نقش محافظتی مخلوط پروبیوتیک(لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس )بر ساختار بافت روده باریک موش آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس
الموضوعات :
1 - دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه¬زیست¬شناسی، واحد¬تهران¬مرکزی،¬ دانشگاه¬آزاد¬اسلامی،¬ تهران،¬ ایران
2 - استادیار، گروه¬زیست¬شناسی، واحد¬تهران¬مرکزی،¬ دانشگاه¬آزاد¬اسلامی،¬ تهران،¬ ایران
الکلمات المفتاحية: پروبیوتیک, روده باریک, استافیلوکوکوس اورئوس, موش صحرایی,
ملخص المقالة :
مقدمه: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از شایعترین علل مسمومیتهای غذایی است که با دارابودن توکسینهای متعددی باعث ایجاد مسمومیت غذایی میشود.پروبیوتیکها میکروارگانیسمهای زنده و مفیدی هستند که میتوانند پاسخ ایمنی میزبان را تعدیل کنند و موجب پیشگیری و درمان بیماریهای مختلف شوند.
هدف: هدف از این پژوهش بررسی اثرمحافظی مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس ) بر بافت روده باریک موشهای صحرایی نر آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس میباشد.
مواد و روشها:در این مطالعه تجربی 21 موش صحرایی نر نژاد ویستار، در سه گروه شامل گروه کنترل، آلوده به استافیلوکوکوس اورئوس CFU / ml)108 ) و مدل آلوده + دریافت کننده پروبیوتیک (CFU / ml109 ) تقسیم بندی شدند. القا آلودگی با تزریق درون صفافی و دریافت پرو بیوتیک به مدت 35 روز با روش گاواژ انجام شد. بعد از دوره تیمار و تشریح حیوانات ،بافت روده باریک جهت بررسی در گروههای مختلف استخراج شد. آنالیز دادههادر گروههای محتلف با نرم افزارSPSS و آزمون آماری واریانس یکطرفه انجام و 05/0P< معنی‌دار در نظر گرفته شد.
نتایج: نتایج حاصل، تغییر معنادار آسیب بخشهای مختلف بافت روده باریک گروه آلوده را در مقایسه با گروه کنترل نشان داد.در حالیکه تغییرات مثبت آسیبهای القایی در روده باریک گروه تیمار در مقایسه با گروه آلوده به صورت معنادار نشان داده شد.
نتیجهگیری: براساس نتایج به دست آمده مخلوط پروبیوتیک اثر حفاظتی بر تخریب بافت روده باریک موشهای آلوده به باکتری را نشان داد. بنابراین احتمالا بتواند به عنوان یک ابزار امیدوارکننده درمانی در جهت کاهش آسیبهای بافت روده باریک استفاده شود
1.Mitevska E, Wong B, Surewaard BG, Jenne CN. The prevalence, risk, and management of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection in diverse populations across Canada: a systematic review. Pathogens. 2021 Mar 10(4):393.
doi: 10.3390/pathogens10040393.
2.Liu A, Garrett S, Hong W, Zhang J. Staphylococcus aureus Infections and Human Intestinal Microbiota. Pathogens. 2024 March 13(4):276.
doi.org/10.3390/pathogens13040276.
3.Howden BP, Giulieri SG, Wong Fok Lung T, Baines SL, Sharkey LK, Lee JY, Hachani A, Monk IR, Stinear TP. Staphylococcus aureus host interactions and adaptation Nat. Rev. Microbiol. 2023 Jun 21(6):380-95.
doi: 10.1038/s41579-023-00852-y.
4.Hu X, Guo J, Zhao C, Jiang P, Maimai T, Yanyi L, Cao Y, Fu Y, Zhang N. The gut microbiota contributes to the development of Staphylococcus aureus-induced mastitis in mice. The ISME journal. 2020 Jul 14(7):1897-910.doi: 10.1038/s41396-020-0651-1.
5. Zhao C, Wu K, Hao H, Zhao Y, Bao L, Qiu M, He Y, He Z, Zhang N, Hu X, Fu Y. Gut microbiota-mediated secondary bile acid alleviates Staphylococcus aureus-induced mastitis through the TGR5-cAMP-PKA-NF-κB/NLRP3 pathways in mice. NPJ biofilms and microbiomes. 2023 Feb 9(1):8.
doi.org/10.1038/s41522-023-00374-8.
6. Chen H, Zhang J, He Y, Lv Z, Liang Z, Chen J, Li P, Liu J, Yang H, Tao A, Liu X. Exploring the role of Staphylococcus aureus in inflammatory diseases. Toxins. 2022 Jul 14(7):464.
doi: 10.3390/toxins14070464.
7.Piewngam P, Khongthong S, Roekngam N, Theapparat Y, Sunpaweravong S, Faroongsarng D, Otto M. Probiotic for pathogen-specific Staphylococcus aureus decolonisation in Thailand: a phase 2, double-blind, randomised, placebo-controlled trial. The Lancet Microbe. 2023 Feb 4(2):e75-83.
doi: 10.1016/S2666-5247(22)00322-6.
8.Tang J, Zhao M, Yang W, Chen H, Dong Y, He Q, Miao X, Zhang J. Effect of Composite Probiotics on Antioxidant Capacity, Gut Barrier Functions, and Fecal Microbiome of Weaned Piglets and Sows. Animals. 2024 Apr 14(9):1359. doi.org/10.3390/ani14091359.
9.Chandrasekaran P, Weiskirchen S, Weiskirchen R. Effects of Probiotics on Gut Microbiota: An Overview. Sci Rep . 2024 May 25(11):6022.
doi: 10.3390/ijms25116022.
10.Watanabe M, Nakai H, Ohara T, Kawasaki K, Murosaki S, Hirose Y. Beneficial effect of heat-killed Lactiplantibacillus plantarum L-137 on intestinal barrier function of rat small intestinal epithelial cells. Sci Rep .2024 May 14(1):12319.
doi.org/10.1038/s41598-024-62657-0.
11.Shawky LM, Abo El Wafa SM, Behery M, Bahr MH, Abu Alnasr MT, Morsi AA. Lactobacillus rhamnosus GG and Tannic Acid Synergistically Promote the Gut Barrier Integrity in a Rat Model of Experimental Diarrhea via Selective Immunomodulatory Cytokine Targeting.Molecular Mol Nutr Food Res. 2024 Aug 68(16):2400295.
doi: 10.1002/mnfr.202400295.
12.Di Vincenzo F, Del Gaudio A, Petito V, Lopetuso LR, Scaldaferri F. Gut microbiota, intestinal permeability, and systemic inflammation: a narrative review. Intern Emerg Med .2024Mar19(2):275-93.doi: 10.1007/s11739-023-03374-w.
13.Liang H, Wang Y, Liu F, Duan G, Long J, Jin Y, Chen S, Yang H. The Application of Rat Models in Staphylococcus aureus Infections. Pathogens. 2024 May 13(6):434.
doi.org/10.3390/pathogens13060434.
