Evaluation of serum biochemical profile using black radish (Raphanus sativus) in mice

Subject Areas : Experimental physiology and pathology

Seyedeh Ommolbanin  Ghasemian ¹ (Department of Veterinary, Behbahan Branch, Islamic Azad University, Behbahan, Iran.)
Maryam  Maryam Karimi-Dehkord ² (Department of clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran)
Ali  Maddahi nejad ³ (D.V.M. Student, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran)
Hooman  Yousefi ⁴ (D.V.M. Student, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran)

Received: 2023-05-02 Accepted : 2023-08-20 Published : 2024-02-20

Keywords: Black radish, Hydroalcoholic extract, Liver function, Kidney function, Lipid profile,

Abstract :

Background & Aim: Considering the presence of active compounds in black horseradish, the present study aimed to evaluate the effect of hydroalcoholic extract of black radish on liver and kidney function in small laboratory mice. Materials & Methods: In this study, 40 small laboratory mice were randomly divided into four groups of control and experimental groups (50, 100, and 150 mg/ml black radish extract). Intraperitoneal injection of hydroalcoholic extract of black radish was performed in the experimental groups. On the 21st day, the mice were anesthetized and then blood sampling was done. Blood urea nitrogen (BUN), creatinine, alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), triglyceride and cholesterol levels were compared between the groups. Results: The levels of BUN, creatinine, ALP, AST and ALT in the experimental groups were not significantly different from the control group (P>0.05). Treatment with horseradish extract led to a decrease in fat profiles in the experimental group compared to the control group. By increasing the dose of the extract, the amount of triglycerides decreased. This reduction was significant in the highest dose (150 mg/kg) (P<0.05). In addition, black radish extract led to a significant decrease in cholesterol in all three doses compared to the control group (P<0.05). Conclusion: The results of the present study indicate the absence of liver and kidney toxicity of the extract in the doses used in the study. It can also be said that in physiological conditions, the use of black horseradish hydroalcoholic extract reduces the fat profile

References:

1. Banihani SA. Radish (Raphanus sativus) and diabetes. Nutrients. 2017;9(9):1014.
2. Ahn M, Kim J, Hong S, Kim J, Ko H, Lee NH, et al. Black Radish (Raphanus sativus L. var. niger) Extract Mediates Its Hepatoprotective Effect on Carbon Tetrachloride-Induced Hepatic Injury by Attenuating Oxidative Stress. J Med Food. 2018;21(9):866-75.
3. Castro‐Torres IG, De la O‐Arciniega M, Gallegos‐Estudillo J, Naranjo‐Rodríguez EB, Domínguez‐Ortíz MÁ. Raphanus sativus L. var niger as a source of phytochemicals for the prevention of cholesterol gallstones. Phytotherapy Research. 2014;28(2):167-71.
4. Afsharypuor S, Balam MH. Volatile constituents of Raphanus sativus L. var. niger seeds. Journal of Essential Oil Research. 2005;17(4):440-1.
5. Lugasi A, Blázovics A, Hagymási K, Kocsis I, Kéry Á. Antioxidant effect of squeezed juice from black radish (Raphanus sativus L. var niger) in alimentary hyperlipidaemia in rats. Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives. 2005;19(7):587-91.
6. Salah‐Abbès JB, Abbès S, Ouanes Z, Houas Z, Abdel‐Wahhab MA, Bacha H, et al. Tunisian radish extract (Raphanus sativus) enhances the antioxidant status and protects against oxidative stress induced by zearalenone in Balb/c mice. Journal of Applied Toxicology: An International Journal. 2008;28(1):6-14.
7. Patra JK, Das G, Paramithiotis S, Shin H-S. Kimchi and other widely consumed traditional fermented foods of Korea: a review. Frontiers in microbiology. 2016;7:1493.
8. Şanlier N, Gökcen BB, Sezgin AC. Health benefits of fermented foods. Critical reviews in food science and nutrition. 2019;59(3):506-27.
9. Ahn M, Kim J, Hong S, Kim J, Ko H, Lee N-H, et al. Black radish (Raphanus sativus L. var. niger) extract mediates its hepatoprotective effect on carbon tetrachloride-induced hepatic injury by attenuating oxidative stress. Journal of medicinal food. 2018;21(9):866-75.
10. Ahn M, Moon J, Park C, Bang H, Kim GO, Kim S-J, et al. Chungpihongsim radish (Raphanus sativus L. cv. Chungpihongsim) ameliorates ethanol-induced gastric injury in rats. Oriental Pharmacy and Experimental Medicine. 2016;16(1):37-43.
11. Kim J-D, Ahn S-W, Song I-B. A Reserch on the Radish based on the Sasang Constitutional Medicine (SCM). Korean Journal of Oriental Medicine. 2004;10(1):63-80.
12. Asghari MH, Hobbenaghi R, Nazarizadeh A, Mikaili P. Hydro-alcoholic extract of Raphanus sativus L. var niger attenuates bleomycin-induced pulmonary fibrosis via decreasing transforming growth factor β1 level. Research in pharmaceutical sciences. 2015;10(5):429.
13. Hanlon PR, Webber DM, Barnes DM. Aqueous extract from Spanish black radish (Raphanus sativus L. Var. niger) induces detoxification enzymes in the HepG2 human hepatoma cell line. Journal of agricultural and food chemistry. 2007;55(16):6439-46.
14. You H, Hao R, Li R, Zhang L, Zhu Y, Luo Y. The effect of radish sourced 4-(methylthio)-3-butenyl isothiocyanate on ameliorating the severity of high fat diet inducted nonalcoholic fatty liver disease in rats. International Journal of Clinical and Experimental Medicine. 2015;8(9):15910.
15. Lee SW, Yang KM, Kim JK, Nam BH, Lee CM, Jeong MH, et al. Effects of white radish (Raphanus sativus) enzyme extract on hepatotoxicity. Toxicological Research. 2012;28(3):165-72.
16. Syed SN, Rizvi W, Kumar A, Khan AA, Moin S, Ahsan A. In vitro antioxidant and in vivo hepatoprotective activity of leave extract of Raphanus sativus in rats using CCL4 model. African Journal of Traditional, Complementary and Alternative Medicines. 2014;11(3):102-6.
17. Ahn M, Park JS, Chae S, Kim S, Moon C, Hyun JW, et al. Hepatoprotective effects of Lycium chinense Miller fruit and its constituent betaine in CCl4-induced hepatic damage in rats. Acta histochemica. 2014;116(6):1104-12.
18. Kim J, Ahn M, Kim S-E, Lee HS, Kim HK, Kim GO, et al. Hepatoprotective effect of fermented black radish (Raphanus sativus L. var niger) in CCl4 induced liver injury in rats. Korean Journal of Oriental Medicine. 2017;41(4):143-9.
19. Hanlon PR, Barnes DM. Phytochemical composition and biological activity of 8 varieties of radish (Raphanus sativus L.) sprouts and mature taproots. Journal of Food Science. 2011;76(1):C185-C92.
20. Evans M, Paterson E, Barnes DM. An open label pilot study to evaluate the efficacy of Spanish black radish on the induction of phase I and phase II enzymes in healthy male subjects. BMC complementary and alternative medicine. 2014;14(1):1-12.
21. Higdon JV, Delage B, Williams DE, Dashwood RH. Cruciferous vegetables and human cancer risk: epidemiologic evidence and mechanistic basis. Pharmacological research. 2007;55(3):224-36.
22. Scholl C, Eshelman BD, Barnes DM, Hanlon PR. Raphasatin is a more potent inducer of the detoxification enzymes than its degradation products. Journal of Food Science. 2011;76(3):C504-C11.
23. Hertog MG, Hollman PC, Katan MB. Content of potentially anticarcinogenic flavonoids of 28 vegetables and 9 fruits commonly consumed in the Netherlands. Journal of agricultural and food chemistry. 1992;40(12):2379-83.
24. Lugasi A, Dworschák E, Blazovics A, Kery A. Antioxidant and free radical scavenging properties of squeezed juice from black radish (Raphanus sativus L. var niger) root. Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives. 1998;12(7):502-6.
25. Kocsis I, Lugasi A, Hagymási K, Kéry A, Fehér J, Szoke É, et al. Beneficial properties of black radish root (Raphanus sativus L. var. niger) squeezed juice in hyperlipidemic rats: Biochemical and chemiluminescence measurements. Acta Alimentaria. 2002;31(2):185-90.
26. Yang L, Li Z, Song Y, Liu Y, Zhao H, Liu Y, et al. Study on urine metabolic profiling and pathogenesis of hyperlipidemia. Clinica Chimica Acta. 2019;495:365-73.

