اثر فراکسیون‌های اتیل استات و ان بوتانول عصاره گیاه غافث (Arimonia eupatoria) بر ترمیم نخاع و بیان ژن های کاسپاز ۳ و ۹ پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در رت
الموضوعات : فصلنامه زیست شناسی جانوریغزاله نبوی نیا 1 , مریم طهرانی پور 2 , جواد بهارارا 3
1 - گروه زیست شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
2 - گروه زیست شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
3 - گروه زیست شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
الکلمات المفتاحية: Agrimonia eupatoria, ترمیم عصب سیاتیک, كاسپاز 3 و 9. ,
ملخص المقالة :
ژن کاسپاز 3 در پیشرفت دژنراسیون و کاسپاز 9 در روندهای آپوپتوزی، نکروزی و مرگ لیزوزومی نقش دارند و پس از آسیب عصب، میزان بیان آنها تغییر می کند. این پژوهش با هدف تعیین اثرات نوروپروتکتیوی عصاره هیدروالکلی و فراكسيون-هاي گياه غافث (Agrimonia eupatoria) بر دانسيته نوروني و تغيير بیان ژن های كاسپاز 3 و 9 پس از کمپرسیون عصب سیاتیک در رت انجام شد. 36 سر رت نر نژاد ویستار به شش گروه شش¬تایی شامل: کنترل، کمپرسیون، تیمار A (کمپرسیون+ عصاره هیدروالکلی با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم)، تیمار B (کمپرسیون+ فراكسيون اتيل استات با دوز75 میلی‌گرم/کیلوگرم)، تیمار C (کمپرسیون+ فراكسيون ان بوتانول با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم) و تیمار D (کمپرسیون+ فاز آبي با دوز 75 میلی‌گرم/کیلوگرم) تقسیم شدند. در گروه کنترل پس از بیهوش کردن رت¬ها، عضله در محل عصب سیاتیک بدون آسیب عصب شکافته شد و در گروه کمپرسیون و گروه‌های تیمار عصب سیاتیک پای راست به مدت 30 ثانیه تحت کمپرسیون قرار گرفت. اولین تزریق عصاره به صورت داخل صفاقی بلافاصله بعد از کمپرسیون عصب و دومین تزریق 7 روز بعد انجام شد. بعد از 28 روز، رت ها تحت روش پرفیوژن قرار گرفته و از نخاع قسمت کمری نمونه¬برداری گردید. لام¬ها با آبی تولوئیدین رنگ آمیزی شده، دانسيته نورونی به روش دايسكتور و متد استريولوژی محاسبه و نتايج توسط آنالیز T-test و Anova مقايسه شدند. از قطعات نخاعی نمونه¬برداری شد، Total RNA استخراج و cDNA سنتز گردید و تغییرات بیان ژن¬هاي كاسپاز 3 و 9 در نمونه¬ها بررسی شد. نتايج نشان داد كه دانسیته نورونی در تمام گروه‌هاي تيمار افزايش معني¬داري نسبت به گروه كمپرسيون دارد (001/0 > p) و در گروه ان بوتانول بيشتر از ساير گروه‌ها است. بيان ژن كاسپاز 3 و 9 در تمام گروه‌هاي تيمار نسبت به گروه كمپرسيون كاهش يافت (01/0 > p). عصاره اين گياه بدليل داشتن تركيباتي مانند توكوفرول كه اثرات آنتي¬اكسيداني و ضد آپوپتوزي دارد مي¬تواند در ترميم سيستم عصبي موثر باشد.
1. Adhiah A.H., Al-bederi O., Al-sammarrae K.W. 2013. Cytotoxic effects of Agrimonia eupatoria L. against.cancer cell lines in vitro. J Assoc Arab Univ Basic Appl Sci, 14: 87-92, 2013.
2.Al-snafi A. 2015. AE: The pharmacological and therapeutic importance of Agrimonia eupatoria - a review. Asian J Pharm Sci. Technol, 5: 112–117.
3. Bae H., Kim H-J., Shin M., Lee H., Yin C.S., Ra J., Kim J. 2010. Inhibitory effect of Agrimoniae Herba on lipopolysaccharide-induced nitric oxide and proinflammatory cytokine production in BV2 microglial cells. Neurol Res, 32: 53–57.