14.Ahmadi Z, Tajbakhsh H, Momtaz H. Detection of the antibiotic resistance pattern in staphylococcus aureus isolated from clinical samples obtained from patients hospitalized in imam raze hospital, kermanshah. World J Microbiol Biotechnol .2014 Mar 6(4 (17)):209-311.
doi.org/10.5812/jkums.118807.
15.Tabaei S, Kouhi Noghondar M, Mohammadzadeh, M,Ataei L, Amel Jamehdar S. Pattern of antibiotic resistance in methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains isolated from clinical specimens: Imam Reza hospital in Mashhad. Med. J. Mashhad Univ. Med. Sci.,2016 Jul-Oct 59(2): 64-70.
doi.org/10.5812/jkums.118807.
16. Liu Y, Zhang J, Ji Y. Environmental factors modulate biofilm formation by Staphylococcus aureus. Sci. Prog.. 2020 Mar103(1):0036850419898659.
doi: 10.1177/0036850419898659.
17. Barzin oshtologh A, Keshtmand, Z, Samadikhah H R. Effect of protective of a mixture of native Iranian probiotics (Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei and Lactobacillus holoticus) on the Damage of Rat male Small Intestinal tissue Caused by lead acetate. Iranian Journal of Biological Sciences. 2022 May 16 : 71-80.
18. Gulgun M, Erdem O, Oztas E, Kesik V, Balamtekin N, Vurucu S, Kul M, Kismet E, Koseoglu V. Proanthocyanidin prevents methotrexate-induced intestinal damage and oxidative stress. Exp Toxicol Pathol .2010 Mar 62(2):109-15.
doi: 10.1016/j.etp.2009.02.120.
19.Men Q, Zhang P, Zheng W, Song S, Ai C. Fucoidan alleviates Salmonella-induced inflammation and mortality by modulating gut microbiota and metabolites, protecting intestinal barrier, and inhibiting NF-κB pathway. Food Biosci.2023 Dec 1;56:103209.
doi.org/10.1016/j.fbio.2023.103209.
20. Rowe SE, Wagner NJ, Li L, Beam JE, Wilkinson AD, Radlinski LC, Zhang Q, Miao EA, Conlon BP. Reactive oxygen species induce antibiotic tolerance during systemic Staphylococcus aureus infection. Nat. Microbiol.. 2020 Feb 5(2):282-90.
doi: 10.1038/s41564-019-0627-y.
21.Siméon Pierre Chegaing Fodouop, Donatien Gatsing, Benjamin Talom Tangue, Richard Simo Tagne, Sédric Donald Tala, Joseph Tchoumboué, Jules Roger Kuiate,Effect of Salmonella typhimurium infection on rat's cell oxidation and in vivo antioxidant activity of Vitellaria paradoxa and Ludwigia abyssinica aqueous extract, Asian Pac J Trop Dis.2015 Jan 5(1): 38-46.
doi.org/10.1016/S2222-1808(14)60624-1.
22.Djenguemtar J, Goka MS, Noubom M, Konack EY, Kamsu GT, Sokoudjou JB, Feudjio HB, Kodjio N,Gatsing D. In vivo Antisalmonellal and Antioxidant Activity of Hydroethanolic Extract of Bauhinia rufescens Leaves in Wistar AlbinoRats Infected with Salmonella Typhi. Microbiol. Res. J. Int.2023Sep33 (2):39-53.
doi 10.9734/mrji/2023/v33i21366.
23.Hosseini S, Keshtmand Z, Mlrnurollahi S M. Investigating the effect of probiotics mixture (Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus heloticus) on small intestine tissue infected with Escherichia coli bacteria in male rats. J. Appl. Microbiol.2023Sep 2(9) 79-87.
doi.org/10.1186/s40104-021-00624-9.
24.Zhu T, Mao J, Zhong Y, Huang C, Deng Z, Cui Y, Liu J, Wang H. L. reuteri ZJ617 inhibits inflammatory and autophagy signaling pathways in gut-liver axis in piglet induced by lipopolysaccharide. JASB. 2021 Dec 12:1-6.
doi.org/10.1186/s40104-021-00624-9.
25. Teshfam M, Rahimi SH, Karimi K. Effect of various levels of probiotic ou morpliology of iutestinal mucosa in brioler chicks. J Vet Res. 2005 60(3):205-211.
26. Zhang J, Zhao J, Jin H, Lv R, Shi H, De G, Yang B, Sun Z, Zhang H. Probiotics maintain the intestinal microbiome homeostasis of the sailors during a long sea voyage.Gut Microbes.2020 Jul 11(4):930-43
.doi: 10.1080/19490976.2020.1722054.
27.Varela-Trinidad GU, Domínguez-Díaz C, Solórzano-Castanedo K, Íñiguez-Gutiérrez L, Hernández-Flores TD, Fafutis-Morris M. Probiotics: Protecting our health from the gut. Microorganisms. 2022 Jul 10(7):1428.
doi: 10.3390/microorganisms10071428.
28.Gorreja F, Walker WA. The potential role of adherence factors in probiotic function in the gastrointestinal tract of adults and pediatrics:a narrative review of experimental and human studies. Gut Microbes.2022 Dec 14(1):2149214. doi: 10.1080/19490976.2022.2149214.
29.Dvorožňáková E, Vargová M, Hurníková Z, Lauková A, Revajová V. Modulation of lymphocyte subpopulations in the small intestine of mice treated with probiotic bacterial strains and infected with Trichinella spiralis. J Appl Microbiol .2022 Jun 132(6):4430-9.
doi: 10.1111/jam.15534.
30.Cao F, Jin L, Gao Y, Ding Y, Wen H, Qian Z, Zhang C, Hong L, Yang H, Zhang J, Tong Z. Artificial-enzymes-armed Bifidobacterium longum probiotics for alleviating intestinal inflammation and microbiota dysbiosis. Nat. Nanotechnol. 2023 Jun18(6):617-27.
doi: 10.1038/s41565-023-01346-x.
31.Wu Y, Yang F, Jiang W, Hu A, Xiong Z, Yang S, Cao P, Cao Z, Xiong Z, Cao H. Effects of compound probiotics on intestinal barrier function and caecum microbiota composition of broilers. Avian Pathol. 2022 Sep 51(5):465-75.
doi.org/10.1080/03079457.2022.2100740.
32.Mazziotta C, Tognon M, Martini F, Torreggiani E, Rotondo JC. Probiotics mechanism of action on immune cells and beneficial effects on human health. Cells. 2023 Jan 12(1):184.
doi: 10.3390/cells12010184.
33. Qi X, Xiao Y, Zhang X, Zhu Z, Zhang H, Wei J, Zhao Z, Li J, Chen T. Probiotics suppress LL37 generated rosacea-like skin inflammation by modulating the TLR2/MyD88/NF-κB signaling pathway. FOOD FUNCT .l 2024;15(17):8916-34. doi.org/10.1039/D4FO03083D.
