در طی فصول زراعی سال های 95-1394 به منظور تعیین پراکنش PNRSV و ToRSV در گل رز و علف های هرز پیچک و شیرتیغی مجاور آن ها در استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی از 600 نمونه برگ رز و 50 نمونه برگ علف هرز بدون علایم و با علایم به صورت کاملاً تصادفی نمونه برداری شد. توسط آزمون الایزای مستقیم DAS-ELISA نمونه ها ارزیابی شدند. نتایج نشان داد گل رز در استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی به ترتیب 24/39%، 7/30%، 8/44% و 1/38% به PNRSV و 38%، 6/25%، 3/32% و 3/28% به ToRSV و علف های هرز پیچک و شیرتیغی به ترتیب 26% و 18% به PNRSV و ToRSV آلوده بودند. نمونه های آلوده با استفاده از بافر فسفات پتاسیم (1/7 pH=) حاوی ماده ضد اکسیداتیو بر روی گیاهان علفی در گلخانه مایه زنی شدند. برای تأیید آلودگی ویروسی نمونه ها، از آزمون RT-PCR و پرایمر های اختصاصی جهت تکثیر قطعات اختصاصی از طول ژنوم PNRSV و ToRSV در نمونه های رز و گیاه محک استفاده شد. نمونه هایی که در آزمون های سرولوژیک آلوده به ویروس تشخیص داده شده بودند، با هر دو جفت آغازگر مورد استفاده واکنش دادند و قطعات ژنتیکی مورد انتظار با اندازه های 210 جفت باز مربوط به پروتئین پوششی PNRSV و 500 جفت باز مربوط به پلیمرازToRSV برای نمونه های آلوده تکثیر شدند. در این بررسی برای اولین بار حضور عوامل ویروس PNRSV و ToRSV در گیاه رز و علف های هرز مورد ارزیابی قرار گرفت. پرونده مقاله

در این تحقیق اثر کنترل کنندگی عصاره اتانولی گیاهان دارویی بید، بومادران و گزنه بر میزان آلودگی ویروس موزاییک خیار (CMV-Fny) در شرایط گلخانه ای مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور گیاهچه های خیار به صورت مکانیکی توسط ویروس CMV-Fny مایه کوبی شدند. عصاره اتانولی گیاهان اشاره شده به صورت مستقیم و با غلظت های مشخص ppm200، ppm800 و ppm1000 به محیط ریزوسفر در گلدان ها اضافه شد. آلودگی گیاهچه های خیار با CMV-Fny در برگ های مایه کوبی شده و تازه رشد یافته توسط آزمون های الایزا مستقیم (DAS-ELISA) در روز های 3، 6، 9 و 12 بعد از مایه کوبی مورد ارزیابی قرار گرفت. سنجش فعالیت اختصاصی آنزیم پراکسـیداز (POX)در گیاهچه های نمونه هایی که بیشترین میزان کنترل ویروس را در 12 روز بعد از آلودگی نشان داده بودنـد، انجام پذیرفت و میزان بیان ژن Inhibitor of viral replication (IVR) در آنها به کمک پی سی آر نیمه کمی (sq-RT-PCR) سنجش شد. نتایج الایزا نشان داد تیمار گیاهچه های خیار با عصاره اتانولی هر سه گیاه مورد بررسی، باعث کاهش معنی دار تیتر پروتئین CMVدر برگ های بالغ مایه کوبی شده و جوان تازه رشد یافته و همچنین شاخص شدت بیماری زایی (DSI) تا 12 روز پس از مایه کوبی در آنها در مقایسه با شاهد منفی کاهش یافته است. بیشترین میزان کاهش تیتر CMV در برگ های مایه کوبی شده و تازه رشد یافته با کاربرد غلظتppm 1000 عصاره اتانولی و ppm200 بومادران در زمان 12 روز پس از مایه زنی به دست آمد. همچنین میزان بیان ژن IVR و فعالیت اختصاصی POX در گیاهچه های خیار تیمار شده با هر یک از عصاره ها افزایش یافت که می تواند بیانگر فعال شدن دفاع سیستمیک در نمونه های تیمار شده باشد. پرونده مقاله

سابقه و هدف: ویروس پسوروز مرکبات عامل ایجاد یکی از مهم‌ترین بیماری‌ های ویروسی مرکبات در جهان است که در باغات مرکبات واقع در شرق مازندران شناسایی شده است. به‌دلیل حضور هم‌ زمان نژادهای مختلف ویروس در نمونه های آلوده، روش‌ های شناسایی مولکولی مانند PCR اغلب از توان ردیابی این ویروس با دقت بالا برخوردار نیستند. در این تحقیق، روشی دقیق برای شناسایی ویروس پسوروز مرکبات معرفی شده است. مواد و روش ها: ردیابی و تشخیص نمونه های آلوده با استفاده از آزمون الایزا به روش ساندویچ غیر مستقیم سه طرفه پـادتن (TAS-ELISA) و آنتی بادی تک همسانه ای از نمونه های پرتقال تامسون و نارنگی انشو با علایم مشکوک به آلودگی به CPsV، در شهرستان های ساری، نکا و قائم شهر از استان مازندارن انجام پذیرفت. آلودگی در نمونه ها با استفاده از RT-PCR تایید و استخراج ds RNA (Double-strand RNA) ویروسCPsV با استفاده از ستون CF-11 انجام شد. برای هیبریداسیون مولکولی از پروب cDNA نشاندار شده با DIG استفاده شد. یافته ها: بررسی الگوی الکتروفورز حاصل از استخراج dsRNA از نمونه هایی که با الایزا و RT-PCR به CPsV آلوده تشخیص داده شده بودند بیانگر حضور ژنوم CPsV با وزن های مولکولی 2500 و 920 جفت باز در نمونه های آلوده بود. همچنین با استفاده از هیبریداسیون مولکولی و پروب طراحی شده، حضور CPsV در نمونه های آلوده مورد تایید قرار گرفت. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده از آزمون هیبرید سازی مولکولی ارتباط مستقیم بین dsRNA استخراج شده از نمونه های آلوده و حضور ویروس پسوروز مرکبات را در نمونه های علایم دار مرکبات شهرستان ساری اثبات نمود. پرونده مقاله