Full-Text:



 

 

ارزیابی پروفایل بیوشیمیایی سرم در استفاده از ترب سیاه (Raphanus sativus) در موش 

سیده ام البنین قاسمیان1، مریم کریمی دهکردی2، علی مداحی نژاد3، هومن یوسفی3

 

1- استادیار گروه دامپزشکی، واحد بهبهان، دانشگاه آزاد اسلامی، بهبهان، ایران.

2- دانشیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران. نویسنده مسئول: [e-mail]   

3- دانشجوی دکترای حرفه­ای دامپزشکی، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران.

 

تاریخ دریافت:12/02/1402                                                                                     تاریخ پذیرش: 29/05/1402

چکیده

زمینه و هدف : با توجه به وجود ترکیبات فعال در ترب سیاه  و همچنین بومی بودن این گیاه در کشور ایران، مطالعه حاضر با هدف ارزیابی تاثیر عصاره هیدروالکلی ترب سیاه بر عملکرد کبد و کلیه در موش کوچک آزمایشگاهی صورت گرفت.

مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی 40 موش سفيد کوچک آزمايشگاهي به طور تصادفي به چهار گروه 10 تایی: گروه کنترل و سه گروه آزمایشی (50، 100 و 150 میلی¬گرم بر میلی لیتر عصاره ترب سیاه) تقسیم شدند. در گروه های آزمایشی تزریق داخل صفاقی عصاره هیدرو الکلی ترب سیاه صورت گرفت. در روز بیست و یکم، موش¬ها  بيهوش شده و سپس خون گيري انجام شد. میزان نیتروژن اوره خون (BUN)، کراتینین،  آلکالین فسفاتاز (ALP)، آسپارتات آمینوترانسفراز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، تری گلیسیرید و کلسترول بین گروه¬ها مقایسه شد.

نتایج: سطح BUN، کراتینین، ALP، AST و ALT در گروه¬های آزمایشی با گروه کنترل تفاوت معنی¬داری نداشتند (05/0<P). تیمار با عصاره ترب، منجر به کاهش پروفایل های چربی در گروه ازمایش نسبت به گروه کنترل گردید. با افزایش دوز عصاره، میزان تری گلیسیرید کاهش یافت. این کاهش در بالاترین دوز (150 میلی گرم بر کیلوگرم) معنی دار بود (05/0>P). علاوه بر این، عصاره ترب سیاه منجر به کاهش معنی دار کلسترول در هر سه دوز در مقایسه با گروه کنترل شد (05/0>P).

نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر حاکی از عدم سمیت کبدی و کلیوی عصاره در دوزهای مصرفی در مطالعه می باشد. همچنین می توان گفت در شرایط فیزیولوژیک، استفاده از عصاره هیدروالکلی ترب سیاه باعث کاهش پروفایل چربی می شود.

کلمات کلیدی :  ترب سیاه، عصاره هیدروالکلی، عملکرد کبد، عملکرد کلیه، پروفایل چربی

 

 

 

مقدمه

 

امروزه، داروهای گیاهی به عنوان داروهای مفید و منبعی برای توسعه داروها مورد توجه قرار گرفته­اند. ترب سیاه با نام علمی Raphanus sativus L.var niger، نوعی تربچه زمستانه متعلق به خانواده Brassicaceae با ریشه­های گرد و پوست سیاه رنگ است که طی سالیان در طب سنتی کشورهای مختلف و خصوصا کشورهای آسیایی مورد استفاده قرار گرفته است. این گیاه به طور گسترده در مناطق گرم و نیمه گرمسیری ژاپن، کره، آسیای جنوب شرقی و کشورهای اروپایی به عمل می­آید (1) ترب سیاه حاوی پروتئین، مواد معدنی و اجزای شیمیایی متنوعی می­باشد (2). اثرات بیولوژیکی ترب سیاه به ماده موثره آن از جمله آنتوسیانین، پلی فنل­ها، گلوکوزینولات و متابولیت آن، ایزوتیوسیانات نسبت داده شده است که دارای اثرات آنتی اکسیدانی می­باشند (3). این گیاه برای درمان برخی بیماریها نظیر اختلالات متابولیک شامل افزایش چربی خون، اختلالات تنفسی، مشکلات گوارشی و اختلالات سیستم ادراری استفاده می­شود (4-6). ترب سیاه به شکل اتانول یا عصاره آبی جهت مصرف دارویی تهیه می­شود (11). به غیر از موارد ذکر شده، تخمیر ترب سیاه با استفاده از میکروارگانیسم‌های گونه‌های لاکتوباسیلوس برای تفکیک و آزادسازی مواد فعال زیستی، مورد استفاده قرار گرفته است (7, 8).

