-
دسترسی آزاد مقاله
1 - رابطه فقهی-حقوقی متقاضیان انجماد گامت با گامتهای منجمد موجود در بانکهای انجماد
نازلی محمودیان سید محمد رضا یتی محمود عباسیپیشرفت دانش پزشکی در ابعاد مختلف هرچند که باعث بهبود زندگی بشر شده ولی به موازات آن برخی از دستاوردهای علمی با موازین قانونی و اخلاقی جوامع همخوانی ندارد. امروزه پیشرفت علم پزشکی در زمینه انجماد تا حدی میباشد که نه تنها توانمندی انجماد اعضا و اجزای بدن را دارد انجماد چکیده کاملپیشرفت دانش پزشکی در ابعاد مختلف هرچند که باعث بهبود زندگی بشر شده ولی به موازات آن برخی از دستاوردهای علمی با موازین قانونی و اخلاقی جوامع همخوانی ندارد. امروزه پیشرفت علم پزشکی در زمینه انجماد تا حدی میباشد که نه تنها توانمندی انجماد اعضا و اجزای بدن را دارد انجماد کامل بدن انسان هم میسر میباشد. انجماد و نگهداری گامت در بانکهای انجمادی به منظور حفظ باروری افراد یکی از شاخههای مهم انجماد میباشد که مسائل پیچیده فقهی، حقوقی، اخلاقی و اجتماعی را در پی دارد. یکی از این مسائل تعیین افرادی است که صلاحیت تصمیمگیری در رابطه با سرنوشت گامتهای منجمد بخصوص گامتهای رها شده بعد از اتمام دوره انجماد را داشته باشند که این امر با عنایت به اینکه گامتهای منجمد از اجزای جدا شده بدن محسوب میشوند مستلزم تبیین رابطه افرادبا گامتهای منجمدشان میباشد. با توجه به ماهیتفقهی حقوقیگامتهای منجمد و مال تلقیشدن آنها و اینکه سلولهای جنسی جزء اجزای بدن محسوب میشوند و با عنایت به اینکه رابطه انسان با اعضا و اجزای بدن خود از نوع رابطه مالکیت ذاتی و حق دائمیمیباشد لذا رابطه افراد با گامتهای منجمد شان نیز همین رابطه میباشد که در نتیجه صاحبان گامت تنها کسانی هستند که حق تصمیمگیری در مورد سرنوشت آنها را دارند و در رابطه با گامتهای رها شده در صورتیکه مراکز انجماد بتوانند با صاحبان گامت ارتباط برقرار کنند از آنها خواسته میشود که برای تعیین سرنوشت گامتهای منجمد خود مراجعه کنند و اگر صاحبان گامت در قید حیات نباشند با توجه به ماهیت حقوقی و مال بودن گامتهای منجمد از ورثه خواسته میشود که برای تعیین سرنوشت آنها تصمیمگیری کنند. و در صورت عدم دسترسی به ورثه گامتهای منجمد رها شده مجهول المالک تلقی شده و تعیین سرنوشت آنها به حاکم شرع سپرده میشود که البته با توجه به قابلیت بالقوه گامتهای منجمد برای انسان شدن و آثاری که در پی دارند ورثه و حاکم صرفاً میتوانند تصمیم به اهدا برای تحقیقات یا دورریزی آنها بگیرند و نمیتوانند آنها را به منظور تولید مثل به افراد نابارور انتقال دهند. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
2 - ذخیره سازی بذور گیاه دارویی خار مریم (Silybum marianum L.) در شرایط فراسرد (ازت مایع)
فریده صالح شهین مهرپور فاطمه جمالوتکنولوژی ذخیره سازی در شرایط فراسرد (Cryopreservation)(نیتروژن مایع) یکی از مناسبترین ابزار جهت حفظ ژرم پلاسم گونه های گیاهی شامل از جمله بذور گیاهان میباشد. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیتهای فیزیولوژیک بذر یا اندام گیاهی تقریبا متوقف و بذور قادر به چکیده کاملتکنولوژی ذخیره سازی در شرایط فراسرد (Cryopreservation)(نیتروژن مایع) یکی از مناسبترین ابزار جهت حفظ ژرم پلاسم گونه های گیاهی شامل از جمله بذور گیاهان میباشد. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیتهای فیزیولوژیک بذر یا اندام گیاهی تقریبا متوقف و بذور قادر به زندهمانی در دورههای نامحدود زمانی می باشند. طی این پژوهش به منظور نگه داری بذور گیاه دارویی خار مریمSilybum marianum از خانواده Asteraceae در شرایط فراسرد از سه پیش تیمار گلیسرول 30% و محلول ویتریفیکاسیون گیاهی PVS2) ( وآب گیری (Desiccation) بذور استفاده شد. کلیه تیمارها پس از گذشت یک هفته از ازت مایع خارج و در حمام اب گرم 42 درجه ذوب و سپس بذرها به ژرمیناتور با دمای 24 درجه سانتی گراد و رژیم نوری 8/16 ساعت منتقل شدند. نتایج مورد تجزیه و تحلیل اماری قرار گرفتند. مطابق نتایج، قدرت زنده مانی بذور گیاه خار مریم (۹۳ درصد)در تیمار آب گیری نسبت به شاهد ( 70 درصد) مشاهده شد. میانگین طول دانه رست هادر تیمار ویتریفیکاسیون بیشترین و برابر با 13/101 میلی متر و در شاهد 38/47 میلی متر مشاهده شد. بنابراین تیمار کاهش رطوبت بذر جهت نگه داری طولانی مدت بذور این گیاه و سایر بذور ارتودکس ( با درصد رطوبت کم ) در مراکز نگه داری ذخایر ژرم پلاسم گیاهی پیشنهاد می شود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
3 - ذخیره سازی بذور گیاه دارویی رازیانه L. Foeniculum vulgare در شرایط فراسرد( ازت مایع)
نیره احمدی شهین مهرپورذخیره سازی در شرایط فرا سرد(Cryopreservation)در دمای 196-درجه سانتی گراد روشی منحصر به فردوابزاری قدرتمند برای حفاظت خارج از محل (exstitu) ژرم پلاسم گونه های گیاهی به شمار می رود. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیت های فیزیولوژیکی بذورشدیدا کاهش یافته و بذ چکیده کاملذخیره سازی در شرایط فرا سرد(Cryopreservation)در دمای 196-درجه سانتی گراد روشی منحصر به فردوابزاری قدرتمند برای حفاظت خارج از محل (exstitu) ژرم پلاسم گونه های گیاهی به شمار می رود. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیت های فیزیولوژیکی بذورشدیدا کاهش یافته و بذور قادر به زنده مانی در دوره های بسیار طولانی می شوند. دراین پژوهش جهت ذخیره سازی بذور گیاه دارویی رازیانه با نام علمیL. Foeniculum vulgare متعلق به خانواده چتریان در شرایط فراسرد، قبل از نگه داری نمونه ها در ازت مایع از سه پیش تیمار مختلف شامل گلیسرول 30%، محلول ویتریفیکاسیون گیاهی (PVS2) و کاهش رطوبت بذر ( Dessication) استفاده شد. بذرهای تیمار شده به مدت یک هفته در ازت مایع نگهداری شدند. بذرهای تیمار شده پس از خروج از ازت در حمام آب گرم 42 درجه سانتی گراد قرار گرفتند. بذرها به همراه نمونه های شاهد در پتری دیش های حاوی کاغذ صافی استریل قرار گرفته و در ژرمیناتور با دمای 24 درجه سانتی گراد و رژیم نوری 8/16 منتقل شدند. نتایج نشان داد زنده مانی بذور تیمار شده تحت سه روش حفظ شده و دانه رست های حاصل رشد عادی نشان دادند. درصد جوانه زنی در تیمار گلیسرول با 65% بیشترین مقدار وسپس تیمار دسیکاتور 53%و pvs215% در مقایسه باشاهد (83%)مشاهده گردید. بنابراین نگهداری بذور این گیاه با به کار گیری پیش تیمار گلیسرول 30% به عنوان روشی ساده و مطمئن جهت نگهداری طولانی مدت ژرم پلاسم این گیاه در مراکز نگه داری ذخایر ژرم پلاسم گیاهی پیشنهاد می شود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
4 - بررسی آنالیز اسانس و خواص آنتی اکسیدانی بذر گیاه دارویی رازیانه .Foeniculum vulgare Mill قبل و پس از ذخیره سازی بذر در شرایط فراسرد ( ازت مایع)
شهین مهرپور نیره احمدی فاطمه جمالو محمد رضا زندمنفردمقدمه: اصطلاح ذخیره سازی در فراسرد (Cryopreservation) به ذخیره سازی یاخته ها،اندام ها و بافت ها دردمای نیتروژن مایع (ºC 196-) اشاره دارد. در این دما، یاخته ها به حالت سکون وارد شده و واکنش های فیزیکی و بیوشیمیایی عملا متوقف می شوند. در این شرایط خاص، زمان حفاظت نام چکیده کاملمقدمه: اصطلاح ذخیره سازی در فراسرد (Cryopreservation) به ذخیره سازی یاخته ها،اندام ها و بافت ها دردمای نیتروژن مایع (ºC 196-) اشاره دارد. در این دما، یاخته ها به حالت سکون وارد شده و واکنش های فیزیکی و بیوشیمیایی عملا متوقف می شوند. در این شرایط خاص، زمان حفاظت نامحدود می شود. ذخیره سازی بذرها کارآمدترین روش برای حفاظت از خزانه ژنی گیاهان است. هزینه های ذخیره سازی پایین و بازسازی کل گیاه از ژنوم کامل، مزایای مشخصی برای ذخیره سازی بذر در مقایسه با انواع دیگر بافت های گیاهی را ارائه می دهد (1). مواد و روش ها: بذرهای گیاه دارویی رازیانه Foeniculum vulgare (Apiaceae) با استفاده از پیش تیمار کاهش رطوبت بذرDessication) ) تیمار شده و به مدت یک هفته در ازت مایع نگهداری شدند. سپس بذرها در معرض شوک حرارتی قرار گرفتند. بذرهای تیمار و شاهد پس از کشت به ژرمیناتور با دمای ºC24 و رژیم نوری 8/16 منتقل شدند. اسانس با روش تقطیر با آب با دستگاه کلونجر استخراج و ترکیبات موجود دراسانس توسطGC/MS آنالیز و مورد بررسی قرار گرفت. اثرات آنتی اکسیدانی عصاره هیدرو الکلی بذرتوسط معرف DPPH بررسی شد. نتایج: درصد زنده مانی در بذرهای شاهد (83%) ودرتیمار کاهش رطوبت بذر( 53%) مشاهده گردید. اصلی ترین ترکیب موجود در اسانس مربوط به آنتول (6/78 %) شناسایی شد که در مقایسه با نمونه های تیمار شده آنتول (04/80 %) تفاوت معنی داری مشاهده نشد. نتایج نشان داد که نگه داری بذر در شرایط فراسرد تاثیر منفی بر خواص آنتی اکسیدانی وترکیبات اسانس آنها ندارد. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
