Manuscript ID : JVM-2305-1244 (R3) Visit : 122 Page: 91 - 101

Article Type: Original Research

Subject Areas :

اباذر لامعی ¹ , ابراهیم رحیمی ² , امیر شاکریان ³ , حسن ممتاز ⁴

1 - دانشجوی دکتری بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی ، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
2 - استاد گروه بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد
3 - استاد مرکز تحقیقات تغذیه و فرآورده های ارگانیک ، واحد شهرکرد ، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد ، ایران
4 - استاد گروه میکروبیولوژی، واحد شهرکرد ، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

Received: 2023-05-08 Accepted : 2023-09-06 Published : 2024-08-19

Keywords:

Abstract :

References:

Full-Text:

جداسازی و تعیین حساسیت ضد میکروبی آرکوباکتر در شیر خام و فراورده های آن به روش کشت و PCR در استان اصفهان

اباذر لامعی1 ، ابراهیم رحیمی2 * ، امیر شاکریان3 ، حسن ممتاز4

1. دانشجوی دکتری بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی ، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

2. استاد گروه بهداشت مواد غذائی ، دانشکده دامپزشکی ، واحد شهرکرد ، دانشگاه آزاد اسلامی

3. استاد مرکز تحقیقات تغذیه و فرآورده های ارگانیک ، واحد شهرکرد ، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد ، ایران

4. استاد گروه میکروبیولوژی، واحد شهرکرد ، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران

چکیده

مقدمه : آرکوباکتر ها عامل بیماری مشترک بین انسان و حیوانات هستند و از طریق آب و مواد غذایی منتقل می شوند تاکنون

اطلاعات اندکی در خصوص مکانیسم های بیماری زایی آرکوباکترها منتشر شده است . بررسی حاضر با هدف بررسی دقیق مقاومت دارویی آرکوباکتر و شیوع آن در شیر خام و فراورده های آن در استان اصفهان انجام گرفت.

مواد و روش کار: در این مطالعه تعداد 350 نمونه شیر خام از 5 گونه حیوان شامل گاو، گوسفند، بز، ‌شتر و گاومیش و 400 نمونه از فراورده های شیر شامل پنیر ، خامه ،کره و بستنی سنتی به طور تصادفی از لبنیاتیهای شهر اصفهان و اطراف اصفهان جمع آوری و در شرایط سترون به آزمایشگاه انتقال داده شدند جهت جداسازی باکتری از محیط CAMP (مرک- آلمان)، غنی شده با خون گوسفند دفیبرینه شده استفاده گردید سپس کلنی‌های مشکوک با استفاده از تست بیوشیمیایی جداسازی و شناسایی شدند و از تکنیک واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز (PCR) جهت تأیید آرکوباکتر‌ها استفاده شد. همچنین در این مطالعه به منظور ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی از روش انتشار دیسکی طبق معیار (2017)CLSI استفاده گردید.

یافته ها: در این مطالعه از مجموع ۷۵۰ نمونه بررسی شده ، 18 نمونه به یکی از گونههای آرکوباکتر آلوده بودند. که این 18 مورد فقط از شیر خام یافت شد و هیچ کدام از فراورده های شیر به این باکتری آلوده نبودند ، بیشترین مقاومت آنتی بیوتیک نیز مربوط به آمپیسیلین ، آموکسی سیلین-کلاوولانیک اسید ، سفالوتین ، سفوتاکسیم و تتراسایکلین مشاهده گردید .

کلمات کلیدی : آرکوباکتر ، شیر خام ، مقاومت آنتی بیوتیک PCR_

* نویسنده مسئول : ابراهیم رحیمی آدرس : گروه دامپزشکی ، واحد شهر کرد ، دانشگاه آزاد اسلامی ، شهر کرد ، ایران

پست الکترونیک: ebrahimrahimi55@yahoo.com

مقدمه

جنس آرکوباکتر متعلق به خانواده کمپیلیو باکتریاسه است و در حال حاضر شامل بیست و شش گونه از آن یافت شده است. باکتری های متعلق به این جنس در همه جا وجود دارند و حیوانات می توانند گونه های آرکوباکتر را جابه جا و منتقل کنند .(6) (10) گونه های آرکوباکتر به عنوان یک پاتوژن در حال ظهور مشترک بین انسان و دام و یک خطر جدی برای سلامت انسان شناخته شده اند (2)(22)(14)در خط تولید فراورده های لبنی، گونه های آرکوباکتر از منابع مختلفی مانند مدفوع، فیلترهای شیر درون خطی، شیر مخزن فله، پنیرها و سطوح فرآوری جدا شده اند (10).

