بررسی الگوی بیان ژن گیرنده فاکتور رشد شبه انسولین-1 تحت تأثیر فاکتور نکروز تومور-آلفا در سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسان
محورهای موضوعی : مجله پلاسما و نشانگرهای زیستی
زینب صحرائیان
1
(دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات فارس، دانشجوی دکتری زیست شناسی تکوینی، دانشکده علوم پایه، شیراز. ایران.)
مریم آیت اللهی
2
(استادیار دانشگاه علوم پزشکی شیراز، مرکز تحقیقات پیوند و ترمیم اعضاء بیمارستان نمازی، شیراز. ایران.)
رامین یعقوبی
3
(دانشیار دانشگاه علوم پزشکی شیراز، مرکز تحقیقات پیوند و ترمیم اعضاء بیمارستان نمازی، شیراز. ایران.)
کلید واژه: مغز استخوان انسان, سلولهای بنیادی مزانشیمی, فاکتور نکروز تومورآلفا 1, گیرنده فاکتور رشد شبه انسولین,
چکیده مقاله :
مقدمه و هدف:نارساییهای حاد کبدی از جمله بیماریهای مهم کبدی محسوب میشوند که خطر مرگ و میر آنها بسیار بالا میباشد.پیشنهاد شده است که سلول درمانی جایگزین مناسبی به جای پیوند کل کبد، در درمان نارساییهای حاد کبدی میباشد. سلولهای بنیادی مزانشیمی یکی از مهمترین سلولها در زمینه سلول درمانی هستند که از منابع مختلفی از جمله مغز استخوان بهدست می آیند. فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF-I) پس از اتصال به گیرنده خود (IGF-IR) در ترمیم بافت کبد تأثیر بهسزایی دارد. ما در این تحقیق به بررسی الگوی بیان ژن IGF-IRدر سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسان تحت تأثیر فاکتور نکروز تومور-آلفا (TNF-α) پرداخته شده است.روشکار:پس از استخراج سلولهای بنیادی مزانشیمی از حدود 5 میلیلیتر مغز استخوان افراد دهنده سالم مراجعه کننده به بخش پیوند مغز استخوان بیمارستان نمازی شیراز (پس از اخذ رضایتنامه)، سلولها جداسازی و کشت شدند. شناسایی آنها با شیوه فلوسایتومتری انجام گرفت. سلولهای پاساژ چهارم با مقدار ng/mL1 در زمانهای مختلف (2، 10 ، 24 و 48 ساعت) تحت تأثیر فاکتور التهابی TNF-αتیمار شدند. میزان بیان ژن IGF-IRدر سلولهای بنیادی مزانشیمی تیمار نشده و تیمار شده با TNF-αبا روش Real TimePCRمورد بررسی قرار گرفت.یافتهها:نتایج آنالیز فلوسایتومتری نشان داد که سلولهای بنیادی مزانشیمی نسبت به بیان مارکر CD90مثبت بودند، در حالیکه نسبت به بیان مارکرهای CD45وCD80منفی میباشند. در سلولهای بنیادی مزانشیمی تیمارشده با TNF-αنسبت به گروه کنترل افزایش بیان ژن IGF-IRمشاهده شد. بیشترین میزان بیان ژن IGF-IRدر گروه سلولی تیمارشده باng/mL1 فاکتور التهابی به مدت 10 ساعت بهدست آمد. نتیجه گیری:الگوی افزایش بیان ژن IGF-IRدر سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسان تحت تأثیر TNF-α، از یک رفتار وابسته به زمان تبعیت میکند. این نتیجه میتواند در آینده در زمینه سلول درمانی نارساییهای حاد کبدی کاربرد کلینیکی داشته باشد.
Inroduction and ObjectiveAcute liver failure (ALF) is a severe liver injury accompanied by sustained liver damage. It is imperative that new approaches for repairing the liver are developed. Cell-based therapy has been implicated in the treatment of liver diseases. Mesenchymal stemcells (MSCs) from various sources such as bone marrow are available. These cells are one of them ajorcandidates incell therapy.The production of insulin-like growth factor-I (IGF-I) increases in the regenerating liver. The IGF-I in liver regeneration is effective after binding to insulin-like growth factor-I receptor (IGF-IR).We hypothesized that tumor necrosis factor-αstimulate MSCs to cause IGF-IRexpression.Materials and Methods:Bone marrow was aspirated fromhuman normal donor after informing consent. Cells were isolated and cultured. Identification of cells with flow cytometric analysis was performed. Fourth passage cells were treated with tumor necrosis factor-α (TNF-α)at 1 ng/mL doseand incubated at different times (2, 10, 24 and 48 hours).The IGF-IRgene expression was investigatedusing real time-polymerase chain reaction technique.Results: Flow cytometric analysis showed that the human bone marrow MSCs were positive for CD90 and negative for CD45 and CD80.The IGF-IRgene expression was increased in TNF-α treated in comparison with untreated cells.Conclusion:Increase gene expression pattern of IGF-IR in human bone marrow derived MSCs may be used for clinical stem cell therapy in ALF.
