Serological and Molecular Detection of Akabane Virus in Iran

محورهای موضوعی : Camel

غ.ع. کجوری ¹ (Department of Clinical Science, School of Veterinary Medicine, Shahrekord University, Shahrekord,)
ز. داوودی ² (Department of Veterinary Medicine, Shahrekord University, Shahrekord, Iran)
ح. ممتاز ³ (Department of Animal Science, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran)

تاریخ دریافت : 1393/07/02 تاریخ پذیرش : 1393/10/25 تاریخ انتشار : 1394/06/10

کلید واژه: RT-PCR, akabane disease, ruminants, Uterus, virus,

چکیده مقاله :

The present study was conducted on sixty healthy female domestic ruminants that suffered from still births or abortion, to find sero-positive cases and also to determine the probable role of uterine tissue in diagnosis of akabane viral infection and viral persistency. Because of this, a serological test (ELISA) and molecular (RT-PCR) diagnostic methods were used to find the seropositive cases and also the presence of the akabane viral genome in uterine samples. Among 2400 head, sixty female animals (20 cattle, 20 sheep and 20 goats) with a history of still births or abortion (suspected group) and sixty healthy ones (control group) were selected and referred to the slaughter house for further evaluations. Blood and uterine body samples were taken and stored at -20 and -70 ˚C, respectively. At the beginning of the experiment all serum samples were tested for brucellosis and 3 sheep of the suspected group and 1 sheep of the control group were positive. The remaining samples were selected for further study. Results of ELISA showed that among 17 suspected sheep only one of them was positive for akabane virus and among 20 suspected goats only three of them were inconclusive. It’s notable that no positive or inconclusive cases were found in suspected cattle and also the control group. The prevalence rate of akabane virus antibody among 57 suspected animals was 1.75 percent. RT-PCR assay was conducted on uterine tissues from the suspected animals and results showed that all samples were free of the akabane genome. According to the obtained results the presence of antibody against akabane virus in suspected sheep and goats was proven or substantiated for the first time in Iran.

چکیده انگلیسی:

تحقیق حاضر بر 60 رأس نشخوارکننده ماده با تاریخچه سقط جنین و یا مرده‌زایی به منظور شناسایی موارد مثبت ابتلا به ویروس آکابان و سپس تعیین نقش بافت رحم در انتقال بیماری و بقای ویروس به انجام رسید. به همین منظور از آزمایش سرولوژیک الیزا و مولکولی RT-PCR بهره گرفته شد تا به ترتیب پس از شناسایی موارد مثبت اقدام به ردگیری ژنوم ویروس در بافت رحم شود. پس از انجام مطالعه میدانی، جمعیتی بالغ بر 2400 رأس شامل60 رأس دام مشکوک (20 رأس گاو، 20 رأس گوسفند و 20 رأس بز) با تاریخچه سقط جنین یا مرده زایی (گروه مطالعه) و 60 رأس دام سالم (گروه شاهد) شناسایی و جهت بررسی بیشتر به کشتارگاه ارجاع شدند. ابتدا در سالن انتظار اقدام به خونگیری از ورید وداج و پس از کشتار ضمن بررسی دقیق لاشه و طی شرایط آسپتیک اقدام به نمونه برداری از رحم شد. نمونه‌ها در اسرع وقت و در کنار یخ به آزمایشگاه منتقل و تا زمان انجام آزمون الایزا و RT-PCR به ترتیب در برودت 20- و 70- درجه سانتیگراد نگهداری شدند. قبل از انجام هر گونه آزمایش ابتدا نمونه‌های سرمی از نظر حضور پادتن بر علیه بروسلا مورد بررسی قرار گرفتند که از گروه مطالعه و شاهد، به ترتیب سه رأس و یک رأس واجد پادتن بر علیه بروسلا بودند و در نهایت آزمون‌های سرولوژیک و مولکولی تنها بر نمونه‌های عاری از بروسلوز صورت پذیرفت. نتایج آزمون الایزا حکایت از مثبت بودن یک مورد از 17 رأس گوسفند و مشکوک بودن 3 بز از 20 رأس داشت. بر این اساس میزان آلودگی به ویروس آکابان در جمعیت 57 رأسی معادل 75/1 درصد برآورد شد. اما در بررسی مولکولی بافت رحم تمامی نمونه‌ها عاری از آلودگی به ویروس آکابان تشخیص داده شدند. بر اساس نتایج به دست آمده حضور آنتی‌بادی بر علیه ویروس آکابان در جمعیت گوسفند و بز مورد مطالعه برای اولین بار در ایران به اثبات رسید.

منابع و مأخذ:

Ahourai P., Gholami M.R., Ezzi A., Kargar R., Khedmati K., Aslani A., Rahmani F. and Zarrin-Naal E. (1992). Bovine congenital arthrogryposis and hydranencephaly outbreaks attributed to akabane virus infection in Iran. Arch. Inst. Razi. 1, 51-56.

Brenner J., Tsuda T., Yadin H. and Kato T. (2004). Serological evidence of Akabane virus infection in northern Israel in 2001. J. Vet. Med. Sc. 66, 441-443.

Inaba Y. and Matsumato M. (1990). Akabane Virus. Pp. 467-480 in Virus Infections of Ruminants, Z. Dinter and B. Morein, Eds. Elsevier Science Publishers, Amsterdam, Netherlands.

Jennings M. and Mellor P.S. (1989). Culicoides: biological vectors of akabane virus. Vet. Microbiol. 21, 125-131.

Jun Q., Qingling M., Zaichao Z., Kuojun C., Jingsheng Z., Minxing M. and Chuangfu C. (2012). A serological survey of akabane virus infection in cattle and sheep in northwest China. Trop. Anim. Health Prod. 44, 1817-1820.

Lee J.K., Park J.S., Choi J.H., Paik B.K., Lee B.C., Hwang W.S., Kim J.H., Jean Y.H., Haritani M., Yoo H.S. and Kim D.Y. (2002). Encephalomyelitis associated with akabane virus infection in adult cows. Vet. Pathol. 39, 269-273.

Liao Y.K., Lu Y.S., Goto Y. and Inaba Y. (1996). The isolation of akabane virus (Iriki strain) from calves in Taiwan. J. Basic Microbiol. 36, 33-39.

Pugh D.G. and Baird A.N. (2012). Sheep and Goat Medicine. Saunders Elsevier, St. Louis, Missouri, USA.

Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. and Constable P.D. (2007). Veterinary Medicine. A Text Book of the Diseases of Cattle, Sheep, Pig, Goat and Horse. Saunders Elsevier, St. Louis, Missouri, USA.

Tarlinton R., Daly J., Dunham S. and Kydd J. (2012). The challenge of schmallenberg virus emergence in Europe. Vet. J. 194, 10-18.

Taylor W.P. and Mellor P.S. (1994). The distribution of akabane virus in the Middle East. Epidemiol. Infect. 113, 175-185.

Tsuda T., Yoshida K., Yanase T., Ohashi S. and Yamakawa M.

     (2004). Competitive enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of the antibodies specific to akabane virus. J. Vet. Diagn. Invest. 16, 571-576.

Yoshida K. and Tsuda T. (1998). Rapid detection of antigenic diversity of akabane virus isolates by dot immunobinding assay using neutralizing monoclonal antibodies. Clin. Vacc. Immunol. 5, 192-198.