آرکوباکترها عمدتاً از طریق مواد غذایی آلوده و منابع آبی که ممکن است از طریق فاضلاب آلوده شوند، منتقل می شوند. گزارش های متعددی در مورد وجود آرکوباکتر در آب به عنوان یک منبع موثر عفونت وجود دارد(23)(15). مصرف مواد غذایی آلوده و آب آلوده عامل انتقال این باکتری به انسان و همچنین حیوانات می باشد. از این رو گونه های آرکوباکتر را به عنوان پاتوژن مشترک بین انسان و حیوان در نظر می گیرند(24)(9).

عفونت آرکوباکتر در انسان به طور عمده در بیماران مبتلا به بیماری های مزمن، افراد مسن و کودکان شناسایی شده اند . اسهال مرتبط با آرکوباکتر بوتزلری مداوم تر، آبکی و بدون علامت است اما نسبت به کمپیلوباکتر ژژونی که اسهال حاد تری می دهد ضعیف تر است(20)(18)(17)(16) (1)(13)

محصولات غذایی با منشاء حیوانی به عنوان یک مسیر انتقال بالقوه مهم آرکوباکتر می باشند(8)(19)(4). اخیراً مطالعه‌ای در تایلند گزارش داد که 13 درصد وعده‌های غذایی که در برخی رستوران‌های بانکوک سرو می‌شود، آلوده به آرکوباکتر بوتزلری است. [14]مطالعات انجام شده روی غذاها نشان داده است که آرکوباکتر بوتزلری شایع ترین گونه بعد از آرکوباکتر کری ائروفیلوس و آرکوباکتر اسکیرووی است . این امر دلیلی برای درج نام آرکوباکتر بوتزلری در لیست میکروب های با خطر بالا برای سلامت انسان ها است که از سوی کمسیون بین المللی ویژگی های میکروبی مواد غذایی مطرح شده است (3) . مطالعه ای بر روی محصولات دریایی نشان داد که 100 درصد صدف ها و 41.1 درصد از سایر نمونه ها دارای شیوع بالا و تنوع گسترده ای از گونه های آرکوباکتر بودند. (5) اکثر موارد آنتریت و باکتریمی ناشی از آرکوباکتر مانند کمپیلوباکتر، خود محدود شونده به نظر می رسد و نیازی به درمان ضد میکروبی ندارد. اما درمان آنتی بیوتیکی برای بیماران مبتلا به تب بالا، اسهال خونی، نقص سیستم ایمنی و افرادی که علائم شدید دارند توصیه می شود (12)(26)

تست وسترن بالت نشان می دهد که سویه های آرکوباکتر بوتزلری توانایی چسبندگی مولکولی به سلول های گلبول های قرمز انسان و خرگوش و هماگلوتین را دارا هستند. سویه های آرکوباکتر باعث القای یک پاسخ التهابی می شود که به عنوان یکی از فاکتورهای اصلی بیماری زایی در این گونه و همچنین در گونه های کمپیلوباکتر و هلیکوباکتر است گونه های آرکوباکتر مانند کمپیلوباکتر و سایر عوامل بیماری زا وارد شده، توانایی چسبیدن به سلول های اپیتلیال روده ای (IPI 21 ) وآغاز پاسخ التهابی به وسیله القای تولید اینترولوکین ( 8 IL ) را دارا هستند. (7)

با توجه به قدرت بالای بیماری زایی آرکوباکتر بر آن شدیم که میزان شیوع این باکتری و حساسیت باکتری به آنتی بیوتیک های رایج را در شیر و فراورده های آن بررسی کنیم

مواد و روشکار

در این مطالعه برای تشخیص آرکوباکتر، تعداد 350 نمونه شیر خام از 5 گونه حیوان شامل گاو، گوسفند، بز، ‌شتر و گاومیش و 400 نمونه از فراورده های شیر شامل پنیر ، خامه ،کره و بستنی سنتی به طور تصادفی از لبنیاتیهای شهر اصفهان و اطراف اصفهان در ظروف سترون نمونه گیری و طی کوتاهترین زمان به آزمایشگاه میکروب شناسی دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهر کرد انتقال داده شد.

