بررسی فراوانی آلودگی به تیلریا، بابزیا و آناپلاسما در گاوهای استان البرز به روش‌های میکروسکوپی وPCR

محورهای موضوعی : پاتوبیولوژی مقایسه ای

محمد عبدلی ^{1 *} , لیدا عبدالمحمدی خیاو ²

1 - بخش تحقیق و تولید واکسن‌های باکتریایی بی‌هوازی، آزمایشگاه تحقیقاتی کلستریدیا، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان ترویج
2 - بخش تحقیق و تولید واکسن‌های باکتریایی بی‌هوازی، آزمایشگاه تحقیقاتی کلستریدیا، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان ترویج آموزش توسعه کشاورزی، تهران، ایران

تاریخ دریافت : 1400/08/12 تاریخ پذیرش : 1400/08/12 تاریخ انتشار : 1399/10/01

کلید واژه: استان البرز, آناپلاسما, بابزیا, گاو, تیلریا آنولاتا,

چکیده مقاله :

آناپلاسموز، بابزیوز و تیلریوز از بیماری های انگلی می باشند که می توانند خسارات قابل توجهی به صنعت دامپروری وارد نمایند. علیرغم اهمیت بیماریزایی تیلریوز، بابزیوز و آناپلاسموز در جمعیت دام های بزرگ، در ایران عمدتا بررسی ها در نشخوارکنندگان کوچک صورت گرفته است. لذا هدف از این مطالعه تشخیص فراوانی آلودگی به تیلریا، بابزیا و آناپلاسما در گاوهای استان البرز به روش های میکروسکوپی وPCR (Polymerase chain reaction) بود. بدین منظور از مجموع ۱۳۰ راس گاو خونگیری نموده و به روش گیمسا رنگ آمیزی شد. نمونه های اسمیر مثبت برای تشخیص مولکولی وارد بررسی شدند. از نمونه های خون استخراج DNA با روش فنل - کلروفرم صورت گرفت و آزمون مولکولی توسط پرایمرهای 18S rRNA، 16S rRNA و TamS جهت تشخیص جنس و گونه انجام شد. نتایج این مطالعه فراوانی فرم پیروپلاسمی توسط میکروسکوپ نوری را در ۲۳/۹% از موارد نشان داد. یافته های آزمون PCR 18S rRNA در ۳۸/۵% تائید کننده عفونت با تیلریا و بابزیا بود. همچنین نتایج آزمون PCR ژن Tams1 در همه این موارد نشان دهنده عفونت با تیلریا آنولاتا بود. در PCR 16S rRNA در ۸۵/۳% نمونه ها آناپلاسما تشخیص داد شد. در هیچ موردی آلودگی به بابزیا مشاهد نشد. با توجه به موارد آلودگی با تیلریا آنولاتا و بابزیای گوسفندی و اهمیت برخی گونه های بابزیا اهمیت مطالعات بیشتر برای ارزیابی این بیماری ها در راستای بهبود صنعت دامپروری ضروری به نظر می رسد.

چکیده انگلیسی:

Anaplasmosis, babesiosis and theileriosis is parasitic diseases that can cause significant damage to the livestock industry. Despite the importance of the pathogenicity of theileriosis, babesiosis and anaplasmosis in large animal populations, in Iran, studies have been performed mainly on small ruminants. So, the aim of this study was to the diagnosis of the frequency of Theileria, Babesia and Annapalsma infections from cattle in Alborz province using microscopic examination and PCR (Polymerase Chain Reaction). For this purpose, out of 130 dairy cattle were taken blood samples and stained with Giemsa dye. Positive smear samples were incorporated for molecular detection. DNA was extracted from blood samples with phenol-chloroform and performed PCR using 18S rRNA, 16S rRNA and TamS primers to identify of the genus and species. The results of this study showed that frequency of piroplasmic form was observed in 9.23% of cases. The 18S rRNA PCR findings revealed 5.38%, were confirmed infection with Theileria and Babesia. Also, Tams1 PCR results were indicated Theileria anulata infection in all cases. 16S rRNA PCR was detected in 3.85% for Anaplasma. No case of Babesia was observed. Considering the cases of infection with T. anulata and Babesia and the importance of some species of Babesia, the importance of further studies to evaluate these diseases in order to improve the livestock industry seems necessary.

منابع و مأخذ:

1. Kalani H, Fakhar M, Pagheh A. An overview on present situation babesiosis and theileriosis and their distribution of ticks in Iran. Iranian Journal of Medical Microbiology. 2012;5(4):59-71.


2. vosughi H, Goudarzi R. Prevalence of bovine theileriosis in Boroujerd city. Veterinary Histobiology 2013;1(2):65-9.


3. Noaman V. A review of anaplasmosis and the prevalence of Anaplasma marginale in cattle in Iran and the world. Veterinary Journal (Pajouhesh & Sazandegi). 2017; 116: 2-15.


