مقایسه کیفیت تخمک‌های حاصل از موش طبیعی و موش القایی سندروم تخمدان پلی کیستیک به دنبال بررسی ژن GDF-9
محورهای موضوعی : زیست شناسی سلولی تکوینی گیاهی و جانوری ، تکوین و تمایز ، زیست شناسی میکروارگانیسم
فاطمه کوشه
1
,
فاطمه قاسمیان
2
1 - گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، خیابان نامجو، رشت، ایران
2 - گروه زیست شناسی-دانشکده علوم پایه- دانشگاه گیلان- رشت- ایران
کلید واژه: بلوغ تخمک, سندروم تخمدان پلی کیستیک, GDF-9, کیفیت تخمک,
چکیده مقاله :
مقدمه: سندروم‌تخمدان‌پلی‌کیستیک (Polycystic ovarian syndrome: PCOS) یکی از شایع‌ترین علل ناباروری است. یکی از روش‌های کمک باروری برای بیماران PCOS استفاده از روش بلوغ آزمایشگاهی (in-vitro maturation: IVM) است. از نشانه‌های کیفیت تخمک بیان مناسب ژنGDF-9 است. این مطالعه به بررسی تفاوت کیفیت تخمک/فولیکول‌های PCOS با تخمک/فولیکول‌های طبیعی در جریان IVM می‌پردازد.مواد و روش‌ها: القاء PCOS در موش‌های نژاد NMRI (تعداد= ۱۰) از طریق تزریق 4 میلی‌گرم‌بر‌کیلوگرم استرادیول والرات حل شده در 2/0 میلی‌گرم روغن کنجد به صورت یک بار در روز و به مدت 60 روز انجام شد. تخمک‌ها و فولیکول‌ها در گروه‌های کنترل و PCOS جمع‌آوری شدند و در محیط MEM-α غنی شده با 10% سرم جنین گاوی به مدت ۴۸-۲۴ ساعت کشت داده شدند. ارزیابی میزان بلوغ آزمایشگاهی و بیان ژن GDF-9 (روشReal-Time PCR ) در گروه‌های مختلف انجام شد. آنالیز آماری با روش ANOVA یک‌طرفه انجام شد.یافته‌ها: در گروه PCOS، کاهش معنی‌داری در تعداد فولیکول‌های اولیه، پری‌آنترال، آنترال و جسم زرد مشاهده شد. همچنین فولیکول‌های کیستیک و فولیکول‌هایی با لایه گرانولوزای دژنره‌شده بالا مشاهده شد. 52٪ تخمک‌ها و 50 % فولیکول‌ها در گروه PCOS بالغ شدند. در گروه کنترل، ۳۳/۸۳ درصد تخمک‌ها و 75 درصد فولیکول‌ها بالغ شدند (P<0.05). بیان ژن GDF-9 در تخمک‌ها و فولیکول‌های طبیعی به ترتیب 08/0±00/1 و 2/0±24/1 (P<0.01) و در تخمک‌ها و فولیکول‌های PCOS به ترتیب 02/0±66/0 و 02/0±37/0 (P<0.001) بود. نتیجه‌گیری: کیفیت تخمک‌ها و به ویژه فولیکول‌های PCOS (بیان ژن GDF-9) به دنبال IVM کاهش یافت. بنابراین، استفاده از تخمک‌های PCOS برای IVM پیشنهاد می شود.
Introduction: Polycystic ovarian syndrome (PCOS) is one of the most common causes of infertility. One of assisted reproductive methods for PCOS patients is using of in-vitro maturation (IVM). Normal GDF-9 gene expression is one of the symptoms of good oocyte quality. This study examines the differences between quality of PCOS oocytes/follicles with normal oocytes/follicles during IVM.Materials and Methods: Induction of PCOS in NMRI mice (n=10) was performed by injection of 4mg/kg estradiol valerate dissolved in 0.2mg sesame oil once daily for 60 days. Oocytes and follicles were collected from control and PCOS groups, and cultured in the MEM-α medium supplemented with 10% FBS for 24-48 hrs. The evaluation of IVM rate and GDF-9 gene expression (Real-Time PCR method) was performed in different groups. Statistical analysis was performed using one-Way ANOVA test.Results: In the PCOS group, a significant decrease was observed in the number of primary follicles, preantral, antral, and corpus luteum. Increased cystic follicles and follicles with degenerated granulosa layer were also observed. 52% and 50% of PCOS oocytes and follicles was matured, respectively. In the control group, 83.33% of oocytes and 75% of follicles matured (P<0.05). GDF-9 gene expression was 1.00±0.08 and 1.24±0.2 in normal oocytes and follicles (P<0.01) and 0.66±0.02 and 0.37±0.02 in PCOS oocytes and follicles, respectively (P<0.001). Conclusion: Quality of PCOS oocytes, and especially, follicles (GDF-9 gene expression) was decreased following IVM. Therefore, using of PCOS oocytes was suggested for IVM
_||_