34. Winther KD, Boll EJ, Sandvang D, Williams AR. Probiotic Bacillus spp. enhance TLR3‐mediated TNF signalling in macrophages. J Immunol ; 2024 Mar 171(3):402-12. doi: 10.1111/imm.13721.
شیوا صیدی1، زهرا کشتمند2 *
1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروهزیستشناسی، واحدتهرانمرکزی، دانشگاهآزاداسلامی، تهران، ایران
2 استادیار، گروهزیستشناسی، واحدتهرانمرکزی، دانشگاهآزاداسلامی، تهران، ایران
*نویسنده مسئول: zkeshtmand2001@gmail.com
محل انجام تحقیق: دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران مرکزی گروه زیست شناسی
ارسال: 1403/08/25
بازنگری: 19/10/1403
پذیرش: 1403/11/10
چکیده
مقدمه: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از شایعترین علل مسمومیتهای غذایی است که با دارابودن توکسینهای متعددی باعث ایجاد مسمومیت غذایی میشود. پروبیوتیکها میکروارگانیسمهای زنده و مفیدی هستند که میتوانند پاسخ ایمنی میزبان را تعدیل کنند و موجب پیشگیری و درمان بیماری های مختلف شوند. هدف از این پژوهش بررسی اثرمحافظی مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس ) بر بافت روده باریک موشهای صحرایی نر آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس میباشد.
مواد و روشها: در این مطالعه تجربی 21 موش صحرایی نر نژاد ویستار، در سه گروه شامل گروه کنترل، آلوده به استافیلوکوکوس اورئس (ATCC25923) CFU / ml)108 ) و مدل آلوده + دریافت کننده پروبیوتیک (CFU / ml109 ) تقسیم بندی شدند. القا آلودگی با تزریق درون صفافی و دریافت پروبیوتیک به مدت 35 روز با روش گاواژ انجام شد. بعد از دوره تیمار و تشریح حیوانات، بافت روده باریک جهت بررسی در گروههای مختلف استخراج شد. آنالیز دادهها در گروههای محتلف با نرم افزارSPSS و آزمون آماری واریانس یکطرفه انجام و 05/0P< معنی‌دار در نظر گرفته شد.
نتایج: نتایج حاصل، تغییر معنادار آسیب بخشهای مختلف بافت روده باریک گروه آلوده را در مقایسه با گروه کنترل نشان داد. در حالیکه تغییرات مثبت آسیبهای القایی در روده باریک گروه تیمار در مقایسه با گروه آلوده به صورت معنادار نشان داده شد.
نتیجهگیری: براساس نتایج به دست آمده مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس) اثر حفاظتی بر تخریب بافت روده باریک موشهای آلوده به باکتری را نشان داد. بنابراین احتمالا بتواند به عنوان یک ابزار امیدوارکننده درمانی در جهت کاهش آسیبهای بافت روده باریک استفاده شود.
کلمات کلیدی: پروبیوتیک، روده باریک، استافیلوکوکوس اورئوس، موش صحرایی
شـــیوه آدرس دهـــی این مقاله : ش صیدی، ز کشتمند. نقش محافظتی مخلوط پروبیوتیک(لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس )بر ساختار بافت روده باریک موش های صحرایی آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس. مجله دانش زیســـتی ایـــران. 1403: 19 (2): .-....
Shiva Sayidi1, Zahra Keshtmand*2
Ms Student, Departmant of Biology, Central Tehran Branch, Islamic Azad Univercity, Tehran, Iran
Assistant Professor, Departmant of Biology, Central Tehran Branch, Islamic Azad Univercity, Tehran, Iran
*Corresponding Author: zkeshtmand2001@gmail.com
Received: 15 - 11 - 2024
Revised: 8 - 1 - 2025
Accepted : 29 - 1 - 2025
Place of research: Laboratory of Central Tehran Branch, Islamic Azad Univercity
Introduction: Staphylococcus aureus is one of the most common causes of food poisoning, which causes food poisoning by containing numerous toxins. Probiotics are live and beneficial microorganisms that can modulate the host's immune response and prevent and treat various diseases. The aim of this research is to investigate the protective effect of the probiotic mixture (Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paracasei, and Lactobacillus brevis) on the small intestine tissue of male rats infected with Staphylococcus aureus bacteria.
Material and Methods: In this experimental study, 21 male Wistar rats were subjected to three the group included the control group, infected with Staphylococcus aureus (ATCC25923) (108 CFU/ml) and the infected model + probiotic recipient (109 CFU/ml). Induction of infection was done by intraperitoneal injection and receiving probiotics for-35 days by gavage method. After the treatment and dissection of the animals, the tissue of the small intestine was extracted for examination in different groups. Data analysis in different groups was done with SPSS software and a one-way statistical test of variance and P<0.05 was considered significant.
Results: The results showed a significant change in the damage of different parts of the small intestine tissue in the infected group compared to the control group showed. At the same time, the positive changes in induced damage in the small intestine of the treatment group were significant compared to the infected group.
Conclusion: Based on the obtained results, the probiotic mixture showed a protective effect on the destruction of the small intestine tissue of rats infected with bacteria. Therefore, it can probably be used as a promising therapeutic tool to reduce small intestinal tissue damage.
KeyWords: probiotic, small intestine, Staphylococcus aureus, rat
Cite this article: Sayidi SH, Keshtmand Z, The protective role of the probiotic mixture (Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paracasei, and Lactobacillus brevis) on the structure of small intestine tissue of rats infected with Staphylococcus aureus bacteria. Iranian Journal of Biological Sciences. 2024; 19 (2): …-…
مقدمه
در سال‌های اخیر بیماریهای عفونی و مقاومت میکروب‌ها یکی از مشکلات مهم در حوزه بهداشت و درمان و یکی از مهم‌ترین عوامل افزایش مرگ و میر در جهان می‌باشند(1).
استافیلوکوکوس اورئوس باکتری گرم مثبت، کروی شکل با قطر1 میکرون، بدون حرکت، فاقد هاگ و به شکل خوشه انگوری، یک پاتوژن فرصت طلب انسانی بسیار سازگار و یکی از بدنام ترین پاتوژن های انسانی بسیار مهم بیمارستانی و اکتسابی است که عفونت آن میتواند بسیاری از اندام‌ها را درگیر کند(2). این باکتری انواعی از سموم و آنزیم ها و برخی پروتئینها و پپتیدها را ترشح میکند که اثرات حدت خاصی نیز دارند(3).