5 - ذخیره سازی بذور گیاه دارویی کنگر فرنگی (Cynara scoolymus L.) در شرایط فراسرد (ازت مایع)
فریده صالح شهین مهرپورتکنولوژی (Cryopreservation) نگه داری در دمای oC 196- (نیتروژن مایع) یکی از مناسبترین و ابزار برای حفظ ژرم پلاسم گونه های گیاهی شامل بذر وبافت ها و یاختههای گیاهی میباشد. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیتهای فیزیولوژیک بذر یا اندام گیاهی تقریبا متوقف و چکیده کاملتکنولوژی (Cryopreservation) نگه داری در دمای oC 196- (نیتروژن مایع) یکی از مناسبترین و ابزار برای حفظ ژرم پلاسم گونه های گیاهی شامل بذر وبافت ها و یاختههای گیاهی میباشد. در این درجه از سرما فرایندهای متابولیکی و فعالیتهای فیزیولوژیک بذر یا اندام گیاهی تقریبا متوقف و بذر و اندام گیاهی قادر به زندهمانی در دورههای نامحدود زمانی می باشند. طی این پژوهش به منظور نگه داری بذور گیاه دارویی کنگر فرنگی (Cynara scoolymus L.) از خانواده Asteraceae در شرایط فراسرد از پیش تیمارهای گلیسرول 30% و محلول ویتریفیکاسیون گیاهی Plant Vitrification Solution 2) ( وآب گیری (Desiccation) بذور استفاده شد. کلیه تیمارها پس از یک هفته از ازت مایع خارج و در حمام اب گرم 42 درجه قرار گرفتند.. بذرها به ژرمیناتور با دمای 24 درجه سانتی گراد و رژیم نوری 8/16 ساعت منتقل شدند. نتایج مورد تجزیه و تحلیل اماری قرار گرفت. نتایج نشان داد که قدرت زنده مانی بذور گیاه کنگر فرنگی در ازت مایع در هر سه تیمار حفظ شده و بیشترین درصد زنده مانی (۹5 درصد) در تیمار آب گیری نسبت به شاهد ( 90 درصد) مشاهده شد. میانگین طول دانه رست ها درنمونه های شاهد برابر 53 میلی متر و درتیمار گلیسرول 30%، به 74/46 میلی متر رسید. بنابراین ذخیره سازی بذور گیاه کنگرفرنگی در ازت مایع از طریق کاهش رطوبت که روشی ساده ، با بیشترین بازدهی و بدون استفاده از مواد شیمیایی می باشد، در مقیاس کاربردی جهت نگه داری طولانی مدت بذوراین گیاه پیشنهاد می شود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
6 - ارزیابی پارامترهای اسپرم انسانی پس از فرایند انجماد با تیمارآنتی اکسیدان میواینوزیتول در بیماران آستنوتراتوزواسپرمی
راحیل جنتی فر حمید پیروزمنش لیلا ناصر پورزمینه و هدف: میواینوزیتول که یکی از اجزای تشکیل دهنده غشای سلول میباشد با خاصیت قوی آنتیاکسیدانتی خود پتانسیل بالایی در خنثیسازی آسیبهای ناشی از انجماد دارد. هدف ازاین مطالعه بررسی اثر آنتی اکسیدان میواینوزیتول همراه با محیط فریز اسپرم بر پارامترهای اسپرمی میباشد. چکیده کاملزمینه و هدف: میواینوزیتول که یکی از اجزای تشکیل دهنده غشای سلول میباشد با خاصیت قوی آنتیاکسیدانتی خود پتانسیل بالایی در خنثیسازی آسیبهای ناشی از انجماد دارد. هدف ازاین مطالعه بررسی اثر آنتی اکسیدان میواینوزیتول همراه با محیط فریز اسپرم بر پارامترهای اسپرمی میباشد. روش کار: نمونه های 20 فرد مبتلا به آستنو تراتوز اسپرمی مراجعه کننده به مرکز درمان ناباروری جهاد دانشگاهی قم در سه گروه: کنترل، اتجمادی، انجمادی+میواینوزیتول mg/mL 2 مورد ارزیابی قرار گرفت. پارامترهای اسپرمی از قبیل: میزان تحرک، مورفولوژی و قابلیت حیات به ترتیب با استفاده از اﺳﺘﺎﻧﺪاردﻫﺎی(WHO)، تکنیک رنگ آمیزی پاپانیکولا و ائوزین-نکروزین استفاده شد، برای بررسی تمامیت غشای پلاسمایی از تکنیکتHOST و هم چنین برای ارزیابی میزان شکستDNA از تکنیک هالو اسپرم در هر سه گروه استفاده شد. یافتهها: نتایج مطالعه نشان داد که انکوباسیون میواینوزیتول با محیط فریز اسپرم(انجماد+میواینوزیتول) موجب افزایش میزان تحرک و قابلیت حیات اسپرم ها می شود(0.05>P). هم چنین، افزایش معنی داری در میزان حرکت پیشرونده اسپرم پس از انکوباسیون میواینوزیتول با نمونه اسپرم(انجماد+میواینوزیتول)حاصل گردید(0.05>P). نتایج مطالعه حاضر نشان داد که انکوباسیون میواینوزیتول با محیط فریز اسپرم موجب کاهش معنی دار میزان آسیب DNA می گردد(0.05>P). تمامیت غشای پلاسمایی و پتانسیل غشای میتوکندری اسپرم نیز افزایش معنی داری در گروه انجماد+میواینوزیتول داشت(0.05>P). این درحالی است که مورفولوژی اسپرم ها تفاوت معنی داری را نشان نداد(0.05<P). نتیجه گیری: نتایج ما نشان میدهد که میواینوزیتول میتواند اثرات مخرب ناشی از فرآیند انجماد-ذوب را کاهش دهد. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
7 - بررسی مقایسهای تاثیر دوستاکسل بر داربست سلولی تخمک موش سوری پس از انجماد شیشهای با دو ماده انجمادی متفاوت
حامد دانش پژوه نسیم حیاتی رودباری مهدی دیانت پور زهرا خدابنده جهرمی یاسر تهمتنیزمینه و هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسی مقایسهای تاثیر ماده دوستاکسل بر روی لقاح آزمایشگاهی، درصد زندهمانی و داربست سلولی تخمکها پس از انجماد شیشهای با دو ماده انجمادی متفاوت میباشد.روش کار: برای رسیدن به این منظور موشهای ماده نژاد NMRI با سن 8 تا 10 هفته با تزریق چکیده کاملزمینه و هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسی مقایسهای تاثیر ماده دوستاکسل بر روی لقاح آزمایشگاهی، درصد زندهمانی و داربست سلولی تخمکها پس از انجماد شیشهای با دو ماده انجمادی متفاوت میباشد.روش کار: برای رسیدن به این منظور موشهای ماده نژاد NMRI با سن 8 تا 10 هفته با تزریق هورمونهای PMSG و HCG برای تخمکگذاری تحریک شدند. توده سلولی کومولوس اطراف تخمک با استفاده از آنزیم هیالورونیداز 1/0% برداشته و سپس تخمکها به 8 گروه آزمایشی شامل گروههای کنترل، دوستاکسل، دوستاکسل+ محلول انجمادی1، دوستاکسل+ محلول انجمادی2، دوستاکسل+ انجماد شیشهای 1، دوستاکسل+ انجماد شیشهای2، انجماد شیشهای 1 و انجماد شیشهای 2 تقسیم گردیدند. تخمکهای بالغ در محلولهای انجمادی اتیلن گلیکول و دیمتیلسولفوکساید با غلظت 15 درصد و ساکارز 5/0 مولار در گروه انجمادی 1 و محلولهای انجمادی اتیلنگلیکول 5/7 %، گلیسرول 5/7 % و سوکروز 5/0 مولار در گروه انجمادی دوم منجمد شدند. پس از ذوب شدن، درصد زنده مانی و لقاح آن ها تا مرحله دو سلولی بررسی گردید. رنگآمیزی میکروتوبولها در تخمکها با آنتیبادی آلفاتوبولین انجام گردید. یافته ها: نتایج نشان میدهد تفاوتهای معنیداری بین درصد زنده مانی و درصد لقاح گروههای انجمادی در مقایسه با گروه کنترل وجود دارد(P<0.05). درصد زنده مانی و درصد لقاح در گروه انجمادی اول نسبت به گروه انجمادی دوم کاهش یافت اما این دو گروه از نظر آماری تفاوت معنیداری بایک دیگر نداشتند. هم چنین درصد زنده مانی و درصد لقاح گروههای پیش انکوبه شده با دوستاکسل بیشتر از گروههای انکوبه نشده بودنتیجه گیری: با توجه نتایج حاصل دوستاکسل با کاهش آسیبهای وارده به اسکلت سلولی تخمک میتواند در بهبود تکنیکهای تولید مثلی موثر باشد. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
8 - بررسی تأثیر افزودن رقیقکنندههای حاوی ادیتات سدیم و پروپیلن گلیکول بر ماندگاری اسپرم منجمد قوچ قزل
