Assessing the levels of CREB after siRNA mediated knockdown in K562 cells

Subject Areas : Journal of Animal Biology

زهرا  دیلمی خیابانی ¹ (1- دانشجوی Ph.D سلولی مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران.)
مهدی  بنان ² (استادیار، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی)
علی محمد  اصغریان ³ (گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن)
جلال  قره سوران ⁴ (عضو هیئت علمی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز)
غلامرضا  جوادی ⁵ (دانشیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم وتحقیقات)
کیمیا  کهریزی ⁶ (دانشیار، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی)
حسین  نجم آبادی ⁷ (استاد، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی)

Received: 2014-06-24 Accepted : 2017-05-21 Published : 2008-11-21

Keywords: Sirna, Protein CREB, HeLa cells,

Abstract :

Background: CREB is an important downstream protein for many signaling pathways. By having efficient siRNAs against CREB, it may be possible to assess the role of molecules involved in signaling pathways in different cell types. In this research the efficiency of CREB knockdown by 2 different siRNAs in HeLa cells has been studied. Materials and methods: HeLa cells were transfected by siRNAs using Lipofectamine 2000. RNA extraction and cDNA synthesis have been done. The efficiency of CREB knockdown has been assessed by quantitative relative real time PCR. According to our results only one of the siRNAs has a high level of inhibitory effect on CREB gene expression in HeLa cells. The expression of CREB by this siRNA was knocked-down by 64.4% in HeLa cells. Conclusion: By using efficient siRNA specifically for knocking down of CREB gene, we can apply this efficient siRNA in different cell types due to study of signaling pathway which CREB may be involved.