• فهرست مقالات Real Time PCR

      • دسترسی آزاد مقاله

        1 - بررسی میزان آلودگی به بروسلوزیس در شیر و پنیر به روش Real Time PCR
        فاطمه خداوردی پور نازیلا ارباب سلیمانی یاسمن  برون
        بروسلاها باکتری های کوچک غیر متحرک، گرم منفی، بدون کپسول و به فرم کوکوباسیل می¬باشند. بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام است و باعث سقط جنین، اختلالات باروری، عفونت های تناسلی، کاهش شیر، اورتریت و اپیدیمیت در میزبان اصلی می¬شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل چکیده کامل
        بروسلاها باکتری های کوچک غیر متحرک، گرم منفی، بدون کپسول و به فرم کوکوباسیل می¬باشند. بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام است و باعث سقط جنین، اختلالات باروری، عفونت های تناسلی، کاهش شیر، اورتریت و اپیدیمیت در میزبان اصلی می¬شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل هزینه های درمانی فراوان به بیماران و ضررهای اقتصادی زیاد به دامداران می¬گردد. با وجود پیشرفت هایی که در تکنیک های کشت خون و تست های سرولوژیکی که برای کشف آنتی بادی های اختصاصی به دست آمد، هنوز مشکلات مهمی در تشخیص بروسلوزیس وجود دارد، بنابراین نیاز به آزمون های جدید آزمایشگاهی می¬باشد. یکی از جدید ترین روش های سنجش کمی که در حال حاضر مورد توجه بسیاری از محققین قرار گرفته روش تشخیص باکتری توسط Real Time PCR می¬باشد. هدف ما هم از این مطالعه شناسایی باکتری های جنس بروسلا در نمونه های شیر و پنیر توسط روش Real Time PCR می¬باشد. 25 نمونه شیر گاو (محلی) و 25 نمونه پنیر از مناطق مختلف شهرستان شهرکرد تهیه شد و به منظور تشخیص مولکولی،استخراج DNA با استفاده از کیت استخراج DNA (شرکت سیناژن) انجام و سپس واکنش Real Time PCR با استفاده از دستگاه مدل Rotor-Gene ساخت شرکت Corbett استرالیا بر روی نمونه ها انجام شد. در این تحقیق از 50 نمونه مورد بررسی تنها در 2 نمونه شیر (4%) بروسلا آبورتوس تشخیص داده شد. در نمونه های پنیر آلودگی به بروسلا گزارش نگردید. این بررسی نشان می دهد روش های مولکولی مثل Real Time PCR باید به عنوان روش هایی مکمل جهت تشخیص بروسلا در کنار روش های رایج مورد استفاده قرار گیرند. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        2 - بررسی میزان آلودگی به بروسلوزیس در نمونه خون های افراد سرولوژی مثبت بروسلا در شهرستان های شهرکرد و اصفهان به روش Real Time PCR
        حسین  خدابنده شهرکی نازیلا ارباب سلیمانی
        چکیده بیماري بروسلوز جزء شایع ترین بیماري هاي باکتریایی مشترك انسان و دام است که در انسان ایجاد تب مالت نموده و خسارات اقتصادي بالایی را در حیوانات اهلی به بار می آورد. در این تحقیق با استفاده از روش Real Time PCR به بررسی فراوانی گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی ت چکیده کامل
        چکیده بیماري بروسلوز جزء شایع ترین بیماري هاي باکتریایی مشترك انسان و دام است که در انسان ایجاد تب مالت نموده و خسارات اقتصادي بالایی را در حیوانات اهلی به بار می آورد. در این تحقیق با استفاده از روش Real Time PCR به بررسی فراوانی گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس در سرم افراد سرولوژی مثبت پرداختیم. نمونه های سرمی 30 نفر از افرادی که تست رایت آن ها مثبت شده بود (بالای 160/1)، از آزمایشگاهای تشخیص طبی شهرستان های شهرکرد و اصفهان جمع آوری و DNA ِنمونه ها با استفاده از کیت استخراج DNA سیناژن استخراج شد. به منظور تشخیص جنس و گونه های بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس واکنش Real Time PCR بر روی نمونه ها انجام شد. در این بررسی تمام 30 نمونه مورد بررسی با روش Real time PCR تأیید شدند. در جنس مونث پس از انجام آزمون Real Time PCR فقط باکتری بروسلا آبورتوس تشخیص داده شد در حالی که در جنس مذکر 22 مورد (33/73درصد) بروسلا آبورتوس و 3 مورد (10درصد) بروسلا ملی تنسیس شناسایی گردید. از 7 مورد آلودگی به بروسلوز در گروه سنی زیر 30 سال، 6 مورد (7/85درصد) بروسلا آبورتوس و 1 مورد (3/14درصد) بروسلا ملی تنسیس تشخیص داده شدند. در صورتی که از 23 مورد آلودگی به بروسلوز در گروه سنی بالای 30 سال، 21 مورد (3/91درصد) بروسلا آبورتوس و 2 مورد (7/8درصد) بروسلا ملی تنسیس تشخیص داده شدند. در سال هاي اخير روش هاي مولكولي زيادي براي تشخيص اين باكتري مورد استفاده قرار گرفته اند. روش Real Time PCR از اين نظر كه نيازمند صرف زمان كم و داراي حساسيت و اختصاصيت بالايي مي باشد، در تشخيص اين بيماري بسيار مفيد مي باشد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        3 - مطالعه اثر بازدارندگی اسانس مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه با استفاده از Real Time PCR
        حسین مومنی مهدی رئیسی حاجیه قاسمیان صفایی حسن ممتاز
        لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکـوزیس یکـی از مهمتـرین بـاکتری هـای بیماری زا در ماهیان به حساب مـی آیـد. بررسی حاضر با هدف مطالعه اثر بازدارندگی غلظت‌های مختلف اسانس گیاه مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لا چکیده کامل
        لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکـوزیس یکـی از مهمتـرین بـاکتری هـای بیماری زا در ماهیان به حساب مـی آیـد. بررسی حاضر با هدف مطالعه اثر بازدارندگی غلظت‌های مختلف اسانس گیاه مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی بر بیان ژن کپسول (epsD) باکتری لاکتوکوکوس گارویه عامل بیماری لاکتوکوکوزیس ماهیان انجام پذیرفت. به منظور انجام این مطالعه، باکتری دارای ژن epsD در مجاورت حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) اسانس ها برابر با μl/ml 12/0 قرار گرفت و میزان بیان ژن مربوطه با استفاده از Real Time PCR بررسی گردید. نتایج نشان داد که بیان ژن در باکتری های مجاورت داده شده با غلظت MIC اسانس ها کاهش یافت. نتایج همچنین حاکی از کاهش بیان ژن مذکور متعاقب افزایش غلظت اسانس بود. اگر چه میزان تأثیر مرزه بختیاری بر بیان ژن کپسول بیش از مرزه خوزستانی بود. از این‌ رو استفاده از اسانس مرزه بختیاری و مرزه خوزستانی به منظور کنترل و پیشگیری بیماری لاکتوکوکوزیس به واسطه ممانعت از بیان ژن کپسول توصیه می شود. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        4 - ترانسکریپتومیکس و روش های پر کاربرد بررسی بیان ژن‌های دفاعی گیاه
        جلال غلام نژاد
        ترانسکریپتومیکس یکی از زمینه‌های پیشرفته در زمینۀ علوم بعد از ژنومیک است. علم ترانسکریپتومیکس بر روی میزان بیان ژن‌ها با بررسی سطوح RNA تمرکز می‌کند. ترانسکریپتومیکس اطلاعات زیادی را در مورد ژنوم، ساختار ژن‌‌ها و عملکرد ژن‌ها فراهم می-آورد و با استفاده از این اطلاعات مک چکیده کامل
        ترانسکریپتومیکس یکی از زمینه‌های پیشرفته در زمینۀ علوم بعد از ژنومیک است. علم ترانسکریپتومیکس بر روی میزان بیان ژن‌ها با بررسی سطوح RNA تمرکز می‌کند. ترانسکریپتومیکس اطلاعات زیادی را در مورد ژنوم، ساختار ژن‌‌ها و عملکرد ژن‌ها فراهم می-آورد و با استفاده از این اطلاعات مکانیسم‌های مولکولی که در فرایندهای بیولوژیکی مختلف سلولی رخ می دهد آشکار می‌شود. گیاهان بعد از درک بیمارگر سیستم دفاعی خود را فعال می‌کنند. امروزه ترانسکریپتومیکس کاربرد وسیعی در کشاورزی پیدا کرده و با استفاده از این علم پاسخ به تنش‌های زیستی و غیرزیستی، بیماری‌های انباری و شناسایی ارقام مقاوم در بیماری شناسی گیاهی مطالعه می-شود. بررسی بیان ژن‌ها در زمان تنش و شناسایی ژن‌های دفاعی نسبت به بیمارگرها، بسیار ضروری است. نتایج تحقیقات ترانسکریپتومیکس در مورد بیان ژن، اطلاعات مرتبط به مکانیسم تحمل و مقاومت به بیمارگرهای گیاهی را افزایش داده و تولید ارقام مقاوم و متحمل از راه روش‌های زیست فناوری را هموارتر می سازد. روش‌های مختلفی جهت تجزیه پروفایل بیان ژن در گیاهان وجود دارد. روش‌هایی که برای مطالعۀ بیان ژن‌ها مورد استفاده قرار می‌گیرد به سه دستۀ روش‌های متکی بر هیبریداسیون، روش‌های مبتنی بر PCR و روش‌های متکی بر توالی یابی تقسیم می‌شوند. در این مقاله مروری بر روش های مطالعۀ بیان ژن‌ها و کاربردهای آن در بیماری شناسی گیاهی پرداخته می شود. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        5 - ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن ها‌ی TEM و SHV در کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی با استفاده از تکنیک Real Time PCR