پریسا شفاعتی غلامعلی مقدم حسین دقیق کیا صادق علیجانیادیتاتسدیم با کلات کردن کلسیم و ممانعت از ورود کلسیم خارج سلولی به داخل سلول و پروپیلن گلیکول با ممانعت از تشکیل بلورهای یخ داخل سلولی، از اسپرم در برابر فرآیند انجماد محافظت می کنند. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی اثر افزودن سطوح مختلفادیتات و پروپیلن گلیکول بر کیفیت و م چکیده کاملادیتاتسدیم با کلات کردن کلسیم و ممانعت از ورود کلسیم خارج سلولی به داخل سلول و پروپیلن گلیکول با ممانعت از تشکیل بلورهای یخ داخل سلولی، از اسپرم در برابر فرآیند انجماد محافظت می کنند. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی اثر افزودن سطوح مختلفادیتات و پروپیلن گلیکول بر کیفیت و ماندگاری اسپرم منجمد قوچ قزل انجام پذیرفت. پس از ارزیابی های اولیه منی 5 رأس قوچ نژاد قزل از لحاظ غلظت، حجم و رنگ نمونه، سلامت آکروزوم، حرکت موجی، تحرک کل و پیشرونده، درصد زنده مانی و درصد اسپرم های غیرطبیعی، نمونه های با غلظت 5/2 میلیارد اسپرم، حرکت پیشرونده ی بالای 70 درصد و حجم بیش از 5/0 میلی لیتر در گروه شاهد با مخلوط تریس، گلیسرول و زرده تخم مرغ و در گروه های تیمار با استفاده از 1، 5/1، 2 و 5/2 میلی مولار EDTA (ethylenediaminetetraacetate) و 1، 2، 3 و 7 درصد پروپیلن گلیکول رقیق شدند. سپس داخل پایت های 25/0 میلی لیتری کشیده شده و بعد از سردسازی در دمای 5 درجه سلسیوس به مدت 10-8 دقیقه، ابتدا در فاصله 5-4 سانتی متری بالای سطح نیتروژن مایع قرار گرفته و در نهایت در داخل آن غوطه ور شدند. خصوصیات کمّی اسپرم شامل زنده مانی، درصد تحرک کل، حرکت پیشرونده و درجا، تست یکپارچگی غشای پلاسمایی، درصد اسپرم های غیرطبیعی، سلامت آکروزوم در کل سلول ها و در سلول های مردهدر روزهای صفر، 20، 40 و 60 فرآیند انجماد بررسی شدند. تیمار 1درصد پروپیلن گلیکول با سایر گروههای تیمار پروپیلن گلیکول و گروه شاهد در میزان تحرک کل، درصد زنده مانی، آکروزوم سالم، تست یکپارچگی غشای پلاسماییو حرکت پیشرونده تفاوت معنی دار داشت (05/0p <). در بین تیمارهای EDTAنیز تیمار با 5/2 میلی مولار EDTA بهترین عملکرد را دارا بود ولی تفاوت معنی داری با سایر گروههای تیمارEDTAو گروه شاهد نداشت. بنابراین نتایج بررسی حاضر نشان داد که رقیق کننده های حاوی پروپیلن گلیکول و EDTA می توانند پارامترهای کیفی اسپرم قوچ را بهبود بخشند. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
9 - تأثیر مورفومتری، ویسکوزیته و آبکیشدن منی بر کیفیت اسپرم منجمد قوچ قزل
پریسا شفاعتی غلامعلی مقدمتوانایی اسپرم در حرکت و رسیدن به اووسیت جهت انجام لقاح و باروری به عوامل مختلفی از جمله مورفومتری، آبکی شدن و ویسکوزیته منی بستگی دارد. مطالعهء حاضر به منظور ارزیابی تأثیر مورفومتری، ویسکوزیته و آبکیشدن مایع منی بر کیفیت اسپرم منجمد قوچ قزل انجام گرفت. جمع آوری منی یک چکیده کاملتوانایی اسپرم در حرکت و رسیدن به اووسیت جهت انجام لقاح و باروری به عوامل مختلفی از جمله مورفومتری، آبکی شدن و ویسکوزیته منی بستگی دارد. مطالعهء حاضر به منظور ارزیابی تأثیر مورفومتری، ویسکوزیته و آبکیشدن مایع منی بر کیفیت اسپرم منجمد قوچ قزل انجام گرفت. جمع آوری منی یکبار در هفته به مدت 3 هفته از 5 رأس قوچ قزل صورت گرفت. ارزیابی های اولیه شامل تحرک کل و پیشرونده، درصد زندهمانی، درصد اسپرمهای غیرطبیعی، غلظت، ویسکوزیته، مورفومتری و آبکیشدن بود. نمونههای با غلظت بالای 5/2 میلیارد اسپرم و حرکت پیشروندهء بالای 70 درصد برای رقیقسازی مورد استفاده قرار گرفتند. بعد از رقیق سازی، نمونهها در داخل پایتهای 25/0 میلی لیتری کشیده شده و در یخچال به مدت 2-5/1 ساعت جهت سردسازی تا دمای 5 درجهء سلسیوس قرار گرفتند. سپس به مدت 10-8 دقیقه در 5-4 سانتی متری بالای سطح نیتروژن مایع در بخار ازت قرار گرفتند و در نهایت داخل نیتروژن مایع غوطه ور شدند. یخگشایی نمونهها در روزهای صفر، 20، 40 و 60 دوره نگه داری، انجام شد. نتایج نشان داد که صفات مربوط به تحرک و زندهمانی اسپرم ها با گذشت زمان کاهش معنیداری داشتند (05/0>p). بین طول قطره و یکپارچگی غشای پلاسمایی منی هم رابطهء منفی و معنیدار وجود داشت (05/0>p). همچنین بین طول رشتهء منی و تحرک کل، همبستگی مثبت و معنیدار، ولی بین آبکیشدن با تحرک کل، حرکت پیشرونده، زندهمانی و یکپارچگی آکروزوم، همبستگی منفی و معنیدار مشاهده گردید (01/0>p). بین طول دم و طول کل اسپرم با یکپارچگی غشای پلاسمایی نیز رابطهء منفی و معنیدار مشاهده شد (01/0>p). یافته های تحقیق حاضر مشخص کرد که هرچه زمان آبکیشدن مایع منی، طول دم و طول کل اسپرماتوزئید کوتاهتر باشد، صفات کیفی آن در فرایند انجماد بهتر حفظ خواهد شد. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
10 - اهمیت و خصوصیات رقیقکنندههای اسپرم
غلامعلی مقدم پریسا شفاعتیبا وجود پیشرفتهای چشمگیری که در روشهای نگهداری انجمادی اسپرم در طول سالهای اخیر صورت گرفته است، تحقیقات ثابت کرده که نگهداری طولانی مدت اسپرم در حالت انجماد و نگهداری سرمایی آسیب جدی به اسپرم وارد میکند. به وجود آمدن پراکسیداسیون چربی و متابولیسم خود اسپرماتوزوئیدها در چکیده کاملبا وجود پیشرفتهای چشمگیری که در روشهای نگهداری انجمادی اسپرم در طول سالهای اخیر صورت گرفته است، تحقیقات ثابت کرده که نگهداری طولانی مدت اسپرم در حالت انجماد و نگهداری سرمایی آسیب جدی به اسپرم وارد میکند. به وجود آمدن پراکسیداسیون چربی و متابولیسم خود اسپرماتوزوئیدها در هنگام انجماد و نگهداری سبب از بین رفتن اسپرماتوزوئیدها میشود. شوک دمایی، شکل کریستالهای یخ داخل سلولی، دهیدراتاسیون سلولی، افزایش غلظت نمکها و شوک اوسموتیک در طول فرآیند انجماد و یخگشایی ممکن است صورت گیرد. علاوه بر این، نگهداری انجمادی تغییرات مضر ساختاری در غشای پلاسما ایجاد میکند. تغییرات در نفوذپذیری غشا نسبت به برخی از یونها مثل کلسیم در طول فرآیند انجماد و یخگشایی گزارش شده است. همچنین در هنگام نگهداری انجمادی تشکیل یخ داخل و خارج سلولی سبب تخریب و مرگ سلولی میشود. غشای پلاسمایی اسپرم محل اصلی آسیب در طی فرآیند انجماد و ذوب است و به دلیل دارا بودن اسیدهای چرب غیراشباع زیاد، در مقابل پراکسیداسیون لیپیدها بسیار حساس است. این تغییرات ممکن است در تجمع محصولات سمی ناشی ازمتابولیسم، به طور عمده از گونههای فعال اکسیژن (Reactive oxygene species) که از طریق پراکسیداسیون لیپیدی غشاهای اسپرم ایجاد می شوند، نقش داشته باشد. گونه های فعال اکسیژن در مقادیر کم، نقش مهمی در کاپاسیته شدن اسپرم، افزایش تحرک اسپرم، واکنش آکروزوم و لقاح تخمک را در انسان، گاوها، اسب ها، خوک ها و قوچ ها دارد. بدین منظور جهت رفع این مشکلات از مواد مختلف آنتیاکسیدانی، حفاظتکنندهها و همچنین کلاتورها در رقیقکنندههای اسپرم استفاده میشود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
11 - اثر ویتریفیکاسیون بر زندهمانی بذور L. Medicago polymorpha نگهداری شده در شرایط فراسرد