استفاده از مدل­های حیوانی برای ارزیابی اثربخشی عصاره­های گیاهی ترب سیاه و تاثیر آن بر آسیب کبدی رایج است چرا که می­توان در مدل­ها حیوانی ضایعاتی با ویژگی­های هیستوپاتولوژیک و بیوشیمیایی مشابه ضایعات سلولی موجود در بیماری کبد در انسان ایجاد کرد. اخیرا، برخی شواهد حاکی از اثرات محافظتی عصاره خام ترب بر معده در موش های صحرایی با آسیب معده ناشی از اتانول بوده است (9). همچنین، این ماده دارای اثر پیشگیرانه (اثرات آنتی اکسیدانی) در برابر ارزیابی­های ایمونوتوکسیک و بیوشیمیایی ناشی از کادمیوم در موش می­باشد (10, 11). برخی شواهد نشان داده است که عصاره الکلی ترب سیاه می­تواند فیبروز ریوی ناشی از داروی بلئومایسین (Bleomycin) را از طریق کاهش سطح فاکتور رشد تغییردهنده بتا (Transforming growth factor beta; TGF-β) تضعیف کند (12). همچنین، عصاره آبی ترب سیاه منجر به تحریک آنزیم­های سم­زدایی در رده سلولی هپاتوم انسانی (HepG2) می­گردد (13). علاوه بر این، 4-(methylthio)-3-butenyl isothiocyanate ماده موثره­ی موجود در تربچه، به کاهش شدت بیماری کبد چرب غیر الکلی ناشی از رژیم غذایی پرچرب در موش ها منجر می­گردد که نشان می دهد ایزوتیوسیانات­ها در محافظت از کبد نقش دارند (14).

استرس اکسیداتیو یکی از علل شایع تغییرات چربی در کبد است. برخی یافته­ها حاکی از اثر محافظتی تربچه سفید در برابر حمله تتراکلرید کربن (CCl4) بوسیله مایکوتوکسین زیرالنون به کبد می­باشند (6, 15). همچنین، عصاره الکلی و آبی ترب سیاه می­تواند در محافظت از کبد در آسیب کبدی ناشی از CCl4 کمک کننده باشند (16). با این حال، اطلاعات کمی در مورد اثرات محافظ کبدی ترب سیاه بر فاکتورهای کبدی در موش­های سالم وجود دارد. از آنجایی که برخی شواهد ظرفیت آنتی اکسیدانی و محافظتی موجود در گیاه ترب سیاه و دیگر اعضای این خانواده را در محافظت از کبد مورد تایید قرارداده­اند و با توجه به انحصاری بودن این گیاه در کشور ایران، مطالعه حاضر با هدف ارزیابی تاثیر عصاره هیدروالکلی ترب سیاه و بررسی اثرات جانبی و سمی احتمالی این گیاه بر عملکرد کبد و کلیه در موش کوچک آزمایشگاهی صورت گرفت.

مواد و روش ها

در این مطالعه 40 موش سفيد کوچک آزمايشگاهي نر نژاد بالب سی مورد استفاده قرار گرفتند. نمونه مورد مطالعه از انستیتو وابسته به دانشگاه علوم پزشکی شهر کرد تهیه شدند. حیوانات در دمای کنترل شده 22 تا 26 درجه سانتیگراد تحت چرخه نور/تاریکی 12 ساعته نگهداری شدند و به طور آزاد با یک رژیم غذایی استاندارد تغذیه شدند. تمام مراحل آزمایشی مطابق با دستورالعمل‌های مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی در دانشگاه آزاد شهر کرد، ایران انجام شد.

تهیه عصاره هیدروالکلی ترب سیاه

جهت تهیه عصاره هیدروالکلی ترب سیاه، ابتدا ترب­ها از بازار تهیه شدند و سپس توسط هرباریوم دانشگاه آزاد شهر کرد شناسایی و مورد تایید قرار گرفتند. عصاره هیدروالکلی ترب سیاه با دستگاه استخراج سوکسله تهیه شد (ساخت شرکت اشک شیشه، ایران) که در آن ماده جامد و حلال در تماس مستقیم باهم قرار دارند. عصاره­گیری به روش ماسراسیون (جهت مطالعات بیولوژیکی) صورت گرفت. با توجه به اینکه مواد موثره نسبت به دما، حساس است و حرارت باعث از بین رفتن آنها می­شود، در مطالعاتی که هدف تحقیقات بیولوژیکی بوده (استفاده از عصاره به عنوان دارو) و کیفیت و درصد مواد موثره مهم می باشد، این روش انجام شد. در این مطالعه حجم مشخصی از گیاه بعد از خشک و آسیاب شدن، به حجم متناسبی از حلال اضافه شد و در آن غوطه­ورگردید. جهت تهیه حلال مورد استفاده، اتانول 70 درصد آب 30 درصد عصاره هیدر والکلی بکار رفت. برای مدتی مشخص (۳ روز) مخلوط در دمای اتاق تحت همزدن نگهداری شد. در نهایت توسط سیستم صافی، عصاره جداسازی شده و به صورت تغلیظ­شده بسته بندی گردید.  

