مطالعه مولکولی و تعیین توالی نوکلئوتیدی کلامیدیا آبورتوس جدا شده از جنین‌های سقط شده گوسفندان استان البرز

محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکی

امیررضا عبادی ¹ ( دانش آموخته، گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. )
محمود جمشیدیان ² ( استاد گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. )
فرهاد موسی خانی ³ ( استادیار گروه میکروبیولوژی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، کرج، ایران. )

تاریخ دریافت : 1393/12/03 تاریخ پذیرش : 1394/01/17 تاریخ انتشار : 1393/12/01

کلید واژه: کلامیدیا آبورتوس, تعیین توالی, البرز,

چکیده مقاله :

کلامیدیا جرمی داخل سلولی اجباری و گرم منفی کوکوباسیل است و یکی از عوامل مهم سقط جنین در نشخوارکنندگان به خصوص در میش می‌باشد. این بررسی با هدف مطالعه مولکولی و تعیین توالی نوکلئوتیدی کلامیدیا آبورتوس جدایه از جنین‌های سقط شده گوسفندان استان البرز انجام گرفت. در این مطالعه از 100 جنین سقط شده از 32 گله گوسفند مناطق مختلف استان البرز نمونه‌برداری صورت گرفت، سپس استخراج DNAانجام شد. با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن IGS-Sr- RNA واکنش PCRصورت گرفته و از موارد مثبت جدا شده 10 نمونه به طور تصادفی برای توالی‌یابی به شرکت ماکروژن کره ارسال گردید. در این مطالعه در مجموع 37 نمونه از 100 نمونه سقط جنین از نظر کلامیدیا آبورتوس مثبت بود. بعد از توالی‌یابی نمونه‌های مثبت بیش از 99 درصد با توالی‌های موجود در بانک ژن شباهت داشت. نتیجه توالی‌یابی‌ها نشان می‌دهد که جدایه‌های مورد مطالعه بیشترین شباهت را با جدایه‌های LN554882. 1, CR848038. 1, AF051935. 1موجود در بانک ژن دارا بوده و در یک خوشه قرار دارند. هم‌چنین نتایج این تحقیق نشان می‌دهد که کلامیدیا آبورتوس یکی از عوامل اصلی سقط جنین میش در استان البرز می‌باشد.

چکیده انگلیسی:

   Chlamydia is an obligate intracellular and gram negative coccobacilli and one of the most important causes of abortion in ruminants especially in ewes. This investigation was performed with the purpose of molecular study and sequencing of Chlamydia abortus isolated from aborted sheep fetuses of Alborz Province. In this study, DNA extraction was performed on 100 samples from aborted fetuses of 32 sheep flocks from different areas of Alborz province. Then using specific primers of gene IGS-Sr- RNA, polymerase chain reaction was conducted and 10 samples were selected randomly from the positive cases were sent to Macrogene company in Korea for sequencing. In this study, 37 samples from a total of 100 aborted fetuses were positive for Chlamydia abortus. After sequencing, more than 99 percent of the positive samples were similar with sequences in gene bank. The sequencing results indicated that the samples were very similar to isolates LN554882/1, AF051935/1 and CR848038/1 of the gene bank and were in the same cluster. Also, this investigation indicated that Chlamydia abortus is one of the main reasons of ewe abortion in Alborz province.

منابع و مأخذ:

• · Aitken, I.D., Clarkson, M.J. and Linklater, K. (1990). Enzootic abortion of ewes. Veterinary Record, 126: 136-138.                                                                                                          


• · Amin, A.S. (2003). Comparison of polymerase chain reaction and cell culture for the detection of chlamydophila species in the semen of bulls, buffalo and rams. Veterinary Journal, 166(1): 88-92.                                                                                                                                         


• · Berri, M., Rekiki, A. and Boumedine, K.S. (2009). Simultaneous differential detection of        Chlamydophila abortus, Chlamydophila pecorum and Coxiella burnetii from aborted ruminants clinical samples using multiplex PCR. BioMed Central Microbiology, 9: 1-8.                                      


• · Borel, N., Thoma, R., Spaeni, P., Weilenman, R., Teankum, K., Brugnera, E., et al. (2006). Chlamydia-related abortions in cattle from Graubunden, Switzerland. Veterinary Pathology, 43: 702-708.                                                                                                                          


• · Creelan, J.L. and Mc cullough, S.J. (2002). Evaluation of strain specific primer sequences from an abortifacient strain of ovine Chlamydophila abortus for the detection of EAE by PCR, Federation of European Microbiological Societies. Microbiology Letters, 190: 103-108.                                            


• · Dagnall, G.J.R. (1990). A simple staining method of the identification of Chlamydial elementary bodies in the foetal membranes of sheep affected by ovine enzootic abortion. Veterinary Microbiology, 21: 233-239.                                                                                                                    


• · Domeika, M., Ganusauska, A. and Bassiri, M. (1994). Comparison of polymerase chain reaction direct immunofluorescence. Veterinary Microbiology, 42: 273-280.                                                              


• · Gyles, C.L., Theon, C.O. (1993). Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals. 2nd ed., USA: Iowa State University, pp: 312-319.


• · Hideto, F., Pudjiatmoko, M., Yoshitsugu, O. and Tsuyoshi, Y. (1997). Phylogenetic analysis of the genus Chlamydia based on 16s rRNA gene sequences. Internatinal Journal of Systemic, Bacteriology, 47(2): 425-431.


• · Osman, K.M., Ali, H.A. and Elajakee, J.A. (2011). Chlamydia psittaci and chlamydia pecorum infections in goats and sheep in Egypt. Revue Scientifique of technique off int Epiz, 30(3): 939-948.


• · Qunin, P.J., Carter, M.E. and Markey, B. (1994). Clinical Veterinary Microbiology. UK: Mosby, Wolf, pp: 310-315.


• · Samooro, S.A., Murray, R.D. and Woldehiwet, Z. (2012). Comparisons of polymerase chain reaction and isolation in cell culture and embryonated hen's egg for the detection of chlamydophila abortus in aborted ovine and caprine placenta. Veterinary World, 2: 32-39.


• · Timoney, J.F., Gillespie, J.H. and Scott, F.W. (1988). Hagan and Bruners Microbiology and Infectious Diseases of Domestic Animals. 8^th ed., Comstock Publishing Associates, pp: 356-381.


• · Wang, F.I. and Shieh, H. (2001). Prevalence of chlamydophila abortus infection in domesticated ruminants in Taiwan. Journal Veterinary Medicine Science, 63(11): 1215-1220.


• · Yvonne, P. and Veerle, D. (2010). Multi locus sequence typing of chlamydia reveals an Association between chlamydia psittaci Genotypes and Host species. Plos one Journal, 5(12): 1-9.