عوامل بیماری زایی در بروز بیماری اثرگذار هستند. علاوه بر اجزای بیماریزایی فوق، خود استافیلوکوکوس اورئوس دارای اثرات بیماری زایی نیز میباشد. تکثیر استافیلوکوکوس اورئوس در محل عفونت منجر به دیسبیوز فلور در محل عفونت میشود که باعث ایجاد طیف وسیعی از بیماریها میشود(4). علاوه بر این، استافیلوکوکوس اورئوس ممکن است باعث اسهال بیمارستانی مرتبط با آنتی بیوتیک شود. در این راستا، کاهش اسیدیته معده به دلیل عبور از سد معده اسیدی استافیلوکوکوس اورئوس میتواند باعث ایجاد کلونیزاسیون شود(5)، که رشد بیش از حد باکتری ها در روده ممکن است رخ دهد که منجر به آنتریت و یا اسهال شود. همچنین استافیلوکوکوس اورئوس در بیماری التهابی روده نقش دارد زیرا آنتی ژن های استافیلوکوکوس اورئوس مشتق از روده میتوانند پاسخهای التهابی را القا کنند(6). سموم استافیلوکوکوس اورئوس با مسمومیت غذایی مرتبط هستند و سم آلفای استافیلوکوکوس اورئوس میتواند عملکرد سلولهای روده را در شرایط آزمایشگاهی با تغییر یکپارچگی اتصالی، مختل کند(7).
با توجه به شیوع برخی عفونتهای بیمارستانی و عوارض جانبی درمان آنها، امروزه محققین به دنبال معرفی و شناسایی ترکیبات طبیعی درمانی، با کارآیی بالاتر و عوارض جانبی کمتر هستند و در حال حاضر پروبیوتیکها از جمله کاندیدای مورد توجه پژوهشگران هستند. شناسایی اولیه پروبیوتیکها به عنوان میکروبیوتای طبیعی و مفید گوارشی به پایان قرن نوزدهم برمیگردد، زمانی که میکروارگانیسمهای موجود در دستگاه گوارش افراد سالم بدون علامت توصیف شدند. در حال حاضر به خوبی پذیرفته شده است که باکتریهای پروبیوتیک، میکروارگانیسمهای مفیدی هستند که در انواع متعددی از غذاها و در دستگاه گوارش زندگی میکنند(8). این باکتری ها قادرند با میکروبهای مضر رقابت کنند و روده را مستعمره کنند. علاوه بر این، پروبیوتیکها میتوانند با بهبود، بازیابی ترکیب، فعالیت فیزیولوژیکی میکروفلور روده، ارتقاء سلامتی را در هنگام مصرف به ارمغان آورند(9).
با توجه به ماهیت و ترکیب شیمیایی بسیار متفاوت عوامل مولکولی پروبیوتیکها، اثر مفید آنها با استفاده از مکانیسمهای مختلف، در روده اعمال می شود. از نظر مولکولی، پروبیوتیکها تعداد زیادی از مولکولهای متنوع را در محیط روده ترشح میکنند که به عنوان عوامل اثرگذار در یک تعامل متقابل و پیچیده بین میکروفلور روده، سیستم ایمنی روده و سلولهای اپیتلیال عمل میکنند(10). این عوامل مولکولی عمدتاً شامل پروتئین‌هایی با ماهیت مختلف هستند که یا در سطوح میکروبی موضعی هستند یا در بخش خارج سلولی سبب ترشح پپتیدها و یا اسیدهای آمینه با وزن مولکولی کم و اسیدهای چرب اشباع میشوند(11). مشابه قطعات سطح سلولی باکتری، آنتیژنهای پروبیوتیک میتوانند از سد روده عبور کرده و سیستم ایمنی را تحریک کنند، این عملکردهای چندگانه از ترکیبات، برای بهبود فیزیولوژیکی میزبان ضروری هستند(12).
با توجه به اینکه، چندین اثر مفید پروبیوتیکها بر هومئوستاز روده ای از جمله بهبود پاسخهای ایمنی ذاتی، فعالیتهای ضد بیماریزایی و ضد التهابی، افزایش ترشح اجزای طبیعی یا متابولیک و مواد مغذی ضروری و عملکرد مشابه میکروبیوتای روده جهت بهبود هضم و ایمنی، بر کل ارگانیسم گزارش شده است، از این رو، در این مطالعه نقش محافظتی مخلوط پروبیوتیک (لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس) بر ساختار هیستولوژیکی بافت روده باریک موش های آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بررسی شده است.
مواد و روشها
در این مطالعه تجربی، 21 سر موش صحرایی نر بالغ نژاد ویستار با میانگین وزن 250-200 گرم از دانشگاه شهید بهشتی تهیه و به حیوانخانه‌ی دانشکده‌ی علوم پایه‌ی دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران مرکزی انتقال داده شدند و قبل از شروع آزمایشات، به منظور سازش با محیط آزمایشگاه به مدت یک هفته نگهداری شدند. موشها در شرایط استاندارد (12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی، با درجه حرارت 3 ± 22 سانتیگراد و رطوبت نسبی70 درصد، بدون محدودیت در دسترسی به آب و غذا در حیوانخانه نگهداری و آزمایشها در بازه‌ی زمانی مشخصی( ساعت 9 تا 12 ظهر) منطبق با دستورالعمل مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی انجام شد.
گروهبندی حیوانات
21 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار بالغ ( ۲۰۰ تا ۲۵۰ گرم) به طور تصادفی در 3 گروه هفتتایی گروه بندی شدند.
گروه کنترل: دریافتکننده آب و مواد غذایی به صورت روزانه
گروه دوم: موشهای دریافتکننده استافیلوکوکوس اورئوس ( CFU/ml 108 )(13).
گروه سوم: موشهای دریافتکننده استافیلوکوکوس اورئوس(CFU/ml108 )+ مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس)(CFU/ml 109 ) (14).
باکتری استافیلوکوکوس اورئوس با غلظت CFU/ml 108 و مخلوط پروبیوتیکها با غلظت CFU/ml 109 از طریق گاواژ به موشها داده شد. جهت یکسان بودن شرایط موشها در طول دوره تیمار، به گروه اول و دوم نیز روزانه، مقدار کمی ازآب به صورت گاواژ داده شد.
مخلوط پروبیوتیکها( لاکتوباسیلوس پلانتاروم(KP165841.1)، لاکتوباسیلوسپاراکازئی(KU512757.1) و لاکتو باسیلوس برویس(KP165838.1)) به صورت پودر و باlog 1010 از شرکت تک‌ژن زیست تهیه شد.
تهیه و تائید سویه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس
سویه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس ATCC25923 از آزمایشگاه استاندارد ایران تهیه وجهت شناسایی نمونههای باکتری از تستهای استاندارد شامل رنگ آمیزیگرم، کاتالاز و کواگولاز لوله ای و رشد در مانیتول سالت آگار استفاده شد(15).
تهیه غلظت مخلوط پروبیوتیک
یک گرم پروبیوتیک در 9 سيسي آب مقطر حل گردید و به هر موش 1سی سی محلول تهیه شده با غلظت CFU/ml 109 به مدت 35 روز گاواژ شد(14).