گروه‌هاي مورد مطالعه

براي بررسي سميت كبدي و كليوي عصاره ترب سیاه، 40 عدد موش سفيد کوچک آزمايشگاهي به چهار گروه 10 تایی تقسیم شدند. نحوه اختصاص نمونه به هر گروه به طور تصادفي صورت گرفت. دسته اول به عنوان گروه کنترل، تحت هيچ درماني قرار نگرفته و فقط به آب و غذا دسترسي داشتند. سایر گروه­ها عبارت بودند از گروه آزمایش اول (50 میلی­گرم عصاره ترب سیاه بر کیلوگرم وزن بدن)-، گروه آزمایش دوم (100 میلی­گرم عصاره ترب سیاه بر کیلوگرم وزن بدن)- و گروه آزمایش سوم (150 میلی­گرم عصاره ترب سیاه بر کیلوگرم وزن بدن). در همه گروه­های آزمایشی نحوه تجویز عصاره هیدرو الکلی ترب سیاه تزریق داخل صفاقی بود.

زمان خونگيري و جداسازي نمونه­ها

موشهاي آزمايشگاهي بعد از 20 روز يعني در روز بیست و یکم پس از توزين بيهوش شده و سپس خون گيري از وريد كاروتيد گردن انجام شد. نمونه­های خون در لوله­های بدون ماده ضد انعقاد جمع­آوری و جهت جداسازی سرم و ارزیابی ازمایشگاهی به آزمايشگاه تشخيص طبي ارسال شد. سرانجام میزان نیتروژن اوره خون (BUN)، کراتینین، آلکالین فسفاتاز (ALP)، آسپارتات آمینوترانسفراز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، تری گلیسیرید و کلسترول در سرم خون اندازه گیری و بین گروه­ها مقایسه شد.

تحلیل آماری

داده ها به صورت میانگین ± خطای استاندارد ارائه شد. گروه ها با آنالیز واریانس یک طرفه و سپس آزمون تعقیبی دانشجو-نیومن-کولز (Student-Newman-Keuls ) مقایسه شدند. در همه موارد، 05/0>p برای نشان دادن معنی داری در نظر گرفته شد.

ملاحظات اخلاقی

همۀ مراحل نگهداری موش­ها با توجه به ضوابط کمیته اخلاقی حیوانات دانشگاه آزاد اسلامی شهر کرد، ایران انجام شدند.

نتایج

در این مطالعه، 40 موش سفيد کوچک آزمايشگاهي به چهار گروه 10نفره کنترل، دریافت کننده­ی 50 میلی­گرم بر میلی لیتر عصاره ترب سیاه (گروه آزمایش اول)، دریافت کننده­ی 100 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره ترب سیاه (گروه آزمایش دوم) و دریافت کننده­ی (150 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره ترب سیاه (گروه آزمایش سوم) تقسیم شدند. میانگین سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر پارامترهای بیوشیمیایی سرم در گروه­های مختلف در جدول یک نمایش داده شده است. یافته­ها حاکی از آن بود که میانگین سطح BUN در گروه کنترل با هیچ یک از گروه­های آزمایشی دریافت کننده­ی 50، 100 و 150 میلی­گرم عصاره ترب سیاه تفاوت معنی­داری نداشت (05/0>P). همچنین، میانگین سطح کراتینین در گروه کنترل تفاوت معنی­داری با گروه­های آزمایشی دریافت کننده­ی 50، 100 و 150 میلی­گرم عصاره ترب سیاه نداشت (05/0>P). بررسی میانگین سطح ALP، AST و ALT نیز در گروه کنترل در مقایسه با گروه­­های آزمایشی حاکی از عدم تفاوت معنی­دار سطح آنزیم های کبدی بین گروه­های مطالعه بود (05/0>P).

 

 

جدول 1- تاثیر سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر پارامترهای بیوشیمیایی سرم در موش ماده نژاد Balb/c (میانگین±انحراف معیار)

پارامتر بیوشیمیایی	گروه کنترل	50	100	150
BUN (mg/dl)	a6/8±9/22	a6/6±3/27	a5/7±5/20	a1/7±7/15
کراتینین (mg/dl)	a15/0±47/0	a13/0±6/0	a15/0±47/0	a16/0±43/0
آلکالین فسفاتاز (IU/l)	a3/11±8/180	a6/12±3/183	a2/13±186	a7/12±5/190
آسپارتات آمینوترانسفراز (IU/l)	a1/27±4/312	a1/9±9/323	a2/19±5/321	a3/18±7/335
آلانین آمینوترانسفراز (IU/l)	a8/5±150	a3/6±9/152	a5/6±2/158	a5/4±3/165
تری گلیسیرید (mg/dl)	a7/2±60	a3/1±7/55	a2/2±3/55	b2/2±8/49
کلسترول‌ (mg/dl)	a2/4±2/52	b5±2/41	b4/3±4/43	b5/1±3/41
کنترل: عصاره دریافت نکردند، 50: دریافت عصاره ترب سیاه به میزان 50 میلی­گرم بر کیلوگرم وزن بدن، 100: دریافت عصاره به میزان 100 میلی­گرم بر کیلوگرم وزن بدن، 150: دریافت عصاره به میزان 150 میلی­گرم بر کیلوگرم وزن بدن. حروف لاتین متفاوت در هر ردیف نشان دهنده اختلاف آماری معنی دار بین هر دو گروه می باشد (05/0p<).

 

 

مقایسه میانگین تری­گلیسیرید در گروه کنترل با گروه­های آزمایشی دریافت کننده­ی 50 و 100 میلی­گرم عصاره هیدروالکلی ترب سیاه حاکی از عدم تفاوت معنی­دار سطح تری­گلیسیرید بین گروه­ها بود. با این حال تفاوت معنی­داری بین سطح تری­گلیسیرید بین گروه کنترل و گروه­ آزمایشی دریافت­کننده­ی 150 میلی­گرم عصاره هیدروالکلی ترب سیاه مشاهده شد، به طوری که این میزان در گروه کنترل، بیش از گروه آزمایشی دریافت کننده­ی 150 میلی­گرم عصاره هیدروالکلی ترب سیاه برآورد شد (05/0>P). دیگر نتایج حاکی از آن بود که میانگین سطح کلسترول‌ در گروه کنترل به طور معنی­داری بیشتر از میزان آن در هر سه گروه آزمایشی دریافت کننده­ی 50، 100 و 150 میلی­گرم عصاره ترب سیاه بود (05/0>P).

