تاثیر ورتمانین بر بیان ژن های سیتوکین های محافظت کننده نورونی در آستروسیت های کشت شده در شرایط آزمایشگاهی
محورهای موضوعی : زیست شناسی سلولی تکوینی گیاهی و جانوری ، تکوین و تمایز ، زیست شناسی میکروارگانیسمامیر یزدان پناه 1 , وحید حمایت خواه جهرمی 2
1 - دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، گروه زیست شناسی، جهرم، ایران
2 - دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، گروه زیست شناسی، جهرم، ایران
کلید واژه: BDNF, آستروسیت, NT3, ورتمانین, بیماریهای نورودژنراتیو,
چکیده مقاله :
زمینه و هدف: بیماریهای نورودژنراتیو با تاثیر بر روی سیستم عصبی مرکزی باعث القا آپوپتوزیس در نورونها می گردد. سلولهای گلیا نقش بسیار مهمی در جلوگیری از پیشرفت این بیماری ها و افزایش بقای نورونی دارند. مهمترین عملکرد سلولهای گلیا در بقای نورونها ترشح فاکتور های محافظت کننده نورونی می باشد. از فاکتورهای محافظت کننده نورونی که توسط آستروسیت ها ترشح میگردد می‌توان به TGFβ1، TGFβ2، GDNF، BDNF و NT3 اشاره کرد.در این مطالعه نقش احتمالی ورتمانین در بیان فاکتورهای محافظت کننده نورونیBDNF و NT3 مترشحه از میکروگلیاها و الیگودندروسیت ها درمحیط in vitro مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها : برای کشت سلولهای آستروسیت از نوزاد 1-2 روزه موش صحرایی Wistar استفاده شد. بدین ترتیب پس از ضد عفونی پوست بدن و دست‌های نوزادان با پنبه آغشته به الکل 70 درصد، با قیچی پوست روی سر کاملاً برداشته و جمجمه از ناحیه گردن به طرف پیشانی شکافته شد تا کورتکس مغز آشکار گردد. سپس مغز را از جمجمه جدا و در بافر هنکس قرار داده شد.غلظت های 8 ، 12 ، 16 مول بر لیتر ورتمانین به وسیله ی سمپلر به سلول های آستروسیت کشت داده شده در پلیت های 6-well اضافه شد و میزان بیان فاکتورهای محافظت کننده نورونی از طریق R-T PCR اندازه گیری شد.نتیجه گیری :سلولهای آستروسیت تیمار شده بوسیله ورتمانین از لحاظ مورفولوژی تغییرات قابل ملاحظه ای را نشان دادند. این در حالی بود که تغییرات مورفولوژیکی در سلولهای کنترل در مقایسه با سلولهای تیمار شده بسیار کمتر مشاهده شد.
Background and Aim: Neurodegenerative diseases induce apoptosis in neurons by affecting the central nervous system. Glia cells play an important role in preventing the progression of these diseases and increasing neuronal survival. The most important function of glia cells after neuronal survival is the secretion of neuroprotective factors. Neuroprotective factors secreted by astrocytes include TGFβ1, TGFβ2, GDNF, BDNF, and NT3.In this study, we investigate the possible role of vortmanine in the expression of neuroprotective factors BDNF and NT3 secreted by microglia and oligodendrocytes in vitro. For this purpose, cultured microglia and oligodendrocytes were treated with concentrations of 8,12,16 μmol / L for 72 hours. materials and methods :A 1-2-day-old Wistar rat was used to culture astrocyte cells. Thus, after disinfecting the skin of the body and hands of infants with 70% alcohol-soaked cotton, the infant's head was cut with scissors, the scalp was completely removed and the skull was cut from the neck to the forehead. To reveal the cerebral cortex. The brain was then removed from the skull and placed in Hanks buffer.Concentrations of 8, 12, and 16 mol / L of vortmanine are added by sampler to microglia and oligodendrocyte cells cultured in 6-well plates and The expression of neuroprotective factors was measured by R-T PCRResults :Vertmanine-treated astrocyte cells showed significant morphological changes.However, morphological changes were much less observed in control cells compared to treated cells.
_||_