عفونی (ILTV) از خانواده هرپس ویریده بوده وتمامی خصوصیات ویروس های این خانواده را دارا می باشد و توانایی تکثیر بر روی پرده کوریوآلان چکیده کامل
لارنگوتراکئیت عفونی (ILT)یک بیماری ویروسی حاد دستگاه تنفسی ماکیان است که در مواردی می تواند باعث کاهش شدید تولید گردد. ویروس لارنگوتراکئیت عفونی (ILTV) از خانواده هرپس ویریده بوده وتمامی خصوصیات ویروس های این خانواده را دارا می باشد و توانایی تکثیر بر روی پرده کوریوآلانتوئیک تخم مرغ جنین دار را دارد.از آنجا که تکثیر ویروس قبل از رشد یافتن در تخم مرغ جنین دار بطور یقین مشخص نمی باشد، به همین علت در این تحقیق تکثیر ویروس برروی بافت های گوناگون جنین جوجه مورد بررسی قرار گرفت. ویروس ILT روی سلول کلیه جوجه ،ریه ،کبدو فیبروبلاست جنین جوجه با استفاده از محیط غنی شده کشت سلول هنکس (Hanks) که شامل 10%(v/v) سرم جنین گاو و 5% (W/V) تریپتوز فسفات براث (TPB) می باشد کشت داده شده است.آثار ضایعات سلولی (CPE) از پاساژ 8-7 مشاهده شد.گنجیدگیهای نوع A که نشان دهنده قابلیت رشد و تکثیر ویروس در سلول است با رنگ آمیزی هماتوکسیلین -ائوزین مشاهده گردید. همچنین وجود آنتی ژن ویروسی در در سلول با انجام آزمایش AGID به اثبات رسید. با نتایج بدست آمده از این تحقیق مشخص شد که ویروس ILT قادر به تکثیر و ایجاد ضایعات سلولی در کشت سلولی می باشد. بنابراین می توان از این روش جهت جداسازی ویروس از موارد بالینی استفاده نمود.
پرونده مقاله
امروزه در بسیاری از کشورهای دنیا واکسن کلون شده مورد استفاده قرار میگیرد. جهت کلون کردن یک ویروس، یکی از راهها رشد ویروس بر روی کشت سلول و جدا کردن پلاکهای مجزا و متفاوت و بررسی آنها از لحاظ مورفولوژی و ژنتیکی است. دراین تحقیق، ابتدا سلولهای ) Madin-Darby Canine Kid چکیده کامل
امروزه در بسیاری از کشورهای دنیا واکسن کلون شده مورد استفاده قرار میگیرد. جهت کلون کردن یک ویروس، یکی از راهها رشد ویروس بر روی کشت سلول و جدا کردن پلاکهای مجزا و متفاوت و بررسی آنها از لحاظ مورفولوژی و ژنتیکی است. دراین تحقیق، ابتدا سلولهای ) Madin-Darby Canine Kidney MDCK) بصورت تک لایه و بطور استاندارد کشت داده شد. رقت های مختلف ویروس به سلولهای تک لایه MDCK همراه با تریپسین، آگار و سولفات منبزیوم اضافه شد. ویروس توانست بر روی سلولهای فوق تکثیر و ایجاد اثر سایتوپاتیک (CPE) و پلاک نماید. در رقت 6-10 تعداد 6 پلاک که از لحاظ شکل و اندازه تفاوت داشتند برداشته شدند و جهت تکثیر به تخممرغ جنین دار 11-9 روزه تلقیح گردید. بعد از 48 ساعت مایع آلانتوئیک هر تخممرغ حاوی پلاک برداشت ونسبت به جداسازی RNA هر پلاک اقدام گردید. منطقه شکست (Cleavage site)پروتئین ادغامی(Fusion) با تست RT-PCR انجام شد و محصول PCR خالصسازی وسکانس گردید. سکانس نوکلئوتیدها و آمینواسیدها برای هر پلاک با سوش های ثبت شده در بانک ژنی مقایسه شد. سکانس نوکلئوتیدهای تمامی پلاکهای بدست آمده، 97 تا 99% همخوانی با ویروس V4در بانک ژنی را تایید نمود. هدف از این پژوهش ایجاد پلاک از سوش V4 ویروس نیوکاسل بر روی سلولهای MDCK جهت ایجاد پلاکهای مجزا و در نهایت بررسی مولکولی پلاکهای ایجاد شده میباشد.