 

نمودار 1- تأثیر سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر ازت اوره خون (BUN) و کراتینین سرم (Creatinine).

حروف لاتین متفاوت نشان دهنده اختلاف آماری معنی دار بین هر دو گروه می باشد (05/0p<).

نمودار 2- تأثیر سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر آنزیم های آلکالین فسفاتاز (ALP) و آسپارتات آمینوترانسفراز (AST).

حروف لاتین متفاوت نشان دهنده اختلاف آماری معنی دار بین هر دو گروه می باشد (05/0p<).

 

 

بحث

مطالعه حاضر به بررسی اثر عصاره هیدروالکلی ترب­ سیاه بر برخی پارامترهای بیوشیمیایی سرم در ارتباط با عملکرد کبد و کلیه در موش پرداخته است. مشخصات و اجزای بیوشیمیایی خون شاخص­های مهم سلامت بافتی در نظر گرفته می­شوند. فعالیت آنزیم‌های ALT، AST و ALP معمولاً در پاسخ به قرار گرفتن در معرض آلاینده‌ها و مواد شیمیایی سمی افزایش می‌یابد و از آنها برای ارزیابی تأثیر منفی احتمالی بر بافت کبد استفاده می‌شود. در این مطالعه، تفاوت معنی­داری در غلظت آنزیم­های کبدی در گروه­های تیمار (دریافت کننده عصاره با دوزهای 50، 100 و 150 میلی­گرم)، نسبت به گروه کنترل دیده نشد.

عدم افزایش آنزیم های کبدی بعد از تزریق عصاره، نشان دهنده عدم وجود اثرات سمی و مضر عصاره بر روی عملکرد کبدی می­باشد. در یک مطالعه مشابه توسط Kim و همکاران (2004) که با هدف تعیین اثر بخشی ترب سیاه تخمیر شده بر آسیب کبدی ناشی از CCl4 در موش صحرایی صورت گرفته استه است، یافته­ها حاکی از این بود که ترب سیاه تخمیر شده (500 میلی گرم بر کیلوگرم) منجر به کاهش سطح آلانین آمینوترانسفراز و آسپارتات آمینوترانسفراز در موش­های صحرایی در معرض CCl4 می­گردد. علاوه بر این، ترب سیاه تخمیر شده به طور قابل توجهی اثرات مهار رادیکال را در کبد با کاهش پراکسیداسیون لیپیدی در موش‌ افزایش داد.

 

نمودار 3- تأثیر سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر آنزیم آلانین آمینوترانسفراز (ALT)

           حروف لاتین متفاوت نشان دهنده اختلاف آماری معنی دار بین هر دو گروه می باشد (05/0p<).

نمودار 4- تأثیر سطوح مختلف عصاره ترب سیاه بر تری گلیسیرید (TG) و کلسترول (Cholesterol)

حروف لاتین متفاوت نشان دهنده اختلاف آماری معنی دار بین هر دو گروه می باشد (05/0p<).

 

 

یافته‌های هیستوپاتولوژیک از جمله فعال‌سازی سلول‌های کوپفر در کبد در هر گروه با نتایج سرمی مطابقت داشت. در مجموع، آنها نتیجه گرفتند که ترب سیاه تخمیر شده از طریق آنتی اکسیداسیون اثرات محافظتی بر کبد در آسیب ناشی از CCl4 در موش‌ها اعمال می­کند (11). در مطالعه Kim و همکاران (2004)، نمونه­ها دچار آسیب کبدی ناشی از CCl4 بودند درحالی که در مطالعه ما تنها سطح پارامترهای بیوشیمیایی در موش­های سالمی که عصاره هیدروالکلی ترب سیاه را دریافت کرده بودند با موش­هایی که هیچ دارویی دریافت نکرده بودند مقایسه شد. بنابراین یافته­های مطالعه مذکور، می­تواند تاییدی بر یافته­های مطالعه حاضر باشد.

پراکسیداسیون لیپید نشانگر مرگ سلولی است (17). تتراکلرید کربن (CCl4) به عنوان یک ماده شیمیایی اکسیداتیو برای القای آسیب کبدی در حیوانات از طریق اکسیداسیون و فعال­سازی سلول­های کوپفر معرفی شده است که تجویز داخل صفاقی آن در موش‌ها، منجر به ایجاد آسیب اکسیداتیو در کبد با تغییرات چربی می­گردد (8, 17). Kim و همکاران نشان دادند که مالون دی آلدئید (MDA) در کبد موش‌های کنترل بسیار پایین بود، در حالی که قرار گرفتن در معرض CCl4، سطح MDA را در کبد افزایش داد که نشان می‌دهد CCl4 پراکسیداسیون لیپیدی را در غشای سلولی تحریک می‌کند و منجر به مرگ سلولی می‌شود. به نظر می­رسد که اجزای آنتی‌اکسیداتیو موجود در ترب سیاه در هر سه روش تخمیر شده (18)، عصاره الکلی تربچه (6) و تربچه سفید هضم شده با پروتئاز (15) در محافظت از سلول‌های کبدی در معرض حمله اکسیداتیو نقش دارند. به این دلیل که تربچه با یا بدون رنگ حاوی انواع مواد فعال زیستی از جمله آنتوسیانین ها، پلی فنول ها، ایزوتیوسیانات ها و کورستین است (16, 19).

