بررسی بافتی، مولکولی و باکتریایی نمونه های بیماران مبتلا به بیماری های التهابی روده از بیمارستان بقیه الله (عج) تهران
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستینجمه نجف زاده 1 , شهلا محمد گنجی 2 , رضا بهروزی 3 , صدیقه مهرابیان 4
1 - دانشگاه آزاد اسلامی، دانشکده علوم زیستی، گروه میکروبیولوژی، واحد تهران شمال، تهران. ایران.
2 - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران. ایران.
3 - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران. ایران.
4 - دانشگاه آزاد اسلامی، دانشکده علوم زیستی، گروه میکروبیولوژی، واحد تهران شمال، تهران. ایران.
کلید واژه: بیماری التهابی روده, کلی باکتین, ژنpks, E.coli,
چکیده مقاله :
مقدمه و هدف: یکی از علل عفونت های داخل بدن، آلودگی با باکتری E.coliواجد ژن pksاست. این ژن، باعث القا فسفوریلاسیون هیستون H2AXدر انتروسیت های موش می شود. در سلول هایی که در معرض توکسین می باشند، افزایش قابل توجهی در فراوانی جهش در ژن های آن ها دیده می شود. در این تحقیق وجود منطقه ژنی pksدر باکتری E.coliجداشده از بیوپسی بیماران مبتلا به بیماری التهابی روده و افراد نرمال مراجعه کننده به کلینیک گوارش و غدد بیمارستان بقیه الله (عج) مورد بررسی قرار گرفته است.روش کار: مطالعات میکروبیولوژی و مولکولی 20 نمونه بیوپسی افراد سالم و 25 نمونه بیوپسی از بافت روده بزرگ افراد مبتلا به بیماری التهابی روده مورد مطالعه قرار گرفت. پس ازشناسایی باکتری E.coliاز بافت روده با روش های میکروبی و بیوشیمیایی ژنوم باکتری استخراج و به روش Multiplex PCRبرای باکتری مورد نظر از لحاظ داشتن ژن های موجود در منطقه pksاستفاده و محصولPCRبه وسیله الکتروفورز بر روی ژل آگاروز 2% بررسی شد.یافته ها: نتایج مشخص نمود که 28%از باکتری های E.coliجداشده از نمونه های بیماران، دارای منطقه ژنی pksهستند.
Inroduction and Objective:Infection with E.coli Bacterium carrying PKS genes is considered one of the causes for infection inside the body, because the bacteria carrying PKS genes will induce Histone H2AX Phosphorylation in antrocites of mice. A considerable increase in frequency of mutations is seen in cells which are exposed to toxin. Studies indicate that infection can cause the potential for mutation. Therefore, colonization of species of E.coli bacteria carrying PKS genes can cause cancer development in large intestine.Material and Methods: In this research, we examined the existence of genetic island of PKS in E.coli bacteria taken from patients’ biopsies infected with inflammatory intestine disease and normal subjects whom have been to Digestion and Glands Clinic at Baghiatalah Hospital and the contrast between cancerous and healthy tissue was performed using a scanning electron microscope. Therefore, 20 biopsy samples of healthy people and 25 biopsy samples of intestine tissue from people infected with inflammatory intestine disease were examined in terms of microbiology and molecular structure. For this purpose, E.coli bacteria was detected by using the intestine tissue, microbiologic and biochemical approaches, then the their DNAs was extracted, and Multiplex PCR approach was used for the specific designed primers in terms of availability of genes in the PKS island, and the PCR products was examined using Electrophoresis on 2% Agarose Gel.Results:The results have indicated that 28% of the E.coli bacteria taken from patients’ biopsies have genetic area of PKS.