1.کشت و جداسازی باکتری

ابتدا نمونه ها به لوله های حاوی محیط کشت پریستون انتقال داده شد و به مدت 48-24 ساعت در انکوباتور با دمای 25 درجه سانتیگراد گرم خانه گذاری گردید. پس از گذشت زمان مورد نظر از باکتریهای رشد یافته با کمک لوپ استریل بر روی محیط CAMP (مرک- آلمان)، غنی شده با خون گوسفند دفیبرینه شده که حاوی آنتی بیوتیکهایی مانند ونکومایسین 2 میلیگرم/میلیلیتر، پلی میکسین 0/005 میلیگرم/میلیلیتر، تری متوپریم1 میلیگرم/میل لیتر بود، کشت صورت گرفت . سپس محیط های کشت در داخل انکوباتور 25 درجه به مدت 72-24 ساعت قرارداده شد. پس از دوره زمانی گرمخانه گذاری پلیت ها جهت شناسایی آرکوباکترها مورد ارزیابی قرار گرفتند. بر روی محیط کشت پایه ، کلنی باکتری به شکل محدب، صاف، شفاف، بدون رنگ تا کرم به اندازه 2-4 میلیمتر بعنوان کلنی مشکوک به آرکوباکتر در نظر گرفته شد. این کلنی ها جهت شناسایی اولیه آرکوباکترها مورد آزمایشات میکروبی مانند رنگ آمیزی گرم، تست های کاتالاز، اکسیداز و تخمیر قند گلوکز و حرکت قرار گرفتند. با مشاهده باسیل های خمیده گرم منفی، متحرک، اکسیداز مثبت و منفی شدن تست تخمیر قند گلوکز، می توان تا حدود بسیار زیادی به جداسازی و شناسایی جنس آرکوباکتر مطمئن شد سپس در مرحله بعد از تستهای فنوتیپی معرفی شده به وسیله آتابای و کوری(1998)که شامل تستهای تولید اوره آز، رشد در دمای 37 درجه سانتیگراد و شرایط میکروآئروفیلیک و رشد در مک کانگی آگار بود، استفاده گردید

2. تایید و تشخیص آرکوباکتر به روش PCR

برای انجام PCR ، ابتدا با استفاده از کیت (شرکت کیاژن ساخت ایران) استخراج DNA از کُلنی ها طبق دستور العمل شرکت سازنده انجام شد سپس به منظور اجرای روند ، پرایمر های فوروارد و ریوارس برای شناسایی ژن SrRNA 16استفاده گردید که این ناحیه ژنی در تمام گونه های آرکوباکتر وجود دارد (جدول ۱) جهت انجام فرایند پلیمریزاسیون دستگاه ترمال سایکلر به مدت 4 دقیقه در دماي 94 درجۀ سانتیگراد جهت دناتوراسیون اولیه قرار داده شد. سپس 35 سیکل PCR شامل 94 درجۀ سانتیگراد براي 45 ثانیه، 54 درجۀ سانتیگراد براي 45 ثانیه و 72 درجۀ سانتیگراد براي 90 ثانیه انجام شد. در خاتمه به مدت 10 دقیقه نیز عمل طویل سازي نهایی در 72 درجۀ سانتیگراد انجام گرفت . روش آزمون و برنامه حرارتی اعمال شده مطابق دستورالعمل sane و همکاران (۲۰۰۷) اعمال و جهت ردیابی محصول مورد نظر از ژل 5/1 درصد آگاروز استفاده گردید. به این صورت که پس از قرار دادن ژل در داخل تانک الکتروفورز، مقدار 5 میکرولیتر از DNA تکثیر یافته به همراه 0/5 میکرولیتر ژل رد داخل هر یک از چاهک های تعبیه شده در ژل آگاروز منتقل گردید. سپس ولتاژ بر روی 100 -110 ولت تنظیم نموده و 30 الی 40دقیقه زمان در نظر گرفته شد. پس از گذشت زمان فوق، ژل به درون دستگاه UV ترانس لومیناتور منتقل گردید تا باندهای تشکیل شده مشاهده گردد (شکل 1)

3. ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیک

به منظور ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی از روش انتشار دیسکی طبق معیار (2017)CLSI استفاده شد. ایزوله های جدا شده به روش متراکم درمحیط مولرهینتون آگار واجد 5 درصد خون دفیبرینه گوسفند کشت ومقاومت آتی بیوتیکی آن ها در حضور دیسک های آنتی بیوتیکی شامل اریترومایسن (15 میکروگرم) ،سیپروفلوکساسین (53میکروگرم)، تتراسایکلین (30میکروگرم)، سفوتاکسیم (30میکروگرم)، جنتامایسین(30میکروگرم)، آموکسی سیلین (10/20)، آمپی سیلین(10میلی گرم) و نالیدیکسیک اسید (30 میکروگرم) ، سفالوتین (30 میکروگرم) ارزیابی گردید. تمام آنتی بیوتیک ها از شرکت پادتن طب (ساخت ایران) تهیه شدند

نتایج

در مجموع 750 نمونه شیر خام و فراورده های شیر شامل تعداد 120 نمونه مربوط به شیر خام گاو، 60 نمونه شیر خام گوسفند ، 100 نمونه شیر خام بز ، 32 نمونه مربوط به شیر خام گاومیش ، 38 نمونه مربوط به شیر خام شتر، 400 نمونه از فراورده های خام دامی شامل پنیر سنتی ، کره سنتی، بستنی سنتی و خامه (100 نمونه از هر کدام ) جمع آوری گردید . طبق نتایج بدست آمده در این مطالعه هیچ یک از فراورده های شیر به آرکوباکتر ها آلوده نبودند. همچنین تمام نمونه های شیر خام بجز شیر شتر به آرکوباکتر آلوده بودند، در این مطالعه از 18 نمونه درگیر به آرکوباکتر 15 نمونه مربوط به گونه آرکوباکتر بوتزلری و 3 نمونه مربوط به گونه آرکوباکترکری ائروفیلوس شناسایی شد . شیر خام گاو دارای بیشترین آلودگی به آرکوباکتر نسبت به بقیه نمونه ها بود در ادامه نتایج این تحقیق نشان داده شد که آرکوباکتر بوتزلری در همه نمونه های شیر خام آلوده وجود داشت ولی آرکوباکتر کری ائروفیلوس فقط در شیر خام گاو و گوسفند یافت شد .(جدول 2 )

جدول ۱- توالی ها

TTCGCTTGCGCTGCATCAT Arcobacter 1

AGCGTTCTATTCAGCGTAGAAGATGT A.butzleri 2

ACCGAAGCTTTAGATTCGAATTTATTCA A.cryaerophilus 3

شکل 1: تصویر الکتروفورز برای ردیابی آرکوباکتر روی ژل آگارز1/5 درصد

M خط کش مولکولی ، 1,2,3,4,5 نمونه هاي آرکوباکتر جداشده ، Cکنترل منفی

جدول ۲ : نتایج مربوط به شیوع آرکوباکتر در شیر و فراورده های آن

آرکوباکتر کری ائروفیلوس	آرکوباکتر بوتزلری	نمونه مثبت	تعداد نمونه	نوع نمونه
2(18/18%)	9(81/8%)	11(9/16%)	120	شیر خام گاو
0	2(100%)	2(2%)	100	شیر خام بز
1(33/3%)	2(66/6%)	3(5%)	60	شیر خام گوسفند
0	2(100%)	2(6/2%)	32	شیر خام گاومیش
0	0	0	38	شیر خام شتر
3(16/6%)	15(83/3%)	18(2/4%)	350	جمع

جدول ۳ : نتایج مربوط به مقاومت دارویی در سویه آرکوباکتر بوتزلری

سپروفلوکساسین	اریترومایسین	تتراسایکلین	اسید نالیدیکسیک	سفوتاکسیم	سفالوتین	آموکسیسیلین	آمپیسیلین	استرپتومایسین	جنتامایسین
1(11%)	1(11%)	9(100%)	6(6/66%)	7(7/77%)	7(7/77%)	8(8/8%)	9(100%)	2(22%)	1(11%)	شیر خام گاو (9)
1(50%)	1(50%)	2(100%)	2(100%)	-	2(100%)	1(50%)	2(100%)	1(50%)	-	شیر خام بز(2)
1(50%)	-	2(100%)	1(50%)	-	2(100%)	1(50%)	2(100%)	-	-	شیر خام گوسفند(2)
-	-	2(100%)	-	-	1(50%)	-	2(100%)	-	-	شیر خام گاومیش(2)