        نجمه طهماسبی بابک خیرخواه
        زمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک پاتوژن گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن های TEM و SHV در کلبسیلا پنو چکیده کامل
        زمینه و هدف: کلبسیلا‌‌‌پنومونیه یک پاتوژن گرم منفی و عامل شایع عفونت های بیمارستانی است. افزایش ظهور مقاومت به چند دارو در کلبسیلا پنومونیه گزینه های درمانی را برای این باکتری محدود کرده است. هدف این تحقیق ارزیابی اثر نانوذرات آهن بر بیان ژن های TEM و SHV در کلبسیلا پنومونیه جدا شده از نمونه های بالینی با استفاده ازتکنیک Real- Time PCR می باشد. روش تحقق: تعداد 50 سویه کلبسیلا پنومونیه ظرف مدت 6 ماه، از بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه بیمارستان های شهر کرمان جمع آوری شد. ایزوله ها بر اساس تست های بیوشیمیایی موجود در سیستم API20E به عنوان کلبسیلا پنومونیه شناسایی شدند. تست حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفیوژن انجام گردید. جهت شناسایی مولکولی ژن های TEM و SHV، PCR انجام گردید. برای تعیین اثر بخشی نانو ذره آهن بر روی سویه های موردنظر، از روش براث دایلوشن طبق استاندارد CLSI استفاده و درنهایت Real- Time PCR صورت گرفت. یافته ها: در این مطالعه تعداد 46 نمونه از جدایه ها به صورت فنوتیپی مولد ESBL مثبت بودند. که 48 درصد (22 مورد) واجد ژن SHV ، 13 درصد (6 مورد) واجد ژن TEM و 39 درصد (18 مورد) دارای هر دو ژن SHV +TEM بودند. نانوذره آهن توانست بیان ژن های TEM و SHV را در کلبسیلا پنومونیه کاهش دهد. نتیجه گیری: با توجه به اثر بخش بودن نانوذرات آهن بر روی کلبسیلاهای بتالاکتاماز مثبت، می توان از نانوذره آهن بعنوان یک دوز دارویی استفاده کرد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        6 - ارزیابی سطح بیان ژن CXCL12در رده سلولی آدنوکارسینومای ریه A549با استفاده از روشReal Time PCR
        ریحانه محبوبی جلیل فلاح مهرآبادی الهه علی عسگری
        زمینه و هدف:سرطان ریه شایع ترین بدخیمی و اولین عامل مرگ و میر ناشی از سرطان در میان زنان و مردان جهان است، به طوری که بقای 5 ساله بیماران حدود 15% میباشد. با توجه به نقش تهاجمی CXCL12و چالشهای موجود درمطالعات مختلف در بیان و عدم بیانCXCL12 و وجود متاستاز در مراحل اولیهی چکیده کامل
        زمینه و هدف:سرطان ریه شایع ترین بدخیمی و اولین عامل مرگ و میر ناشی از سرطان در میان زنان و مردان جهان است، به طوری که بقای 5 ساله بیماران حدود 15% میباشد. با توجه به نقش تهاجمی CXCL12و چالشهای موجود درمطالعات مختلف در بیان و عدم بیانCXCL12 و وجود متاستاز در مراحل اولیهی آدنوکارسینومای ریه، رده سلولیA549انتخاب شد تا میزان بیان ژنCXCL12در آن مورد بررسی قرار گیرد.روش کار:در این مطالعه رده سلولی A549در محیط کشت DMEMحاوی 10% سرم گاوی و 1% پنی سیلین-استرپتومایسین کشت داده شد. از رده ی سلولی مذکور RNAاستخراج گردید و پس از ارزیابی کمی و کیفی آن،cDNAسنتز شد. سپس میزان بیان ژن CXCL12با روش Real Time PCRمورد ارزیابی قرار گرفت.  یافته ها:بیان اندکCXCL12در رده سلولی آدنوکارسینومای ریه A549نشان دهندهی آن است که CXCL12میتواند به عنوان یک مارکر بالقوه برای اهداف پیشگوییکننده و در نهایت درمانی در نظر گرفته شود.نتیجه گیری:CXCL12در رده سلولیآدنوکارسینومای ریه A549بیان کمی دارد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        7 - بررسی سطح mRNA ژن GLUT1 در نمونه های بافتی سرطان سلول غیر کوچک ریه
        فاطمه صاعدوند مهدی ابراهیمی شهره زارع کاریزی
