• فهرست مقالات Nested PCR

      • دسترسی آزاد مقاله

        1 - تعیین انتشار جغرافیایی تیلریا اویسدر بزان استان تهران به روش مولکولی
        مهدی خداویسی، صادق رهبری، پرویز شایان، ناصر حقوقی‌راد .
        تیلریا اویس یکی از عوامل تک یاخته‌ای خونی خوش خیم در گوسفند و بز در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری بوده که توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده انتقال می‌یابد. این مطالعه برای تعیین پراکنش تیلریا اویس بر روی جمعیت 400 راس بز به ظاهر سالم در استان تهران انجام گردید. گس چکیده کامل
        تیلریا اویس یکی از عوامل تک یاخته‌ای خونی خوش خیم در گوسفند و بز در بسیاری از مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری بوده که توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده انتقال می‌یابد. این مطالعه برای تعیین پراکنش تیلریا اویس بر روی جمعیت 400 راس بز به ظاهر سالم در استان تهران انجام گردید. گسترش‌های خونی تهیه شده پس از رنگ‌آمیزی با روش گیمسا، تحت آزمایشات میکروسکوپی قرار گرفتند. به منظور تشخیص مولکولی، استخراج DNA از خون صورت گرفت و متعاقب آن به منظور تفریق گونه‌های تیلریا و بابزیا از یکدیگر با آغازگرهای اختصاصی منشعب از ژن کد کننده 18SrRNA (آغازگر1، آغازگر2) تکثیر پیدا کرد. به منظور تفریق گونه‌های تیلریا از یکدیگر آزمایش Semi-nested PCR با آغازگرهای اختصاصی منشعب از ژن ms 1-2 برای تیلریا لستوکاردی (آغازگر4، آغازگر 6)، تیلریا آنولاتا (آغازگر 5، آغازگر 6) و برای تیلریا اویس با آغازگر اختصاصی منشعب از ژن 18SrRNA ( آغازگر2، آغازگر3) انجام شد. نتایج میکروسکوپی نشان داد که 7/1% ( 7 مورد از 400 نمونه) به تیلریا اویس آلوده بوده در حالی که در بررسی Semi-nested PCR 6% (24 مورد از 400 نمونه) برای تیلریا اویس مثبت بودند. نتایج این بررسی نشان داد که تیلریا اویس در بزان بدون علائم بالینی قابل شناسایی است. بنابراین آنها می‌توانند به عنوان مخازن عفونت برای کنه‌ها و عامل انتقال انگل به گوسفند در نظر گرفته شوند. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        2 - فراوانی آلودگی به تری تریکوموناس فتوس در گاوهای شهرستان اصفهان
        حامد تفضلی علی شریف زاده
        تری تریکوموناس فتوس ، تک یاخته ای است که معمولا در گاو بیماری تولیدمثلی ایجاد کرده و باعث ناباروری و سقط جنین می گردد. روش مرسوم برای تشخیص آلودگی ، مشاهده مستقیم میکروسکوپی و درصورت زمان محدود برای بررسی،انتقال به محیط انتقالی یا محیط کشت است . هدف از این بررسی تنظیم ر چکیده کامل
        تری تریکوموناس فتوس ، تک یاخته ای است که معمولا در گاو بیماری تولیدمثلی ایجاد کرده و باعث ناباروری و سقط جنین می گردد. روش مرسوم برای تشخیص آلودگی ، مشاهده مستقیم میکروسکوپی و درصورت زمان محدود برای بررسی،انتقال به محیط انتقالی یا محیط کشت است . هدف از این بررسی تنظیم روش مولکولی برای تشخیص آلودگی تریکوموناسی وتعیین میزان آلودگی درکشتارگاه اصفهان بود. در این بررسی از دو کشتارگاه متفاوت در شهرستان اصفهان 73 گاونر و27 گاوماده موردبررسی قرارگرفتند. با استفاده از سرنگ انسولین استریل و سواپ از رحم و مخاطات تناسلی نمونه گیری صورت گرفت. برای استخراج DNA براساس دستورالعمل شرکت سازنده کیت اقدام گردید(شرکت سیناژن - ایران). آزمایش واکنش زنجیره ی پلیمرازی (Nested PCR)، با بکارگیری پرایمرهای اختصاصیRNA ریبوزومی تری تریکوموناس فتوس برای توالی جنس(TFR 12) وگونه(TFR3-4) صورت پذیرفت. همه نمونه ها با انجام آزمون Nested PCR مورد بررسی قرارگرفتند . تعداد 6 گاونر(2/8% )و2 گاوماده (4/7% ) با نشان دادن باند372 بازی آلودگی به جنس و2 گاونرنیز آلودگی به گونه فتوس تری تریکوموناس راباباند374 بازی نشان دادند.سایر نمونه ها با گونه هایی غیر از گونه فتوس مرتبط بودند. بنابراین بر اساس نتایج این تحقیق، شیوع جنس تری تریکوموناس و خصوصا تری تریکوموناس فتوس در نمونه ها ، تاییدکننده لزوم توجه جدی به آزمایشهای غربالگری در گاو به خصوص گاوهای نر می باشد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        3 - بررسی میزان فراوانی مایکوپلاسما آرژینینی در ریه شتران مبتلا به پنومونی، ذبح شده در کشتارگاه صنعتی مشهد
