سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری عامل عفونتهای مزمن گوارشی شناخته شده است. درمیان روشهای تشخیصی، تست سرولوژیک یک روش دردسترس با حساسیت قابل قبول است. اما اختصاصیت پایین، کاربرد آن را محدود میکند. هدف از این مطالعه طراحی، کلونسازی و بیان پروتین نوترکیب حاصل از دو ژنureB وomp18 از سویه بومی ایرانی میباشد که میتواند به‌عنوان یک الگو در طراحی کیت سرولوژیک با اختصاصیت بالا به منظور تشخیص عفونت هلیکوباکتر پیلوری به کار رود.مواد و روشها: پس از استخراج DNA ژنومی هلیکوباکتر پیلوری، ژنهای ureB وomp18 با واکنش PCR تکثیر شده و بعد از برش آنزیمی در وکتور بیانی pET-22b کلون گردید. بیان پروتین نوترکیب حاصله با کمک IPTG القا و با خلوص بالا با کروماتوگرافی میل-ترکیبی (Affinity Chromatography) تخلیص شد. خاصیت آنتیژنی پروتین نوترکیب تخلیص شده با روش وسترن بلاتینگ تایید گردید.یافتهها: دو قطعهی ژنی ureB وomp18 به ترتیب با سایزهای 597 و 479 جفت باز توسط PCR تکثیر یافته و به شکل یک قطعهی هیبرید در وکتور pET-22b کلون گردید. بیان پروتین نوترکیب حاصل در باکتری E. coli BL21(DE3) به شکل یک قطعهی حدود 60 کیلودالتونی در SDS-PAGE ظاهر گردیده و توسط ستون Ni-NTA تخلیص شد. نتایج وسترن بلات آنتیژن کایمریک تخلیص شده با سرم بیماران مبتلا نشان دهنده ویژگی آنتیژنیِ این پروتین نوترکیب بود.نتیجهگیری: در مطالعهی حاضر برای اولین بار پروتین نوترکیب UreB- Omp18 از سویه بومی این باکتری تولید گردید که می‌تواند گزینه مناسبی برای طراحی کیت تشخیصی در منطقه باشد. پرونده مقاله