        مقدمه: سرطان ریه نوعی تومور ریوی بدخیم است که مهمترین عامل مرگ و میر ناشی از ابتلا به سرطان در انسان محسوب می‌شود. GLUT1 حامل مهم گلوکز به سلولها است که بیان بیش از حد طبیعی آن در افزایش سوخت و ساز سلول های سرطانی نقش دارد. هدف: بررسی تغییر در بیان ژن GLUT1 در نمونه های چکیده کامل
        مقدمه: سرطان ریه نوعی تومور ریوی بدخیم است که مهمترین عامل مرگ و میر ناشی از ابتلا به سرطان در انسان محسوب می‌شود. GLUT1 حامل مهم گلوکز به سلولها است که بیان بیش از حد طبیعی آن در افزایش سوخت و ساز سلول های سرطانی نقش دارد. هدف: بررسی تغییر در بیان ژن GLUT1 در نمونه های بافتی سرطان سلول غیر کوچک است.مواد و روش ها: تعداد 30 نمونه بافت سرطان سلول های غیرکوچک ریه و 30 نمونه بافت مجاور تومور از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان مسیح دانشوری پس از اخذ رضایت نامه، دریافت شد. پس از نمونه گیری و جداسازی RNA و ساخت cDNA، سطح mRNA ژن GLUT1 و GAPDH با تکنیک Real time PCRسنجیده شد. آنالیز داده های بیان ژن با آزمون آماری t انجام شد.نتایج: در 21 نمونه (70 درصد) سطح mRNA ژن GLUT1 در بافت سرطان سلول های غیرکوچک ریه نسبت بافت سالم افزایش داشته است. علاوه براین سطح mRNA در بافت تومور نسبت به بافت طبیعی 3/4 برابر افزایش داشت (013/0 = P).نتیجه گیری: افزایش سطح mRNA ژن GLUT1 در سلول های کارسینومای ریه سلول غیرکوچک می تواند نشانه ای از تغییر برنامه متابولیکی این سلول ها به گلیکولیز هوازی باشد که نتیجه آن گسترش تومور و بدخیمی ناشی از آن می باشد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        8 - تنش سرما و اثر آن بر سنتز هورمون اسید آبسیزیک از طریق بررسی بیان ژن و تغییرات آنتی‌اکسیدان‌های غیرآنزیمی گوجه فرنگی (Solanum lycopersicum 'Red Cloud)
        نیلوفر صمدی سکینه سعیدی سار حسین عباسپور ناهید مسعودیان
        گوجه‌فرنگی یکی از محصولات عمده کشاورزی در رده‌ی محصولات زراعی است که در بسیاری از کشورهای جهان و همچنین ایران از جنبه‌های مختلف دارای اهمیت می‌باشد. در این تحقیق تحت تنش سرما به بیان ژن SlNCED1در مسیر بیوسنتز هورمون آبسیزیک اسید به روش Real-Time qRT-PCR و اندازه‌گیری بر چکیده کامل
        گوجه‌فرنگی یکی از محصولات عمده کشاورزی در رده‌ی محصولات زراعی است که در بسیاری از کشورهای جهان و همچنین ایران از جنبه‌های مختلف دارای اهمیت می‌باشد. در این تحقیق تحت تنش سرما به بیان ژن SlNCED1در مسیر بیوسنتز هورمون آبسیزیک اسید به روش Real-Time qRT-PCR و اندازه‌گیری برخی خواص فیزیولوژیکی پرداخته شده است. بدین‌منظور پس از میوه‌دهی، بوته‌ها به‌مدت 12 و 24 ساعت در دمای 2 و 4 درجه‌ سانتی‌گراد قرار گرفتند. پس از این مدت میوه‌ها جهت سنجش آنتی اکسیدان‌های غیرآنزیمی به روش DPPD و فنل کل به روش فولین سیکالتو و بیان ژن جدا شدند. نتایج حاکی از آن بود که بیشترین میزان بیان ژن SlNCED1مربوط به دمای 4 درجه به‌ترتیب در ساعات 24 و12 بود. همچنین نتایج آنالیز مقایسه میانگین نشان داد که فعالیت معنی دار آنتی اکسیدان وفنل کل در دمای 2درجه و 12 ساعت اتفاق افتاد. به‌طورکلی می‌توان گفت که از آنجایی که گوجه فرنگی رد کلود متعلق به نواحی گرمسیری است لذا در دماهای پایین‌تر از 12 درجه‌ سانتی‌گراد دچار تنش سرمایی شده و متعاقب آن تغییرات بیان ژن‌ها و آنتی اکسیدان‌ها را جهت حفاظت از خود در برابر تنش ایجاد می‌کند. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        9 - Enhancement of valerenic acid production in Valeriana officinalis roots by methyl jasmonate -mediated transcriptional changes of sesquiterpene synthase genes
        Hengameh Taheri Mansour Ghesmati
        Valeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is the active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate t چکیده کامل
        Valeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is the active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the effect of methyl jasmonate (MeJA) concentrations (50 and 100 µM) in the modulation of expression patterns of the genes involved in valerenic acid (VA) biosynthesis, transcript abundance of identified sesquiterpene synthase (Sesqui-TPS) genes in the root of V. officinalis was monitored by quantitative real time PCR (qRT-PCR) within a 144 h time period. In addition, Valerenic acid contents were measured by high-performance liquid chromatography (HPLC). The highest amount of VA (12.45 mg/g dry weight (DW)) was found at 100 µM MeJA with a 12 fold increase over control culture (1.03 mg/g DW) at exposure time of 72 h. Moreover, MeJA in a concentration dependent manner enhanced transcription rate of VoTPS1 and VoTPS7 genes. Accordingly, exposure to 100 µM MeJA for 24 h can be more effective in the induction of these genes than that observed for 50 µM. Such enhancement was correlated with increased VA accumulation suggesting that these genes may be responsible for the biosynthesis of intermediates involved in the VA-biosynthetic pathway. However, MeJA treatment seemed to have a less significant effect on VoTPS3 expression than VoTPS1 and VoTPS7 genes. This results provide insights for more effective biosynthesis of VA by MeJA-mediated transcriptional changes of putative sesqui-TPS. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        10 - The effect of biosynthesized silver nanoparticles on FAE1 and FAD2 gene expression in Camelina sativa
        Tayebehalsadat Mirmoeini Leila Pishkar Danial Kahrizi Giti Barzin Naser Karimi
        Nanotechnology is a field of research related to physics, chemistry, engineering sciences with the application of new techniques and production of nanoscale materials and an emerging field in interdisciplinary research especially biotechnology. Camelina is an oilseed an چکیده کامل
        Nanotechnology is a field of research related to physics, chemistry, engineering sciences with the application of new techniques and production of nanoscale materials and an emerging field in interdisciplinary research especially biotechnology. Camelina is an oilseed and re-emerging plant that requires a lot of research on its oil production process. This study was conducted to investigate the effect of biosynthesized silver nanoparticles on the expression level of FAE1 and FAD2 in Soheil cultivar of Camelina oilseed plant based on a completely randomized design with four replications in 2018-2019. The aqueous extract of Camelina leaf and silver nitrate salt was used to prepare the nanoparticles. Experimental treatments included 0.5, 1, 2 and 3 mg / L of silver nanoparticles. After the preparation of foliar samples for all treatments, RNA extraction, cDNA synthesis and temperature gradient determination, the Real Time PCR reaction was used to study gene expression patterns. Data were then analyzed using GenEX and SAS software. The results showed that the effect of silver nanoparticles on FAE1 and FAD2 gene expression was significant (p<0.05) and the effect was increased with increasing silver nanoparticle concentration. The highest enhancement was observed at 3 mg / L silver nanoparticles. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        11 - Enhancement of valerenic acid production in Valeriana officinalis roots by methyl jasmonate-mediated transcriptional changes of sesquiterpene synthase genes
        Hengameh Taheri Mansour Ghesmati
        Valeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the e چکیده کامل