نتایج حاصل از بررسی میزان حساسیت با آنتی بیوتیک های استفاده شده نشان داد که تمام آرکوباکتر بوتزلری جدا شده از شیر به آمپیسیلین و تتراسایکلین مقاومت نشان دادند و حداقل یک ایزوله از شیر خام گاو به هر آنتی بیوتیک آزمایش شده مقاوم بود. همچنین آنالیز نتایج نشان داد که تمام جدایه های آرکوباکتر بوتزلری از شیر خام گوسفند و بز به آنتی بیوتیک سفالوتین مقاوم بودند.

جدول ۴ : نتایج مربوط به مقاومت دارویی در سویه آرکوباکتر کری ائروفیلوس

سپروفلوکساسین	اریترومایسین	تتراسایکلین	اسید نالیدیکسیک	سفوتاکسیم	سفالوتین	آموکسیسیلین	آمپیسیلین	استرپتومایسین	جنتامایسین
-	-	2	1	2	2	2	1	-	-	شیر خام گاو (2)
-	-	1	1	-	1	-	1	-	-	شیر خام گوسفند(1)

مطابق جدول 4 آنالیز نتایج نشان داد که باکتری کری ائروفیلوس شیر به جنتامایسین، استرپتومایسین، اریترومایسین و سیپروفلوکساسین حساس می باشد همچنین نتایج آنتی بیوگرام نشان داد که تمام جدایه های شیر خام گاو به آموکسی سیلین-کلاوولانیک اسید، سفالوتین، سفوتاکسیم و تتراسایکلین مقاومت نشان دادند . نتایج آزمون حساسیت و مقاومت در جدایه شیر خام گوسفند نیز نشان داد که آرکوباکتر کری ائروفیلوس به آمپی سیلین، سفالوتین، نالیدیکسیک اسید و تتراسایکلین مقاومت بوده و آنتی بیوتیک های فوق فاقد کارایی لازم می باشند .

بحث

نتیجه گیری

مصرف مستقیم شیر خام ممکن است انسان را در معرض عوامل خطرناک مشترک بین انسان و دام مانند گونه های آرکوباکتر قرار دهد. پاستوریزه و استریل کردن شیر قبل از تبدیل به محصولات لبنی می تواند تا حدود زیادی از گسترش این باکتری در این محصولات بکاهد مطالعه حاضر نشان داد که بیشترین میزان شیوع مربوط به شیر خام گاو (16/9%) و گوسفند (5%) بود در مجموع، بیشترین مقاومت دارویی مربوط به سفالوتین ، آمپیسیلین و تتراسایکلین و کمترین مقاومت مربوط به جنتامایسین و اریترومایسین می باشد. تست حساسیت ضد میکروبی در این مطالعه نشان داد که مقاومت در برابر آنتی بیوتیک های خط اول مورد استفاده در بالینی و دامپزشکی افزایش یافته است بنابراین، هنگام کنترل آلودگی آرکوباکتر و همچنین درمان عفونت های ناشی از گونه های آرکوباکتر در حیوانات و انسان، باید به این نتایج توجه کرد. همچنین توصیه می شود این مطالعه در سایر نقاط کشور اجرا تا میزان آلودگی در کشور تخمین زده شود.

تقدیر و تشکر

نویسندگان این مقاله از تمام کسانی که ما را حمایت کردند تقدیر و تشکر می نماید .

منابع

1. Abdelbaqi, K., et al. 2007. Development of a real-time fluorescence resonance energy transfer PCR to detect Arcobacter species. J. Journal of clinical microbiology. 45:3015-3021. Crossref. PubMed.

2. Arias, M. L., Cid, A., Fernandez, H. (2017). Arcobacter butzleri first isolation eport from chicken carcasses in costa Rica, Brazilian Journal of Microbiology, 10: 12-13.

