بررسی همراهی پلی مورفیسم ACVR2A rs1424941 با بیماری پره‌اکلامپسی preeclampsia در بیماران ایرانی
محورهای موضوعی : زیست شناسی سلولی تکوینی گیاهی و جانوری ، تکوین و تمایز ، زیست شناسی میکروارگانیسمعسل هنرپور 1 , احمد مجد 2 * , رضا میرفخرایی 3 , مریم رحیمی 4 , سید حمید جمالدین 5
1 - گروه زیست شناسی ژنتیک،دانشکده علوم زیستی ،دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شمال،تهران،ایران
2 - استادگروه زیست شناسی دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران- شمال
3 - گروه ژنتیک پزشکی،دانشکده پزشکی،دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی،تهران،ایران
4 - مرکز تحقیقات ژنومیک پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آزاد اسلامی تهران، تهران، ایران
5 - گروه زنان وزایمان دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران ، تهران ،ایران
کلید واژه: پره اکلامپسی, ACVR2A, پلی مورفیسم, rs1424941,
چکیده مقاله :
پره‌اکلامپسی یکی از شایع‌ترین بیماری‌های مرتبط با دوران بارداری در انسان است که با فشار خون بالا همراه است، به‌عنوان یکی از دلایل اصلی مرگ و میر جنینی و مادری محسوب می‌گردد.این بیماری در همه نژاد ها رخ می دهد،و فقط مختص دوران بارداری است و پس از زایمان بهبود می‌یابد .در این مطالعه نقش پلی‌مورفیسم rs1424941 ژن ACVR2A را دراستعداد ابتلابه بیماری پره اکلامپسی مورد بررسی قرار گرفت . در ابتدا از400 نمونه خون محیطی افراد مبتلا به بیماری پره اکلامپسی وافراد سالم استخراج DNA انجام شد وجهت تعیین ژنوتیپ از روش TP-ARMS-PCR استفاده شد. نتایج آنالیز همراهی نشان داد که ژنوتیپ هتروزیگوت (A/G) rs1424941 با افزایش خطر پره اکلامپسی همراه بود(.( P=0.04 مطالعه حاضر برای اولین بار همراهی پلی‌مورفیسم ACVR2A rs1424941 با بیماری پره اکلامپسی در جمعیت ایران تایید کرد. با این حال، مطالعات مشابه در قومیت های مختلف برای تایید همراهی rs1424941 با پره اکلامپسی ضروری است.
Preeclampsia is one of the most common diseases associated with pregnancy in humans, which is associated with high blood pressure, and is considered one of the main causes of fetal and maternal mortality. This disease occurs in all races, and is only specific to pregnancy.In this study, we investigated the role of ACVR2A rs1424941 gene polymorphism in preeclamptic patients and controls. DNA extraction was performed on 400 peripheral blood samples of people with preeclampsia and healthy people, TP-ARMS-PCR method was used to determine the genotype of the samples from preeclamptic and normal pregnant women. The results of association analysis indicated that rs1424941 variant, heterozygous AG genotype was associated with increased risk of PE. P=0.04 the present study for the first time confirmed the role of ACVR2A rs1424941 polymorphism in the pathogenesis of PE in Iranian population. However, repeated studies in different ethnicities are necessary to confirm the role of rs1424941 genotype on susceptibility to preeclampsia.
1. Fitzpatrick E, Johnson MP, Dyer TD, Forrest S, Elliott K, Blangero J, et al. Genetic association of the activin A receptor gene (ACVR2A) and pre-eclampsia. Mol Hum Reprod. 2009;15(3):195-204.
2. Brichant JF, Bonhomme V. Preeclampsia: an update. Acta Anaesthesiol Belg. 2014;65(4):137-49.
3. Gholami M, Mirfakhraie R, Pirjani R, Taheripanah R, Bayat S, Daryabari SA, et al. Association study of FOXP3 gene and the risk of 0020 pre-eclampsia. Clin Exp Hypertens. 2018;40(7):613-6.
4. Ankichetty SP, Chin KJ, Chan VW, Sahajanandan R, Tan H, Grewal A, et al. Regional anesthesia in patients with pregnancy induced hypertension. J Anaesthesiol Clin Pharmacol. 2013;29(4):435-44.
5. Abedin Do A, Esmaeilzadeh E, Amin-Beidokhti M, Pirjani R, Gholami M, Mirfakhraie R. ACE gene rs4343 polymorphism elevates the risk of preeclampsia in pregnant women. J Hum Hypertens. 2018;32(12):825-30.