پرونده مقاله
اخیراً نیدوویروسها بهعنوان عامل احتمالی بیماریهای تنفسی شدید در خزندگان و بخصوص مارهای پیتون از نقاط مختلفی از جهان توصیف شدهاند. هدف از این مطالعه، جداسازی عامل بیماریزا همراه با تعیین دقیق خصوصیات و نیز بررسی یافتههای هیستوپاتولوژی در یک ایگوانای ماده میباشد. د چکیده کامل
اخیراً نیدوویروسها بهعنوان عامل احتمالی بیماریهای تنفسی شدید در خزندگان و بخصوص مارهای پیتون از نقاط مختلفی از جهان توصیف شدهاند. هدف از این مطالعه، جداسازی عامل بیماریزا همراه با تعیین دقیق خصوصیات و نیز بررسی یافتههای هیستوپاتولوژی در یک ایگوانای ماده میباشد. در طی معاینات پس از مرگ، ضایعات پیوگرانولوماتوز و فیبرونکروتیک در سیستمهایی غیر از دستگاه تنفس این ایگوانا مشاهده شد و نتایج بررسی واکنش زنجیرهای پلیمراز رونویسی معکوس نیز مثبت بود لذا ارتباط بین مشاهده این ضایعات گسترده با نتایج کالبدگشایی حاصل از مطالعه موارد ابتلا به سرپنتوویروسهای قبلی و نیز میزان و نوع تغییرات در ژنوم سرپنتوویروس شناسایی شده با سرپنتو ویروس قبلی بررسی شد. تلقیح کشت سلولی و سپسRT-PCR برای جمعآوری و به دست آوردن ایزوله ویروسی استفاده شد. در ادامه ایمونوهیستوشیمی انجام شد. رنگآمیزی برای نوکلئوپروتئین سرپنتویروس نشان داد که این ویروس نهتنها طیف وسیعی از اپیتلیوم (اپیتلیوم تنفسی و گوارشی، سلولهای کبدی، لولههای ادراری، مجاری پانکراس و غیره)، بلکه مونوسیتهای داخل عروقی، ماکروفاژهای داخل ضایعه و سلولهای اندوتلیال را نیز آلوده میکند. با توالی یابی نسل بعدی، ژنوم کامل برای اینگونه سرپنتویروس جدید به دست آمد. تجزیهوتحلیل ژنوم ویروسی بازیابی شده از این بیماری تنفسی و سیستمیک مرتبط با عفونت سرپنتوویروس، ارتباط توالی با فنوتیپ سایر سویهها را نشان نداد. نتایج نشان داد که این سرپنتوویروس تروپیسم سلولی و بافتی گستردهای دارد و سیر عفونتزایی توسط آن میتواند متفاوت باشد و در نتیجه گسترش سیستمیک ویروس در بدن ضایعات در طیف گستردهای از بافتها و سیستمهای مختلف بدن ایجاد میکند.
پرونده مقاله
در این تحقیق نانوکامپوزیت فلوئورآپاتیت (FAp)- هیدروکسیآپاتیت (HAp) در مقیاس نانومتر با استفاده از فرآیند سل- ژل سنتز شد. تریاتیلفسفیت، نیتراتکلسیمآبدار و فلورید آمونیوم به ترتیب به عنوان منابع تامینکننده P، Ca و F با نسبتهای استوکیومتری P/F و Ca/P به ترتیب 6 و 67 چکیده کامل
در این تحقیق نانوکامپوزیت فلوئورآپاتیت (FAp)- هیدروکسیآپاتیت (HAp) در مقیاس نانومتر با استفاده از فرآیند سل- ژل سنتز شد. تریاتیلفسفیت، نیتراتکلسیمآبدار و فلورید آمونیوم به ترتیب به عنوان منابع تامینکننده P، Ca و F با نسبتهای استوکیومتری P/F و Ca/P به ترتیب 6 و 67/1 بکار گرفته شد. پودرهای سنتز شده در دمای °C 550 حرارت داده شدند. جهت ارزیابی ویژگیهای محصول، از روشهای آنالیز XRD، FT-IR، Zetasizer، SEM، TEM/SAED/EDX و EDAX و آزمایش کشت سلولی استفاده شد. نتایج XRD حضور فازهای FAp و HAp در پودر را تایید مینماید. نتایج (FT-IR) نیز جانشین شدن نسبی F- با OH- و تشکیل نانوکامپوزیت FAp/HAp را ثابت مینماید. همچنین، بررسیهای XRD نشان داد که اندازه بلورکها در حدود nm 15 میباشد که این نتایج بوسیله TEM تایید شده است. نتایج زتاسایزر نیز نشان داد که متوسط اندازه ذرات پودر حاصل در حدود nm 145 میباشد. نمونههای دارای مقادیر بیشتر FAp منجر به افزایش تعداد سلولها درآزمایش کشت سلولهای فیبروبلاست شدند.