مه لقا قربانلی رکسانا بنیادی عباس قمری زارع شکوفه شهرزاددر این پژوهش برای دستیـابی بـه روشی موفـق جهت نـگهداری طولانی مدت بـذور در شرایط دمـای فـراسرد از روش ویتریفیکاسیون استفاده شد. بدین منظور از بذور یونجه یکسالهMedicago polymorpha L. که در دمای °C4 سازگاری سرمایی یافته بودند استفاده گشت. بذور با قرار گرفتن در مجاورت چکیده کاملدر این پژوهش برای دستیـابی بـه روشی موفـق جهت نـگهداری طولانی مدت بـذور در شرایط دمـای فـراسرد از روش ویتریفیکاسیون استفاده شد. بدین منظور از بذور یونجه یکسالهMedicago polymorpha L. که در دمای °C4 سازگاری سرمایی یافته بودند استفاده گشت. بذور با قرار گرفتن در مجاورت سیلیکاژل در دسیکاتور برای 4 روز آبگیری شدند. سپس جهت حفاظت اسمزی به مدت 20 دقیقه در دمای °C25 با محلول گلیسرول M2 در ساکاروز M 6/0 بارگیری گشتند. بذور بارگیری شده به منظور دهیدراتاسیون و حفاظت به کرایوویالهای حاوی ml 5/0 محلول PVS2 صفر درجه سانتیگراد انتقال یافته و بلافاصله در نیتروژن مایع ذخیره شدند. کرایوویالهای حاوی نمونه پس از یک هفته از نیتروژن مایع خارج گشتند و بلافاصله در حمام آبی C°37 به مدت 2 دقیقه گرمادهی شدند. در مرحله بعد به منظور آبدهی و شستشوی مواد نگهدارنده به ترتیب به مدت 5، 10 و 15 دقیقه در دمای °C 22 در داخل محلول شستشوی حاوی سوکروز M 2/1 در نمکهای محیط کشت MS قرار گرقتند. بازیابی نمونهها به سه روش صورت گرفت: (الف و ب) قرار دادن بذور به مدت نیم ساعت و 24 ساعت در زیر آب جاری و سپس انتقال آنها بر روی پتریدیشهای حاوی کاغذ صافی مرطوب به منظور تولید دانهرست، (ج) استریل بذور با استفاده از هیپوکلریت سدیم 2% و سپـس انتقال آنها به محیـط کشت جامد MS حاوی mg/lit 5/0 GA3. درصد زندهمانی بذور نگهداری شده در دمای فراسرد در روشهای بازیابی الف و ب (به ترتیب 37/94% و 21/98%) در سطح 5% با شاهد (بذوری که تحت تیمار فراسرد قرار نگرفتند) دارای اختلاف بود درحالیکه، این اختلاف در روش ج (زندهمانی 16/76%) فاقد اختلاف معنیدار بود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
12 - Comparative Evaluation of Ascorbic Acid Supplementation in Tris-Egg Yolk Based Extender and Triladyl® Extender on Post-Thaw Kinematics Parameters of Sahiwal Bull Semen
H. Abdul Rauf R.E. Qadeer F.U. Hassan M. Tarique Tunio M.F. Bhutta S. ImranThe current study was conducted to see the effects of ascorbic acid supplementation into tris-citric acid-glycerol-yolk (TCGY) extender and comparing it with Triladyl extender for bovine semen cryopreservation. Semen was collected from Sahiwal bulls for three weeks and چکیده کاملThe current study was conducted to see the effects of ascorbic acid supplementation into tris-citric acid-glycerol-yolk (TCGY) extender and comparing it with Triladyl extender for bovine semen cryopreservation. Semen was collected from Sahiwal bulls for three weeks and each ejaculate (N=30) was divided into three aliquots. The first aliquot was extended using TCGY extender (control group), the 2nd aliquot was extended using TCGY supplemented with 2.1 mg/mL of ascorbic acid (AA group) and the 3rd aliquot of the same ejaculate was extended using Triladyl extender (TA group). Following the processing and freezing, thawed semen straws from each treatment were evaluated for sperm motility, viability, acrosome integrity and live/dead ratio. The average path velocity was the highest in TA group (77.99±2.99 µm/s) compared with other two groups (P<0.05). Similarly, values of total motility showed that TA group was superior to the other two groups (93.6±0.94% in TA versus 83.33±1.71% in control and 88.53±1.38% in AA group) (P<0.05). The amplitude of lateral head displacement (8.47±0.27 µm versus 5.00±0.22 µm and 4.74±0.13 µm), length of the average path (50.23±1.79 µm vs. 25.33±2.12 µm and 23.51±0.39 µm), length of the curvilinear path (85.01±3.03 µm vs. 38.89±1.48 µm and 38.65±0.77 µm), length of the straight-line path (37.28±1.33 µm vs. 19.39±0.84 µm and 20.42±0.29 µm) and track speed (130.93±5.33 µm/s vs. 89.13±3.47 µm/s and 92.11±1.88 µm/s) were significantly higher (P<0.05) in AA group as compared to TA and control group. Values for plasma membrane integrity (PMI), acrosome membrane integrity (AMI) and eosin were higher in AA and TA groups than in the control group (P<0.05). The addition of ascorbic acid in TCGY extender can serve as a better alternative to commercial extender for cryopreservation of semen. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
13 - Effect of Different Levels of Egg Yolk on Cryopreservation of Black Bengal Buck Semen in Tris Egg yolk Citrate Fructose Glycerol Extender
ال. گویجن سینق ک. رای ب. سرکارThis study was conducted to assess the physical and morphological characteristics of fresh, pre-freeze and post-thaw black Bengal buck (Capra hircus) semen processed in Tris-egg yolk-citrate-fructose-glycerol (TEYCFG) extender containing 4 different concentrations (2.5, چکیده کاملThis study was conducted to assess the physical and morphological characteristics of fresh, pre-freeze and post-thaw black Bengal buck (Capra hircus) semen processed in Tris-egg yolk-citrate-fructose-glycerol (TEYCFG) extender containing 4 different concentrations (2.5, 5, 7.5 and 10%) of egg-yolk. Ejaculates were collected once a week for eight weeks from six mature bucks (48 ejaculates) using an artificial vagina. It was found that a general decrease in values of pre-freeze and post-thaw semen parameters such as progressive sperm motility (%), live sperm (%), acrosomal integrity (%) and positive sperm (%) in the hypo-osmotic swelling (HOS) test, but an over-all increase in abnormal spermatozoa compared to fresh semen for extenders containing different concentrations of egg-yolk. Best values for all the semen parameters were obtained using extender with 2.5% egg-yolk. Of all egg-yolk concentrations, the 10% egg-yolk supplement caused the highest percentage of abnormal sperm, which was significant (P<0.05), compared to 2.5% and 5% egg-yolk containing extenders, but non-significantly (P>0.05) different compared with 7.5% egg-yolk containing extender. Only progressive motility was significantly different (P<0.05) within extenders containing 2.5%, 5%, 7.5% and 10% egg-yolk. We conclude that Black Bengal buck semen can be cryopreserved effectively with tris-egg yolk-citrate-fructose-glycerol extender containing 2.5% egg yolk (V/V). پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
14 - Effect of Antioxidant D-Aspartic Acid and Thawing Rate on the Freeze-Thawing Process of Ram Semen
ح. دقیق کیا ص. وطنخواهThe study was conducted to determine the influence of D-aspartic acid (D-Asp) as antioxidant supplement and thawing rates on ram sperm motility, membrane integrity, abnormality, viability, mitochondria activity, malondialdehyde and antioxidant activities, and total anti چکیده کاملThe study was conducted to determine the influence of D-aspartic acid (D-Asp) as antioxidant supplement and thawing rates on ram sperm motility, membrane integrity, abnormality, viability, mitochondria activity, malondialdehyde and antioxidant activities, and total antioxidant capacity after freezing-thawing process. Semen samples from five mature rams (3-4 years old) were diluted with extenders (1.5% soybean lecithin, 7% glycerol) containing no supplements (control) and D-Asp (5, 10, and 15 mg/L) and cryopreserved. Frozen straws were thawed at water bath temperatures at 37 ˚C for 30s and at 60 ˚C for 6s. Addition of 10 mg/L of D-Asp improved significantly progressive motility, average path velocity, and straight-line velocity percentages