شناسایی عوامل بیماری بلایت باکتریایی گیاه یاس هلندی در تهران و کرج
محورهای موضوعی : دو فصلنامه تحقیقات بیماریهای گیاهی
زهرا نوبختی
1
(دانش آموخته کارشناسی ارشد، گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.)
نادر حسن زاده
2
(دانشیار، گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.)
جواد رزمی
3
(استادیار، گروه گیاه‌پزشکی، دانشکده کشاورزی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.)
کلید واژه: بلایت باکتریایی, یاس هلندی, پارک‌های تهران و کرج, ژن 16S rRNA,
چکیده مقاله :
طی ماه‌های تابستان تا پاییز سال 1396 تعداد 50 نمونه مشکوک به بیماری باکتریایی از گیاه یاس هلندی از پارکها و فضای سبز شهرهای تهران و کرج جمع آوری شد. نمونه‌ها جهت بررسیهای بیشتر به آزمایشگاه منتقل شد. ابتدا از نمونه‌های آلوده پس از شستشو و ضد عفونی سطحی با محلول 1% آب ژاول و شستشوی مجدد با آب مقطر استریل، سوسپانسیون لازم تهیه شد. سپس یک لوپ از هر سوسپانسیون روی محیط کشتهای نوترینت آگار(NA) و کینگس-بی (KB) کشت گردید. تک کلنی‌های غالب در هر پتری ابتدا خالص سازی و سپس اثبات بیماریزایی شدند. جدایههای باکتریایی که قادر به ایجاد فوق حساسیت روی گیاه شمعدانی و لکه برگی و پژمردگی روی گیاه یاس هلندی بودند انتخاب شدند. از بین جدایههای منتخب، تعداد 7 جدایه که دارای صفات فنوتیپی متفاوت از بعد صفات مرفولوژیکی، فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی بودند انتخاب شدند. با استفاده از PCR، ژن 16S rRNA جدایههای منتخب توسط جفت آغازگر عمومی P1 و P6 تکثیر شدند. پس از توالی یابی محصولات PCR و بلاست توالیها مشخص شد که 7 جدایه منتخب به جنس/گونه Stenotrophomonas maltophilia، Pseudomonas plecoglossida، Staphylococcus sp.، Ochrobactrum sp.، Achromobacter sp.، Bacillus sp. و Paenibacillus sp. تعلق دارند.
Abstract
During the summer months until the fall of 2017, 50 diseased samples of ligustrum plants suspected to bacterial disease were collected from all around Tehran and Karaj parks and green spaces. The diseased samples were transferred to the laboratory for further investigation. The dominant single colonies with distinguished morphology were selected and fulfilled their pathogenicity on geranium and detached stems and leaves of the host plant. Seven pathogenic bacterial isolates were further analyzed by morphological, physiological and biochemical traits. Using PCR, the 16S rRNA gene of the selected isolates was amplified DNAs were first extracted by alkaline lysis method and their 16S rRNA genes were amplified with primer pair P6/P1.
The PCR products were sequenced by Macrogen Co. (Seoul, Korea) and the edited sequences were compared with deposited sequences in Genbank nucleotide database (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). According to the results, heterogeneous species include strains of Stenotrophomonas maltophilia, strains of Pseudomonas plecoglossida, strains of Bacillus sp., strains of Paenibacillus sp., strain of Ochrobactrum sp., strains of Achromobacter sp., and strains of Staphylococcus epidermidls were identified. The presence of a wide range of not-so-well-known bacteria, but the pathogen confirms their importance, at least as secondary pathogens. This is the first report of isolating certain novel bacterial agents on ligustrum in Iran.
Keywords: Bacterial leaf spot, ligustrum, Tehran and Karaj parks, 16S rRNA gene.
_||_