یک مطالعه توسط Evans و همکاران (2014)، شواهدی را در انسان ارائه می‌کند که نشان می­دهد مکمل حاوی ترب سیاه اسپانیایی تأثیر مثبتی بر سم‌زدایی دوز 1000 میلی‌گرمی استامینوفن دارد، که نشان‌دهنده افزایش تنظیم آنزیم‌های فاز I و فاز II است که می­تواند از سلول‌های کبدی محافظت کند (20). داده های قوی وجود دارد که سبزیجات کروسیفروس (Cruciferae) با پیامدهای سلامتی مانند کاهش خطر ابتلا به سرطان های مختلف مرتبط می کند (21). ترب سیاه اسپانیایی متعلق به خانواده Cruciferae است و حاوی غلظت بالایی از گلوکوزینولات ها، به ویژه گلوکورافازاتین است که بیش از 65 درصد از کل گلوکوزینولات های موجود را تشکیل می دهد (13). تصور می شود که محتوای گلوکوزینولات و مهمتر از آن متابولیت های گلوکوزینولات سهم عمده ای در فواید سلامتی مرتبط با مصرف سبزیجات Cruciferae دارند. غلظت‌های بالای گلوکوزینولات‌ها با تعدادی از مکانیسم‌های متمایز پیشگیری از سرطان مرتبط است، از جمله القای ژن‌های آنتی‌اکسیدانی و سم‌زدایی از طریق فعال‌سازی فاکتور شبه هسته‌ای ۲ مشتق از اریتروئید و گیرنده‌های هیدروکربنی آریل، مهار واکنش‌های پیش‌التهابی با سرکوب هسته‌ای. با ترب سیاه اسپانیایی، گلوکورافازاتین به راسفازاتین متابولیزه می شود (22). مطالعه آزمایشگاهی سلول‌های HepG2 هپاتوم انسانی نشان داده است که رافازاتین بیان RNA چندین آنزیم کبدی را القا می‌کند (13). با وجود شواهد مزایای ترب سیاه بر عملکرد کبد، تحقیقات بیشتر هنوز مورد نیاز است.

در نتایج مشخص گردید که تزریق عصاره هیدروالکلی ترب سیاه در دوزهای 50 و 100 میلی­گرم تاثیری بر سطح تری­گلیسیرید نداشت، درحالی که تزریق آن در دوز 150 میلی­گرم منجر به کاهش معنی­دار سطح تری گلیسیرید گردید. علاوه بر این عصاره گیاهی ترب سیاه در هر سه دوز، حتی در پایین­ترین دوز مصرفی (50 میلی­گرم)، توانست سطح کلسترول‌ خون را به طور چشمگیری نسبت به گروه کنترل کاهش دهد. کاهش پروفایل لیپیدی در گروه­های تحت تیمار با عصاره ترب سیاه، تاییدی بر اثرات مفید و مثبت عصاره ترب سیاه در کاهش میزان چربی خون در شرایط فیزیولوژیک می­باشد و احتمالا در موارد هایپرلیپیدمی نیز می­تواند در کاهش چربی خون موثر باشد.

طبق مشاهدات Hertog و همکاران (1992)، ریشه تربچه حاوی 7 میلی گرم بر کیلوگرم فلاونوئید است که شامل کورستین و میریستین می­باشد. این ترکیبات نقش مهمی در جلوگیری از اکسیداسیون لیپید از طریق فرآیندهای آنتی اکسیدانی مستقیم و اصلاح چندین فعالیت آنزیمی دارند (23). آنتی اکسیدان ها هیدروژن را در اختیار رادیکال های آزاد قرار می دهند. این تبدیل منجر به گونه های غیر رادیکال و در نتیجه مهار فاز تکثیر اکسیداسیون لیپید می شود (24). اگرچه مکانیسم دقیق ترکیبات فعال بیولوژیکی در ترب سیاه بر متابولیسم لیپید و پراکسیداسیون لیپیدی هنوز مشخص نیست، اثر مفید این ماده در برخی مطالعات مشهود بوده است. در مطالعه Lugasi  و همکاران (2005)، اثر آنتی اکسیدانی آب فشرده ترب سیاه (Raphanus sativus L. var niger) در هیپرلیپیدمی گوارشی موش صحرایی مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته­ها حاکی از آن بود که مکمل رژیم غذایی غنی از چربی به همراه آب تربچه سیاه منجر به بهبود قابل توجه مواد واکنش‌دهنده با اسید تیوباربیتوریک و غلظت اسیدهای چرب کونژوگه گردید که به ​​طور قابل‌توجهی در موش‌های هیپرلیپیدمیک بالاتر بود (5). بر اساس مطالعه مذکور، ترب سیاه، آنتی اکسیدان های ثانویه یا پیشگیرانه را که می توانند سرعت شروع زنجیره را در فرآیند پراکسیداسیون لیپیدی کاهش دهند، تقویت می­کند. اگرچه عوامل شلاته کننده آنتی اکسیدان نیستند، اما نقش مهمی در جلوگیری از اکسیداسیون لیپید دارند و در حضور آنها، این واکنش ها سرکوب می شوند. مطالعه Lugasi  و همکاران (1998) نشان دادند که ترب سیاه منجر به شلاته شدن مس به طور قابل توجه می­گردد  (24).

همچنین، مطالعه Kocsis و همکاران (2002) خواص مفید آب فشرده شده ریشه تربچه سیاه را در موش های صحرایی هیپرلیپیدمیک مورد ارزیابی قرار داد.

یافته­ها تغییرات مقادیر مختلف آنزیم های کبدی ALT، AST و ALP و سایر مقادیر پارامترهای متابولیک کلسترول توتال، تری گلیسرید، بیلی روبین توتال و گلوکز اثر رژیم ریشه تربچه سیاه را بر کبد و متابولیسم لیپید را تایید کرد (25).

کاهش ترانس­آمینازها و آلکالین فسفاتاز درحیوانات با هیپرلیپیدمی نشان دهنده اثر محافظتی احتمالی ترکیبات آب فشرده ریشه تربچه سیاه است که می تواند کبد را از آسیب بافتی ناشی از رژیم غذایی غنی از چربی محافظت کند. همچنین مشابه با یافته­های مطالعه ما تغییرات مقادیر متابولیت (کلسترول، تری اسیل گلیسرول) اثر کاهش دهنده چربی را در سرم این حیوانات نشان داد (25)

مطالعه­ای دیگر توسط Ahn و همکاران (2018) نشان داد که تربچه سیاه تخمیر شده منجر به کاهش تجمع چربی را در سلول‌های چربی 3T-L1 کاهش می‌دهد. 3T-L1 یک فیبروبلاست جدا شده از جنین موش است که به نظر می‌رسد با کاهش عوامل رونویسی چربی مرتبط است. یافته­های مطالعه مذکور نشان داد که تجویز ترب سیاه تخمیر شده به موش­های دارای کمبود متیونین و کولین (Methionine–choline-deficient) به طور قابل توجهی منجر به بهبود سطح سرمی آلانین آمینوترانسفراز، آسپارتات آمینوترانسفراز، آلکالین فسفاتاز و تری گلیسیرید می­گردد. علاوه بر این، درمان با تربچه سیاه تخمیر شده التهاب کبدی ناشی از رژیم غذایی دارای کمبود متیونین و کولین را با کاهش بیان اکسید نیتریک القایی سرکوب کرد (9).