6. Azimi-Nezhad M, Teymoori A, Salmaninejad A, Ebrahimzadeh-Vesal R. Association of MTHFR C677T Polymorphism with Preeclampsia in North East of Iran (Khorasan Province). Fetal and Pediatric Pathology. 2020;39(5):373-80.
7. Ferreira L, Gomes C, Araújo A, Bezerra P, Duggal P, Jeronimo S. Association between ACVR2A and early-onset preeclampsia: replication study in a northeastern Brazilian population. Placenta. 2015;36(2):186-90.
8. Redman CW, Sargent IL. Latest advances in understanding preeclampsia. Science. 2005;308(5728):1592-4.
9. Buurma AJ, Turner RJ, Driessen JH, Mooyaart AL, Schoones JW, Bruijn JA, et al. Genetic variants in pre-eclampsia: a meta-analysis. Hum Reprod Update. 2013;19(3):289-303.
10. Moses EK, Fitzpatrick E, Freed KA, Dyer TD, Forrest S, Elliott K, et al. Objective prioritization of positional candidate genes at a quantitative trait locus for pre-eclampsia on 2q22. Mol Hum Reprod. 2006;12(8):505-12.
11. Yanan F, Rui L, Xiaoying L, Shuang Z, Feng Z, Yingnan W, et al. Association between ACVR2A gene polymorphisms and risk of hypertensive disorders of pregnancy in the northern Chinese population. Placenta. 2020;90:1-8.
12. Glotov AS, Kazakov SV, Vashukova ES, Pakin VS, Danilova MM, Nasykhova YA, et al. Targeted sequencing analysis of ACVR2A gene identifies novel risk variants associated with preeclampsia. J Matern Fetal Neonatal Med. 2019;32(17):2790-6.
13. Thulluru HK, Michel OJ, Oudejans CB, van Dijk M. ACVR2A promoter polymorphism rs1424954 in the Activin-A signaling pathway in trophoblasts. Placenta. 2015;36(4):345-9.
14. Zeybek B, Celik HA, Aydin HH, Askar N. Polymorphisms in the activin A receptor type 2A gene affect the onset time and severity of preeclampsia in the Turkish population. J Perinat Med. 2013;41(4):389-99.
15. Ward LD, Kellis M. HaploReg v4: systematic mining of putative causal variants, cell types, regulators and target genes for human complex traits and disease. Nucleic Acids Res. 2016;44(D1):D877-81.
16. Lokki AI, Klemetti MM, Heino S, Hiltunen L, Heinonen S, Laivuori H. Association of the rs1424954 polymorphism of the ACVR2A gene with the risk of pre-eclampsia is not replicated in a Finnish study population. BMC Res Notes. 2011;4:545.
17. Roten LT, Johnson MP, Forsmo S, Fitzpatrick E, Dyer TD, Brennecke SP, et al. Association between the candidate susceptibility gene ACVR2A on chromosome 2q22 and pre-eclampsia in a large Norwegian population-based study (the HUNT study). European Journal of Human Genetics. 2009;17(2):250-7.
18. Peiris HN, Georgiou H, Lappas M, Kaitu'u-Lino T, Salomón C, Vaswani K, et al. Expression of Myostatin in Intrauterine Growth Restriction and Preeclampsia Complicated Pregnancies and Alterations to Cytokine Production by First-Trimester Placental Explants Following Myostatin Treatment. Reprod Sci. 2015;22(10):1202-11.
19. Wang S, Fang L, Cong L, Chung JPW, Li TC, Chan DYL. Myostatin: a multifunctional role in human female reproduction and fertility – a short review. Reproductive Biology and Endocrinology. 2022;20(1):96.
بررسی همراهی پلی مورفیسم ACVR2A rs1424941 با بیماری پره‌اکلامپسی در بیماران ایرانی.
Association Study of ACVR2A rs1424941 polymorphism with preeclampsia in Iranian patients.
