ردیابی و شناسایی ویروس لکه حلقوی گوجه فرنگی در گیاهان زینتی استان خراسان شمالی
Subject Areas : Journal of Ornamental Plants
جواد
محمودی صفا
1
(گروه گیاهپزشکی دانشکده گیاهپزشکی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان ، ایران)
سعید
نصرالله نژاد
2
(گروه گیاهپزشکی دانشکده گیاهپزشکی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان ، ایران)
فروه سادات
مصطفوی نیشابوری
3
(گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی دانشگاه زابل، زابل، ایران)
Keywords: RT-PCR, گیاهان زینتی, DAS-ELISA, مایه زنی مکانیکی, بیماری های ویروسی,
Abstract :
در سال­های اخیر علائم بیماری­های ویروسی مانند کوتولگی، موزائیک، رنگ پریدگی، بافت مردگی و لکه­های حلقوی روی گیاهان زینتی در پارک­ها، بوستان­ها و معابر استان خراسان شمالی شیوع پیدا کرده است. ویروس لکه حلقوی گوجه­فرنگی Tomato ring spot virus(ToRSV) متعلق به جنس Nepovirusو خانوادهSecoviridaeمی­باشد. این عامل ویروسی یکی از عوامل اصلی آلوده کننده گل­های زینتی در جهان محسوب می­شود. در این تحقیق جهت بررسی درصد آلودگی ویروس ToRSV، در اوایل پاییز سال 1393 مجموعا 400 نمونه گیاه زینتی به صورت کاملا تصادفی و بدون در نظر گرفتن علائم از پارک­ها، بوستان­ها و معابر استان خراسان شمالی (شهرستان­های بجنورد و شیروان) جمع­آوری شد و در شرایط خنک به آزمایشگاه منتقل گردید. در آزمایشگاه به منظور ارزیابی وجود ویروس در نمونه­های مشکوک،­ آزمون سرولوژیکی DAS-ELISA انجام شد و نمونه­های آلوده به ویروس که در آزمون الایزا مشخص شدند به گیاهان محک Cucumis sativus، Vigna unguiculata،Nicotiana glutinousa وNicotiana rusticaمایه­زنی گردیدند. پس از ظهور علائم، گیاهان محک مجددا برای تایید وجود آلودگی توسط آزمون DAS-ELISA تست شدند. شناسایی مولکولی گیاهان آلوده توسط کیت استخراج RNA (کیاژن) انجام شد و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ویروس در واکنش RT-PCR، یک قطعه 449bp تکثیر شد. نتایج آزمون الایزا و واکنش RT-PCR حضور ویروس را در گیاهان زینتی استان خراسان شمالی تایید کرد. در مایه­زنی مکانیکی ویروس هر سه گیاه محک فوق علائم بیماری را نشان دادند.
AIPH and Union Fleurs. 2011. International statistics flowers and plants. Edited by A. Schubach. Voorhout, Netherlands. www.aiph.org
Anonymous. 2014. Agricultural statistics 2013. Agriculture Jihad Publication, Tehran, Iran. (In Persian).
Ayazpour, K. 2014. Alphabetic list of plant viruses and viroids reported from Iran. Islamic Azad University Press, Jahrom, Iran (In Persian).
Card, S.D., Pearson, M.N. and Clover, G.R.G. 2007. Plant pathogens transmitted by pollen. Australasian Plant Pathology, 36:455-461.
Clark, M.F. and Adams, A.N. 1977. Characteristics of the micro plate method of enzyme-linked immunosrobent assay for the detection of plant viruses. Journal of General Virology, 34:475- 483.
EPPO. 2005. Tomato ring spot nepovirus. EPPO Bulletin, 35: 313–318.
Ghotbi, T. and Shahraeen, N. 2009. Natural incidence and infectivity level of three nepoviruses in omamental crops in Iran. Journal of Plant Breeding and Crop Science, 1(3): 039-044.
Ghotbi, T. and Shahraeen, N. 2012. Incidence and distribution of viruses infecting propagated ornamentals in Northern Iran. International Research Journal of Microbiology, 3(11): 373-381.
