جداسازی، شناسایی مولکولی، ردیابی ژن magA و ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های کلبسیلا در تلفات جنینی شترمرغ در اصفهان

محورهای موضوعی : میکروبیولوژی

مجید غلامی آهنگران ¹ , امیرحسین آقاخانی لنبانی ² , راضیه فرهنگ اصفهانی ³ , آسیه احمدی ⁴

1 - دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی،شهر کرد،ایران
2 - دانش یار ، گروه علوم درمانگاهی ، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
3 - دانش آموخته دانشکده دامپزشکی،واحد شهرکرد،دانشگاه آزاد اسلامی ،شهرکرد ، ایران
4 - استادیار،گروه صنایع غذایی، واحد اردستان،دانشگاه آزاد اسلامی، اردستان، ایران.

تاریخ دریافت : 1400/10/25 تاریخ پذیرش : 1402/01/22 تاریخ انتشار : 1401/12/01

کلید واژه: شترمرغ, PCR, تلفات جنینی, کلبسیلا,

چکیده مقاله :

تلفات جنینی در شترمرغ می تواند باعث کاهش سودآوری صنعت پرورش شترمرغ شود. عوامل زیادی در کاهش جوجه درآوری نقش دارند. در این میان عوامل عفونی از اهمیت ویژه ای برخوردارند. در بین عوامل عفونی نقش کلبسیلا در تلفات جنینی و به ویژه در شترمرغ کمتر مورد بررسی قرار گرفته است. لذا در مطالعه اخیر 200 نمونه سواب از جنین های تلف شده شترمرغ جمع آوری شد و با روش‌های میکروبیولوژی و بیوشیمیایی به شناسایی موارد آلوده به کلبسیلا پرداخته شد. سپس با روش PCR با پرایمرهای اختصاصی به شناسایی و تعیین گونه کلبسیلا و ژن حدت magA پرداخته شد. نتایج نشان داد از مجموع 200 نمونه سوآب جمع آوری شده 60 مورد آلوده به عوامل عفونی باکتری های گرم منفی (30%) بودند و از مجموع موارد آلوده به باکتری های گرم منفی 20 مورد آلوده به کلبسیلا تشخیص داده شد (33%). از مجموع موارد آلوده به کلبسیلا 15 مورد گونه نومونیا (75%) و 5 مورد گونه اکسی توکا (25%) شناسایی شد. هیچ کدام از سویه های کلبسیلا حامل ژن magA نبودند. در این مطالعه سویه های کلبسیلا بیشترین حساسیت را نسبت به ایمیپنم (100%) و بیشترین مقاومت را نسبت به انروفلوکساسین (70%) نشان دادند. بطور کلی، با توجه به آلودگی جنین های تلف شده به کلبسیلا به نظر می رسد این باکتری سهم 10 درصدی در تلفات جنینی شترمرغ داشته باشد لذا جلوگیری از آلودگی های سطحی و رعایت اصول ضدعفونی در جوجه کشی شترمرغ در کاهش تلفات جنینی ناشی از آلودگی های سطحی و از جمله کلبسیلا نقش عمده ای دارد.

منابع و مأخذ:

1. بهاری چهارده، پ.، جاجوندیان، ر.، راد، م. (1384). جدا سازی برخی از باکتری های ایجاد کننده عفونت کیسه زرده در تعدادی از مرغداری های اطراف شهرستان مشهد.پاتوبیولوژی مقایسه ای، شماره 2 ، پیاپی9، صفحات 125-130.


2. شعبانی ع.ع.، غلامی آهنگران، م.، ممتاز ح. (1396). ردیابی مولکولی اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) و ویروس بیماری نیوکاسل در شترمرغ‌های استان اصفهان.آسیب‌شناسی درمانگاهی دامپزشکی، سال 11، شماره 2، صفحات 97-105.


3. کهن ورز بیجارپس، ز.، ذاکر بستان اباد، س.، تفویضی، ف. (1397). تشخیص مولکولی کلبسیلا نومونیه مقاوم به دارو طبق شناسایی ژن های PER، SHV و VEB در نمونه های جدا شده از بیماران شهر تهران. مجله میکروب شناسی پزشکی ایران، سال 12، شماره 5، 364- 372.


