مطالعه تجربی آپوپتوز در لوزالمعده جوجه‌های SPF متعاقب عفونت با ویروس آنفلوانزای سروتیپ H9N2

محورهای موضوعی : آسیب شناسی درمانگاهی دامپزشکی

یوسف دوستار ¹ , داریوش مهاجری ²

1 - گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز، تبریز، ایران
2 - گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز، تبریز، ایران

تاریخ دریافت : 1386/11/08 تاریخ پذیرش : 1387/06/04 تاریخ انتشار : 1387/09/01

کلید واژه: لوزالمعده, جوجه, ویروس آنفلوانزای طیور, آپوپتوزیس,

چکیده مقاله :

ویروس آنفلوانزا عامل مرگ سلولی در بافت‌های حیوانات و انسان می‌باشد. مرگ سلولی حاصله از این ویروس می‌تواند به دو صورت نکروز و آپوپتوز اتفاق بیفتد. در این تحقیق به ارزیابی نوع مرگ سلولی در بافت لوزالمعده جوجه‌های عفونی شده با ویروس آنفلوانزای طیور سروتیپ H9N2(A/chicken/ Iran/ 772/2000) به‌طور تجربی پرداخته شده است. در بررسی حاضر، تعداد 20 قطعه جوجه SPF با سن 3 هفته در دو گروه برابر به‌طور تصادفی توزیع گردید. گروه اول با 2/0 میلی‌لیتر با رقت 1 به 10 و تیتر EID50 5/7 10 ویروس آنفلوانزا و گروه دوم نیز با حجمی برابر، توسط محلول سالین نرمال به‌روش داخل بینی تلقیح گردید. پس از 72 ساعت، از بافت لوزالمعده جوجه‌‌ها نمونه‌برداری انجام شد و از نمونه‌های پایدار شده در فرمالین بافر 10%، مقاطع میکروسکوپی با ضخامت 5 میکرون و رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین- ائوزین تهیّه گردید. در مطالعات ریزبینی بافت‌ لوزالمعده، اختلاف میانگین تعداد سلول‌های آپوپتوتیک و نکروتیک بین گروه‌های شاهد و تیمار معنی‌دار بود (005/0>p). نتایج این بررسی نشان داد که ویروس آنفلوانزای سروتیپ H9N2 توانائی القاء آپوپتوز در سلول‌های آسینار و جزائر آلفا و بتای لوزالمعده طیور را دارد. مجله دامپزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز، 1387، دوره 2، شماره 3، 187-181.

چکیده انگلیسی:

     Influenza virus is the cause of cell death in animal and human tissues. Cell death can take place in the form of necrosis or apoptosis. In this study, the type of cell death in the pancreatic tissue of chickens infected by H9N2 serotype of influenza virus (A/chicken/Iran/772/2000) is experimentally investigated. In the present study, 20 SPF chickens with the age of 3- weeks were randomly allocated to two equal groups.  The first group was infected with 0.2 ml of 1:10 dilution and 107.5 EID50 titer of the virus and the second group with equal volume of normal saline solution intranasaly. After 72 hours, specimens were collected from the pancreatic tissue and 5 μm thick microscopic sections were prepared from specimens fixed in 10% buffered formalin and stained with hematoxylin and eosin. Histopathological examination of the pancreatic tissue revealed that there was significant difference in the mean number of apoptotic and necrotic cells between the control and treatment groups (p<0.005). The results of this study indicated that the H9N2 serotype of influenza virus has the potential to induce apoptosis in acinar, alpha and beta islet cells of pancreas.

منابع و مأخذ:

1. دوستار، ی. (1383): مطالعه آزمایشی آپوپتوزیس القاء شده توسط ویروس عامل بیماری بورس عفونی جوجه‌ها با استفاده از متد تشخیصی TUNEL و میکروسکوپ الکترونی. پایان‌نامه جهت دریافت دکترای تخصصی دانشگاه تهران، دانشکده دامپزشکی، صفحات: 184-180.