رادیکال­های آزاد ممکن است در پاتوژنز مشکلات کبدی نظیر هیپرلیپیدمی و کبد چرب نقش داشته باشند و تغییرات متابولیک را افزایش دهند (26). آسیب ناشی از رادیکال های آزاد را می توان با آنتی اکسیدان­هایی که در انواع مختلف سبزیجات که از خانواده گیاهان Cruciferae می­باشند کاهش داد. تربچه سیاه نیز به همین طبقه اختصاص دارد. این تغییرات گزارش شده می­تواند توجه محققان را به خواص آنتی اکسیدانی و محافظت از کبد ترکیبات فعال عصاره تربچه سیاه جلب کند. زیرا این ماده می­تواند نقش مهمی در جلوگیری از فرآیندهای پراکسیداسیون لیپید ایفا کند.

اوره و کراتینین از مواد زائد سمی در بدن می­باشند که باید از طریق کلیه­ها دفع ­گردند. از این‌ رو میزان کراتینین و ازت اوره خون نمایانگر عملکرد کلیه­ها است و بالا بودن این دو حاکی از اختلال در عملکرد کلیه یا بیماری­های کلیوی

 است. در این مطالعه، تفاوت معنی­داری در غلظت نیتروژن اوره و کراتینین در گروه­های دریافت کننده عصاره، نسبت به گروه کنترل دیده نشد که نشان دهنده عدم وجود اثرات منفی عصاره بر روی عملکرد کلیوی می­باشد. مقادیر نیتروژن اوره و کراتینین در گروه تیمار با عصاره ترب سیاه در دوزهای بالا (میزان 100 و 150 میلی­گرم) نسبت به گروه کنترل کاهش یافته هر چند معنی­دار نبود. این نشان می­دهد عصاره ترب سیاه علاوه بر اینکه اثر سمی بر عملکرد کلیه نداشته، بلکه در دوزهای بالاتر سبب کاهش نیتروژن اوره خون و کراتینین شده است.

مشابه با یافته­های مطالعه حاضر، مطالعه Ahn و همکاران (2018)، اثرات عصاره تربچه سیاه را بر روی موش‌های مبتلا به آسیب کبدی ناشی از تتراکلرید کربن ارزیابی کرد. بر اساس نتایج به‌دست‌آمده، تأثیر عصاره تربچه سیاه بر کاهش سطوح نیتروژن اوره خون تأیید شد (9). در همین راستا مطالعه Evans و همکاران نشان داد که تاثیر مثبت عصاره تربچه سیاه را بر کاهش کراتینین مورد تایید قرار داد (13). با این حال، با توجه به کمبود یافته­ها رد این خصوص، انجام مطالعات بیشتر برای اطمینان از تاثیر تأثیر عصاره تربچه سیاه بر کاهش نیتروژن اوره خون و کراتینین مورد توصیه است.

نتیجه گیری

در این پژوهش، عصاره هیدورالکلی ترب سیاه در دوزهای مورد مطالعه در شرایط فیزیولوژی اثر سمی بر عملکرد کبد و کلیه نداشته است. علاوه بر این قادر به کاهش سطح تری­گلیسیرید (در دوزهای 100 و 150 میلی­گرم) و کلسترول‌ (در هر سه دوز) در موش­های سوری گردید.

تعارض مناقع

نویسندگان مقاله تعارض در منافع ندارند.

 

 

.

 

فهرست منابع

1.        Banihani SA. Radish (Raphanus sativus) and diabetes. Nutrients. 2017;9(9):1014.

2.        Ahn M, Kim J, Hong S, Kim J, Ko H, Lee NH, et al. Black Radish (Raphanus sativus L. var. niger) Extract Mediates Its Hepatoprotective Effect on Carbon Tetrachloride-Induced Hepatic Injury by Attenuating Oxidative Stress. J Med Food. 2018;21(9):866-75.

3.        Castro‐Torres IG, De la O‐Arciniega M, Gallegos‐Estudillo J, Naranjo‐Rodríguez EB, Domínguez‐Ortíz MÁ. Raphanus sativus L. var niger as a source of phytochemicals for the prevention of cholesterol gallstones. Phytotherapy Research. 2014;28(2):167-71.

4.        Afsharypuor S, Balam MH. Volatile constituents of Raphanus sativus L. var. niger seeds. Journal of Essential Oil Research. 2005;17(4):440-1.

5.        Lugasi A, Blázovics A, Hagymási K, Kocsis I, Kéry Á. Antioxidant effect of squeezed juice from black radish (Raphanus sativus L. var niger) in alimentary hyperlipidaemia in rats. Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives. 2005;19(7):587-91.

6.        Salah‐Abbès JB, Abbès S, Ouanes Z, Houas Z, Abdel‐Wahhab MA, Bacha H, et al. Tunisian radish extract (Raphanus sativus) enhances the antioxidant status and protects against oxidative stress induced by zearalenone in Balb/c mice. Journal of Applied Toxicology: An International Journal. 2008;28(1):6-14.

7.        Patra JK, Das G, Paramithiotis S, Shin H-S. Kimchi and other widely consumed traditional fermented foods of Korea: a review. Frontiers in microbiology. 2016;7:1493.

8.        Şanlier N, Gökcen BB, Sezgin AC. Health benefits of fermented foods. Critical reviews in food science and nutrition. 2019;59(3):506-27.

9.        Ahn M, Kim J, Hong S, Kim J, Ko H, Lee N-H, et al. Black radish (Raphanus sativus L. var. niger) extract mediates its hepatoprotective effect on carbon tetrachloride-induced hepatic injury by attenuating oxidative stress. Journal of medicinal food. 2018;21(9):866-75.

10.        Ahn M, Moon J, Park C, Bang H, Kim GO, Kim S-J, et al. Chungpihongsim radish (Raphanus sativus L. cv. Chungpihongsim) ameliorates ethanol-induced gastric injury in rats. Oriental Pharmacy and Experimental Medicine. 2016;16(1):37-43.