کشت باکتری
سوش استافیلوکوکوس اورئوس تهیه شده بعد از انتقال به آزمایشگاه روی محیط کشت بلاد اگار(مرک، آلمان) پاساژ داده شد. سپس کلنیهای حاصل از کشت از نظر میکروسکوپی و ماکروسکوپی و بیوشیمیایی مورد بررسی قرارگرفت. کلنی های کواگولاز مثبت، مانیتول مثبت جهت مطالعات بعدی در محیط BHI در یک میکروتیو5/1 میلی لیتری در دور 3000 دور به مدت 3 دقیقه رسوب گیری شد. در مرحله آخر رسوبات در نیم مک فارلند PBS حل شده و با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتری در طول موج 630 نانومتر جذب نور اندازهگیری شد. با توجه به جذب 5/0= 630OD نانومتر هر لوله حاوی CFU\ml 108×1باکتری است. محلول باکتری در آمپول 2 میلیلیتری ریخته شد و طی سه روز متوالی، یک سیسی به موش های گروه دوم و سوم خورانده شد(15, 16).
نمونهگیری
پس از تیمار موشهای صحرایی آلوده به باکتری، گروه سوم با مخلوط پروبیوتیک به مدت 35 روز، با رعایت اصول کار با حیوانات آزمایشگاهی مصوب دانشگاه آزاد واحد تهران مرکزی (IR.IAU.CTB.REC.1401.092) حیوانات با تزریق درون صفاقی کتامین– زایلازین1% (10 میلیگرم زایلازین 1000میلیگرم کتامین) آسان کشی شده و نمونهبرداری از روده کوچک(دوازدهه، ژژنوم و ایلئوم) انجام شد. طی مراحل آماده سازی بافت، جهت تثبیت، نمونهها در داخل محلول فرمالین %10 نمکی با pH خنثی قرار داده شدند و طی مراحل آبگیری، شفاف کردن وآغشتگی، بافتها با پارافین، پاساژ داده شدند. درمرحله بعد، قالبگیری نمونهها با پارافین، تهیه برشهای 5 میکرونی، تهیه لام و رنگآمیزی با هماتوکسیلین ائوزین صورت گرفت(17).
از هر نمونه استخراج شده از هر قسمت روده( دوازدهه، تهی روده، دراز روده)، سه برش تهیه و از نظر میکروسکوپی ارزیابی شد. در این مطالعه ضخامت لایههای مختلف روده( لایه سروزی، ماهیچه ای، زیر مخاط و مخاط)، طول و عرض پرز، تراکم غدد گابلت و سلولهاي جامی در طول بافت روده باریک، واکوئله شدن و نکروزه شدن بافت و میزان تجمع سلولهای التهابی لنفوسیت بررسی شدند. در این مرحله، از عدسی چشمی مدرج و اسلاید تنظیم شده) کالیبره) و میکروسکوپ نوري المپیوس استفاده شد. در بخش بررسی فاکتورهای مختلف بافتی، شدت آسیب روده بر اساس اعداد درجهبندی از صفر تا 4 ، در نظر گرفته شد: صفرتا 1 طبیعی؛ 1تا 2 آسیب خفیف؛ 2 تا 3 آسیب متوسط؛ 3 تا 4 آسیب شدید؛ 4 و بیشتر آسیب بسیار شدید؛ (17).
آنالیز آماری
براي آناليز دادهها از نرم افزارSPSS (IBM, Version22)،آزمون واريانس يك‌طرفه و تست تعقيبي توكي استفاده شد(05/0 P ≤ ). نتايج در هر مورد بهصورت ميانگين ±انحراف معيار گزارش شد. همچنین از آزمون آماري کلموگروف ـ اسمیرنف، نیز براي تعیین نرمال بودن توزیع دادهها استفاده شد( 05/0< P).
ملاحظات اخلاقي
مطالعه حاضر با مجوز کمیته اخلاق دانشگاه آزاد اسلامی تهران مرکزی انجام گرفته است و سعی شده که تمام موازین اخلاقی کار با حیوان مورد توجه باشد و الزامات معاهده هلسینکی رعایت گردد (IR.IAU.CTB.REC.1401.092).
نتایج
نتایج هیستوپاتولوژی
در گروهه کنترل پرزها سالم و سلولهاي استوانهاي نکروز نشده بودند و از نظر درصد پرزهاي درگیر شده نیز به نظر میرسد هیچ پرزي دچار آسیب نشدهاست، تعداد بسیار کمتري از سلولهاي بافت پوششی در مقایسه با سلولهاي پوششی گروه آلوده دچار آسیب شدند. نتایج بررسی بافت روده باریک در گروه دریافتکننده باکتری استافیلوکوکوس اورئوس در مقایسه با گروه کنترل تغییر در لایههای مختلف (مخاطی، زیر مخاطی و عضلانی)، شدت تخریب پرزها، نکروزه شدن، واکوئله شدن، تجمع سلولهای التهابی لنفوسیتی، تغییر در تراکم و تعداد سلولهای جامی و غدد گابلت مشاهده شد. در حالیکه در گروه دریافتکننده مخلوط پروبیوتیک کاهش معناداری در تجمع سلولهای التهابی لنفوسیتی، تخریب پرزها، نکروزه شدن، واکوئله شدن، تغییر در ضخامت و نظم لایههای مختلف در مقایسه با گروه عفونی مشاهده شد (جدول1،شکل1).
جدول1. مقایسه بافت روده باریک در گروههای مختلف
گروه دریافت کننده استافیلوکوکوس اورئوس(CFU / ml108 ) +پروبیوتیک(CFU / ml109 ) | گروه دریافتکننده استافیلوکوکوس اورئوس(CFU / ml108 ) | گروه کنترل | تغییرات بافت روده باریک |
038/0± 56/2***### | 02/0± 51/4*** | 01/0± 01/0 | تغییردر طول و عرض پرز |
028/0± 56/1***### | 02/0± 31/4*** | 01/0± 02/0 | باریک شدن پرزها |
03/0± 01/3***# | 06/0± 14/4*** | 003/0± 011/0 | تغییرضخامت لایه ماهیچه ای |
01/0± 18/3***# | 016/0± 28/4*** | 001/0± 13/0 | تخریب بافت اپیتلیوم |
02/0± 29/3***# | 07/0± 18/4*** | 02/0± 01/0 | ضخامت لایه زیر مخاط |
06/0± 43/4*** | 15/0± 13/4*** | 03/0± 02/0 | ضحامت لایه مخاط |
001/0± 02/2***# | 03/0± 24/3*** | 02/0± 01/0 | نکروزه شدن بافت |
04/0± 06/2***# | 014/0± 38/3*** | 02/0± 07/0 | واکوئله شدن |
03/0± 01/3***# | 02/0± 23/4*** | 003/0± 02/0 | تجمع سلولهای لنفوسیت |
02/0± 23/3***# | 07/0± 35/4*** | 02/0± 01/0 | تعداد سلولهای گابلت |
003/0± 08/3*** | 02/0± 46/3*** | 01/0± 01/0 | تعداد سلولهای جامی غدد |
نتایج براساس میانگین±انحراف معیار
***001/0 P <مقابسه با گروه کنترل
# 05/0> P: مقایسه با گروه آلوده به استافیلوکوکوس اورئوس
### 001/0> P: مقایسه با گروه آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس
شکل1. مقطع میکروسکوپی بافت رودهباریک درگروههای آزمایش. الف) گروه کنترل، ب) گروه آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، ج)گروه آلوده تیمارشده با مخلوط پروبیوتیک. با رنگآمیزی هماتوکسیلین- ائوزین(بزرگنمایی 400).
