تشخیص مولکولی باکتری آئروموناس هیدروفیلا در ماهیان قرمز آکواریومی و قزل‌آلای رنگین‌کمان پرورشی استان چهارمحال و بختیاری

محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکی

فیروز فدایی‌فرد ¹

1 - دانشگاه آزاد اسلامی، واحد شهرکرد، دانشیار گروه بهداشت و بیماری‌های آبزیان، دانشکده دامپزشکی، شهرکرد، ایران.

تاریخ دریافت : 1392/12/03 تاریخ پذیرش : 1393/06/05 تاریخ انتشار : 1393/03/01

کلید واژه: آئروموناس هیدروفیلا, سپتی‌سمی آئروموناس‌های متحرک, قزل‌آلای رنگین‌کمان, ماهی قرمز, چهار محال و بختیاری,

چکیده مقاله :

باکتری آئروموناس هیدروفیلا عامل سپتی سمی آئروموناس‌های متحرک در ماهیان آب‌های شیرین و شور است.مطالعه حاضر با هدف ردیابی باکتری آئروموناس هیدروفیلا در ماهیان قرمز آکواریومیو قزل آلای رنگین کمان پرورشی استان چهارمحال و بختیاری صورت گرفت. بدین منظور، از مراکز فروش ماهیان زینتی تعداد 50 عدد ماهی قرمز و از 6 مزرعه پرورش ماهی قزل آلای رنگین کمان به ازای هر مزرعه 10 عدد و در مجموع 60 عددبه طور تصادفی از ماهیان مشکوک به بیماری نمونه برداری انجام گردید. در خصوص ماهیان قرمز از میانگین وزنی 3 تا 5 گرم و در ماهیان قزل آلای رنگین کمان از میانگین وزنی 10 تا 20 گرم استفاده شد. ابتدا از کبد و کلیه تمام ماهیان نمونه‌برداری باکتریایی و کشت بر روی محیط آگار خون دار انجام گرفت.سپسمحیط‌ها به انکوباتور منتقل و پس از گرمخانه‌گذاری در دمای 22 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت، بر روی پرگنه‌های رشد یافته آزمون‌های کاتالاز، اکسیداز و رنگ گرم انجام شد و آن‌هایی که گرم منفی، کاتالاز و اکسیداز مثبت بودند در محیط کشت ریملر شاتس (محیط انتخابی آئروموناس هیدروفیلا) کشت داده شد و پس از گرمخانه‌گذاری در دمای 22 درجه سانتی گراد به مدت 48 ساعت، از پرگنه‌های رشد یافته با استفاده از زوج پرایمرهایالیگونوکلئوتیدی مربوط به ژن lipآزمون PCRصورت پذیرفت. طی بررسی مولکولی باکتری‌های جدا شده از ماهیان قزل آلای رنگین کمان تعداد 9 جدایه و با بررسی ماهیان قرمز تعداد 6 جدایه به عنوان آئروموناس هیدروفیلا شناسایی گردید.با توجه به ردیابی باکتری آئروموناس هیدروفیلا در هر دو گروه ماهیان قرمز و قزل آلای رنگین کمان، در صورت رعایت نکردن اصول مدیریت بهداشتی در آبزی پروری این باکتری می‌تواند منجر به شیوع سپتی سمی همراه با تلفات گردد.

چکیده انگلیسی:

   Aeromonas hydrophilia   is the etiologic agent of motile aeromonas septicaemia, one of the most important bacterial diseases of fresh and marine water fishes. The aim of the present study was detection of A. hydrophilia in the aquarium goldfish and cultured rainbow trout in Chaharmahal va Bakhtiary province.  In this study 50 goldfish from aquarium fish shops and 60 rainbow trouts suspected of having the disease from 6 farms (10 fish in each farm) were randomly collected. The average weight in goldfish and rainbow trout samples were 3-5 g and 10-20 g, respectively. Sampling was performed from kidney and liver, and inoculated into blood agar and incubated at 22°C for 24 hours. Pure colonies which are grown on the mediums were tested by catalase, oxidase and gram staining, then those of gram-negative, catalase and oxidase positive were diagnosed, and cultured on Shotts-Rimler medium (as selective medium for A. hydrophila). These mediums were incubated at 22 °C for 24-48 h. The typical colonies were tested by using oligonucleotide primers of lip gene by PCR method. In light of molecular analysis of all specimens, 9 and 6 isolates from rainbow trout and gold fishes were identified as A. hydrophila respectively. Due to the detection of A. hydrophila in both cultured rainbow trout and aquarium goldfish, the bacteria can lead to septicemia with mortality if the health management principles are not observed in fish farming.

منابع و مأخذ:

• اخلاقی، م. (1377). برخی فاکتورهای استرس‌زا در ظهور عفونت‌های ناشی از آئوموناس هیدروفیلا (Aeromonas hydrophila) در کپور ماهیان پرورشی، مجله علمی شیلات ایران، سال 7، شماره 4، صفحات: 8-1.


• اسماعیلی، ف. و پیغان، ر. (1376). آلودگی ماهی کپور علفخوار به ارگانیسم‌های شبیه آئرووناس‌های متحرک. مجله علمی شیلات ایران، سال 6، صفحات: 8-1.


• شاهسونی، د. و راد، م. (1378). گزراش سپتی سمی آئروموناس هیدورفیلا در ماهی اسکار آکواریومی، Astronotus ocellatus. مجله دامپزشکی ایران، دوره 2، شماره 3، صفحات: 70 - 69.