ABSTRACT:
Preeclampsia is one of the most common diseases associated with pregnancy in humans, which is associated with high blood pressure, and is considered one of the main causes of fetal and maternal mortality. This disease occurs in all races, and is only specific to pregnancy.In this study, we investigated the role of ACVR2A rs1424941 gene polymorphism in preeclamptic patients and controls. DNA extraction was performed on 400 peripheral blood samples of people with preeclampsia and healthy people, TP-ARMS-PCR method was used to determine the genotype of the samples from preeclamptic and normal pregnant women. The results of association analysis indicated that rs1424941 variant, heterozygous AG genotype was associated with increased risk of PE. P=0.04 the present study for the first time confirmed the role of ACVR2A rs1424941 polymorphism in the pathogenesis of PE in Iranian population. However, repeated studies in different ethnicities are necessary to confirm the role of rs1424941 genotype on susceptibility to preeclampsia.
Keywords: preeclampsia, ACVR2A, polymorphism,rs1424941
چکیده :
پره‌اکلامپسی یکی از شایع‌ترین بیماری‌های مرتبط با دوران بارداری در انسان است که با فشار خون بالا همراه است، به‌عنوان یکی از دلایل اصلی مرگ و میر جنینی و مادری محسوب می‌گردد.این بیماری در همه نژاد ها رخ می دهد،و فقط مختص دوران بارداری است و پس از زایمان بهبود می‌یابد .در این مطالعه نقش پلی‌مورفیسم rs1424941 ژن ACVR2A را دراستعداد ابتلابه بیماری پره اکلامپسی مورد بررسی قرار گرفت . در ابتدا از400 نمونه خون محیطی افراد مبتلا به بیماری پره اکلامپسی وافراد سالم استخراج DNA انجام شد وجهت تعیین ژنوتیپ از روش TP-ARMS-PCR استفاده شد. نتایج آنالیز همراهی نشان داد که ژنوتیپ هتروزیگوت (A/G) rs1424941 با افزایش خطر پره اکلامپسی همراه بود(.( P=0.04 مطالعه حاضر برای اولین بار همراهی پلی‌مورفیسم ACVR2A rs1424941 با بیماری پره اکلامپسی در جمعیت ایران تایید کرد. با این حال، مطالعات مشابه در قومیت های مختلف برای تایید همراهی rs1424941 با پره اکلامپسی ضروری است.
کلیدواژه‌ها : پره اکلامپسی، ACVR2A، پلی مورفیسم، rs1424941
مقدمه :
پره اکلامپسی (PE) یک اختلال شایع بارداری در انسان است. یک بیماری چند عاملی است که تحت تأثیر عوامل پیچیده محیطی و ژنتیکی قرار می گیرد(1). به طور کلی می توان آن را فشار خون بالا (فشار خون سیستولیک/دیاستولیک ≥ 140/90) و پروتئینوری نوظهور (بیش از 300 میلی گرم در 24 ساعت) پس از 20 هفته بارداری تعریف کرد(2-5) PE یک عارضه تهدید کننده زندگی است که با افزایش میزان مرگ و میر جنین و مادر در سراسر جهان مرتبط است(1, 6, 7).این بیماری در همه نژادهای رخ می دهد و در حدود 5 درصد از بارداری ها را شامل می شود(8). پره اکلامپسی بر اساس شدت به گروه های زیر درجه بندی می شود: پره اکلامپسی شدید ، پره اکلامپسی خفیف و اکلامپسی (2, 4). علائم بالینی در سه ماهه دوم بارداری ظاهر می شود (9). تجزیه و تحلیل گسترده ژنومی شجره نامه های پره اکلامپسی، چندین جایگاه مادری را روی کروموزوم 2 به عنوان ژن های کاندید نشان داده است(10) که مهم ترین آنها ژن گیرنده اکتیوین A نوع 2 (ACVR2A) است(10).
ACVR2A گیرنده اکتیوین A نوع 2 را رمز می کند و واسطه عملکرد اینهیبین A، اکتیوین A، اکتیوین B و میوستاتین است. به عنوان یک ژن کاندید احتمالی، ACVR2A یک پروتئین سیگنال دهنده سلولی است که به عنوان یک تنظیم کننده مهم عملکرد تولید مثل شناخته می شود (1, 11). اکتیوین A متعلق به ابرخانواده TGF-b است که یک شاخص بیولوژیکی شناخته شده PE است. سطح بالای اکتیوین A در سرم زنان پره اکلامپسی ثابت شده است (12). ACVR2A از طریق تأثیر آن بر دسیدوالیزاسیون، تهاجم تروفوبلاست و جفت در ایجاد بارداری ایفای نقش دارد(13). اولین شواهد در مورد ارتباط بین پلی مورفیسم های ACVR2A و PE توسط Moses و همکاران گزارش شد که ارتباط قوی با rs1424954 نشان دادند(10). از آن زمان، چندین مطالعه در جمعیت های مختلف انجام شده است که در آنها نتایج متناقضی به دست آمده است(7, 11, 14) بنابراین، در این مطالعه ارتباط واریانت ACVR2A rs1424941 را با PE در بیماران ایرانی مورد بررسی قرار گرفت. این اولین مطالعه ای است که نقش پلی مورفیسم ACVR2A در پاتوژنز PE در جمعیت ایران مورد بررسی قرار داد.
