اثر اسپرم تازه و منجمد ذخیره شده روی باروری آزمایشگاهی و توسعه بعدی جنین‌های بز

Subject Areas : Camel

اس. ساها ¹ , ام.آ.ام.ی. خاندوکر ² , ال.ی. اسد ³ , آ.ام.ام.تی. رضا ⁴ , آ. هوکیو ⁵

1 - Department of Biotechnology, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh, Bangladesh
2 - Department of Animal Breeding and Genetics, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh, Bangladesh
3 - Department of Animal Breeding and Genetics, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh, Bangladesh Department of Animal Nutrition, Genetics and Breeding, Sher-e-Bangla Agricultural University, Dhaka, Bangladesh
4 - Department of Animal Breeding and Genetics, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh, Bangladesh
5 - Department of Animal Breeding and Genetics, Bangladesh Agricultural University, Mymensingh, Bangladesh

Received: 2013-07-06 Accepted : 2013-08-15 Published : 2014-06-01

Keywords: جنین, اسپرم تازه و منجمد, باروری آزمایشگاهی,

Abstract :

این مطالعه برای مقایسه راندمان اسپرم تازه و اسپرم منجمد یخ‌‌ گشایی شده روی باروری آزمایشگاهی (IVF) تخمک‌های بز انجام شد. مجموعه‌های اووسیتی مورد استفاده توسط مکش 2 الی 6 میلی‌لیتر از محتویات تخمدان از کشتارگاه بدست آمدند. در زمان درجه‌بندی اووسیت‌ها، منحصراً مجموعه اووسیت‌های طبیعی برای 48 ساعت مورد اندازه‌گیری قرار گرفتند. مجموعه‌های اووسیتی رسیده به مرحله M-II، 97/1±41/61 درصد بود. مجموعه‌های اووسیتی بالغ برای 5 ساعت در محیط‌های براکت و اولیفانت با استفاده از اسپرم تازه و اسپرم منجمد یخ گشایی شده به طور مجزا بارور شدند. بعد از باروری، تخمک‌ها به مدت 48 ساعت برای مشاهده سرعت تقسیم پذیری کشت داده شدند. بلوغ، باروری و کشت در دمای 5/38 درجه سانتی‌گراد در یک انکوباتور حاوی 5 درصد دی‌ اکسید کربن در هوای مرطوب انجام شد. بعد از باروری، سرعت تقسیم برای مناسب بودن تخمک‌ها برای تبدیل به مرولا و بلاستوسیت مورد مشاهده قرار گرفتند. برای اسپرم تازه و منجمد میزان باروری طبیعی (اشکال دو هسته‌ای) به ترتیب 58/2±02/36 و 58/2±73/34 درصد و سرعت تقسیم سلولی به ترتیب 5/2±19/25 و 8/2±01/21 درصد بودند. تفاوت معنی‌داری بین اسپرم تازه و منجمد در راندمان باروری آزمایشگاهی و توسعه بعدی جنین‌های بز مشاهده نشد (05/0P>). نتیجه این‌که، هردو نوع اسپرم (هم تازه و هم منجمد) می‌تواند برای IVF و توسعه بعدی جنین‌های بز استفاده شوند.

References:

Baldassarre H. and Karatzas C.N. (2004). Advanced assisted reproduction technologies (ART) in goats. Anim. Reprod. Sci. 82, 255-266.
Ball G.D., Leibried M.L., Ax R.L. and First N.L. (1984). Maturation and fertilization of bovine oocytes in vitro. J. Dairy Sci. 67, 2775-2785.
Brackett B.G., Bousquet D., Boice M.L., Donawick W.J., Evans J.F. and Dressel M.A. (1982). Normal development following in vitro fertilization in the cow. Biol. Reprod. 27, 147-158.
Carolon C., Monaghan P., Mehmood A., Lonergan P., Gallagher M. and Gordon I. (1992). Slicing of bovine ovaries as a means of oocyte recovery. J. Reprod. Fertil. 9, 51-52.
Danilda H. (2000). Technical aspect of in vitro embryo production. Duran Embryo Biotechnology Laboratory, Philippine Carabao Center, National Headquarters abd Gene Pool Munoz, Nueva Ecija 3120 Phillipine.
De S.V., Ahmed A.M., Martino A. and Cognie Y. (1992). In vitro maturation and fertilization of goat oocytes. Theriogenology. 37, 1049-60.
FAO. (2003). Food and Agriculture Organization of United Nations, Rome, Italy.
Ferdous J. (2006). Collection, grading and evaluation of goat cumulus-oocyte-complexes (COCs) in view of in vitro maturation, fertilization and culture. MS Thesis. Dep. Anim. Breed. Genetic.Bangladesh Agricultural Univ., Mymensingh.
Fuki Y. and Ono H. (1989). Effect of sera, hormones and granulosa cells added to culture media for in vitro maturation, fertilization, cleavage and development of bovine oocytes. J. Reprod. Fertil. 86, 501-506.
Ge-Li JunL.Q., Gao-Jun Feng C.A.Q. and Zheng Xiao Feng R.R. (2009). Effect of semen quality on in vitro production of porcine embryos. Act. Agric. Shangha. 25(3), 6-9.
Hafez E.S.E. (1993). Reproduction in Farm Animals. Lea and Febriger. Philadelphia.
Holtz W. (2005). Recent developments in assisted reproduction in goats. Small Rum. Res. 60, 95-110.
Hoque S.A.M. (2009). Effect of collection techniques and goat follicular fluid onin vitro maturation and fertilization of oocytes. MS Thesis. Dep. Anim. Breed. Genetic. Bangladesh Agricultural Univ., Mymensingh.
Islam M.R., Khandoker M.A.M.Y., Afroz S., Rahman M.G.M. and Khan R.I. (2007). Qualitative and quantitative analysis of goat ovaries, follicles and oocytes in view of in vitro production of embryos. J. Zhe. Univ. 8, 465-469.
KhandokerM.A.M.Y., Imai K., Takahashi T. and Hashizume K. (2001). Role of gelatinase on follicular atresia in the bovine ovary. Biol. Reprod. 65, 720-732.
Mondal A., Khandoker M.A.M.Y., Rahman A.H.M.S., Apu A.S. and Pervage S. (2008). In vitro production of goat embryos. Bang. J. Anim. Sci. 37, 1-9.
Pawshe C.H., Totey S.M. and Jain S.K. (1994). A comparison of three methods of recovery of goat oocytes for in vitro maturation and fertilization. Theriogenology. 42, 117-125.
Rho G.J., Hahnel A.C. and Betteridge K.J. (2001). Comparisons of oocyte maturation and of three methods of sperm preparation for their effects on the production of goat embryos in vitro. Theriogenology. 56, 503-516.
SAS. (1998). User’s guide. SAS Institute Inc. Version 6.12. Cary. NC. USA.
Silva M.A.C., Carnevale E.M., MacLellan L.J., Preis K.A., Leao K.M. and Squires E.L. (2002). Use of fresh, cooled and frozen semen during gamete intrafallopian transfer in mares. Theriogenology. 58, 763-766.
Wang Z.G., Xu Z.R. and Yu S.D. (2007). Effects of oocyte collection techniques and maturation media on in vitro maturation and subsequent embryo development in Boer goat. Czech J. Anim. Sci. 52, 21-25.
Wani N.A., Wani G.M., Khan M.Z. and Salahudin S. (2000). Effect of oocyte harvesting techniques on in vitro maturation and in vitro fertilization in sheep. Small Rumi. Res. 36, 63-67.
Webb R., Campbell B.K., Garveric H.A. and Gong J.G. (1999). Molecular mechanisms regulating follicular recruitment and selection. J. Reprod. Fert. 45, 123-126.