پرونده مقاله
سابقه و هدف: پلی هیدروکسی آلکانوات ها گروهی از پلیمرها می باشند که توسط بسیاری از باکتری ها، به هنگام ورود به فاز ثابت رشدی و در حضور منابع معدنی تولید می شوند. هدف از این پژوهش بررسی محیط کشت های مختلف حاوی منابع کربن گلوکز، ساکاروز، لاکتوز، ترکیب این سه منبع کربن بر ر چکیده کامل
سابقه و هدف: پلی هیدروکسی آلکانوات ها گروهی از پلیمرها می باشند که توسط بسیاری از باکتری ها، به هنگام ورود به فاز ثابت رشدی و در حضور منابع معدنی تولید می شوند. هدف از این پژوهش بررسی محیط کشت های مختلف حاوی منابع کربن گلوکز، ساکاروز، لاکتوز، ترکیب این سه منبع کربن بر رشد باکتری آلکالیجنس اوتروفس جهت تولید پلیمرهای زیست تخریب پذیر هیدروکسی بوتیرات-والرات می باشد. مواد و روش ها: در این پژوهش به منظور تولید هیدروکسی بوتیرات-والرات و بررسی تأثیر منابع مختلف کربنی بر تولید، باکتری آلکالیجنس اوتروفس شناسایی شد. جهت انجام آزمایشات در حالت ناپیوسته ی خوراک دهی شده اسید استیک و ترکیب اسید پروپیونیک به همراه اسید استیک به عنوان منبع اسید چرب فرّار به صورت مرحله ای به محیط کشت افزوده شد. محیط کشت های مورد نظر همراه با باکتری تلقیح شده جهت گرمارسانی و تولید پلیمر به انکوباتور با دمای 32 درجه ی سانتیگراد، دور rpm 120 و زمان ماند سلولی 72 ساعت انتقال داده شدند. نتایج: نتایج این پژوهش نشان داد که منبع کربن گلوکز به همراه اسید استیک باعث تولید بیشترین مقدار هیدروکسی بوتیرات-والرات (HB=3.4860g/lو HV=0.7940g/l) شده است. همچنین کمترین مقدار تولید هیدروکسی بوتیرات (HB=2.3124g/l)مربوط به زمانی است که از ساکارز به عنوان منبع کربن و ترکیب اسید استیک و اسید پروپیونیک استفاده شده است. بحث: نتایج نشان داد که باکتری آلکالیجنس اوتروفس منبع کربنی گلوکز و منبع اسید چرب اسید استیک را نسبت به سایر منابع کربنی، بیشتر مورد استفاده قرار داده است.
پرونده مقاله
سابقه و هدف: انتروویروس‌ها یکی از مهم‌ترین ویروس‌های روده‌ای هستند که طیف وسیعی از بیماری‌ها را در انسان ایجاد می کند. اخیرا با توجه به زمان‌بر بودن و همچنین نیاز به انجام تست‌های تاییدی، استفاده از روش‌های مولکولی جهت تشخیص انترو چکیده کامل
سابقه و هدف: انتروویروس‌ها یکی از مهم‌ترین ویروس‌های روده‌ای هستند که طیف وسیعی از بیماری‌ها را در انسان ایجاد می کند. اخیرا با توجه به زمان‌بر بودن و همچنین نیاز به انجام تست‌های تاییدی، استفاده از روش‌های مولکولی جهت تشخیص انتروویروس‌ها مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این پژوهش ارزیابی روش‌های ICC-RT-PCR و کشت سلولی برای تشخیص انتروویروس‌های موجود در سیستم فاضلاب است. مواد و روش‌ها: در این پژوهش 63 نمونه فاضلاب با روش Grab sample تهیه و با روش‌های Pellet و Two-Phase تغلیظ و در رده‌های سلولی RD و HEp-2 کشت داده شد. در مرحله بعد، تمامی نمونه‌ها به کشت‌های سلولی حساس RD و HEp-2 تلقیح و پس از 24 ساعت گرمخانه گذاری در حرارت 36 درجه سانتی‌گراد، با استفاده از پرایمرهای Pan E.V، Pan P.V و پرایمرهای اختصاصی Sabin بر روی نمونه‌های کشت سلولی تست RT-PCR انجام شد. یافته‌ها: از مجموع نمونه‌های مورد بررسی، با استفاده از روش کشت سلولی از 33 نمونه انتروویروس (38/52 درصد) و توسط روش ICC-RT-PCR از 41 نمونه انتروویروس (07/65درصد) و از 6 نمونه ویروس پولیو (52/9 درصد) جداسازی گردید. نتیجه‌گیری: با آنالیز آماری مشخص شد که بین روش‌های کشت سلولی و ICC-RT-PCR ارتباط معنی داری در سطح 05/0 برای جداسازی انتروویروس‌ها وجود دارد. همچنین حساسیت روش ICC-RT-PCR برای تشخیص انتروویروس‌ها کمتر از 01/0، TCID50 ارزیابی شد که می‌تواند نشان دهنده قابل قبول بودن و حساسیت این روش برای تشخیص انتروویروس‌های موجود در فاضلاب باشد.
