تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس به روش Nested PCR در گاوهای شیری مشکوک به بیماری یون
محورهای موضوعی : میکروب شناسی تشخیصیعباس دوستی 1 , سعادت مشکلانی 2
1 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد
2 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد
کلید واژه: گاو شیری, Nested-PCR, مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس, یون,
چکیده مقاله :
سابقه و هدف: یون یک بیماری مزمن روده ای در نشخوار کنندگان اهلی و وحشی می باشد که عامل ایجاد آن مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس است. این باکتری عامل بیماریزای مشترک بین انسان و دام است که گسترش جهانی دارد و نیازمند روشی مطمئن برای پیشگیری و کنترل می باشد. هدف از این پژوهش، ارائه روشی سریع و دقیق براساس Nested PCR برای تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس در مدفوع گاو می باشد. مواد و روش ها: از تعداد 120 نمونه مدفوع گاو های مشکوک به بیماری یون، استخراج DNA صورت گرفت سپس با استفاده از پرایمر های اختصاصی ژن IS900واکنش Nested PCR تنظیم و انجام شد. محصولات PCR بدست آمده روی ژل آگارز الکتروفورز گردید. یافته ها: از مجموع 120 نمونه مورد بررسی، 22 مورد (33/18 درصد) به مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس آلوده بودند که در آزمون PCR مثبت تشخیص داده شدند. نتیجه گیری: تکنیک Nested PCR یکی از روش های سریع، مطمئن و کم هزینه برای تشخیص مایکوباکتریوم پاراتوبرکیلوسیس محسوب می شود.
Backgorund and Objectives: Johne’s disease is a chronic intestinal disease of domestic and wild ruminants that is caused by Mycobacterium paratuberculosis. So that Mycobacterium paratuberculosis is a widespread zoonotic disease, necessary to use prevention and control methods to eliminate this agent matter needs the attention of corresponding managers. The aim of this study is base on use of Nested PCR as an accurate and rapid method to detection of Mycobacterium paratuberculosis bovine feces. Material and Methods: Fecal samples from 120 dairy cattle were collected and DNA extraction was performed from the samples. Then, samples were evaluated with specific primers for the Mycobacterium paratuberculosis-specific IS900 gene by Nested-PCR assay. Finally, PCR products were electrophoresis on agarose gel. Results: In total, from 120 samples were enrolled in this study, 22 specimen (18.33%) were found positive on the basis of Nested-PCR analysis. Conclusion: Nested PCR technique is considered as a fast, reliable and affordable assay to detect Mycobacterium paratuberculosis.