after freeze-thaw (P<0.05). Plasma membrane integrity, mitochondria activity, viability, total antioxidant capacity, and glutathione peroxidase were higher in group receiving 10 mg/L in comparison to other treatments (P<0.05). Meanwhile, total abnormality significantly decreased at this concentration (10 mg/L) in comparison to the level of 15 mg/L and control group (P<0.05). Our results revealed that malondialdehyde level was lower in group receiving 10 mg/L D-Asp compared to other treatments (P<0.05). There were no significant interactions between concentrations of D-Asp and thawing protocols for any semen samples. Also, significant improvement in sperm viability and mitochondria activity were observed at 37 ˚C to 30 s thawing method (P<0.05). In overall, results of the present study demonstrate that addition of D-Asp at level of 10 mg/L have beneficial effect on quality of post-thawed ram semen cryopreserved in an extender. Therefore, this antioxidant in the suitable dose can be recommended as an additional component of ram freezing extender. The 60 ˚C to 6s thawing procedure is not an appropriate replacement for 37 ˚C to 30 s. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
15 - <i>Morus nigra</i> Fruit Extract Safeguards Frozen Thawed Bovine Sperm Parameters
S. Suleman M.A. Kanwal R. Ali N. Kanwal S. Yasmeen M.Y. Mehmood S. Siddique S.N. Ahmad A. Younis I. Inayat K. Raees AhmadThis study explored the effect of Morus nigra fruit extract (MFE) on microanatomical and physiological parameters of cryopreserved bovine sperms. Three ejaculates were collected on weekly basis, from five fertile bulls. Each semen sample was mixed with dilution medium ( چکیده کاملThis study explored the effect of Morus nigra fruit extract (MFE) on microanatomical and physiological parameters of cryopreserved bovine sperms. Three ejaculates were collected on weekly basis, from five fertile bulls. Each semen sample was mixed with dilution medium (DM) (1:2 v/v), centrifuged (32 g) for 10 minutes to pore away the upper-half of the mixture. The remaining material was then extended (1:4 ratios) with standard cryopreservation extender (SCE). Three aliquots (0.3 mL) from this extended sample were further extended with 0.7 mL pure SCE (control group), 0.7 mL SCE containing 3% MFE (MFE-3 group) and 0.7 mL SCE containing 6% MFE (MFE-6 group) respectively to attain final dilutions (25 times dilution of fresh semen ejaculate, containing approximately 1836.5 ± 85.23 million sperms per mL). From each final dilution (0.1 mL) sample was directly analyzed for semen quality parameters (SQPs) and rest of the material was placed in liquid nitrogen for 24 hrs for post thaw study of the SQPs and in-vitro fertilizability. Results revealed substantial improvement in sperm membrane integrity, motility, and fertilizability in MFE-3 and MFE-6 against SCE group. Likewise, significantly high mean percent number of progressively motile sperms and sperms showing 20 µ/sec or above velocity both before and after cryopreservation, were observed in MFE-6 and MFE-3 groups as compared to SCE. These findings show protective effects of MFE for bovine spermatozoa against cryoinjuries and the post thawed oxidative stress. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
16 - Cryopreservation of Spermatogonial Stem Cells of Native Goat of Iran
M. Mohebbi G. Moghaddam B. Qasemi-Panahi H. Daghigh Kia S.A. Rafat G. HamidianThis study deals with cryopreservation of spermatogonial stem cells (SSCs) of native goat using different media along with cryoprotectant. Morphological differentiation and immunocytochemistry tests were used to identify the cells. Furthermore anti-vimentin and anti-Oct چکیده کاملThis study deals with cryopreservation of spermatogonial stem cells (SSCs) of native goat using different media along with cryoprotectant. Morphological differentiation and immunocytochemistry tests were used to identify the cells. Furthermore anti-vimentin and anti-Oct-4 immuno staining methods were used for identification of sertoli cells and SSCs, respectively. Cryopreservation of SSCs was done with two sets of media. One with 40% dulbecco’s modified eagle’s medium (DMEM), 50% fetal bovine serum (FBS) and 10% dimethyl sulfoxide (DMSO). The second medium included 90% FBS and 10% DMSO. Post thaw cryopreserved cells were subjected to viability and colony area formation on 4th, 8th and 12th days of culturing after and before cryopreservation. Results clearly indicated the viability, area and number of colonies in the first medium registered to 61.37%, 0.87 mm2and 246.88 averagely in every 25 cm2 culture flask, respectively. Similarly with second medium, post thaw cryopreserved sperm registered viability, area and number of colonies to 73.87%, 2.74 mm2 and 364.36 in every 25 cm2 culture flask, respectively. After the thawing of spermatogonial cells, the best viability percentage was obtained in the freezing medium containing 90% FBS. Thus the study demonstrated that serum concentration had a distinct positive effect on the maintenance and proliferation of SSCs in culture after cryopreservation. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
17 - Effect of the Addition of Insulin Like Growth Factor-I (IGF-I) on Cryopreservation of Hariana Bull Semen
G.V. Singh A. Kumar V. Sachan J.K. Agrawal A. SaxenaThis experiment was designed to study the effect of insulin like growth factor-I (IGF-I) on cryopreservation of Hariana bull semen. For this purpose, semen ejaculates were collected from four Hariana bulls using artificial vagina at biweekly interval. The semen samples چکیده کاملThis experiment was designed to study the effect of insulin like growth factor-I (IGF-I) on cryopreservation of Hariana bull semen. For this purpose, semen ejaculates were collected from four Hariana bulls using artificial vagina at biweekly interval. The semen samples which possess more than 70% initial progressive motility and above 500 million/mL spermatozoa concentration was subsequently subjected to processing for experiment. Semen samples were extended in egg yolk tris glycerol (EYTG) extender and split into four groups. IGF-I was added at 50 ng/80 × 106 spermatozoa, 100 ng/80 × 106 spermatozoa and 150 ng/80 × 106 spermatozoa in the group II, III, IV respectively and group I as control (without IGF-I). Semen samples were evaluated at pre-freeze and post-thaw stage for percent individual progressive motility, percent live spermatozoa, percent hypo-osmotic swelling (HOS) positive spermatozoa, percent spermatozoa with intact acrosome. A significant (p < 0.05) higher individual progressive motility, viability, HOS response and acrosomal integrity was observed at pre-freeze and post-thaw stage by using 150 ng/ml IGF-I. Concentration of 150 ng/mL IGF-I was found to be more beneficial in cryopreservation of Hariana bull spermatozoa as evidenced by post-thaw seminal parameter. It was concluded that IGF-I can be added to extender for improving cryosurvial of Hariana bull spermatozoa. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