2. حبل‌الورید، م.، سهرابی حقدوست، ا.، پوربخش، س.ا. و غلامی، م.ر. (1382): مطالعه هیستوپاتولوژیک ضایعات ناشی از تزریق داخل وریدی تحت تیپ ₂N₉H ویروس آنفلوانزای تیپ A در جوجه، مجله علمی- پژوهشی انیستیتو تحقیقاتی واکسن و سرم‌سازی رازی، شماره 55، صفحات:51-41.


3. Barber, G.N. (2001): Host defense viruses and apoptosis. Cell Death Differ., 8: 113-26.


4. Frankfurt, O.S. and Krishan, A. (2001): Identification of apoptotic cells by formaldehyde–induced DNA denaturation in condensed chromatin. Histochem Cytochem., 49: 369-78.


5. Ito, T., Kobayashi, Y., Morita, T., Horimoto, G. and Kawaoka, Y. (2002): Virulent influenza a viruses induces apoptosis in chickens. Virus Res., 84: 27-35.


6. Kwon, Y.K., Joh, S.J. and Kim, M.C. (200): Highly pathogenic avian influenza (H5N1) in the commercial domestic ducks of South Korea. Avian Pathol., 34(5): 367-370.


7. Kunio, O., Manabu, N., Bo, Y., Toshio, B. and Toshio, Y. (2003): Apoptosis induced by influenza virus-hemagglutinin stimulation may be related to fluctuations of cellular oxidative condition. Biol. Pharma. Bull., 26: 141-147.


8. Liu, J., et al. (2003): H₉N₂ influenza viruses prevalent in poultry in china is phylogenetically distinct from A/quail/ Hong kong/G1/97prsumed to be the donor of the internal protein genes of the H₅N₁ Hong Kong/ 97virus. Avian Pathology, 32: 552-560.


9. Morris, J., Nightingale, S., Harry, S. and Clive, S. (2005): Influenza, A. Virus induced apoptosis is a multifactorial process: Explanting reverse genetics to elucidate the role of influenza A virus proteins in virus–induced apoptosis. Virol., 335: 198-211.


10. Mehranpour, M.J., Dadras, H., Khodakaram-Tafti, A., Rahimian, A. and Toffan, A. (2007): Pathological finding of highly pathogenic avian influenza virus A/Duck/Vietnam/12/2005(H5N1) in turkey. International Journal of Poultry Science, 9: 679-683.


11. Mo, O.I., Brugh, M., Fletcher, J., Rowland, G.N. and Swayne, H. (1997): Comparative pathology of chickens experimentally inoculated with avian influenza virus of low and high pathogenicity. Avian Disease, 41:125-136.


12. Perkins, L.E.L. and Swayne, D. (2003): Varied pathogenecity of a hong kong-origin H5N1 avian influenza virus in four passé ring species and budgerigars. Vet. Pathol., 40: 14-24.


13. Schultuz, C., Stacey, D.S., Neumann, N., Kawaoka, G. and Shaw, H. (2002): Influenza Virus NS1 protein Induces Apoptosis in cultured cells. Virginia, 75: 17-22.


14. Schultz, C., Koci, M., Thompson, E. and Tumpey, T.M. (2003): Examining the cellular pathways involved in influenza virus induced apoptosis. Avian Diseases, 968-71.


15. Schultz, R., Harrington, J. and William, J.R. (2003): Apoptosis: Programmed cell death at a molecular level. Semin. Arthritis Rheum., 32:345-369.


16. Suarez, D.L. and Schultz-Cherry, S. (2000): Immunology of avian influenza Virus. A review of avian influenza virus, 24: 269-283.


17. Zambon, M.C. and Meduiro, R. (2001): Pathogenesis of influenza A and B in humans. Rev. Med. Viro., 11: 227-41.