شناسایی و تعیین پادگن‌های ایمنی‌زای موثر Ascaridia galli در ماکیان پرورشی منطقه تبریز
محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکییعقوب قره‌داغی 1 , ناصر حقوقی راد 2 , پرویز شایان 3 , علی اسلامی 4
1 - دانش آموخته انگل‌شناسی دامپزشکی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران، ایران.
2 - گروه انگل‌شناسی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران، ایران.
3 - گروه انگل‌شناسی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.
4 - گروه انگل‌شناسی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.
کلید واژه: آسکاریدیا گالی, ایمن‌سازی, مرغ لگهورن سفید,
چکیده مقاله :
در بررسی انجام شده طی سال 1384 که در شهر تبریز صورت گرفت، توانایی یک واکسن تجربی ساخته شده از لاروهای هوموژن شده آسکاریدیا گالی ارزیابی شد. به یک گروه پنج تایی از مرغ‌های نژاد لگهورن سفید، دوبار و هر دفعه 100 میکروگرم از لاروهای هوموژن شده آسکاریدیا گالی رقیق شده در یک میلی لیتر PBS که در یک میلی لیتر ادجوانت فروند امولسیفیه شده بود، به صورت داخل دهانی خورانده شد. ایمن‌سازی نوبت دوم در روز 21 به صورت داخل دهانی انجام گردید. گروه بعدی (پنج مرغ نژاد لگهورن سفید) یک میلی لیتر PBS امولسیفیه شده در یک میلی لیتر از همان ادجوانت دریافت کردند. در روز 33 به هر مرغ تقریباً 10000 عدد تخم عفونی زای آسکاریدیا گالی خورانده شد. از زمان اولین تجویز تا چالش مرغ‌ها با تخم‌های عفونی زا، از هر مرغ هر 10 روز یکبار خون اخذ شد و پس از آن تا انتهای زمان بررسی، این کار به صورت هفتگی انجام گردید. سرم‌ها توسط روش الایزا و وسترن بلاتینگ آزمایش شدند. مرغ‌ها هشت هفته پس از چالش با تخم‌های عفونی زا، برای به دست آوردن نماتودها کالبدگشایی شدند. مرغ‌های واکسینه کاهش 76 درصدی در میانگین EPG، 74 درصد کاهش در میانگین کرم‌های نر، 79 درصد کاهش در میانگین تعداد کرم‌های ماده و 77 درصد کاهش در میانگین تعداد کل کرم‌ها را نشان دادند. اختلاف معنی‌دار در میانگین دانسیته نوری سرم‌ها در الایزا مورد توجه بود (001/0>P). پروتئین‌های آسکاریدیا گالی به وسیله SDS-PAGE جدا شدند. سرم‌های گروه واکسینه واکنش بالایی را در وسترن بلاتینگ نشان دادند.
In a trial, in Tabriz area, the ability of an experimental vaccine from the larval homogenate of Ascaridia galli was evaluated during the year 1384. A group of 5 white leghorn hens were immunized twice with 100 micrograms larval homogenate of Ascaridia galli diluted in 1ml PBS and emulsified in 1ml Freund’s adjuvant orally. Booster immunization was also administered orally on day 21 The other group (5 white leghorn hens) received 1 ml PBS emulsified in 1ml of the same adjuvant. On day 33 each hen was administered approximately 10,000 Ascaridia galli infective eggs orally. Blood samples were collected from the animals in a 10 day interval from the first immunization until infective challenge and weekly thereafter until the end of study. Sera were tested by ELISA and Western-blotting. Hens were necropsied 8 weeks post challenge with infective eggs for recovery of the nematodes. Vaccinated hens showed a 76 percent reduction in mean EPG, 74 percent reduction in the average number of male worms, 79 percent reduction in the average number of female worms and 77 percent reduction in the mean number of total worms. Significance in mean optical density of sera in ELISA was noticed (p<0.001). Proteins of Ascaridia galli were separated by SDS-PAGE. The vaccinated sera indicated a high reactivity in Western-Blotting.
