بررسی تأثیر عصارۀ کبدی جنینی بر سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف به سلول های کبد
محورهای موضوعی : بیوتکنولوژی و میکروبیولوژی کاربردی
کلید واژه: سلولهای بنیادی مزانشیمی بند ناف, تمایز, هپاتوسیت, تولید گلیکوژن, Invitro,
چکیده مقاله :
سلول های بنیادی سلول هایی با پتانسیل تمایزی گسترده شمال، دانشکده علوم زیستی، گروه زیست شناسی، در مراحل مختلف تکوینی هستند که می توانند در ترمیم و بازسازی یک بافت صدمه دیده ایفای نقش کنند. این سلول ها دارای ویژگی خود نوزایی بوده و قادرند برای مدت طولانی سلول های مشابه خود را تولید کنند، این خصوصیات سلول های بنیادی را کاندید مناسبی در درمان بیماری هایی نظیر بیماری های مزمن کبدی، پارکینسون، آلزایمر و ... نموده است. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر عصارۀ کبد بر روی تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی بافت بند ناف جنین موش NMRI به سلول های کبدی بوده که در این مسیر تمایزی سلول های شبه هپاتوسیتی حاصل شدند. در مسیر تمایز سلول های مزانشیمی با مورفولوژی دوکی شکل به سلول های شبه هپاتوسیتی با مورفولوژی سلول هایی چند وجهی، هستۀ درشت و سیتو پلاسم دانه دار تبدیل شدند.گلیکوژن در سلول های تمایز یافته استفاده شد که نتیجۀ آن مثبت بود و دانه های گلیکوژن در سلول های تمایز یافته به رنگ قرمز ظاهر گردیدند. از تست پریودیک اسید شیف نیز جهت اثبات این مورد استفاده شد. در این مطالعه از سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف جنین موش مادۀ باردار 14تا 17 روزه استفاده شد. سلول های بند ناف توسط محلول آنزیم تریپسیناز انکوبه گردیدند و به دنبال آن از طریق عمل مکانیکی پیپت کردن، سوسپانسیون سلول های حاصله در پلیت های کشت سلولی 12 خانه کشت داده شدند. از کیت تشخیص آلکالین فسفاتاز نیز جهت شناسایی سلول های بنیادی تمایز نیافته استفاده گردید. پس از گذشت 30 روز از کشت سلول های مزبور از تست پریودیک اسید شیف برای شناسایی سلول های شبه کبدی استفاده گردید. عصارۀ کبدی را با دوز های متفاوت (15، 30، 40، 50 لاندا) برای القای سلول های بنیادی مزانشیمی استفاده گردید که نهایتاً نتایج در چهار گروه تجربی دسته بندی گردیدند. نتایج این پژوهش نشان دادند که سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف موش توانایی تغییر و تبدیل به سلول های شبه هپاتوسیتی را دارند که سلول های چند وجهی با هسته های درشت و هستک های واضح مشخص اند. و دوز مؤثر عصارۀ کبدی برای القای سلول های بنیادی مزانشیمی در جهت تغییر و تبدیل به سلول های کبدی 15 لاندا مشخص گردید. بند ناف جنین موش منبع مناسبی برای به دست آوردن سلول های بنیادی مزانشیمی می باشد. که این سلول های دارای مورفولوژی دوکی شکل هستند، سلول های حاصله از القای آن ها توسط عصارۀ کبدی، سلول ها با مورفولوژی چند وجهی و هسته های درشت را نشان دادند.
Stem cells have various potential of differentiation in several levels of an Embryo development. These cells can participate in regeneration and recovery of injured tissues. They have ability of self -renewal and this means these cells can produce similar cells for long period of time.In consequence of this issue they are considered suitable candidate for treatment of liver diseases. Mesenchymal stem cells are described as a kind of non-hematopoetic stem cells that resident in bone marrow and other skeleton tissues.The purpose of present study was to examine the effect of liver extract on umbilical cord-derived NMIR mouse Mesenchymal Stem Cells into Hepatocyte-like cells and with this protocol of differentiation we finally got hepatocyte-like cells. MSCs were isolated from NMRI mouse on days 14-17 and cultured in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) with 10% FBS (Fetal Bovine Serum).we investigate the differentiation potential of mouse Mesenchymal stem cells into hepatocytes in vitro by using liver extract every 4 days.We cultured Mesenchymal stem cells without additional factors or late differential markers of hepatic development. Our results have showed Mesenchymal stem cells after 30 days were changed to hepatocyte-like cells. These cells have multidimensional morphology of hepatocyte-like cells with 1 or 2 obvious nuclei.Periodic Acid –Schiff (PAS)test used for detecting the amount of glycogen synthesis in differentiated Mesenchymal stem cells toward hepatocytes-like cells and the colour of red confirm this differentiation.
_||_