ارتباط بین بیان ژن هایaflO وaflQ با میزان آفلاتوکسینB1 از گونه های آسپرژیلوس جدا شده از خوراک دام
محورهای موضوعی : قارچ شناسی
نوشین سهرابی
1
(گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران)
مرتضی تقی زاده
2
(موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران)
کلید واژه: آفلاتوکسین, آسپرژیلوس فلاووس, Real-Time RT-PCR, aflO, aflQ,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: آفلاتوکسین ها بهعنوان متابولیت های ثانویه سمی، توسط برخی از گونه های آسپرژیلوس تولید می شوند. از آنجا که این گونه های قارچی می توانند باعث آلودگی مواد غذایی و خوراک دام شوند، لذا ردیابی و کنترل آلاینده های میکروبی آن ها اهمیت فراوانی دارند. در مطالعه حاضر ضمن بررسی آلودگی خوراک دام، ارتباط بین میزان آفلاتوکسین B1 تولید شده توسط گونه های قارچ آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین و میزان بیان ژن های aflO وaflQ بررسی گردید. مواد و روش ها: تعداد 67 نمونه از گونه های مختلف آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین جداسازی و انتخاب شدند. ضمن بررسی وجود توالی های مربوط به ژن هایaflO وaflQ بهروش PCR، میزان بیان آن ها بهروشReal Time RT-PCR کمی بررسی شد. علاوه بر این، میزان آفلاتوکسینB1 بهروش کروماتوگرافی معکوس با کارآیی بالا RP - HPLC)) و با استفاده از دتکتور فلورسنت اندازه گیری شد. یافته ها: درمیان 67 گونه جدا شده، 41 نمونه دارای هر دو ژن aflO وaflQ بودند. 17 نمونه از 26 گونه بررسی شده (65 درصد) مقادیر بالاتر از 5 نانوگرم بر گرم آفلاتوکسینB1 و 6 نمونه (23 درصد) نیز مقادیر بسیار بالایی از این توکسین (بیش از 100 نانوگرم بر گرم) را تولید کرده بودند. نتیجه گیری: با توجه به ارتباط نسبی بین میزان بیان ژن های مولد آفلاتوکسین و تولید آفلاتوکسینB1 در نمونه های خوراک دام، به نظر می رسد که بررسی سایر ژن های مولد آفلاتوکسین می تواند منجر به تکمیل این مطالعه و تقویت ارتباط بین بیان ژن های مولد آفلاتوکسین و میزان توکسین تولید شده شود.
Background & Objectives: Aflatoxins are produced as toxic secondary metabolites by some Aspergillus species. Since these fungal species can contaminate food and animal feed, microbial contamination monitoring and control is important. In the current study, the correlation between expression of two aflatoxin biosynthetic pathway genes aflO and aflQ and was investigated. Materials & Methods: Sixty-seven different isolates of aflatoxin-producing Aspergillus species selected and the presence. expression of aflO and aflQ gene sequences were assayed by PCR and quantitative Real-Time RT-PCR methods, respectively. In addition, the amount of aflatoxin B1 by high-performance reverse chromatography (RP-HPLC) using a fluorescent detector. Results: Forthy one, out of 67 isolated species had both aflO and aflQ genes. Seventeen samples out of 26 (65%) had aflatoxin B1 levels higher than 5 ng/g and 6 samples (23%) produced high levels of this toxin (more than 100 ng / g) as well. Conclusion: Considering the relative correlation between the expression of selected aflatoxin genes and AFB1 produced in feedstuffs, it seems that the investigation of other aflatoxin-producing genes can lead to a better correlation and complete the results of this study.
_||_