18 - Supplemental Glutathione Improves Post-Thaw Quality of Holstein Bulls Sperm in a Nanomicelle based Extender
T. Nadri A. Towhidi S. Zeinoaldini G. Riazi M. Zhandi M. SharafiAdding antioxidants to semen extenders could reduce post-thaw sperm damages. Glutathione is an important intracellular antioxidant that has free radicals scavenging properties and multiple effects on DNA and protein synthesis. In the present study, effects different lev چکیده کاملAdding antioxidants to semen extenders could reduce post-thaw sperm damages. Glutathione is an important intracellular antioxidant that has free radicals scavenging properties and multiple effects on DNA and protein synthesis. In the present study, effects different levels of reduced glutathione (GSH) containing 0 (control), 1.0, 2.5, or 5.0 mM in a nanomicelle-based extender on post-thaw quality of bovine sperm were investigated. Initially, lecithin was added to a tris-based extender containing GSH. The mixture was then emulsified by slowly shaking and sonification so that nano size of particles was obtained. Thirty-six ejaculates from six Holstein bulls were used. The post-thaw quality parameters including computer-assisted sperm analysis of motility, plasma membrane functionality, membrane integrity, acrosome integrity, morphology and level of apoptosis were measured. Compared to the control medium, the total motility and membrane integrity were significantly better in samples containing 2.5 mM GSH (67.3±1.2% vs. 73±1.2% and 71.3±1.5% vs. 77.6±1.5%, respectively). The extender supplemented with 2.5 mM GSH had the highest percentage of viable sperm during apoptotic test. In conclusion, supplementation of lecithin nanomicelle-based extender with 2.5 mM GSH reduced damages to bovine sperm during cryopreservation. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
19 - Anti-oxidative Effects of Ethanol Extract of <i>Origanum vulgare</i> on Kinetics, Microscopic and Oxidative Parameters of Cryopreserved Holstein Bull Spermatozoa
ح. دقیق کیا ر. فرهادی ا. اشرفی م. مهدیپورOriganum vulgare contains high levels of phenolic compounds such as gallic acid and polyphenols such as rosmarinic acid and quercetin. The purpose of this study was to investigate the effects of Origanum vulgare extract, as a natural antioxidant, on freezing-thawing sem چکیده کاملOriganum vulgare contains high levels of phenolic compounds such as gallic acid and polyphenols such as rosmarinic acid and quercetin. The purpose of this study was to investigate the effects of Origanum vulgare extract, as a natural antioxidant, on freezing-thawing semen quality in Holstein bulls. Three Holstein bulls (5-6 years old, mean live weight 800 kg) were used for semen collection twice a week for two months. Ethanol extract of Origanum vulgare (2, 4, 8, 12, 16 and 20 mL/dL extender) was added to a citrate-yolk-base extender. After freezing-thawing sperm motility parameters, viability and membrane integrity were determined using a CASA system, eosin-nigrosin staining, and hypo-osmotic swelling test, respectively; malondialdehyde concentration and activity of superoxide dismutase and catalase were also measured. The percentages of motility were higher (P<0.05) in the freezing extender containing 4 mL/dL Origanum vulgare extract (72.34±7.98). Addition of 2 and 4 mL/dL extract of Origanum vulgare significantly improved the motility, viability and plasma membrane integrity of the spermatozoa following freezing-thawing process compared to the control group. Addition of 4 mL/dL extract significantly reduced the concentration of malondialdehyde compared to the control group (P<0.05). The activity of superoxide dismutase and catalase increased significantly by inclusion of 4 and 8 mL/dL extract of Origanum vulgare to the extender (1.86±0.18 and 1.92±0.28 U/mg protein; 4.54±0.13 and 4.28±0.28 U/mg protein, respectively). The activity of superoxide dismutase and catalase was significantly increased by inclusion of 4 and 8 mL/dL extract to the extender. In conclusion, addition of 2 and 4 mL/dL extract of Origanum vulgare to the semen extender improved the post-thawed quality of semen, which may be due to increasing in antioxidant enzyme activity and reduction in lipid peroxidation. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
20 - بررسی اثر نگهداری در شرایط فراسرد بر پایداری فیتوشیمیایی گیاه مرزهSatureja sahendica
شبنم شهبازی عباس قمری زارع فاطمه سفیدکن علی اشرف جعفری وحید عبدوسیچکیده فنآوری انجماد برای نگهداری طولانیمدت ژرمپلاسم گیاهی از اهمیت زیادی برخوردار است. بهکارگیری این فنآوری برای حفاظت مواد گیاهی زمانی سودمند است که باعث تغییرات در ترکیبات شیمیایی اسانس آن در گیاه نگردد. گیاه مرزه Satureja sahendicaازگونههای در معرض خطر انقراض د چکیده کاملچکیده فنآوری انجماد برای نگهداری طولانیمدت ژرمپلاسم گیاهی از اهمیت زیادی برخوردار است. بهکارگیری این فنآوری برای حفاظت مواد گیاهی زمانی سودمند است که باعث تغییرات در ترکیبات شیمیایی اسانس آن در گیاه نگردد. گیاه مرزه Satureja sahendicaازگونههای در معرض خطر انقراض در ایران است. حفاظت از موادژنتیکی این گیاهان ارزشمند، لازم و ضروری است. به منظور بررسی اثر نگهداری در شرایط فراسرد بر پایداری فیتوشیمیایی و نوع و میزان ترکیبات شناسایی شده گیاهان حاصل از بذور تیمار شده به مدت یک هفته در نیتروژن مایع ( 196-) با گیاهان شاهد اندازهگیری شد. نخست سرشاخههای گلدار گیاهان حاصل از هر دو نوع بذر جمعاوری گردید و پس از خشکشدن در محیط ازمایشگاه به روش تقطیر با اب، مورد اسانسگیری قرارگرفت، سپس ترکیبات تشکیلدهنده اسانسها با استفاده از کروماتوگرافی گازی تجزیهای وگازکروماتوگراف متصل به طیفسنججرمی و محاسبه شاخص بازداری، مورد شناسایی قرارگرفت. تعداد 15ترکیب در اسانس سرشاخه S. sahendica قرارگرفته در شرایط فراسرد،شناساییشد. ترکیبهای عمده در این نمونه، پاراسیمن (3/43%)، گاماترپینن (05/21%)، تیمول (3/18%) و کارواکرول (1/5%)بودند. تعداد13 ترکیب در اسانس سرشاخه مرزه S. sahendica شاهد، شناسایی شد، که از میان انها، پاراسیمن (4/29%)، تیمول (3/28%)، گاماترپینن (19%) و کارواکرول (5/14%) اجزای اصلی اسانس بودند. نتایج نشان داد که از لحاظ نوع و درصد ترکیبات موجود در اسانس تفاوت قابل ملاحظهای بین گیاهان شاهد و گیاهان فراسرد وجود نداشت و با استفاده از فناوری فراسرد می توان بذر این گونه ارزشمند ودر حال خطر را برای مدت زمان بسیار طولانی حفظ و از خطر انقراض این گونه منحصربهفرد جلوگیرینمود. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