مواد و روش ها:
نمونه ها:
تعداد 400 زن باردار شامل 200 زن سالم (به عنوان گروه شاهد) و 200 بیمار پره اکلامپسی (به عنوان گروه مورد) در این مطالعه مورد-شاهدی شرکت کردند. از هر فرد نمونه خون محیطی به منظور تعیین ژنوتیپ گرفته شد . تمامی شرکت کنندگان از بیمارستان اکبر آبادی تهران جمع اوری شدند. بیماران PE فشار خون سیستولیک/دیاستولیک در حالت استراحت 90/140≥ همراه با پروتئینوری بعد از هفته 20 بارداری داشتند .افراد سالم هیچ سابقه PE خانوادگی نداشتند. افراد دارای سابقه فامیلی فشار خون بالا، بیماران کلیوی از این مطالعه کنار گذاشته شدند. این مطالعه مورد تایید کمیته اخلاق دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (IR.SBMU.MSP.REC.1401.166) قرار گرفت. همه افراد شرکت کننده در این مطالعه قبل از هر آزمایشی رضایت نامه کتبی آگاهانه را امضا کردند.
استخراج DNA وتعیین ژنوتیپ :
DNA با استفاده از کیت استخراج DNA ژنومی شرکت انا سل AnaCell) ، ایران (از نمونه های خون محیطی استخراج شد و در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شد TP-ARMS-PCR. برای تعیین ژنوتیپ ژن ACVR2A پلی مورفیسم rs1424941 استفاده شد. پرایمرها با استفاده از نرم افزار آنلاین Primer1 (http://primer1.soton.ac.uk/primer) طراحی شدند. توالی پرایمرها برای تعیین ژنوتیپ پلی مورفیسم ACVR2 rs1424941 در جدول 1 ارائه شده است.
برای پلی‌مورفیسم rs1424941، مخلوط واکنش 20 میکرولیتری PCR شامل 1 میکرولیتر نمونه DNA (100≥ نانوگرم)، 5/1 میکرولیتر از هر پرایمر (10Pmol) ، 12 میکرولیتر مستر میکس شرکت امپلیکونTaq DNA
Polymerase 2X Master Mix RED (amplicon,korea)، و 1μL آب تزریقی استفاده شد و PCR در دستگاه ترموسایکلر Eppendorf) ،Germany) انجام شد. برنامه ترموسایکلر شامل 1 چرخه دمای 95 درجه سانتی‌گراد به‌مدت 5 دقیقه، 32 چرخه شامل، دناتوراسیون در دمای 95 درجه سانتی‌گراد برای 30 ثانیه، اتصال در دمای 60 درجه سانتی‌گراد به مدت 50 ثانیه و گسترش در 72 درجه سانتی گراد برای 50 ثانیه و برای مرحله نهایی گسترش، واکنش‌های PCR در دمای 72 درجه سانتی‌گراد به مدت 10 دقیقه دیگر انکوبه شدند. محصولات PCRروی ژل آگارز 2 درصد حاوی رنگ Gel Green Stain،( (Iran,AnaCell در بافرX 5/0Tris/borate/EDTA (TBE) جدا شدند. تعدادی از نمونه‌ها به‌طور تصادفی انتخاب و با استفاده از دستگاه آنالایزر ABI 3730xl با توالی‌یابی سنگر تعیین توالی شدند. نتایج توالی یابی به دست آمده با استفاده از نرم افزار Chromas نسخه 2.6.6 تجزیه و تحلیل شد.
تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک :تجزیه و تحلیل عملکردی in silico با استفاده از RegulomeDB (http://www.regulomedb.org/)، مرورگر ژنوم Ensembl (https://www.ensembl.org/)، و HaploReg (https://pubs.broadinstitute.org/) انجام شد.
تحلیل آماری :
انحراف از تعادل هاردی واینبرگ (HWE) با استفاده از آزمون مربع کای در نرم افزار آنلاین SNPStats (https://www.snpstats.net/) ارزیابی شد. فراوانی آللی و ژنوتیپی نیز با استفاده از همین نرم افزار محاسبه شد. ارتباط بین ژنوتیپ های ACVR2 rs1424941 و PE با استفاده از نرم افزار آنلاین MedCalc نسخه 20.100 (https://www.medcalc.org/) تعیین شد. قدرت ارتباط بین پلی مورفیسم انتخابی و خطر PE با نسبت شانس (OR) و فاصله اطمینان 95٪ (CI) محاسبه شد. مقدار p<0.05 از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته شد.
نتایج:
اطلاعات دموگرافیک و بالینی بیماران PE و افراد کنترل در جدول 2 ارائه شده است. همانطور که انتظار می رفت، مقادیر فشار خون سیستولیک و دیاستولیک در بیماران PE در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل توجهی بالاتر بود (0001/0 > P). شاخص توده بدنی (BMI) نیز در بیماران مبتلا به PE به طور قابل توجهی بالاتر از زنان باردار سالم بود (0001/0 > P). علاوه بر این، وزن جنین هنگام تولد و سن حاملگی در هنگام زایمان در بیماران در مقایسه با افراد کنترل کمتر بود (0001/0 > P). فراوانی ژنوتیپ برای rs1424941 در جدول 3 ارائه شده است.
نتایج حاصل، ارتباط معنی داری بین ژنوتیپ هتروزیگوت (A/G) وخطرابتلا به بیماری PE در نمونه های مورد مطالعه نشان داد. (OR=1.57 (1.02-2.04، p-value 0.04؛ شکل 1 الگوی الکتروفورز ژل و تعیین توالی ها را نشان می‌دهد که بیانگر ژنوتیپ‌های مختلف rs1424941 است. تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک نشان داد که rs1424941 در جایگاه اتصال فاکتور رونویسی قرار دارد. ،طبق سایت HaploReg rs1424941 یک نوع واریانت اینترونیک است و میل ترکیبی فاکتور رونویسی ZEB1 به موتیف آن در توالی ACVR2A را تقریباً 21 برابر تغییر می دهد(15).
بحث:
در مطالعه حاضر، ما ارتباط بین پلی‌مورفیسم ، rs1424941 ACVR2A و خطر ابتلا به PE را در نمونه‌ای از بیماران ایرانی بررسی کردیم. نتایج نشان داد که ژنوتیپ هتروزیگوت(A/G) rs1424954 با خطر PE مرتبط می باشد. مطالعات متعددی نقش پلی‌مورفیسم ژنوتیپ مادری ACVR2A را در پاتوژنز PE بررسی کرده‌اند، اگرچه نتایج متناقضی گزارش شده‌اند(1, 7, 10, 11, 13, 16). Moses و همکارانش اولین کسانی بودند که با استفاده از تکنیک اسکن ژنومی، کروموزوم 2 را کاندید برای بیماری پره اکلمپسی کردند و با توجه به آنالیزهای بیوانفورماتیک که روی این کروموزوم انجام دادند بیشترین اولویت را به ژن ACVR2A اختصاص دادند (10). ACVR2A rs1424941 یک واریانت اینترونیک است و مانند مطالعه حاضر ارتباط آن با PE قبلا در جمعیت نروژی گزارش شده بود(17). با این حال، این ارتباط در چندین جمعیت، از جمله استرالیا/نیوزیلند و شمال شرقی برزیل مشاهده نشد(1, 7). آللrs1424941 به‌عنوان یک نوع واریانت اینترونیک، میل فاکتور رونویسی ZEB1 را برای اتصال به موتیف آن در توالی ACVR2A تغییر می‌دهد. جالب‌توجه است که کاهش فاکتور رونویسی ZEB1 نقش مهمی در تهاجم تروفوبلاست و پاتوژنز PE ایفا می‌کند. راه دیگری که پلی‌مورفیسم‌های ACVR2A ممکن است به پاتوژنز PE کمک کنند، اتصال به میوستاتین، عضو دیگر از ابر خانواده TGF-β، به‌عنوان گیرنده آن است. پیشنهاد می‌شود که میوستاتین نقش مهمی در پاتوژنز اختلالات مرتبط با تولیدمثل ازجمله PE ایفا می‌کند، اگرچه مکانیسم دقیق آن به‌طور کامل شناخته‌نشده است(18). Peiris و همکاران نشان دادند که بیان میوستاتین در زنانی که حاملگی آنها با محدودیت رشد داخل رحمی (IUGR) و PE بیشتر است (18). پیشنهاد می‌شود که تغییر بیان ACVR2A به دلیل واریانت عملکردی آن ممکن است بر عملکرد میوستاتین تأثیر بگذارد و به پاتوژنز PE کمک کند(19). بااین‌حال، مطالعات بیشتری برای تعریف کامل رابطه بین ACVR2A، میوستاتین و ایجادPE موردنیاز است. در این مطالعه، ما نشان دادیم که ژنوتیپ (A/G) rs1424941 با خطر PE در نمونه‌های موردمطالعه ما در ارتباط است. بطور کلی، درک نحوه عملکرد ژن‌ها بینش جدیدی در مورد علت ناشناخته پره اکلمپسی ارائه می‌دهد. درنتیجه درمان‌های جدید ممکن است از درک بهتر از پاتوژنز پره اکلمپسی حاصل شود؛ و خطر این بیماری را کاهش دهد.