پرونده مقاله
سابقه و هدف: فلج شل حاد (Acute Flaccid Paralysis) توسط عوامل مختلفی ایجاد می‌شود که مهم‌ترین عامل آن پولیو ویروس می‌باشد. هدف از پژوهش ارزیابی عوامل غیر پولیویی ایجاد کننده فلج در ایران می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این تحقیق به منظور بهبود در قدر چکیده کامل
سابقه و هدف: فلج شل حاد (Acute Flaccid Paralysis) توسط عوامل مختلفی ایجاد می‌شود که مهم‌ترین عامل آن پولیو ویروس می‌باشد. هدف از پژوهش ارزیابی عوامل غیر پولیویی ایجاد کننده فلج در ایران می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این تحقیق به منظور بهبود در قدرت جداسازی انتروویروس‌های احتمالی موجود در مدفوع کودکان مبتلا به فلج شل حاد، تمام نمونه‌های مدفوع این کودکان، به پنج رده سلولی L20B، RD، Hep-2، Vero و GMK تلقیح شدند و با روش میکرونوترالیزاسیون مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: با تلقیح دو نمونه از هر یک از 458 مورد بیمار زیر 15 سال مبتلا به فلج شل حاد به پنج رده سلولی ذکر شده، در کل 34 مورد انتروویروس از گونه‌ها و سروتایپ‌های مختلف جداسازی گردید. 1/7% از کل موارد مبتلا به AFP از نظر کشت سلولی و جداسازی انتروویروس‌ها مثبت بودند. جنسیت نقش موثری در جداسازی انتروویروس‌ها نداشت. اکثر موارد جداسازی ویروس‌ها مربوط به گروه سنی 5-0 سال بود و با افزایش سن، از تعداد موارد جداسازی این ویروس کاسته شد. بیشترین ویروس‌های جدا شده مربوط به پولیوویروس‌ها (12مورد) و اکوویروس‌ها (12 مورد) بود. در این پژوهش نشان داده شد که موارد شناخته شده فلج باقیمانده (Residual Paralysis=RP) بیشتر توسط اکوویروس‌ها ایجاد می‌شوند. همچنین اختلاف معنی داری در تعداد موارد جداسازی پولیوویروس واکسن در افراد مبتلا به RP و افراد غیرمبتلا وجود نداشت. از این‌رو نشان داده شد واکسن‌های OPV مورد استفاده در کشور از ایمنی کافی برخوردار است. موارد جداسازی کوکساکی‌ویروس‌ها در نمونه‌های بالینی نیز بین افراد مبتلا به RP و افراد غیرمبتلا اختلاف معنی داری نداشت. نتیجه گیری: به دلیل معنی دار بودن اختلاف جداسازی انتروویروس‌های غیرپولیویی بین دو گروه دارای فلج باقیمانده مثبت و منفی، نقش این ویروس‌ها در ایجاد فلج باقیمانده ثابت می‌شود.
