شناسایی جدایههای سینوریزوبیوم ملیلوتی متحمل به شوری در یونجههای یکساله و چند ساله
محورهای موضوعی : یافته های نوین کشاورزیمجید دشتی 1 , حسین حیدری شریف آباد 2 , امیر لکزیان 3 , الهه بینش 4
1 - استادیار مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی
2 - استاد موسسه تحقیقات ثبت و گواهی بذر و نهال
3 - استاد دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
4 - کارشناس میکروبیولوژی مؤسسه واکسن و سرم سازی رازی مشهد
کلید واژه: تنش شوری, یونجه, سینوریزوبیوم ملیلوتی, تیرگی رشد,
چکیده مقاله :
به منظور شناسایی و جداسازی باکتریهای سینوریزوبیوم ملیلوتی متحمل به شوری، نمونههای مختلف خاک و گره های ریشه از مناطق مختلف استان خراسان بزرگ به همراه جدایههایی از مؤسسه تحقیقات خاک وآب و یک جدایه استاندارد مورد مطالعه قرار گرفت. تیمارهای شوری با افزودن غلظتهای مختلف کلرید سدیم (صفر ،150، 300، 450، 600و 750 میلیمولار) به محیط کشت اختصاصی اعمال گردید و سپس جدایههای موفق در تست گره زایی، در حرارت 28 درجه سانتی گراد به تیمارهای فوق تلقیح شدند. تیرگی رشد باکتریها در محیط کشت مایع پس از 72 ساعت در طول موج 420 نانومتر با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد. نتایج نشان داد کلیه جدایهها در تیمار شاهد به خوبی رشد نموده و تحت این شرایط شش جدایه دارای تیرگی رشد بیشتر از یک بودند. اختلاف معنیداری در تیرگی رشد 44 جدایه تحت شرایط شوری مشاهده گردید بهطوریکه در غلظتهای بالای600 میلیمولار، رشد باکتریها به شدت تحت تأثیر قرار گرفت و تیرگی رشد تنها هشت جدایه در محیط کشت از 1/0 بیشتر شد. این جدایهها به عنوان متحمل به شوری در نظر گرفته شدند. از بین جدایههای متحمل، جدایه M32با اختلاف معنیداری در سطح 5% برتری نشان داد. هیچیک از جدایه ها در غلظت 750 میلی مولارکلرید سدیم رشد نکردند.
In order to identification and isolation of salt tolerance Sinorhizobium meliloti strains, several soil samples and root nodules were collected from some regions of Khorassan Province and also some strains from Soil & Water Research Institute and one standard strain were studied. After nodulation test, strains was inoculated to Yeast Extract Monitol Broth (YEMB) medium at 28ºC degree centigrade and then exposed to different concentration of NaCl ( 0, 150, 300, 450, 600, 750 mM). Growth turbidity (OD420nm) as an indicator for bacterial growth was measured after for 72 hr. A factorial experiment was arranged in a Completely Randomized Design (CRD) with three replications. Results showed that all strains grew well in control treatment and six strains showed growth turbidity (OD) >1.0. Growth turbidity of 44 strains had high significant differences under salt stress. Salt concentrations greater than 600 mM severely affected the bacteria growth. Only eight strains showed OD>0.1, considered as salt tolerance strains. Amoung which, strain M32 showed significant difference (P<0.05). None grew in a salin solution of 750 mM.
1- دشتی، م. 1375. تأثیر سوشهای سینوریزوبیوم ملیلوتی بر تثبیت ازت و خصوصیات رشد سه گونه یونجه یکساله. پایان نامه کارشناسی ارشد زراعت. دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج.
2- کوچکی، ع.، راشد محصل، م. ح.، نصیری محلاتی، م. و صدرآبادی، ر. 1367. مبانی فیزیولوژیکی رشد و نمو گیاهان زراعی . بنیاد فرهنگی آستان قدس رضوی مشهد.
3- گالشیعلیآبادی،س. ا. ۱۳۶۷.بررسی کارآئی تثبیت ازت باکتری ریزوبیوم ملیلوتی در شرایط شور. پایان نامه کارشناسی ارشد. دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان.
4- Alikhani, H. A. and Saleh Rastin,N. 2002 . Symbioticical characteristics of indigenous Sinorhizobium meliloti strains from some Iranian soils and their variations in the different levels of salinity. 17th WCSS , Thailand .
5- Beck, D. P., Materon, L. A. and Afandi, F. 1993. Practical Rhizobium-legume Technology. Manual No. 19. ICARDA. Syria.
6- Bostford, J. L. 1984. Osmoregulation in Rhizobium meliloti L., Inhibition of growth by salts. Arch. Microbiology. 137:124-127.
7- Dixcon, R. O. D. and wheeler, C. T. 1985. Nitrogen fixation in plants. Chapman and Hall. Landon.
8- Heidari S. A. H. 1994. Variation in sensivity of nodulation and nitrogen faxation to nitrate in annual Medicago species. Department of Plant Science, Waite Agriculture Research Institute, Glen Osmond, South Australia, PHD Thesis.
9- Lakshmi-Kumari, M., singh, C. S. and subba Rao, N. S. 1974. Root hair infection and nodulation of Lucerne as influence by salinity and alkalinity. Plant and Soil. 40:1310-316.
10- Mohammad R. M., Campbell, W. F.and Rumbaugh, M. D. 1989. Variation in salt tolerance of alfalfa. Arid Soil Res. Rehab. 3:11-20.
11- Mohammad R. M. and Campbell, W. F. 1985. The search for salt-tolerant Alfalfa/ Rhizobium. Utah Science. 46:36-37.
12- Mohammad, R. M., M. Akhbavan-Kharazian, W. F. Campbell, and Rambough, M. D. 1991. Identification of salt and drought tolerant Rhizobium meliloti L. strain.Plant and soil. 134:271-276.
13- Singleton, P.W., Elswalfy, S. A. and Bohlool, B. B. 1982. Effect of salinity on Rhizobium growth and survival. Appl. Environ. Microbiology. 44:884-890
14- Singleton, P.W. and Bohlool, B. B. 1984. Effect of salinity on nodule formation by soybean. Plant Physiology.74:72-76.
15- Sprent, J. I. and P. Sprent. 1990. Nitrogen fixing organisms. Chapman and Hall. Landon.
16- Subba Rao, N. S., Johansen C., Kumar Rao J.V. and Jana, M. K. 1990. Response of the pigeon pea-Rhizobium symbiosis on salinity stress variation among Rhizobium strain in symbiotic ability. Biol. Fertil. soil . 9:49-53
17- Vincent, J. M. 1982. Nitrogen fixation in legumes. Academic press. London.
18- Zahran, H. H. 1990. Conditions for successful Rhizobium-legum-symbiosis in saline environment. Biol. Fert. Soils. 12:73-80.