اسلامی، ع. (1374): کرم شناسی دامپزشکی، جلد دوم، انتشارات دانشگاه تهران، صفحه: 5-1.
2- ارفع، ف. (1374): کرم شناسی پزشکی، جلد دوم، تهران، انتشارات بنفشه، صفحه: 6-1.
3- حقوقی راد، ن. (1367): تشخیص آزمایشگاهی بیماری های انگلی روده، چاپ دوم، انتشارات دانشگاه تهران، صفحه: 200-199.
4- زهری، م. (1381): اصول پرورش طیور، چاپ دوازدهم، انتشارات دانشگاه تهران، صفحه: 17-15.
5- محمود زاده، ع. و مهرانی، ح. (1382): کاربرد روش های مولکولی در انگل شناسی تحلیلی، (ترجمه)، تالیف: میشل، تی. چاپ پنجم، تهران، انتشارات گوهر منظوم، صفحه: 45 و 12.
6- میرزایانس، ا.، راک، ه.، انوار، م. و نیاک، ع. (1354): روش های آزمایشگاهی بیماری های انگلی در دامپزشکی، چاپ هفتم، انتشارات دانشگاه تهران، صفحه: 9-1.
7- Becker, K.L. (1998): Purification and characterization of p54, p63 (p120) from Ascaridia galli, Immunology Journal. 213: 198-203.
8- David, J. M., Michael, T. (1996): Purification and characterization of prostaglandine- H E- isomerase, a sigma – class glutation s- transferase from Ascaridia galli, Biochemistry Journal. 313: 223-227.
9- Dellman, H.H. and Brown, E. N. (1997): A survey into the prevalence of Ascaridia galli in Texas commercial broiler chickens. Avian disease. 85(3): 172-184.
10- Eklund, J., Loomis, E. and Abplanalp, H. (1988): Genetic resistance of white leghorn chickens to Ascaridia galli. Arch Gefluegelkd. 42: 185-191.
11- Growther, J.R. (1995): Methods in Molecular Biology, ELISA: Theory and practice. Humana. U.S.A., 42.
12- Harlow, E. and Lane, D. (1988): Antibodies a laboratory manual. Cold spring laboratory, U.S.A., pp: 461-470, 560.
13- Head, K. and Wand west, G. S. (1989): Study of the Immunologic responses for Ascaridia galli in poultry, Current Science India. 73(5): 356-370.
14- Jitla, D.S., Guraya, S.S. and Parshad, V.R. (1991): Effects of host intestinal secretions and antimetabolite on survival and mobility of Ascaridia galli. Biomedical Letters. 41 (2): 181, 73-79.
15- Karanv, F.N., Mc guire, T.C., Davis, W.C., Besser, T.E. and Jasmer, D.P. (1997): CD+4 T-lymphocytes
contribute to protective gut antigens. Parasite Immunology. 19:435-445.
16- Krystyna, Z. (2001): Purification and characterization of - amylases from the intestine and muscle of Ascaridia galli, Current Science India. 87(4): 380-385.
17- Mcclure, S. (2000): Poultry immunity to gastrointestinal nematode parastie. Available at: http://www.Csiro.Au/Scips.htm
18- Muimo, R. and Isaac, R.E. (1995): Nematod Arylalkylamine N-Acetyl- Transferases: Purification and charcaterization from Ascaridia galli. University of Leeds, Lsz 9JT U.K. International Worm Meeting, pp: 335-338.
19- Peter, F. (2001): Conformational and functional analysis of the lipid binding protein Ag-NPA-1 from the parasitic nematode Ascaridia galli, Indian Journal of Animal Sciences. 65(3): 55-59.
20- Rao, M.V.S. and Lal, S.S. (1991): Immunophysiological changes induced by Ascaridia galli in white leghorn chickens. Comarative Physiology and Ecology. 16 (4): 134 - 136.