ارزیابی حضورباکتری های کمپیلوباکترججونی و لیستریا مونوسیتوژنزدرمنابع آب شرب شهرکرمانشاه قبل از کلرزنی براساس مقایسه کشت وPCR

محورهای موضوعی : Business Administration and Entrepreneurship

سهیلا حیدریان ¹ (Ph.D. Student of Microbiology, shahr-e- Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran)
آتوسا فردوسی ² (Supervisor, Ph.D. of mycology, shahr-e- Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran)
محمدحسن شاه حسینی ³ (Supervisor, Ph.D. of Biotechnology, shahr-e- Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran)
طاهر محمدیان ⁴ (Advisor, Ph.D. of Biochemistry, shahr-e- Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran)

تاریخ دریافت : 1400/01/04 تاریخ پذیرش : 1400/11/17 تاریخ انتشار : 1402/05/01

کلید واژه: آب شرب, : لیستریا مونوسیتوژنز, کمپیلوباکترججونی, واکنش زنجیره ایی پلیمراز,

چکیده مقاله :

زمینه وهدف : در نتیجه رشد روزافزون جمعیت جهان پیش بینی می شود که آب به عنوان یکی از کمیاب ترین منابع در قرن بیست و یکم مطرح باشد .با وجود پیشرفت های فراوان در زمینه تصفیه آب و فاضلاب ،بیماری های ناشی از آب هنوز یک تهدید برای سلامت مردم دنیا محسوب می شود.

باکتری لیستریا مونوسیتوژنز یک پاتوژن است که باعث لیستریوزیس میگردد. همچنین این پاتوژن می‌تواند باعث مننژیت، سپتی سمی و وقوع سقط جنین در انسان شود. یکی از راه های انتقال این میکروارگانسیم آب ومواد غذایی است. شناسایی سریع و دقیق آن در پیشگیری از موارد عفونت نقش بسزایی دارد.

وهمچنین با توجه به اهمیت کمپیلوباکتر ججونی درآب و صنایع غذایی و ایجاد عفونت و مسمومیت و مشکلات گوارشی در انسان، شناسایی این باکتری‌ می‌تواند گامی مؤثر در جلوگیری از آلودگی آب به کمپیلوباکتر‌ججونی باشد.

هدف ازاین مطالعه شناسایی باکتری های لیستریا مونوسیتوژنز وکمپیلوباکترججونی باروش کشت وPCR ومقایسه دوروش درمنابع تامین کننده آب شهر کرمانشاه میباشد.

روش کار: نمونه ها شامل1چشمه 1سراب و1سدو124حلقه چاه عمیق از منابع تامین کننده آب شهر کرمانشاه که در 18مخزن ذخیره جمع آوری شد ه استخراج DNA از باکتری استاندارد کمپیلوباکتر ججونی وهمچنین لیستریا مونوسیتوژنزبا استفاده از کیت DNG-Plus انجام گرفت واکنش زنجیره ایی پلیمراز با استفاده از آغازگرهای اختصاصی بهینه شد. پس از تعیین اختصاصیت و حد تشخیص واکنش زنجیره ایی پلیمراز نمونه های جمع آوری شده آب مورد برسی قرارگرفت وهمزمان هم نمونه ها کشت داده شد.ومورد برسی قرار گرفت.

چکیده انگلیسی:

Abstract: 
Introduction: As the world population grows, it is predicted that freshwater supplies will be rare in the 21st century. Despite abundant advances in water and wastewater treatment, waterborne diseases still threaten the health of the people of the world. Listeria monocytogenes bacterium is a pathogen that causes listeriosis. This pathogen can also cause meningitis, poisonous sepsis, and abortion in humans. One way of transmitting this microorganism is water and foodstuffs. Quick and accurate identification plays an important role in preventing infections. Also, due to the importance of Campylobacter jejuni in water and food industries and causing infection, toxication, and digestive problems in humans, the identification of this bacterium can be an effective step in preventing water contamination with Campylobacter jejuni. The aim of the present study was to identify Listeria monocytogenes and Campylobacter jejuni through culture and PCR and compare them in the water supply of Kermanshah city.
Methods: 18 samples were collected from different water supplies of Kermanshah. DNA was extracted from standard Campylobacter jejuni and Listeria monocytogenes using a DNG-Plus kit. PCR reaction was optimized using specific primers. After determining the specificity and PCR detection limit, the collected water samples were examined and at the same time, the samples were cultured and examined.
Findings: From 18 samples of water supply sources in Kermanshah by PCR, Campylobacter jejuni was isolated from all samples, and Listeria monocytogenes was isolated from 17 samples, and also 4 cases of Campylobacter jejuni and 2 cases of Listeria monocytogenes were isolated by culture method. The results showed that PCR has a better performance than culture for detecting Listeria monocytogenes and Campylobacter jejuni.

منابع و مأخذ:

References

1. NRC. Biosolids applied to land: Advancing standards and practices. National Academy Press. 2002.


2. Meghdadi H, Khosravi AD, Sheikh AF, Alami A, Nassirabady N. Isolation and characterization of Listeria monocytogenes from environmental and clinical sources by culture and PCR-RFLP methods. Iran J Microbiol. 2019.