        مریم ایزدی جعفر نوید مهر مصطفی جعفرپور سعید زیبایی
        ازرسی کشتارگاهی شترهای کشتار شده، در کشتارگاه صنعتی مشهد حاکی از این است که پنومونی در بین شتران کشتار شده به وفور دیده می‌شود. مایکوپلاسماها که کوچکترین میکروارگانیسم‌ها با زندگی آزاد می‌باشند از عوامل مطرح در پنومونی شتران بشمار می‌روند. مایکوپلاسما آرژینینی از حیوانا چکیده کامل
        ازرسی کشتارگاهی شترهای کشتار شده، در کشتارگاه صنعتی مشهد حاکی از این است که پنومونی در بین شتران کشتار شده به وفور دیده می‌شود. مایکوپلاسماها که کوچکترین میکروارگانیسم‌ها با زندگی آزاد می‌باشند از عوامل مطرح در پنومونی شتران بشمار می‌روند. مایکوپلاسما آرژینینی از حیوانات مبتلا به پنومونی و پلوروپنومونی خصوصأ گاو، گوسفند و بز جدا می‌شود. این میکروارگانیسم در ریه شتران مبتلا به پنومونی نیز گزارش شده است اما این موضوع تاکنون در ایران مورد توجه و مطالعه آزمایشگاهی قرار نگرفته است. در این مطالعه با استفاده از کشت و روش مولکولی Nested PCR به تشخیص این میکروارگانیسم پرداختیم. از 100 نمونه ریه مبتلا به پنومونی توسط روش کشت 43 مورد مثبت مایکوپلاسما جدا گردید. سپس با روش مولکولی Nested PCR و با بهره گیری از دو پرایمر اختصاصی که در برگیرنده ناحیه spacer در ایران RNA ریبوزومی مایکوپلاسما آرژینینی بودند، مورد بررسی قرار گرفتند که از 43 نمونه 19 مورد از نظر مایکوپلاسما آرژینینی مثبت بودند. بنابراین طبق نتایج حاصل در این تحقیق برای اولین بار در ایران مایکوپلاسما آرژینینی با روش‌ Nested PCR از ریه شتران مبتلا به پنومونی جداسازی و معرفی گردید.‌‌ پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        4 - شیوع <i>کوکسیلا بورنتی </i> در مخازن جمع‌آوری شیر گاوهای بومی استان گیلان به‌روش Nested-PCR
        اکرم نوروز حقی نوبیجاری ابراهیم رحیمی امیر شاکریان
        تب کیو با عامل ریکتزیا، بیماری مشترک انسان و دام باقدرت بیماری زایی بسیار بالا است که اخیراً تنها به‌عنوان بیماری شغلی در دامداران، دامپزشکان و کارگران کشتارگاه ها تلقی نمی شود. مصرف شیر نقش بسیار مهمی در اپیدمی و گسترش بیماری دارد و شیر گاو یکی از منابع بالقوه کوکسیلا چکیده کامل
        تب کیو با عامل ریکتزیا، بیماری مشترک انسان و دام باقدرت بیماری زایی بسیار بالا است که اخیراً تنها به‌عنوان بیماری شغلی در دامداران، دامپزشکان و کارگران کشتارگاه ها تلقی نمی شود. مصرف شیر نقش بسیار مهمی در اپیدمی و گسترش بیماری دارد و شیر گاو یکی از منابع بالقوه کوکسیلا بورنتی می باشد. این مطالعه با هدف بررسی شیوع کوکسیلا بورنتی در مخازن جمع‌آوری شیر گاوهای بومی استان گیلان انجام گرفت. در این مطالعه مقطعی-توصیفی از تابستان 1395 تا بهار 1396 در مجموع 204 نمونه شیراز مخازن جمع‌آوری شیر در مراکز جمع‌آوری شیر شهرستان‌های استان گیلان تهیه و جهت بررسی شیوع کوکسیلا بورنتی، به روش Nested PCR مورد آزمایش قرار گرفت. از مجموع 204 نمونه شیر خام، 21 نمونه(10.29%) ازنظر حضور کوکسیلا بورنتی مثبت بود. بالاترین میزان آلودگی در شهرستان لاهیجان،33/33% و به دنبال آن در شهرستان رودبار،(29.4%) مشاهده شد. نمونه‌های اخذشده از شهرستان های رشت، تالش، آستانه و ماسال هیچ مورد مثبتی نداشتند. بررسی شیوع فصلی نمونه ها حاکی از عدم اختلاف آماری بین فصول مختلف بود. نتایج حاکی از آن است که شیر گاوهای سنتی می‌تواند منبع و مخزن کوکسیلا بورنتی در ایران می‌باشد. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        5 - شناسایی مولکولی سروتیپ های ویروس عامل برونشیت عفونی در جوجه های گوشتی استان گیلان