در گروه القا عفونت افزایش تعداد سلولهای التهابی به ویژه لنفوسیتها(فلش قرمز رنگ)، واکوئله شدن (فلش مشکی)، نکروزی شدن بافت (فلش خاکستری )، غدد گابلت (فلش نارنجی)، تخریب بافت اپیتلیوم (فلش سبز)، تغییر در طول و عرض پرزها( فلش سفید)، ضخامت لایه سروزی، (فلش بنفش) ضخامت لایه ماهیچهای( فلش زرد)، ضخامت لایه زیر مخاط( فلش صورتی) و ضخامت لایه مخاطی(فلش ابی) نشان داده شد.
بحث
در تحقیق حاضر، اثر محافظتی مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس ) بر بافت روده باریک موشهای صحرایی نر آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بررسی شد.
نتایج حاصل ازاین پژوهش نشان داد که در گروه آلوده به باکتری در بخشهای مختلف روده باریک آسیبهایی القا شده و تخریبهایی قابل مشاهده است. در آلودگیهای باکتریایی، استرس اکسیداتیو باعث تولید انواع گونههای اکسیژن آزاد از جمله رادیکال آزاد هیدروکسیل و آنیونهای سوپراکسید میشود. تحقیقات مختلف گزارش دادهاند، افزایش گونههایاکسیژن آزاد میتواند به ماکرومولکول‌های زیستی غشا مانند پروتئینها و اسیدهای نوکلئیک آسیب برساند(19،20). از این رو، افزایش استرس اکسیداتیو در عفونتها بر وقوع التهاب، آسیب سلولی و حساسیت به بیماری تأثیرگذار است (20). در مطالعه انجام شده در سال 2015 توسط سیمون و همکاران اثرات باکتری سالمونلا بر فعالیت سیستم آنتیاکسیدانی در شرایط درون زایی گزارش داده شده(21) که نتایج حاصل از این مطالعه نیز همسو با مطالعه پیشین بود. همچنین در پژوهش انجام شده توسط دژنگومتر و همکاران (2023) برهم خوردن تعادل سیستم آنتی اکسیدانی در موشهای صحرایی آلوده به سالمونلا گزارش داده شد(22). در بخش دیگری از این تحقیق، نتایج حاصل از بررسی بافت روده باریک موشهای آلوده به باکتری تیمار شده با مخلوط پروبیوتیک به مدت 35 ، بهبودی معناداری را در مقایسه با گروه آلوده به باکتری نشان داد. درپژوهش انجام شده توسط حسینی و همکاران (2023) نشان داد، مصرف مخلوط پروبیوتیک در موشهای آلوده به باکتری اشیرشیاکلی میتوانند سبب کاهش آسیبهای القایی عفونت باکتریایی شود (23) که نتایج حاصل از این مطالعه نیز همسو با این تحقیق است. ژو و همکاران (2021)اثرات لاکتوباسیلوس روتری بر نفوذپذیری روده ای در خوکهای از شیر گرفته، نشان داده شد که در گروه دریافت کننده پروبیوتیک نسبت ارتفاع پرز به عمق کریپت افزایش داشته (24)که در مطالعه حاضر نیز، نتایج همسو با مطالعه پیشین است. تشام و همکاران، در بررسی خود گزارش دادند، مصرف پروبیوتیک در جیره غذایی ماکیان موجب افزایش طول خمل ها در ابتدای روده و افزایش عمق کریپتهای لیبرکون در ابتدا و انتهای روده باریک شده است. احتمالا افزایش عمق کریپتها به دلیل تحریک غدد لیبرکون توسط پروبیوتیک و در نتیجه افزایش تقسیم سلولی این غدد میباشد(25). مکانیسمهای احتمالی مختلفی برای کاهش آسیب در گروه تیمار با پروبیوتیک میتوان پیشنهاد داد که از جمله آنها می توان به موارد زیر اشاره داشت:
فعالیت آنزیمی پروبیوتیکها در مجرای روده میتواند در اثرات بیولوژیکی این پروبیوتیکها نقش داشته باشد. لاکتوباسیل ها و بیفیدوباکتریها بیش از20 فعالیت آنزیمی مختلف را نشان میدهند این آنزیمها با مهار فعالیت بتاگلوکورونیداز باکتریایی روده که متابولیتهای گلوکورونید شده را به شکل سمی در روده هیدرولیز میکند مانع القا آسیب در روده میشوند(26).مسیرهای خاص و مکانیسمهای تنظیمی کلیدی این اثرات پروبیوتیکها تا حد زیادی ناشناخته هستند. کاهش pH مجرا، رقابت برای منابع غذایی و تولید باکتریوسین یا مواد مشابه باکتریوسین از جمله مکانیسمهای پیشنهادی اصلی برای حذف رقابتی عوامل بیماری‌زا توسط پروبیوتیک هاست. هنگامی که یک سویه میکروبی به عنوان یک پروبیوتیک نشان داده میشود، پیش نیازهای خاصی وجود دارد که باید مورد توجه قرار گیرد. یکی از آنها چسبندگی به مخاط روده برای کلونیزاسیون و تعامل بیشتر بین سویههای پروبیوتیک تجویز شده و میزبان است (27). این تعامل خاص برای تعدیل تضاد در برابر پاتوژن ها و برای اعمال در سیستم ایمنی مورد نیاز است. سلولهای اپیتلیال روده برای جلوگیری از چسبندگی باکتریهای بیماری زا، موسین ترشح میکنند و نشان داده شده است که چندین پروتئین لاکتوباسیلوس این چسبندگی را تقویت میکنند و چسبندگیهای سطحی را نشان میدهند که اتصال به لایه مخاطی را تسهیل میکنند(28). همچنین پروبیوتیکها در تعادل فلور روده ای دارای اهمیت هستند، میکروبیوتای روده سیستم ایمنی را از طریق تولید مولکولهایی با عملکردهای تعدیل کننده ایمنی و ضد التهابی که قادر به تحریک سلولهای ایمنی هستند تعدیل میکند. این اثرات تعدیلکننده ایمنی، به دلیل تعامل باکتریهای پروبیوتیک با سلولهای اپیتلیال، دندروسیتها، مونوسیتها، ماکروفاژها و لنفوسیتها است(29). پروبیوتیکها یک رویکرد بالقوه برای کمک به حفظ سد روده در طول کل دستگاه روده هستند. پروبیوتیکها علاوه بر کمک به تولید بوتیرات توسط یک میکروبیوم سالم و متعادل، در تقویت پروتئین‌های TJ و حفظ یکپارچگی مخاط مؤثر هستند و به این ترتیب جذب بهینه مواد مغذی را نیز ارتقا میدهند (30). یکی دیگر از مکانیسمهای اصلی اثر پروبیوتیکها تنظیم پاسخ ایمنی میزبان است (31) که با تعدیل پاسخ ایمنی و القای ایجاد سلولهای T تنظیم کننده به حفظ هومئوستاز روده کمک میکنند (32). این میکروارگانیسمها قادر به سرکوب التهاب روده از طریق کاهش بیان TLR و ترشح متابولیتهایی هستند که ممکن است مانع ورود TNF-α به سلولهای تک هسته ای خون و مهار سیگنال دهی NF-kB در انتروسیتها شوند. از این نظر، سیگنالدهی توسط اجزای دیواره سلولی لاکتوباسیلها به طور بالقوه میتواند از طریق اتصال TLR2 و TLR6 رخ دهد و تولید سیتوکینین را تحریک کند. علاوه بر این، TLR2 پپتیدوگلیکان را که جزء اصلی باکتریهای گرم مثبت از جمله باکتریهای جنس لاکتوباسیلوس است، شناسایی میکند (33). پروبیوتیکها با سلولهای اپیتلیال از طریق TLR2 تعامل دارد و این تعامل با سلولهای ایمنی مرتبط با روده باعث افزایش تعداد گیرندههای CD-206 و TLR2 میشود که مجموعه ای از این مکانیسمها در کاهش آسیب و بهبودی تخریبهای ایجاد شده در بافت روده باریک موشهای آلوده به باکتری کمک میکند (34).