3. Paillard D, Dubois V, Thiebaut R, Nathier F, Hoogland E, Caumette P, et al. Occurrence of Listeria spp. in effluents of French urban wastewater treatment plants. Appl Environ Microbiol. 2005.


4. Ryser ET, Marth EH. Listeria, listeriosis, and food safety: Third edition. Listeria, Listeriosis, and Food Safety, Third Edition. 2007.


5. Hocking AD. Foodborne microorganisms of public health significance. 6th ed. Hocking AD, editor. Australian Institute of Food Science and Technology incorporated (AIFST Inc.); 2003.


6. Adedayo O, Kirkpatrick BD. Campylobacter jejuni Infections: update on presentation, diagnosis, and management. Hosp Physician. 2008.


7. Dingle KE, Van den Braak N, Colles FM, Price LJ, Woodward DL, Rodgers FG, et al. Sequence typing confirms that Campylobacter jejuni strains associated with Guillain-Barré and Miller-Fisher syndromes are of diverse genetic lineage, serotype, and flagella type. J Clin Microbiol. 2001.


8. Shakerian A, Rokni N, Sharifzadeh A, Alagha S, Talebian R. Campylobacter jejuni as a potential pathogen in liver of broilers chickens in slaughtered & retail market broilers in Shahr-e-Kord, Iran. 2005.


9. M. M, S E. The role of campylobacter jejuni in campylobacteriosis. J Kerman Univ Med Sci [Internet]. 2009;16(2):188. Available from: magiran.com/p620116.


10. Colmegna I, Cuchacovich R, Espinoza LR. HLA-B27-Associated Reactive Arthritis: Pathogenetic and Clinical Considerations. Clinical Microbiology Reviews. 2004.


11. Waage AS, Vardund T, Lund V, Kapperud G. Detection of small numbers of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli cells in environmental water, sewage, and food samples by a seminested PCR assay. Appl Environ Microbiol. 1999.


12. Miljkovi-Selimovi B, Lavrni D, Mori O, Ng LK, Price L, Uturkova L, et al. Enteritis caused by Campylobacter jejuni followed by acute motor axonal neuropathy: A case report. J Med Case Rep. 2010.


13. Galanis E. Campylobacter and bacterial gastroenteritis. CMAJ. Canadian Medical Association Journal. 2007.


14. Eiland LS, Jenkins LS. Optimal Treatment of Campylobacter Dysentery. J Pediatr Pharmacol Ther. 2008.


15. APHA. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Stand Methods. 2005.


16. Al‐ghazali MR, Al‐azawi SK. Detection and enumeration of Listeria monocytogenes in a sewage treatment plant in Iraq. J Appl Bacteriol. 1986.


17. Wai SN, Nakayama K, Umene K, Moriya T, Amako K. Construction of a ferritin-deficient mutant of Campylobacter jejuni: Contribution of ferritin to iron storage and protection against oxidative stress. Mol Microbiol. 1996.


18. Champion OL, Gaunt MW, Gundogdu O, Elmi A, Witney AA, Hinds J, et al. Comparative phylogenomics of the food-borne pathogen Campylobacter jejuni reveals genetic markers predictive of infection source. Proc Natl Acad Sci U S A. 2005.


19. Khan IUH, Gannon V, Kent R, Koning W, Lapen DR, Miller J, et al. Development of a rapid quantitative PCR assay for direct detection and quantification of culturable and non-culturable Escherichia coli from agriculture watersheds. J Microbiol Methods. 2007.


20. Hocking A.D., Arnold G., Jenson I., Newton K., Sutherland P. Foodborne microorganisms of public health significance (5th edn). Aust Inst Food Sci Technol Inc Sydney. 1997.


21. Arvanitidou M, Papa A, Constantinidis TC, Danielides V, Katsouyannopoulos V. The occurrence of Listeria spp. and Salmonella spp. in surface waters. Microbiol Res. 1997.


22. Mohammad Mahdi Soltan Dallal et al. The Study of Campylobacter Frequency in Foodborne Disease Outbreaks in Iran. 2017;16(September):9–19.


23. Ali AM, Qureshi AH, Rafi S, Roshan E, Khan I, Malik AM, et al. Frequency of Campylobacter Jejuni in Diarrhoea/Dysentery in Children in Rawalpindi and Islamabad. J Pak Med Assoc. 2003.


24. Bodhidatta L, Vithayasai N, Eimpokalarp B, Pitarangsi C, Serichantalergs O, Isenbarger DW. Bacterial enteric pathogens in children with acute dysentery in thailand: Increasing importance of quinolone-resistant Campylobacter. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 2002.


25. Sari A, Jamshidi A, Bassami MR. Isolation and identification of Campylobacter jejuni from poultry carcasses using conventional culture methods and multiplex PCR assay. Int J Vet Res. 2011;5(1):31–73.