4. رضایی فر، آ.، پیغمبری، س. م.، صدرزاده، ا.، زهرایی صالحی، ت.، عسگری بدوئی؛ م.، حاجی بابایی ، ع. (1388). بررسی وضعیت آلودگی باکتریایی تلفات جوجه کشی های شترمرغ. نشریه میکروب شناسی دامپزشکی گرمسار، سال 5 ، شماره 2 ، 133-129.


5. Agha-Seyed Hosseini, M., Firoozeh, F., Piroozmand, A., and Gilasi, H.R. (2016). Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae strains among clinical specimens in Kashan (2014-2015). Feyz, 20:267-73.


6. Ajayi, A.O., and Egbebi, A.O. (2011). Antibiotic susceptibility of Salmonella typhi and Klebsiella pneumoniae from poultry and local birds in Ado-Ekiti, Ekiti-State, Nigeria. Annals of Biological Research, 2: 431-437.


7. Amer, M.M., ELbayoumi, K.M., Amin Girh, M.S., Mekky, H.M., and Rabie, N.S. (2017). A study on bacterial contamination of dead in shell chicken embryos and culled one day old chicks. International Journal of Pharmaceutical and Phytopharmacological Research, 7: 5-11.


8. Amraie, H., Shakib, P., Rouhi, S., Bakhshandeh, N., & Zamanzad, B. (2014). Prevalence assessment of magA gene and antimicrobial susceptibility of Klebsiella pneumoniae isolated from clinical specimens in Shahrekord, Iran. Iranian Journal of Microbiology, 6:


9. Anderson, M.J., and Janoff, E.N. (1998). Klebsiella endocarditis: report of two cases and review. Clinical Infectious Diseases, 26:468-474


10. Brisse, S.,  and Verhoef, J. (2001). Phylogenetic diversity of Klebsiella pneumoniae and Klebsiella oxytoca clinical isolates revealed by randomly amplified polymorphic DNA, gyrA and parC genes sequencing and automated ribotyping. International Journal of Systemic and Evolutionary Microbiology, 51:915-924.


11. Button, C., Moon, D., and Turner, D. (1994). Increasing the hatchability of ostrich eggs. Australian Ostrich Assocciation Journal, 27:18-23.


12. Chander, Y., Ramakrishnan, M.A., Jindal, N., Hansen, K., and Goyal, S.M. (2011). Differentiation of Klebsiella pneumoniae and Klebsiella oxytoca by multiplex poly-merase chain reaction. International Journal of Applied Research in Veterinary Medicine, 9: 138-142.


13. Dalir, A., Razavi, S., Talebi, M., Masjedian Jazi, F., Zahedi Bialvaei, A., Mirshekar, M., and Lohrasbi, V. (2021). Antibiotic Susceptibility Pattern and Distribution of Virulence Factors Among Klebsiella pneumoniae Isolated from Healthy Volunteers. Iranian Journal of Medical Microbiology, 15: 676-683.


14. Deeming, D.C. (1995). Possible effect of microbial infection on yolk utilization in ostrich chicks. Veterinar Record, 136: 270-271.


15. Dzoma, B.M., and Dorrestein, G.M. (2001). Yolk sac retention in the ostrich (Struthio camelus): histopathologic, anatomic, and physiologic considerations. Journal of Avian Medicine and Surgery, 15: 81-89.


16. El Fertas-Aissani, R., Messai, Y., Alouache, S., & Bakour, R. (2013). Virulence profiles and antibiotic susceptibility patterns of Klebsiella pneumoniae strains isolated from different clinical specimens. Pathologie Biologie, 61:209-216.


17. Fatehi, T., Anvari, M., Ranji, N. (2017). Investigating antibiotic resistance and the frequency of SHV and TEM extended expecterum beta lactamase genes in Klebsiella penumoniea isolated from blood samples of neonates admitted to some health centers in rasht. Iranian Journal of Medical Microbiology, 11: 57-63.