4. Behnam-Rasouli M., Nikravesh MR., Mahdavi-Shahri N. and Tehranipour M. 2000. Post-Operative time effects after sciatic nerve crush on the number of alpha motoneurons ,using a stereological (Disector). Iran. Biomed. J, 4(1): 45-9.
5. Benchoua A., Couriaud C., Guegan C. 2002.Active caspase-8 trans-locates to the nucleus of apoptotic cells to inactivate poly(ADP-ribose) polymerase-2. J Biol Chem, 277:34217–22.
6. Cain K., Bratton SB., Cohen GM. 2002. The Apaf-1 apoptosome: A large caspase-activating complex. Biochemie, 84:203–14.
7. Cande C., Cohen I., Daugas E. 2002. Apoptosis-inducing factor (AIF): A novel caspase-independent death effector released from mitochondria. Biochimie, 84:215–22.
8. Correia H.S., Batista M.T., Dinis T.C.P. 2007. The activity of an extract and fraction of Agrimonia eupatoria L. against reactive species. BioFactors, 29: 91–104
9. Ferrer I., Planas A.M. 2003. Signaling of cell death and cell survival following focal cerebral ischemia: life and death struggle in the penumbra. J Neuropathol Exp Neurol, 62(4): 329-39.
10.Gyrd-Hansen M., Farkas T., Fehrenbacher N., Bastholm L., Høyer-Hansen M., Elling F., Wallach D., Flavell R., Kroemer G., Nylandsted J., Jäättelä M. 2006. Apoptosome-independent activation of the lysosomal cell death pathway by caspase-9. Mol Cell Biol, 26(21):7880-91.
11. Hernando R. 2010. Neurological improvement of injured sciatic nerve following omental transplantation. J Neurol Sci , 27(2): 254-6.
12. Leker R.R., Shohami E. 2002.Cerebral ischemia and trauma—Different etiologies yet similar mechanisms: Neuroprotective opportunities. Brain Res Rev, 39:55–73.
13. Nesic O., Xu GY., McAdoo D., High K.W., Hulsebosch C. and Perez-Pol R. 2001. IL-1 receptor antagonist prevents apoptosis and caspase-3 activation after spinal cord injury. J Neurotrauma, 18(9): 947-56.
14.Rakhshandah H., Shakeri MT. and Ghasemzadeh MR. 2007. Comparative Hypnotic Effect of Rosa damascena Fractions and Diazepam in Mice. Iranian J Pharmaceuti Res, 6(3): 193-197.
15.Sommer C., Schomacher M., Berger C., Kuhnert K., Muller H.D., Schwab S., Schabitz W.R. 2006. Neuroprotective cannabinoid receptor antagonist SR141716A prevents downregulation of excitotoxic NMDA receptors in the ischemic penumbra. Acta Neuropathol, 112(3):277-86.
16. Strasser A., O’Connor L., Dixit V.M. Apopotosis signaling. 2000. 69:217–45.
17. Sun X.M., Bratton S.B., Butterworth M., MacFarlane M., Cohen G.M. 2002. Bcl-2 and Bcl-xL inhibit CD95-mediated apoptosis by preventing mitochondrial release of Smac/DIABLO and subsequent inactiva-tion of X-linked inhibitor-of-apoptosis protein. J Biol Chem, 277:1345–51.
18. Tehranipour M. Javadmoosavi Z. 2011. The neuroprotective effect of alcoholic extract of cannabis sativa on neuronal density of spinal cord alpha motoneurons after sciatic nerve injury in rat .j shaheed sadoughi uni med sci, 19(3). 49-339.
19. Tehranipour M. and Ghadamyari T. 2010. The effects of root aquatic extract of Salvia staminea on neuronal density of alpha motoneurons in spinal cord anterior horn after sciatic nerve compression in rat. J Biol Sci, 10(1): 48-52.
20. Zoltan P. , Biriczova L. , Pallag G., Carvalheiro Marqes E., Vargova N., Kmonickova E.2020. The Therapeutic Effects of Agrimonia eupatoria L. Physiol. Res, 69(4):S555-S571
