جداسازی و شناسایی قارچ آسپرژیلوس فلاووس توکسین زا جدا شده از پسته های شهر رفسنجان با بررسی بیان ژن nor-1 دخیل در مسیر بیوسنتز آفلاتوکسین
محورهای موضوعی : میکروب شناسیکلید واژه: آسپرژیلوس فلاووس, ژن nor-1, آفلاتوکسین, پسته,
چکیده مقاله :
آفلاتوکسین ها از متابولیت های ثانویه قارچ ها هستند که فوق العاده سمی و سرطانزا می باشند و می توانند باعث آلودگی مواد غذایی مختلفی همچون خشکبار مانند پسته شوند. از آنجایی که ایران یکی از بزرگترین صادرکنندگان پسته درجهان است و یکی از آلودگی های مهم پسته آفلاتوکسین است، هدف از این تحقیق جداسازی و شناسایی قارچ آسپرژیلوس فلاووس توکسین‌زای جدا شده از پسته‌های شهر رفسنجان با بررسی بیان ژن nor-1 دخیل در مسیر بیوسنتز آفلاتوکسین به روش مولکولی RT-PCR می‌باشد. در این تحقیق به طور تصادفی از 10 خشکبار فروشی در نقاط مختلف شهررفسنجان، نمونه‌های پسته گردآوری و یک مجموعه از 1000 عدد پسته تهیه شد، سپس با تکنیک‌های میکروبی قارچ‌های آنها جداسازی شدند و با بررسی‌های ماکروسکوپی و میکروسکوپی حضور قارچ‌های آسپرژیلوس فلاووس تایید شد. سپس محتویات ژنومی و RNA قارچ‌ها استخراج ، تخلیص و آزمایش RT-PCR جهت بررسی بیان ژن مورد نظر انجام شد. در این تحقیق 42 سویه قارچ آسپرژیلوس فلاووس جدا شده از پسته‌های محصول شهر رفسنجان مورد بررسی قرار گرفت. درنهایت 9 نمونه از 42(4/21%) نمونه‌ی بررسی شده برای ژن nor-1 دارای بیان و به عبارت دیگر توکسین‌زا بودند. آلودگی به آفلاتوکسین در نقاط مختلف دنیا در انواع مواد غذایی و در مقادیر مختلف گزارش شده است که برای سلامت عمومی می‌تواند یک تهدید باشد، پس بکار‌گیری نظارت و روش‌های صحیح نگهداری، توزیع و تشخیص سریع به کمک روش‌های مولکولی، جهت کاهش میزان آلودگی مواد غذایی بخصوص محصولات خشکبار به قارچ‌های مولد آفلاتوکسین ضروری می‌باشد.
Aflatoxins are highly toxic and carcinogenic secondary fungal metabolites and have been detected in various food commodities including pistachio nuts. Since Iran is one of the largest producers of pistachios in the world, the aim of this study is investigation of the expression of nor-1 gene, one of the most essential genes for producing of Aflatoxin, by molecular method in Aspergillus flavus isolated from Rafsanjan’s Pistachio. Randomly, 1000 Pistachios, were collected from 10 dried fruits wholesales in Rafsanjan city. The species of A. flavus were identified morphologically (Macroscopy & Microscopy). In the next step RNA of the A. flavus was extracted. RT-PCR technique was used for amplifying of nor-1 gene. Consequently, 41 Aspergillus flavus species were isolated from pistachioes. Overall, 9 samples (21.4%) were positive for nor-1 gene expression. Aflatoxin contamination in different kinds of foods have been reported in different part of the world. It is a threat for public health, so using surveillance methods, with molecular techniques is necessary to reduction of food contamination specially nuts with toxigenic fungi.
_||_