بررسی اثر داربست مثانه گوسفند نژاد اهلی بر روی سلولهای بلاستمادر شرایط برون تنی
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستی
نگار صغیری
1
(کارشناس ارشد زیست شناسی تکوین،عضو باشگاه پژوهشگران جوان، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، مشهد. ایران.)
هاشم راستی
2
(دانشجوی دکتری زیست شناسی تکوین جانوری، عضو باشگاه پژوهشگران جوان، دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، مشهد. ایران.)
جواد بهارآرا
3
(- دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، دانشیار، دکتری سلولی تکوینی ، مشهد. ایران.)
ناصر مهدوی شهری
4
(دانشگاه آزاد اسلامی واحد مشهد، دانشکده علوم، استاد سیتولوژی هیستولوژی، گروه زیست شناسی، مشهد. ایران.)
مهدی مرجانی
5
(دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، گروه علوم درمانگاهی، دانشیار دانشکده دامپزشکی، کرج. ایران.)
سید حسن علوی
6
(دانشیار آناتومی، بخش میکروسکوپ الکترونی، پژوهشکده بوعلی،دانشگاه علوم پزشکی مشهد. ایران)
فاطمه علوی
7
(کارشناس ارشد فیزیولوژی، بخش میکروسکوپ الکترونی، آزمایشگاه مرکزی دانشگاه فردوسی مشهد. ایران.)
کلید واژه: سلولزدایی, مثانه, داربست, بلاستما, تمایز,
چکیده مقاله :
مقدمه و هدف:داربستهای زیستی که از ماتریکس خارج سلولی تشکیل شدهاند قابلیت تسهیل تجدید ساختار در تعداد زیادی از بافتها را دارا میباشند. این مطالعه به منظور بررسی اثر القایی داربست مثانه گوسفند نژاد اهلی بر روی سلولهای بافت بلاستما در شرایط برون تنی انجام شد.روش کار:ابتدا مثانه گوسفند با قرارگیری در SDSیک درصد به مدت 24 ساعت همراه با چرخش آرام کاملاً سلولزدایی شد. سپس به منظور تهیه بافت بلاستما با پانچور مخصوص لالههای گوش خرگوش نر نژاد نیوزیلندی پانچ و حلقه بلاستمایی حاصل شد. در ادامه داربست سلولزدایی شده در شرایط استریل در مرکز حلقه بلاستما قرار گرفته و به محیط کشت انتقال داده شد. سپس جهت مطالعات میکروسکوپ نوری از رنگهای هماتوکسیلین ائوزین و پیک اندیگو و آبی تولوئیدین استفاده شد. همچنین نمونههایی از روزهای 15 و 20 برای مطالعه با میکروسکوپ الکترونی گذاره آماده سازی شدیافتهها:رشتههای کلاژن در ماتریکس مثانه بعد از سلولزدایی حفظ شده بودند. در روزهای 15 و 20 کشت بیشترین مهاجرت سلولهای بلاستمایی به داربست مثانه دیده شد. در روز 10 و 15 کشت تعدادی سلول نابالغ در مسیر تمایز به سلولهای فیبروبلاست و آدیپوسیت مشاهده شد. در روز 15 کشت تمایز سلولهای بلاستما به سلولهای پوششی و در روز 20 کشت تمایز آنها به سلولهای فیبروبلاست و آدیپوسیت مشاهده گردید. نتیجه گیری:داربست مثانه قابلیت القای سلولهای بلاستمایی را دارد و باعث میشود سلولهای بلاستمایی علاوه بر مهاجرت به آن به انواعی از سلولها تمایز یابند این رویداد با توجه به آنکه از هیچ عامل رشد و محرک دیگری در محیط کشت استفاده نشده بود حائز اهمیت است.
Introduction and ObjectiveBiological scaffolds, composed of Extra Cellular Matrix (ECM), are capable of facilitating the restructuring of a large number of tissues. The objective of this study was to investigate the effect of ovine bladder scaffold of sheep, domesticated breedon blastema cells in vitroMaterials and Methods: At first, ovine bladder o the sheep was decellularized by putting in 1% wt/vol solution of sodium dodecyl sulfate (SDS) for 24 hours. Then to prepare the blastema tissue, the pinna of New Zealand rabbit was manually punched-hole with a special puncher and a circular blastema was separated. There after, the decellularized samples were put in the middle of blastema ring and were transfered to the culture medium. To continue the study, microscope with lights of hematoxylin and eosin and pick indigo and Toluidine blue staining was used. Some samples on the day 15 and 20 of culture were studied by transitional electron microscope.Results: Collagen fibers were preserved after decellularized in matrix of bladder. Most migration of blastema cells occurred on days 15 and 20 of culture. On the day 10 and 15, some immature cells were differentiation in the pathway of adipocyte and fibroblast. On the day 15th and 20th, more blastema cells were migrated to the ovine scaffold. On the 10th and 15 day immature cell culture was seen to be differentiated from fibroblast and adipocyte cells. On the 15 th day blastema cell culture differentiated from covering cells and on the 20th day from fibroblast and adipocyte cells were seen.Conclusion: Bladder scaffold has ability to induce blastema cells and causes not only blastoma cells’ migration but also to be changed to different cells. This phenomenon is very important because of no growth factor and inducer was used in culture medium.