غربالگری و شناسایی سویههای جدید باکتریایی اکسید کننده متان از خاکهای آلوده به نفت خوزستان
محورهای موضوعی : میکروب شناسی محیطینازنین صانعی 1 , محمد رعایایی اردکانی 2 , محمدرضا صعودی 3
1 - گروه بیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید چمران، اهواز، ایرا
2 - گروه بیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید چمران، اهواز، ایران
3 - گروه بیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه الزهرا، تهران، ایران
کلید واژه: باکتریهای اکسیدکننده متان, خاکهای آلوده به نفت, اسفنگوموناس, کروموباکتر,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: با استفاده از اطلاعات به دست آمده از نوع و پراکندگی میکروارگانیسم ها در نمونه های خاک های سطحی می توان به میزان توزیع مخازن نفت و گاز پی برد. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی باکتری های اکسید کننده متان از خاک های آلوده به نفت در خوزستان و بهینه سازی دما و اسیدیته در حضور متان بود.مواد و روش ها: باکتری ها در محیط نمک های معدنی و نیترات (NMS) در حضور 50 درصد هوا و 50 درصد متان جداسازی شدند. محیط های کشت به مدت 10 روز بر روی شیکر در دمای °C 30 در تاریکی گرمخانه گذاری شدند و هر 2 روز یک بار مخلوط گازها تجدیدکشت شد. جدایه ها با استفاده از ویژگی های بیوشیمیایی و مولکولی شناسایی شدند. همچنین بهینه سازی رشد باکتری ها در دما و اسیدیته های گوناگون در محیط کشت NMS در حضور متان به عنوان منبع کربن انجام شد.یافته ها: در شرایط مورد بررسی، سه باسیل گرم منفی از نمونه های خاک جداسازی گردید. جدایه ها متعلق به گونه هایی از اکروموباکتر و اسفنگوموناس بودند. تمامی سویه ها قادر به رشد در محیطNMS دارای غلظت بالای متانول (3%) بودند. بهترین شرایط pH و دمای بهینه رشد باکتری های جداسازی شده به ترتیب 4/7 و °C 30 به دست آمد.نتیجه گیری: سویه هایمتانوتروف جداسازی شده در بررسی حاضر قادر به رشد و اکسیداسیون متان در محدوده وسیع اسیدیته و دما بودند و می توانند برای حذف ترکیبات تک کربنه مانند متان و به عنوان شناساگر بیولوژیک مخازن نفت و گاز پیشنهاد شوند.
Background & objectives:Based on information about the types and numbers of microorganisms in the surface soil samples, the distribution range of underlying oil and gas reservoirs can be judged. In the present study, methane oxidizing bacteria were isolated and characterized from oil contaminated soils in Khuzestan, Iran and their growth was optimized in the presence of methane as sole carbon and energy sources. Materials & Methods: Bacteria were isolated in nitrate mineral salt (NMS) medium in the presence of 50% air and 50% methane. The cultures were incubated on a shaker for 10 days at 30°C in dark place, and every two days, the gas mixture was replaced. The isolated bacteria were characterized based on biochemical and molecular identification tests. Then the optimum growth conditions was detected in different pH values and incubation temperatures in NMS medium containing methane. Results:Three Gram-negative rods were isolated from soil samples that were able to grow in isolation condition. The isolates were characterized as Achromobacter and Sphingomonas spp. The strains could also grow in the NMS medium with a high methanol concentration (3%). The optimal pH and temperature for the isolates were 7.4 and 30°C respectively. Conclusion: Methanotrophic strains that were isolated in the present study were able to grow and oxidize methane in high ranges of temperature and pH and can be proposed for the removal of mono-carbon compounds such as methane and as biological detectors for prospecting for oil and gas reservoirs
