اثر بازدارنده رشد تایموکوئینون بر سلول‌های سرطانی راجی در لنفوم بورکیت
محورهای موضوعی : فصلنامه زیست شناسی جانوری
مرتضی داودی
1
,
شهریار سعیدیان
2
,
رضا صغیری
3
,
زهرا زمانی
4
,
غلامرضا بخشی خانیکی
5
1 - گروه بیوشیمی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
2 - گروه بیوشیمی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
3 - گروه بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
4 - گروه بیوشیمی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
5 - گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران
کلید واژه: سیاه دانه, ریل تایم پی سی آر, لنفوم بورکیت, تایموکوئینون, سلول‌های راجی,
چکیده مقاله :
گیاهان دارویی به علت ارزانی و قابل دسترس بودن و پذیرش بهتر بیماران، مورد توجه هستند. یکی از این گیاهان سیاه دانه (Nigella sativa) است. در این مطالعه اثر ضد تکثیری تایموکوئینون که ترکیب اصلی روغن دانه های سیاه دانه است، بر روی رده‌ی سلول‌های راجی بررسی می شود. سلول‌های راجی لنفوسیت‌های B سرطانی هستند که در لنفوم بورکیت در مراکز زایای این سلول‌ها دیده می شوند. در تحقیق حاضر، سلول‌های راجی با رقت های مختلف تایموکوئینون از صفر تا 1000 میکروگرم در میلی لیتر تیمار شدند و تعیین درصد سلول‌های زنده با روش تریپان بلو و تست MTT صورت گرفت. همچنین جهت نشان دادن درصد سلول‌ها در مراحل مختلف رشد از روش فلوسایتومتری و کیت Annexin V-FITC/PI استفاده شد. بیان ژن c-Myc که مهمترین ژن تغییر یافته در ایجاد لنفوم بورکیت است با روش Real Time - PCR مورد بررسی قرار گرفت. آنالیز آماری نیز با استفاده از نرم افزار SPSS 2020 انجام شد. این مطالعه نشان داد که تایموکوئینون می تواند بطور وابسته به غلظت و وابسته به زمان موجب مهار رشد سلول‌های راجی شود. تایموکوئینون ضمن سرکوب بیان ژن c-Myc با درصد قابل توجهی موجب ورود سلول‌های راجی به مرحله مرگ برنامه ریزی شده و یا آپوپتوز می شود و توان بالقوه در درمان های جانبی بیماری لنفوم بورکیت را دارد.
Medicinal plants are of interest due to their cheapness, accessibility and better acceptance by patients. One of these plants is black seed (Nigella sativa). In this study, the anti-proliferative effect of thymoquinone, which is the main component of black seed oil, is investigated on Raji cells. Raji cells are cancerous B lymphocytes that are seen in the germinal centers of Burkitt's lymphoma. In present study, Raji cells were treated with different dilutions of thymoquinone from 0 to 1000 μg/ml and the percentage of living cells was determined by trypan blue method and MTT test. Also, flow cytometry and Annexin V-FITC/PI kit were used to show the percentage of cells in different stages of growth. The expression of c-Myc gene, which is the most important altered gene in the development of Burkitt's lymphoma, was investigated by Real Time-PCR method. Statistical analysis was also done using SPSS 2020 software. This study showed that thymoquinone can inhibit the growth of Raji cells in a concentration-dependent and time-dependent manner. Thymoquinone, while suppressing the expression of c-Myc gene with a significant percentage, causes Raji cells to enter the stage of programmed death or apoptosis, and has the potential to be used as an adjunctive treatment for Burkitt's lymphoma.
1-Abukhader M.M. 2013. Thymoquinone in the clinical treatment of cancer: Fact or fiction? Pharmacognosy Reviews, 7(14): 117-120.
2- Adhikary S., Eilers M. 2005. Transcriptional regulation and transformation by Myc proteins. Molecular Cell Biology, 6(8):635- 645.
3- Banerjee S., Kaseb A.O., Wang Z., Kong D., Mohammad M., Padhye S., Sarkar F.H., Mohammad R.M. 2009. Antitumor activity of gemcitabine and oxaliplatin is augmented by thymoquinone in pancreatic cancer. Cancer Research, 69(13):5575-5583.
4- Beaulieu M.E., Castillo F., Soucek L. 2020. Structural and Biophysical Insights into the Function of the Intrinsically Disordered Myc Oncoprotein. Cells, 9(1038):1-27.
5- Burkitt D.P. 1983. The discovery of Burkitt’s lymphoma. Cancer, 51(10):1777-86.
6- Burkitt D.P. 1958. A sarcoma involving the jaws in African children. The British Journal of Surgery, 46(197):218-223.
7- Caponetti G., Bagg A. 2017. Demystifying the diagnosis and classification of lymphoma: a hematologist/oncologist’s guide to the hematopathologist’s galaxy. Journal of Community and Supportive Oncology, 15(1):43-48.
8- Chen H., Liu H., Qing G., 2018. Targeting oncogenic Myc as a strategy for cancer treatment. Signal Transduction and Targeted Therapy, 3(5):1-7.