21 - بررسی اثر استرس گرمایی بر پارامترهای اسپرمی و نسبت جنسی اسپرم های حاوی کروموزوم X یا Y پس از انجماد – ذوب سیمن بز
محسن مصباح محسن فروزانفر شاهین اقبال سعید محمد امین عدالت منشانتخاب جنسیت قبل از لقاح فرآیندی است که طی آن از اسپرمهای تعیین جنسیت شده حاوی کروموزوم X یا Y استفاده میشود تا جنسیت دلخواه در زاده ها تولید شود. اعتقاد بر این است که اسپرمهای حاوی کروموزوم X در مقایسه با اسپرمهای حاوی Y دارای طول عمر بیشتر بوده و در شرایط اسیدی، تغی چکیده کاملانتخاب جنسیت قبل از لقاح فرآیندی است که طی آن از اسپرمهای تعیین جنسیت شده حاوی کروموزوم X یا Y استفاده میشود تا جنسیت دلخواه در زاده ها تولید شود. اعتقاد بر این است که اسپرمهای حاوی کروموزوم X در مقایسه با اسپرمهای حاوی Y دارای طول عمر بیشتر بوده و در شرایط اسیدی، تغییرات دمایی و حتی استرس اکسیداتیو مقاومتر میباشند. هدف از انجام تحقیق حاضر بررسی اثر استرس گرمایی بر پارامترهای اسپرمی و نسبت جنسی اسپرم های حاوی کروموزوم X یا Y پس از انجماد – ذوب سیمن بز بود. سیمن رقیق شده گروه استرس گرمایی، ابتدا به مدت 30 دقیقه در دمای° C 43 قرار داده شد و سپس همانند گروه کنترل منجمد-ذوب شدند. نتایج نشان داد که که استرس گرمایی منجر به کاهش معنیدار پارامتر تحرک کلی اسپرم، زندهمانی و یکپارچگی غشا سلولی اسپرم در مقایسه با گروه کنترل شد. همجنین در گروه استرس گرمایی میانگین نسبت Y به X به میزان 4/94 درصد بود که در مقایسه با میانگین Y به X به میزان 1 مورد انتظار، تفاوت معنیداری ( p< /001) نشان داد. اعمال استرس گرمایی به اسپرم در شرایط آزمایشگاهی میتواند منجر به کاهش معنیدار پارامترهای اسپرمی شود به علاوه کاهش تعداد اسپرمهای حاوی کروموزوم Y در مقایسه با X در جمعیت زنده مانده پس از انجماد-ذوب، میتواند نشاندهنده حساستر و شکنندهتر بودن اسپرمهای حاوی کروموزوم Y در مقایسه با اسپرمهای حاوی X در گونه بز باشند. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
22 - بررسی پایداری فیتوشیمیایی bachtiarica Satureja بعد از حفاظت فراسرد با استفاده از پروتکل کاهش رطوبت
لیلا غفارزاده نمازیچکیده: در سالهای اخیر در کشور ما نیز توجه زیادی به گیاهان دارویی شده است. از آنجا که گونههای مختلف گیاه مرزه بر اثر برداشت بیرویه از عرصههای طبیعی توسط انسان، تنشهای زنده و غیرزنده تهدید شده و کشت کار پیدرپی یک گونه باعث کاهش تنوع ژنتیکی آنها میگردد، حفظ ذخایر ژنت چکیده کاملچکیده: در سالهای اخیر در کشور ما نیز توجه زیادی به گیاهان دارویی شده است. از آنجا که گونههای مختلف گیاه مرزه بر اثر برداشت بیرویه از عرصههای طبیعی توسط انسان، تنشهای زنده و غیرزنده تهدید شده و کشت کار پیدرپی یک گونه باعث کاهش تنوع ژنتیکی آنها میگردد، حفظ ذخایر ژنتیک این گونهها از اهمیت بالایی برخوردار است. تکنیک های ذخیره سازی بذر در دمای بسیار پایین (196- درجه سانتی گراد) با استفاده از نیتروژن مایع که یکی از راه های حفظ ژرم پلاسم با هزینه بسیار پایین و بدون از دست دادن قابلیت زنده مانی می باشد، زمانی مفید خواهد بود که منجر به تغییرات در محتوی اسانس گیاه مورد نظر نگردد. به منظور بررسی پایداری فیتوشیمیایی و مقایسه نوع و مقدار ترکیبات شناسایی شده گیاه bachtiarica Satureja ، بذرها به مدت 1 هفته در نیتروژن مایع در دمای 196- درجه سانتیگراد نگهداری شدند. ساقه چه بذور کشت شده در شرایط درون شیشه ای جمع آوری و در آزمایشگاه خشک شدند. اسانس توسط روش تقطیر با آب جدا شده و ترکیبات با استفاده از GC و GC-MS تجزیه و تحلیل شدند. نتایج نشان داد که 12 عنصر در اسانس گیاهان نگهداری شده در شرایط فراسرد شناسایی شدند و تفاوتی بین اسانسهای استخراج شده از گیاهان حاصل از بذور شاهد و حفاظت فراسرد از لحاظ تعداد، نوع و درصد ترکیبات موجود وجود ندارد. بنابراین این گونه در معرض خطر با تکنیک نگهداری در شرایط فراسرد میتواند برای یک دوره طولانی مدت حفظ شوند. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
23 - Cryopreservation of Ammodendron persicum (Bunge ex Boiss.) Seeds and Evaluation of the Cryogenic Seeds under Various Conditions
Mohebbat Ali Naderi Shahab Maryam Jebelly Ali Ashraf JafariAmmodendron persicum (Bunge & Boiss.)is a desert shrub specie which grows on some sand dunes and sandy areas of South Khorasan and Sistan-va-Baluchestan provinces in east of Iran. Low distribution and narrow ecological range have put this species under threat. In order چکیده کاملAmmodendron persicum (Bunge & Boiss.)is a desert shrub specie which grows on some sand dunes and sandy areas of South Khorasan and Sistan-va-Baluchestan provinces in east of Iran. Low distribution and narrow ecological range have put this species under threat. In order to evaluate the possibility of long-term preservation of A. persicum seeds in cryogenic conditions (-196°C), the seeds of species were collected from its natural habitats and three pre-cryopreservation treatments including PVS2, Desiccation, and 30% Glycerol as well as non-treated (Control) were applied before transferring the seeds into Liquid Nitrogen (LN) or at -196°C. The treated seeds were incubated in LN for a period of 1 week. Subsequently, the cryopreserved seeds were removed from the LN and subjected to post-cryopreservation treatment. Seed germination and establishment were evaluated under laboratory, greenhouse and natural conditions. The laboratory results showed that seeds of the A. persicum species can tolerate cryogenic conditions. The effects of the pre-cryopreservation treatments including Desiccation, 30% Glycerol, and PVS2, and non-treated (Control) one on germination of cryopreserved seeds were significantly different. The non-treated (Control) and Desiccation, respectively showed the best effects on the survival rate (51%) and other attributes of the cryopreserved seeds. The results revealed that the cryopreserved seeds were also able to germinate and establish under greenhouse and desert conditions. In this study, the appropriate seeding depth, the seed sowing time and factors affecting the seed germination as well as establishments under natural conditions were evaluated. The results revealed that cryopreservation approach is the most promising method for long-term preservation of the A. persicum seeds. Long-term seed preservation via cryopreservation is an important approach to prevent this species from loss of genetic diversity and risk of extinction پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
24 - Cryopreservation of Smirnovia iranica (Sabeti) Seeds and Evaluation of Cryopreserved Seeds under Laboratory, Greenhouse and Natural Habitat Conditions