3. Arias, M.L, Cid, A., Fernandez, H. (2010). First isolation report from chicken carcasses in costarica, Journal of Brasilian microbiology 42: 703-706.

4. Collado, L. 2010. Taxonomy and epidemiology of the genus Arcobacter. Ph.D. thesis. Rovira i Virgili University, Reus, Spain. Crossref.

5. Collado. L., Guarro, K., Figueras, M.J. (2009). Prevalence of Arcobacter in Meat and shellfish. Journal food Prot. 72:1102-1106.

6. Douidah, L., L. De Zutter, P. Vandamme, J. Baré, and K. Houf. 2009. Virulence determinants in clinical and non-clinical human and animal Arcobacter butzleri strains. In Proceedings of the 15th International Workshop on Campylobacter, Helicobacter and Related Organisms (CHRO), Niigata, Japan.

7. Ferreira S, Queiroz JA, Oleastro M, Domingues FC. 2016. Insights in the pathogenesis and resistance of Arcobacter: a review. Critical Reviews in Microbiology. 42:364–383.

8. Forsythe, S. J. 2006. Arcobacter, p. 181-221. In Y. Motarjemi and M. Adams (ed.), Emerging foodborne pathogens. CRC Press, New York, NY.

9. Figueras, M. J., L. Collado, and J. Guarro. 2008. A new 16S rDNA-RFLP method for the discrimination of the accepted species of Arcobacter. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 62:11-15. [PubMed] [Google Scholar]

10. Giacomett, F., Lucchi, A., Manfreda, G., Florio, D., Zanon, R, G., Serrainoa, A. (2013). Occurrence and Genetic Diversity of Arcobacter butzleri in an Artisanal Dairy Plant in Italy. Applied and environmental microbiology. 79 (21); 6665-6669.

11. Greisen K, Loeffelholz M, Purohit A, Leong D 1994. PCR primers and probes for the 16S rRNA gene of most species of pathogenic bacteria, including bacteria found in cerebrospinal fluid. Journal of Clinical Microbiology 32: 335-351.

12. Houf, K. 2010. Arcobacter, p. 289-305. In D. Liu (ed.), Molecular detection of foodborne pathogens. CRC Press, Boca Raton, FL.

13. Ho, H. T., L. J. Lipman, and W. Gaastra. 2006. Arcobacter, what is known and unknown about a potential foodborne zoonotic agent! Journal of Veterinary Microbiology. 115:1-13. PubMed.

14. ICMSD. (2002). Microorganisms in foods. 7./microbiological testing foodsafety management, International commission on microbiological specifications for foods. Kluwer Academic Plenum. NEW York., NY.

15. Jacob, J., Lior, H., Feuerpfeil, I. (1993). Isolation of Arcobacter butzleri from a drinking water reservoir in eastern Germany. Zentralblatt für Hygiene und Umweltmedizin, 193: 557-562.

16. Jiang, Z. D., et al. 2010. Microbial etiology of travelers' diarrhea in Mexico, Guatemala and India importance of enterotoxigenic Bacteroides fragilis and Arcobacter species. Journal of Clinical Microbiology. 48:1417-1419. Crossref. PubMed.

17. Kopilovic, B., V. Ucakar, N. Koren, M. Krek, and A. Kraigher. 2008. Waterborne outbreak of acute gastroenteritis in a costal area in Slovenia in June and July 2008. Journal of Eurosurveillance 13:1-3.

18. Kownhar, H., E. M. Shankar, R. Rajan, A. Vengatesan, and U. A. Rao. 2007. Prevalence of Campylobacter jejuni and enteric bacterial pathogens among hospitalized HIV infected versus non-HIV infected00

19. Korolik V, Ketley JM. Campylobacter chemotaxis. In: Ketley JM, Konkel ME, editors. Campylobacter: Molecular and Cellular Biology. Norfolk, UK: Horizon Bioscience; 2006. pp. 349–367.

20. Lau, S. K., P. C. Woo, J. L. Teng, K. W. Leung, and K. Y. Yuen. 2002. Identification by 16S ribosomal RNA gene sequencing of Arcobacter butzleri bacteraemia in a patient with acute gangrenous appendicitis. Journal of Molecular Pathology. 55:182-185. PubMed.

