ردیابی ژنهای حدت شیگاتوکسین و اینتیمین در اشریشیاکلی جدا شده از یک کبوتر با علایم گوارشی: گزارش موردی
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستی
مجید غلامی آهنگران
1
(بخش بهداشت و بیماری های طیور، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران)
مهرداد استادپور
2
(دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران.)
آنیتا خانی
3
(دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران)
کلید واژه: اﻳﻨﺘﻴﻤﻴﻦ, ﺷﻴﮕﺎﺗﻮﻛﺴﻴﻦ, اﺷﺮﻳﺸﻴﺎﻛﻠﻰ, ﻫﻤﻮﻟﻴﺰﻳﻦ, کبوتر,
چکیده مقاله :
زمینه و هدف: اشریشیاکلی به عنوان فلور در دستگاه گوارش تمام خونگرمها و از جمله کبوتر یافت میشود. این باکتری دارای ژنهای حدت زیادی است که از جمله میتوان به شیگاتوکسین و اینتیمین اشاره کرد. اینتیمین مسئول اتصال اشریشیاکلی به سلولهای مخاطی روده بوده و شیگاتوکسین باعث مرگ سلول میشود. هدف از مطالعه اخیر بررسی حضور این ژن های حدت در اشریشیاکلی جداشده از یک مورد عفونت گوارشی در کبوتر به منظور امکان بیماریزایی اشریشیاکلی با منشا کبوتر در انسان می باشد. مواد و روش ها: سوآب کلواکی از یک کبوتر با علایم گوارشی ارجاع شده به کلینیک دامپزشکی تهیه شد. ﭘﺲ از ﻛﺸﺖ و ﺧﺎﻟﺺﺳﺎزى، ﺑﺎ ﺗﺴﺖﻫﺎى ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻰ ﺑﻪ ﺗﺄﻳﻴﺪ ﻣﻮارد آﻟﻮدﮔﻰ اﺷﺮﻳﺸﻴﺎﻛﻠﻰ ﭘﺮداﺧﺘﻪ ﺷﺪ. ﺳﭙﺲ ﺑﺎ اﺳﺘﺨﺮاج DNA ﺑﻪروش ﺟﻮﺷﺎﻧﺪن، ﺑﻪ ردﻳﺎﺑﻰ ژنﻫﺎى ﻫﻤﻮﻟﻴﺰﻳﻦ، اﻳﻨﺘﻴﻤﻴﻦ و زﻳﺮ واحدﻫﺎى ١ و ٢ ﺷﻴﮕﺎﺗﻮﻛﺴﻴﻦ (stx1 و stx2) ﭘﺮداﺧﺘﻪ ﺷﺪ. ژن های مورد نظر با پرایمر های اختصاصی و براساس تکثیر ژن های هدف با طول قطعه مشخص (به ترتیب 165، 890، 614 و 779 جفت بازی) مورد شناسایی قرار گرفتند. نتایج: ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻧﺸﺎن داد سویه اشریشیاکلی جدا شده از کبوتر با علایم اسهال واجد ژنهای حدت شیگاتوکسین 1 و اینتیمین بوده و فاقد ژن کد کننده همولیزین و شیگاتوکسین 2 میباشد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد ژنهای حدت شیگاتوکسین 1 و اینتیمین در کبوتر واجد علایم گوارشی قابل ردیابی است. لذا با توجه به این نتایج، بر خلاف تصورات قبلی، ممکن است پرندگان منشا اشریشیاکلی شیگاتوکسوژنیک باشند و ممکن است علایم اسهال در کبوتر با حضور اشریشیاکلی واجد ژن شیگاتوکسین و اینتیمین در ارتباط داشته باشد که لازم است برای اثبات آن بررسیهای بیشتری انجام شود.
Background & Aim : Escherichia coli (E. coli) is found as a flora in the digestive tract of all warm-blooded animals, including pigeons. This bacterium has many virulent genes including shigatoxin and intimin. Intimin is responsible for binding E. coli to intestinal mucosal cells, and shigatoxin causes cell death. The aim of recent study was to investigate the presence of these virulence genes in E. coli isolated from a case of gastrointestinal infection in pigeons in order to determine the possibility of pathogenic E. coli with origin of pigeons in humans. Materials and Methods: In this regard, to identify virulent genes in E. coli isolated from diarrheic pigeon, a cloaca swab was prepared from a pigeon with diarrhea symptoms. After microbial culture and purification, the infection to E. coli was confirmed by biochemical examinations. Then, DNA was extracted by boiling method and hemolysin, intimin and sub unites of shigatoxin (stx1 & stx2) genes were detected. The target genes were identified by specific primers based on amplification of target genes with specific fragment lengths (165, 890, 614 and 779 bp, respectively). Results: The E. coli strain isolated from pigeon with symptom of diarrhea had the virulence genes of stx1 and intimin and lacks the genes encoding hemolysin and stx2. Conclusion: The results showed that the virulence genes of shigatoxin 1 and intimin were detectable in pigeons with gastrointestinal symptoms. According to these results, contrary to previous perceptions, birds may be the source of shigatoxogenic E. coli, and the symptoms of diarrhea in pigeons may be related to the presence of Shigatoxin and intimine in E. coli, which needs to be further investigated.
_||_