• ربانی خوراسگانی، م. و سلطانی، م. (1378). ارزیابی تکنیک آنتی‌بادی درخشان به روش غیرمستقیم برای تشخیص ویبریو آنگوئیلاروم (Vibrio anguillarum) و آئروموناس هیدروفیلا (Aeromonas hydrophila) در کارگاه‌های پرورش ماهی و میگو. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، دوره 54، شماره 2، صفحات: 87-73.


• رضویلر، و.، حسنی طباطبایی، ع. و آذری تاکامی، ق. (1360). بررسی و نقش بیماری‌زایی آئروموناس هیدروفیلا در بعضی بیماری‌های ماهی. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، دوره 3، شماره 3، صفحات: 33-21.


• هادی، ف.، قاسمی، م.، سائزی‌قاسمی، م.، عیسی‌زاده، ک.، حقیقی، س. و خارا، ح. (1391). شناسایی مولکولی آئروموناس هیدروفیلا Aeromonas hydrophila جدا شده از ماهی کپور نقره‌ای،  Hypophthalmichthys molitrix. دومین کنگره ملی علوم آزمایشگاهی دامپزشکی، 22 تا 23 آذر ماه، دانشگاه سمنان.
  
  
  
  • Abulhamd, A.T. (2009). Characterization of Aeromonas hydrophila Isolated from Aquatic Environments Using Phenotypic and Genotyping Methods. Research Journal of Agriculture and Biological Science, 5(6): 923-931.
  
  
  • Ahmed, M. and El-Ashram, M. (2002). On Aeromonas hydrophila Infection among cultured tilapias: A biological, histopathological and management study. Egyptian Journal of Aquatic Biolology and Fishery, 6(3): 181-202.
  
  
  • Alsaphar, S.A.A. and Al-Faragi, J.K.H. (2012). Detection and study of the experimental infection of Aeromonas strain in the common carp (Cyprinus carpio L.). The Iraqi Journal of Veterinary Medicine, 36 (2):222-230.
  
  
  • Cascon, A., Anguita, J., Hernanz, C., Sanchez, M., Fernandez, M. and Navarro, G. (1996). Identification of Aeromonas hydrophila Hybridization Group 1 by PCR Assays, Applied and Environmental Microbiology, 62(4): 1167-1170.
  
  
  • Chang, C.I., Hung, P.H., Wu, C.C., Cheng, T.C., Tsai, J.M., Lin, K.J., et al. (2012). Simultaneous Detection of Multiple Fish Pathogens Using a Naked-Eye Readable DNA Microarray. Sensors, 12(3): 2710-2728.
  
  
  • Choresca Jr, C.H., Gomez, D.K., Han, J., Shin, S., Kim, J., Jun, J., et al. (2010).  Molecular detection of Aeromonas hydrophila isolated from albino catfish, Clarias sp. reared in an indoor commercial aquarium. Korean Journal of Veterinary Research, 50(4): 331-333.
  
  
  • Fadaeifard, F., Momtaz, H., Rahimi, E. and Mirzakhani, A. (2011). Detection of Streptococcus iniae and Lactococcus garvieae by multiplex polymerase chain reaction in some rainbow trout farms of Iran. African Journal of Biotechnology, 11(2): 260-263.
  
  
  • Fadaeifard, F., Sharifzadeh, A., Raisi, M., Mazrooi, H., Safari, S. and Moumeni, M. (2014). Molecular identification of Yersinia ruckeri isolates by polymerase chain reaction test in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. European Journal of Experimental Biology, 4(1): 1-4.
  
  
  • Jang, S., Liu, H., Su, J., Dong, F., Xiong, F., Liao, L., et al. (2010). Construction and characterization of two bacterial artificial chromosome libraries of grass carp. Marine Biotechnology, 12: 261-266.
  
  
  • Lee, S., Kim, S., Oh, Y. and Lee, Y. (2000). Characterization of Aeromonas hydrophila isolated from rainbow trout. Korea Journal of Microbiology, 38(1): 1-7.
  
  
  • Lewbart, G.A. (2001). Bacteria and ornamental fish. Seminars in Avian and Exotic Pet Medicine, 10: 48-56.
  
  
  • Shotts, E.B. Jr and Rimler, R. (1973). Medium for the isolation of Aeromonas hydrophila. Journal of Applied Microbiology, 26(4): 550-553.
  
  
  • Singh, V., Chaudhary, D.K., Mani, I., Somvanshi, P., Rathore, G. and Sood, N. (2010). Genotyping of Aeromonas hydrophila by Box Elements. Microbiology, 79(3): 370-373.
  
  
  • Uma, A., Rebecca, G., Meena, S. and Saravanabava, K. (2010).PCR detection of Putative aerolysin and hemolysin genes in an Aeromonas hydrophila isolate from infected Koi Carp (Cyprinus Carpio). Tamilnadu Journal of Veterinary and Animal Science, 6(1): 31-33.
  
  
  • Wang, G., Clark, C.G., Lium, C., Pucknell, C., Munro, C.K., Kruk, T.M.A.C., et al. (2003). Detection and characterization of the hemolysis genes in Aeromonas hydrophila and Aeromonas sobria by multiplex PCR. Journal of Clinical Microbiology, 41: 1048-1054.
  
  
  • Wang, Y., Tang, C., Yu, X., Wang, Y. and Yue, H. (2008), Detecting pathogenic Aeromonas hydrophila in fish by triplex PCR. Wei Sheng Wu Xue Bao (Chinese journal), 48(7): 947-951.
  
  
  • Zheng, W., Cao, H. and Yang, X. (2012). Grass carp (Ctenopharyngodon idellus) infected with multiple strains of Aeromonas hydrophila. African Journal of Microbiology Research, 6(21): 4512-4520.