شناسایی ژنهای blaTEM، blaSHV و blaOXA در جدایههای اشریشیا کلی جمعآوری شده از کلیباسیلوز طیور با استفاده از روشMultiplex-PCR
محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکی
زهره مهرانی فر
1
(
دانش آموخته کارشناسی ارشد، گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران.
)
میترا صالحی
2
(
استادیار گروه میکروب شناسی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.
)
کیومرث امینی
3
(
استادیار گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران.
)
کلید واژه: اشریشیا کلی, Multiplex-PCR, ژنهای بتالاکتاماز وسیع الطیف, کلی باسیلوزیس,
چکیده مقاله :
چکیده مقاومت ضدمیکروبی ایجاد شده به واسطه تولید آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs) در اشریشیا کلی یک تهدید اساسی در کلی باسیلوزیس ماکیان محسوب می شود. مطالعه حاضر به شناسایی ژن های blaTEM، blaSHVو blaOXAدر جدایه های اشریشیا کلی به دست آمده از کلی باسیلوزیس طیور با استفاده از روش MPCR می پردازد. در مجموع، 60 جدایه اشریشیا کلیاز طیور استان کرمان به دست آمد. DNA سلولی با استفاده از کیت DNA-سیناژن (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF) استخراج و PCR چندگانه به منظور شناسایی ژن های OXA،SHVو TEMانجام شد. نتایج تست CDT نشان داد که 45 جدایه (75 درصد) مولد ESBLs بودند. تعداد 19 و 13 جدایه (6/31 درصد و 6/21 درصد) به ترتیب برای ژن هایbla OXA و bla aada مثبت بودند. تعداد 7 جدایه (6/11 درصد) به طور هم زمان ژن های OXA و aada را حمل می کردند. تمام ایزوله ها برای ژن های TEM و SHV منفی بودند. نتایج نشان داد، با اینکه روشدیسکدیفیوژنبرایشناسایی ESBLs روشیبسیارکاربردیو مقرونبهصرفهمی باشد، ولی روش جدید طراحی شده Multiplex-PCR در این مطالعه می تواند به صورت روزمره در آزمایشگاه تشخیصی دامپزشکی برای شناسایی انتروباکتریاسه مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs) به کار رود.
Abstract Antimicrobial resistance exhibited by extended-spectrum b-lactamases (ESBLs) production by E. coli is considered to be a major threat for colibacillosis in poultry. The present study deals with the detection of bla TEM, bla OXA and bla SHV genes in E. coli isolated from colibacillosis by MPCR.A total of 60 strains of E. coli were recovered from the poultry in Kerman, Iran. Cellular DNA was extracted by CinnaPure-DNA (Cell culture, Tissues, Gram negative Bacteria and CSF) and MPCR was performed for the identification of the OXA, SHV and TEM genes.CDT test results showed that 45 strains (75%) were noted for ESBL production. A total of 19 and 13 strains (31.6% and 21.6%) were positive for blaOXA and bla aada, respectively and 7 isolates (11.6%) carried both OXA and aada genes. All isolates were negative for TEM and SHV genes.The results showed, although disk diffusion is a highly practical and cost effective method for identification of ESBLs, but the novel multiplex PCR assay designed in this study may be routinely used in veterinary diagnostic laboratory for identification of extended spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Enterobacteriaceae.
منابع