پلی‌مورفیسم ژن aroA در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از شیر خام و پنیر سنتی

محورهای موضوعی : بهداشت مواد غذایی

عزیزه حسین خانی ¹ , علیرضا منادی سفیدان ² , جلال شایق ³

1 - دانش‌آموخته کارشناسی ارشد میکروب‌شناسی، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی، ارومیه، ایران
2 - دانشیار میکروب شناسی گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
3 - استادیار گروه دامپزشکی، واحد شبستر، دانشگاه آزاد اسلامی، شیستر، ایران

تاریخ دریافت : 1399/10/28 تاریخ پذیرش : 1399/12/27 تاریخ انتشار : 1399/10/01

کلید واژه: PCR-RFLP, مواد لبنی, آنزیمTaqI, aroA, استافیلوکوکوس اورئوس‌,

چکیده مقاله :

با توجه به بیماری‌زایی استافیلوکوکوس اورئوس و حضور آن در مواد لبنی و اهمیت انتقال این باکتری به واسطه مواد لبنی، هدف از این مطالعه آنالیز ژن aroA در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از شیر گاو و پنیر سنتی است. بدین منظور تعداد 40 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس شامل 14 جدایه از پنیر سنتی، 19 جدایه از شیر گاو و 7 جدایه از شیر گاومیش به روش PCR-RFLP مورد آزمایش قرار گرفتند. برش آنزیمی پس از تکثیر ژن کوآگولاز با پرایمرهای اختصاصی، با استفاده از آنزیمTaqI به‌عمل آمد. نتیجه تکثیر شده برای ژن aroA تولید باندی با اندازه 1153 جفت باز بود. هضم باند مذکور با آنزیم TaqI سه الگوی مختلف برش از ژن مورد نظر نمایش می‌داد. الگوی اول شامل سه باند، الگوی دوم دو باند و الگوی سوم چهار باند بودند. از 40 نمونه استافیلوکوکوس اورئوس مورد مطالعه در این پژوهش تعداد 29 نمونه حاوی ژن aroA با الگوی سه باندی، 9 نمونه با الگوی دو باندی و 2 نمونه الگوی 4 باندی بودند. با توجه به این که این روش قادر به تشخیص تفاوت بین سویه‌های با منشأ غذایی مختلف نیست، لازم است با روش‌های مکمل جایگزین شود. هم‌چنین نتایج این بررسی نشان‌دهنده نیاز به توجه بیشتر به نکات بهداشتی در تهیه مواد غذایی حاصل از مواد لبنی و نیز توجه بیشتر دامپزشکان در برخورد با استافیلوکوکوس اورئوس و انتخاب رویکرد درمانی مناسب برای آن می‌باشد.

چکیده انگلیسی:

Due to the pathogenicity of Staphylococcus aureus and its presence in dairy products and the importance of its transmission through dairy products, this study aimed to analyze the aroA gene in S. aureus isolated from cow milk and traditional cheese. For this purpose, 40 S. aureus isolates including 14 traditional cheese isolates, 19 cow milk isolates, and 7 domestic water buffalo milk isolates were assayed by the PCR-RFLP technique. After amplification of the coagulase gene with specific primers, enzyme restriction was performed using the TaqI enzyme. The amplification of aroA produced an 1153 bp band. Digestion of this band with TaqI enzyme showed 3 different cutting patterns. The first pattern consisted of three bands, the second pattern had two bands, and the third pattern consisted of four bands. 29 S. aureus isolates (out of 40) held the highest number containing the aroA gene with the three-band pattern, 9 samples with the two-band pattern, and 2 samples with the 4-band pattern. Since the method is unable to distinguish between strains with different food origins, it should be replaced by complementary methods. The results indicated the need to pay more attention to health points in the preparation of dairy foods and also more attention of local veterinarians in dealing with this pathogen and choosing the appropriate treatment approach for it.  

منابع و مأخذ:

• Buzzola F.R, Barbagelata M.S, Caccuri R.L and Sordelli D. (2006). Attenuation and persistence of and ability to induce protective immunity to a Staphylococcus aureus aroA mutant in mice. Infection and Immunity, 74: 3498–3506.


• El-Huneidi, W., Bdour, S. and Mahasneh, A. (2006). Detection of enterotoxin genes seg, seh, sei, and sej and of a novel aroA genotype in Jordanian clinical isolates of Staphylococcus aureus. Diagnostic Microbiology and Infectious disease, 56: 127–132.


• Galal, H.M., Abdrabou, M.I., Faraag, A.H., Mah, C.K. and Tawfek, A.M. (2021). Evaluation of commercially available aroA delated gene coli O78 vaccine in commercial broiler chickens under Middle East simulating field conditions. Scientific Reports, 11(1): 1–12.


• Grossmann, A., Frobose, N.J., Mellmann, A., Alabi, A.S., Schaumburg, F. and Niemann, S. (2021). An in vitro study on Staphylococcus schweitzeri Scientific Reports, 11(1): 1–10.


• Marcos, J.Y., Soriano, A.C., Salazar, M.S., Moral, C.H., Ramos, S.S., Smeltzer, M.S. et al. (1999). Rapid identification and typing of Staphylococcus aureus by PCR-restriction fragment length polymorphism analysis of the aroA Journal of Clinical Microbiology, 37: 570–574.


• de Oliveira, M.D., Araújo, J.D.O., Galúcio, J.M., Santana, K. and Lima, A.H., (2020). Targeting shikimate pathway: In silico analysis of phosphoenolpyruvate derivatives as inhibitors of EPSP synthase and DAHP synthase. Journal of Molecular Graphics and Modelling, 101: 107735.


• Saei, H.D., Ahmadi, M., Mardani, K. and Batavani, R.A. (2010). Genotyping of Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis based on PCR-RFLP analysis of the aroA Comparative Clinical Pathology, 19(2): 163–168.


• Shayegh J., Barzegari A. and Mikaili P. (2013). Molecular characteristics of Staphylococcus aureus isolates from buffalo’s milk.  Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi, 19 (4): 665–668.


• Seiberling, K.A., Aruni, W., Kim, S., Scapa, V.I., Fletcher, H. and Church, C.A. (2013). The effect of intraoperative mupirocin irrigation on Staphylococcus aureus within the maxillary sinus. International Forum of Allergy & Rhinology, 3(2): 94–98.


• Smith, E.M., Green, L.E., Medley, G.F., Bird, H.E., Fox, L.K., Schukken, Y.H. et al. (2005) Multilocus sequence typing of intercontinental bovine Staphylococcus aureus Journal of Clinical Microbiology, 43: 4737–4743.


• Stepan, J. Pantucek, R. and Doskar, J. (2004). Molecular diagnostics of clinically important staphylococci. Folia Microbiologica, 49(4): 353–386.


• Sung, J.M.L., Lloyd, D.H. and Lindsay, J.A. (2008). Staphylococcus aureus host specificity: comparative genomics of human versus animal isolates by multi-strain microarray. Microbiology, 154(7): 1949–1959.


• Zeinhom, M. and Abed, A.H. (2021). Prevalence, characterization, and control of Staphylococcus aureus isolated from raw milk and Egyptian soft cheese. Journal of Veterinary Medical Research, 27(2): 152–160.