Golnaraqi, A.R., Shahraeen, N., Pourrahim, R., Farzadfar, S.H. and Ghasemi, A. 2004. Occurrence and relative incidence of viruses infecting soybeans in Iran. Plant Disease, 88: 1069-1074.
Gumus, M. and Paylan, I.C. 2013. Detection of viruses in seeds of some vegetables by Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). African Journal of Biotechnology, 3891-3897.
Hsu, H.T. and Maroon-Lango, C. 2003. Management of viral diseases in floral and nursery crops. In: Advances in Plant Disease Management (eds). Research Signpost, 413-429.
John, A.G. 1995. Detection of tomato ring spot virus by Polymerase Chain Reaction. Plant Disease, 79: 1054-1056.
Kamran, R. and Izadpanah, K. 1981. Isolation and identification of BYMV and ToRSV from gladiolus in Shiraz. Iranian Journal of Plant Pathology, 17 (1-4): 1-7.
Loebenstein, G., Lawson, R.H. and Brunt, A.A. 1995. Virus and virus-like disease of bulb and flower crops. Wiley and Sons Publisher, 543 pp.
Mahmoodi safa, J., Nasrolahnejad, S., Rezai, M. and Mostafavy Neyshabouri, F.S. 2015. Serological survey tomato ring spot virus (ToRSV) on ornamental plants in North Khorasan. Proc 1st Annual Iranian Agriculture Research Conference, Shiraz, Iran, 22 July. pp. 726-729 (In Persian).
Massumi, H., Shaabanian, M., Hosseini Pour, A., Heydarnejad, J. and Rahimian, H. 2009. Incidence of viruses infecting tomato and their natural hosts in the south east and central regions of Iran. Plant Disease, 93: 67-72.
Mathews, D.M. 2010. Optimizing detection and management of virus diseases of plants (1) and Emerging tree diseases in Southern California (2). In: Proceedings of the Landscape Disease Symposium, Camarillo, CA, pp. 10-20.
Moini, A.A. 2010. Identification of tomato ring spot virus (ToRSV) on apple in Iran. Australian Plant Disease Note, 5: 105–106.
Moini, A.A., Vahid Hosseinnia, S. and Izadpanah, K. 2008. Introduction of some economically important natural hosts for tomato ring spot nepovirus. In: Proc 18th Iranian Plant Protection Congress, Hamedan, Iran, 24-27 August. p. 804 (In Persian).
Mostashar Nezami, I., Mira, A. and Nikookar, Gh. 2013. Explanation of Factors Affecting the Export of Flowers in Iran: A case study in Alborz province. Journal of Natural and Social Sciences, 3217- 3227.
NIOP. 2015. Flower and plant industry of Iran: Production of flowers and ornamental plants. Mahallat. www.niop.ir
Pinkerton, J.N., Kraus, J., Martin, R.R. and Schreiner, R.P. 2008. Epidemiology of Xiphinema americanum and tomato ring spot virus on red raspberry, Rubus idaeus. Plant Disease, 92: 364-371.
Rakhshandehroo, F., Pourrahim, R., Zamanizadeh, H., Rezaee, S. and Mohammadi, M. 2005. Incidence and distribution of viruses infecting Iranian vineyards. Journal of Phytopathology, 153: 480- 484.
Sattary, M., Rakhshandehroo, F. and Mozaffari, J. 2012. Identification and of tomato ring spot virus (ToRSV) on stone fruits in Golestan and Fars provinces. Iranian Journal of Plant Protection Science, 43: 367-378.
Stace-Smith, R. 1996. Tomato ring spot nepovirus. pp. 1309–1312. In: Brunt, A.A., Crabtree, K., Dallwitz, M.J., Gibbs, A.J., Watson, L. and Zurcher, E.J. (eds.), Viruses of Plants, CAB International, Wallingford (GB), pp. 1309–1312.
Walker, M.C., Chisholm, J., Wei, T., Ghoshal, B., Saeed, H., Rott, M. and Sanfaçon, H. 2015. Complete genome sequence of three tomato ring spot virus isolates: evidence for reassortment and recombination. Archives of Virology, 160(2): 543-547.
