تشخیص ژن eaeA در اشریشیاکلی‌های جداسازی شده در جوجه‌های گوشتی با استفاده از PCR

Subject Areas : Camel

ا. ذاکری ¹

1 - Department of Animal Science, Tabriz Branch, Islamic Azad University, Tabriz, Iran

Received: 2013-07-05 Accepted : 2013-08-01 Published : 2014-06-01

Keywords: PCR, جوجه‌های گوشتی, ژن eaeA, اشریشیا‌کلی,

Abstract :

هدف اصلی از مطالعه حاضر، جدا‌سازی باکتری اشریشیا‌کلی از جوجه‌های گوشتی و ردیابی وجود ژن eaeA به عنوان فاکتور حدت در این باکتری به وسیله PCR بود. ارگان‌های مختلف جوجه‌های گوشتی (ریه، کبد و طحال) جهت کشت در محیط آگار خون‌دار و تست‌های بیوشیمیایی آماده‌سازی شدند. باکتری اشریشیا‌کلی در 81 نمونه از 120 نمونه بالینی (5/67 درصد) جداسازی گردید. DNA در باکتری‌های جداسازی شده استخراج گردید و برای آزمون PCR با پرایمرهای اختصاصی ژن حدت eaeA آماده‌سازی گردید. در ژل آگاروز، محصول PCR تولید شده در 39 نمونه از 81 نمونه (1/48 درصد) با تشکیل باند 384 جفت بازی دیده شد که دال بر وجود ژن eaeA در نمونه‌های مورد آزمایش بود. ژن eaeA که به عنوان یکی از ژن‌های حدت باکتری اشریشیا‌کلی محسوب می‌گردد، در اشریشیا‌کلی‌های جداسازی شده از این منطقه به طور معمول وجود دارد. از این سو، اهمیت این ژن در این باکتری و انقال آن از طیور و اهمیت آن از نظر بهداشت عمومی مرد بررسی قرار گیرد.

References:

Bi Z., Nagayama K., Akeda Y., Cantareli V., Kodama T., Takarada Y., Shibata S. and Honda T. (1999). Development of an enzymelabeled oligonucleotide probe for detecting the Escherichia coli attaching and effacing A gene. Microbiol. Immunol. 43, 663-667.
Debroy C. and Maddox C.W. (2001). Identification of virulence attributes of gastrointestinal Escherichia coli isolates of veterinary significance. Anim. Health Res. Rev. 2, 129-140.
Gannon V.P.J., Rashed M., King R.K. and Thomas E.J.G. (1993). Detection and characterization of the eae gene of Shiga-like toxin producing Escherichia coli using polymerase chain reaction. J. Clin. Microbiol. 31, 1268-1274.
Kariuki S., Gilks C., Kimari J., Muyodi J., Getty B. and Hart C.A. (2002). Carriage of potentially pathogenic Escherichia coli in chickens. Avian Dis. 46, 721-724.
O’Brien A.D., Holmes R.K. (1987) Shiga and Shiga-like toxins. Microbiol. Rev. 51, 206-220.
Zahraei T., Safarchi A., Peighambari S.M., Mahzoumieh M. and Rabbani M. (2007) Detection of Stx1 eae, espb and hly genes in avian pathogenic Escherichia coli by multiplex polymerase chain reaction. J. Vet. Res. 62(2), 37-42.
Zakeri A. and Kashefi P. (2012) Isolation, Serotyping and drug resistance patterns of Escherichia coli from cases of colibacillosis in Tabriz. Wulfenia J. 19(9), 244-253.