بررسی اثر همافزایی نانوذرات اکسید نقره و پروبیوتیک لاکتوباسیلوس پلانتاروم بر بیان ژن جزء MexX سیستم افلاکس پمپ در سویههای سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به دارو
محورهای موضوعی : زیست فناوری میکروبیامیمه مظفر مرزه الحلی 1 , فرحناز مولوی 2 , مریم طهرانی پور 3
1 - دانشجوی کارشناسی ارشد رشته علوم سلولی و مولکولی، گروه زیستشناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
2 - دانشگاه ازاد اسلامی، واحد مشهد، دانشکده علوم پایه ، گروه زیست شناسی، مشهد، ایران
3 - 3- دانشیار گروه زیستشناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
کلید واژه: پمپ افلاکس, سودوموناس آئروزینوزا, نانوذرات اکسید نقره, لاکتو باسیلوس,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: در سودوموناس آئروژینوزا بخشی مهمی از مقاومت دارویی مربوط به سیستمهای پمپ افلاکس است. در این مطالعه، اثر ضدمیکروبی نانوذره اکسید نقره و پروبیوتیکلاکتوباسیلوس پلانتارومبر بیان ژن MexX مطالعه شده است. مواد و روشها: در این مطالعه مقطعی-توصیفی 49 نمونه از شهر مشهد جمعآوری و با استفاده از روشهای استاندارد تعیین هویت شدند. سویههای دارای مقاومت چند دارویی برای تعیینMIC و بررسی فراوانی ژن MexX به روشPCR انتخاب شدند. روش رقت سازی در براث برای پروبیوتیک، نانوذرات اکسید نقره و ترکیب هردو انجام شد تا MIC وMBC بدست آید. از روش میکرودایلوشن و تکنیک Real time-PCR به ترتیب برای تعیین رقت اثربخش نانوذرات اکسید نقره و پروبیوتیک و بیان ژن MexX استفاده شد. دادههای مربوط به تغییرهای بیان ژن MexX با روش ΔΔCT– 2 با استفاده از آزمون آماری T مستقل در دو گروه تحلیل شد. یافتهها: تمام سویهها واجد ژن MexX بودند و تمام آنها به بیش از دو آنتیبیوتیک مقاوم بودند. حداقل غلظت مهار رشد در روش رقت در آگار برای نانوذرات اکسید نقره تا رقت 500 میکروگرم بر میلیلیتر و برای پروبیوتیک تا رقت 16 میکروگرم بر میلیلیتر بود. نانوذرات نقره در مقایسه با پروبیوتیک تاثیر بیشتری در مهار رشد باکتری داشت و میزان این تاثیر نسبت به اثر ترکیبی پروبیوتیک و نانوذرات نقره نیز بیشتر بود (P>0.05). نتیجهگیری: نانوذرات اکسید نقره و پروبیوتیک اثر آنتی باکتریال برای کاهش عملکرد پمپ افلاکس MexXY-OprM در باکتری سودوموناس آئروژینوزا دارد.
Background & Objectives: An important part of drug resistance In Pseudomonas aeruginosa is related to efflux pump systems. In this study, the antimicrobial effect of silver oxide nanoparticle and Lactobacillus plantarum probiotic on MexX gene expression has been studied. Materials & Methods: In this descriptive cross-sectional study, 49 samples were collected from Mashhad and identified using standard methods. Strains with multidrug resistance were selected to determine MIC and check the frequency of MexX gene by PCR method. Broth dilution method was performed for probiotics, silver oxide nanoparticles and combination of both to obtain MIC and MBC. Microdilution method and Real time-PCR technique were used to determine the effective dilution of silver oxide nanoparticles and probiotics and MexX gene expression, respectively. The data related to the changes in MexX gene expression were analyzed by the 2-ΔΔCT method using the independent T test in two groups. Results: All strains had MexX gene and all of them were resistant to more than two antibiotics. The minimum concentration of growth inhibition in the dilution method in agar was for silver oxide nanoparticles up to a dilution of 500 µg/ml and for probiotics up to a dilution of 16 µg/ml. Compared to probiotics, silver nanoparticles had a greater effect in inhibiting the growth of bacteria, and the amount of this effect is greater than the combined effect of probiotics and silver nanoparticles (P>0.05). Conclusion: Silver oxide nanoparticle and probiotic have antibacterial effect to reduce MexXY-OprM efflux pump function in Pseudomonas aeruginosa bacteria.
_||_