واکنش زنجیره پلیمراز ژن های Mgc2 و 16S rRNA جهت تشخیص مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم

Subject Areas : Camel

ا.  ذاکری ¹ (Department of Animal Science, Tabriz Branch, Islamic Azad University, Tabriz, Iran)

Received: 2015-04-27 Accepted : 2015-06-15 Published : 2016-03-01

Keywords: 16S rRNA, mgc2, واکنش زنجیره پلی‪مراز, مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم,

Abstract :

مایکوپلاسما‪ها باکتری‪های بسیار کوچکی هستند که فاقد دیواره سلولی و دارای جنس‪های مختلف که در قالب کلاس مولیکاتوس قرار می‪گیرند. این باکتری به عنوان کوچکترین میکرو ارگانیسمی است که به طور مستقل می‪تواند زندگی نماید. این دسته از باکتری‪ها می‪توانند بیماری‪های جدی و مزمن ایجاد نمایند. مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم به عنوان یکی از مهمترین عوامل میکروبی پاتوژن پرندگان محسوب می‪گردد که باعث خسارات اقتصادی فراوان در صنعت طیور می‪گردد. هدف از انجام این مطالعه، بررسی وجود مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم در طیور به وسیله واکنش زنجیره پلی‪مراز ژن‪های mgc2 و 16S rRNA بود. برای این کار پرایمرهای اختصاصی برای ژن‪های مذکور مورد استفاده قرار گرفت. در ابتدا جهت غربالگری از تست سرمی RSAT از 26 فارم پرورشی نمونه خون اخذ گردید. هچنین جهت نمونه برداری برای PCR، 109 نمونه از نمونه‪هایی که در آزمایش RSAT مثبت شده بودند، اخذ گردید که این نمونه‪ها شامل سواب‪هایی از ریه، کیسه‪های هوایی و نای را شامل می‪شد. با توجه به اختصاصی بودن پرایمرهای استفاده شده در این مطالعه، در آزمایش PCR، باند 530 جفت بازی برای ژن 16S rRNA و باند 300 جفت بازی برای ژن mgc2 در ژل الکتروفورز تشکیل گردید که وجود مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم در این نمونه‪ها را تأیید می‪نمود. این تست می‪تواند به صورت معمول در آزمایشگاه‪ها جهت تشخیص باکتری مایکوپلاسما گالی‪سپتیکوم در کوتاهترین زمان ممکن و مستقیماً بر روی نمونه‪های بالینی انجام گیرد.

References:

Biro J., Erdei N., SzekelyI. and Stipkovits L. (2006). Differentiation of Mycoplasma gallisepticum strains using molecular methods. Act. Vet. Hung. 54, 437-448.

Bradbury J.M. and Levisohn S. (1996). Experimental infections in poultry. Pp. 361-370 in Tully Molecular and Diagnostic Procesures in Mycoplasmology. Academic Press, San Diego, California.

Charlton B.R., Bickford A.A., Walker R.L. and Yamamoto R. (1999). Complementary randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis patterns and primer sets to differentiate Mycoplasma gallisepticum strains. J. Vet. Diag. Invest. 11, 158-161.

Collett S.R. (2005). Monitoring broiler breeder flocks for Mycoplasma gallisepticum infection after vaccination with ts-11. MS Thesis. University of Pretoria. Africa.

Fan H.H., Kleven S.H. and Jackwood M.W. (1995). Application of polymerase chain reaction with arbitrary primers to strain identification of Mycoplasma gallisepticum. Avian Dis. 39, 729-735.

Feberwee A., Mekkes D.R., de Wit J.J., Hartman E.G. and Pijpers A. (2005). Comparison of culture, PCR and different serologic tests for detection of Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae infections. Avian Dis. 49, 260-268.

Garcia M., Ikuta N., Levisohn S. and Kleven S.H. (2005). Evaluation and comparison of various PCR methods for detection of Mycoplasma gallisepticum infection in chickens. Avian Dis. 49, 125-32.

Ghaleh Golab N., Asasi K., Afsharifar A.R. and Pourbakhsh S.A. (2005). Isolation ande detection of Mycoplasma gallisepticum by polymerase chian reaction and restriction fragment length polymorphism. Int. J. Virt. Real. 6(2), 35-41.

Gharaibeh S. and Al Roussan D. (2008). The use of molecular techniques in isolation and characterization of Mycoplasma gallisepticum from commercial chicken in Jordan. Int. J. Poult. Sci. 7(1), 28-35.

Hosseini H. (2006). Molecular studies of Mycoplasma gallisepticum isolates from avian. Ph D. Thesis. TehranUniv., Tehran, Iran.

KempfI., Blanchard A., Gesbert F., Guittet M. and Bennejean G. (1993). The polymerase chain reaction for Mycoplasma gallisepticum infection. Avian Pathol. 22, 739-750.

Khan M.I. (2002). Multiplex PCR of avian pathogenic Mycoplasmas. Pp. 201-223 in PCR Detection of Microbial Pathogens. Humana Press, Totowa,New Jersey.

Kleven S.H. (2008a). Control of avian Mycoplasma infections in commercial poultry. Avian Dis. 52, 367-374.

Kleven S.H. (2008b). Mycoplasmosis. Pp. 805-808 in Diseases of Poultry. IowaStateUniversityPress, USA.

Luciano R.L., Cardoso A.L. and Tessari E.N. (2011). Comparative study of serological tests for Mycoplasma synoviae dignosis in commercial poultry breeders. Vet. Med. Int. 3, 304-349.

LysnyanskyI., Garcia M. and Levisohn S. (2005). Use of mgc2-polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism for rapid differentiation between field isolates and vaccine strains of Mycoplasma gallisepticum in Israel. Avian Dis. 49, 238-245.

Ongor H., Kalin R., Karahan M., Cetinkaya B. and Akan M. (2009). Detection of Mycoplasma species in turkeys by culture and polymerase chain reaction. Rev. Sci. Technol. 28(3), 1103-1109.