11.        Kim J-D, Ahn S-W, Song I-B. A Reserch on the Radish based on the Sasang Constitutional Medicine (SCM). Korean Journal of Oriental Medicine. 2004;10(1):63-80.

12.        Asghari MH, Hobbenaghi R, Nazarizadeh A, Mikaili P. Hydro-alcoholic extract of Raphanus sativus L. var niger attenuates bleomycin-induced pulmonary fibrosis via decreasing transforming growth factor β1 level. Research in pharmaceutical sciences. 2015;10(5):429.

13.        Hanlon PR, Webber DM, Barnes DM. Aqueous extract from Spanish black radish (Raphanus sativus L. Var. niger) induces detoxification enzymes in the HepG2 human hepatoma cell line. Journal of agricultural and food chemistry. 2007;55(16):6439-46.

14.        You H, Hao R, Li R, Zhang L, Zhu Y, Luo Y. The effect of radish sourced 4-(methylthio)-3-butenyl isothiocyanate on ameliorating the severity of high fat diet inducted nonalcoholic fatty liver disease in rats. International Journal of Clinical and Experimental Medicine. 2015;8(9):15910.

15.        Lee SW, Yang KM, Kim JK, Nam BH, Lee CM, Jeong MH, et al. Effects of white radish (Raphanus sativus) enzyme extract on hepatotoxicity. Toxicological Research. 2012;28(3):165-72.

16.        Syed SN, Rizvi W, Kumar A, Khan AA, Moin S, Ahsan A. In vitro antioxidant and in vivo hepatoprotective activity of leave extract of Raphanus sativus in rats using CCL4 model. African Journal of Traditional, Complementary and Alternative Medicines. 2014;11(3):102-6.

17.        Ahn M, Park JS, Chae S, Kim S, Moon C, Hyun JW, et al. Hepatoprotective effects of Lycium chinense Miller fruit and its constituent betaine in CCl4-induced hepatic damage in rats. Acta histochemica. 2014;116(6):1104-12.

18.        Kim J, Ahn M, Kim S-E, Lee HS, Kim HK, Kim GO, et al. Hepatoprotective effect of fermented black radish (Raphanus sativus L. var niger) in CCl4 induced liver injury in rats. Korean Journal of Oriental Medicine. 2017;41(4):143-9.

19.        Hanlon PR, Barnes DM. Phytochemical composition and biological activity of 8 varieties of radish (Raphanus sativus L.) sprouts and mature taproots. Journal of Food Science. 2011;76(1):C185-C92.

20.        Evans M, Paterson E, Barnes DM. An open label pilot study to evaluate the efficacy of Spanish black radish on the induction of phase I and phase II enzymes in healthy male subjects. BMC complementary and alternative medicine. 2014;14(1):1-12.

21.        Higdon JV, Delage B, Williams DE, Dashwood RH. Cruciferous vegetables and human cancer risk: epidemiologic evidence and mechanistic basis. Pharmacological research. 2007;55(3):224-36.

22.        Scholl C, Eshelman BD, Barnes DM, Hanlon PR. Raphasatin is a more potent inducer of the detoxification enzymes than its degradation products. Journal of Food Science. 2011;76(3):C504-C11.

23.        Hertog MG, Hollman PC, Katan MB. Content of potentially anticarcinogenic flavonoids of 28 vegetables and 9 fruits commonly consumed in the Netherlands. Journal of agricultural and food chemistry. 1992;40(12):2379-83.

24.        Lugasi A, Dworschák E, Blazovics A, Kery A. Antioxidant and free radical scavenging properties of squeezed juice from black radish (Raphanus sativus L. var niger) root. Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives. 1998;12(7):502-6.

25.        Kocsis I, Lugasi A, Hagymási K, Kéry A, Fehér J, Szoke É, et al. Beneficial properties of black radish root (Raphanus sativus L. var. niger) squeezed juice in hyperlipidemic rats: Biochemical and chemiluminescence measurements. Acta Alimentaria. 2002;31(2):185-90.

26.        Yang L, Li Z, Song Y, Liu Y, Zhao H, Liu Y, et al. Study on urine metabolic profiling and pathogenesis of hyperlipidemia. Clinica Chimica Acta. 2019;495:365-73.

 

 

 

.

 

 

 

Evaluation of serum biochemical profile using black radish (Raphanus sativus) in mice

Seyedeh Ommolbanin Ghasemian1, Maryam Karimi-Dehkordi2, Ali Maddahi nejad3, Hooman Yousefi3

 

1- Assistant Professor, Department of Veterinary, Behbahan Branch, Islamic Azad University, Behbahan, Iran.

2-Associate Professor, Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran. Corresponding Author: [e-mail]

3- D.V.M. Student, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran.

 

 

Received:2023.05.02                                                                                         Accepted: 2023.08.20

 

Abstract

Background & Aim: Considering the presence of active compounds in black horseradish, the present study aimed to evaluate the effect of hydroalcoholic extract of black radish on liver and kidney function in small laboratory mice.

Materials & Methods: In this study, 40 small laboratory mice were randomly divided into four groups of control and experimental groups (50, 100, and 150 mg/ml black radish extract). Intraperitoneal injection of hydroalcoholic extract of black radish was performed in the experimental groups. On the 21st day, the mice were anesthetized and then blood sampling was done. Blood urea nitrogen (BUN), creatinine, alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), triglyceride and cholesterol levels were compared between the groups.

Results: The levels of BUN, creatinine, ALP, AST and ALT in the experimental groups were not significantly different from the control group (P>0.05). Treatment with horseradish extract led to a decrease in fat profiles in the experimental group compared to the control group. By increasing the dose of the extract, the amount of triglycerides decreased. This reduction was significant in the highest dose (150 mg/kg) (P<0.05). In addition, black radish extract led to a significant decrease in cholesterol in all three doses compared to the control group (P<0.05).

Conclusion: The results of the present study indicate the absence of liver and kidney toxicity of the extract in the doses used in the study. It can also be said that in physiological conditions, the use of black horseradish hydroalcoholic extract reduces the fat profile.

Keywords: Black radish, Hydroalcoholic extract, Liver function, Kidney function, Lipid profile