Comparative study between microscopic and PCR analysis in a population of piroplasm carrier sheep in five region of khoramabad, Iran

Subject Areas : Large Animal Diseases

Sh  Yavari ¹ (دانش آموخته کارشناسی ارشد انگل شناسی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران)
P.  Shayan ² (مرکز مطالعات کنه و بیماریهای منتقله از آن، گروه انگل شناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران)
S.  Bokai ³ (گروه بهداشت و مواد غذایی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران)
N.  Amini nia ⁴ (مرکز مطالعات کنه و بیماریهای منتقله از آن، گروه انگل شناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران)

Received: 2012-05-23 Accepted : 2012-06-22 Published : 2015-02-20

Keywords: PCR, piroplasm, Theileria, Babesia,

Abstract :

In the present study the rate of Theileria and Babesia spp. infection of sheep housing in Khoramabad, Iran was determined by using PCR technique and traditional giemsa staining method. DNA was extracted from blood samples that collected from 100 sheep from five regions of Khoramabad and amplified by using specific primers derived from 18S rRNA gene of the mentioned piroplasms by PCR technique and subsequently analyzed on agarose gel using ethidium bromide under UV condition. Additionally, the prepared blood smears of each sheep were analyzed by Giemsa staining method. The results showed that structures assembling the mentioned piroplasms were detectable in 15 blood smears. Twelve of them were determined as Theileria spp. and the remaining three as Babesia spp. The PCR results showed that 28 samples were positive. The PCR product specific for Theileria spp. amplified in 22 samples (22%). Babesia spp. were detected in 6 blood samples (6%). The apparent agreement between two tests was 81%. When PCR technique is considered as golden standard method, the sensitivity and specificity of the other method were measured as 42% and 95.8%, respectively.

References:

- توسلی، م. 1377. بررسی سرواپیدمیولوژیک بابزیا اویس در گوسفندان مناطق مختلف اقلیمی ایران با استفاده از تست ایمونوفلورسنت غیرمستقیم (IEAT). پایان‌نامه شماره 69 جهت دریافت دکتری تخصصی انگل‌شناسی، دانشکده دام‌پزشکی دانشگاه تهران.

2- حاج حسین‌لو، م. 1374. بررسی کشتارگاهی بابزیوز گوسفند و بز در شهرستان ارومیه، پایان‌نامه شماره 176، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ارومیه، صفحه 42. 

        3- حاجی کلایی، م. چنگیزی، ع. لطف‌الله‌زاده، ص. مرزبان، ک. 1382. بررسی فراوانی آلودگی به تیلریا در گوسفند و ارتباط متقابل آن با یافته‌های بالینی در کشتارگاه قائم‌شهر. مجله دام‌پزشکی دانشگاه تهران. دوره 58، شماره 2. 

4- صادقی دهکردی، ز. رهبری، ص. ذاکری، ص.1389. بررسی مرفومتریک و بیولوژی مولکولی بابزیای گوسفند در ایران. هفتمین همایش سراسری و دومین کنفرانس منطقه‌ای بیماری‌های انگلی ایران.

5- غیاثی، ف. 1376. تعیین گونه‌های عامل با بابزیوز گوسفندی و چگونگی پراکندگی کنه‌ها در گوسفندان بیمار شهرستان ارومیه. پایان‌نامه شماره 428 دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه.

6- نویدپور، ش. 1375. بررسی آلودگی تیلریای گوسفندان کشتار شده در کشتارگاه اهواز. پژوهش و سازندگی. شماره 31. صفحه 81 – 78. 

7- Aktas, M.K., Dumanli, N., 2005. Development of polymeras chain, reaction method for diagnosis of BabesiaOvis infection in sheep and goat. veterinary parasitology.104:259– 263.

8-Hadadzadeh, H.R., KHazrainia, P., Haidarpour, M .Zaeemi, M., 2010.geographic distribution of different theileria species in sheep in iran. Fourth asian congress of tropical medicine and paracitology 

9- Hadethi, A.H., and Saffar, T.M., 1988. Prevalence of parasitic infection of sheep in norther Irag. Veterinary  parasitology. 2( 2): 93 – 95

10- Karst,A., Munir,A., 2008. Corrigendum to Molecular Detection of Theileria and Babesia in cattle .venrrinary Parasitol. 158 (4) :295 – 301.

11- Shayan, p., and Rahbari, S., 2005. Simultaneous differentiation between Theileria spp. and Babesia on stained blood smear using PCR. parasitology Research. 97 (4): 281 – 6.

12- Theodoropoulos, G., Gazuali, M., Ikonomopoules, J. A., Kantzoura, V., and Kominakis, A., 2006. Determination of prevalence and risk factors of imfection with Babesia in small ruminant from Greece by polymerase Chain reractionamflication. Veterinary  parasitology .135 (2): 99 – 104.