• Home
  • monoclonal antibody
    • List of Articles monoclonal antibody

      • Open Access Article

        1 - Amplification Of vh and vl Gene Fragments from RNA Source Of Single Human Plasma Cell
        Laya Esmati Jalil Fallah Mehrabadi Hamideh Rouhaninejad Masomeh Bazaz
        Inroduction and ObjectiveThe first generation of therapeutic monoclonal antibodies was isolated from mouse. One of the disadvantages of them was stimulating immune response in human. Fully human monoclonal antibodies are significantly considered due to their high effici More
        Inroduction and ObjectiveThe first generation of therapeutic monoclonal antibodies was isolated from mouse. One of the disadvantages of them was stimulating immune response in human. Fully human monoclonal antibodies are significantly considered due to their high efficiency and low immunogenic potential. Nowadays different kind of techniques such as phage display and single B cell technology are used to produce fully human mAb. The aim of this project was amplification of VH and VL genes from RNA source of Human plasma cell.Materials and Methods:With the aim of isolation and amplification of VH and VL regions, single cell RT-PCR reaction was performed. Single plasma cells were lysed by using cell lysis buffer. By using synthesized cDNA from plasma cells and antibody specific primers, antibody genes were amplified. Six pair of primers utilized to amplify the variable region of heavy chain (VH) and light chain (VL). Restriction sites and the linker sequences were placed on primer sequences due to respectively cloned in target plasmid and to link VH and VL. Results: Electrophoresis represented VH and VL fragments with 400 bp length were amplified by PCR. The VH and VL gene sequences were BLAST separately and showed 97% similarity among other antibodies gene sequence.Conclusion: Primer sets were selected and designed which contain linker sequence for ScFv construction, NcoI and NotI restriction sites in order to clone directly into an expression vector. Manuscript profile
      • Open Access Article

        2 - تولید آنتی ‏بادی مونوکلونال علیه پروتئین G1 بیان شده پروکاریوتی از ویروس تب بی‏دوام گاوی
        ر. پسندیده م.ر. صیفی آباد شاپوری م.ت. بیگی نصیری
        اپیتوپ G1 از گلیکوپروتئین G ویروس تب بی ‏دوام گاوی (BEFV) از لحاظ ژنتیکی و آنتی ‏ژنیکی در بین جدایه‏ های مختلف از این ویروس حفاظت شده است و تنها با آنتی ‏بادی‏ های خنثی‏ کننده ضد این ویروس واکنش می‏ دهد. بنابراین این آنتی‏ژن، یک نامزد منا More
        اپیتوپ G1 از گلیکوپروتئین G ویروس تب بی ‏دوام گاوی (BEFV) از لحاظ ژنتیکی و آنتی ‏ژنیکی در بین جدایه‏ های مختلف از این ویروس حفاظت شده است و تنها با آنتی ‏بادی‏ های خنثی‏ کننده ضد این ویروس واکنش می‏ دهد. بنابراین این آنتی‏ژن، یک نامزد مناسب برای توسعه آزمون ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) برای شناسایی سرولوژیکی حیوانات آلوده است. هدف از این مطالعه، تولید آنتی ‏بادی مونوکلونال علیه آنتی‏ژن G1 نوترکیب بیان شده در اشرشیاکلی بود. به این منظور، هیبرید‏های سلولی سوماتیک بین سلول‏ های میلومای SP2/0 و سلول‏ های طحال حاصل از موش ‏های Balb/c ایمن شده با پروتئین هم جوش MBP-G1 ایجاد شد. پس از سه مرتبه کلونینگ، پایداری ترشح آنتی‏ بادی درکلون ‏های مثبت با روش الایزا و واکنش آنتی‏ بادی‏‏ های مونوکلونال علیه G1 نوترکیب توسط آزمایش وسترن بلات تأیید شد. آنتی‏ بادی‏ های اختصاصی تولید شده علیه آنتی ­ژن نوترکیب G1 ممکن است به ­منظور طراحی آزمایش‏ های تشخیصی برای ویروس BEF در آینده مناسب باشند. Manuscript profile