Reference:
1. Fitzpatrick E, Johnson MP, Dyer TD, Forrest S, Elliott K, Blangero J, et al. Genetic association of the activin A receptor gene (ACVR2A) and pre-eclampsia. Mol Hum Reprod. 2009;15(3):195-204.
2. Brichant JF, Bonhomme V. Preeclampsia: an update. Acta Anaesthesiol Belg. 2014;65(4):137-49.
3. Gholami M, Mirfakhraie R, Pirjani R, Taheripanah R, Bayat S, Daryabari SA, et al. Association study of FOXP3 gene and the risk of 0020 pre-eclampsia. Clin Exp Hypertens. 2018;40(7):613-6.
4. Ankichetty SP, Chin KJ, Chan VW, Sahajanandan R, Tan H, Grewal A, et al. Regional anesthesia in patients with pregnancy induced hypertension. J Anaesthesiol Clin Pharmacol. 2013;29(4):435-44.
5. Abedin Do A, Esmaeilzadeh E, Amin-Beidokhti M, Pirjani R, Gholami M, Mirfakhraie R. ACE gene rs4343 polymorphism elevates the risk of preeclampsia in pregnant women. J Hum Hypertens. 2018;32(12):825-30.
6. Azimi-Nezhad M, Teymoori A, Salmaninejad A, Ebrahimzadeh-Vesal R. Association of MTHFR C677T Polymorphism with Preeclampsia in North East of Iran (Khorasan Province). Fetal and Pediatric Pathology. 2020;39(5):373-80.
7. Ferreira L, Gomes C, Araújo A, Bezerra P, Duggal P, Jeronimo S. Association between ACVR2A and early-onset preeclampsia: replication study in a northeastern Brazilian population. Placenta. 2015;36(2):186-90.
8. Redman CW, Sargent IL. Latest advances in understanding preeclampsia. Science. 2005;308(5728):1592-4.
9. Buurma AJ, Turner RJ, Driessen JH, Mooyaart AL, Schoones JW, Bruijn JA, et al. Genetic variants in pre-eclampsia: a meta-analysis. Hum Reprod Update. 2013;19(3):289-303.
10. Moses EK, Fitzpatrick E, Freed KA, Dyer TD, Forrest S, Elliott K, et al. Objective prioritization of positional candidate genes at a quantitative trait locus for pre-eclampsia on 2q22. Mol Hum Reprod. 2006;12(8):505-12.
11. Yanan F, Rui L, Xiaoying L, Shuang Z, Feng Z, Yingnan W, et al. Association between ACVR2A gene polymorphisms and risk of hypertensive disorders of pregnancy in the northern Chinese population. Placenta. 2020;90:1-8.
12. Glotov AS, Kazakov SV, Vashukova ES, Pakin VS, Danilova MM, Nasykhova YA, et al. Targeted sequencing analysis of ACVR2A gene identifies novel risk variants associated with preeclampsia. J Matern Fetal Neonatal Med. 2019;32(17):2790-6.
13. Thulluru HK, Michel OJ, Oudejans CB, van Dijk M. ACVR2A promoter polymorphism rs1424954 in the Activin-A signaling pathway in trophoblasts. Placenta. 2015;36(4):345-9.
