مقایسه چهار روش مشاهده مستقیم، الایزا، کشت و Nested PCR در بررسی آلودگی شیر مخزن دامداریها به باکتری مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس
محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکی
آریا بدیعی
1
(دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، دانشکده دامپزشکی، گروه علوم بالینی، کرج، ایران)
فرهاد موسی خانی
2
(دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، دانشکده دامپزشکی، گروه پاتوبیولوژی، کرج، ایران)
عباس برین
3
(دانشگاه تهران، دانشکده دامپزشکی، گروه علوم پایه، تهران، ایران)
امیر حمیدی
4
(دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، کرج، ایران)
محسن ظفری
5
(دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، کرج، ایران)
کلید واژه: گاو, الایزا, یون, مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس, Nested-PCR, کشت شیر, مشاهده مستقیم,
چکیده مقاله :
عامل بیماری یون، باکتری مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس است و هر ساله زیان فراوانی در سطح جهانی، از قبیل کاهش تولید، افت شاخص های تولید مثلی و حذف دام مبتلا را متوجه صنعت گاو شیری، می نماید. از دیگر سوی، این باکتری را یک پاتوژن زئونوز می دانند و تحقیقات جدید احتمال می دهند که این باکتری در ایجاد بیماری کرون در انسان، نقش داشته باشد. هدف این مطالعه مقایسه روش های تشخیص آزمایشگاهی الایزا، مشاهده مستقیم، کشت و Nested-PCR در شیر بالک تانک جهت تشخیص آلودگی شیر مخزن گله ها به باکتری مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکولوزیس، می باشد. بدین منظور نمونه گیری از مخزن 100 دامداری صنعتی استان تهران صورت پذیرفت و این نمونه ها با هر چهار روش کشت شیر، مشاهده مستقیم، Nested-PCR و الایزا مورد بررسی قرار گرفتند که تعداد 82 نمونه (82%) در محیط کشت مثبت بوده اند، 94 نمونه(94%)در تستIS900 Nested PCR مثبت بوده اند و 98 نمونه(98%) با الایزا مثبت بوده اند. اما از کل نمونه های تست شده تنها 33 نمونه(33%) در مشاهده مستقیم مثبت بودند. تعداد چهار نمونه وجود داشت که در تست الایزا مثبت بودند ولی در تست PCR منفی شدند. این چهار نمونه به علاوه 12 نمونه دیگر که الایزای آنها مثبت بود، در مجموع 16 نمونه در محیط کشت، رشد باکتری نداشتند. در مجموع نتایج این مطالعه ارجحیّت Nested PCR بر سایر روش های استفاده شده در این تحقیقرا، تأیید می نماید.در ضمن نتایج این مطالعه نشان دهنده میزان بالای آلودگی به این باکتری در دامداری های استان تهران می باشد که نیازمند اقدامات جدی تری است.
Causative agent of Johne’s diseases is Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP) and each year, it hurts dairy cattle industry worldwide by depression of production and reproductive indexes and culling of affected animals. This bacteria is known as a zoonotic pathogen and recent researches explain its probable role in Crohn’s disease in humans. This study compared four laboratory diagnostic tests; including Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA), direct microscopic examination, milk culture and Nested-PCR for diagnosis of herds bulk tank milk infection with MAP bacteria. 100 bulk tank milk samples were obtained from 100 industrial dairy herds of Tehran province. Samples were screened by four tests and 82 samples (82%) detected as positive in culture media, 94 milk samples (94%) were positive by Nested-PCR test and 98 samples were positive in ELISA test results (98%). But direct microscopic examination identified just 33 milk samples as positive. Four positive samples of ELISA test were detected as negative samples by Nested-PCR. These 4 samples in addition to 12 other samples which diagnosed as positive by ELISA, had no growth in culture media (16 samples). These results indicated superiority of Nested-PCR among these four tests for diagnosis of bulk tank milk infection with MAP bacteria. Furthermore, the results represent high prevalence of MAP bacteria in bulk tank milk of dairy herds in Tehran province and it needs more serious eradication efforts.