نتیجه گیری
نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که مصرف مخلوط پروبیوتیک( لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس برویس ) بر بافت روده باریک موشهای صحرایی نر آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس اثر حفاظتی داشته، با توجه به نتایج مطالعات، پروبیوتیکها میکروارگانیسمهای بیخطری هستند که احتمالا وقتی در دوزهای کافی و در دوره‌های مناسب تجویز شوند، اثرات مفیدی را برای میزبان ایجاد میکنند.
Refrences
1. Mitevska E, Wong B, Surewaard BG, Jenne CN. The prevalence, risk, and management of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection in diverse populations across Canada: a systematic review. Pathogens. 2021; 10(4):393. DOI: 10.3390/pathogens10040393.
2. Liu A, Garrett S, Hong W, Zhang J. Staphylococcus aureus Infections and Human Intestinal Microbiota. Pathogens. 2024 ;13(4):276. DOI: 10.3390/pathogens13040276.
3.Howden BP, Giulieri SG, Wong Fok Lung T, Baines SL, Sharkey LK, Lee JY, Hachani A, Monk IR, Stinear TP. Staphylococcus aureus host interactions and adaptation Nat. Rev. Microbiol. 2023 Jun; 21(6):380-95.DOI: 10.1038/s41579-023-00852-y.
4.Hu X, Guo J, Zhao C, Jiang P, Maimai T, Yanyi L, Cao Y, Fu Y, Zhang N. The gut microbiota contributes to the development of Staphylococcus aureus-induced mastitis in mice. The ISME journal. 2020 Jul; 14(7): 1897-910. DOI: 10.1038/s41396-020-0651-1.
5. Zhao C, Wu K, Hao H, Zhao Y, Bao L, Qiu M, He Y, He Z, Zhang N, Hu X, Fu Y. Gut microbiota-mediated secondary bile acid alleviates Staphylococcus aureus-induced mastitis through the TGR5-cAMP-PKA-NF-κB/NLRP3 pathways in mice. NPJ biofilms and microbiomes. 2023 Feb; 9(1):8. DOI: 10.1038/s41522-023-00374-8.
6. Chen H, Zhang J, He Y, Lv Z, Liang Z, Chen J, Li P, Liu J, Yang H, Tao A, Liu X. Exploring the role of Staphylococcus aureus in inflammatory diseases. Toxins. 2022 Jul; 14(7):464. DOI: 10.3390/toxins14070464.
7.Piewngam P, Khongthong S, Roekngam N, Theapparat Y, Sunpaweravong S, Faroongsarng D, Otto M. Probiotic for pathogen-specific Staphylococcus aureus decolonisation in Thailand: a phase 2, double-blind, randomised, placebo-controlled trial. The Lancet Microbe. 2023 Feb; 4(2): e75-83. DOI: 10.1016/S2666-5247(22)00322-6.
8.Tang J, Zhao M, Yang W, Chen H, Dong Y, He Q, Miao X, Zhang J. Effect of Composite Probiotics on Antioxidant Capacity, Gut Barrier Functions, and Fecal Microbiome of Weaned Piglets and Sows. Animals. 2024 Apr; 14(9):1359. DOI: 10.3390/ani14091359.
9.Chandrasekaran P, Weiskirchen S, Weiskirchen R. Effects of Probiotics on Gut Microbiota: An Overview. Sci Rep. 2024 May; 25(11):6022. DOI: 10.3390/ijms25116022.
10. Watanabe M, Nakai H, Ohara T, Kawasaki K, Murosaki S, Hirose Y. Beneficial effect of heat-killed Lactiplanti bacillus plantarum L-137 on intestinal barrier function of rat small intestinal epithelial cells. Sci Rep .2024 May ; 14(1):12319. DOI: 10.1038/s41598-024-62657-0.
11.Shawky LM, Abo El Wafa SM, Behery M, Bahr MH, Abu Alnasr MT, Morsi AA. Lactobacillus rhamnosus GG and Tannic Acid Synergistically Promote the Gut Barrier Integrity in a Rat Model of Experimental Diarrhea via Selective Immunomodulatory Cytokine Targeting. Molecular Mol Nutr Food Res. 2024 Aug; 68(16):2400295. DOI: 10.1002/mnfr.202400295.
12.Di Vincenzo F, Del Gaudio A, Petito V, Lopetuso LR, Scaldaferri F. Gut microbiota, intestinal permeability, and systemic inflammation: a narrative review. Intern Emerg Med .2024 Mar;19(2): 275-93. DOI: 10.1007/s11739-023-03374-w.
13.Liang H, Wang Y, Liu F, Duan G, Long J, Jin Y, Chen S, Yang H. The Application of Rat Models in Staphylococcus aureus Infections. Pathogens. 2024 May; 13(6):434. DOI: 10.3390/pathogens13060434.
14. Ahmadi Z, Tajbakhsh H, Momtaz H. Detection of the antibiotic resistance pattern in staphylococcus aureus isolated from clinical samples obtained from patients hospitalized in imam raze hospital, kermanshah. World J Microbiol Biotechnol 2014 Mar; 6,4 (17):209-311. DOI: 10.5812/jkums.118807.