14. Zeybek B, Celik HA, Aydin HH, Askar N. Polymorphisms in the activin A receptor type 2A gene affect the onset time and severity of preeclampsia in the Turkish population. J Perinat Med. 2013;41(4):389-99.
15. Ward LD, Kellis M. HaploReg v4: systematic mining of putative causal variants, cell types, regulators and target genes for human complex traits and disease. Nucleic Acids Res. 2016;44(D1):D877-81.
16. Lokki AI, Klemetti MM, Heino S, Hiltunen L, Heinonen S, Laivuori H. Association of the rs1424954 polymorphism of the ACVR2A gene with the risk of pre-eclampsia is not replicated in a Finnish study population. BMC Res Notes. 2011;4:545.
17. Roten LT, Johnson MP, Forsmo S, Fitzpatrick E, Dyer TD, Brennecke SP, et al. Association between the candidate susceptibility gene ACVR2A on chromosome 2q22 and pre-eclampsia in a large Norwegian population-based study (the HUNT study). European Journal of Human Genetics. 2009;17(2):250-7.
18. Peiris HN, Georgiou H, Lappas M, Kaitu'u-Lino T, Salomón C, Vaswani K, et al. Expression of Myostatin in Intrauterine Growth Restriction and Preeclampsia Complicated Pregnancies and Alterations to Cytokine Production by First-Trimester Placental Explants Following Myostatin Treatment. Reprod Sci. 2015;22(10):1202-11.
19. Wang S, Fang L, Cong L, Chung JPW, Li TC, Chan DYL. Myostatin: a multifunctional role in human female reproduction and fertility – a short review. Reproductive Biology and Endocrinology. 2022;20(1):96.
جدول 1: توالی های پرایمر مورد استفاده شده برای ژنوتیپ rs1424941:
پلی مرفیسم | پرایمر | توالی پرایمر | سایز |
rs1424941 | FI | TGGTTGGTTTTTTAATTGTGCTAAAA | 199 (A allele) |
RI | GTTACATTGTGAAGATCATAGTATGTCCC | 295 (G allele) | |
FO | TATGAATGTTTTAAAATCACAAAGCACA |
439
| |
RO | GTAGAGGTTTCCTGAGGGAATAGATAAA |
جدول شماره 2: اطلاعات دموگرافی بیماران و گروه کنترل:
| بیمار N=200 | کنترل N=200 | P-value |
شاخص توده بدنی | 32.18 ± 5.171 32.02 | 28.21 ± 4.343 | <0.0001 |
فشار خون سیستولیک | 152.2 ± 14.03 | 110.3 ± 7.769 | <0.0001 |
فشار خون دیاستولیک | 96.50 ± 8.796 | 73.07 ± 7.286 | <0.0001 |
سن ازدواج | 36.01 ± 3.005 | 38.83 ± 1.018 | <0.0001 |
وزن جنین | 2.842 ± 1.280 | 3.293 ± 0.4429 | <0.0001 |
جدول شماره 3 بررسی همراهی آلل وژنوتایپ ژن ACVR2A rs1424941:
rs1424941 | |||||
مدل | آلل /ژنوتایپ | بیمار | کنترل | OR (95% CI) | P-value |
| G/G | 117 (58.5%) | 133 (66.5%) | 1 |
|
G/A | 73 (36.5%) | 53 (26.5%) | 1.57 (1.02-2.04) | 0.04* | |
A/A | 10 (5%) | 14 (7%) | 0.81 (0.35-1.90) | 0.63 | |
غالب | G/G A/G-A/A | 117 (58.5%) | 133 (66.5%) | 1 | 0.099 |
83 (41.5%) | 67 (33.5%) | 1.41 (0.94-2.11) | |||
مغلوب | G/G-A/G A/A | 190 (95%) | 186 (93%) | 1 | 0.4 |
10 (5%) | 14 (7%) | 0.70 (0.30-1.61) | |||
فوق غالب | G/G-A/A A/G | 127 (63.5%) | 147 (73.5%) | 1 | 0.031* |
73 (36.5%) | 53 (26.5%) | 1.59 (1.04-2.44) | |||
آلل | G | 307 (76.75%) | 319 (79.75%) | 1 | 0.30 |
A | 93 (23.25%) | 81 (20.25) | 1.19 (0.85-1.67) | ||
موارد معنی‌دار با علامت ستاره مشخص‌شده است.
تصویر1 :نتایج الکتروفورز ژل اگاروز 2% و تعیین توالی های rs1424941 را نشان می‌دهد
