پروتئازها یکی از مهم ترین آنزیم های صنعتی هستند که حدود 60 درصد از فروش جهانی آنزیم ها را به خود اختصاص داده اند. پروتئاز خارج سلولی کاربردهای زیادی در صنایع مختلف مانند چرم سازی، دترجنت، آب میوه گیری، نانوایی و صنایع گوشت دارند. با این وجود، اصلی ترین چالش تولید صنعتی آنزیم ها، میزان تولید اندک شان است. این مطالعه با هدف بهینه سازی شرایط تولید آنزیم پروتئاز و ارزیابی کاربردشان در حذف لکه های خونی انجام شد. در ابتدا، نمونه های فاضلاب بر روی محیط اسکیم میلک آگار کشت داده شدند. جدایه ای که بیشترین هاله را در اطراف کلنی‌ داشت، به منظورمطالعات بعدی انتخاب گردید. بهینه سازی عوامل موثر در تولید پروتئاز کریزو باکتریوم ایندوجنسیس BYK27 با روش تاگوچی انجام پذیرفت. همچنین قدرت پاک کنندگی پروتئاز نیز با تیمار پارچه های خونی با این آنزیم مورد بررسی قرار گرفت. پارامترهای بهینه برای تولید پروتئاز کریزو باکتریوم ایندوجنسیس BYK27، شامل گلوکز (1 درصد)، عصاره مخمر (0.06 درصد)، دمای 40 درجه سلیسیوس و 9 pH بود. میزان تولید آنزیم پروتئاز در شرایط بهینه U/ml 590 بود. این مقدار در مقایسه با محیط پایه معادل 63 درصد افزایش داشت. فعالیت پروتئازی و پایداری آنزیم توسط بتا-مرکاپتواتانل 50 درصد افزایش داشت. اما این فعالیت توسط DMF موجب مهار 88 درصدی آنزیم گردید. همچنین پروتئاز سویهBYK27 قادر بود پس از 20 دقیقه گرماگذاری، رنگ بری لکه‌های خونی را به طور کامل انجام دهد. نتایج این مطالعه نشان می دهد که پروتئاز تولید شده توسط سویه BYK27 قابلیت استفاده در بیوتکنولوژی به ویژه در صنایع شوینده و ساخت ترکیبات با ارزش را دارا می باشد. تفاصيل المقالة

سابقه و هدف: آلفا آمیلازهای گرمادوست کاربردهای بسیار زیادی در صنایع مختلف دارند. از این میان می توان به فرآوری نشاسته و تولید شوینده ها اشاره نمود. این مطالعه با هدف جداسازی باکتری های مولد آلفا آمیلاز گرمادوست و نیز تعیین خصوصیت آن ها انجام شد. مواد و روش ها: پس از نمونه برداری از چشمه آبگرم گروه واقع در استان کرمان، به منظور جداسازی باکتری های مولد آلفا آمیلاز از محیط نشاسته آگار استفاده گردید. سویه مورد نظر به کمک توالی یابی ژن 16S rDNA شناسایی گردید. خصوصیت آلفا آمیلاز گرمادوست در حضور عوامل مختلفی مانند pH، دما، یون های فلزی و حلال های آلی تعیین شد. همچنین پارامترهای کینتیکی آنزیم در حضور غلظت های مختلف نشاسته تعیین گردید. یافته ها: در این مطالعه سویه برتر مولد آلفا آمیلاز گرمادوست خارج سلولی به عنوان باکتری آنوکسی باسیلوس جونیسیس AT23 معرفی گردید. آنزیم آلفا آمیلاز سویه AT23 دارای فعالیت بهینه در pH های 5 و 6 بود. یک افزایش هفت برابری در فعالیت آنزیمی آلفا آمیلاز در حضور کلرید سدیم (غلظت 3 مولار) مشاهده شد. یون های منگنز و روی فعالیت آنزیمی را به ترتیب حدود 95 و 31 درصد افزایش دادند. پارامترهای کینتیکی، Km و Vmax به ترتیب 1.657 (میلی گرم بر میلی لیتر) و 0.0059 (میلی گرم بر میلی لیتر بر دقیقه) تعیین گردید. همچنین فعالیت آنزیمی در غلظت 10 درصد از حلال های آلی ان-بوتانول و سیکلو هگزانول حدود دو برابر افزایش یافت. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان می دهد که آلفا آمیلاز سویه AT3 یک آنزیم نمک دوست و مقاوم در برابر است. بنابراین می تواند در صنایع مختلف مورد استفاده قرار گیرد. تفاصيل المقالة