15. Tabaei S, Kouhi Noghondar M, Mohammadzadeh, M, Ataei L, Amel Jamehdar S. Pattern of antibiotic resistance in methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains isolated from clinical specimens: Imam Reza hospital in Mashhad. Med. J. Mashhad Univ. Med. Sci.,2016 Jul-Oct; 59(2): 64-70. DOI: 10.22038/mjms.2016.7328
16. Liu Y, Zhang J, Ji Y. Environmental factors modulate biofilm formation by Staphylococcus aureus. Sci. Prog. 2020 Mar;103(1):0036850419898659. DOI: 10.1177/0036850419898659.
17. Barzin oshtologh A, Keshtmand, Z, Samadikhah H R. Effect of protective of a mixture of native Iranian probiotics (Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei and Lactobacillus holoticus) on the Damage of Rat male Small Intestinal tissue Caused by lead acetate. Iranian Journal of Biological Sciences. 2022 May; 16: 71-80.
18. Gulgun M, Erdem O, Oztas E, Kesik V, Balamtekin N, Vurucu S, Kul M, Kismet E, Koseoglu V. Proanthocyanidin prevents methotrexate-induced intestinal damage and oxidative stress. Exp Toxicol Pathol .2010 Mar; 62(2):109-15. DOI: 10.1016/j.etp.2009.02.120.
19. Men Q, Zhang P, Zheng W, Song S, Ai C. Fucoidan alleviates Salmonella-induced inflammation and mortality by modulating gut microbiota and metabolites, protecting intestinal barrier, and inhibiting NF-κB pathway. Food Biosci.2023 Dec 1;56:103209. DOI: 10.1016/j.fbio.2023.103209.
20. Rowe SE, Wagner NJ, Li L, Beam JE, Wilkinson AD, Radlinski LC, Zhang Q, Miao EA, Conlon BP. Reactive oxygen species induce antibiotic tolerance during systemic Staphylococcus aureus infection. Nat. Microbial. 2020 Feb; 5(2):282-90. DOI: 10.1038/s41564-019-0627-y.
21. Siméon Pierre Chegaing Fodouop, Donatien Gatsing, Benjamin Talom Tangue, Richard Simo Tagne, Sédric Donald Tala, Joseph Tchoumboué, Jules Roger Kuiate, Effect of Salmonella typhimurium infection on rat's cell oxidation and in vivo antioxidant activity of Vitellaria paradoxa and Ludwigia abyssinica aqueous extract, Asian Pac J Trop Dis.2015 Jan; 5(1): 38-46. DOI:10.1016/S2222-1808(14)60624-1.
22. Djenguemtar J, Goka MS, Noubom M, Konack EY, Kamsu GT, Sokoudjou JB, Feudjio HB, Kodjio N,Gatsing D. In vivo Antisalmonellal and Antioxidant Activity of Hydroethanolic Extract of Bauhinia rufescens Leaves in Wistar AlbinoRats Infected with Salmonella Typhi. Microbiol. Res. J. Int.2023 Sep; 33 (2):39-53. DOI: 10.9734/mrji/2023/v33i21366.
23. Hosseini S, Keshtmand Z, Mlrnurollahi S M. Investigating the effect of probiotics mixture (Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus heloticus) on small intestine tissue infected with Escherichia coli bacteria in male rats. J. Appl. Microbiol.2023 Sep; 2(9) 79-87. DOI: 10.1186/s40104-021-00624-9.
24. Zhu T, Mao J, Zhong Y, Huang C, Deng Z, Cui Y, Liu J, Wang H. L. reuteri ZJ617 inhibits inflammatory and autophagy signaling pathways in gut-liver axis in piglet induced by lipopolysaccharide. JASB. 2021 Dec; 12:1-6. DOI: 10.1186/s40104-021-00624-9.
25. Teshfam M, Rahimi SH, Karimi K. Effect of various levels of probiotic ou morpliology of intestinal mucosa in brioler chicks. J Vet Res. 2005; 60(3):205-211.
26. Zhang J, Zhao J, Jin H, Lv R, Shi H, De G, Yang B, Sun Z, Zhang H. Probiotics maintain the intestinal microbiome homeostasis of the sailors during a long sea voyage. Gut Microbes.2020 Jul; 11(4):930-43 .DOI: 10.1080/19490976.2020.1722054.
27.Varela-Trinidad GU, Domínguez-Díaz C, Solórzano-Castanedo K, Íñiguez-Gutiérrez L, Hernández-Flores TD, Fafutis-Morris M. Probiotics: Protecting our health from the gut. Microorganisms. 2022 Jul; 10(7):1428. DOI: 10.3390/microorganisms10071428.
28. Gorreja F, Walker WA. The potential role of adherence factors in probiotic function in the gastrointestinal tract of adults and pediatrics: a narrative review of experimental and human studies. Gut Microbes. 2022 Dec; 14(1):2149214. DOI: 10.1080/19490976.2022.2149214.
29. Dvorožňáková E, Vargová M, Hurníková Z, Lauková A, Revajová V. Modulation of lymphocyte subpopulations in the small intestine of mice treated with probiotic bacterial strains and infected with Trichinella spiralis. J Appl Microbiol .2022 Jun; 132(6):4430-9. DOI: 10.1111/jam.15534.
30. Cao F, Jin L, Gao Y, Ding Y, Wen H, Qian Z, Zhang C, Hong L, Yang H, Zhang J, Tong Z. Artificial-enzymes-armed Bifidobacterium longum probiotics for alleviating intestinal inflammation and microbiota dysbiosis. Nat. Nanotechnol. 2023 Jun;18(6):617-27. DOI: 10.1038/s41565-023-01346-x.
31. Wu Y, Yang F, Jiang W, Hu A, Xiong Z, Yang S, Cao P, Cao Z, Xiong Z, Cao H. Effects of compound probiotics on intestinal barrier function and caecum microbiota composition of broilers. Avian Pathol. 2022 Sep; 51(5):465-75. DOI: 10.1080/03079457.2022.2100740.
32. Mazziotta C, Tognon M, Martini F, Torreggiani E, Rotondo JC. Probiotics mechanism of action on immune cells and beneficial effects on human health. Cells. 2023 Jan; 12(1):184. DOI: 10.3390/cells12010184.
33. Qi X, Xiao Y, Zhang X, Zhu Z, Zhang H, Wei J, Zhao Z, Li J, Chen T. Probiotics suppress LL37 generated rosacea-like skin inflammation by modulating the TLR2/MyD88/NF-κB signaling pathway. FOOD FUNCT . 2024;15(17):8916-34. DOI: 10.1039/D4FO03083D.
34. Winther KD, Boll EJ, Sandvang D, Williams AR. Probiotic Bacillus spp. enhance TLR3‐mediated TNF signalling in macrophages. J Immunol 2024 Mar; 171(3):402-12. DOI: 10.1111/imm.13721.