9- Gilani A., Jabeen Q., Ullah Khan M. 2004. A review of medicinal uses and pharmacological activities of Nigella sativa. Pakistan Journal of Biological Sciences, 7: 441-451.
10- Hannan A., Rahman A., Sohag A.A., Uddin J., Dash R., Sikder M.H., Rahman S., Timalsina B., Munni Y.A., Sarker P.P., Alam M., Mohibbullah M., Haque N., Jahan I. Hossain T., Afrin T., Rahman M., Arif T.U., Mitra S., Oktaviani D.F., Khan K., Choi H.J., Moon I. Kim B. 2021. Black Cumin (Nigella sativa L.): A Comprehensive Review on Phytochemistry, Health Benefits, Molecular Pharmacology, and Safety. Nutrients, 13(6):1784.
11- Hu H.M., Kanda K., Zhang L., Boxer L.M. 2007. Activation of the c-Myc p1 promoter in Burkitt's lymphoma by the hs3 immunoglobulin heavy-chain gene enhancer. Leukemia, 21(4):747-753.
12- Kalkat M., Resetca D., Lourenco C., Chan P., Wei Y., 2018. MYC Protein Interactome profiling reveals functionally distinct regions that cooperate to drive tumorigenesis. Molecular Cell, 72(5):836-848.
13- Khan A., Tania M., Fu S., Fu J. 2017. Thymoquinone, as an anticancer molecule: from basic research to clinical investigation. Oncotarget, 8(31): 51907-51919.
14– Lewis D.W., Lilly S., Jones K.L. 2020. Lymphoma: Diagnosis and Treatment. Am Fam Physician, 101(1):34-41.
15- Ling Yong, CL., Wei Ow D.S., Tandiono T., Mei Heng L.L., Keung Chan K.K., Dieter Ohl C., Klaseboer E., Wan Ohl S., Hwa Choo A.B. 2014. Microbubble-mediated sonoporation for highly efficient transfection of recalcitrant human B- cell lines. Biotechnology Journal, 9(8):1081-1087.
16- Meerloo J.V., Kaspers G.J.L., Cloos J. 2015. Cell sensitivity assays: The MTT assay. Methods in Molecular Biology. Springer Ukraine, MIMB, (731): 237-244.
17- Misteli T. 2011. The inner life of the genome. HHS Author Manuscripts, 304(2): 66-73.
18- Mugnaini E.N., Ghosh N. 2016. Lymphoma. Prim Care. Lymphoma Research Gate, 43(4):661-675.
19- Nickavar B., Mojab F., Amoli M. 2003. Chemical composition of the fixed and volatile oils of Nigella sativa L. from Iran. National Library of Medicine, 58(9/10):629-631.
20- Padhye S., Banerjee S., Ahmad A., Mohammad R., Sarkar F.H. 2008. From here to eternity-the secret of Pharaohs: Therapeutic potential of black cumin seeds and beyond. Cancer Therapy, 6(b):495-510.
21- Potre O., Pescaru M., Sima A., Ionita L., Tudor R., Borsi E., Samfireag M., Potre C. 2021. Evaluation of the Relapse Risk and Survival Rate in Patients with Hodgkin Lymphoma: A Monocentric Experience. Medicina (Kaunas), 57(10): 1026.
22- Pourbakhsh H., Taghiabadi E., Abnous K., Hariri A.T., Hosseini S.M., Hosseinzadeh H. 2014. Effect of Nigella sativa fixed oil on ethanol toxicity in rats. Iran Journal Basic Medicine, 17(12):1020-31.
23- Pulvertaft, R.J.V. 1965. A study of malignant tumours in Nigeria by short-term tissue culture. Journal of Clinical Pathology, 18(3):261-273.
24- Rieger A.M., Nelson K.L., Konowalchuk J.D., Barreda, D.R. 2011. Modified annexin v/propidium iodide apoptosis assay for accurate assessment of cell death. Journal of Visualized Experiments, 24(50):2597.
25- Roix J.J., McQueen P.G., Munson P.J., Parada L.A., Misteli T. 2003. Spatial proximity of translocation-prone gene loci in human lymphomas. Nature Genetics, 34(3):287-291.
26- Schmitz R., Ceribelli M., Pittaluga S., Wright G., Staudt L.M., 2014. Oncogenic Mechanisms in Burkitt Lymphoma. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine, 4(2):a014282.
27- Singh S.K., Apata T., Gordetsky J.B., Singh R., 2019. Docetaxel Combined with Thymoquinone Induces Apoptosis in Prostate Cancer Cells via Inhibition of the PI3K/AKT Signaling Pathway. Cancers, 11(1390):1-13.
28- Wasylishen A., Penn L.Z. 2010. Myc The Beauty and the Beast. Genes Cancer, 1(6):532-541.
29- Yu Z., Wang R., Fok W.C., Cloes A., Salmon A.B., Perez V.I. 2015. Rapamycin and Dietary Restriction Induce Metabolically Distinctive Changes in Mouse Liver. Journals of Gerontology: Biological Sciences, 70(4):410-420.
_||_