18. Gholami-Ahangaran, M., Moravvej, A.H., Safizadeh, Z., Sadeghi Nogoorani, V., Zokaei, M., Ghasemian, S.O. (2021). The evaluation of ESBL genes and antibiotic resistance rate in Escherichia coli strains isolated from turkey meat and intestinal contents in Isfahan, Iran. Iranian Journal of Veterinary Research, DOI:22099/IJVR.2021.39493.5737.


19. Guo, Y., Zhou, H., Qin, L., Pang, Z., Qin, T., and Ren, H. (2016). Frequency, Antimicrobial Resistance and Genetic Diversity of Klebsiella pneumoniae in Food Samples. PLoS ONE, 11: doi:10.1371/journal. pone. 0153561


20. Hiroi, M., Yamazaki, F., and Harada, T. (2012). Prevalence of extended-spectrum β-lactamaseproducing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in food-producing animals. Journal of Veterinary Medicine Science, 74:189– 95.


21. Hossieni, S. E., Amini, A., Soltanmoradi, H., & Ebrahimzadeh Namvar, A. (2018). Frequency of fimH, magA and rmpA genes among Klebsiella pneumoniae isolates in hospitalized patients in Babol, Iran. Avicenna Journal of Clinical Medicine, 25: 121-6.


22. Husseina, S.A., Hassanb, A.H., and Sulaimanc, R.R. (2008). Bacteriological and pathological study of yolk sac infection in broiler chicks in Sulaimani district. Journal of Dohuk University, 11: 48-56.


23. Khan, K.A., Khan, S.A., Aslam, A., Rabbani, M., and Tipu, M.Y. (2004). Factors contributing to yolk retention in poultry: A review. Pakistan Veterinary Journal, 24: 46-51.


24. Knöbl, T., Cappellete, C.P., and Vigilato, M.A.N. (2012). Enterobacteria isolation in ostrich eggs (Struthio Camelus). Brazilian Journal of Poultry Science14: 33-36. 


25. Lee, S. S. J., Chen, Y. S., Tsai, H. C., Wann, S. R., Lin, H. H., Huang, C. K., & Liu, Y. C. (2008). Predictors of septic metastatic infection and mortality among patients with Klebsiella pneumoniae liver abscess. Clinical Infectious Diseases, 47: 642-650.


26. Nahavandinejad, M., & Asadpour, L. (2017). Mucoviscosity determination and detection of magA and rmpA genes in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae in Northern Iran. Crescent Journal of Medical and Biological Sciences, 4: 104-107.


27. Orajaka, L.J.E., and Mohan, K., (1985). Aerobic Bacterial Flora from Dead-in-Shell Chicken Embryos from Nigeria. Avian Diseases, 29: 583-589.


28. Overdevest, I.T., Willemsen, I., and Rijnsburger, M. (2011). Extended-spectrum b-lactamase genes of Escherichia coli in chicken meat and humans, the Netherlands. Emerging Infectious Diseases, 17:1216–22.


29. Razmyar, J., and Zamani, A.H. (2016). An outbreak of yolk sac infection and dead-in-shell mortality in common canary (Serinus canaria) caused by Klebsiella pneumonia. Iranian Journal of Veterinary Research-Shiraz University, 17: 141-143.


30. Younis, G., Awad, A., El-Gamal, A., and Hosni, R. (2016). Virulence properties and antimicrobial susceptibility profiles of Klebsiella species recovered from clinically diseased broiler chicken. Advance in Animal and Veterinary Science, 4: 536-542.


31. Yu, W. L., Ko, W. C., Cheng, K. C., Lee, H. C., Ke, D. S., Lee, C. C., and Chuang, Y. C. (2006). Association between rmpA and magA genes and clinical syndromes caused by Klebsiella pneumoniae in Taiwan. Clinical Infectious Diseases, 42:1351-1358.


32. Zamani, A., Mashouf, R. Y., Namvar, A. M. E., & Alikhani, M. Y. (2013). Detection of magA Gene in Klebsiella spp. Isolated from clinical samplesdetection of magA. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 16: