بررسی آلودگی شیرهای محلی کرمان به لیستریا مونوسیتوژنز به روش‌های فنوتیپی و مولکولی
محورهای موضوعی : ماندگاری فراورده های غذایی و تولیدات کشاورزیسمیه فرحبخش 1 , اشرف کریمی نیک 2
1 - دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه میکروبیولوژی، واحد کرمان، دانشگاه آزاد اسلامی، کرمان، ایران
2 - استادیار، گروه میکروبیولوژی، واحد کرمان، دانشگاه آزاد اسلامی، کرمان، ایران
کلید واژه: culture, Polymerase Chain Reaction (PCR), Milk, لیستریا مونوسیتوژنز, Listeria monocytogenes, کشت, شیر, واکنش زنجیره‌ای پلی مراز (پی‌سی‌آر),
چکیده مقاله :
لیستریا مونوسیتوژنز باکتری گرم مثبت و عامل بیماری لیستریوز در انسان و حیوان است و در بیشتر مواد غذایی از جمله لبنیات و شیر حضور دارد. این باکتری در گاو موجب سقط جنین و ورم پستان و در انسان منجر به مسمومیت غذایی شده و می تواند در افراد پرخطر مانند زنان باردار، جنین و نوزاد تازه متولد شده به صورت مننژیت سپتی سمی مشاهده گردد. وجود این باکتری به عنوان شاخص بهداشتی و آلودگی در شیر تلقی می شود. در این تحقیق 50 نمونه شیر خام و غیرپاستوریزه موجود در سطح شهر کرمان جمع آوری و با رعایت زنجیره سرد به آزمایشگاه منتقل گردید. کشت بر روی محیط کشت اختصاصی لیستریا انجام و شناسایی فنوتیپی صورت پذیرفت. جهت شناسایی مولکولی، DNA باکتری های شناسایی شده به روش فنوتیپی، با استفاده از کیت تجاری استخراج گردید و تشخیص لیستریا مونوسیتوژنز با کاربرد کیت IGF اختصاصی شناسایی این باکتری از شرکت ایرانیان ژن فن آوران صورت پذیرفت. محصول پی سی آر با ژل یک درصد الکتروفورز گردید و باندهای اختصاصی مشاهده گردید. نتایج نشان داد 30 و 27 نمونه از شیرهای غیرپاستوریزه به ترتیب بر اساس روش‌های انجام شده، کشت و پی‌سی‌آر نسبت به لیستریا مونوسیتوژنز آلودگی نشان دادند. این امر توجه و رعایت شرایط بهداشتی را در طی مراحل تولید و تهیه شیر و ضرورت استفاده از شیر پاستوریزه را نشان می‌دهد.
Listeria monocytogenes is a gram-positive bacterium that causes listeriosis in humans and animals and is present in most foods including dairy and milk. Listeria monocytogenes can cause abortion and mastitis in cattle. In humans, as well as infections in pregnant women, fetuses, and a newborn baby are seen as meningitis septicemia. Despite these microorganisms in milk can be considered as a health indicator. In this study, 50 samples of raw and unpasteurized milk in the city of Kerman were collected and transferred to the laboratory by observing the cold chain. The culture was performed on a Listeria-specific culture medium and phenotypic identification was performed. For molecular identification, the DNA of bacteria identified by the phenotypic method was extracted using a commercial kit. Listeria monocytogenes was detected by using a special IGF kit to identify this bacterium from the Iranian Gene Fanavaran Company. The PCR product was electrophoresed with 1% gel and specific bands were observed. The results showed that 30 and 27 samples of unpasteurized milk showed contamination against Listeria monocytogenes based on the methods performed, culture, and PCR, respectively. This shows the attention and observance of hygienic conditions during the production and preparation of milk and the necessity of using pasteurized milk.