        لیلا اسدپور
        سابقه و هدف: ویروس برونشیت عفونی متعلق به خانواده کرونا ویریده عامل بیماری برونشیت عفونی ماکیان است. این بیماری به شدت واگیردار بوده و موجب تلفات بالا و خسارات اقتصادی گسترده در صنعت پرورش طیور می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی فراوانی سروتایپ های ویروس برونشیت عفونی د چکیده کامل
        سابقه و هدف: ویروس برونشیت عفونی متعلق به خانواده کرونا ویریده عامل بیماری برونشیت عفونی ماکیان است. این بیماری به شدت واگیردار بوده و موجب تلفات بالا و خسارات اقتصادی گسترده در صنعت پرورش طیور می گردد. این مطالعه با هدف ارزیابی فراوانی سروتایپ های ویروس برونشیت عفونی در گله های گوشتی مرغداری های اطراف رشت انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی- توصیفی بر روی نمونه های نای و ریه جوجه های گوشتی از 50 گله مختلف از مرغداری های گوشتی اطراف شهرستان رشت انجام شد. در ابتدا نمونه های مثبت برونشیت عفونی با روش RT-PCR شناسایی شدند. سپس سروتیپ این جدایه ها با واکنش nested PCR اختصاصی تیپ های ماساچوست و 793B تعیین گردید. یافته ها: از 50 نمونه مورد بررسی 32 نمونه (64%) آلوده به برونشیت عفونی بودند. واکنش nested PCR نشان داد که 10 مورد (31.25 درصد) از نمونه های مثبت برونشیت عفونی آلوده به سروتیپ 793B و 22 نمونه (68.75 درصد) آلوده به سروتیپ ماساچوست بودند. نتیجه گیری: واکسن H120 سروتیپ ماساچوست تنها محافظت نسبی در برابر سایر سروتیپ ها ایجاد می کند. حضور سروتیپ 793B در منطقه ضرورت وارد کردن این سروتیپ در ترکیب با سروتیپ ماساچوست در برنامه واکسینایسون را به منظور ایجاد ایمنی مناسب در گله ها مشخص می نماید. پرونده مقاله
      • دسترسی آزاد مقاله

        6 - شناسایی لیشمانیا اینفانتوم با روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز آشیانه‌ای در مخازن حیوانی شهرستان بویراحمد
        حسین انصاری عبدالعلی مشفع کاوس صلح جو پویا خدادادی
        سابقه و هدف: لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) از جمله بیماری&zwnj;های انگلی مشترک بین انسان و حیوان است که عامل آن لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی آن سگ و سگ&zwnj;سانان می&zwnj;باشد. هدف از این پژوهش، شناسایی مولکولی انگل مولد لیشمانیوز احشایی در سگ&zwnj;های شهرستان بویراحمد چکیده کامل
        سابقه و هدف: لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) از جمله بیماری&zwnj;های انگلی مشترک بین انسان و حیوان است که عامل آن لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی آن سگ و سگ&zwnj;سانان می&zwnj;باشد. هدف از این پژوهش، شناسایی مولکولی انگل مولد لیشمانیوز احشایی در سگ&zwnj;های شهرستان بویراحمد بود. مواد و روش&zwnj;ها: در این پژوهش برای جداسازی انگل لیشمانیا، از گسترش&zwnj;های تماسی تهیه شده از طحال و کبد 15 قلاده سگ دارای علایم بالینی لیشمانیوز احشایی شهرستان بویراحمد در سال 89 استفاده گردید. همچنین جنس و گونه انگل پس از تهیه مقاطع بافتی از اندام&zwnj;های حیوانات مورد پژوهش با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره&zwnj;ای پلی&zwnj;مراز آشیانه&zwnj;ای شناسایی گردید. یافته&zwnj;ها: از مجموع نمونه&zwnj;های مورد بررسی لیشمانیا اینفانتوم در 14 مورد (3/93%) از بافت&zwnj;های کبد، طحال و اسمیرهای آن&zwnj;ها و لیشمانیا ماژور در 1 نمونه (7/6%) با روش واکنش زنجیره&zwnj;ای پلی&zwnj;مراز آشیانه&zwnj;ای تشخیص داده شدند. نتیجه&zwnj;گیری: نتایج مولکولی نشان داد که عامل اصلی لیشمانیوز احشایی در مخازن حیوانی (سگ) شهرستان بویراحمد لیشمانیا اینفانتوم می&zwnj;باشد. اما لیشمانیا ماژور نیز می&zwnj;تواند به عنوان یکی از عوامل ایجاد کننده لیشمانیوز احشایی در سگ وسگ&zwnj;سانان به شمار آید. پرونده مقاله