4. Noaman V, Nabinejad A, Shahmoradi A, Esmaeilkhanian S. Molecular detection of bovine leukocytic Anaplasma species in Isfahan, Iran. Research in Molecular Medicine. 2016;4(2):47-51.


5. Jampour M, Tehrani Sharif M, Alavi S, Abil M. Determination of the prevalence rate of cutaneous theileriosis in infected cattle with theileriosis in Garmsar, Iran. The 15th Iranian Veterinary Congress; Tehran, Iran.2008.


6. Dehkordi FS, Parsaei P, Saberian S, Moshkelani S, Hajshafiei P, Hoseini S, et al. Prevalence study of T. annulata by comparison of four diagnostic techniques in Southwest Iran. Bulgarian Journal of Veterinary Medicine. 2012;15(2);123-130.


7. Razmi G, Pourhosseini M, Yaghfouri S, Rashidi A, Seidabadi M. Molecular detection of Theileria spp. and Babesia spp. in sheep and ixodid ticks from the northeast of Iran. The Journal of parasitology. 2013;99(1):77-81.


8. Almería S, Castella J, Ferrer D, Ortuno A, Estrada-Peña A, Gutierrez J. Bovinepiroplasms in Minorca (Balearic Islands, Spain): a comparison of PCR-based and light microscopy detection. Veterinary Parasitology. 2001;99(3):249-59.

9. Böse R, Jacobson R, Gale K, Waltisbuhl D, Wright I. An improved ELISA for the detection of antibodies againstBabesia bovis using either a native or a recombinantB. bovis antigen. Parasitology research. 1990;76(8):648-52.


10. Silva MG, Henriques G, Sanchez C, Marques PX, Suarez CE, Oliva A. First survey for Babesia bovis and Babesia bigemina infection in cattle from Central and Southern regions of Portugal using serological and DNA detection methods. Veterinary parasitology. 2009;166(1-2):66-72.


11. Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual. 4th edition. New York: Cold spring harbor laboratory press; 1989.


12. Shiels BR, d'Oliveira C, McKellar S, Ben-Miled L, Kawazu S-i, Hide G. Selection of diversity at putative glycosylation sites in the immunodominant merozoite/piroplasm surface antigen of Theileria parasites. Molecular and biochemical parasitology. 1995;72(1-2):149-62.


13. García-Sanmartín J, Aurtenetxe O, Barral M, Marco I, Lavin S, García-Pérez A, et al. Molecular detection and characterization of piroplasms infecting cervids and chamois in Northern Spain. Parasitology. 2007;134(3):391.


14. Amer S, Kim S, Yun Y, Na K-J. Novel variants of the newly emerged Anaplasma capra from Korean water deer (Hydropotes inermis argyropus) in South Korea. Parasites & vectors. 2019;12(1):365.


15. Noaman V, Shayan P. Molecular detection of Anaplasma phagocytophilum in carrier cattle of Iran-first documented report. Iran J Microbiol. 2009;1(2):37-42.


16. Mahmoudvand P, Varshosaz M, Nayebzadeh H, Rocky A, Pourmahdi Borujeni M. Study the frequency of blood parasites of sheep in Dezful suburb, southwest Iran. Iranian Veterinary Journal. 2019;15(3):68-77.


17. Fakhar M, Hajihasani A, Maroufi S, Alizadeh H, Shirzad H, Piri F, et al. An epidemiological survey on bovine and ovine babesiosis in Kurdistan Province, western Iran. Tropical animal health and production. 2012;44(2):319-22.

18- Khamesipour F, Doosti A, Koohi A, Chehelgerdi M, Mokhtari-Farsani A, Chengula AA. Determination of the presence of Babesia species in blood samples of cattle, camel and sheep in Iran by PCR. Archives of Biological Sciences. 2015;67 (1):83-90.

19. Razmi G, Khodaverdi M. Diagnosis of Theileria annulata in cattle with subclinical or clinical symptoms by polymerase chain reaction (PCR). 15th Iranian Veterinary Congress; Tehran, Iran.2008.


20. Heidarpour Bami M, Khazraiinia P, Haddadzadeh H, Kazemi B. Identification of Theileria species in sheep in the eastern half of Iran using nested PCR-RFLP and microscopic techniques. Iranian Journal of Veterinary Research. 2010;11(3):262-6.


21. Esmaelizad M, Niaraki SJ, Fesharaki RH. Molecular and phylogenetic analysis of the partial tams1 gene sequence of a vaccine strain of Theileria annulata. Brazilian Archives of Biology and Technology. 2011;54(6):1109-16.


22. Razmi GR, Eshrati H, Rashtibaf, M. Prevalence of Theileria spp. infection in sheep in South Khorasan province, Iran. Veterinary Parasitology. 2006;140 (3-4):239-243.


23. Razmi GR, Hosseini M, Aslani MR. Identification of tick vectors of ovine theileriosis in an endemic region of Iran. Veterinary Parasitology. 2003; 116 (1):1-6.