21. Lau SK, Woo PC, Teng JL, Leung KW, Yuen KY. Identification by 16S ribosomal RNA gene sequencing of Arcobacter butzleri bacteraemia in a patient with acute gangrenous appendicitis. Journal of Molecular Pathology. 2002 Jun;55(3):182.

22. Ramees TP, Dhama K, Karthik K, Rathore RS, Saminathan M, Tiwari R, Malik YS, Singh RK. (2017). Arcobacter: an emerging food- born zoonotic pathogen, its public health concerns and advances in diagnosis and control – a comprehensive. Journal of Veterinary Quarterly. 37(1): 136-161

23. Teague NS, Srijan A, Wongstitwilairoong B, Poramathikul K, Champathai T, Ruksasiri S, et al. Enteric pathogen sampling of tourist restaurants in Bangkok, Thailand. Journal of Travel Medicine. 2010;17(2):118–23. 10.1111/j.1708-8305.2009.00388.

24. Wang, X., Seo, J.S., Lee, M.H., Choi, C. (2014). Comparison of conventional PCR, Multiplex PCR, and Loop- Mediated Isothermal Amplification Assays for Rapid Detection of Arcobacter Species. Journal of Food Protection. 52: 557-563.

25. Wilson,D.L.,Abner,S.R.,Newman,T.C.,Mansfield,L.S.,andLinz,J.E.2000.Identificationof ciprofloxacin resistant Campylobacter jejuni by use of afluorogenic PCR assay. Journal of Clinical Microbiology.38(11):3971-3978.

26. Yan, J. J., et al. 2000. Arcobacter butzleri bacteremia in a patient with liver cirrhosis. Journal of the Formosan Medical Association. 99:166-169. PubMed.

Investigation of the prevalence and antibiotic resistance of Arcobacter in raw milk and its products in Isfahan province in 1401

Lameei A¹ Rahimi E ² * Shakerian A³ Momtaz H ⁴

1. Department of Food Hygiene, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran.

2.professor Department of Food Hygiene, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran.

3.professor Research Center of Nutrition and Organic Products, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran.

4. professor Department of Microbiology, Islamic Azad University, Shahrekord Branch, Shahrekord, Iran.

Abstract

Introduction: Arcobacteria are the cause of common diseases between humans and animals and are transmitted through water and food. So far, little information has been published about the pathogenic mechanisms of Arcobacteria. These bacteria can also opportunistically infect people with weak immunity. cause severe diseases. The present study was conducted with the aim of investigating drug resistance of Arcobacter and identifying virulence and resistance genes in raw milk in Isfahan province Materials and methods: In this study, to detect Arcobacter, 350 samples of raw milk from 5 species of animals, including cows, sheep, goats, camels, and buffaloes, and 400 samples of milk products, including cheese, cream, butter, and traditional ice cream, were randomly selected. Samples were taken from the dairies of Isfahan city and around Isfahan and were transferred to the microbiology laboratory of Kurd University in the shortest possible time. Then, bacteria grown in Preston medium with the help of a sterile loop on CAMP medium (Merck-Germany), enriched with defibrinated sheep blood containing antibiotics such as vancomycin 2 mg/ml, polymyxin 0.005 mg/ml, tri Methoprim was 1 mg/ml, linear culture was done. Also, in order to evaluate the phenotypic antibiotic resistance, the simple disk diffusion method was used according to CLSI (2017) criteria

Findings: Out of a total of 350 samples of raw milk and 400 samples of milk products examined, 18 samples were infected with at least one species of Arcobacter. These 18 cases were only isolated from raw milk and none of the milk products were infected with this bacterium. Also, out of 18 samples infected with Arcobacter species, 15 samples were infected with Arcobacter botzeleri and 3 samples were infected with Arcobacter cari aerophilus . The highest antibiotic resistance was also evaluated for ampicillin, amoxicillin-clavulanic acid, cephalothin, cefotaxime and tetracycline.

Key words: Arcobacter, raw milk, antibiotic resistance

*Corresponding author: Ebrahim rahimi

Address: Department of Veterinary, shahrekord Branch, Islamic Azad University,shahrekord, Iran

E. mail: ebrahimrahimi55@yahoo.com

Share To

Article Url

Sanad

Links

Related Centers

Technical Support

Official pages