بررسی فراوانی ژن ctpA در باکتری های لیستریا مونوسیتوژنز جدا شده از طیور به روش PCR
محورهای موضوعی : میکروب شناسی غذاییصغرا مقصودی 1 , عباس دوستی 2 , هاشم نیری 3 , محمد چهلگردی 4
1 - کارشناس ارشد، دانشکاه آزاد اسلامی، واحد فلاورجان، گروه میکروب شناسی
2 - استادیار، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد شهرکرد
3 - استادیار، دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان، گروه بیوشیمی
4 - کارشناس، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد
کلید واژه: لیستریا مونوسیتوژنز, واکنش زنجیره ای پلی مراز, طیور, ctpA,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: لیستریا مونوسیتوژنز توانایی ایجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حیوانات را دارد. گوشت و فرآورده های گوشتی نقش بالقوه ای در انتقال لیستریا به انسان دارند و باعث ایجاد بیماری لیستریوز می گردند. هدف از این مطالعه تعیین میزان آلودگی طیور به لیستریا مونوسیتوژنز و بررسی فراوانی ژن ctpA می باشد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی 410 نمونه جمع آوری شده از طیور در شهرکرد شامل 110 نمونه مدفوع و 100 نمونه از هر یک از بافت های کبد، طحال و مغز انجام شد. جداسازی لیستریا مونوسیتوژنز با استفاده از محیط های کشت اختصاصی صورت پذیرفت. آزمایشات PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن های 16S rRNA و ctpA لیستریا مونوسیتوژنز انجام شد. همچنین تمامی 410 نمونه به صورت مستقیم نیز با روش PCR ارزیابی گردیدند. یافته ها: از مجموع نمونه های مورد پژوهش، با روش کشت 20.24 درصد از نظر لیستریا مثبت تشخیص داده شدند. حضور لیستریا با روش کشت در نمونه های مدفوع، کبد، طحال و مغز به ترتیب 36.30%، 19%، 19% و 12% تعیین گردید. اما با استفاده از روش PCR از مجموع 410 نمونه، 25.12 درصد آلوده به لیستریا بودند. همچنین ژن ctpA در 34/95% از لیستریا ها مشاهده شد. نتیجه‌گیری: یافته های ما نشان می دهد که لیستریا مونوسیتوژنز در طیور منطقه مورد مطالعه از فراوانی نسبتاً بالایی برخوردار است. با استفاده از روش PCR امکان شناسایی مستقیم آلودگی لیستریا مونوسیتوژنز در نمونه های تهیه شده از طیور وجود دارد.
Background and Objectives: Listeria monocytogenes is able to cause infections in humans and around 50 species of animals. Meats and their derivatives show a potential role in the transmission of Listeria to humans and epidemy of listeriosis. The aim of this study was to determine the contamination of poultry meats whit L. monocytogenes and to find out the frequency of ctpA gene. Materials and Methods: This cross-sectional study was carried out on 410 samples collected from poultry, including 110 fecal samples and 100 samples from each of liver, spleen and brain samples. Isolation of L. monocytogenes was performed using specific medium. PCR was performed using L. monocytogenes 16S rRNA and ctpA gene specific primers. Also, all of the 410 samples were tested directly using PCR. Results: Totally, 20.24% of the samples were positive for Listeria in culture method. The presence of Listeria in fecal, liver, spleen and brain specimens were 36.30%, 19%, 19% and 12%, respectively. However, based on PCR, 25.12% out of 410 samples were infected to Listeria. Furthermore, ctpA gene was found in 34.95% of Listeria. Conclusion: The results indicate that the frequency of L. monocytogenes in the poultry samples of this region is relatively high. PCR techniques make it possible to determine the L. monocytogenes infection directly in fresh samples.