        Valeriana officinalis (valerian), as a nutraceutical herb, is widely used for its sedative and hypnotic properties. It is known that C15 sesquiterpenoid valerenic acid (VA) is active ingredient responsible for pharmacological effects of V. officinalis. To evaluate the effect of methyl jasmonate (MeJA) concentrations (50 and 100 µM) in the modulation of expression patterns of the genes involved in valerenic acid (VA) biosynthesis, transcript abundance of the identified sesquiterpene synthase (Sesqui-TPS) genes in the root of V. officinalis was monitored by quantitative real time PCR (qRT-PCR) within a 144 h time period. In addition, valerenic acid contents were measured by high-performance liquid chromatography (HPLC). The highest amount of VA (12.45 mg/g dry weight (DW)) was found at 100 µM MeJA with a 12-fold increase over control culture (1.03 mg/g DW) at exposure time of 72 h. Moreover, MeJA in a concentration dependent manner, enhanced transcription rate of VoTPS1 and VoTPS7 genes. Accordingly, exposure to 100 µM MeJA for 24 h can be more effective on induction of these genes than observed for 50 µM. Such enhancement correlated with increased VA accumulation suggesting that these genes may be responsible for the biosynthesis of intermediates involved in the VA-biosynthetic pathway. However, MeJA treatment seemed to have a less significant effect on VoTPS3 expression than VoTPS1 and VoTPS7 genes. These results provide insights for more effective biosynthesis of VA by MeJA-mediated transcriptional changes of putative sesqui-TPS. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        12 - بررسی مقاومت­های دارویی در بیماران مبتلا به سل با استفاده از تکنیک Real Time PCR
        محیا موسوی هادی امراللهی
        سل یک بیماری واگیردار بوده و عامل آن مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است. مقاومت به دو داروی اصلی ایزونیازید و ریفامپین را مقاومت چند دارویی سل (MDR-TB) می‌نامند. این مطالعه به بررسی گونه آلوده کننده بیماران استان سمنان از طریق بررسی حضور یا عدم حضور قطعه IS6110در نمونه­ ها و چکیده کامل
        سل یک بیماری واگیردار بوده و عامل آن مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است. مقاومت به دو داروی اصلی ایزونیازید و ریفامپین را مقاومت چند دارویی سل (MDR-TB) می‌نامند. این مطالعه به بررسی گونه آلوده کننده بیماران استان سمنان از طریق بررسی حضور یا عدم حضور قطعه IS6110در نمونه­ ها و هم­چنین بررسی وجود مقاومت یا عدم وجود آن در نمونه­ها نسبت به دو آنتی­ بیوتیک ریفامپین و ایزونیازید از طریق تکنیک Real Time PCRپرداخته است.نمونه­ های بزاق جمع­اوری شده از بیماران مسلول در محیط کشت L-Jکشت داده شدند و سپس استخراج DNAاز باکتری­ها با استفاده از تکنیک  CTABانجام شد و نمونه­ ها جهت تعیین مقاومت یا عدم مقاومت از طریقReal Time PCR  مورد بررسی قرار گرفتند. همچنین نمونه­ ها با استفاده از تکنیک PCRمعمولی با استفاده از پرایمر اختصاصی IS6110جهت تعیین توبرکلوزیس بودن یا نبودن مورد بررسی قرار گرفتند. از 21 نمونه بالینی مورد مطالعه، 17 مورد مایکوباکتریوم توبر کلوزیس و 4 مورد غیرتوبرکلوزیس بودند همچنین تمامی نمونه­ ها حساس به آنتی­بیوتیک تشخیص داده شدند. با کمک تکنیک تشخیصی Real Time PCRبررسی ژن­های مربوط به مقاومت آنتی ­بیوتیکی در کوتاه­ترین زمان ممکن (کمتر از یک روز) و با دقت و اختصاصیت بالا در همان بدو تشخیص بیماری انجام می­ پذیرد، در این تحقیق خوشبختانه تمامی نمونه‏ های بالینی حساس به دو آنتی­ بیوتیک ریفامپین و ایزونیازید بودند که از علل احتمالی این امر می­توان بهکنترل موفق این بیماری توسط مراکز درمانی از طریق معاینات پی­ درپی بیماران و همچنین امار کم مهاجرین در این استان اشاره کرد. پرونده مقاله