پرونده مقاله
سابقه و هدف: نئوسپورا کنینوم یکی از مهم‌ترین عوامل ایجاد کننده سقط جنین گاو در جهان به شمار می‌رود. تولید انبوه این تک یاخته در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از کشت سلولی و رده‌های سلولی مختلف انجام می‌گردد. از طرفی استفاده از رده‌های سلولی معلق د چکیده کامل
سابقه و هدف: نئوسپورا کنینوم یکی از مهم‌ترین عوامل ایجاد کننده سقط جنین گاو در جهان به شمار می‌رود. تولید انبوه این تک یاخته در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از کشت سلولی و رده‌های سلولی مختلف انجام می‌گردد. از طرفی استفاده از رده‌های سلولی معلق در تولید انبوه فرآورده‌های بیولوژیک بسیار مقرون به صرفه است. هدف از این مطالعه بررسی امکان کشت تک یاخته نئوسپورا کنینوم با استفاده از رده سلولی معلق Ka6 می‌باشد.
مواد و روش ها: این پژوهش به صورت تجربی پس از کشت تاکی‌زوئیت نئوسپورا کنینوم بر روی رده سلولی Ka6 انجام شد. سپس توانایی این رده سلولی با رده سلولیVero که در حال حاضر بهترین رده سلولی برای کشت نئوسپورا است با روش رنگ سنجیMTT مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها: نتایج این پژوهش نشان داد که تاکی‌زوئیت‌های نئوسپورا کانینوم به خوبی درون سلول‌های Ka6 وارد، تکثیر و از این سلول‌ها خارج شده‌اند. همچنین تکثیر تاکی‌زوئیت‌های این تک یاخته در هر دو رده سلولی Ka6 و Vero نسبت به گروه کنترل معنی دار بود. اما میزان تکثیر نئوسپورا بر روی رده سلولیKa6 تفاوت معنی داری نسبت به رده سلولیVero نداشت.
نتیجه گیری: این مطالعه اولین گزارش موفق آمیز کشت تک یاخته نئوسپورا کنینوم با استفاده از رده سلولی معلق می‌باشد. از آن‌جایی که رده سلولیKa6 یک لنفوسیت ترانسفورم شده است و به دلیل امکان کشت آن به صورت معلق در سطح انبوه در بیوراکتور، استفاده از آن نسبت به رده سلولیVero ارجحیت دارد.
پرونده مقاله
در تحقیق حاضر پوشش های تک لایه هیدروکسی اپتایت (HA)، اکسید تیتانیوم (TiO2) و پوشش با ساختار تغییرات تدریجی اکسید تیتانیوم/هیدروکسی اپتایت به روش الکتروفورتیک بر روی آلیاژ تیتانیومTi–6Al–4V اعمال گردید. مورفولوژی پوشش ها با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی چکیده کامل
در تحقیق حاضر پوشش های تک لایه هیدروکسی اپتایت (HA)، اکسید تیتانیوم (TiO2) و پوشش با ساختار تغییرات تدریجی اکسید تیتانیوم/هیدروکسی اپتایت به روش الکتروفورتیک بر روی آلیاژ تیتانیومTi–6Al–4V اعمال گردید. مورفولوژی پوشش ها با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) بررسی شد. همچنین ترکیب پوشش ها با استفاده از آنالیز های پراش اشعه ایکس (XRD) و طیف سنجی پراش انرژی اشعه ایکس (EDX) مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که در پوشش با ساختار تغییرات تدریجی اکسید تیتانیوم/هیدروکسی اپتایت، ترکیب پوشش از 100 درصد اکسید تیتانیوم/صفر درصد هیدروکسی اپتایت در سطح زیر لایه، به صفر درصد اکسید تیتانیوم/100 درصد هیدروکسی اپتایت در سطح خارجی پوشش تغییر کرده است. به منظور بررسی زیست سازگاری پوشش های اعمال شده، کشت سلول های بنیادی بند ناف بر روی آنها صورت گرفت. نتایج نشان داد که پوشش با ساختار تغییرات تدریجی و پوشش تک لایه هیدروکسی اپتایت نسبت به پوشش تک لایه اکسید تیتانیوم از زیست سازگاری به مراتب بالاتری برخوردار هستند. علاوه بر این میزان چسبندگی پوشش ها به وسیله آزمون برشی بررسی گردید و نتایج نشان داد که پوشش با ساختار تغییرات تدریجی از استحکام چسبندگی به مراتب بالاتری (MPa 31) در مقایسه با پوشش تک لایه هیدروکسی اپتایت (MPa 11) بر خوردار است.
پرونده مقاله
سکوی نشر دانش
سند یا سکوی نشر دانش ،سامانه ای جهت مدیریت حوزه علمی و پژوهشی نشریات دانشگاه آزاد می باشد