Mohebbat Ali Naderi Shahab Maryam Jebelli Ali Ashraf JafariSmirnovia iranica (Sabeti) synonym: Smirnovia turkestana (Bunge) is a deciduous perennial bushy species of the Fabaceae (Papilionaceae) family. The species grow on sand dunes of desert areas, having a deep vertical root and very long horizontal or lateral roots. They ha چکیده کاملSmirnovia iranica (Sabeti) synonym: Smirnovia turkestana (Bunge) is a deciduous perennial bushy species of the Fabaceae (Papilionaceae) family. The species grow on sand dunes of desert areas, having a deep vertical root and very long horizontal or lateral roots. They have an important role in natural vegetation of desert and sand dune stabilization. Limited growing areas, grazing due to good palatability, and foliage quality of the plant have put this species under threat. Seed preservation under cryogenic conditions at -196ºC is an important approach to conserve seeds for a long period. In this study, seeds of the S. iranica were collected from natural habitats of the plants and three pre-cryopreservation treatments including PVS2, Desiccation, and 30%Glycerol were applied before transferring the seeds into liquid nitrogen (LN) at -196ºC for 1 week, 1 month, and 1 year (in 2015). Subsequently, the seeds were removed from the liquid nitrogen, imposed to heat shock and evaluated under laboratory, greenhouse and natural habitat conditions. The cryopreserved seeds of various cryopreservation periods germinated normally under laboratory and greenhouse conditions. In laboratory conditions, there were no significant differences between periods of seed storage in cryogenic conditions for seed germination trait. The highest seed germination percent (84%) was observed in the desiccation pre-cryopreservation treatment. In pre-cryopreservation treatments as well as cryogenic storage periods under greenhouse conditions, seed germination and seedling establishment were significantly different. In natural habitat, the cryopreserved seeds germinate and grow to normal seedlings and plants. The results showed that S. iranica seeds can be successfully stored in cryogenic conditions for a long period. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
25 - Seed Germination of Lilium ledebourii (Baker) Boiss. after Cryopreservation
Mohammad Reza Mohajeri Abbas Ghamari Zare Mohebat Ali Naderi Shahab Sepideh Kalateh JariAbstract. Seeds or plant organs are usually used as the materials for the long-term cryopreservation. The aim of this study is to investigate the possibility of seed cryopreservation of Lilium ledebourii (Baker) Boiss. as an endemic and endangered species because of gen چکیده کاملAbstract. Seeds or plant organs are usually used as the materials for the long-term cryopreservation. The aim of this study is to investigate the possibility of seed cryopreservation of Lilium ledebourii (Baker) Boiss. as an endemic and endangered species because of genetic erosion. To evaluate seed potentials for the cryopreservation, four treatments including vitrification, 30% glycerol, desiccation and encapsulation-dehydration were applied on seeds before immerging in the liquid nitrogen (-196˚C) for a week. Then, seeds were removed from liquid nitrogen and exposed to heat shock (42˚C water bath), washed with the distilled water and eventually, sown in petri-dishes containing tissue papers. Some criteria including seed germination percent, root and shoot length values, root/shoot length ratio and seed vigor index were recorded and statistically analyzed after four weeks. Data of germination was converted to an arc-sine transformation prior to the analysis of variance. Results showed that germination percentages were 97.50, 97.43, 94.86 and 69.47% for 30%-glycerol, vitrification, desiccation, and encapsulation-dehydration treatments, respectively. They were not significantly different from control seeds (89.33%). On the other hand, other germination attributes of seeds almost showed no significant differences in comparison with control treatment in most treatments. In addition, 30%-glycerol, vitrification and desiccation experienced the highest amounts of germination attributes whereas they showed no significant differences with the control treatment in most qualities. In contrast, the encapsulated seeds showed the lowest amounts in germination indices though they had no significant differences with control treatment (except germination rate). Most of germination attributes of encapsulated seeds were significantly lower than the other cryogenic treatments. Both 30% glycerol and desiccation treatments showed some advantages over vitrification method. However, desiccation was the best treatment because it does not need any chemical substances. It was concluded that the cryopreservation technique is an important approach for the long-term preservation of the seeds of this endangered species. پرونده مقاله -
دسترسی آزاد مقاله
26 - Effect of methylxanthines on motility, membrane integrity and DNA damage of frozen-thawed buffalo spermatozoa
Amin Alizadegan Abdolreza RastegarniaMethylxanthine supplementation has resulted in better seminal characteristics in fresh and cryopreserved spermatozoa. The objective of this study was to determine the effect of methylxanthines such as pentoxifylline, theophylline, and caffeine on the post-thaw quality o چکیده کاملMethylxanthine supplementation has resulted in better seminal characteristics in fresh and cryopreserved spermatozoa. The objective of this study was to determine the effect of methylxanthines such as pentoxifylline, theophylline, and caffeine on the post-thaw quality of buffalo bull spermatozoa. The semen was collected from four mature regular donor buffalo bulls. The ejaculates having more than 80% motility were pooled, split into four aliquots, and then diluted in Tris-citric acid-based extender having different concentrations of pentoxifylline (3.5mM), caffeine(10mM), theophylline(25Mm), and control (without additives). All semen extenders were cooled to 4◦C within 2 hours, equilibrated at 4◦C for four then filled in 0.5 ml French straws and frozen in a programmable cell freezer before plunging into liquid nitrogen. Semen was thawed at 37◦C for 40 seconds after a week of storage inside liquid nitrogen. Of the three additives, only supplementation of pentoxifylline in cryopreservation extender significantly improved total and progressive semen motility relative to that of untreated control (P<0.05). Pentoxifylline also increased plasma membrane integrity and some motion patterns such as curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP), and straight-line velocity (VSL) when compared to theophylline, caffeine, or control (P<0.05). No significant differences were observed for acrosomal integrity and DNA damage of frozen-thawed buffalo spermatozoa in an extender containing methylxanthines. The findings of this study showed that supplementation of methylxanthines such as pentoxifylline in semen cryopreservation extender has more potential to elevate motility and membrane integrity of buffalo frozen-thawed spermatozoa. پرونده مقاله